CN103370081A

CN103370081A - 受试者的选择和治疗

Info

Publication number: CN103370081A
Application number: CN2012800074447A
Authority: CN
Inventors: M.托托里蒂斯
Original assignee: Santarus Inc
Current assignee: Santarus Inc
Priority date: 2011-02-03
Filing date: 2012-02-02
Publication date: 2013-10-23
Also published as: WO2012106497A2; JP2017078075A; EP2670438A4; JP2014505703A; WO2012106497A3; AU2012212194A1; AU2012212194B2; CA2824089A1; CN107252483A; US20160340433A1; AU2017202357A1; EP2670438A2; US20140017261A1

Abstract

本发明涉及选择受试者的方法，以及利用抗-VLA-1抗体治疗受试者的方法。在一个实施方案中，第一治疗剂是DMARD(缓解疾病的抗风湿性药物)，例如金盐；羟氯喹；抗叶酸剂，例如甲氨蝶呤；嘧啶合成抑制剂，例如来氟米特；或磺胺药，例如柳氮磺胺吡啶。例如，DMARD可以是甲氨蝶呤，以mg/周或更少的剂量施用；来氟米特，以20mg/日或更少的剂量施用；柳氮磺胺吡啶，以3000mg/日或更少的剂量施用；或羟氯喹，以400mg/日或更少的剂量施用。

Description

受试者的选择和治疗

相关申请

本申请要求2011年2月3日提交的美国临时申请No.61/439,348和2011年6月17日提交的美国临时申请No.61/498,263的权益。将两个先前的申请通过引用整体并入本文。

发明领域

本申请涉及选择受试者的方法和利用抗-VLA-1抗体治疗受试者的方法。

发明背景

整联蛋白是介导细胞-细胞和细胞-基质粘附的细胞表面受体的超家族。此类异二聚体蛋白质(由两个非共价连接的多肽链α和β链组成)在发育和组织修复过程中为细胞生长、迁移和分化提供了固着以及信号。整联蛋白还牵涉免疫和炎性过程，所述过程需要使细胞外渗出血管，进入组织并且朝向感染位置。

VLA-1(也称为αlβl)属于称为VLA(“极晚期抗原”)整联蛋白的一类整联蛋白。VLA-1结合胶原(I型和IV型)和层粘连蛋白，其牵涉细胞在胶原上的粘着和迁移；胶原基质的收缩和重组织；和参与细胞外基质重塑的基因的表达的调控。

已显示VLA-1参与类风湿关节炎、与骨质吸收相关的慢性炎性疾病的发生。患者的关节炎滑膜中的浸润T细胞表达高水平的VLA-1，利用抗体阻断其显著地减少动物模型的炎症反应和关节炎的发生。

发明概述

本发明至少部分基于利用抗-VLA-1抗体治疗受试者的新型改进的方法的发现。在一个方面，本发明表征了其中如果患者先前已接受利用至少一种第一治疗剂的治疗并且任选地患者对第一治疗剂的反应不能满足预定标准，则将受试者，例如患有炎性病症例如关节炎的患者选择作为接受利用抗-VLA-1抗体的治疗的候选者的方法。例如，患者可以在给定的量的时间后，例如在两周或一个月或两个月或更长时间过程后不能经历关节炎症状的缓解。如果患者对第一治疗剂的反应确实满足预定标准或反应水平，则患者通常不被选择来接受利用抗-VLA-1抗体的治疗。

在一个实施方案中，当(i)患者未能改善关节炎症状；(ii)患者停止改善关节炎症状；或(iii)患者经历关节炎症状的恶化时，患者不满足预定标准。关节炎症状的改善可以表现为例如肿胀关节计数或压痛关节计数的减少。关节炎症状的恶化可表现为肿胀关节计数或压痛关节计数的增加。症状的改善或恶化还可通过在第一试剂施用后由患者报导的疼痛的量，通过患者的血液中鉴定的RF(类风湿因子)的量，或从患者收集的关节滑液的性质来测定。例如，症状的改善可通过关节滑液中白细胞(WBC)或外周血单核细胞(PMN)数目的减少来表示。

可给受试者，例如鉴定为接受通过本文中描述的方法利用抗-VLA-1抗体进行治疗的候选者的患者，施用抗-VLA-1抗体。在一个实施方案中，患者患有关节炎例如类风湿性关节炎，患者在被选择来接受利用抗-VLA-1抗体的治疗之前接受患有关节炎至少6个月的诊断。在另一个实施方案中，患者患有炎性肠病(IBD)，例如溃疡性结肠炎或克罗恩病，并且患者在被选择来接受利用抗-VLA-1抗体的治疗之前接受患有IBD至少6个月的诊断。

在一个实施方案中，第一治疗剂是DMARD(缓解疾病的抗风湿性药物(Disease Modifying Antirheumatic Drug))，例如金盐；羟氯喹；抗叶酸剂，例如甲氨蝶呤；嘧啶合成抑制剂，例如来氟米特；或磺胺药，例如柳氮磺胺吡啶。例如，DMARD可以是甲氨蝶呤，以25mg/周或更少的剂量施用；来氟米特，以20mg/日或更少的剂量施用；柳氮磺胺吡啶，以3000mg/日或更少的剂量施用；或羟氯喹，以400mg/日或更少的剂量施用。

在另一个实施方案中，第一治疗剂是TNF-α抑制剂，例如抗-TNF-α抗体，例如英夫利昔单抗、阿达木单抗、培化舍珠单抗或戈利木单抗；或融合蛋白依那西普。

在另一个实施方案中，第一治疗剂是VLA-2的抑制剂，例如抗-VLA-2抗体，例如GBR500。

在另一个实施方案中，第一治疗剂是整联蛋白的抑制剂，例如MAdCAM-1(粘膜血管地址素细胞粘附分子-1(Mucosal Vascular AddressinCell Adhesion Molecule-1)，α4β7整联蛋白)。MAdCAM-1抑制剂可以是抗-MAdCAM-1抗体，例如维多珠单抗(MLN0002,Millennium Pharmaceuticals,Cambridge,MA)。例如，在一个实施方案中，患者具有炎性肠病，并且患者在接受利用抗-VLA-1抗体的治疗之前对利用抗-MAdCAM-1抗体的治疗具有不充分的反应。

在另一个实施方案中，第一治疗剂是B细胞消耗剂，例如抗-CD20抗体，例如利妥昔单抗(Rituxan,Genentech,Inc.,South San Francisco,CA；和IDECPharmaceutical,San Diego,CA)。

在另一个实施方案中，第一治疗剂是Janus激酶(JAK)家族成员或脾酪氨酸激酶(SYK)家族成员的抑制剂。JAK家族成员包括JAK1、JAK2、JAK3和TYK2，并且SYK家族成员包括SYK和ZAP-70。在一个实施方案中，第一治疗剂是JAK3的抑制剂，例如小分子抑制剂CP-690,550(托法替尼(tofacitinib))。在另一个实施方案中，第一治疗剂是SYK抑制剂，例如小分子抑制剂R406或其前体药物R788。

在一个实施方案中，在施用抗-VLA-1抗体之前停止第一治疗剂的施用。例如，在施用抗-VLA-1抗体之前至少2周、至少3周、至少4周、至少5周或更长时间停止第一治疗剂的施用。在一个实施方案中，在患者已从身体清除治疗量的第一治疗剂之前不给患者施用抗-VLA-1抗体。类似地，当患者在体内具有治疗水平的抗-VLA-1抗体时可以不给患者施用第一治疗剂。

在一些实施方案中，当施用抗-VLA-1抗体时，患者继续接受第一治疗剂。例如，当施用抗-VLA-1抗体时，患者可继续接受DMARD或超过一种DMARD。在其它实施方案中，在接受利用抗-VLA-1抗体的治疗的同时，患者将不接受超过一种DMARD。在一个实施方案中，在接受利用抗-VLA-1抗体的治疗同时，患者接受利用DMARD和羟氯喹的治疗。

在一个实施方案中，在施用抗-VLA-1抗体疗法后，患者接受第一治疗剂的施用，或选择施用以便在患者中维持抗体和第一治疗剂的治疗水平。例如，可将抗体和第一治疗剂在体内维持至少1天、至少2天、至少5天或至少10天或更长时间。

在一个实施方案中，患者继续接受利用第一治疗剂的治疗，所述第一治疗剂是例如甲氨蝶呤、来氟米特、柳氮磺胺吡啶或羟氯喹，同时还给患者施用抗-VLA-1抗体。例如，在一个实施方案中，第一治疗剂是甲氨蝶呤，以35mg/周、30mg/周、25mg/周、20mg/周或15mg/周或更少的剂量施用甲氨蝶呤，同时还给患者施用抗-VLA-1抗体。在另一个实施方案中，第一治疗剂是来氟米特，以30mg/日、25mg/日、20mg/日、15mg/日、10mg/日或更少的剂量施用来氟米特，同时还给患者施用抗-VLA-1抗体。在另一个实施方案中，第一治疗剂是柳氮磺胺吡啶，以4000mg/日、3500mg/日、3000mg/日、2500mg/日、2000mg/日或更少的剂量施用柳氮磺胺吡啶，同时还给患者施用抗-VLA-1抗体。在另一个实施方案中，第一治疗剂是羟氯喹，以500mg/日、450mg/日、400mg/日、350mg/日、300mg/日或更少的剂量施用羟氯喹，同时还给患者施用抗-VLA-1抗体。

在另一个实施方案中，第一治疗剂是羟氯喹，还给患者施用第二DMARD，同时给患者施用抗-VLA-1抗体。

在一个实施方案中，患者继续接受利用第一治疗剂的治疗，所述第一治疗剂是抗-MAdCAM-1抗体，例如维多珠单抗，同时还给患者施用抗-VLA-1抗体。例如，在一个实施方案中，通过适当的施用途径例如通过静脉内(IV)注射，每2周1次以20mg/kg、15mg/kg、10mg/kg、6mg/kg、2mg/kg或更少的剂量施用抗-MAdCAM-1抗体，同时还给患者施用抗-VLA-1抗体。

在一个实施方案中，抗-VLA-1抗体包括包含SEQ ID NO:1的序列的轻链多肽和包含SEQ ID NO:2的序列的重链多肽。例如，抗-VLA-1抗体可包括包含SEQ ID NO:3的序列的轻链多肽和包含SEQ ID NO:4的序列的重链多肽。

在一个实施方案中，抗-VLA-1抗体结合与具有包含SEQ ID NO:1的序列的轻链多肽和包含SEQ ID NO:2的序列的重链多肽的抗体所结合的表位相同的表位。

在一个实施方案中，提供了利用抗-VLA-1抗体治疗患者的方法，其中患者先前已施用了第一治疗剂，并且其中评价对第一治疗剂的反应，并且将所述反应确定为不充分的。方法包括给患者施用有效量的抗-VLA-1抗体。如果例如，(i)患者未能改善症状；(ii)患者停止改善症状；或(iii)患者经历症状的恶化，则反应被确定为不充分的。

