CN103271839A - 一种用于护肤的组合物及其应用 - Google Patents

Abstract

本发明公开了一种用于护肤的组合物，该组合物主要是由以下重量份的原料制成：L-岩藻糖0.1-5份、辅酶Q100.05-5份、透明质酸0.1-5份、神经酰胺0.05-2份、mPEG1-25份。它可以制备成任何一种常用护肤品制剂。此外，本发明还公开了该组合物在制备具有抗衰老、抗皮肤发炎和保湿功能的护肤品组合物中的应用。

Description

一种用于护肤的组合物及其应用

技术领域

本发明涉及一种组合物，尤其涉及一种用于护肤的组合物；此外，本发明还涉及该组合物的应用。

背景技术

目前市面中，护肤产品众多，以辅酶Q1O和透明质酸为原料的护肤品很多，但是L-岩藻糖作为一种具有优良抗衰老性能的成分，以前并没有得到广泛的认知，因此，应用较少。

岩藻糖（fucose）是六碳糖的一种，又称6-脱氧-L-半乳糖，并可以看作是一种甲基戊糖。自然界存在的岩藻糖绝大多数为L-岩藻糖(L-Fucose)，D构型的岩藻糖仅作为稀有糖，发现于一些糖甘类化合物中。

L-岩藻糖较大量地存在于海藻及树胶中，也发现于某些细菌的多糖中。岩藻糖作为糖蛋白中糖链的组成部分，广泛存在于各类细胞表面的质膜上。岩藻糖比一般六碳糖在第六碳原子上少一个羟基，所以岩藻糖比其他单糖亲水性弱，而疏水性强一些。在某些血型物质分子中的岩藻糖是一定的血型的标记。通常从海藻中提取岩藻糖，先用酸处理，中和后，以苯腙形式析出，除去苯肼，可得α-L-岩藻糖结晶，熔点145℃。

L-岩藻糖是一种活性分子，极易溶于水，具有高稳定性。L-岩藻糖可用于食品、医药和特别是婴儿配方食品，药品和科学研究等，其作用有：

抗感染，抗癌，增强免疫力：L-Fucose可与病毒、细菌、毒素结合，阻止其感染细胞，从而增强机体抵抗力。

营养补充：L-岩藻糖是人体8种必需糖之一，也是人母乳中寡糖之一（人母乳中还含有唾液酸、N-乙酰氨基葡萄糖、D-葡萄糖和D-半乳糖等），是理想的膳食补充剂和婴儿食品的营养补充剂和免疫增强因子。

发明内容

本发明要解决的技术问题之一是提供一种用于护肤的组合物，其具有抗衰老、抗皮肤发炎和保湿功能。

本发明要解决的技术问题之二是提供该用于护肤的组合物在制备具有抗衰老、抗皮肤发炎和保湿功能的护肤品组合物中的应用。

为解决上述技术问题，本发明提供一种用于护肤的组合物，该组合物主要是由以下重量份的原料制成：L-岩藻糖0.1-5份、辅酶Q100.05-5份、透明质酸0.1-5份、神经酰胺0.05-2份、mPEG1-25份。优选为：L-岩藻糖0.25份、辅酶Q101份、透明质酸0.2份、神经酰胺0.3份、mPEG5份。

本发明选择L-岩藻糖、辅酶Q10、透明质酸、MPEG、神经酰胺进行组合，将这些原料组合使得其产生协同作用，从而能有效用于护肤。本发明利用L-岩藻糖的天然活性及减缓肌肤老化的明显功效，综合其他有效的化妆品添加成分辅酶Q10、透明质酸、神经酰胺等，再利用专门的mPEG（聚乙二醇修饰剂）进行性能改善，最后达到更加完美的护肤功效，该组合物在行业内处于领先水平。

L-岩藻糖是一种活性分子，极易溶于水，具有高稳定性。L-岩藻糖可用于食品、医药和特别是婴儿配方食品，药品和科学研究等，其作用有：抗感染，抗癌，增强免疫力：L-岩藻糖可与病毒、细菌、毒素结合，阻止其感染细胞，从而增强机体抵抗力。营养补充：L-岩藻糖是人体8种必需糖之一，也是人母乳中寡糖之一（人母乳中还含有唾液酸、N-乙酰氨基葡萄糖、D-葡萄糖和D-半乳糖等），是理想的膳食补充剂和婴儿食品的营养补充剂和免疫增强因子。

