CN103263663B - 一种抗血小板溶栓素在制备治疗vwf缺陷型血管栓塞性疾病的药物中的应用 - Google Patents

一种抗血小板溶栓素在制备治疗vwf缺陷型血管栓塞性疾病的药物中的应用 Download PDF

Info

Publication number
CN103263663B
CN103263663B CN201310228355.1A CN201310228355A CN103263663B CN 103263663 B CN103263663 B CN 103263663B CN 201310228355 A CN201310228355 A CN 201310228355A CN 103263663 B CN103263663 B CN 103263663B
Authority
CN
China
Prior art keywords
vwf
platelet
thrombolysin
platelet thrombolysin
deficiency
Prior art date
Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
Active
Application number
CN201310228355.1A
Other languages
English (en)
Other versions
CN103263663A (zh
Inventor
倪合宇
热合满阿迪力
雷曦
戴向荣
李小羿
Current Assignee (The listed assignees may be inaccurate. Google has not performed a legal analysis and makes no representation or warranty as to the accuracy of the list.)
ZHAOKE PHARMACEUTICAL (HEFEI) CO Ltd
Original Assignee
ZHAOKE PHARMACEUTICAL (HEFEI) CO Ltd
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by ZHAOKE PHARMACEUTICAL (HEFEI) CO Ltd filed Critical ZHAOKE PHARMACEUTICAL (HEFEI) CO Ltd
Priority to CN201310228355.1A priority Critical patent/CN103263663B/zh
Publication of CN103263663A publication Critical patent/CN103263663A/zh
Application granted granted Critical
Publication of CN103263663B publication Critical patent/CN103263663B/zh
Active legal-status Critical Current
Anticipated expiration legal-status Critical

Links

Landscapes

  • Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
  • Medicines That Contain Protein Lipid Enzymes And Other Medicines (AREA)

Abstract

本发明涉及医药领域，尤其涉及一种抗血小板溶栓素在制备治疗VWF缺陷型血管栓塞性疾病的药物中的应用。由于VWF缺陷型生物体内并不含有VWF因子，因此，抗血小板溶栓素对VWF缺陷型血管栓塞性疾病的治疗作用并非通过抑制GPIb蛋白与VWF相互作用实现的。实验表明，经抗血小板溶栓素处理后，野生型小鼠（体内含有VWF）提睾肌动脉血栓模型内聚集的血小板多于VWF缺陷型小鼠，表明抗血小板溶栓素对VWF缺陷型小鼠的效应强于野生型小鼠。

