CN103285010A - 化合物在制备治疗抗结核菌药物中的应用 - Google Patents

Abstract

本发明公开了Aspeverin在制备抗结核菌药物中的应用。本发明针对当前结核病发病率高、结核杆菌多重耐药菌株的出现，使结核病发病率和死亡率呈上升趋势的现状，发现Aspeverin具有显著抑制结核菌的活性，具有很好的应用前景。本发明涉及的Aspeverin在制备治疗抗结核菌药物中的用途属于首次公开，由于骨架类型属于全新的骨架类型，而且其对于结核菌抑制活性强得意想不到，不存在由其他化合物给出任何启示的可能，具备突出的实质性特点，同时用于结核菌感染的防治显然具有显著的进步。

Description

化合物在制备治疗抗结核菌药物中的应用

技术领域

本发明涉及化合物Aspeverin的新用途，尤其涉及Aspeverin在制备治疗抗结核菌药物中的应用。 

背景技术

近年来全球结核病的发病呈增高趋势，据世界卫生组织（WHO）估计，目前全球受结核分枝杆菌（Mycobacterium tuberculosis，MTB）感染的人口占世界人口的三分之一，其中5～10%的感染者成为结核病患者。我国每年出现活动性肺结核病人130万例，其中传染性肺结核约60万例，其中传染性肺结核约60万例，是全球结核病高负担国家之一。 

自抗结核药物相继问世，使结核病的治疗起到划时代的变化。然而由于结核病患者的治疗管理尚不十分规范，不规则化疗，滥用抗结核药物，使结核病耐药情况日益严重，且耐药性的变化更趋向于多种药物同时耐药，这给结核病的防治工作造成极大困难。因此寻找新的抗结核药物，尤其是抗多药耐药性的抗结核药物对保护人民身体健康，具有重要意义。 

本发明涉及的化合物Aspeverin是一个2013年发表（Nai-Yun Ji，et al.,2013.Aspeverin,a New Alkaloid from an Algicolous Strain of Aspergillus versicolor.Organic Letters10(15),2327–2329.）的新化合物，该化合物拥有全新的骨架类型，目前的用途仅仅涉及抑制浮游动植物的生长（Nai-Yun Ji，et al.,2013.Aspeverin,a New Alkaloid from an Algicolous Strain of Aspergillus versicolor.Organic Letters10(15),2327–2329.），对于本发明涉及的Aspeverin在制备治疗抗结核菌药物中的用途属于首次公开，由于属于全新的结构类型，而且其对于抗结核菌的活性强得意想不到，不存在由其他化合物给出任何启示的可能，具备突出的实质性特点，同时用于抗结核菌显然具有显著的进步。 

发明内容

本发明的目的在于根据现有Aspeverin研究中未发现其具有抗抗结核菌活性的报道的现状，提供了Aspeverin在制备抗抗结核菌药物中的应用。 

所述化合物Aspeverin结构如式（Ⅰ）所示： 

式（Ⅰ） 

发明人先用卡介苗做应试菌株，采用纸片扩散法对Aspeverin的抗结核菌活性进行初步试验，根据初步试验的结果，本发明再用固体培养基稀释法测定了该化合物对卡介苗、结核分枝杆菌标准株H37Rv株和耐多药结核分枝杆菌（MDR MTB）三种结核菌的最小抑菌浓度，实验结果证实Aspeverin具有很强的抗结核菌和抗耐药性结核菌活性，可作为治疗结核菌感染疾病的先导化合物，也可用于制备治疗结核病药物。 

与现有技术相比，本发明具有如下有益效果： 

1.本发明提供了一种可用于抗结核病治疗的Aspeverin，从而扩大了抗结核菌药物的种类； 

2.针对目前结核病发病率高、结核杆菌多重耐药菌株及人体免疫缺陷病毒双重感染的出现，使结核病发病率和死亡率呈上升趋势的现状，本发明发现Aspeverin具有抗结核菌和耐药性结核菌活性的特点，可用于抗结核药物的制备，具有非常广阔的应用前景； 

3.本发明涉及的Aspeverin在制备治疗抗结核菌药物中的用途属于首次公开，由于骨架类型属于全新的骨架类型，而且其对于结核菌抑制活性强得意想不到，不存在由其他化合物给出任何启示的可能，具备突出的实质性特点，同时用于结核菌感染的防治显然具有显著的进步。 

具体实施方式

本发明所涉及化合物Aspeverin的制备方法参见文献（Nai-Yun Ji，et al.,2013.Aspeverin,a New Alkaloid from an Algicolous Strain of Aspergillus versicolor.Organic Letters10(15),2327–2329.） 

