CN103385853A

CN103385853A - 一种egf脂质体及其制备方法

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Publication number: CN103385853A
Application number: CN2012101376747A
Authority: CN
Inventors: 孙民富
Original assignee: Individual
Current assignee: Individual
Priority date: 2012-05-07
Filing date: 2012-05-07
Publication date: 2013-11-13

Abstract

本发明公开了一种EGF脂质体及其制备方法。该脂质体包封的药物为EGF，可采用超临界二氧化碳RESS、SAS、SAS-EM、SAA、PGSS、RESOLV、PSF等方法单独或共同联合制备。脂质体的粒径可控在50-500纳米内，分布均匀，包封率高于90％，活性稳定在90％以上。特别适合蛋白质、多肽、核酸、基因等材料的加工，可以制作成针剂、片剂、胶囊剂、乳剂、气雾剂、喷雾剂、冻干粉等剂型，可广泛应用于医药、化妆品、保健品等领域。

Description

一种EGF脂质体及其制备方法

技术领域

本发明属于医药技术领域，是一种EGF脂质体及其制备方法。

背景技术

EGF(Epidermal Growth Factoy)中文名称为表皮生长因子，由53个氨基酸组成(并包括3个二硫键的多肽)。EGF是1986年诺贝尔医学奖成果，具有公认的皮肤细胞再生促进能力。

最初的EGF主要被应用于医学领域，对治疗烧烫伤、促进伤口愈合，修复肠胃道、肝脏及眼角膜的损伤等，功效十分显著。

其后，更广泛应用于化妆品领域，EGF能够深入肌肤基底层，加速细胞的增殖分化，让衰老细胞快速角化，使已断裂、变性的胶原纤维和弹性纤维得到修复，皮肤弹性增加，皱纹逐渐平复乃至消失，同时，可使面部的色斑逐渐淡化，使表皮内角质层水分保持能力增加，让肌肤滋润焕发活力。

但是，EGF体外稳定性差，体内半衰期短，在应用方面受到很大的限制，严重制约了在各个领域的大面积推广使用。为此，国内外诸多学者和专家纷纷对最有希望获得突破的脂质体进行了长期不懈的科研攻关。

脂质体是一种中空的、由类脂双分子膜组成的球形微囊。由于脂质体的这种特有的结构，它表现出了与众不同的特点：1.对生物膜具有优良的通透性，由于它与生物膜有着极为类似的结构，因此它极易通过生物膜；2.具有淋巴系统定向性，由于脂质体释放药物是有选择性的，能够有的放矢，故被称为生物导弹；3.具有缓释性，可以携带着它所包封的药物和活性组分进入皮肤，缓慢的释放，持久的发挥作用：4.具有稳定性，所包封的药物和活性组分可避免被体内的酶或免疫系统所分解。

尽管脂质体有诸多的优势，但要真正产业化并不容易：不是有机溶剂毒性大，残留严重；就是粒径分布不均，包封率低下，活性损失严重。因此，极少有规模化生产的成功案例。

发明内容

本发明的目的在于提供一种粒径在50-500nm范围内，分布均匀，包封率在90％以上，活性稳定在90％以上的粉剂和乳剂，特别适合蛋白质、多肽、核酸、基因等材料的脂质体及制备方法，可以制作成针剂、片剂、胶囊剂、乳剂、气雾剂、喷雾剂、冻干粉等剂型，广泛应用于医药、化妆品、保健品等领域。

该脂质体的包封的药物为EGF，制备工艺可采用超临界二氧化碳RESS(超临界溶液快速膨胀法)，SAS(超临界反萃剂法)，SAS-EM(超临界流体反萃剂法-加强质量传递制粒法)，SAA(超临界辅助原子化成粒法)，PGSS(气体饱和溶液制粒法)，RESOLV(进入液体溶剂中的超临界溶液快速膨胀法)PSF(超临界反相蒸发法)。

