CN103319215A - 一种微生物菌肥及其制备方法与用途 - Google Patents
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Abstract
本发明公开了一种微生物菌肥，其配方包括25～35％微生物菌、10～21％硅藻土、8～18％助剂、18～24％可溶性淀粉，所述微生物菌包括内生枯草芽孢杆菌802-K和内生枯草芽孢杆菌802-S，且两种菌种的质量比为1∶1，上述的百分数均为各成份占微生物菌肥的质量百分数，同时也公开了其制备方法，方法包括微生物菌的培养和微生物菌肥的制备，本发明的优点是不仅能够提供植物生长所需要的营养元素，还可诱导植物体在低温条件下产生SOD酶，使植物细胞免受伤害，可以有效防御水稻障碍性冷害。
Description
技术领域
本发明属于微生物菌剂的技术领域，具体是一种诱导植物产生SOD酶的微生物菌肥及其制备方法与用途。
背景技术
细胞内活性氧产生与清除的平衡在遭受逆境胁迫或衰老过程中会遭到破坏，从而引起自由基的积累和膜脂过氧化，使膜系统的结构和功能受到损伤，造成植物细胞伤害。作为内源活性氧清除剂的SOD酶能够在一定程度上清除体内过剩的活性氧，维持活性氧代谢平衡，保护膜结构，使植物具有抵抗逆境胁迫的能力。SOD酶在水稻的叶绿体、线粒体和细胞质中均有分布。近年来很多研究证实了SOD酶与水稻的抗寒性有关，所以人们对它们在低温胁迫中的变化及其与抗寒性的关系逐渐重视起来。抗寒力强的品种在低温胁迫时，SOD酶的活性较不抗寒的高并且受伤害的程度轻。因此，植物体内SOD酶活性的高低直接决定了植物抵抗逆境胁迫的能力。
水稻障碍性冷害是指在水稻颖花分化期到抽穗期受到低温影响，导致水稻不灌浆从而减产，气温影响水稻产量的最关键时间是7、8月份，特别是在水稻抽穗前15天到抽穗后25天的40天时间里，是产量的决定期，气温的高低对产量的影响非常大，在水稻孕穗期，花粉母细胞减数分裂要求的温度是17℃以上，当日平均气温在17℃以下连续3天以上时，花粉母细胞就不能正常发育，导致花粉败育形成空粒。
目前，针对水稻障碍性冷害的防治基本上都基于选择耐冷性品种、在抽穗前10～15天，采取深水护胎灌溉等防御措施。还没有一种微生物肥料可以有效防御水稻障碍性冷害，安全度过孕穗期障碍性冷害，提高结实率，避免空粒。
发明内容
为了解决目前没有更好的防治植物障碍性冷害的缺陷，本发明开发出了一种新成份的微生物菌肥，能够诱导植物产生SOD酶，从而防治障碍性冷害。
实现上述目的的技术方案为，本发明开发出了一种新成分的微生物菌肥，包括25～35％微生物菌、10～21％硅藻土、8～18％助剂、18～24％可溶性淀粉，其特征在于，所述微生物菌包括枯草芽孢杆菌802-K和枯草芽孢杆菌802-S，且两种菌种的质量比为1∶1，上述的百分数均为各成份占微生物菌肥的质量百分数。这两株枯草芽孢杆菌为水稻内生芽孢杆菌，其能够在水稻、玉米、小麦等作物体内有效的定殖具有解药害、缓解药害、促早熟、提高水稻抗逆性等特点。
所述微生物菌还包括液化淀粉芽孢杆菌、侧孢芽孢杆菌，并且在微生物菌中枯草芽孢杆菌802-K、枯草芽孢杆菌802-S、液化淀粉芽孢杆菌和侧孢芽孢杆菌的质量比为4∶4∶1∶1。
本发明将肥料制成可湿性粉剂所用到的助剂包括分散剂D-1002、润湿剂W-1002、亚甲基双萘磺酸钠以及十二烷基硫酸钠，且分散剂D-1002、润湿剂W-1002、亚甲基双萘磺酸钠、十二烷基硫酸钠的质量比为3∶1∶5∶4。