辅酶Q10是一种脂溶性抗氧化剂，辅酶Q10是人类生命不可缺少的重要元素之一，能激活人体细胞和细胞能量的营养，具有提高人体免疫力、增强抗氧化、延缓衰老和增强人体活力等功能。辅酶Q10在体内主要有两个作用，一是在营养物质在线粒体内转化为能量的过程中起重要的作用，二是有明显的抗脂质过氧化作用。它是细胞线粒体中的能量转换剂，它通过转移和传递电子参与“三羧酸循化”产生ATP（三磷酸腺苷），即能量因子供细胞代谢使用。人类在20岁时，自主合成的辅酶Q10能力达到顶峰，维持至50岁左右。以后会逐年下降，因为寄存辅酶Q10的细胞线粒体DNA物质被氧自由基破坏，导致自主合成辅酶Q10减少。结果使人体细胞，特别是心脏细胞的代谢功能下降，“老态龙钟”就显现出来了。实验证明体内辅酶Q10变成醇式后通过直接与过氧化物自由基反应，并且可以再生vE，独力并协同vE发挥抗氧化剂的作用。体外实验还发现抗氧化剂辅酶Q10可以保护哺乳动物细胞免于线粒体氧化应激引发的凋亡，而肿瘤坏死因数-（TNF-）或癌基因抑活药均没有这种作用，临床研究表明口服辅酶Q10对于治疗帕金森综合症、亨廷顿舞蹈病及阿尔茨海默症等与线粒体功能障碍及衰老有关的神经退行性疾病有显著疗效。随年龄增长的免疫功能下降是自由基和自由基反应的结果，辅酶Q10作为一种强抗氧化剂单独使用或与维生素B6（吡哆醇）结合使用可抑制自由基对免疫细胞上受体与细胞分化和活性相关的微管系统的修饰作用，增强免疫系统，延缓衰老。皱纹的增加、皮肤的老化与辅酶Q10含量有关，含量越低，皮肤越易老化，面部的皱纹也越多。辅酶Q10可以通过口服来摄取，当细胞中含足够辅酶Q10即能量代谢会有所增强，清除自由基，缓解皱纹加重。此外，也可以涂擦含有辅酶Q10的护肤品，提高外用也能增加细胞对辅酶Q10的吸收，从而减少皱纹的形成。

透明质酸是一种酸性粘多糖，1934年美国哥伦比亚大学眼科教授Meyer等首先从牛眼玻璃体中分离出该物质。透明质酸以其独特的分子结构和理化性质在机体内显示出多种重要的生理功能，如润滑关节，调节血管壁的通透性，调节蛋白质，水电解质扩散及运转，促进创伤愈合等。尤为重要的是，透明质酸具有特殊的保水作用，是目前发现的自然界中保湿性最好的物质，被称为理想的天然保湿因子（Natural moisturizing factor，NMF，例如：2%的纯透明质酸水溶液能牢固地保持98%水分。透明质酸是一种多功能基质，透明质酸（玻尿酸）HA广泛分布于人体各部位。其中皮肤也含有大量的透明质酸。人类皮肤成熟和老化过程也随着透明质酸的含量和新陈代谢而变化，它可以改善皮肤营养代谢，使皮肤柔嫩、光滑、去皱、增加弹性、防止衰老，在保湿的同时又是良好的透皮吸收促进剂。与其他营养成分配合使用，可以起到促进营养吸收的更理想效果。大量研究表明，人体皮肤表层（角质层）水分含量约占15－30%，低于或高于此值均使人不适，具有燥感或腻感，长期如此，会使皮肤干裂或水肿，从而使皮肤失去弹性，粗糙老化。而透明质酸（玻尿酸）HA作用于皮肤内部调理后，可在不同环境中自动调节，始终维持皮肤水分在25－30%，保持皮肤的湿润、清爽，使皮肤更富有弹性，起到抗皱防皱、延缓人全皮肤衰老、美容养颜的作用。透明质酸是人体真皮层的其中一种成份，具备保持水份的能力，份量更高达其本身重量的100倍，使用含有透明质酸HA的保养品，可以改善干燥和已出现皱纹的肌肤，使其恢复原有的光滑和弹性，因此，透明质酸是改善干燥及老化肌肤的最理想产品。