例如，在一个实施方案中，患者患有关节炎例如类风湿性关节炎，如果(i)患者未能改善关节炎症状；(ii)患者停止改善关节炎症状；或(iii)患者经历关节症状的恶化，则反应被确定为不充分的。

关节炎症状的改善可表现为肿胀关节计数或压痛关节计数的减少，关节炎症状的恶化可表现为肿胀关节计数或压痛关节计数的增加。在一个实施方案中，患者患有IBD，例如溃疡性结肠炎或克罗恩病，如果(i)患者未能改善IBD症状；(ii)患者停止改善IBD症状；或(iii)患者经历IBD症状的恶化，则反应被确定为不充分的。

在一个实施方案中，第一治疗剂是DMARD例如金盐；羟氯喹；抗叶酸剂，例如甲氨蝶呤；嘧啶合成抑制剂，例如来氟米特；或磺胺药，例如柳氮磺胺吡啶。在其它实施方案中，第一治疗剂是TNF-α抑制剂、JAK抑制剂或SYK抑制剂、抗-VLA-2抗体，例如GBR500；抗-MAdCAM-1抗体，例如维多珠单抗；或抗-CD20抗体，例如利妥昔单抗。

在一个实施方案中，本发明表征了利用抗-VLA-1抗体治疗患者的方法，其中患者先前已施用了第一治疗剂，并且其中对第一治疗剂的反应是不充分的。方法包括给患者施用有效量的抗-VLA-1抗体。

在一个实施方案中，提供了利用抗-VLA-1抗体治疗患者的方法，其中患者先前已施用了第一治疗剂，并且响应患者对第一治疗剂的反应的负面评价，例如反应不能满足预定标准的评价，给患者施用有效量的抗-VLA-1抗体。可直接或间接获取负面评价。

在一个实施方案中，提供了治疗患者的方法，所述方法包括施用第一治疗剂，所述第一试剂是抗-VLA-1抗体，和第二试剂，其中施用第一和第二治疗剂对于治疗患者的关节炎是有效的。第二治疗剂可以是例如DMARD、TNF-α抑制剂、JAK抑制剂(例如，JAK1、JAK2、JAK3或TYK2的抑制剂)、SYK抑制剂(例如，SYK或ZAP-70的抑制剂)、VLA-2抑制剂、IL-6抑制剂、IL-17抑制剂、IL-12/IL-23抑制剂、MAdCAM-1抑制剂、CD20抑制剂或另一种生物制剂。例如，第二治疗剂可以是甲氨蝶呤、来氟米特、柳氮磺胺吡啶或羟氯喹、GBR500、英夫利昔单抗、阿达木单抗、培化舍珠单抗、戈利木单抗、依那西普、利妥昔单抗、托珠单抗(tocilizumab)、阿巴他塞或维多珠单抗。

在一个实施方案中，第二治疗剂是甲氨蝶呤，以35mg/周、30mg/周、25mg/周、20mg/周或15mg/周或更少的剂量施用。在另一个实施方案中，第二治疗剂是来氟米特，以30mg/日、25mg/日、20mg/日、15mg/日、10mg/日或更少的剂量施用。在另一个实施方案中，第二治疗剂是柳氮磺胺吡啶，以4000mg/日、3500mg/日、3000mg/日、2500mg/日、2000mg/日或更少的剂量施用。在另一个实施方案中，第二治疗剂是羟氯喹，以500mg/日、450mg/日、400mg/日、350mg/日、300mg/日或更少的剂量施用。

在另一个实施方案中，第二治疗剂是抗体，例如抗-MAdCAM-1抗体，例如维多珠单抗，通过适当的施用途径，例如通过静脉内(IV)注射，每2周一次，以例如20mg/kg、15mg/kg、10mg/kg、6mg/kg、2mg/kg或更少的剂量施用抗体。

在一个实施方案中，给患者施用第三治疗剂，其可以是例如DMARD，例如金盐；羟氯喹；抗叶酸剂，例如甲氨蝶呤；嘧啶合成抑制剂，例如来氟米特；或磺胺药，例如柳氮磺胺吡啶；TNF-α抑制剂，例如抗-TNF-α抗体，例如英夫利昔单抗、阿达木单抗、培化舍珠单抗或戈利木单抗；或融合蛋白依那西普；VLA-2抑制剂，例如抗-VLA-2抗体，例如GBR500；MAdCAM-1抑制剂，例如抗-MAdCAM-1抗体，例如维多珠单抗；B细胞消耗剂，例如CD20抑制剂，例如抗-CD20抗体，例如利妥昔单抗；JAK抑制剂，例如托法替尼；或SYK抑制剂，例如R406或前体药物R788。在一个实施方案中，患者具有IBD，例如溃疡性结肠炎或克罗恩病，并且第二治疗剂或第三治疗剂是MAdCAM-1抑制剂，例如抗-MAdCAM-1抗体，例如维多珠单抗。

在一个实施方案中，第一和第二以及任选地第三治疗剂的施用导致比在单独施用第一或第二(或第三)治疗剂后观察到的症状的更大改善。

在一个实施方案中，提供了选择患者作为接受利用抗-VLA-1抗体的治疗的候选者的方法，其中患者先前已施用了第一治疗剂。方法包括对患者样品进行测试以评价患者对第一治疗剂的反应，如果患者对第一治疗剂的反应不能满足预定标准，则选择患者作为利用抗-VLA-1抗体的治疗的候选者。如果患者对第一治疗剂的反应确实满足预定标准，则确定不将患者作为接受利用抗-VLA-1抗体的治疗的候选者。患者可具有关节炎例如类风湿性关节炎。

如果(i)患者未能改善关节炎症状；(ii)患者停止改善关节炎症状；或(iii)患者经历关节炎症状的恶化，则患者可被选择为利用抗-VLA-1抗体进行治疗的候选者。

关节炎症状的改善可表现为肿胀关节计数或压痛关节计数的减少，关节炎症状的恶化可表现为肿胀关节计数或压痛关节计数的增加。

在一个实施方案中，给被选择作为进行利用抗体的治疗的候选者的患者施用有效量的抗-VLA-1抗体。

在一个方面，本发明表征在将患者选择或分类为接受利用抗-VLA-1抗体的治疗的候选者的方法，其中患者先前已施用了第一治疗剂。方法包括评价患者对第一治疗剂的反应，如果患者不满足预定标准，则将患者选择或分类为利用抗-VLA1抗体进行治疗的候选者。如果反应确实满足预定标准，则不将患者选择或分类为接受利用抗-VLA-1抗体的治疗的候选者。评价患者的反应可包括分析来自患者的样品，例如组织或关节液样品。

在另一个实施方案中，提供了通过给患者施用第一治疗剂治疗患者的方法，其中第一治疗剂是抗-VLA-1抗体，并且还给患者施用第二治疗剂，其中第二治疗剂是抗炎剂。第一和第二治疗剂的施用对于治疗患者的炎性疾病，例如关节炎，例如类风湿性关节炎是有效的。

在一个实施方案中，第二治疗剂是甲氨蝶呤、来氟米特、柳氮磺胺吡啶或羟氯喹。例如，第二治疗剂可以是甲氨蝶呤，以例如35mg/周、30mg/周、25mg/周、20mg/周、或15mg/周或更少的剂量施用；第二治疗剂可以是来氟米特，以例如30mg/日、25mg/日、20mg/日、15mg/日、10mg/日或更少的剂量施用；第二治疗剂可以是柳氮磺胺吡啶，以例如4000mg/日、3500mg/日、3000mg/日、2500mg/日、2000mg/日或更少的剂量施用；或第二治疗剂可以是羟氯喹，以例如500mg/日、450mg/日、400mg/日、350mg/日、300mg/日或更少的剂量施用。

在另一个实施方案中，给患者施用第三治疗剂，例如DMARD，例如金盐；羟氯喹；抗叶酸剂，例如甲氨蝶呤；嘧啶合成抑制剂，例如来氟米特；或磺胺药，例如柳氮磺胺吡啶；TNF-α抑制剂，例如抗-TNF-α抗体，例如英夫利昔单抗、阿达木单抗、培化舍珠单抗或戈利木单抗；或融合蛋白依那西普；VLA-2抑制剂，例如抗-VLA-2抗体，例如GBR500；MAdCAM-1抑制剂，例如抗-MAdCAM-1抗体，例如维多珠单抗；B细胞消耗剂，例如CD20抑制剂，例如抗-CD20抗体，例如利妥昔单抗；JAK抑制剂，例如托法替尼；或SYK抑制剂，例如R406，或前体药物R788。通常，第一、第二和第三试剂彼此不同。

在一个实施方案中，患者患有IBD，例如溃疡性结肠炎或克罗恩病，并且第二治疗剂或第三治疗剂是MAdCAM-1抑制剂，例如抗-MAdCAM-1抗体，例如维多珠单抗。

在一个实施方案中，第一和第二治疗剂的施用导致比在单独施用第一或第二治疗剂时症状(例如类风湿性关节炎或IBD的症状)的更大改善。

除非另外定义，否则本文中使用的所有技术和科学术语具有与由本发明所属领域内技术人员通常理解的含义相同的含义。虽然可将与本文中描述的方法和材料相似或等同的方法和材料用于实施或测试本发明，但在下文中描述了适当的方法和材料。本文中提及的所有出版物、专利申请、专利和其它参考文献通过引用整体并入本文。在矛盾的情况下，以本说明书，包括定义为准。此外，材料、方法和实施例仅仅是举例说明性的而并非旨在限制。

本发明的一个或多个实施方案的内容示于下文中的附图和描述中。根据描述和附图以及根据权利要求，本发明的其它特征、主题和有利方面将变得显而易见。

附图简述

图1A和1B分别是抗-VLA-1抗体的轻链可变结构域序列(SEQ ID NO:1)和重链可变结构域序列(SEQ ID NO:2)。此类序列分别包括轻链和重链CDR。

图2A和2B分别是抗-VLA-1抗体的轻链多肽(SEQ ID NO:3)和重链多肽(SEQ ID NO:4)序列。

详述

本发明至少部分基于利用抗-VLA-1抗体治疗患者的新型改进方法的发现。因此，在一个方法中，使已接受第一疗法一定时间的患者转换至不同疗法，所述疗法包括利用抗-VLA-1抗体的治疗。如果例如患者不能实现或维持预先选择水平的对利用一线疗法的治疗的反应的改善，或停止对一线疗法的反应，则患者被选择用于利用抗-VLA-1抗体进行治疗。例如，在施用一线疗法后，患者可以不满足改善的预先选择的标准，或显示不可接受的水平的症状，或不满足症状的预先选择的标准。在一些情况下，患者在被选择来利用抗-VLA-1抗体进行治疗之前，已接受超过一种疗法。在一个实施方案中，利用超过一种现有疗法，患者不能实现或维持预先选择的水平的改善。例如，在利用超过一种现有疗法治疗后，患者可以不满足预先选择的水平的改善或显示不可接受水平的症状，或不满足症状的预先选择的标准。在此类情况下，患者可被分类为对一线疗法，或对一种或多种现有疗法的不充分反应者，或可被分类为在施用一线疗法或一种或多种现有疗法后已接受负面评价的患者。不能对一种或多种现有疗法反应的患者可被诊断为患有难治性疾病，例如难治性类风湿性关节炎。

