CN103415208A - 由植物生长素类除草剂分子结构的部分差异所导致的dht-激活的植物对生长素类除草剂的耐受性增加 - Google Patents

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Abstract

本发明涉及通过向其中预期防治的地点施用有效量的2,4-DB以在含有耐受植物生长素除草剂的棉花作物的场地中防治不期望植被的方法。

Description

由植物生长素类除草剂分子结构的部分差异所导致的DHT-激活的植物对生长素类除草剂的耐受性增加
优先权要求
本申请要求2011年1月7日提交的美国临时专利申请61/430,693(“INCREASED TOLERANCE OF DHT-ENABLED PLANTS TO AUXINICHERBICIDES RESULTING FROM MOIETY DIFFERENCES IN AUXINICHERBICIDE MOLECULAR STRUCTURES”)的益处。
技术领域
本发明涉及在含有植物生长素除草剂耐受(auxin herbicide tolerant)的棉花作物的场地中防治不期望植被的方法，包括向其中预期防治的地点施用有效量的2,4-DB。
背景技术
生长素类除草剂在耐受植物生长素除草剂的棉花作物的场地中防治不预期植被的使用可引起对耐受植物生长素除草剂的棉花作物的短暂损伤，其可导致延缓发育。可见的短暂损伤可包括叶下垂、卷叶和叶柄弯曲的组合-其统称为偏上生长(epinasty)。可在施用后10-14天可见的其它短暂损伤包括叶捆扎、畸形和叶的偏上生长。所述短暂的季节初期损伤可导致棉花作物成熟时间的不期望延长，这导致种植者承受额外的开支且可能降低作物总体产率。
本发明致力于并解决与作物损伤相关的问题，所述损伤由针对在含有耐受植物生长素除草剂的作物的场地中防治不期望植被而施用生长素类除草剂所导致，所述问题包括由季节初期的除草剂损伤所导致的延迟的早熟。
发明内容
本发明的主题是在含有耐受植物生长素除草剂的棉花作物的场地中防治不期望植被的方法，包括向其中预期防治的地点施用有效量的2,4-DB。
本发明另外的主题是这样的方法，其中相对于施用酸当量的2,4-D而言，对耐受除草剂的棉花作物的损伤得到降低。
本发明另外的主题和优势将由下面详细描述而对本领域技术人员而言变得显而易见，其中通过对实施本发明所考虑的最佳方式进行示例说明来简单地描述本发明的实施方案。如将认识到的，本发明能够进行其它和不同的实施方案，且其若干详细情形能够在各个明显的方面进行修改，其均不偏离本发明。因此，将说明书在本质上视为示例说明而非限制。
具体实施方式
本发明将在下文中更加全面地进行描述。实际上，这些发明可以许多不同形式来实施且不应被理解为限制本申请阐述的实施方案；更准确地说，提供这些实施方案以使得本公开能够满足适用法律的要求。在本申请通篇，相似的编号是指相似的要素。
本申请阐述的本发明的许多修改和其它实施方案将由受益于前述描述中存在的教导的属于本发明领域的技术人员所考虑。因此，应该理解的是不能将本发明限制为公开的具体实施方案且所述修改和其它实施方案意在包括在随附权利要求书的范围内。尽管本申请采用特定术语，但是它们仅以一般性和描述性的含义来使用而不用于限制目的。
本发明涉及在含有耐受植物生长素除草剂的棉花作物的场地中防治不期望植被的方法，其包括向其中预期防治的地点施用有效量的2,4-DB。