神经酰胺是近年来开发出的最新一代保湿剂，是一种水溶性脂质物质，它和构成皮肤角质层的物质结构相近，能很快渗透进皮肤，和角质层中的水结合，形成一种网状结构，锁住水分。神经酰胺是存在于人体皮肤最外侧的角质层细胞间类脂体的主要构成成分(>50%)起着防止水分散发及对外部刺激有防护功能的重要作用，承担着保护皮肤和滋润、保湿功能。也有许多研究报告指出，可以通过使用含神经酰胺的外用膏类产品，达到防止过敏性皮肤病的目的和抑制黑色素褐斑的效果。

mPEG是聚乙二醇修饰剂，是带有官能团的聚乙二醇，目前主要用于蛋白质以及多肽药物修饰，以增加体内半衰期，降低免疫原性，同时还可以增加药物的水溶性，又叫修饰性PEG、修饰性聚乙二醇，是经过化学修饰基团或者生物活性基团修饰的PEG。在药物开发研究中，为了增加蛋白或多肽药物在体内半衰期，降低免疫原性，同时增加药物的水溶性，使用有化学基团修饰的PEG与蛋白药物共价结合，与蛋白结合之前的带有修饰性基团的PEG就是修饰性PEG。

在该组合物中加入辅料，采用本领域常规方法可以制成任何一种常用护肤品。优选的，所述的护肤品是洁面乳、润肤霜、眼霜、护肤乳液、或护肤水。

优选的，针对不同的护肤品剂型，可以加入以下不同的辅料，见表1：

表1

此外，本发明还提供该组合物的应用，包括：该组合物在制备具有抗衰老功能的护肤品中的应用，该组合物在制备具有抗皮肤发炎功能的护肤品中的应用，该组合物在制备具有保湿功能的护肤品中的应用。

本发明具有以下有益效果：本发明较早得将L-岩藻糖应用到护肤品中，将为消费者带来更多的护肤选择，以及更佳的使用体验。本发明同时提供了可直接用于皮肤护理的护肤品，如洁面乳、润肤霜、眼霜、护肤乳液、护肤水等，具体效果见表2。实验证明，以L-岩藻糖等为关键组分制作的本发明护肤组合物，通过科学的性能组合，能减缓肌肤老化，有良好的肌肤保湿、抗氧化、抗炎症等功效。该护肤组合物在改善皮肤水分含量方面，达到了提升皮肤角质层的细胞间质水份含量的效果；可增加皮肤组织生成，减少皱纹，增强皮肤弹性，延迟皮肤老化。

表2

具体实施方式

以下通过实施例对本发明作进一步的阐述：

实施例1：洁面乳

本实施例涉及制备一种有效清洁面部、保持肌肤湿润、增强皮肤抗衰老性和抗敏性的洁面乳，按比例称取原料：L-岩藻糖0.1g、辅酶Q100.05g、透明质酸0.1g，mPEG1g，神经酰胺0.05g，脂肪酸甘油酯45g；纳米级胶原蛋白0.1g；去离子水45g；增稠剂0.1g。将所有物质与其他配料混合并搅拌乳化，然后进行微波真空处理得到岩藻糖洁面乳。

实施例2：洁面乳

本实施例涉及制备一种有效清洁面部、保持肌肤湿润、增强皮肤抗衰老性和抗敏性的洁面乳，按比例称取原料：L-岩藻糖5g、辅酶Q105g、透明质酸5g，mPEG25g，神经酰胺2g，脂肪酸甘油酯15g；纳米级胶原蛋白5g；去离子水20g；增稠剂2g。将所有物质与其他配料混合并搅拌乳化，然后进行微波真空处理得到岩藻糖洁面乳。

实施例3：洁面乳

本实施例涉及制备一种有效清洁面部、保持肌肤湿润、增强皮肤抗衰老性和抗敏性的洁面乳，按比例称取原料：L-岩藻糖0.25g、辅酶Q101g、透明质酸0.2g，mPEG5g，神经酰胺0.3g，脂肪酸甘油酯25g；纳米级胶原蛋白0.5g；去离子水30g；增稠剂1g。将所有物质与其他配料混合并搅拌乳化，然后进行微波真空处理得到岩藻糖洁面乳。