如本文中所用，“不能实现”充分反应的受试者意指在治疗过程中从未显示预先选择的水平的改善的受试者。如本文中所用，“停止显示”或“停止实现”或“不能维持”预先选择的水平的反应意指受试者在治疗过程中曾经显示或实现预先选择的水平的反应，但后来，例如数天、数周或数月后，经历症状的恶化，即使在继续接受导致症状的初始改善的治疗的情况下亦如此。

病症。本发明中表征的方法特别适合用于治疗关节炎，例如自身免疫性关节炎，例如，类风湿性关节炎或银屑病关节炎；或其它形式的炎性关节炎，例如与炎性肠病相关的关节炎。被选择来利用抗-VLA-1抗体进行治疗的患者可患有关节炎例如类风湿性关节炎，并且可显示对一线疗法或对超过一种现有疗法的不充分反应，或可在施用一线疗法，或一种或多种现有疗法后已接受负面评价。

自身免疫性关节炎由免疫系统的异常引起，该异常使得身体开始攻击其自已的关节和结缔组织。自身免疫性关节炎的实例包括类风湿性关节炎、幼年型关节炎、银屑病关节炎和强直性脊柱炎。类风湿性关节炎是特征在于周围关节的非特异性的，通常对称的炎症，潜在地导致关节和关节周围结构的进行性破坏，具有或不具有全身性表现的慢性综合症。幼年型关节炎(始于16岁或16岁前的关节炎)与成人类风湿性关节炎类似，并且倾向于影响大关节和小关节，并且可影响生长和发育。可在约7%的银屑病患者中发生的银屑病关节炎是与皮肤或指甲的银屑病相关的炎性关节炎；并且对于RF(类风湿因子)是阴性测试。强直性脊柱炎是特征在于中轴骨骼和大外周关节的炎症的全身性风湿性病症。

其它类型的关节炎，特别地炎性关节炎适合于利用本发明表征的方法进行治疗。例如，当一线疗法不能或停止缓解关节炎症状时，可利用抗-VLA-1抗体治疗与炎性肠病相关的关节炎。

可通过许多可获得的诊断工具测量试剂治疗关节炎的功效，所述工具包括但不限于例如体格检查，包括测定压痛关节计数或肿胀关节计数的数目、关节X-射线、血液检测或从患病关节收集的液体的检查。X-射线可显示可在慢性类风湿性关节炎中发生的侵蚀、囊肿和关节间隙狭窄。显示升高的ESR(红细胞沉降率(Erythrocyte Sedimentation Rate))水平或针对改变的γ-球蛋白的抗体(即，类风湿因子“RF”)的存在的血液检测显示类风湿性关节炎。来自类风湿性关节炎患者的关节的滑液通常是混浊的，但为无菌的，具有减小的粘度和通常3,000至50,000个白细胞(WBC)/μL。

关节炎例如类风湿性关节炎的症状包括关节痛、关节肿胀、关节变形、减弱的活动关节的能力、关节周围皮肤的发红、僵硬、关节周围的发热、晨僵和泻流(关节中液体的收集)。类风湿性关节炎的诊断标准示于Aletaha等人,“2010Rheumatoid Arthritis Classification Criteria,”Arthritis and Rheumatism62:2569-2581,2010中，包括受试者的患病大关节和小关节数目、血清中RF(类风湿因子)和ACPA(抗-瓜氨酸蛋白抗体)的水平、CRP(C-反应性蛋白)和ESR(红细胞沉降率)水平以及受试者的症状是否已持续至少6周或短于6周的评价。症状的持续时间通过在评价时自我报告临床上牵涉的患者的任何关节的滑膜炎的体征和症状(疼痛、肿胀和压痛)的持续时间来测定。这类因素的每一个提供了评分，总评分≥6(在0-10的等级上)表示类风湿性关节炎。

“大关节”包括肩膀、肘、髋、膝和踝，并且“小关节”包括掌指、近端指间(PIP)、第二至第五跖趾(MTP)以及拇指指节间(IP)关节和腕关节。

RF和ACPA水平通常以IU(国际单位)报告。基于各自实验室测试和测定的正常上限(ULN)，可进行下列定义：阴性=少于或等于实验测试和测定的ULN；低水平阳性=高于ULN但于≤实验测试和测定的ULN的3倍；高水平阳性=>实验测试和测定的ULN的3倍。

基于当地实验室标准将CRP和ESR水平评分为正常或异常。如果这两个测试中的至少一个结果是异常的，则将患者评分为具有异常急性反应。

患有关节炎例如类风湿性关节炎的患者通常也具有升高的水平的VLA-1⁺细胞，例如VLA-1⁺T细胞或单核细胞。

本发明中表征的方法也适用于治疗自身免疫性病症，例如炎性肠病(IBD)(例如，溃疡性结肠炎或克罗恩病)。在一个实施方案中，被选择来利用抗-VLA-1抗体进行治疗的患者患有IBD并且已显示对第一疗法，或对超过一种现有疗法的不充分反应，或在施用一线疗法或一种或多种现有疗法后已接受负面评价。

可通过许多参数来监测试剂治疗IBD的功效，所述参数包括但不限于例如每日液体或软大便的次数、腹痛、腹部包块(abdominal mass)的存在、<0.47(男人中)和<0.42(女人中)的血细胞比容、与标准体重的偏差、肛裂、瘘管或脓肿；以及虹膜的炎症或葡萄膜炎。

克罗恩病活动性指数提供了使用症状例如上述症状进行的疾病严重度的定量评价(Best等人,“Development of a Crohn’s Disease Activity Index.National Cooperative Crohn’s Disease Study”Gastroenterology 70:439-444,1976)。220-400的CDAI通常表示中度至重度克罗恩病。大于450的CDAI通常表示严重疾病。克罗恩病的缓解通常定义为大于150的CDAI的下降。对疗法的反应通常公认为大于70点的CDAI的下降。

通常将通过CDAI提供的定量分析(或其它类似活动性评级法，参见D’Haens等人“A Review of Activity Indices and Efficacy End Points forClinical Trials of Medical Therapy in Adults with Ulcerative Colitis”Gastroeneterology132:763-786,2007)与通过炎性肠病问卷调查(IBDQ)提供的定性分析结合使用，所述问卷调查提供的定性分析报告了克罗恩病患者的生活质量(Irvine等人,“Quality of Life:a Valid and Reliable Measure ofTherapeutic Efficacy in the Treatment of Inflammatory BowelDisease.Canadian Crohn’s Relapse Prevention Trial Studygroup”Gastroenterology106:287-96,1994)。IBDQ是32项问卷法，其将社会、系统和情绪症状以及肠相关症状的元素整合入活动性指数。问卷法报告肠功能、情绪功能、系统症状和社会功能，并且可自我管理。关于指数的总评分在32至224的范围内，最高评分表示更好的生活质量。患者的缓解评分通常在170至190的范围内。反应通常被定义为15点、16点、17点、18点或更多点的评分的增加。

一线疗法。一线疗法可以是本领域已知的任何疗法。例如，一线疗法可以是治疗剂，其为例如大分子(生物制剂)或小分子或细胞内信号转导的胃肠外抑制剂。

在一些实施方案中，一线疗法是治疗剂，所述治疗剂是小分子抑制剂DMARD，例如甲氨蝶呤，在其它实施方案中，一线疗法是生物制剂，例如TNF抑制剂，例如TNF-α抑制剂或白细胞介素抑制剂，例如IL-6、IL-17或IL-12/IL-13抑制剂。TNF-α抑制剂包括例如抗-TNF抗体英夫利昔单抗、阿达木单抗、培化舍珠单抗和戈利木单抗，以及融合蛋白依那西普。依那西普(Enbrel

)是可溶性TNF受体2与免疫球蛋白G1的Fc组分之间的融合物。抗-IL-6抗体托珠单抗是IL-6抑制剂的实例。用于治疗关节炎的其它生物治疗剂包括B细胞消耗剂，例如抗-CD20抗体利妥昔单抗(Rituxan,Genentech,Inc.,South San Francisco,CA；和IDEC Pharmaceutical,San Diego,CA)以及T细胞共刺激阻断剂，例如阿巴他塞，其为由融合至CTLA-4的细胞外结构域的免疫球蛋白组成的融合蛋白。

在一些实施方案中，一线疗法是治疗剂，例如Janus激酶(JAK)家族和脾酪氨酸激酶(SYK)家族成员的抑制剂(例如小分子抑制剂)。此类家族的成员是各种细胞因子的信号转导途径所必需的并且牵涉类风湿性关节炎(RA)(代表性自身免疫性炎性疾病)的发病机理。JAK家族的成员包括JAK1、JAK2、JAK3和Tyk2。示例性JAK抑制剂是口服可获得的JAK3抑制剂CP-690,550(托法替尼)。SYK家族的成员包括SYK和链相关蛋白激酶(ZAP-70)。示例性SYK抑制剂是R406和其前体药物R788(福他替尼二钠)。

一线疗法还可以是抗-极晚期抗原-2(VLA-2)抗体，例如GBR500(Sanofi,Bridgewater,NJ)、抗-MAdCAM-1抗体，例如维多珠单抗或抗-CD20抗体，例如利妥昔单抗。

在一个实施方案中，患者患有关节炎，一线疗法包括利用DMARD、TNF-α抑制剂、JAK(Janus激酶)抑制剂、SYK(脾酪氨酸激酶)抑制剂、IL-6抑制剂、IL-17抑制剂、IL-12/IL-23抑制剂、VLA-2抑制剂、CD20抑制剂或另一种生物治疗剂的治疗。DMARD包括例如甲氨蝶呤、金盐、来氟米特、柳氮磺胺吡啶或羟氯喹。

在另一个实施方案中，患者患有炎性肠病，例如克罗恩病或溃疡性结肠炎，并且一线疗法包括利用抗-MAdCAM-1抗体，例如维多珠单抗的治疗。

用于治疗关节炎的一线疗法还包括例如热和冷治疗，以及用于支持和定位关节的夹板或矫正装置。关节炎患者还可经历水疗法、冰按摩(ice massage)或经皮肤神经刺激(transcutaneous nerve stimulation)(TENS)。辣椒素乳膏还可涂覆于关节上的皮肤以减轻疼痛，患者可施用葡糖胺和软骨素。患者可施用醋氨酚(来进行缓解)，或NSAID(非类固醇类抗炎药)，例如阿司匹林、布洛芬或萘普生。患者(特别地患有自身免疫性关节炎的患者)还可接受皮质类固醇、COX-2(环氧化酶-2)抑制剂，例如塞来考昔或免疫抑制剂，例如硫唑嘌呤或环磷酰胺。患者还可进行手术来重建关节(关节成形术)或替换关节。患者可以进行锻炼方案，例如低强度有氧代谢活动以建立或维持耐力、针对灵活性的关节活动度恢复练习(range of motion exercises)和针对肌紧张的强度训练。