如在本说明书中使用且除非另作说明，否则术语"除草剂"是指阻碍或者杀死不期望、不需要的植物的分子或者分子组合，所述不期望、不需要的植物诸如但不限于有害或者令人烦恼的杂草、阔叶植物、禾草和莎草；且所述除草剂可以该方式用于作物防护。短语"有效量"是指产生降低不需要的植物生长的可观察到的预期效果所需的除草剂的量，所述效果包括植物坏死、植物死亡、生长抑制、繁殖抑制、增殖抑制以及除去、毁坏或者另外的降低不期望、不需要的植物的存在和活性。不期望、不需要的植物包括耐受除草剂的以及抗除草剂的杂草诸如草甘膦耐受的杂草和抗草甘膦的杂草。
“植物生长素除草剂”包括具有芳基氧基链烷酸酯化学结构的除草剂，诸如苯氧基乙酸酯植物生长素(例如2,4-D和MCPA)、苯氧基丁酸酯植物生长素(例如2,4-DB和MCPB)以及吡啶基氧基乙酸酯植物生长素(例如氟草烟和绿草定)。
众多生长素类除草剂耐受基因可在本发明的植物采用。棉花作物可转化为含有任何耐受基因家族(指定AAD)，该基因针对酶芳基氧基链烷酸酯二氧化酶(AAD)进行编码，所述酶继而使原位(in planta)植物生长素除草剂失活。所述除草剂耐受可由AAD-1(最初来自鞘脂单胞菌(Sphingobiumherbicidovorans))、AAD-12(最初来自代尔夫特食酸菌(Delftia acidovorans))和AAD-13基因给予，如在PCT公开WO2005/107437、PCT公开WO2007/053482和PCT公开US2010/0251432A1中披露。
通过便利方法将生长素类除草剂诸如2,4-DB施用至其中预期杂草防治的地点。所述"地点"意在包括土壤、种子和幼苗以及已长成的植被。在植物生长的任何阶段或者在种植或发芽前，当将2,4-DB直接施用至植物或者植物所在地时，所述2,4-DB展现出除草活性。实测效果取决于所要防治的植物种属、植物的生长阶段、稀释的施用参数和喷雾液滴大小(spray drop size)、固体组分的粒度、使用时的环境状况、所用的具体化合物、所用的具体辅料和载体、土壤类型等，以及所施用化学品的量。这些及其它因素可按本领域已知的进行调整以促进预期的除草作用。通常，优选在芽后(postemergence)对相对不成熟的不期望的植被施用2,4-DB以实现对杂草的最大防治。
棉花(Gossypium spp.)是世界上最重要的纺织纤维作物且是世界上最重要的油料种子作物中的一种。棉株(cotton plant)提供了人类食物、家畜饲料以及工业原材料的来源。将棉籽压制为烹饪油并将残留的棉籽粗粉用于动物饲料。棉花的工业用途包括烛芯、捻线、纸和大批纤维产品。
棉花种属是非常大的，目前包含50个种类。棉花的两个四倍体种类具有可纺性种子纤维，称为皮棉。这两个种类为陆地棉(G.hirsutum)(称为美国陆地棉(American Upland cotton))和海岛棉(G.barbadense)(称为皮马棉(Pimacotton))。
棉花为具有具备花的双子叶植物，即棉花在相同的花上具有雄性的产生花粉的器官以及分开的雌性的接受花粉的器官。种植的棉花由三个三角形苞片包围，这形成公知的方形。所述花包含具有五个花瓣的打开的花冠、带有雄蕊簇且形成包围花柱的管的雄蕊柱。复雌蕊由三至五个具有突出至高于花药的柱头的心皮组成。子房发育为三至五个小室的荚膜或者荚壳。在每个室或者小室内安置有七至九个种子。在开花前的当天，卷曲的花冠由所述方形伸出。在开花的当天，花冠打开且出现花粉脱落。在开花后的当天所述花冠变为红色且之后由所述植物脱落。在花药打开以及柱头上的花粉脱落或者柱头上的花粉通过昆虫而堆积的情况下，发生授粉。
"植物"意指完整植物、植物器官(例如叶、茎、根等)、种子、植物细胞、繁殖体、胚胎和子代。植物细胞可为分化的或者未分化的(例如愈伤组织、悬浮培养细胞、原生质体、叶细胞、根细胞、韧皮部细胞和花粉)。
