CN103355229B - 珍珠蚌珍珠囊的免疫刺激生成方法 - Google Patents

Abstract

本发明提供一种珍珠蚌珍珠囊的免疫刺激生成方法，具体过程如下：①制作免疫原：采集同种蚌活体组织中的外套膜组织，加适量水混合，采用高速匀浆设备对该混合物进行匀浆，制作成组织浆液；向组织浆液中加入免疫佐剂，制成免疫原，在4℃下冷藏备用；②珍珠囊的生成：在生产珍珠所需要的蚌体操作部位，用利器刺破形成伤口，然后在伤口内滴入免疫原，滴入免疫原处生长形成珍珠囊；或在伤口内植入珠核，并向珠核处滴入免疫原，生长后在珠核外形成珍珠囊。本发明成功地将免疫学理论应用于珍珠培育实践，与常规育珠方法相比，形成珍珠的圆度更好，比常规生产法的无核珠圆珠率提高20%，有核珠圆珠率提高35%。

Description

珍珠蚌珍珠囊的免疫刺激生成方法

技术领域

本发明涉及珍珠培养技术领域，尤其是一种用于背瘤丽蚌或三角帆蚌珍珠蚌珍珠囊的免疫刺激生成方法。

背景技术

珍珠形成的首要条件是在贝类结缔组织等软组织部位生成具有向内分泌珍珠质的“珍珠囊”，而传统的游离珍珠生产方法要追溯到100多年前日本人见濑辰平等人的外套膜组织小片移植法，这种方法生成珍珠囊的技术在全世界普及后，成为延用至今的现代人工育珠的基本工艺。由于中国淡水珍珠对世界珍珠市场的冲击，珍珠价格一路走低；21世纪后育珠操作女工劳动力成本不断提高，养殖生产风险进一步加大。珍珠养殖生产进入微利时代，改进操作工艺，提高珍珠质量，降低劳动成本已成为珍珠业界的共同诉求。

公开号为CN101036450A的中国专利公开了一种插核后珍珠囊辅助成型方法,包括以下步骤:(1)切取珠蚌的前段外套膜组织;(2)在20-25℃温度,PH值为6.9-8.3下,用蛋白酶酶解外套膜组织,进行离散,得到细胞组织;(3)采用高速离心设备对步骤(2)中得到的细胞组织进行分离,制得细胞液;(4)对所得细胞液进行中和处理;(5)将中和后的细胞液浸泡于保护液中备用;(6)取适量步骤(5)得到的细胞液,滴于插核手术后的珠蚌术后伤口,细胞液与外套膜、珠核融合生长,形成珍珠囊。该方法成功地将细胞工程方法运用于珍珠培育,与常规育珠法相比,细胞囊形成时间可缩短10天,珠质明显提高,大大降低了畸形珠和无珍珠层的素珠的形成率。但是该方法仅仅能培育有核珍珠，并且生成的淡水珍珠圆珠率偏低，无法满足人们对高品质珍珠的需求。

发明内容

本发明的目的是为了解决淡水珍珠圆珠率偏低的问题，提供一种即可培育无核珍珠也可培育有核珍珠的珍珠蚌珍珠囊的免疫刺激生成方法。

本发明的上述技术问题主要是通过下述技术方案得以解决的：

一种珍珠蚌珍珠囊的免疫刺激生成方法，具体过程如下：

①制作免疫原：

采集同种蚌活体组织中的外套膜组织，加适量水混合，采用高速匀浆设备对该混合物进行匀浆，制作成组织浆液；向组织浆液中加入免疫佐剂，制成免疫原，在4℃下冷藏备用；

②珍珠囊的生成：

在生产珍珠所需要的蚌体操作部位，用利器刺破形成伤口，然后在伤口内滴入免疫原，滴入免疫原处生长形成珍珠囊；或在伤口内植入珠核，并向珠核处滴入免疫原，生长后在珠核外形成珍珠囊。给贝类免疫后，用常规方法养殖。

本发明利用动物创伤修复本能和免疫反应原理，应用珍珠贝敏感的免疫原，加相应佐剂，对珍珠贝相应组织（靶细胞）进行有效创伤并辅以免疫原和佐剂，从而刺激贝类生成珍珠囊。本发明成功地将免疫学理论应用于珍珠培育实践，与常规育珠方法相比，形成珍珠的圆度更好，比常规生产法的无核珠圆珠率提高20%，有核珠圆珠率提高35%。