以足以引起有益或期望的临床结果的量递送疗法例如一线或二线治疗剂的“有效量”。可在一次或多次施用中递送有效量的治疗剂。“有效量”的一线疗法可产生“充分的反应”。“充分的反应”表现为症状的改善，例如肿胀关节计数和/或压痛关节计数的减少，或关节疼痛的减轻。抗-VLA-1抗体的“有效量”是按照临床上可接受的标准，足以减轻、改善、稳定、逆转、减缓或延迟关节炎或关节炎的症状的进展的量。

监测受试者在利用一线或二线疗法治疗后的关节炎症状的改善。例如，可通过测定ACR(美国风湿病学会)评分来监测受试者。例如，ACR20的评分表示压痛和肿胀关节总数的至少20%的减少和下列5个参数中的3个参数的20%的减少：疾病的医生整体评价、疾病的患者总体评价、疼痛的患者评价、C-反应蛋白或红细胞沉降率以及健康评价问卷(HAQ)评分的伤残程度。通常地，ACR20的评分表示患者在施用治疗剂后具有关节炎症状的显著改善。对于例如ACR50或ACR70的评分，患者可显示更显著的改善。

如果患者在施用疗法后未显示至少ACR20的评分，例如至少ACR50或ACR70的评分，那么患者可接受负面评价，或可被确定为具有对疗法的不充分反应。在一些实施方案中，在1或2周，或1或2个月或更长的过程中监测患者的ACR评分。在一些实施方案中，患者将不满足在利用一线疗法治疗后需要ACR20、ARC50或ACR70的ACR评分的预定标准，从而患者被选择来利用抗-VLA-1抗体进行治疗。

HAQ是证明有效的问卷法(由患者自我管理)，其包括20个与功能相关的项和4个与帮助和装置相关的项。问题包括8个子量表：穿衣和整理内务、站立、卫生保健、到达、吃、行走、抓握和活动。对项进行0(能够无困难地行使功能)至3(不能行使功能)的评分。HAQ疾病指数是量表评分的加权和，更高的评分表示更差的功能。HAQ疾病指数的减小超过-0.19至-0.22(例如，-0.2或-0.21)被认为是临床上重要的。

如果患者在施用疗法后未显示至少0.19，例如至少0.22或更多的HAQ评分的提高(增加)，则患者可接受负面评价，或被确定为具有对疗法的不充分反应。在一些实施方案中，在1或2周，或1或2个月或更长时间过程中监测患者的HAQ的提高。在一些实施方案中，患者将不满足需要至少0.19或0.22或更多的HAQ评分的提高的预定标准，从而患者被选择来利用抗-VLA-1抗体进行治疗。

还可通过测定DAS(疾病活动性评分)的提高来监测患者在利用一线或二线疗法治疗后关节炎症状的改善。DAS是类风湿性关节炎的活动性的量度，其整合下列参数：压痛和肿胀关节的总数、ESR和疾病活动性的患者评价(Van der Heijde等人,“Development of disease activity score based on judgmentin clinical practice by rheumatologists”J.Rheumatol.20:579-81,1993)。如果患者在施用疗法后未显示DAS的改善，例如至少1.6、至少1.8、至少2.0、至少2.5、至少3.0、至少3.2、至少3.6或更多的DAS的减少，则患者可接受负面评价，或被确定为具有对疗法的不充分反应。在一些实施方案中，在1或2周，或1或2个月或更长时间的过程中监测患者的DAS的改善。在一些实施方案中，患者将不满足需要至少1.6、至少2.0、至少2.2、至少2.8、至少3.2、至少3.6或更多的DAS的改善(DAS的减小)的预定标准，从而患者将被选择来利用抗-VLA-1抗体进行治疗。通常地，2.6或更少的DAS评分表示RA的缓解，3.2或更少的DAS评分表示低疾病活动性。在一个实施方案中，患者将不满足为2.6或更少的DAS的预定标准，或患者将不满足为3.2或更少的DAS的预定标准。

28-关节计数的DAS(DAS28-CRP测量)包括4个变量的组合：28个关节中压痛关节的数目、28个关节中肿胀关节的数目、CRP(以mg/L表示)和100毫米(mm)的直观模拟标度尺(Visual Analogue Scale)(VAS)上疾病活动性量度的主观评价。DAS28-CRP值在0至9.31的范围内，更高的评分表示更强的疾病活动性。通常地，2.6或更少的DAS28-CRP评分表示RA的缓解，3.2或更少的DAS28-CRP评分表示低疾病活动性。在一个实施方案中，患者将不满足为2.6或更少的DAS的预定标准，或患者将不满足为3.2或更少的DAS28的预定标准。

还可通过压痛和肿胀关节的总数的计数来监测患者的关节炎症状的改善。如果在施用疗法后压痛和肿胀关节的总数减少不超过例如1、2、3或更多个，则患者可接受负面评价，或被确定为具有对疗法的不充分反应。在一些实施方案中，在1或2周，或1或2个月或更长时间的过程中监测患者的肿胀或压痛关节计数的减少。在一些实施方案中，患者将不满足需要1、2、3或更多个的肿胀或压痛关节计数的减少的预定标准，从而患者将被选择来利用抗-VLA-1抗体进行治疗。在一些实施方案中，患者将不满足需要15%、20%、30%或更多的肿胀或压痛关节计数的减少的预定标准，从而患者将被选择来利用抗-VLA-1抗体进行治疗。

还可通过放射摄影法例如MRI、超声或X射线监测患者的关节炎症状的改善。此类方法提供了可显示滑膜炎、侵蚀变化和水肿的程度的图像。在例如1或2周或1或2个月或更长时间的过程中不能看到滑膜炎程度的减轻、关节侵蚀率的减小或水肿的减轻例如可表示患者具有对疗法的不充分反应。在一些实施方案中，患者将不满足需要15%、20%、30%或更多的滑膜炎程度的减轻、关节侵蚀率的减小或“骨骼水肿”或“骨炎”的减轻的预定标准，从而患者将被选择来利用抗-VLA-1抗体进行治疗。

还可通过测定血液或滑液中VLA-1⁺细胞，例如VLA-1⁺T细胞或单核细胞的数目来监测患者在利用一线或二线疗法治疗后关节炎症状的改善。如果在施用疗法后，VLA-1⁺细胞的数目的减少例如不超过15%、20%或30%或更多，则患者可接受负面评价，或被确定为具有对疗法的不充足反应。在一些实施方案中，在1或2周，或1或2个月或更长时间的过程中监测患者的VLA-1⁺细胞的减少。在一些实施方案中，患者将不满足需要15%、20%、30%或更多的VLA-1⁺细胞的减少的预定标准，从而患者将被选择来利用抗-VLA-1抗体进行治疗。

在一些实施方案中，患者将不满足需要至少15%、20%、30%或更多的压痛和肿胀关节计数的改善，以及其余5个评分量度(疼痛的患者评价(基于范围为1至100的直观模拟标度尺，评分越高表示疼痛越大)；急性相反应物，例如CRP的水平；HAQ评分；以及患者和的医生整体评价)中的3个的至少15%、20%、30%或更多的改善的预定标准。以0至100的等级评价患者和医生整体评价，数字越高表示疾病越严重。

在一些实施方案中，通过测定每日液体或软大便的次数(例如在7天的时期中)；测定腹痛的程度或腹部包块的尺寸或存在；测定血细胞比容水平；监测与标准体重的偏离；或测定肛裂、瘘管或脓肿的存在和尺寸来监测患者在利用一线或二线疗法治疗后IBD症状的改善。在一个实施方案中，测定症状并且将其用于活动性评级，例如CDAI。如果在施用一线或二线疗法后，CDAI评分未减少至少50、至少60、至少70或至少80或更多，则患者可接受负面评价，或被确定为具有对疗法的不充分反应。在一些实施方案中，在1或2周，或1或2个月或更长时间过程中监测患者的CDAI评分。在一些实施方案中，患者将不满足需要至少50、至少60、至少70或至少80的CDAI评分的减少的预定标准，从而患者将被选择来利用抗-VLA-1抗体进行治疗。

在一些实施方案中，以对利用一线或二线疗法进行治疗的反应监测患者对IBDQ的评分。例如，如果在施用一线或二线疗法后IBDQ评分不能增加至少15点、至少16点、至少17点、至少18点或更多点，则患者可接受负面评价，或被确定为具有对疗法的不充分反应。在一些实施方案中，在1或2周，或1或2个月或更长时间的过程中监测患者的IBDQ评分。在一些实施方案中，患者将不满足需要至少15点、至少16点、至少17点或至少18点或更多点的IBDQ评分的增加的预定标准，从而患者将被选择来利用抗-VLA-1抗体进行治疗。

关于患者对一线疗法的反应的信息可直接或间接获取。例如，关于患者的反应的信息可由医生或直接检查在施用一线疗法后患者的症状改善的照护者进行评价。或者，可以例如从获自医院或诊所、或临床医生或照护者或数据库例如在线数据库的记录的患者记录间接获取信息。

如本文中所用，术语“获取(acquire)”或“获取(acquiring)”是指通过“直接获取”或“间接获取”物理实体或值而获得物理实体或值例如数值的拥有。“直接获取”意指进行获得物理实体或值的过程(例如，检查患者或患者样品)。“间接获取”是指接受来自另一方或来源，例如来自直接获得物理实体或值的第三方实验室的物理实体或值。

直接获取物理实体包括进行包括实体物质例如起始材料的物理变化的过程。示例性变化包括从两个或更多个起始材料产生物理实体，剪切或片段化物质，分离或纯化物质，将两个或更多个分开的实体组合成混合物，进行包括断裂或形成共价或非共价键的化学反应。

直接获取值包括进行包括样品或另一种物质的物理变化的过程，例如通过进行包括物质例如样品、分析物或试剂的物理变化的分析过程(在本文中有时称为“物理分析”)，进行分析方法，例如包括下列的一项或多项的方法：将物质例如分析物或其片段或其它衍生物与另一种物质分离或纯化所述物质；将分析物或其片段或其它衍生物与另一种物质例如缓冲剂、溶剂或反应物组合；或改变分析物或其片段或其它衍生物的结构，例如通过断裂或形成分析物的第一与第二原子之间的共价或非共价键；或通过改变试剂或其片段或其它衍生物的结构，例如通过断裂或形成试剂的第一与第二原子之间的共价或非共价键。

“分析”样品包括进行牵涉样品或另一种物质例如起始材料的物理变化的过程。示例性变体包括从两种或更多种起始材料产生物理实体，剪切或片段化物质，分离或纯化物质，将两种或更多种分开的实体组合成混合物，进行包括断裂或形成共价或非共价键的化学反应。分析样品可包括进行包括物质例如样品、分析物或试剂的物理变化的分析过程(在本文中有时称为“物理分析”)，进行分析方法，例如包括下列的一项或多项的方法：将物质例如分析物或其片段或其它衍生物与另一种物质分离或纯化所述物质；将分析物或其片段或其它衍生物与另一种物质例如缓冲剂、溶剂或反应物组合；或改变分析物或其片段或其它衍生物的结构，例如通过断裂或形成分析物的第一与第二原子之间的共价或非共价键；或通过改变试剂或其片段或其它衍生物的结构，例如通过断裂或形成试剂的第一与第二原子之间的共价或非共价键。