"转基因植物"或者"转化的植物"或者"稳定转化的"植物、细胞或者组织是指已经将外源性核酸序列或者DNA片段引入或者整合至植物细胞中的植物。"稳定转化"意指将引入至植物的核苷酸结构整合至植物的基因组并且该核苷酸结构能够由其子代遗传。
除草活性化合物4-(2,4-二氯苯氧基)丁酸或者2,4-DB描述于例如Tomlin,Clive(editor)(2009)“The Pesticide Manual,”Fifteenth Edition,British CropProtection Council(BCPC),第306-308页。
用于制备本发明除草混合物的适当的农用辅料和载体对于本领域技术人员而言是熟知的。
可使用的液态载体包括水、甲苯、二甲苯、石脑油(petroleum naphtha)、作物油(crop oil)、丙酮、甲基乙基酮、环己酮、三氯乙烯、四氯乙烯、乙酸乙酯、乙酸戊酯、乙酸丁酯、丙二醇单甲醚和二甘醇单甲醚、甲醇、乙醇、异丙醇、戊醇、乙二醇、丙二醇、丙三醇等。针对浓缩物的稀释，水通常是选择的载体。
合适的固体载体包括滑石、叶蜡石(pyrophyllite clay)、硅石、活性白土(attapulgus clay)、高岭土、硅藻土(kieselguhr)、白垩(chalk)、硅藻土(diatomaceous earth)、石灰、碳酸钙、膨润土、漂白土(Fuller's earth)、棉子壳(cotton seed hull)、小麦粉、豆粉、浮石(pumice)、木粉、胡桃壳粉(walnut shellflour)、木质素等。
通常期望的是将一种或多种表面活性剂引入本发明的组合物中。所述表面活性剂有益地以固体和液体组合物使用，尤其是设计成在施用前用载体稀释的组合物形式使用。表面活性剂的性质可以是阴离子的、阳离子的或非离子的并可用作乳化剂、润湿剂、助悬剂或用于其它目的。典型的表面活性剂包括烷基硫酸盐，如二乙醇-月桂基硫酸铵；烷基芳基磺酸盐，如十二烷基苯磺酸钙；烷基酚-烯化氧加成产物，如壬基酚-C18乙氧基化物；醇-烯化氧加成产物，如十三烷基醇-C16乙氧基化物；皂，如硬脂酸钠；烷基萘-磺酸盐，如二丁基萘磺酸钠；磺化琥珀酸盐的二烷基酯，如二(2-乙基己基)磺化琥珀酸钠；山梨糖醇酯，如山梨糖醇油酸酯；季铵，如月桂基甲基-氯化铵；脂肪酸的聚乙二醇酯，如聚乙二醇硬脂酸酯；环氧乙烷和环氧丙烷的嵌段共聚物；以及磷酸单烷基酯的盐和磷酸二烷基酯的盐。
常用于农业组合物的其它辅料包括相容剂(compatibility agent)、消泡剂、掩蔽剂(sequestering agent)、中和剂和缓冲剂、缓蚀剂(corrosion inhibitor)、染料、芳香剂(odorant)、铺展剂(spreading agent)、渗透助剂、粘着剂、分散剂、增稠剂、防冻剂(freezing point depressant)、抗微生物剂等。所述组合物也可含有其它相容性组分，例如其它除草剂、植物生长调节剂、杀真菌剂、杀虫剂等，并可与液体肥料或固体颗粒肥料载体如硝酸铵、尿素等一起配制。
本发明的除草组合物中活性成分的浓度通常在约0.001至约98wt%(重量百分数)。通常以约0.01至约90wt%的浓度使用。在设计用作浓缩物的组合物中，活性成分通常以约5至约98wt%，优选约10至约90wt%的浓度存在。这些组合物在施用前通常用惰性载体诸如水进行稀释。一般施用于杂草或杂草所在地的稀释组合物通常含有约0.0001至约1wt%活性成分且优选含有约0.001至约0.05wt%活性成分。
在本发明的方法中，2,4-DB除草剂的施用可在作物播种前、发芽前以及芽后同等进行。发芽前和/或者芽后早期的施用是优选的。"发芽前"定义为在作物植物由土地发芽前的阶段施用除草剂。"芽后"定义为在作物植物由土地发芽后的阶段施用除草剂，其中所述作物植物的叶子与除草剂接触。优选地，在芽后以及在棉花作物的营养生长阶段将2,4-DB施用至棉花作物。