该脂质体的制备方法如下：

以RESS为例：

超临界溶液快速膨胀法(RESS)是美国人Matson D.W.于1987年发明的，因其具有无溶剂残留和操作温度不高等优点，特别适用于热敏性及不稳定性高的生化蛋白质制品。它的具体工艺流程为：超临界二氧化碳与溶剂溶解，经喷嘴的快速膨胀后，由于溶液在喷嘴中的膨胀导致温度快速下降，溶剂在高压釜内沉析，二氧化碳以气体状态通过过滤器排放。专家认为，这实际上是超临界溶剂和溶质的二元混合物在收敛性喷嘴中膨胀，当超临界溶液处于过饱和状态时，形成粒子沉析。RESS法衍生的RESS-N法是在二氧化碳中加入乙醇、甲醇和异丙醇等共溶剂，具有提高对溶质溶解度的作用，扩大了应用领域。而基于RESS法创新而成的RESOLV(进入液体溶剂中的超临界溶液快速膨胀)法，虽然采用了RESS工艺流程，但是，二氧化碳流体是直接喷射到含有反应剂的液体中，淬灭了粒子的生长，获得了粒径更小、分布更均匀、包封率更高、活性更稳定的脂质体，在更大程度上将超临界二氧化碳制粒在生物医药领域的应用推进的一个新的阶段。

本发明正是在上述基础上的综合创新，一举突破了EGF在制作脂质体粉体和液体的难关，使得粒径达到了50-500纳米，分布均匀，包合率和活性都保持在90％以上，在医药、化妆品和保健品领域前途无量。

附图说明：

EGF脂质体的粒度分布测定。

经检测，包封率达到了91.9％；粒径范围为62-190.9纳米；粒径分布图左右对称，99％分布在少于190.9纳米范围内；稳定性试验表明，在37度条件下，45天时间内，无分层和变质现象，活性不减；完全达到了预期效果。

具体实施例：

1.将卵磷脂和胆固醇及少量乙醇构成的溶质融入高压二氧化碳中，与EGF溶液通过同轴双孔喷头同时喷入高压釜中，二氧化碳通过过滤器排放，收集干粉即为EGF脂质体。

2.将卵磷脂和胆固醇及少量乙醇融入高压二氧化碳中，与EGF溶液通过同轴双孔喷头同时喷人高压釜中的含有水和PVP的反应剂的液体中，二氧化碳排放后，收集液体即为EGF脂质体。

3.溶质可以是卵磷脂、胆固醇及小量乙醇，也可以是右旋糖苷和荧光素硫氰酸脂(FITC)及聚甲基丙烯酸脂(PMMA)或其它有机溶剂。

4.EGF可以是原液，也可以溶入其它助剂。

5.反应剂可以是水和PVP，也可以是二甲基亚砜(DMSO)或其它助剂。

本发明的优点在于：EGF脂质体的原有生物活性不受影响，粒径小，分布均匀，包封率高。可用于医药、化妆品和保健品。既可注射给药，又可口服给药。对治疗烧烫伤和糖尿病足有特效，对将EGF冻干粉改剂为可以在常温下市场存放和销售的液态化妆品开辟了新路。

Claims

1.一种EGF脂质体，其特征在于：所包封的药物为EGF，脂质体的粒径可控在50-500纳米范围内，分布均匀；包封率高于90％，活性稳定在90％以上。

2.一种如权利要求1所述的EGF脂质体的制备方法，其特征在于：该EGF脂质体的制备方法包括以下步骤：

(1)可采用超临界二氧化碳RESS、RESOLV、SAS、SAS-EM、SAA、PSF等方法，单独或共同联合制备EGF脂质体；

(2)超临界二氧化碳溶剂可以是卵磷脂、胆固醇和乙醇，也可以是右旋糖苷、荧光素硫氰酸脂(FITC)及其它有机溶剂；

(3)EGF溶液可以是原液，也可以添加其它助剂；

(4)反应剂可以是水和PVP，也可以是二甲基亚砜(DMSO)及其它助剂；

(5)EGF脂质体可以是粉状的，也可以是液态的。

3.根据权利要求1所述的EGF脂质体，其特征是它特别适合蛋白质、多肽、核酸、基因等材料的加工，可以制作成针剂、片剂、胶囊剂、乳剂、气雾剂、喷雾剂、冻干粉等剂型，可广泛应用于医药、化妆品、保健品等领域。