在一个实施方案中，确定患者是否具有关节炎症状的改善，包括如下的一项或多项：评价患者，或分析来自患者的样品，索取患者的评价或样品的分析，索取来自患者的评价或样品分析的结果，或接受来自患者的评价或样品分析的结果。一般而言，分析可包括进行基本方法(例如，分析患者样品的VLA-1+细胞或单核细胞的数目)或接受来自已进行了基本方法的另一个患者的数据的一项或两项。

抗-VLA-1抗体。针对VLA-1，例如针对VLA-1的α亚基、β亚基或两种亚基的抗体适合用于本文中描述的方法。在一个实施方案中，抗-VLA-1抗体结合VLA-1的α1亚基。在例如美国专利No.7,358,054中公开了示例性抗-VLA-1抗体，将所述专利通过引用整体并入本文。用于本文中描述的方法的适当抗体包括：具有1、2或3个轻链(LC)CDR和1、2或3个重链(HC)CDR的抗体，并且在一个实施方案中所有6个CDR具有美国专利No.7,358,054中公开的抗体的序列；其中CDR的每一个与美国专利No.7,358,054中公开的抗体的CDR相异不超过1或2个氨基酸(变体氨基酸，当用于该上下文中时，对于非保守变化可以是独立地或作为基团是保守的)的抗体。

在一个实施方案中，用于本文中描述的方法的抗-VLA-1抗体包括来自美国专利No.7,358,054中公开的抗体的LC可变区、HC可变区或两者的抗体；与美国专利No.7,358,054中公开的抗体结合交叠的表位或与所述抗体竞争结合的抗体；具有LC可变区、HC可变区或两者的抗体，所述可变区与美国专利No.7,358,054中公开的抗体的对应部分具有至少90、95或99%的氨基酸同源性；具有与美国专利No.7,358,054中公开的抗体的对应部分相异不超过10、5或1个氨基酸残基的LC可变区、与所述对应部分相异不超过10、5或1个氨基酸残基的HC可变区或两者的抗体。

在一个实施方案中，用于本文中描述的方法的抗-VLA-1抗体包括轻链可变区和重链可变区，所述轻链可变区与SEQ ID NO:1(图1A)的序列相同或相异不超过10、5、3或1个氨基酸，所述重链可变区与SEQ ID NO:2(图1B)的序列相同或相异不超过10、5、3或1个氨基酸。

在一个实施方案中，抗-VLA-1抗体具有轻链序列和重链序列，所述轻链序列与SEQ ID NO:3(图2A)的序列相同或相异不超过10、5、3或1个氨基酸，所述重链可变区与SEQ ID NO:4(图2B)的序列相同或相异不超过10、5、3或1个氨基酸。

如本文中所讨论的，用于本文中描述的方法的示例性抗-VLA-1抗体包括美国专利No.7,358,054中描述的抗体，将所述专利通过引用整体并入本文。美国专利No.7,358,054中描述的抗体包括例如单克隆抗体AJH10(ATCCPTA-3580；于2001年8月2日保藏在美国典型培养物保藏中心,10801University Boulevard,Manassas,VA20110-2209)、hAQC2(ATCC PTA-3275；于2001年4月18日保藏)、haAQC2(ATCC PTA-3274；于2001年4月18日保藏)、hsAQC2(ATCC PTA-3356；于2001年5月4日保藏)和mAQC2(ATCCPTA-3273)。在布达佩斯协议下保藏所有此类抗体。

在一个实施方案中，用于本文中描述的方法的抗-VLA-1抗体包括包含SEQ ID NO:1(图1A)的序列的轻链多肽和包含SEQ ID NO:2(图1B)的序列的重链多肽。

在一个实施方案中，抗-VLA-1抗体具有包含SEQ ID NO:3(图2A)的序列的轻链序列和包含SEQ ID NO:4(图2B)的序列的重链序列。其它抗-VLA-1抗体包括例如美国专利No.5,391,481和5,788,966中描述的单克隆抗体1B3(ATCC HB-10536)和Ha31/8。

在一个实施方案中，抗-VLA-1抗体通过例如物理阻断相互作用，减小VLA-1对于其对应物(counterpart)的亲和力，破坏VLA-1复合物或使所述复合物去稳定，隔离VLA-1或将VLA-1靶向降解来抑制VLA-1与VLA-1配体例如胶原之间的相互作用。在一个实施方案中，抗体可以在参与VLA-1/配体结合界面的一个或多个氨基酸残基上结合VLA-1。此类氨基酸残基可通过例如丙氨酸扫描来鉴定。在另一个实施方案中，抗体可结合不参与VLA-1/配体结合的残基。例如，抗体可改变VLA-1的构象，从而减少结合亲和力，或抗体可在空间上阻碍VLA-1/配体结合。在一个实施方案中，抗体可减少VLA-1-介导的事件或活性的激活。

联合疗法。可替代关节炎的其它疗法，或除了所述疗法外，施用用于关节炎治疗的抗-VLA抗体。

在一个实施方案中，当患者对例如DMARD、TNF-α抑制剂、JAK(Janus激酶)抑制剂(例如，JAK1、JAK2或JAK3抑制剂)、SYK(脾酪氨酸激酶)抑制剂、IL-6抑制剂、IL-17抑制剂、IL-12/IL-23抑制剂、VLA-2抑制剂、MAd-CAM-1抑制剂、CD20抑制剂或另一种生物抗风湿病疗法，例如阿巴他塞的施用不反应或停止对其的反应或停止所述反应的改善时，施用抗-VLA-1抗体。示例性DMARD包括甲氨蝶呤、来氟米特、柳氮磺胺吡啶、羟氯喹、金盐和青霉素。示例性TNF-α抑制剂包括英夫利昔单抗、阿达木单抗、培化舍珠单抗、戈利木单抗和依那西普。示例性VLA-2抑制剂是抗-VLA-2抗体GBR500，示例性MAdCAM-1抑制剂是抗-MAd-CAM-1抗体维多珠单抗，示例性CD20抑制剂是抗-CD20抗体利妥昔单抗。

患者可接受DMARD、抗-TNF-α疗法或本文中描述的另一种治疗剂，随后在接受利用抗-VLA-1抗体的治疗之前患者可停止接受第一疗法。在一个实施方案中，当患者开始接受抗-VLA-1疗法时，患者继续接受第一治疗剂。例如，患者在施用抗-VLA-1抗体疗法后接受第一治疗剂的施用，或选择施用以便抗体和第一治疗剂的治疗水平在患者中得以维持。可使抗体和第一治疗剂在患者中维持至少1天、至少2天、至少5天、至少10天或更长时间。

在一个实施方案中，患者接受抗-TNF-α疗法和DMARD疗法，随后患者停止接受利用抗-TNF-α和DMARD疗法的任一种或两种的治疗，随后给患者施用抗-VLA-1抗体。

在一个实施方案中，患者接受或继续接受关节炎的其它治疗，同时接受利用抗-VLA-1抗体的治疗。例如，患者可接受热和冷治疗，或可将夹板或矫正装置用于支持和定位关节。关节炎患者还可经历水疗法、冰按摩或经皮肤神经刺激(TENS)。辣椒素乳膏还可涂覆于关节上的皮肤以减轻疼痛，患者可施用葡糖胺和软骨素。患者可施用醋氨酚，或NSAID(非类固醇类抗炎药)，例如阿司匹林、布洛芬或萘普生。患者(特别地患有自身免疫性关节炎的患者)还可接受皮质类固醇、COX-2(环氧化酶-2)抑制剂，例如塞来考昔或免疫抑制剂，例如硫唑嘌呤或环磷酰胺。患者还可进行手术来重建关节(关节成形术)或替换关节。患者可以进行锻炼方案，例如低强度有氧代谢活动以建立或维持耐力、针对灵活性的关节活动度恢复练习和针对肌紧张的强度训练。

抗体。如本文中所用，术语“抗体”是指这样的蛋白质，所述蛋白质包括至少一个免疫球蛋白可变区，例如提供免疫球蛋白可变结构域的氨基酸序列或免疫球蛋白可变结构域序列。例如，抗体可包括重(H)链可变区(在本文中缩写为VH)和轻链(L)链可变区(在本文中缩写为VL)。在另一个实例中，抗体包括两个重(H)链可变区和两个轻(L)链可变区。术语“抗体”包括抗体的抗原结合片段，包括单链抗体、Fab片段、F(ab′)2片段、Fd片段、Fv片段和dAb片段，以及IgA、IgG型的完全抗体，例如完整和/或完全长度免疫球蛋白(例如，IgGl、IgG2、IgG3、IgG4)、IgE、IgD和IgM及其任何亚型。免疫球蛋白的轻链可具有κ或λ型。在一个实施方案中，抗体被糖基化。抗体对于抗体依赖性细胞毒性和/或补体介导的细胞毒性可以是有功能的，或对于此类活性的一种或两种可以是无功能的。

还可将VH和VL区域细分为高变区(称为“互补决定区”(“CDR”))，其间散布有更保守的区域(称为“构架区”(FR))。FR和CDR的界限已被精确地界定(参见，Kabat,等人,Sequences of Proteins of Immunological Interest,第5版，U.S.Department of Health and Human Services,NIH Publication No.91-3242,1991；和Chothia,等人,J.MoI.Biol.196:901-917,1987)。在本文中使用Kabat的定义。每一个VH和VL通常由以下列顺序从氨基末端至羧基末端排列的3个CDR和4个FR组成：FRl、CDRl、FR2、CDR2、FR3、CDR3、FR4。“免疫球蛋白结构域”是指来自免疫球蛋白分子的可变或恒定结构域的结构域。免疫球蛋白结构域通常包含2个由约7个β-链形成的β-折叠，和保守的二硫键(参见，例如，Williams and Barclay,Ann.Rev Immunol.6:381-405,1988)。“免疫球蛋白可变结构域序列”是指可形成足以将CDR序列置于适合于抗原结合的构象中的结构的氨基酸序列。例如，所述序列可包括天然存在的可变结构域的全部或部分氨基酸序列。例如，序列可省略1、2或更多个N-或C-末端氨基酸、内部氨基酸，可包括一个或多个插入或额外末端氨基酸，或可包括其它改变。在一个实施方案中，包括免疫球蛋白可变结构域序列的多肽可与另一个免疫球蛋白可变结构域序列缔合以形成靶结合结构(或“抗原结合位点”)，例如与VLA-1相互作用的结构。

