CN103316048A - 用于治疗中老年男性部分雄激素缺乏综合征的海参精囊提取物 - Google Patents
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Abstract
用于治疗中老年男性部分雄激素缺乏综合征的海参精囊提取物及其制备方法，涉及从海参精囊中提取有效物质的工艺技术领域。适量预冻好的海参精囊冷冻干燥，粉碎；按质量比1:10加入无水乙醇，30℃条件下搅拌提取3h；过滤后取滤液，残渣重复上述操作，合并滤液；旋转蒸发仪回收乙醇，浓缩液真空干燥即为海参精囊提取物。可将海参精囊提取物制备成片剂和胶囊剂，用于治疗中老年男性部分雄激素缺乏综合征。
Description
技术领域
本发明涉及保健药物食品技术领域，确切地说涉及海参精囊提取物在治疗中老年男性部分雄激素缺乏综合征中的应用。
背景技术
中老年男性雄激素部分缺乏综合征（PADAM），是男性从中老年向老年期过渡阶段时，由于机制逐渐衰老，内分泌功能尤其是性腺功能减退，男性激素调节紊乱而出现的一组临床症候群；也称男性更年期综合症、更年期忧郁症、男性老年前期诸证。
目前，国际提倡PADAM患者进行睾酮补充治疗，如睾酮的脂肪酸酯（安特尔）、甲基睾丸酮、丙酸睾酮等，而睾酮补充治疗只能缓解部分症状，而且，由此带来的安全性问题逐渐引起了人们的密切关注，睾酮对红细胞生成、脂代谢、糖代谢、肝供能和前列腺均有影响，长期应用睾酮补充治疗可能发生肝功能损害、脂质代谢紊乱、血红蛋白升高和前列腺增生等问题。中老年男性口服雄激素其代谢产物对心血管代谢不利，可诱发胰岛素抵抗，增加内皮因子水平可导致心血管疾病发生的风险增加。所以寻找天然活性物来代替睾酮治疗PADAM逐渐引起了医学者的广泛兴趣。
海参，属海参纲（Holothurioidea），不仅是珍贵的食品，也是名贵的药材。据《本草纲目拾遗》中记载：海参，味甘咸，补肾，益精髓，摄小便，壮阳疗痿，其性温补，足敌人参，故名海参。现代研究表明，海参具有提高记忆力、延缓性腺衰老，防止动脉硬化、糖尿病以及抗肿瘤等作用。海参精囊是海参的生殖器官，具有极好的营养价值，但在海参加工过程中大多作为废弃物丢弃，致使其中的营养成分和活性因子不被利用，造成很大浪费。而目前国内外对海参精囊的研究鲜见报道，海参精囊中的成分和生物学作用尚不清楚，因此分离提取海参精囊中有效成分，并应用于治疗PADAM具有重要的现实意义。
发明内容
本发明第一目的在于发明一种治疗PADAM的来源于海参精囊的提取物。
本发明所述海参精囊提取物为从海参精囊中提取的醇溶性物质。经研究，该提取物对于治疗PADAM效果显著，且无副作用。
本发明的第二个目的在于发明上述醇溶性物质的制备方法。
包括以下步骤：
（1）预冻好的海参精囊冷冻干燥，粉碎；
（2）按质量比1:10加入无水乙醇，30℃条件下搅拌提取3 h；过滤后取滤液，残渣重复上述操作，合并滤液；
（3）旋转蒸发仪回收乙醇，浓缩液真空干燥得到海参精囊提取物。
本发明工艺简单、易于操作，生产的产品费用低廉，对于治疗PADAM效果显著，且无副作用。
本发明第三个目的在于发明上述海参精囊提取物在治疗PADAM药物中的应用。
海参精囊提取物在改善PADAM药物中应用的有益效果如下：
证明了海参精囊提取物具有改善PADAM作用。已完成临床前在小鼠环磷酰胺PADAM模型中的药效学研究。采用了经典的环磷酰胺所致的小鼠PADAM模型，观察不同剂量的海参精囊提取物对小鼠PADAM的改善作用。
研究表明：
1、海参精囊提取物使环磷酰胺所致的PADAM模型小鼠的睾丸和附睾指数增加。
1、海参精囊提取物使环磷酰胺所致的PADAM模型小鼠的血清睾酮的含量提高，精子密度、运动率提高，畸形率降低。
2、海参精囊提取物使环磷酰胺所致的PADAM模型小鼠的受损生精小管的结构明显改善，使生精细胞数量显著增加。
具体实施方式
1、 制备海参精囊治疗PADAM提取物：
海参精囊由大连棒棰岛海产股份有限公司提供
（1）预冻好的海参精囊冷冻干燥，粉碎；
（2）按质量比1:10加入无水乙醇，30℃条件下搅拌提取3 h；过滤后取滤液，残渣重复上述操作，合并滤液；
（3）旋转蒸发仪回收乙醇，浓缩液真空干燥得到海参精囊提取物。
2、制备片剂和胶囊：
(1)本发明海参精囊提取物胶囊制剂的制备
称取上述步骤制备的海参精囊提取物200mg，同时称取淀粉295mg、硬脂酸镁5mg，均匀混合，填充成胶囊。
(2)本发明海参精囊提取物片剂的制备
称取上述步骤制备的海参精囊提取物200mg，同时称取淀粉195mg、乳糖100mg，均匀混合，用湿法制粒，压成片剂。
3、海参精囊提取物对雄性小鼠生殖系统的影响
(1)试验对象：
雄性昆明种小鼠，8-10周（25-30g），购于山东省鲁抗医药股份有限公司，清洁级，合格证号：SLXK鲁20080002。室温下饲养，自由饮水和摄食
(2)试剂
甲睾酮片，5mg/片，购于上海信谊康捷药业有限公司，批号：110802；
睾酮放射免疫分析药盒，购于北京北方生物技术研究所，批号：130220；
