CN103393684A

CN103393684A - 一种抗肿瘤药物的组合物的制剂及其制备方法

Info

Publication number: CN103393684A
Application number: CN2013103455339A
Authority: CN
Inventors: 石万棋; 郎天琼; 邓聪
Original assignee: Sichuan Guokang Pharmaceutical Co Ltd
Current assignee: Sichuan Guokang Pharmaceutical Co Ltd
Priority date: 2013-08-09
Filing date: 2013-08-09
Publication date: 2013-11-20

Abstract

本发明提供了一种抗肿瘤药物的组合物的制剂及其制备方法，它含有姜黄素和甲磺酸伊马替尼为主要成分制备而成的药剂：姜黄素10~300份，甲磺酸伊马替尼20~100份。本发明还提供了该药物组合物的制备方法和用途。本发明药物姜黄素和甲磺酸伊马替尼配伍使用，能发挥协同增效的药效，产生了意想不到的市场的效果，具有广泛的应用前景。

Description

一种抗肿瘤药物的组合物的制剂及其制备方法

技术领域

本发明涉及一种抗肿瘤药物的组合物的制剂及其制备方法，属于医药技术领域。

背景技术

姜黄素是多年生草本植物姜黄的主要成分，是一种橙黄色的结晶粉末，味稍苦，不溶于水，溶于乙醇、丙二醇，易溶于冰醋酸和碱溶液。它具有广泛的药理作用，如抗菌、抗氧化、抗病毒、抗血管增生、抗艾滋病等。近年来的研究还发现，姜黄素具有抗肿瘤作用，且已在许多动物实验中得到了证实。

姜黄素的抗肿瘤机制包括：抑制肿瘤细胞增殖、生长、生存、转移、血管形成和肿瘤侵袭等，并能抑制多条信号通路从而发挥抗肿瘤细胞增殖等作用。据文献报道，姜黄素能降低线粒体膜电位和BCL-2水平，增加Bax水平，激活caspase-3，通过线粒体依赖途径诱导HL-60细胞凋亡，阻滞细胞周期于G0/G1期；另外，姜黄素还可以通过下调U937、T-ALL等人白血病细胞株和人肾CAKI细胞等实体肿瘤中的抗凋亡蛋白BCL-2、BCL-XL、cIAP1、XIAP的表达，激活Caspase-3、8，导致BID和多聚二磷酸腺苷荷塘聚合酶断裂、细胞色素C的释放而诱导肿瘤细胞凋亡。姜黄素可以通过Fas启动的外源性信号通路来诱导人黑色素瘤细胞的凋亡。通过抑制一些信号通路，姜黄素也可以诱导细胞的凋亡：如KF-κB组成性激活及其调节产物基因表达、蛋白激酶B(AKT)信号通路、丝裂原活化蛋白激酶（MAPK）信号通路。

甲磺酸伊马替尼是一种特异的酪氨酸激酶抑制剂，能够靶向抑制Ph染色体阳性慢性粒细胞白血病产生的具有酪氨酸激酶活性的异常蛋白Bcr-Ab1。自2001年5月在美国经FDA批准上市后，其主要用于费城染色体阳性（Ph+）的慢性粒细胞白血病（CML）加速期、急变期以及α-干扰素治疗失败后的慢性期治疗，2002年2月FDA又批准了该药用于治疗无法切除的或转移性的恶性胃肠道间质肿瘤。

联合用药用于肿瘤的治疗已成为新的研究热点，已有文献报道姜黄素与其它中药联合用药的体外抗肿瘤作用显著。很多研究也显示，姜黄素与某些化疗药物在体外联合诱导肿瘤细胞凋亡具有累加或协同作用。