本发明除了公开了新开发出的微生物菌肥的成份外，还公开了一种制备该微生物菌肥的方法，该方法包括如下步骤，(1)培养微生物菌：①斜面培养微生物菌：分别将枯草芽孢杆菌802-K、枯草芽孢杆菌802-S置入各自的营养琼脂培养基中，在温度为37℃条件下，斜面培养16h；
②将①步的两个培养基转移到各自茄瓶中，培养的条件均为在温度为37℃条件下，继续培养菌种16h；
③经茄瓶培养后的菌种接种到含相应菌种培养基的种子罐中培养，培养的条件均为温度为37℃，通气量为30m3/h、种子罐转速为175r/min，培养12～16h；
④将③步培养出的枯草芽孢杆菌802-K、枯草芽孢杆菌802-S置入发酵罐中发酵，发酵的温度为37℃，通气量为350m3/h、发酵罐转速为96r/min，发酵时间为16～20h；
⑤经④步得到的发酵液进行压滤，分别收集枯草芽孢杆菌802-K、枯草芽孢杆菌802-S滤饼；
⑥将上步收集到的滤饼分别进行沸腾干燥，干燥的进口温度均为80℃，干燥后得到固体的枯草芽孢杆菌802-K、枯草芽孢杆菌802-S；
(2)微生物菌肥的制备：将25～35％微生物菌、10～21％硅藻土、8～18％助剂、18～24％可溶性淀粉均匀混合，再将上述混合物研磨成800目的粉末，得到微生物菌肥；所述微生物菌包括经(1)步得到的枯草芽孢杆菌802-K、枯草芽孢杆菌802-S，且两种菌的质量比为1∶1，上述的百分数均代表的是各成份占微生物菌肥的质量百分数。
所述步骤(1)中当微生物菌还包括液化淀粉芽孢杆菌、侧孢芽孢杆菌时，培养微生物菌的方法包括如下步骤，①斜面培养微生物菌：将液化淀粉芽孢杆菌、侧孢芽孢杆菌分别置入各自营养琼脂培养基中，均在温度为37℃的条件下培养16h；
②将①步的两个培养基转移到各自的茄瓶中，培养的温度均为30℃，继续培养的时间均为16h；
③将茄瓶培养后的菌种接种到含相应菌种培养基的种子罐中培养，培养温度为30℃、通气量为30m3/h、种子罐转速为175r/min、培养10h；
④将③步培养出的液化淀粉芽孢杆菌和侧孢芽孢杆菌置入发酵罐中发酵，发酵的温度均为30℃，通气量均为350m3/h、发酵罐转速均为180r/min，液化淀粉芽孢杆菌发酵时间为26h，侧孢芽孢杆菌的发酵时间为48h；
⑤经④步得到的发酵液进行压滤，分别收集液化淀粉芽孢杆菌发酵液和侧孢芽孢杆菌滤饼；
⑥将上步收集到的发酵液分别进行沸腾干燥，干燥的进口温度均为80℃，干燥后得到固体的液化淀粉芽孢杆菌和侧孢芽孢杆菌；
所述制备方法步骤(2)中微生物菌还包括液化淀粉芽孢杆菌和侧孢芽孢杆菌时，枯草芽孢杆菌802-K、枯草芽孢杆菌802-S、液化淀粉芽孢杆菌和侧孢芽孢杆菌的质量比为4∶4∶1∶1。
本发明的微生物菌肥是用作防治水稻、玉米、小麦障性冷害的肥料。
本发明的有益效果，微生物菌种采用枯草芽孢杆菌802-K、枯草芽孢杆菌802-S、液化淀粉芽孢杆菌、侧孢芽孢杆菌，使形成的微生物菌肥不仅能够提供植物生长所需要的营养元素，还可诱导植物体在低温条件下产生SOD酶，使植物细胞免受伤害，可以有效防御水稻障碍性冷害。
具体实施方式
以下结合具体实施例对发明内容做进一步的说明。
本发明所用的枯草芽孢杆菌、液化淀粉芽孢杆菌是从水稻体内分离得到的。其方法为先对水稻的不同器官(根、茎、叶)进行表面消毒，然后在无菌条件下对各个器官进行研磨，从得到的研磨液中分离菌株，然后测定得到菌株的促生作用，选取促生效果较好的菌株进行定殖实验，经定殖实验证实能在植物体内定殖的菌株，确定为植物内生菌，经鉴定分别属于枯草芽孢杆菌、解淀粉芽孢杆菌。