实施例4：润肤霜

本实施例涉及制备一种具有良好的肌肤保湿、抗氧化、抗炎症、防紫外线功效的润肤霜，按比例称取原料：L-岩藻糖0.1g、辅酶Q100.05g、透明质酸0.1g，mPEG1g，神经酰胺0.05g，甘油脂10g；凡士林5g；液状石蜡10g；去离子水70g，将以上原料混合加热到70～80℃，搅拌溶解后乳化均质，加入香精等再一次乳化均质。再经真空脱气、过滤、冷却后制成。

实施例5：润肤霜

本实施例涉及制备一种具有良好的肌肤保湿、抗氧化、抗炎症、防紫外线功效的润肤霜，按比例称取原料：L-岩藻糖5g、辅酶Q105g、透明质酸5g，mPEG25g，神经酰胺2g，甘油脂6g；凡士林8g；液状石蜡6g；去离子水：40g。将以上原料混合加热到70～80℃，搅拌溶解后乳化均质，加入香精等再一次乳化均质。再经真空脱气、过滤、冷却后制成。

实施例6：润肤霜

本实施例涉及制备一种具有良好的肌肤保湿、抗氧化、抗炎症、防紫外线功效的润肤霜，按比例称取原料：L-岩藻糖0.25g、辅酶Q101g、透明质酸0.2g，mPEG5g，神经酰胺0.3g，甘油脂8g；凡士林6g；液状石蜡8g；去离子水55g。将以上原料混合加热到70～80℃，搅拌溶解后乳化均质，加入香精等再一次乳化均质。再经真空脱气、过滤、冷却后制成。

实施例7：眼霜

本实施例涉及制备一种抗皱抗衰老的眼霜，按比例称取原料：L-岩藻糖0.1g、辅酶Q100.05g、透明质酸0.1g，mPEG1g，神经酰胺0.05g，去离子水80g，榈酸乙基己酯1g、异硬脂醇新戊酸酯1g，甘油酯1g；将各种原料混合均匀，加热到75℃～80℃，冷却至45℃后，再加入香精，搅拌至室温，分装即得。

实施例8：眼霜

本实施例涉及制备一种抗皱抗衰老的眼霜，按比例称取原料L-岩藻糖5g、辅酶Q105g、透明质酸5g，mPEG25g，神经酰胺2g，去离子水30g，榈酸乙基己酯10g、异硬脂醇新戊酸酯10g，甘油酯10g；将各种原料混合均匀，加热到75℃～80℃，冷却至45℃后，再加入香精，搅拌至室温，分装即得。

实施例9：眼霜

本实施例涉及制备一种抗皱抗衰老的眼霜，按比例称取原料：L-岩藻糖0.25g、辅酶Q101g、透明质酸0.2g，mPEG5g，神经酰胺0.3g，去离子水55g，榈酸乙基己酯5g、异硬脂醇新戊酸酯5g，甘油酯5g；将各种原料混合均匀，加热到75℃～80℃，冷却至45℃后，再加入香精，搅拌至室温，分装即得。

实施例10：护肤乳液

本实施例涉及制备一种具有良好的肌肤保湿、抗氧化、抗炎症功效的护肤乳液，按比例称取原料：L-岩藻糖0.1g、辅酶Q100.05g、透明质酸0.1g，mPEG1g，神经酰胺0.05g，去离子水90g，甘油酯1g,同加热到70～80℃，将各种原料混合均匀，进入乳化均质机中乳化均质，再加入香精等原料再次乳化均质，再经真空脱气、过滤、冷却后制成。

实施例11：护肤乳液

本实施例涉及制备一种具有良好的肌肤保湿、抗氧化、抗炎症功效的护肤乳液，按比例称取原料：L-岩藻糖5g、辅酶Q105g、透明质酸5g，mPEG25g，神经酰胺2g，去离子水50g，甘油酯5g，同加热到70～80℃，将各种原料混合均匀，进入乳化均质机中乳化均质，再加入香精等原料再次乳化均质，再经真空脱气、过滤、冷却后制成。