发明内容

本发明提供了一种抗肿瘤的药物组合物，它含有姜黄素和甲磺酸伊马替尼为主要成分制备而成的制剂。

本发明药物质量稳定，姜黄素与甲磺酸伊马替尼配伍使用，能发挥协同增效的药效，临床应用方便，为临床提供了一种新的选择。

本发明提供了一种治疗肿瘤的药物组合物，它含有姜黄素和甲磺酸伊马替尼为主要成分制备而成的制剂：

姜黄素 10~300份、甲磺酸伊马替尼20~100份。

进一步优选地、它含有格列美脲和栀子苷为主要成分制备而成的制剂：

姜黄素50~200份、甲磺酸伊马替尼50份。

其中，所述的药剂是片剂、胶囊剂、丸剂、颗粒剂或口服液。

其中，所述的片剂还包括乳糖、微晶纤维素、聚维酮、羧甲基淀粉钠，其重量配比为：

姜黄素10~300份、甲磺酸伊马替尼20~100份、乳糖50~70份、微晶纤维素20~100份、聚维酮5~50份、羧甲基淀粉钠10~60份。

进一步优选为，所述的片剂还包括乳糖、微晶纤维素、聚维酮、羧甲基淀粉钠，其重量配比为：

姜黄素50~200份、甲磺酸伊马替尼50份、乳糖250份、微晶纤维素50份、聚维酮20份、羧甲基淀粉钠30份。

本发明还提供了一种制备所述的药物组合物的方法，它包括如下步骤：

a、称取重量配比的原料药及辅料：姜黄素10~300份、甲磺酸伊马替尼20~100份、乳糖50~70份、微晶纤维素20~100份、聚维酮5~50份、羧甲基淀粉钠10~60份。

b、按处方量称取已粉碎、过筛80目的姜黄素、甲磺酸伊马替尼、乳糖、微晶纤维素、用等量递增混合法充分混匀后，再粉碎过筛。取聚维酮K30，加蒸馏水加热制成5%聚维酮K30溶液后，加入混合粉中制成软材，用20目筛制粒，60℃干燥4小时，收粒，加入羧甲基淀粉钠，混匀，用18目筛整粒，压片，得片剂。

具体实施方式：

实施例1 本发明药物片剂的制备

处方：

姜黄素 100 g

甲磺酸伊马替尼 50 g

乳糖 250 g

微晶纤维素 50 g

羧甲基淀粉钠 30 g

聚维酮K30 20 g

制成 1000片

操作：按处方量称取已粉碎、过筛80目的姜黄素、甲磺酸伊马替尼、乳糖、微晶纤维素、用等量递增混合法充分混匀后，再粉碎过筛。取聚维酮K30，加蒸馏水加热制成5%聚维酮K30的溶液后，加入混合粉中制成软材，用20目筛制粒，60℃干燥4小时，收粒，加入羧甲基淀粉钠，混匀，用18目筛整粒，制成适宜的制剂。

以下通过具体药效学试验证明本发明的有益效果

1体外抑癌试验

1.1材料与方法

细胞株：人胃癌细胞MGC823，人肝癌细胞HepG-2，人肺鳞癌细胞H520。

1.2细胞的培养：将冻存的MGC823细胞，HepG-2细胞、H520细胞置于38^oC水浴中复温至完全融化，接种细胞至含有10 %小牛血清的培养基中，于37^oC、5%CO₂的培养箱中恒温培养约24小时。当细胞生长呈致密状贴壁生长时，用0.25%的胰蛋白酶消化后传代，传3 ~ 4代待细胞生长稳定。

1.3 MTT法检测药物对细胞株增殖的影响：将消化后的三种细胞稀释成浓度为5×10⁴个/mL的细胞悬液，每孔200 uL接种于96孔板中，并设空白孔（不加细胞和药物）8孔，于37^oC、5%CO₂的培养箱中恒温培养24小时。弃去培养基，换含1%的DMEM培养过夜，三种细胞分别按表2分为六组，每组设6个复孔。将各组细胞在37^oC、5%CO₂的培养箱中恒温培养48小时。然后向每孔中加入5 mg/mL的MTT溶液20 uL，继续孵育4小时，弃去孔内培养上清液。再向每孔中加入DMSO 200 uL，振荡10 min使细胞内结晶物充分溶解，于490 nm处测定各孔的吸光值（空白孔调零），按下式分别计算三种细胞各个组的生长抑制率：