本发明的除草化合物通常与一种或更多种其它除草剂联合施用以防治更广种类的不期望的植被。当与其它除草剂联合使用时，本发明的化合物可与其它一种或多种除草剂配制，与其它一种或多种除草剂进行罐混合或与其它一种或多种除草剂先后施用。可与本发明化合物联合使用的一些除草剂包括：草甘膦(glyphosate)、草铵膦(glufosinate)、百草枯(paraquat)、ALS-抑制剂(例如磺酰脲类(sulfonylureas)、咪唑啉酮类(imidazolinones)、三唑并嘧啶磺酰苯胺(pyrimidine sulfonanilides)等)、HPPD抑制剂(例如甲基磺草酮(mesotrione)、异噁氟草酮(isoxaflutole)等)、PPO抑制剂(例如吡草醚(pyraflufen)、氟磺胺草醚(fomesafen)等)、麦草畏(dicamba)、溴苯腈(bromoxynil)、芳基氧基链烷酸酯等，这些除草剂中的一些可需要基因工程进行加工以使得所述作物具有对这些除草剂的选择性。
本组合物可通过常规的地面或空气撒粉器、喷雾器和颗粒施用器(granule applicators)的使用，通过向灌溉用水中的加入以及通过本领域技术人员已知的其它常规手段施用于杂草或其所在地。
在本发明的一个方面，相比于施用有效量的2,4-D而言，通过施用有效量的2,4-DB所引起的对耐受除草剂的棉花作物的损伤得到降低。由除草剂引起的损伤降低有利地降低了对于作物的压力，由此可能降低作物成熟的时间或者甚至可能使得种植者节省开支以及增加作物总产率。
尽管不意在被任何理论所束缚，但是假定2,4-DB在进行原位β-氧化之前不是稳固的除草剂。该额外的代谢步骤和/或者因素导致AAD-转化的植物对2,4-DB施用(相比于2,4-D施用)的耐受能力的增加。该概念可应用于所有AAD-转化作物，但当在施用至具有对2,4-D较低耐受的AAD-转化作物包括棉花时特别有效。
“损伤”是指如经本领域技术人员视觉评估的偏上性的叶子(具有叶下垂、卷叶、叶柄弯曲)的百分比。由2,4-DB(相比于2,4-D)引起的损伤降低在施用这些除草剂后的若干分钟内是可观察到的且在此后的延长的时间段内(诸如从施用后2小时至施用后30天，包括施用后3小时至施用后19天，且还包括施用后6小时至施用后24小时)是继续可观察到的。
本发明也包括转基因的耐受芳基氧基链烷酸酯除草剂的棉花作物，其包含一种或者多种另外的除草剂耐受基因，包括但不限于抗草甘膦、抗ALS-(咪唑啉酮、磺酰脲)、抗芳基氧基链烷酸酯-、抗HPPD-、抗PPO-和抗草铵膦-基因，由此提供除草剂耐受植物，其顺应于更广的且更稳固的杂草防治以及抗除草剂处理选择。
芽后操作中通常采用约0.1至约2,240克酸当量/公顷(g ae/ha)的施用率，且优选1至约1,120g ae/ha；对于发芽前施用，通常采用约1至约2,240g ae/ha的施用率。指定的更高的施用率通常得到对广泛的不期望植被的非选择性防治。较低的施用率通常得到选择性防治且可在棉花作物所在地采用。在本发明的实施方案中，用于芽后操作的2,4-DB的优选施用率为至少280g ae/ha，优选约280g ae/ha至约2,240g ae/ha。
实施例
包括下述实施例以证实本发明的某些优选实施方案。这些实施例不应被理解为对权利要求的限制。本领域技术人员应该理解的是下述实施例中披露的技术代表用于示例说明其优选的实施方式的具体方法。然而，根据本公开，本领域技术人员应该认识到可对这些具体实施方案进行多种改变而在不脱离本发明主旨和范围的情况下仍然获得类似或者相似的结果。