Description

一种抗血小板溶栓素在制备治疗VWF缺陷型血管栓塞性疾病的药物中的应用
技术领域
本发明涉及医药领域，尤其涉及一种抗血小板溶栓素在制备治疗VWF缺陷型血管栓塞性疾病的药物中的应用。
背景技术
本发明所述抗血小板溶栓素(Antiplateletthrombolysin，APT)是从尖吻蝮蛇蛇毒中分离出来的一种蛋白水解酶，由α链、β链两条肽链组成，α链氨基酸序列如SEQIDNO.1所示，β链氨基酸序列如SEQIDNO.2所示。
目前的研究结果表明，抗血小板溶栓素具有明显的溶解纤维蛋白原和抑制血小板聚集的作用。其中，抗血小板溶栓素对血小板聚集的抑制作用主要是通过抑制GPIb与VWF相互作用，GPIb是血小板表面最主要的糖蛋白之一，它只介导血小板在高剪切力作用下的粘附。VWF是血管性血友病因子的缩写，常染色体遗传的VWF数量和/或结构异常导致的常见出血性疾病，以出血倾向、出血时间延长、血小板粘附功能下降，伴或不伴Ⅷ因子数量和/或功能异常为主要临床特点。GPIb与血浆或血管内皮细胞的VWF在高剪切力条件下相互作用，降低血小板的流速。GPIb与VWF特异性结合，使血小板粘附到血管壁上，同时激活了其它受体的反应，包括激活GPIIb/IIIα受体，使之与纤维蛋白原的结合，导致血小板聚集，从而引起血栓的形成。因此，通过阻断GPIb与血浆VWF结合，可阻止血小板粘附在血管内皮细胞壁上，抑制血小板聚集。
可见，现有的研究结果表明，抗血小板溶栓素对血小板聚集的抑制作用是通过抑制GPIb与VWF在高剪切力条件下相互作用实现的。而对于VWF缺陷型，抗血小板溶栓素是否能够同样起到抑制血小板聚集的作用尚不明确。
发明内容
有鉴于此，本发明要解决的技术问题在于提供一种抗血小板溶栓素在制备治疗VWF缺陷型血管栓塞性疾病的药物中的应用，本发明发现，抗血小板溶栓素在缺陷VWF的条件下，仍能够起到抑制血小板聚集的作用，从而达到治疗血管栓塞性疾病的目的。
本发明提供了一种抗血小板溶栓素在制备治疗VWF缺陷型血管栓塞性疾病的药物中的应用，抗血小板溶栓素由α链、β链两条肽链组成，其中，α链氨基酸序列如SEQIDNO.1所示，β链氨基酸序列如SEQIDNO.2所示。
由于VWF缺陷型生物体内并不含有VWF因子，因此，抗血小板溶栓素对VWF缺陷型血管栓塞性疾病的治疗作用并非通过抑制GPIb蛋白与VWF相互作用实现的。
作为优选，VWF缺陷型血管栓塞性疾病为VWF缺陷型提睾肌动脉栓塞。
作为优选，本发明提供的治疗VWF缺陷型血管栓塞性疾病的药物为化学药物或生物制剂。
作为优选，治疗VWF缺陷型血管栓塞性疾病的药物，包括抗血小板溶栓素与药学上可接受的辅料。
优选的，本发明提供的治疗VWF缺陷型血管栓塞性疾病的药物为口服制剂或注射剂。
更优选的，治疗VWF缺陷型血管栓塞性疾病的口服制剂为片剂、胶囊剂、丸剂、颗粒剂、滴丸剂、微囊剂或微丸剂。
更优选的，治疗VWF缺陷型血管栓塞性疾病的注射剂中抗血小板溶栓素的质量-体积浓度为6μg/mL。
本发明提供了一种抗血小板溶栓素在制备治疗VWF缺陷型血管栓塞性疾病的药物中的应用。由于VWF缺陷型生物体内并不含有VWF因子，因此，抗血小板溶栓素对VWF缺陷型血管栓塞性疾病的治疗作用并非通过抑制GPIb蛋白与VWF相互作用实现的。可见，本发明提供的抗血小板溶栓素的用途，与现有技术中公布的用途作用机理不相同。实验表明，经抗血小板溶栓素处理后，野生型小鼠（体内含有VWF）提睾肌动脉血栓模型内聚集的血小板多于VWF缺陷型小鼠，表明抗血小板溶栓素对VWF缺陷型小鼠的效应强于野生型小鼠。
附图说明
图1示给予对照缓冲液的野生型小鼠提睾肌动脉血栓模型内血栓形成的情况；
图2示经抗血小板溶栓素处理的野生型小鼠提睾肌动脉血栓模型内血栓形成的情况；
图3示给予对照缓冲液的VWF缺陷型小鼠提睾肌动脉血栓模型内血栓形成的情况；
图4示经抗血小板溶栓素处理的VWF缺陷型小鼠提睾肌动脉血栓模型内血栓形成的情况；
图5示小鼠提睾肌动脉血栓模型内血小板平均荧光强度（MFI），阴影区域表示标准误SEM；其中，图5（a）示抗血小板溶栓素对野生型小鼠提睾肌动脉血栓模型内血小板平均荧光强度影响，曲线1示给予对照缓冲液的野生型小鼠提睾肌动脉血栓模型内血小板平均荧光强度随时间变化情况，曲线2示给予抗血小板溶栓素的野生型小鼠提睾肌动脉血栓模型内血小板平均荧光强度随时间变化情况；图5（b）示抗血小板溶栓素对VWF缺陷型小鼠提睾肌动脉血栓模型内血小板平均荧光强度影响，曲线1示给予对照缓冲液的VWF缺陷型小鼠提睾肌动脉血栓模型内血小板平均荧光强度随时间变化情况，曲线2示给予抗血小板溶栓素的VWF缺陷型小鼠提睾肌动脉血栓模型内血小板平均荧光强度随时间变化情况；图5（c）示抗血小板溶栓素对野生型及VWF缺陷型小鼠提睾肌动脉血栓模型内血小板平均荧光强度影响效果比较，曲线1示给予抗血小板溶栓素的野生型小鼠提睾肌动脉血栓模型内血小板平均荧光强度随时间变化情况，曲线2示给予抗血小板溶栓素的VWF缺陷型小鼠提睾肌动脉血栓模型内血小板平均荧光强度随时间变化情况；图5（d）示抗血小板溶栓素对野生型及VWF缺陷型小鼠提睾肌动脉血栓模型内血小板平均荧光强度影响，曲线1示给予对照缓冲液的野生型小鼠提睾肌动脉血栓模型内血小板平均荧光强度随时间变化情况，曲线2示给予对照缓冲液的VWF缺陷型小鼠提睾肌动脉血栓模型内血小板平均荧光强度随时间变化情况，曲线3示给予抗血小板溶栓素的野生型小鼠提睾肌动脉血栓模型内血小板平均荧光强度随时间变化情况，曲线4示给予抗血小板溶栓素的VWF缺陷型小鼠提睾肌动脉血栓模型内血小板平均荧光强度随时间变化情况。
具体实施方式
本发明提供了一种抗血小板溶栓素在制备治疗VWF缺陷型血管栓塞性疾病的药物中的应用，本领域技术人员可以借鉴本文内容，适当改进工艺参数实现。特别需要指出的是，所有类似的替换和改动对本领域技术人员来说是显而易见的，它们都被视为包括在本发明。本发明的方法及应用已经通过较佳实施例进行了描述，相关人员明显能在不脱离本发明内容、精神和范围内对本文所述的方法和应用进行改动或适当变更与组合，来实现和应用本发明技术。
本发明采用的试剂皆为普通市售品，皆可于市场购得。
下面结合实施例，进一步阐述本发明：
实施例1抗血小板溶栓素对VWF缺陷型小鼠提睾肌动脉血栓模型内血栓形成的抑制作用
麻醉8周龄雄性野生型小鼠和雄性VWF缺陷型小鼠，制备提睾肌样本于解剖显微镜下进行活体显微镜检查，整个实验过程使用预热的碳酸氢盐缓冲盐水表面灌流。通过颈静脉插管，先后注射大鼠抗CD41抗体（BD.Bioscience,0.1μg/g）和AlexaFlour647羊抗鼠IgG（MolecularProbes，0.5μg/g），以获得血小板标签。血管损伤前30min，分别对构建好的小鼠提睾肌动脉血栓模型通过颈静脉给予抗血小板溶栓素（6μg/mL）或等体积对照缓冲液（不会影响血小板聚集）。然后，使用脉冲氮染料激光器行多个独立的上游损伤，使用激光诱导的提睾肌动脉血栓形成。OlympusBX51WI显微镜下实时捕获血栓形成的图象，使用Slidebook（IntelligentImagingInnovationsInc.，Denver,CO,USA）分析。实验结果如图1～5所示。图1～4中浅色部分示血小板凝集部分。
试验结果显示，与经抗血小板溶栓素处理的野生型小鼠相比，给予对照缓冲液的野生型小鼠提睾肌动脉血栓模型内聚集的血小板增多约18倍，表明抗血小板溶栓素明显抑制野生型小鼠提睾肌动脉血栓模型内血栓形成。
与经抗血小板溶栓素处理的VWF缺陷型小鼠相比，给予对照缓冲液的VWF缺陷型小鼠提睾肌动脉血栓模型内聚集的血小板增多约30倍，表明抗血小板溶栓素有效抑制血管性血友病因子（VWF）缺陷型小鼠提睾肌动脉栓塞模型内血栓形成。
进一步分析结果，经抗血小板溶栓素处理后，野生型小鼠提睾肌动脉血栓模型内聚集的血小板多于VWF缺陷型小鼠，表明抗血小板溶栓素对VWF缺陷型小鼠的效应强于野生型小鼠。
以上所述仅是本发明的优选实施方式，应当指出，对于本技术领域的普通技术人员来说，在不脱离本发明原理的前提下，还可以做出若干改进和润饰，这些改进和润饰也应视为本发明的保护范围。