抗体的VH或VL链还可包括重链或轻链恒定区的全部或部分，从而分别形成免疫球蛋白重链或轻链。在一个实施方案中，抗体是两条免疫球蛋白重链和两条免疫球蛋白轻链的四聚体。免疫球蛋白重链与轻链可通过二硫键连接。重链恒定区通常包括3个恒定结构域CHl、CH2和CH3。轻链恒定区通常包括CL结构域。重链和轻链的可变区包含与抗原相互作用的结合结构域。抗体的恒定区通常介导抗体与宿主组织或因子(包括免疫系统的各种细胞，例如效应细胞和经典补体系统的第一补体(CIq))的结合。

抗体的一个或多个区域可以是人的，有效地人的或人源化的。例如，可变区的一个或多个可以是人的或有效地人的。例如，在人源化抗体中，通常CDR的一个或多个例如HC CDRl、HC CDR2、HC CDR3、LC CDRl、LC CDR2和LC CDR3是非人的，例如啮齿类动物，例如小鼠的，并且抗体的其它部分是人的。通常，构架区的一个或多个可以是人的，例如HC或LC的FRl、FR2、FR3和FR4。在一个实施方案中，全部构架区都是人的，例如来源于人体细胞，例如产生免疫球蛋白的造血细胞或非造血细胞。在一个实施方案中，人序列是种系序列，从而由种系核酸编码。恒定区的一个或多个可以是人的，有效地人的或人源化的。在另一个实施方案中，至少70、75、80、85、90、92、95或98%的构架区(例如，总体地FRl、FR2和FR3，或总体地FRl、FR2、FR3和FR4)或完整抗体可以是人的，有效地人的，或人源化的。例如，FRl、FR2和FR3总体地可与由人种系区段编码的人序列具有至少70、75、80、85、90、92、95、98或99%的同一性或完全相相同。“有效地人的”免疫球蛋白可变区是这样的免疫球蛋白可变区，其包括充足数量的人构架氨基酸位置，以便免疫球蛋白可变区不引发正常人的免疫原性反应。“有效地人的”抗体是这样的抗体，其包括充足数量的人氨基酸位置，以便抗体不引发正常人的免疫原性反应。

“人源化的”免疫球蛋白可变区是这样的免疫球蛋白可变区，所述可变区经修饰以便修饰形式在人中引发比非修饰形式更小的免疫反应，例如，经修饰以包括充足数量的人构架氨基酸位置以便免疫球蛋白可变区不引发正常人的免疫原性反应。“人源化的”免疫球蛋白的描述包括例如美国专利No.6,407,213和5,693,762。在一些情况下，人源化免疫球蛋白可在一个或多个构架氨基酸位置上包含非人氨基酸。抗-VLA-1抗体还可以是嵌合抗体，从而通过工程化同源抗体例如鼠、大鼠或兔抗体来产生。例如，同源抗体可通过重组DNA技术来改变，以便重链和/或轻链的铰链区和/或恒定区的部分或全部被来自另一物种例如人的抗体的对应组分替代。一般而言，工程抗体的可变结构域保持与同源抗体的可变结构域相同或大体上相同。这样的工程抗体称为嵌合抗体，并且当给铰链和/或恒定区所源自的物种的个体施用时免疫原性小于同源抗体。例如，具人铰链和/或恒定区和来自小鼠抗体的构架区的嵌合抗体在人中的抗原性小于FR区所源自的小鼠抗体。产生嵌合抗体的方法在本领域是公知的。优选恒定区包括但不限于来源于IgGl和IgG4的恒定区。

抗体产生。可通过多种方法产生结合VLA-1的抗体，包括动物的免疫和体外方法，例如噬菌体展示。可将VLA-1的全部或部分用作免疫原或用于选择的靶。例如，VLA-1或其片段，例如VLA-1的αl亚基的全部或部分，例如αl-I结构域可用作免疫原。在一个实施方案中，被免疫的动物包含具有天然的、人的或部分人的免疫球蛋白基因座的免疫球蛋白产生性细胞。在一个实施方案中，非人动物包括至少部分人免疫球蛋白基因。例如，可能利用人Ig基因座的大片段工程化在小鼠抗体产生中具有缺陷的小鼠株系。使用杂交瘤技术，可产生和选择来源于具有期望的特异性的基因的抗原特异性单克隆抗体。参见，例如，XENOMOUSE^TM,Green等人,Nat.Gen.7:13-21,1994；U.S.2003-0070185；美国专利No.5,789,650；和WO96/34096。

还可在啮齿类动物中产生针对VLA-1的非人抗体。例如通过EP 239400(Winter等人)；美国专利No.6,602,503；5,693,761和6,407,213中描述的方法人源化非人抗体。或者可使非人抗体去免疫化，或者修饰其以使它们成为有效地人的。

EP 239 400描述了通过用来自另一物种的互补决定区置换(在给定的可变区内)一个物种的它们的互补决定区(CDR)来改变抗体。通常地，通过使用重组核酸技术将非人抗体，例如小鼠抗体的CDR置换到人抗体的对应区域中，以产生编码期望的置换抗体的序列。可添加期望的同种型的人恒定区基因区段(通常地CH的γI和CL的κ)，可使人源化重链和轻链基因在哺乳动物细胞中共表达以产生可溶性人源化抗体。还可使用用于人源化抗体的其它方法。例如，其它方法可导致抗体、在三维上靠近结合决定簇的构架位置和免疫原性肽序列的三维结构。参见，例如，WO 90/07861；美国专利No.5,693,762；5,693,761；5,585,089和5,530,101；Tempest等人,Biotechnology9:266-271,1991以及美国专利No.6,407,213。

有时，CDR至人构架的直接转移导致所得抗体的抗原结合亲和力的丧失。这是因为在一些同源抗体中，构架区内的某些氨基酸与CDR相互作用，从而影响抗体的总体抗原结合亲和力。在这类情况下，至关重要的是将“回复突变”引入受体抗体的构架区中，以保持同源抗体的抗原结合活性。产生回复突变的一般方法在本领域是已知的。例如，Queen等人,Proc.Natl.Acad.Sci.USA 86:10029-10033,1989；Co等人,Proc.Nat.Acad.Sci.USA88:2869-2873,1991；和WO 90/07861(Protein Design Labs Inc.)描述包括两个关键步骤的方法。首先，通过计算机分析与同源鼠抗体的V区域构架的最佳蛋白质序列同源性来选择人V构架区。随后，利用计算机对鼠V区域的三级结构建模，以使可能与鼠CDR相互作用的构架氨基酸残基可视化，随后将这些鼠氨基酸残基叠加在同源人构架上。在该两步法下，存在设计人源化抗体的几个标准。第一标准是将来自通常与非人供体免疫球蛋白同源的特定人免疫球蛋白的构架用作人受体，或使用来自许多人抗体的共有构架。第二标准是如果人受体残基是不常见的并且供体残基对于特定构架残基上的人序列是典型的，则使用供体氨基酸而非受体残基。第三标准是使用供体构架氨基酸而非紧邻CDR的位置上的受体。

还可使用不同方法，例如Tempest,Biotechnology 9:266-271,1991中描述的方法。在该方法下，可将来源于NEWM和REI的重链及轻链的V区域构架分别用于CDR移植而无需小鼠残基的激进引入。使用该方法的有利方面是可从X射线晶体学已知NEWM和REI可变区的三维结构，从而可容易地对CDR与V区域构架残基之间的特异性相互作用进行建模。

可以如Boerner等人,J.Immunol.147:86-95,1991所述，例如使用体外引发的人脾细胞产生结合VLA-1的完全人单克隆抗体。还可如由Persson等人,Proc.Nat.Acad.Sci.USA 88:2432-2436,1991或Huang和Stollar,J.Immunol.Methods 141:227-236,1991；以及美国专利No.5,798,230所述，通过库克隆(repertoire cloning)来制备它们。还可使用标准噬菌体技术(参见，例如，Hoogenboom等人,Immunotechnology 4:1-20,1998；Hoogenboom等人,Immunol Today 2:371-8,2000；和U.S.2003-0232333)将大型非免疫人噬菌体展示文库用于分离可被开发为人治疗剂的高亲和力抗体。用于产生完全人抗体的其它方法包括使用非人动物，所述非人动物具有灭活的内源Ig基因座并且对于未重排的人抗体重链和轻链基因是转基因的。可利用αl-I结构域或其期望的抗原性片段免疫此类转基因动物，随后从来源于其的B细胞制备杂交瘤。此类方法描述于例如各种GenPharm/Medarex(Palo Alto,CA)出版物/关于包含人Ig微型基因座的转基因小鼠的专利，例如美国专利5,789,650；各种Abgenix(Fremont,CA)出版物/关于XENOMICE的专利(例如，美国专利6,075,181；6,150,584和6,162,963；Green等人,Nature Genetics7:13-21,1994；和Mendez等人,Nat.Genet.15:146-56,1997)；以及各种Kirin(Japan)出版物/关于“transomic”小鼠的专利(例如，EP843961，和Tomizuka等人,NatureGenetics16:133-1443,1997)中。

可在原核和真核细胞中产生本文中描述的抗体。在一个实施方案中，在酵母细胞例如毕赤酵母属(Pichia)(参见，例如，Powers等人,J.Immunol.Methods 251:123-35,2001)、汉逊酵母属(Hanseula)或酵母菌属(Saccharomyces)的细胞中表达抗体(例如，scFv)。抗体，特别地可在哺乳动物中产生全长抗体，例如全长IgG抗体。用于重组表达的示例性哺乳动物宿主细胞包括与DHFR可选择标记一起使用的中国仓鼠卵巢(CHO细胞)(包括Urlaub和Chasin,Proc.Natl.Acad.Sci.USA 77:4216-4220,1980中描述的dhfr^-CHO细胞)，例如Kaufman和Sharp,Mol.Biol.159:601-621(1982)中描述的；淋巴细胞细胞系，例如NSO骨髓瘤细胞和SP2细胞、COS细胞、K562以及来自转基因动物例如转基因哺乳动物的细胞。例如，细胞可以是乳房上皮细胞。

除了编码免疫球蛋白结构域的核酸序列外，重组表达载体可具有额外的核酸序列例如调控载体在宿主细胞中复制的序列(例如，复制起始点)和可选择标记基因。可选择标记基因帮助选择已将载体引入其中的宿主细胞(参见，例如，美国专利No.4,399,216；4,634,665和5,179,017)。示例性可选择标记基因包括二氢叶酸还原酶(DHFR)基因(例如以用于dhfr宿主细胞的甲氨蝶呤选择/扩增)和neo基因(例如用于G418选择)。

在用于抗体例如全长抗体或其抗原结合部分的重组表达的示例性系统中，通过磷酸钙介导的转染将编码抗体重链和抗体轻链的重组表达载体引入dhfr^-CHO细胞。在重组表达载体内，抗体重链和轻链基因各自有效地连接于增强子/启动子调控元件，例如来源于SV40、CMV、腺病毒等的此类调控元件，例如CMV增强子/AdMLP启动子调控元件或SV40增强子/AdMLP启动子调控元件，以驱动基因的高水平转录。重组表达载体还具有DHFR基因，其允许通过使用甲氨蝶呤选择/扩增来选择已用载体转染的CHO细胞。培养选择的转化宿主细胞以使其表达抗体重链和轻链，并且从培养基回收完整抗体。将标准分子生物学技术用于制备重组表达载体、转染宿主细胞、选择转化体、培养宿主细胞以及从培养基回收抗体。例如，可利用蛋白A或蛋白G通过亲和层析分离一些抗体。