肿瘤细胞生长抑制率（%）=（1-实验组吸光值/对照组吸光值）×100%

表1 各组细胞的处理方式

分别计算各组内不同浓度的药物对肿瘤细胞的抑制率，并通过测定细胞的OD值，计算出三种处理方式对各个细胞的抑制率。

结果

姜黄素、甲磺酸伊马替尼、姜黄素与甲磺酸伊马替尼联合用药对三种肿瘤细胞的生长抑制率见表2~表4。

表2 姜黄素对三种癌细胞的抑制率（%）

表3 甲磺酸伊马替尼对三种癌细胞的抑制率（%）

表4 联合用药（其中甲磺酸伊马替尼剂量为10 ug/mL）对三种癌细胞的

抑制率（%）

由表2~表4中的数据可见，姜黄素对人胃癌细胞MGC823及肝癌细胞HepG-2的生长均具有较强的抑制作用，其IC50值分别为29.1 ± 0.5 ug/mL、31.2 ± 0.6 ug/mL，而对人肺鳞癌细胞H520生长的抑制作用则相对较弱(38.0 ± 0.6ug/mL)；甲磺酸伊马替尼对人胃癌细胞MGC823生长的抑制作用较强（15.6 ± 0.2 ug/mL），而对人肝癌细胞HepG-2和人肺鳞癌细胞H520生长的抑制作用则较弱（分别为28.2 ± 0.8 ug/mL, 59.3 ± 1.2 ug/mL）；当二者联合用药以后，对三种癌细胞的生长抑制作用明显高于姜黄素或甲磺酸伊马替尼单独用药（12.0 ~ 21.7 ug/mL）。

通过检测不同浓度的姜黄素与甲磺酸伊马替尼联合用药对癌细胞的抑制率（见表5），发明人发现，姜黄素与甲磺酸伊马替尼二者联合用药时表现出协同作用。

表5不同浓度的姜黄素和甲磺酸伊马替尼对三种癌细胞的抑制率（%）

2.体内抑癌试验

为了验证本发明药物复方制剂在体内的抗癌作用是否与细胞试验的结果一致，我们在胃癌小鼠模型上进行了抑癌试验。

2.1材料与方法

取甲磺酸伊马替尼20g，分别加入不同量的姜黄素和乳糖等辅料，混合，制粒，压片。

药物组：①复方姜黄素(姜黄素-甲磺酸伊马替尼)(组方1)

②复方姜黄素(姜黄素-甲磺酸伊马替尼)(组方2)

③复方姜黄素(姜黄素-甲磺酸伊马替尼)(组方3)

④甲磺酸伊马替尼组

姜黄素组

⑥对照组

注：①复方姜黄素(姜黄素-甲磺酸伊马替尼) (1组)的配方：

姜黄素100mg；甲磺酸伊马替尼50mg；乳糖250mg；微晶纤维素50mg；聚维酮K30 30mg；羧甲基淀粉钠20 mg。

②复方姜黄素(姜黄素-甲磺酸伊马替尼) (2组)的配方：

姜黄素150mg；甲磺酸伊马替尼50mg；乳糖200mg；微晶纤维素50mg；聚维酮K30 30mg；羧甲基淀粉钠20mg。

③复方姜黄素(姜黄素-甲磺酸伊马替尼) (3组)的配方：

姜黄素200mg；甲磺酸伊马替尼50mg；乳糖150mg；微晶纤维素50mg；聚维酮K30 30mg；羧甲基淀粉钠20mg。

④甲磺酸伊马替尼

甲磺酸伊马替尼50mg；乳糖350mg；微晶纤维素50mg；聚维酮K30 30mg；羧甲基淀粉钠20mg。

姜黄素

姜黄素200 mg；乳糖200mg；微晶纤维素50mg；聚维酮K30 30mg；羧甲基淀粉钠20mg。

⑥对照组

乳糖400mg；微晶纤维素50mg；聚维酮K₃₀ 30mg；羧甲基淀粉钠20mg。

2.2癌细胞悬液的制备：从腹水瘤小鼠抽取癌性腹水约1 ml，加入4 ml 生理盐水，离心洗涤后加入含10%小牛血清的DMEM细胞培养基制成细胞悬液，稀释至细胞浓度为5×10⁶个/ml。