实施例12：护肤乳液

本实施例涉及制备一种具有良好的肌肤保湿、抗氧化、抗炎症功效的护肤乳液，按比例称取原料：L-岩藻糖0.25g、辅酶Q101g、透明质酸0.2g，mPEG5g，神经酰胺0.3g，去离子水70g，甘油酯3g，同加热到70～80℃，将各种原料混合均匀，进入乳化均质机中乳化均质，再加入香精等原料再次乳化均质，再经真空脱气、过滤、冷却后制成。

实施例13：护肤水

本实施例涉及制备一种补水保湿、延缓衰老、减少面部细纹的护肤水，按比例称取原料：L-岩藻糖0.1g、辅酶Q100.05g、透明质酸0.1g，mPEG1g，神经酰胺0.05g，甘油脂10g，去离子水70g，将各种原料混合均匀，进入乳化均质机中乳化均质，再加入香精等原料再次乳化均质，再经真空脱气、过滤、冷却后制成。

实施例14：护肤水

本实施例涉及制备一种补水保湿、延缓衰老、减少面部细纹的护肤水，按比例称取原料：L-岩藻糖5g、辅酶Q105g、透明质酸5g，mPEG25g，神经酰胺2g，甘油脂20g，去离子水40g，将各种原料混合均匀，进入乳化均质机中乳化均质，再加入香精等原料再次乳化均质，再经真空脱气、过滤、冷却后制成。

实施例15：护肤水

本实施例涉及制备一种补水保湿、延缓衰老、减少面部细纹的护肤水，按比例称取原料：L-岩藻糖0.25g、辅酶Q101g、透明质酸0.2g，mPEG5g，神经酰胺0.3g，甘油脂15g，去离子水55g，将各种原料混合均匀，进入乳化均质机中乳化均质，再加入香精等原料再次乳化均质，再经真空脱气、过滤、冷却后制成。

以下通过试验例对本发明的有益效果作进一步的阐述：

试验例1抗衰老试验

1.材料

（1）动物：昆明种小白鼠，雄性，3～4个月大，100只，体重(30±3)g；14个月大，40只，体重(55±4)g，均购于安徽医科大学实验动物中心,合格证号为:皖医实动准第01号。

（2）药品：TEA由江苏药物研究所植化室提供，本发明组合物。用1％羧甲基纤维素钠（CMC_Na）制成混悬液,供ig给药；维生素E（VE）,Merck公司产品，用少量无水乙醇溶解后，再用1％CMC_Na制成混悬液,供ig给药（乙醇终浓度＜0.2％)；D_半乳糖(D_gal)，Sigma公司产品，用生理盐水配成浓度为0.5％溶液，高压灭菌，置4℃冰箱贮存备用。

（3）试剂：硫代巴比妥酸（TBA），上海试剂二厂产品;三氯乙酸（TCA），如皋市化学试剂厂；1，1，3，3_四乙氧基丙烷（TEP），5,5′_二硫代对二硝基苯甲酸（DTNB）,均为Fluka产品；还原型谷胱甘肽（GSH，AR级），上海试剂三厂产品；氧化型谷胱甘肽（GSSG），上海丽珠东风生物技术有限公司；邻苯二甲醛（OPT），上海试剂一厂产品；牛血清白蛋白，N_乙基马来酰亚胺（NEM）均为Sigma公司产品；酚试剂，上海市医学化验所产品；SOD测定试剂盒，南京建成生物工程研究所产品。

（4）仪器：GL20A型全自动高速冷冻离心机，湖南仪器总厂离心机厂生产；Hitach_650型荧光分光光度计，日本日立公司产品；721分光光度计，上海第三分析仪器厂产品；7530_G紫外分光光度计，上海雷磁仪器厂；CPS_1A超声波粉碎机，上海超声波仪器厂；内切式组织匀浆机，浙西机械厂。

2.方法

（1）D_gal衰老小鼠模型的制备。小鼠scD_gal40mg·kg^-1,隔日1次，共10wk。每周称体重1次，并按此调整D_gal剂量。

（2）肝、脑细胞中线粒体的制备。眼球放血处死小鼠，立即取出肝脏和脑组织，分别用冰冷的生理盐水制成10％匀浆（W/V），4℃离心，（3500r·min^-1，10min）,取上清液，再4℃离心（11812r·min^-1，15min）,沉淀为线粒体。将线粒体悬于生理盐水中，-20℃贮存待测。一部分线粒体悬液经CPS_1A超声波粉碎机粉碎，60μA，5s/次，间隙10s，反复4次使线粒体微粒破碎，4℃离心（2000r·min^-1，10min）,取上清液供酶活力测定。以上操作皆在4℃以下进行。另一部分线粒体悬液直接供丙二醛（MDA）与蛋白质的测定。