实施例一：本发明的微生物菌肥，其配方包括25％微生物菌、21％硅藻土、8％助剂、18％可溶性淀粉，所述微生物菌包括枯草芽孢杆菌802-K和枯草芽孢杆菌802-S，且两种菌种的质量比为1∶1，上述的百分数均为各成份占微生物菌肥的质量百分数。
所用的助剂包括分散剂D-1002、润湿剂W-1002、NNO(亚甲基双萘磺酸钠)、十二烷基硫酸钠，其各成份的质量比为3∶1∶5∶4。分散剂(D-1002)与润湿剂(W-1002)购于北京汉莫克化学技术有限公司。
把上述配方的微生物菌肥制成可湿性粉剂的方法为：(1)培养微生物菌：①斜面培养微生物菌：分别将枯草芽孢杆菌802-K、枯草芽孢杆菌802-S置入各自的营养琼脂培养基中，在温度为37℃条件下，斜面培养16h；
②将①步的两个培养基转移到各自茄瓶中，培养的条件均为在温度为37℃条件下，继续培养菌种16h；
③经茄瓶培养后的菌种接种到含相应菌种培养基的种子罐中培养，培养的条件均为温度为37℃，通气量为30m3/h、种子罐转速为175r/min，培养12～16h；
④将③步培养出的枯草芽孢杆菌802-K、枯草芽孢杆菌802-S置入发酵罐中发酵，发酵的温度为37℃，通气量为350m3/h、发酵罐转速为96r/min，发酵时间为16～20h；
⑤经④步得到的发酵液进行压滤，分别收集枯草芽孢杆菌802-K、枯草芽孢杆菌802-S发酵液；
⑥将上步收集到的发酵液分别进行沸腾干燥，干燥的温度均为80℃，干燥后得到固体的枯草芽孢杆菌802-K、枯草芽孢杆菌802-S；
(2)微生物菌肥的制备：将25～35％微生物菌、10～21％硅藻土、8～18％助剂、18～24％可溶性淀粉均匀混合，再将上述混合物研磨成800目的粉末，得到微生物菌肥；所述微生物菌包括经(1)步得到的枯草芽孢杆菌802-K、枯草芽孢杆菌802-S，且两种菌的质量比为1∶1，上述的百分数均代表的是各成份占微生物菌肥的质量百分数。
以下通过试验说明本发明的微生物菌肥可诱导水稻植物体产生SOD酶，从而防治障碍性冷害。
一、实验作物：水稻(空育131)
二、实验地点：黑龙江佳木斯市连江口农场，土壤类型为轻度沼泽化草甸土，有机质含量2％，pH6.2
三、实验步骤：
1、实验小区秋翻地，春整地，人工整平，2012年5月19日插秧，水稻秧龄3.1叶期，插秧规格30cm*12cm。小区单排单灌，排灌良好。
2、每公顷施尿素250kg，分四次施用，基肥40％、分蘖肥30％、调节肥10％、穗肥20％，每公顷施用磷酸二铵150kg，100％基肥施入，每公顷施用氯化钾180公斤，基肥60％，穗肥40％。
3、尿素和钾肥使用量各处理均一致，基肥5月20日施入，5月28日插秧，6月3日分蘖肥施入，6月22日调节肥施入，穗肥7月2日施入。返青后撤浅水层，增温促蘖；有效分蘖末期晒田抑制无效分蘖，进入浅湿润间歇灌溉。减数分裂期灌深水防御障碍性冷害，然后间歇性灌溉。蜡熟末期停灌，黄熟期排干，10月9日机械收获。
4、田间防治水稻稻瘟病、细菌性褐斑病、梢腐病等田间混合性病害选用2％加收米液剂80g/667m2+75％拿敌稳水分散粒剂20g/667m2+3％多抗霉素水剂80ml/667m2。
5、移栽田除草：插前5-7天、插后15-20天选用60％马歇特乳油130ml/667m2+10％吡嘧磺隆可湿性粉剂15g/667m2封闭防治稗草和阔叶杂草。
6、潜叶蝇：移栽前一天，水稻叶龄在3.1-3.5叶期，选用70％艾美乐6g/100m2，兑水15L/667m2茎叶喷雾。
7、负泥虫、稻螟蛉、粘虫：分别在水稻5.5-6.1叶期和6.5-7.1叶期，选用2.5％溴氰菊酯(敌杀死)乳油15-30ml/667m2，兑水15L/667m2.