注射用环磷酰胺，0.2g/瓶，购于江苏恒瑞医药股份有限公司，批号：12031425。
(3)实验方法
将健康雄性昆明小鼠随机分为空白组、环磷酰胺模型组、海参精囊取提物低、高剂量组和阳性药组，除空白组腹腔注射生理盐水外，其他各组均腹腔注射环磷酰胺28mg·kg-1，每天1次，连续5天以复制动物PADAM模型，本发明海参精囊提物低、高剂量组及阳性药物组，分别用海参精囊提取物300 mg·kg-1、600 mg·kg-1及甲睾酮1.5mg·kg-1灌胃给药，空白组和模型组灌胃同体积的蒸馏水，每天1次，连续4周。
于末次给药24h后，小鼠眼球取血，用于检测血清中睾酮水平。脱颈椎处死，取睾丸、附睾，迅速称重，分别计算脏器指数（脏器指数=mg脏器重量/100g体重量）；左侧附睾剪碎，制成精子悬液，显微镜下观察精子总数、运动率及精子畸形率；左侧睾丸用10%福尔马林固定，石蜡切片，HE染色，在显微镜用测微尺计算生精上皮厚度和生精细胞的数量。
(4)数据分析与处理
用SPSS软件对实验数据进行统计分析，计算观察指标的平均值与标准差，另外均用t检验比较组间差异。
(5)结果与分析
1）本发明海参精囊提取物对小鼠睾丸指数、附睾指数的影响
如表1所示，与空白组相比，模型组小鼠的睾丸及附睾指数显著降低（ ● P<0.05、 ○ P<0.01）；与模型组相比，本发明海参精囊提物组与甲睾酮组均显著提高睾丸及附睾指数（▼ P<0.01）。
表1 海参精囊提取物对小鼠睾丸指数、附睾指数的影响（ ±s，n=10）
| 组别 | 睾丸指数/% | 附睾指数/% |
| 空白 | 8.0967±0.4607 | 0.9256±0.0656 |
| 模型 | 5.8683±0.7334○ | 0.7612±0.0695● |
| 本发明提物低剂量 | 6.8500±0.4195▼ | 1.2139±0.0795▼ |
| 本发明提物高剂量 | 7.3383±0.5087▼ | 1.2877±0.1404▼ |
| 甲睾酮 | 7.3500±0.5512▼ | 1.4604±0.1756▼ |
与空白组比较， ● P<0.05、 ○ P<0.01；与模型组比较， ▼ P<0.01
2）本发明海参精囊提取物对小鼠精子密度、运动率及畸形率的影响
如表2所示，与空白组相比，模型组小鼠的精子密度、运动率显著降低（ ○ P<0.01），畸形率显著升高（ ○ P<0.01）；而本发明海参精囊提物组显著提高精子密度、运动率，降低畸形率（ ▼ P<0.01）。
表2 海参精囊提取物对小鼠精子密度、运动率及畸形率的影响（
±s，n=10）
| 组别 | 精子密度/1×107·ml-1 | 精子运动率/% | 精子畸形率/% |
| 空白 | 4.4170±0.4167 | 47.50±4.37 | 30.33±1.63 |
| 模型 | 2.1330±0.5086○ | 28.33±6.31○ | 36.67±0.82○ |
| 本发明提物低剂量 | 4.6330±0.3077▼ | 52.83±1.47▼ | 32.33±1.03▼ |
| 本发明提物高剂量 | 4.6170±0.5076▼ | 47.83±4.79▼ | 31.83±1.17▼ |
| 甲睾酮 | 5.0500±0.2168▼ | 58.00±2.83▼ | 31.17±0.75▼ |
与空白组比较， ○ P<0.01；与模型组比较， ▼ P<0.01
3）本发明提取物对雄性小鼠血清睾酮的影响
如表3所示，与空白组相比，模型组小鼠的血清睾酮显著降低（ ○ P<0.01）；而本发明海参精囊提物组可显著提高血清睾酮水平（ ▼ P<0.01）。
表3 海参精囊提取物对小鼠血清睾酮含量的影响（±s，n=10）
| 组别 | 血清睾酮含量/pg·ml-1 |
| 空白 | 158.50±14.79 |
| 模型 | 67.67±19.31○ |
| 本发明提物低剂量 | 159.17±29.29▼ |
| 本发明提物高剂量 | 147.33±17.59▼ |
| 甲睾酮 | 512.83±59.60▼ |
与空白组比较， ○ P<0.01；与模型组比较， ▼ P<0.01
4）海参精囊提取物对小鼠睾丸组织生精上皮厚度和生精细胞数量的影响
如表4所示，与空白组比，模型组小鼠生精上皮厚度和生精细胞数量显著降低（ ○ P<0.01）；而本发明海参精囊提物组可显著提高生精上皮厚度，增加生精细胞数量（ ▼ P<0.01）。
表4 海参精囊提取物对小鼠生精上皮厚度和生精细胞数量的影响（
±s，n=10）
| 组别 | 生精上皮厚度/mm | 生精细胞数量/1·mm-2 |
| 空白 | 0.8306±0.0534 | 3.6888±0.0814 |
| 模型 | 0.4611±0.0218○ | 2.2028±0.0772○ |
| 本发明提物低剂量 | 0.6426±0.0236▼ | 3.0195±0.1178▼ |