（3）线粒体MDA含量的测定。采用硫代巴比妥酸比色法^[8]，根据TEP标准曲线计算MDA含量，结果以nmol·mg^-1Pr表示。蛋白质含量测定采用改良Lowry氏法^[9]。

（4）线粒体中谷胱甘肽过氧化物酶(GSHpx)活性测定。取线粒体裂解液上清0.4ml，用DTNB法检测^[10]，GSHpx活力单位以μmol·min^-1.mg^-1Pr表示。

（5）线粒体锰超氧化物歧化酶（Mn_SOD）活性测定。按SOD测定试剂盒说明书进行，采用黄嘌呤氧化酶法测Mn_SOD活性。其活力单位以NU(国际单位)·mg^-1Pr表示。

（6）线粒体GSH含量测定采用DTNB比色法，在412nm处测吸光度值。根据标准曲线计算GSH含量，结果以nmol·mg^-1Pr表示。

（7）线粒体GSSG含量测定。取线粒体裂解液上清1.0ml，加入0.04mol·L^-1NEM水溶液0.4ml，室温放置30min后，加0.187mol·L^-1NaOH溶液1.5ml，OPT溶液（1mg·ml^-1）0.1ml充分混合，室温放置30min。在激发波长350nm,发射波长430nm处测荧光强度（F）值，并在标准曲线上查出相应的GSSG含量，以nmol·mg^-1Pr表示。

以下数据处理实验数据以

表示，采用t检验判定。

表3本发明组合物对D-半乳糖衰老小鼠肝、脑线粒体中MDA含量和抗氧

表4本发明组合物对D-半乳糖哀老小鼠肝.脑线粒体中GSH,GSSG

表5本发明组合物对17月龄小鼠肝，脑线粒体中MDA含量和抗氧化酶活性的影响

表6本发明组合物对17月龄小鼠肝,脑线粒体中GSH、脑线粒体中GSH、GSSH含量和GSH/GSSG比值的影响

3．结果

本试验例结果如表3-表6所示，本发明组合物对D_gal衰老小鼠肝、脑细胞中线粒体MDA含量和抗氧化能力的影响设同龄(5～6mon)正常对照组、D_gal模型组、VE(50mg·kg^-1.d^-1)阳性对照组和本发明组合物4组。D_gal处理10wk后，结果表明，与同龄正常对照组相比，D_gal衰老小鼠肝、脑线粒体的MDA含量显著升高；GSHPX活性和Mn_SOD活性均显著降低；GSH含量明显降低，GSSG含量明显升高，GSH/GSSG比值显著下降(P＜0.01)。本发明组合物和VE均可使MDA含量显著降低；GSHPX和Mn_SOD活性显著升高(P＜0.01)；本发明组合物和VE均可使其降低的GSH含量升高，增高的GSSG含量下降，从而使降低的GSH/GSSG比值显著升高(P＜0.01)。本发明组合物与VE均可使D_gal衰老小鼠的脂质过氧化物MDA含量降低，同时上调D_gal衰老小鼠的抗氧化能力。

本发明组合物对老前期小鼠肝、脑细胞线粒体MDA含量和抗氧化能力的影响设青龄对照（3mon）、衰老前期对照（17mon）、本发明组合物和VE（50mg·kg^-1.d^-1ig,14～17mon）4组。给药12wk，末次给药后24h处死动物，检测各种指标。结果表明，与青龄小鼠相比，17mon小鼠肝、脑线粒体中MDA含量显著升高;GSHPX活性和Mn_SOD活性均显著降低；GSH含量明显降低或有下降趋势，GSSG含量明显升高或有上升趋势，从而使GSH/GSSG比值显著降低(P＜0.05或P＜0.01)。本发明组合物和VE均可使MDA含量显著降低；并均可上调GSHPX、Mn_SOD活性；上调GSH含量，降低GSSG含量，使GSH/GSSG比值显著升高(P＜0.05或P＜0.01)。本发明组合物和VE均可降低衰老前期小鼠体内活性氧的损伤效应和改善其体内抗氧化能力。