2.3胃癌小鼠动物模型的制作：采用清洁级ICR小鼠，术前禁食12小时，注射镇痛麻醉剂。常规腹部皮肤，在腹正中切口，打开腹腔后将胃拉出，将制备的癌细胞悬液以0.2 ml/只接种于小鼠的胃壁中（大弯侧前臂），关腹。术后每日分别灌胃（ig）姜黄素组、甲磺酸伊马替尼组、复方制剂组1、2、3以及对照组，每组20只，每日观察1~2次，连续灌胃15天后处死，解剖观察并称取瘤重，计算抑瘤率。

表6 药物组对小鼠肿瘤的抑制作用

从表6中可以看出，姜黄素和甲磺酸伊马替尼联合用药可明显提高对肿瘤的抑制率（36.2%、43.5%、50.5%）；且随着姜黄素剂量的增加，二者联合用药对肿瘤的抑制作用明显增加；同时，在甲磺酸伊马替尼剂量不变，姜黄素剂量低于单独用药组的情况下，二者联合用药对肿瘤的抑制作用（36.2%，43.5%）也明显高于单独用药组（26.3%）。

Claims

1.一种治疗肿瘤的药物组合物，其特征在于：它含有姜黄素和甲磺酸伊马替尼为主要成分制备而成的制剂：姜黄素 10~300份、甲磺酸伊马替尼20~100份。

2.根据权利要求1所述的治疗肿瘤的药物组合物，其特征在于：它含有姜黄素和甲磺酸伊马替尼为主要成分制备而成的制剂：姜黄素50~200份、甲磺酸伊马替尼50份。

3.根据权利要求1或2所述的治疗糖尿病的药物组合物，其特征在于：所述的药剂是片剂、胶囊剂、丸剂、颗粒剂或口服液。

4.根据权利要求3所述的治疗肿瘤的药物组合物，其特征在于：所述的片剂还包括乳糖、微晶纤维素、聚维酮、羧甲基淀粉钠，其重量配比为：姜黄素10~300份、甲磺酸伊马替尼20~100份、乳糖50~70份、微晶纤维素20~100份、聚维酮5~50份、羧甲基淀粉钠10~60份。

5.根据权利要求1~2所述的治疗肿瘤的药物组合物，其特征在于：所述的片剂还包括乳糖、微晶纤维素、聚维酮、羧甲基淀粉钠，其重量配比为：姜黄素50~200份、甲磺酸伊马替尼50份、乳糖250份、微晶纤维素50份、聚维酮20份、羧甲基淀粉钠30份。

6.一种制备权利要求4~5任意一项所述的药物组合物的方法，其特征在于：所述的片剂的制备包括如下的步骤：

a、称取重量配比的原料药及辅料：姜黄素10~300份、甲磺酸伊马替尼20~100份、乳糖50~70份、微晶纤维素20~100份、聚维酮5~50份、羧甲基淀粉钠10~60份;

b、按处方量称取已粉碎、过筛80目的姜黄素、甲磺酸伊马替尼、乳糖、微晶纤维素、用等量递增混合法充分混匀后，再粉碎过筛;取聚维酮K30，加蒸馏水加热制成5%聚维酮K30溶液后，加入混合粉中制成软材，用20目筛制粒，60℃干燥4小时，收粒，加入羧甲基淀粉钠，混匀，用18目筛整粒，压片，得片剂。