以下通过实施例对本发明作进一步详细的说明，但本发明的保护范围不受具体实施例的任何限制，而是由权利要求加以限定。 

实施例1：本发明所涉及化合物Aspeverin片剂的制备： 

取20克化合物Aspeverin，加入制备片剂的常规辅料180克，混匀，常规压片机制成 1000片。 

实施例2：本发明所涉及化合物Aspeverin胶囊剂的制备： 

取20克化合物Aspeverin，加入制备胶囊剂的常规辅料如淀粉180克，混匀，装胶囊制成1000粒。 

实验例1固体培养基稀释法测定Aspeverin抗卡介苗（BCG）绝对浓度 

从斜面上刮取卡介苗培养物，加入到3ml Middlebrook7H9肉汤培养基中，加入少量玻璃珠，旋紧试管盖，于漩涡振荡器上剧烈振动研磨，与标准麦氏比浊管（MacFarlandNo.1）比浊，即配成1mg/ml的卡介苗（BCG）菌悬液。 

将Aspeverin用DMSO配成高浓度的原液，用含5%的吐温-80无菌超纯水稀释原液至所需浓度，将稀释好的Aspeverin按所需剂量加入到4ml Middlebrook7H11琼脂培养基（该培养基已经121℃高压蒸汽灭菌15分钟、冷却至50～55℃），混匀，制成含Aspeverin，浓度分别为6.0ug/ml，4.0ug/ml，3.0ug/ml，2.0ug/ml，1.5ug/ml，1.0ug/ml，0.75ug/ml，0.5ug/ml等浓度的斜面培养基。 

将浓度为1mg/ml的卡介苗（BCG）菌悬液用接种环蘸取数环，分别接种于含Aspeverin系列浓度的培养基和空白对照培养基斜面上，置于37℃培养4～8周，观察实验结果，结果如表1所示。 

本实施例中所用Middlebrook7H9肉汤培养基和Middlebrook7H11琼脂培养基为本领域技术人员进行结核菌培养时的常用培养基，其配方采用常规配方即可。 

实验例2固体培养基稀释法测定Aspeverin抗结核分枝杆菌标准株H37Rv株绝对浓度 

从斜面上刮取结核分枝杆菌标准株H37Rv株培养物，加入到3ml Middlebrook7H9肉汤培养基中，加入少量玻璃珠，旋紧试管盖，于漩涡振荡器上剧烈振动研磨，与标准麦氏比浊管（MacFarland No.1）比浊，即配成1mg/ml的H37Rv株菌悬液。 

将Aspeverin分别用DMSO配成高浓度的原液，用含5%的吐温-80无菌超纯水稀释原液至所需浓度，将稀释好的Aspeverin按所需剂量加入到4ml Middlebrook7H11琼脂培养基（该培养基已经121℃高压蒸汽灭菌15分钟、冷却至50～55℃），混匀，制成含Aspeverin，浓度分别为6.0ug/ml，4.0ug/ml，3.0ug/ml，2.0ug/ml，1.5ug/ml，1.0ug/ml，0.75ug/ml，0.5ug/ml等浓度的斜面培养基。 

将浓度为1mg/ml的H37Rv株菌悬液用接种环蘸取数环，分别接种于含Aspeverin系列浓度的培养基和空白对照培养基斜面上，置于37℃培养4～8周，观察实验结果，结果如表1所 示。 

实验例3固体培养基稀释法测定Aspeverin抗结核分支杆菌临床分离耐ISRE MTB株绝对浓度 

从斜面上刮取结核分枝杆菌临床分离耐ISRE MTB株（耐异烟肼、链霉素、利福平、乙胺丁醇结核分枝杆菌临床分离柱）培养物，加入到3ml Middlebrook7H9肉汤培养基中，加入少量玻璃珠，旋紧试管盖，于漩涡振荡器上剧烈振动研磨，与标准麦氏比浊管（MacFarland No.1）比浊，即配成1mg/ml的菌悬液。 

将Aspeverin分别用DMSO配成高浓度的原液，用含5%的吐温-80无菌超纯水稀释原液至所需浓度，将稀释好的Aspeverin按所需剂量加入到4ml Middlebrook7H11琼脂培养基（该培养基已经121℃高压蒸汽灭菌15分钟、冷却至50～55℃），混匀，制成含Aspeverin，浓度分别为6.0ug/ml，4.0ug/ml，3.0ug/ml，2.0ug/ml，1.5ug/ml，1.0ug/ml，0.75ug/ml，0.5ug/ml等浓度的斜面培养基。 

将浓度为1mg/ml的结核分枝杆菌临床分离耐ISRE MTB株菌悬液用接种环蘸取数环，分别接种于含Aspeverin系列浓度的培养基和空白对照培养基斜面上，置于37℃培养4～8周，观察实验结果，结果如表1所示。 

表1固体培养基稀释法测定Aspeverin抗结核菌绝对浓度结果 

结论：Aspeverin具有很强的抗结核菌和抗耐药性结核菌活性，可作为治疗结核菌感染疾病的先导化合物，也可用于制备治疗结核病药物。 

Claims (1)

1.Aspeverin在制备抗结核菌药物中的应用，所述化合物Aspeverin结构如式（Ⅰ）所示：

式（Ⅰ）。