试验例2抗皮肤发炎试验

1.材料

（1）实验动物：SD大鼠64只，雄性，体重250±20g，由泸州医学院动物科提供。

（2）仪器：足趾容积测量仪，PV-200，成都泰盟科技有限公司。

（3）试验试剂：花生四烯酸：sigma公司，货号A9673。以0.2mol/L的碳酸盐缓冲液（PH11.2）稀释为lg/L的浓度；角叉菜胶：sigma公司，货号046K0165。用生理盐水溶解，浓度为1%。

（4）主要实验药品：本发明护肤液、本发明护肤液10倍浓缩液、皿治林（以1%聚山梨醇酯80配制成混悬液）、地塞米松（用生理盐水溶解）。

2.方法：

实验一：本发明护肤液抑制加氧酶途径的实验研究

（1）实验动物分组：雄性SD大鼠32只(体重250±20g)，随机分为四组,每组8只,本发明护肤液中剂量组(中药用量相当于人体用量的10倍),给药量按6ml/kg/天计。阳性对照组（皿治林），给药量按0.3mg/kg/天计。空白对照组（1%聚山梨醇脂80）。

（2）动物模型的制备及给药。

灌药：上述四组动物于造模前8天开始灌胃，按体重灌服药物，药物浓度校正为每100g大鼠体重每日灌饲药液6ml，每日分两次灌药，空白对照组灌服等容量的1%聚山梨醇酯80。

造模：在最后一次灌喂后两小时，于大鼠左足后爪皮下注射0.1ml新鲜配制的花生四烯酸。右足后爪皮下注射0.1ml的碳酸盐缓冲液作对照。在注射花生四烯酸后2、4、6、8小时四个时间点分别测定大鼠两侧足爪体积的改变。

（3）炎性反应的评估

炎性反应的强度以鼠爪肿胀的体积作为评估指标。

足爪肿胀体积=注射花生四烯酸鼠爪体积-注射碳酸盐缓冲液鼠爪体积

不同药物对鼠爪水肿的抑制率=（对照组鼠爪肿胀体积-给药组鼠爪肿胀体积）/对照组鼠爪肿胀体积*100%

（4）统计学方法

应用SPSS10.0软件，采用方差分析进行统计学分析。

实验二：本发明护肤液抑制环加氧酶途径的实验研究

（1）实验动物分组：雄性SD大鼠32只(体重250±20g)，随机分为四组,每组8只,本发明护肤液中剂量组(中药用量相当于人体用量的10倍),给药量按6ml/kg/天计。本发明护肤液小剂量组(中药用量相当于人体用量的5倍),给药量按3ml/kg/天计。阳性对照组（地塞米松），给药量按1mg/kg/天计。空白对照组（生理盐水）。

（2）动物模型的制备及给药。

灌药：上述本发明护肤液中、小剂量组动物于造模前8天开始灌胃，每日按体重灌服药物，药物浓度校正为每100g大鼠体重每日灌饲药液6ml，每日分两次灌药，阳性对照组灌服地塞米松溶液，空白对照组灌服等容量的生理盐水。

造模：在最后一次灌喂后2小时后，于大鼠左足爪皮下注射1%角叉菜胶后2、4、6、8小时四个时间点分别测定大鼠两侧足爪厚度的改变。

（3）炎性反应的评估

炎性反应的强度以鼠爪肿胀的体积作为评估指标。

足爪肿胀体积=注射花生四烯酸鼠爪体积-注射生理盐水鼠爪体积

不同药物对鼠爪水肿的抑制率=（对照组鼠爪肿胀体积-给药组鼠爪肿胀体积）/对照组鼠爪肿胀体积*100%

（4）统计学方法

应用SPSS10.0软件，采用方差分析进行统计学分析。

3．结果

实验一：本发明护肤液抑制脂加氧酶途径的实验研究结果

花生四烯酸诱导的炎症反应：

如表7所示，大鼠皮下注射0.1ml的花生四烯酸可以诱导强烈、持续的鼠爪水肿，属爪足趾皮肤发紫。该炎症反应在注射后2h达到顶峰，空白对照组鼠爪厚度增加为（0.871±0.056），本组试验给与皿治林作阳性对照，在注射花生四烯酸前灌胃皿治林可显著、快速、持续地抑制花生四烯酸诱导的鼠爪水肿（P<0.05）。与对照组相比,皿治林在2、4、6、8h四个时间点对鼠爪水肿的抑制率分别为38.5%、29.0%、20.9%、15.1%。