| 本发明提物高剂量 | 0.6908±0.0290▼ | 3.1500±0.0458▼ |
| 甲睾酮 | 0.7547±0.0190▼ | 3.4473±0.0890▼ |
与空白组比较， ○ P<0.01；与模型组比较， ▼ P<0.01
Claims (4)
1.用于治疗中老年男性部分雄激素缺乏综合征的海参精囊提取物，为从海参加工废弃物海参精囊中提取的水溶性物质；该海参精囊提取物的制备方法包括以下步骤：
（1）预冻好的海参精囊冷冻干燥，粉碎；
（2）按质量比1:10加入无水乙醇，30℃条件下搅拌提取3 h；过滤后取滤液，残渣重复上述操作，合并滤液；
（3）旋转蒸发仪回收乙醇，浓缩液真空干燥得到海参精囊提取物。
2.一种如权利要求1所述用于治疗中老年男性部分雄激素缺乏综合征的海参精囊提取物的制备方法，其特征在于包括以下步骤：
（1）预冻好的海参精囊冷冻干燥，粉碎；
（2）按质量比1:10加入无水乙醇，30℃条件下搅拌提取3 h；过滤后取滤液，残渣重复上述操作，合并滤液；
（3）旋转蒸发仪回收乙醇，浓缩液真空干燥得到海参精囊提取物。
3.如权利要求2所述的海参精囊提取物的制备方法，其特征在于还包括：将步骤（3)制得的产品进一步通过常规的制药手段制成含有海参精囊提取物100mg或200mg规格的胶囊或片剂。
4.如权利要求1所述的海参精囊提取物在用于制备治疗中老年男性部分雄激素缺乏综合征的药物的用途。
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|---|---|---|---|
| CN2013102799353A CN103316048A (zh) | 2013-07-05 | 2013-07-05 | 用于治疗中老年男性部分雄激素缺乏综合征的海参精囊提取物 |
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| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
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| CN2013102799353A CN103316048A (zh) | 2013-07-05 | 2013-07-05 | 用于治疗中老年男性部分雄激素缺乏综合征的海参精囊提取物 |
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|---|---|
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| CN2013102799353A Pending CN103316048A (zh) | 2013-07-05 | 2013-07-05 | 用于治疗中老年男性部分雄激素缺乏综合征的海参精囊提取物 |
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| CN (1) | CN103316048A (zh) |
Citations (3)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
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| RU2184556C1 (ru) * | 2001-08-16 | 2002-07-10 | ГУ Тихоокеанский институт биоорганической химии Дальневосточного отделения РАН | Средство, обладающее противовирусной активностью |
| WO2009135311A1 (en) * | 2008-05-09 | 2009-11-12 | Rival S.E.C | Echinoderm-derived extracts, methods of preparation and uses |
| CN102757861A (zh) * | 2012-07-31 | 2012-10-31 | 青岛海康水产发展有限公司 | 一种海参脂的提取方法 |
-
2013
- 2013-07-05 CN CN2013102799353A patent/CN103316048A/zh active Pending
Patent Citations (3)
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| 杨永亮: "我国中药运动补剂研究的现状与前景", 《浙江体育科学》 * |
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Application publication date: 20130925 |