8、7月13日(水稻孕穗期)，将100株水稻施用本发明生物菌肥按照50g/667m2兑水15L/667m2的量茎叶喷雾，另100株按照正常栽培不施用菌肥，作试验对比。
气象条件：2012年7月13日到7月20日水稻9.1-9.5叶期间，日平均气温在15℃-18℃。
四、试验结果：以下是喷施了本实施例菌肥和未喷施植物SOD酶的结果：
| 处理组别 | SOD酶活(U/g) |
| 喷施菌肥组 | 956.28 |
| 未喷施菌肥组 | 640.21 |
水稻是否发生障碍性冷害还要从叶片、叶绿素含量等表征值观察，以下是施菌肥后5天调查喷施菌肥组植株生长正常，未发现叶片萎蔫，黄化，白化等冻害现象，结实率见表
| 喷施菌肥组 | 未喷施菌肥组 | |
| 结实率(％) | 87.8 | 76.7 |
于10月4日进行产量调查，见下表
处理组比空白对照组穗长长1cm，每穗实粒数多3.7粒，千粒重多1.1g，结实率高1.1％，增产率高7.69％。
以下是叶绿素含量的对比
| 处理组别 | 叶绿素(mg/g) |
| 喷施菌肥组 | 4.882 |
| 未喷施菌肥组 | 2.809 |
结论：通过测定发现，喷施菌肥的处理组SOD酶活力明显比空白对照组高出93.07U/g，喷施菌肥的处理组SOD酶活力比空白对照高出49.37％。有效的防治细胞损伤。并且叶绿素含量比未施肥组提高了73.80％，显著的减低冷害对叶绿素的破坏。
实施例二：本发明的微生物菌肥，其配方包括35％微生物菌、10％硅藻土、18％助剂、24％可溶性淀粉，所述微生物菌包括枯草芽孢杆菌802-K和枯草芽孢杆菌802-S，液化淀粉芽孢杆菌、侧孢芽孢杆菌，并且在微生物菌中枯草芽孢杆菌802-K、枯草芽孢杆菌802-S、液化淀粉芽孢杆菌和侧孢芽孢杆菌的质量比为4∶4∶1∶1。
所用的助剂包括分散剂D-1002、润湿剂W-1002、NNO(亚甲基双萘磺酸钠)、十二烷基硫酸钠，且各成份的质量比为3∶1∶5∶4。
把上述配方的微生物菌肥制成可湿性粉剂的方法为：(1)培养微生物菌：①斜面培养微生物菌：分别将枯草芽孢杆菌802-K、枯草芽孢杆菌802-S置入各自的营养琼脂培养基中，在温度为37℃条件下，斜面培养16h；
②将①步的两个培养基转移到各自茄瓶中，培养的条件均为在温度为37℃条件下，继续培养菌种16h；
③经茄瓶培养后的菌种接种到含相应菌种培养基的种子罐中培养，培养的条件均为温度为37℃，通气量为30m3/h、种子罐转速为175r/min，培养12～16h；
④将③步培养出的枯草芽孢杆菌802-K、枯草芽孢杆菌802-S置入发酵罐中发酵，发酵的温度为37℃，通气量为350m3/h、发酵罐转速为96r/min，发酵时间为16～20h；
⑤经④步得到的发酵液进行压滤，分别收集枯草芽孢杆菌802-K、枯草芽孢杆菌802-S发酵液；
⑥将上步收集到的发酵液分别进行沸腾干燥，干燥的温度均为80℃，干燥后得到固体的枯草芽孢杆菌802-K、枯草芽孢杆菌802-S；