不同药物对鼠爪水肿的影响：

如表7所示，在注射前灌喂8天本发明护肤液（中药用量相当于人体用量的10倍），按6ml/kg/天计，可显著快速地抑制花生四烯酸诱导的鼠爪水肿的形成与发展，与空白组相比（P<0.05）。在2、4、6、8h的鼠爪水肿抑制率分别为，14.4%、11.8%、23.16%、19.3%。在6h时肿胀抑制率达高峰，药效持续时间长。但对鼠爪肿胀抑制不如皿治林明显，但两者相比没有显著性差异（P<0.05）。

而本发明护肤液小剂量组（中药用量相当于人体用量的5倍），按3ml/kg/天计，也可显著抑制鼠爪水肿的形成。虽然鼠爪水肿厚度略高于本发明口服液剂量组，但两组相比差异无显著性（P<0.05），在2、4、6、8h的鼠爪水肿抑制率分别为，13.9%、11.5%、22.3%、17.3%。在6h时肿胀抑制率达高峰。与皿治林组相比没有显著性差异（P>0.05）。

表7本发明护肤液、皿治林对花生四烯酸诱导的鼠爪肿胀体积的影响

实验二：本发明护肤液抑制环加氧酶途径的实验研究结果

角叉菜胶诱导的炎症反应：

如表8所示，大鼠皮下注射1%角叉菜胶可诱导强烈、持续的鼠爪水肿，属爪皮肤颜色趋于正常。该炎症反应在注射后4小时达到高峰，空白对照组鼠爪厚度增加（0.339±0.068），本组试验给与地塞米松做阳性对照，在注射1%角叉菜胶前灌喂地塞米松可显著、快速、持续地抑制角叉菜胶诱导的鼠爪水肿，与空白组比较存在显著性差异（P<0.05)。与地塞米松组相比肿胀程度明显且存在显著性差异（P<0.05)。

如表8所示，本发明护肤液小剂量组（中药用量相当于人体用量的5倍），按3ml/kg/天计，不能显著抑制鼠爪水肿的形成，属爪水肿体积大于祛风止痒口服液中剂量组，两组相比有显著性差异（P<0.05）。水肿程度明显高于阳性对照组（地塞米松），有显著性差异（P<0.05）。与空白对照组相比不存在显著性差异（P>0.05）。

表8本发明护肤液、地塞米松对角叉菜胶诱导的鼠爪肿胀体积的影响

Claims (8)

1.一种用于护肤的组合物，其特征在于，该组合物主要是由以下重量份的原料制成：L-岩藻糖0.1-5份、辅酶Q100.05-5份、透明质酸0.1-5份、神经酰胺0.05-2份、mPEG1-25份。

2.如权利要求1所述的组合物，其特征在于，该组合物主要是由以下重量份的原料制成：L-岩藻糖0.25份、辅酶Q101份、透明质酸0.2份、神经酰胺0.3份、mPEG5份。

3.如权利要求1或2所述的组合物，其特征在于，在该组合物中加入辅料，制成护肤品。

4.如权利要求3所述的组合物，其特征在于，所述的护肤品是洁面乳、润肤霜、眼霜、护肤乳液、或护肤水。

5.如权利要求4所述的组合物，其特征在于，所述的护肤品是洁面乳，其辅料包括表面活性剂、纳米级胶原蛋白、去离子水、增稠剂；所述护肤品是润肤霜，其辅料包括甘油酯、凡士林、液状石蜡、去离子水；所述护肤品是眼霜，其辅料包括去离子水、榈酸乙基己酯、异硬脂醇新戊酸酯、甘油酯；所述护肤品是护肤乳液，其辅料包括去离子水、甘油酯；所述护肤品是护肤水，其辅料包括去离子水、甘油酯。

6.一种如权利要求1-5任一项所述的组合物在制备具有抗衰老功能的护肤品中的应用。

7.一种如权利要求1-5任一项所述的组合物在制备具有抗皮肤发炎功能的护肤品中的应用。

8.一种如权利要求1-5任一项所述的组合物在制备具有保湿功能的护肤品中的应用。