用AAD-1基因转化的棉株(AAD-1棉花)编码芳基氧基链烷酸酯二氧化酶(AAD)蛋白。这些植物用于下述实施例中以证实其对植物生长素除草剂具体是2,4-DB和2,4-D的耐受。AAD-1也可用作为育种区中的可选标记。用于植物中的耐受除草剂的AAD-1基因本身首次公开于WO2005/107437(也参见美国专利7,838,733)。
实施例1
2,4-DB和2,4-D在AAD-1-棉花区域中提供相似的杂草防治
用于比较2,4-DB和2,4-D在AAD-1棉花中的杂草防治效能的试验在位于Greenville,MS(3个地点)；Chula,GA；Macon County,GA；Attapulgus,GA；Memphis,TN；Newport,AR；和Fresno,CA附近的9个场地位点中进行。试验设计为在每个位点进行四次，其中具有在随机化完全区组中的处理区域。每个区域具有两列AAD-1-棉株，其长度为6.1米。对于单一施用的处理，杂草和棉株在高度上的靶标为5.1cm至15.2cm。处理剂由以560、840和1120g ae/ha施用至区域的Butyrac200(2,4-DB)和Weedar64(2,4-D)组成。在施用除草剂后，针对杀死的或者显示严重除草剂相关损伤的植物的百分数(0-100%，其中0表示无活性或者为对照组且100%表示靶标植物的死亡)来对杂草种类进行视觉评估，每周评估一次，评估三周。
在AAD-1棉花区域中通过施用2,4-DB和2,4-D所进行的杂草防治的结果显示于表1中。针对几乎所有靶标物种以及每周的测量，随着2,4-DB或者2,4-D的施用率的增加而获得更高水平的防治，最大防治为1120g ae/ha。因此，根据效能，1120g ae/ha为针对防治AAD-1棉花中的杂草所测试的三种施用率中优选的施用率。在1120g ae/ha，将防治分类为≤80%、>80%或者>90%的杀死或者严重损伤的杂草植物。
表1
Figure BDA0000378229560000081
缩写：AAD，芳基氧基链烷酸酯二氧化酶；g ae/ha，克酸当量/公顷；
GLY-res，抗草甘膦；WAA，施用后的周数。
a物种编码由欧洲植物保护组织(http://eppt.eppo.org/index.php)保持
b测量最大防治的施用后的周数；n=36个区域
c除了AMAPA之外的所有苋属
在1120g ae/ha的施用率，2,4-DB和2,4-D提供对除了苋属(AMASS)之外的每种杂草物种的同等防治，其中2,4-D的防治显著超出2,4-DB的防治达92%至77%。大多数物种由两种除草剂以>80%被防治。由两种除草剂以小于80%被防治的物种为抗草甘膦的长芒苋(Amaranthus palmeri)(AMAPAGLY-res)、南美山蚂蝗(Desmodium tortuosum)(DEDTO)和种棱粟米草(Mollugoverticillata)(MOLVE)。
实施例2
用AAD-1转化的棉株具有增强的对2,4-DB(相比于2,4-D)的耐受
为了评价AAD-1-棉株对2,4-DB和2,4-D除草剂化合物的作用的耐受，通过在两个场地试验中散布式喷雾至AAD-1-棉株上来单独施用所述除草剂Butyrac200(2,4-DB)和Weedar64(2,4-D)。
一个试验在位于Greenville,MS；Brinson,GA；Memphis,TN；和Fresno,CA附近的四个场地位点中进行。试验设计为在每个位点进行四次，其中具有在随机化完全区组中的处理区域。每个区域具有两列AAD-1-棉株，其长度为6.1米。对于单一施用的处理，棉株在高度上的靶标为5.1cm至15.2cm。处理剂由以560、840、1120、1680和2240g ae/ha施用的Butyrac200(2,4-DB)以及以840和1120g ae/ha施用的Weedar64(2,4-D)组成。针对在施用后一天显示出除草剂相关损伤的叶子的百分数来视觉评估所述AAD-1-棉株。