(2)微生物菌肥的制备：将25～35％微生物菌、10～21％硅藻土、8～18％助剂、18～24％可溶性淀粉均匀混合，再将上述混合物研磨成800目的粉末，得到微生物菌肥；所述微生物菌包括经(1)步得到的枯草芽孢杆菌802-K、枯草芽孢杆菌802-S，当微生物菌还包括液化淀粉芽孢杆菌和侧孢芽孢杆菌时，四种菌种的质量比为4∶1∶1∶1，上述的百分数均代表的是各成份占微生物菌肥的质量百分数。
所述步骤(1)中当微生物菌还包括液化淀粉芽孢杆菌、侧孢芽孢杆菌时，培养微生物菌的方法包括如下步骤，①斜面培养微生物菌：将液化淀粉芽孢杆菌、侧孢芽孢杆菌分别置入营养琼脂培养基中，均在温度为37℃的条件下培养16h；
②将①步的两个培养基转移到各自的茄瓶中，培养的温度均为37℃，继续培养的时间均为16h；
③将茄瓶培养后的菌种接种到含相应菌种培养基的种子罐中培养，培养温度为37℃、通气量为30m3/h、种子罐转速为175r/min、培养10h；
④将③步培养出的液化淀粉芽孢杆菌和侧孢芽孢杆菌置入发酵罐中发酵，发酵的温度均为37℃，通气量均为350m3/h、发酵罐转速均为180r/min，液化淀粉芽孢杆菌发酵时间为26h，侧孢芽孢杆菌的发酵时间为48h；
⑤经④步得到的发酵液进行压滤，分别收集液化淀粉芽孢杆菌发酵液和侧孢芽孢杆菌发酵液；
⑥将上步收集到的发酵液分别进行沸腾干燥，干燥的温度均为80℃，干燥后得到固体的液化淀粉芽孢杆菌和侧孢芽孢杆菌；
9、以下通过试验说明本发明的微生物菌肥可诱导玉米植物体产生SOD酶，从而防治障碍性冷害。大田试验中选取200株经过正常栽培条件的玉米，在孕穗期时将100株玉米施用本发明生物菌肥按照50g/667m2兑水15L/667m2的量茎叶喷雾，另100株按照正常栽培不施用菌肥，作试验对比。
以下是抽穗期后得到的试验对比数据
结论：从表中可以看出，该肥料能够显著的促进玉米的生长，使增产量达到36.6kg/亩，SOD酶的产量提高了51.06％，并能显著的诱导SOD酶的产生，提高玉米的系统抗性。
实施例三：本发明的微生物菌肥，其配方包括30％微生物菌、15％硅藻土、12％助剂、21％可溶性淀粉，所述微生物菌包括枯草芽孢杆菌802-K和枯草芽孢杆菌802-S，液化淀粉芽孢杆菌、侧孢芽孢杆菌，并且在微生物菌中枯草芽孢杆菌802-K、枯草芽孢杆菌802-S、液化淀粉芽孢杆菌和侧孢芽孢杆菌的质量比为4∶4∶1∶1。
所用的助剂包括分散剂D-1002、润湿剂W-1002、NNO(亚甲基双萘磺酸钠)、十二烷基硫酸钠，且各成份的质量比为3∶1∶5∶4。
将该生物肥制成可湿性粉剂的方法同实施例二。
以下通过试验说明本发明的微生物菌肥可诱导小麦体产生SOD酶，从而防治障碍性冷害。小麦的试验方法同水稻和玉米的，以下是小麦大田试验结果，
结论：从表中可以看出，该肥料能够显著的促进小麦增产，增产率达到14.4％；SOD酶的活力增加了47.00％。