作为优选，所述的匀浆的速度为18000转—20000转/分。

作为优选，所述的外套膜组织与水的重量比为0.8-1.2:1。

作为优选，所述的免疫佐剂为弗氏不完全佐剂，细胞液与弗氏不完全佐剂的质量比为1:1。弗氏佐剂（Freundadjuvant），是目前最常用于动物实验的佐剂，它是将抗原水溶液与油剂（石蜡油或植物油）等量混合，再加乳化剂（羊毛脂或吐温80）制成油包水抗原乳剂，称之为弗氏不完全佐剂。

作为优选，所述的免疫原在伤口内的加入量为0.5~1.0 ml。

与现有技术相比，本发明的有益效果是：

1、免疫原可以集中在实验室内制作，易于保存。

2、现场操作速度快，对操作工技术要求降低，培训简单。

3、培育的无核珍珠圆度好，均匀。本发明最大的特点就是可以培育得到无核珍珠，现有的均为有核珠的辅助培育技术。本发明既可以应用于无核珍珠的培育，也可以进行有核珍珠的培育。

4、公开号为CN101036450A的中国专利申请采用酶解技术获得细胞液，本发明是直接采取组织均浆，机械方法，不是化学法。该方法比“酶解法”过程简便、成本低，容易技术培训、做到标准化生产和商业化应用，操作者容易掌握。该专利申请还需要插入细胞小片，而本发明方法省去此步骤，培育方法更加简便，容易操作和规模化进行。

具体实施方式

下面通过实施例，对本发明的技术方案作进一步具体的说明。

实施例1

背瘤丽蚌珍珠囊的免疫刺激生成方法，具体过程如下：

①制作免疫原：

采集背瘤丽蚌活体组织中的外套膜组织，按照1:1的重量比加水混合，采用高速匀浆设备对该混合物进行匀浆，制作成组织浆液，匀浆的速度控制在18000转—20000转/分范围内；向组织浆液中加入弗氏不完全佐剂，组织浆液与弗氏不完全佐剂的质量比为1:1，制成免疫原，在4℃下冷藏备用；

②珍珠囊的生成：

在生产珍珠所需要的蚌体操作部位，用利器刺破形成伤口，然后在伤口内滴入0.5 ml免疫原，结束操作后，将蚌放入洁净的池水中暂养1周，然后放入富含浮游生物的养殖塘进行培育。滴入免疫原处开始形成珍珠囊，并积累珍珠质。

     由于通过外源刺激，一边形成上皮细胞，一边即开始分泌珍珠质，珍珠质从一个核心开始沉积，随着细胞的增多，组织的形成，完全包围中心的珍珠质，形成了珍珠囊，从很小的珍珠雏形就是圆形的。所以，这样培育的珍珠，圆珠率比常规方法要高。

③育珠蚌的养殖：

经过暂养的手术蚌，需要转入养殖池塘进行强化培育，育珠蚌通过吸收水体中的矿物元素和丰富的有机营养物质，能够快速积累珍珠质，这样形成的珍珠圆度才好。如果长期在缺乏营养的水体中养殖，该方法培育的珍珠圆度也会受到影响，圆珠率就会下降。

实施例2

具体过程同实施例1，不同之处在于：②珍珠囊的生成中，在伤口内植入珠核，并向珠核处滴入1.0 ml免疫原，很快，珠核附近的组织开始围绕珠核分化、形成上皮细胞并包围珠核，通过上皮细胞、组织的生长后在珠核外形成珍珠囊。

本发明成功地将免疫学理论应用于珍珠培育实践，与常规育珠方法相比，形成珍珠的圆度更好，比常规生产法的无核珠圆珠率提高20%，有核珠圆珠率提高35%。本发明方法同样适用其他产珠蚌类，如三角帆蚌。

上述实施例是对本发明的说明，不是对本发明的限定，任何对本发明的简单变换后的结构、方法均属于本发明的保护范围。

Claims (1)

1.一种珍珠蚌珍珠囊的免疫刺激生成方法，其特征在于：

①制作免疫原：采集同种蚌活体组织中的外套膜组织，加水混合，外套膜组织与水的重量比为0.8-1.2:1，采用高速匀浆设备对该混合物进行匀浆，匀浆的速度为18000转—20000转/分，制作成组织浆液；向组织浆液中加入免疫佐剂，制成免疫原，在4℃下冷藏备用；所述的免疫佐剂为弗氏不完全佐剂，组织浆液与弗氏不完全佐剂的质量比为1:1；

②珍珠囊的生成：在生产珍珠所需要的蚌体操作部位，用利器刺破形成伤口，然后在伤口内滴入免疫原，免疫原在伤口内的加入量为0.5~1.0 ml，滴入免疫原处生长形成珍珠囊；或在伤口内植入珠核，并向珠核处滴入免疫原，生长后在珠核外形成珍珠囊。