由2,4-DB或者2,4-D引起的对AAD-1-棉株的损伤的结果显示于表2中。在840g ae/ha的施用率，相比于2.4-D所观察到的，2,4-DB导致较低的(但非在统计学上不同)对AAD-1棉花的损伤水平。然而，在优选的1120g ae/ha的施用率，相比于2.4-D所观察到的，在施用后第一天内2,4-DB导致显著较低的对AAD-1棉花的损伤。甚至将2,4-DB的施用率加倍(2240g ae/ha)(相比于2,4-D(1120g ae/ha))，相比于2,4-D，由2,4-DB所引起的AAD-1棉花的损伤显著较低。
表2
Figure BDA0000378229560000091
缩写：AAD，芳基氧基链烷酸酯二氧化酶；DAA，施用后的天数；g
ae/ha，克酸当量/公顷；
a视觉评估的损伤，作为每个区域的偏上性的棉株叶子的百分数；
n=16个区域
b不重叠的置信区间显著不同(P=.05)。
c相同字母后的区间不是显著不同的。
另外的试验在Tifton,Georgia附近的University of Georgia Ponder Farm的一个场地位点进行。试验设计为进行三次，其中具有在随机化完全区组中的区域。每个区域具有一列AAD-1-棉株，其长度为7.6米。对于单一施用的处理，棉株在高度上的靶标为48.3cm(6-叶阶段)。处理剂由以280、560、1120和2240g ae ha施用的Butyrac200(2,4-DB)以及以560和1120g ae/ha施用的Weedar64(2,4-D)组成。针对在施用后的第0、1、2、19和45天显示出除草剂相关损伤的叶子的百分数来视觉评估损伤AAD-1-棉株。
在施用2,4-DB或者2,4-D后随着时间推移对AAD-1-棉株的损伤的结果显示于表3中。针对所有施用率，在施用2,4-DB和2,4-D除草剂后的相同天数(第0天)观察到最高水平的对AAD-1棉花的损伤。在优选的1120g ae/ha的施用率，相比于2,4-D所观察到的，在施用后的第0、1、2和19天2,4-DB导致显著较低的损伤。在施用后第45天，以1120g ae/ha施用的2,4-DB和2,4-D对AAD-1棉花的损伤不是显著不同的。甚至将2,4-DB的施用率加倍(2240g ae/ha)(相比于2,4-D(1120g ae/ha))，相比于2,4-D，在施用后第0、1、2和19天由2,4-DB所引起的AAD-1棉花的损伤显著较低。
表3
缩写：AAD，芳基氧基链烷酸酯二氧化酶；DAA，施用后的天数；
g ae/ha，克酸当量/公顷；
a视觉评估的损伤，作为每个区域的偏上性的棉珠叶子的百分数；
n=3个区域
b相同字母后的区间不是显著不同的。
实施例3
用AAD-12转化的棉株具有适度增加的对2,4-DB(相比于2,4-D)的耐受
为了评价AAD-12-棉株对2,4-DB和2,4-D除草剂化合物的作用的耐受，通过在一个温室试验中喷雾至AAD-12-棉株上来单独施用所述除草剂DBStraight(2,4-DB)和Weedar64(2,4-D)。四次处理由针对每两个除草剂的两个施用率1120和2240g ae/ha组成。试验设计为在每次处理进行四次单一AAD-12-棉株试验。植物生长在不同区域中。处理并非随机化的。当喷雾时，植物处于3-至4-叶阶段。针对在施用后第0、1、2、4和12天显示出除草剂相关损伤的叶子的百分数来视觉评估喷雾的AAD-12-棉株。