实施例四：本发明的微生物菌肥，其配方包括27％微生物菌、12％硅藻土、10％助剂、20％可溶性淀粉，所述微生物菌包括枯草芽孢杆菌802-K和枯草芽孢杆菌802-S，液化淀粉芽孢杆菌、侧孢芽孢杆菌，并且在微生物菌中枯草芽孢杆菌802-K、枯草芽孢杆菌802-S、液化淀粉芽孢杆菌和侧孢芽孢杆菌的质量比为4∶4∶1∶1。
所用的助剂包括分散剂D-1002、润湿剂W-1002、NNO(亚甲基双萘黄酸钠)、十二烷基硫酸钠，且各成份的质量比为3∶1∶5∶4。
制备方法同实施例二。
本发明的微生物菌种是经过大量的试验选择出来的，以下列举出一个例子来说明我们在选择菌种时的试验方法，
1、试验菌肥：本实施例的微生物菌肥、固氮芽孢杆菌与多粘类芽孢杆菌按照2∶1配比制成的微生物菌肥；
2、选取三组处于孕穗期的水稻，每组10株，一组不加任何微生物菌肥、另一组添加本实施例的肥，最后一组添加固氮芽孢杆菌与多粘类芽孢杆菌混合组成的肥，添加肥的量按照1.5g/m2的量添加，将这三组水稻在4℃下冷冻24小时，冷冻后在26℃缓冻两天，测量各组植物的SOD酶值，及观察各组水稻生长的情况，结果见下表，
观察得到的三组水稻生长情况，喷施本实施例菌肥的水稻叶片未受到冷害影响，叶片长度比试验前增长了11.82％，空白组受到冷害影响，叶片出现发黄、失水现象，另一喷施了生物菌肥组的水稻叶片虽未完全受到冷害，但是叶片增长的不多，叶片长度比试验前增长了3.35％。
以上仅为进一步说明本发明内容所列举出的实施例而已，本发明在选择菌种时做了大量的试验最终选择出了合适的菌种及质量配比，能够防治冷害的效果也是经过了大量的大田试验得出的结论，为了简练的说明，只选取了几个试验，所以，一切基于在本发明的成份、制备方法上所作出的简单变动都应落在本发明的保护范围内。
Claims (10)
1.一种微生物菌肥，包括25～35％微生物菌、10～21％硅藻土、8～18％助剂、18～24％可溶性淀粉，其特征在于，所述微生物菌包括枯草芽孢杆菌802-K和枯草芽孢杆菌802-S，且这两种菌均为植物内生芽孢杆菌，两种菌种的质量比为1∶1，上述的百分数均为各成份占微生物菌肥的质量百分数。
2.根据权利要求1所述的微生物菌肥，其特征在于，所述微生物菌还包括液化淀粉芽孢杆菌、侧孢芽孢杆菌，并且在微生物菌中枯草芽孢杆菌802-K、枯草芽孢杆菌802-S、液化淀粉芽孢杆菌和侧孢芽孢杆菌的质量比为4∶4∶1∶1。
3.根据权利要求1所述的微生物菌肥，其特征在于，所述助剂包括分散剂D-1002、润湿剂W-1002、亚甲基双萘磺酸钠以及十二烷基硫酸钠，且分散剂D-1002、润湿剂W-1002、亚甲基双萘磺酸钠、十二烷基硫酸钠的质量比为3∶1∶5∶4。
4.根据权利要求1所述的微生物菌肥，其特征在于，该微生物菌肥的剂型为可湿性粉剂。
5.一种制备权利要求1所述的微生物菌肥的方法，其特征在于，该方法包括如下步骤，(1)培养微生物菌：①斜面培养微生物菌：分别将枯草芽孢杆菌802-K、枯草芽孢杆菌802-S置入各自的营养琼脂培养基中，在温度为37℃条件下，斜面培养16h；
②将①步的两个培养基转移到各自茄瓶中，培养的条件均为在温度为37℃条件下，继续培养菌种16h；