抗体还可包括修饰，例如改变Fc功能，例如减弱或消除与Fc受体或与CIq或与两者的相互作用的修饰。例如，可在一个或多个残基上，例如残基234和237(根据美国专利No.5,648,260中的编号)的一个或多个上对人IgGl恒定区进行突变。其它示例性修饰包括美国专利No.5,648,260中描述的那些修饰。

对于一些包括Fc结构域的抗体，抗体产生系统被设计来合成其中Fc区域被糖基化的抗体或其它蛋白质。例如，在CH2结构域中的天冬酰胺297上糖基化IgG分子的Fc结构域。Fc结构域还可包括其它真核翻译后修饰。在其它情况下，以未被糖化的形式产生蛋白质。还可通过转基因动物产生抗体。例如，美国专利No.5,849,992描述了用于在转基因哺乳动物的乳腺中表达抗体的方法。构建转基因，所述转基因包括奶特异性启动子(milk-specificpromoter)和编码目标抗体例如本文中描述的抗体和用于分泌的信号序列的核酸序列。由此类转基因哺乳动物的雌性动物产生的奶包括其中分泌的目标蛋白质，例如抗体。可从奶中纯化蛋白质，可将所述蛋白质用于一些应用，直接使用。

抗-VLA-1抗体还可包括实现期望的功能的其它部分。例如，抗体可包括毒素部分，例如破伤风类毒素或蓖麻毒素或放射性核素，例如¹¹¹In或⁹⁰Y，例如用以杀伤被抗体靶向的细胞(参见，例如，美国专利No.6,307,026)。抗体可包括部分例如生物素、荧光部分、放射性部分、组氨酸标记等，以容易地进行分离或检测。抗体还可包括可延长它们的血清半衰期的部分，例如聚乙二醇(PEG)部分。

药物组合物。可将抗-VLA-1抗体配制为药物组合物，例如以给受试者施用以治疗关节炎，例如类风湿性关节炎。通常地，药物组合物包括药学上可接受的载体。如本文中所用，“药学上可接受的载体”包括生理上相容的任何和所有溶剂、分散介质、包衣、抗菌剂和抗真菌剂、等渗剂和吸收延迟剂等。组合物可包括药学上可接受的盐，例如酸加成盐或碱加盐(参见，例如，Berge,等人,J.Pharm.Sci.66:1-19,1977)。可按照标准方法配制VLA-1拮抗剂。药物配制是良好建立的技术，并且进一步描述于例如Gennaro(编),Remington:The Science and Practice of Pharmacy,第20版,Lippincott,Williams&Wilkins(2000)(ISBN:0683306472)；Ansel等人,Pharmaceutical Dosage Forms and Drug Delivery Systems,第7版,Lippincott Williams&Wilkins Publishers(1999)(ISBN:0683305727)；和Kibbe(编),Handbook of Pharmaceutical Excipients American Pharmaceutical Association,第3版.(2000)(ISBN:091733096X)中。

在一个实施方案中，可利用赋形剂材料例如氯化钠、磷酸氢二钠七水合物、磷酸二氢钠和稳定剂配制抗-VLA-1抗体。可以以适当的浓度在例如缓冲溶液中提供抗体，并且可将其在2℃至8℃下贮存。药物组合物可以以多种形式存在。此类形式包括例如液体、半固体和固体剂型，例如为例如可注射或可输注的液体溶液；分散体或悬浮剂；片剂；丸剂；粉剂；脂质体和栓剂。优选形式可取决于期望的施用模式和治疗应用。通常地，本文中描述的试剂的组合物以可注射或可输注溶液的形式存在。

可以口服或胃肠外(例如通过静脉内、皮下、腹膜内或肌内注射)施用本文中描述的此类抗-VLA-1抗体组合物。

如本文中所用，短语“胃肠外施用(parenteral administration)”和“胃肠外施用的(administered parenterally)”意指除肠内和局部施用(通常通过注射)外的施用模式，包括但不限于静脉内、肌内、动脉内、硬膜内、囊内、眶内、心内、真皮内、腹膜内、经气管、皮下、表皮下、关节内、囊下、蛛网膜下、脊柱内、硬膜外、脑内、颅内、颈动脉内和胸骨内注射和输注。

可将组合物配制为溶液、微乳剂、分散体、脂质体或适合于以高浓度稳定贮存的其它有序列结构。可通过将本文中描述的试剂以需要的量与上文中列举的成分的一种或组合(根据需要)一起掺入适当的溶剂中，随后进行过滤灭菌来制备无菌注射液。一般地，通过将本文中描述的试剂掺入包含基本分散介质和来自上文中列举的需要的其它成分的无菌媒介物来制备分散体。在用于制备无菌注射液的无菌粉剂的情况下，优选制备方法是真空干燥和冷冻干燥，所述冷冻干燥产生本文中描述的试剂和来自其先前无菌过滤的溶液的任何另外的期望成分的粉剂。可以例如通过使用包衣例如卵磷脂，在分散体的情况下通过维持需要的粒度以及通过使用表面活性剂来维持溶液的适当流动性。可通过将组合物包含在延迟吸收的试剂例如单硬脂酸盐和明胶中来产生可注射组合物的延迟吸收。

在某些实施方案中，可利用保护化合物避免快速释放的载体例如控释制剂(包括埋植剂和微型胶囊递送系统)来制备VLA-1拮抗剂。可使用生物可降解的生物相容性聚合物，例如乙烯醋酸乙烯酯、聚酐、聚乙醇酸、胶原、多正酯和聚乳酸。用于制备此类制剂的许多方法已获得专利或通常是已知的。参见，例如，J.R.Robinson,编,Sustained and Controlled Release Drug Delivery Systems,Marcel Dekker,Inc.,New York,1978。

可以例如用使其在循环中例如血液、血清或其它组织中的稳定性和/或保留时间改善达例如至少1.5倍、至少2倍、至少5倍、至少10倍或至少50倍的部分修饰抗-VLA-1抗体。可以例如通过使用标记的抗体形式评价修饰抗体以估计其是否可到达受损位置，例如关节炎关节。

例如，可将抗-VLA-1抗体与聚合物例如大体上无抗原性的聚合物例如环氧烷烃(polyalkylene oxide)或聚氧乙烯缔合。适当的聚合物在重量上变化很大。可使用具有范围在200至35,000道尔顿内(或范围在约1,000道尔顿至15,000道尔顿内，或范围内在约2,000道尔顿至12,500道尔顿内)的数均分子量的聚合物。

在一个实施方案中，可将抗-VLA-1抗体缀合至水溶性聚合物，例如亲水性聚乙烯聚合物，例如聚乙烯醇或聚乙烯吡咯烷酮。此类聚合物的非限定性目录包括环氧烷烃(polyalkylene oxide)共聚物，例如聚乙二醇(PEG)或聚丙二醇、聚氧乙烯化多元醇、其共聚物及其嵌段共聚物，只要嵌段共聚物的水溶性得以维持即可。其它有用的聚合物包括聚氧化烯(polyoxyalkylene)，例如聚氧乙烯、聚氧丙烯以及聚氧乙烯与聚氧丙烯的嵌段共聚物，例如普流尼克、甲基丙烯酸酯、卡波姆和分枝或未分枝多糖。

当将抗-VLA-1抗体与第二试剂例如抗炎剂或DMARD组合使用时，可单独地或一起配制两种试剂。例如，可将各自的药物组合物混合(例如在即将施用时)，一起施用或可单独地施用。可单独施用各自的药物组合物，在相同或不同的时间施用。

施用。可以通过多种方法给受试者例如人受试者施用本发明中表征的抗-VLA-1抗体。对于许多应用，施用途径是下列途径之一：静脉内注射或输注(IV)、皮下注射(SC)、腹膜内施用(IP)或肌内注射。在一些情况下，施用可以是直接进入CNS，例如通过硬膜内、脑室内(ICV)、脑内或颅内施用。可以以固定的剂量或以例如mg/kg的剂量施用拮抗剂。

还可选择剂量来减少或避免针对拮抗剂的抗体的产生。

还可定制用于个别案例的阻断剂的施用途径和/或模式。可调整给药方案以提供期望的反应，例如治疗反应或组合治疗作用。

通常地，可使用抗-VLA-1抗体(和任选地第二试剂)的剂量的任意组合(单独的或共配制的)，从而以生物可用量给受试者提供试剂。例如，可施用在0.025mg/kg至100mg/kg、0.05mg/kg至50mg/kg、0.1mg/kg至30mg/kg、0.1mg/kg至5mg/kg或0.3mg/kg至3mg/kg的范围内的剂量。其它适当的剂量水平包括例如0.001mg/kg至100mg/kg体重/施用、0.1mg/kg至50mg/kg体重/施用、0.1mg/kg体重至20mg/kg体重，例如0.1mg/kg体重至10mg/kg体重/施用。在其它实施方案中，以0.3mg/kg至1mg/kg或5至12.5mg/kg/施用的剂量施用抗体。

在另一个方面，本发明表征了治疗受试者的关节炎的方法，包括按照选自下列的方案给受试者施用抗-VLA-1抗体(例如本文中描述的抗-VLA-1抗体)：0.1mg/kg至1mg/kg；0.2mg/kg至1mg/kg；0.3mg/kg至1mg/kg；0.4mg/kg至1mg/kg；0.2mg/kg至4mg/kg以及0.3mg/kg至5mg/kg。

在另一个方面，本发明表征了治疗受试者的关节炎的方法，包括按照选自下列的方案给受试者施用抗-VLA-1抗体(例如本文中描述的抗-VLA-1抗体)：5mg/kg至10mg/kg；6mg/kg至9mg/kg；7mg/kg至8mg/kg；5mg/kg至9mg/kg；5mg/kg至8mg/kg；5mg/kg至7mg/kg；6mg/kg至10mg/kg；7mg/kg至10mg/kg以及8mg/kg至10mg/kg。

在另一个方面，本发明表征了治疗受试者的关节炎的方法，包括按照选自下列的方案给受试者施用抗-VLA-1抗体(例如本文中描述的抗-VLA-1抗体)：0.03mg/kg至少于0.1mg/kg；0.03mg/kg至0.9mg/kg；0.03mg/kg至0.08mg/kg；0.03mg/kg至0.05mg/kg；0.04mg/kg至0.08mg/kg；0.04mg/kg至0.07mg/kg或0.05mg/kg至少于0.1mg/kg。