由2,4-DB或者2,4-D引起的对AAD-1-棉株所观察到的平均损伤的结果显示于表4中。在施用后的第0天至第4天(DAA)，相比于用2,4-D处理的植物，用2,4-DB处理的植物表现出所观察到的叶子损伤的较低的百分数；然而，在该试验中在施用后的第2天和第4天，仅在2240g ae/ha的更高施用率时所观察到的百分数在统计学上是不同的。
表4
Figure BDA0000378229560000111
缩写：AAD，芳基氧基链烷酸酯二氧化酶；DAA，施用后的天数；
g ae/ha，克酸当量/公顷；HSD，可靠的显著差异
a视觉评估的损伤，作为每个区域的偏上性的棉珠叶子的百分数；
n=4个植物
b相同字母后的区间不是显著不同的。
实施例4
用AAD-13转化的棉珠
棉花细胞可用AAD-13转化以产生具有类似于由AAD-1或者AAD-12基因提供的耐受的对2,4-DB和2,4-D耐受的棉珠。
可使用US2010/0251432[PCT/US08/63212(Lira et al.)]的实施例7中所述的相同技术来采用用AAD-13转化的棉花。
在前面的描述中，阐述了众多具体详细描述，诸如具体物质、结构、化学品、方法等，以对本发明提供更好的解释。然而，可在不借助所具体阐述的详细描述的情况下实施本发明。在其它实例中，并未对熟知的加工结构进行详细描述以至于不会对本发明产生不必要的混淆。
在本公开中仅显示和描述了本发明优选的实施方案以及展现其多样性的几个实施例。应该理解的是本发明能够在各种其它组合和情境下使用且能够在如本申请所表达的发明概念的范围内进行变化和修改。

Claims (16)

1.在含有耐受植物生长素除草剂的棉花作物的场地中防治不期望植被的方法，包括向其中预期防治的地点施用有效量的2,4-DB。
2.权利要求1的方法，其中相对于施用酸当量的2,4-D而言，对所述耐受除草剂的棉花作物的损伤得到降低。
3.权利要求2的方法，其中相对于施用当量的2,4-D而言，在施用后6小时，对耐受除草剂的棉花作物的损伤得到降低。
4.权利要求2的方法，其中相对于施用当量的2,4-D而言，在施用后24小时，对耐受除草剂的棉花作物的损伤得到降低。
5.权利要求1的方法，其中所述耐受植物生长素除草剂的棉花作物为耐受芳基氧基链烷酸酯植物生长素除草剂的棉花作物。
6.权利要求2的方法，其中相对于施用当量的2,4-D而言，在施用后多达19天的任何时期，对耐受除草剂的棉花作物的损伤得到降低。
7.权利要求1的方法，其中所述耐受芳基氧基链烷酸酯除草剂的棉花作物为转基因棉花作物。
8.权利要求7的方法，其中所述转基因的耐受芳基氧基链烷酸酯除草剂的棉花作物进一步包含至少一种另外的耐受除草剂的基因。
9.权利要求1的方法，其中所述耐受芳基氧基链烷酸酯除草剂的棉花作物包含针对AAD-1(芳基氧基链烷酸酯二氧化酶)编码的基因。
10.权利要求1的方法，其中所述耐受芳基氧基链烷酸酯除草剂的棉花作物包含针对AAD-12(芳基氧基链烷酸酯二氧化酶)编码的基因。
11.权利要求1的方法，其中所述2,4-DB的有效量为至少280克酸当量/公顷。
12.权利要求1的方法，其中所述2,4-DB的有效量为约280克酸当量/公顷至约2,240克酸当量/公顷。
13.权利要求1的方法，其中将所述2,4-DB芽后施用至耐受植物生长素除草剂的棉花作物。
14.权利要求1的方法，其中在耐受植物生长素除草剂的棉花作物的生长的营养阶段中将所述2,4-DB芽后施用至耐受植物生长素除草剂的棉花作物。
15.权利要求1的方法，其中所述不期望植被包括抗草甘膦的杂草。
16.权利要求1的方法，包括向其中预期防治的地点施用额外的除草剂。
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