③经茄瓶培养后的菌种接种到含相应菌种培养基的种子罐中培养，培养的条件均为温度为37℃，通气量为30m3/h、种子罐转速为175r/min，培养12～16h；
④将③步培养出的枯草芽孢杆菌802-K、枯草芽孢杆菌802-S置入发酵罐中发酵，发酵的温度为37℃，通气量为350m3/h、发酵罐转速为96r/min，发酵时间为16～20h；
⑤经④步得到的发酵液进行压滤，分别收集枯草芽孢杆菌802-K、枯草芽孢杆菌802-S滤饼；
⑥将上步收集到的滤饼分别进行沸腾干燥，干燥的进口温度均为80℃，干燥后得到固体的枯草芽孢杆菌802-K、枯草芽孢杆菌802-S粉末；
(2)微生物菌肥的制备：将25～35％微生物菌、10～21％硅藻土、8～18％助剂、18～24％可溶性淀粉均匀混合，再将上述混合物研磨成800目的粉末，得到微生物菌肥；所述微生物菌包括经(1)步得到的枯草芽孢杆菌802-K、枯草芽孢杆菌802-S，且两种菌的质量比为1∶1，上述的百分数均代表的是各成份占微生物菌肥的质量百分数。
6.根据权利要求5所述制备微生物菌肥的方法，其特征在于，所述步骤(1)中当微生物菌还包括液化淀粉芽孢杆菌、侧孢芽孢杆菌时，培养微生物菌的方法包括如下步骤，①斜面培养微生物菌：将液化淀粉芽孢杆菌、侧孢芽孢杆菌分别置入营养琼脂培养基中，均在温度为30℃的条件下培养16h；
②将①步的两个培养基转移到各自的茄瓶中，培养的温度均为30℃，继续培养的时间均为16h；
③将茄瓶培养后的菌种接种到含相应菌种培养基的种子罐中培养，培养温度均为30℃、通气量均为30m3/h、种子罐转速均为175r/min、培养时间均为10h；
④将③步培养出的液化淀粉芽孢杆菌和侧孢芽孢杆菌置入发酵罐中发酵，发酵的温度均为30℃，通气量均为350m3/h、发酵罐转速均为180r/min，液化淀粉芽孢杆菌发酵时间为26h，侧孢芽孢杆菌的发酵时间为48h；
⑤经④步得到的发酵液进行压滤，分别收集液化淀粉芽孢杆菌发酵液和侧孢芽孢杆菌滤饼；
⑥将上步收集到的滤饼分别进行沸腾干燥，干燥的进口温度均为80℃，干燥后得到固体的液化淀粉芽孢杆菌和侧孢芽孢杆菌粉末。
7.根据权利要求5所述制备微生物菌肥的方法，其特征在于，所述步骤(2)中微生物菌还包括液化淀粉芽孢杆菌和侧孢芽孢杆菌时，枯草芽孢杆菌802-K、枯草芽孢杆菌802-S、液化淀粉芽孢杆菌和侧孢芽孢杆菌的质量比为4∶4∶1∶1。
8.根据权利要求5所述制备用于水稻的微生物菌肥的方法，其特征在于，所述步骤(2)中的助剂包括分散剂D-1002、润湿剂W-1002、亚甲基双萘磺酸钠和十二烷基硫酸钠，且分散剂D-1002、润湿剂W-1002、亚甲基双萘磺酸钠、十二烷基硫酸钠的质量比为3∶1∶5∶4。
9.权利要求1所述用于水稻的微生物菌肥的用途，其特征在于，将该微生物菌肥用作防治植物障碍性冷害的肥料。
10.根据权利要求9所述的微生物菌肥用途，其特征在于，所述的植物为水稻、玉米和小麦。
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