在另一个方面，本发明表征了治疗受试者的关节炎的方法，包括按照选自下列的方案给受试者施用抗-VLA-1抗体(例如本文中描述的抗-VLA-1抗体)：大于1.0mg/kg至少于5.0mg/kg；大于1.0mg/kg至2.0mg/kg；大于1.0mg/kg至3.0mg/kg；大于1.0mg/kg至4.0mg/kg；2.0mg/kg至少于5mg/kg；3.0mg/kg至少于5mg/kg；4.0mg/kg至少于5mg/kg；2mg/kg至3mg/kg；3mg/kg至4mg/kg；1.5mg/kg至2.5mg/kg；2.5mg/kg至3.5mg/kg或3.5mg/kg/日至4.5mg/kg。

在另一个方面，本发明表征了治疗受试者的关节炎的方法，包括按照选自下列的方案给受试者施用抗-VLA-1抗体(例如本文中描述的抗-VLA-1抗体)：0.03mg/kg/施用；0.1mg/kg/施用；0.2mg/kg/施用；0.3mg/kg/施用；0.5mg/kg/施用；0.6mg/kg/施用；0.8mg/kg/施用；1mg/kg/施用；3mg/kg/施用；5mg/kg/施用；7mg/kg/施用；8mg/kg/施用；10mg/kg/施用和12.5mg/kg/施用。

在某些实施方案中，以有效地提供至少1μg/ml的血浆水平的抗体的量施用具有抗-VLA-1抗体的组合物。剂量可以是例如每次施用或每日的量。

在一些实施方案中，每3天至10天一次，例如每3天、4天、5天或6天一次；或每8至16天一次，或每12至30天一次施用抗-VLA-1抗体。在一些实施方案中，每40天、每45天、每50天、每55天、每60天、每70天、每80天、每90天、每100天或每120天施用抗-VLA-1抗体。

在一些实施方案中，在休药期或停药期之前，患者接受至少2次、至少3次、至少4次、至少5次或至少6次施用。

施用可以以单次施用方式进行，或施用可以以间隔方式(例如治疗方案的部分)进行。例如，可每天1次或2次或3次，或每周1次或2次或3次，每2周或每3周或每4周1次，或每月1次或2次或3次施用抗-VLA-1抗体。在一个实施方案中，每1至14天施用抗体。

在一些实施方案中，每周一次或两次，或每月一次或两次皮下或肌内或静脉内施用抗-VLA-1抗体。在一个实施方案中，每周二次皮下施用抗-VLA-1抗体。

在一些实施方案中，开始时提供负荷剂量(loading dose)，随后提供一系列维持剂量。用于负荷剂量的抗体浓度和施用途径可以与维持剂量的抗体浓度或施用途径相同或不同。例如，可静脉内施用负荷剂量，可皮下提供维持剂量。

如本文中所用，剂量单位形式或“固定剂量”是指适合作为用于待治疗的受试者的单一剂量的物理上分离的单位。每一个单位包含经计算产生与所需药物载体相关以及任选地与其它试剂相关的期望的治疗作用的预定量的活性化合物。

可给关节炎患者施用单个或多个剂量。在一个实施方案中，可通过连续输注施用抗-VLA-1抗体。治疗可持续数天、数周、数月或数年来治疗关节炎的症状，或阻止疾病进展。

药物组合物可包括药学有效量的抗-VLA-1抗体。可基于施用的抗体的作用、或抗体与第二试剂(如果使用第二试剂的话)的组合作用来确定此类有效量。抗体的治疗有效量还可根据因素例如患者的疾病状态、年龄、性别和体重以及化合物引发个体的期望反应(例如，至少一个病症参数的改善，例如患病关节的疼痛或肿胀的减轻)的能力而变化。治疗有效量也是其中组合物的任何毒性或有害作用超过治疗有益作用的量。

试剂盒。可在试剂盒中提供抗-VLA-1抗体。例如，试剂盒可包括(a)装有包含抗-VLA-1抗体的组合物的容器和任选地(b)信息材料。信息材料可以是与本文中描述的方法和/或抗体用于治疗益处的用途相关的说明性、指导性销售或其它材料。试剂盒可任选地包括用于治疗关节炎的第二试剂，例如DMARD或TNF-α抑制剂。例如，试剂盒包括装有包含抗-VLA-1抗体的组合物的第一容器和装有第二试剂的第二容器。

除了抗体以外，试剂盒中的组合物还可包括其它成分，例如溶剂或缓冲剂、稳定剂或防腐剂。可以以任何形式例如以液体、干燥或冷冻干燥的形式提供抗-VLA-1抗体，制剂通常是大体纯的和/或无菌的。当在液体溶液中提供试剂时，液体溶液通常是水溶液。当以干燥形式提供试剂时，通常通过添加适当的溶剂进行重构。可任选地在试剂盒中提供溶剂例如无菌水或缓冲液。

试剂盒可包括一个或多个用于包含试剂的组合物的容器。例如，试剂盒可包括用于组合物和信息材料的分开的容器、分配器或小室。在一个实例中，可将抗体组合物包含在瓶子、小瓶或注射器中，可将信息材料包含在塑料套或塑料袋中。在一些实施方案中，可将试剂盒的单独的组件包含在单个未分开的容器中。例如，将组合物装在已在其上以标签的形式粘贴了信息材料的瓶子、小瓶或注射器中。在一些实施方案中，试剂盒包括多个例如一堆单个的容器，每一个容器装有一个或多个抗-VLA-1抗体的单位剂型例如一个或多个本文中描述的剂型。容器任选地包括组合单位剂量，例如，以例如期望的比率包含抗-VLA-1抗体和第二试剂的单位剂型。例如，试剂盒可包括多个注射器、安瓿瓶、铝箔包、泡罩包装或医疗装置，每一个容器包含单个组合单位剂量。试剂盒的容器可以密封的；防水的，例如，对于湿气或蒸发的变化是不能渗透的；和/或不透光的。

试剂盒中提供的信息材料可包括关于抗体的产生、抗体的分子量、浓度、有效期、批次的信息或生产位点的信息等。信息材料还可涉及例如以适当的剂量、剂型或施用模式(例如本文中描述的剂量、剂型或施用模式)施用抗-VLA-1抗体来治疗患有关节炎的受试者的方法。信息可包括关于谁应当接受或不应当接受抗-VLA-1抗体作为关节炎的疗法的信息。例如，信息材料可规定患者在利用抗-VLA-1抗体疗法开始治疗之前，不接受DMARD或抗-TNF-α疗法，进行一定的时间，例如3周、4周、5周、1个月或更长时间。

试剂盒的信息材料在其形式上不受限制。可以以多种形式包括打印的文本、附图或照片(例如在标签或印刷传单上)提供信息材料。其它适当形式包括计算可读材料、录像或录音。信息材料可包括联系信息，例如实际地址、电子邮件地址、网站或电话号码，其中试剂盒的使用者可获得关于抗-VLA-1抗体和/或其在本文中描述的方法中的用途的实质性信息。

试剂盒任选地包括适合于组合物施用的装置，例如注射器或其它适当的递送装置。可提供用一种或多种治疗剂预装载的装置，或装置可以是空的，但适合于装载。

其它实施方案存在于权利要求中。

Claims

1.一种利用抗-VLA-1抗体治疗患者的方法，其中所述患者先前已施用了第一治疗剂，并且其中所述患者对所述第一治疗剂的反应是不充分的，所述方法包括：

给所述患者施用有效量的抗-VLA-1抗体，

从而治疗所述患者。

2.根据权利要求1所述的方法，其中所述反应被确定为不充分的，因为(i)所述患者未能改善关节炎症状；(ii)所述患者停止改善关节炎症状；或(iii)所述患者经历关节炎症状的恶化。

3.根据权利要求2所述的方法，其中改善包括肿胀关节计数或压痛关节计数的减少。

4.根据权利要求2所述的方法，其中关节炎症状的恶化包括肿胀关节计数或压痛关节计数的增加。

5.根据权利要求1所述的方法，其中所述患者患有关节炎。

6.根据权利要求1所述的方法，其中所述第一治疗剂是DMARD。

7.根据权利要求5所述的方法，其中所述DMARD是甲氨蝶呤、来氟米特、柳氮磺胺吡啶、羟氯喹或金盐。

8.根据权利要求1所述的方法，其中所述患者经诊断患有类风湿性关节炎至少6个月。

9.根据权利要求1所述的方法，其中在给所述患者施用抗-VLA-1抗体之前，停止施用所述第一治疗剂。

10.根据权利要求1所述的方法，其中在给所述患者施用抗-VLA-1抗体之前，停止施用所述第一治疗剂至少4周。

11.根据权利要求1所述的方法，其中在给所述患者施用抗-VLA-1抗体的同时，继续施用所述第一治疗剂。

12.根据权利要求11所述的方法，其中所述第一治疗剂是DMARD，并且所述DMARD是甲氨蝶呤，以25mg/周或更少的剂量施用；来氟米特，以20mg/日或更少的剂量施用；柳氮磺胺吡啶，以3000mg/日或更少的剂量施用；或羟氯喹，以400mg/日或更少的剂量施用。

13.根据权利要求11所述的方法，其中所述第一治疗剂是DMARD，并且在给所述患者施用抗-VLA-1抗体的同时，给所述患者施用不超过一种DMARD疗法。

14.根据权利要求11所述的方法，其中所述第一治疗剂是羟氯喹，并且在给所述患者施用抗-VLA-1抗体的同时，还给所述患者施用第二DMARD。

15.根据权利要求1所述的方法，其中所述第一治疗剂是TNF-α抑制剂。

16.根据权利要求1所述的方法，其中所述抗-VLA-1抗体包括含有SEQID NO:1的序列的轻链以及含有SEQ ID NO:2的序列的重链。

17.根据权利要求1所述的方法，其中所述抗-VLA-1抗体包括含有SEQID NO:3的序列的轻链以及含有SEQ ID NO:4的序列的重链。

18.根据权利要求1所述的方法，其中所述抗-VLA-1抗体结合与包含含有SEQ ID NO:1的序列的轻链以及含有SEQ ID NO:2的序列的重链的抗体所结合的表位相同的表位。

19.一种方法，所述方法选择患者作为接受利用抗-VLA-1抗体的治疗的候选者，其中所述患者先前已施用了第一治疗剂，所述方法包括：

a)对患者样品进行测试以评价患者对所述第一治疗剂的反应；和

b)如果所述患者对所述第一治疗剂的反应不能满足预定标准，则将患者选择为利用抗-VLA-1抗体进行治疗的候选者，并且如果所述反应确实满足该预定标准，则确定所述患者不是接受利用抗-VLA-1抗体的治疗的候选者。

20.一种方法，所述方法将患者选择或分类为接受利用抗-VLA-1抗体的治疗的候选者，其中所述患者先前已施用了第一治疗剂，所述方法包括：

a)评价患者对所述第一治疗剂的反应，其中所述评价包括分析来所述患者的样品；和

b)如果所述反应不能满足预定标准，则将患者选择或分类为利用抗-VLA-1抗体进行治疗的候选者，并且如果所述反应满足该预定标准，则将所述患者选择或分类为不是接受利用抗-VLA-1抗体的治疗的候选者，

从而将所述患者选择或分类为接受利用抗-VLA-1抗体的治疗的候选者。