Claims (7)

1.一种抗血小板溶栓素在制备治疗不含有VWF因子的VWF缺陷型血管栓塞性疾病的药物中的应用，所述抗血小板溶栓素由α链、β链两条肽链组成，其中，α链氨基酸序列如SEQIDNO.1所示，β链氨基酸序列如SEQIDNO.2所示。
2.根据权利要求1所述的应用，其特征在于，所述不含有VWF因子的VWF缺陷型血管栓塞性疾病为VWF缺陷型提睾肌动脉栓塞。
3.根据权利要求1所述的应用，其特征在于，所述药物为生物制剂。
4.根据权利要求1所述的应用，其特征在于，所述药物包括抗血小板溶栓素与药学上可接受的辅料。
5.根据权利要求1所述的应用，其特征在于，所述药物为口服制剂或注射剂。
6.根据权利要求5所述的应用，其特征在于，所述口服制剂为片剂、胶囊剂、丸剂、颗粒剂、微囊剂。
7.根据权利要求5所述的应用，其特征在于，所述注射剂中抗血小板溶栓素的质量-体积浓度为6μg/mL。
CN201310228355.1A 2013-06-08 2013-06-08 一种抗血小板溶栓素在制备治疗vwf缺陷型血管栓塞性疾病的药物中的应用 Active CN103263663B (zh)

Priority Applications (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CN201310228355.1A CN103263663B (zh) 2013-06-08 2013-06-08 一种抗血小板溶栓素在制备治疗vwf缺陷型血管栓塞性疾病的药物中的应用

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CN201310228355.1A CN103263663B (zh) 2013-06-08 2013-06-08 一种抗血小板溶栓素在制备治疗vwf缺陷型血管栓塞性疾病的药物中的应用

Publications (2)

Publication Number Publication Date
CN103263663A CN103263663A (zh) 2013-08-28
CN103263663B true CN103263663B (zh) 2016-05-04

Family

ID=49007355

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
CN201310228355.1A Active CN103263663B (zh) 2013-06-08 2013-06-08 一种抗血小板溶栓素在制备治疗vwf缺陷型血管栓塞性疾病的药物中的应用

Country Status (1)

Country Link
CN (1) CN103263663B (zh)

Families Citing this family (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN111035754A (zh) * 2016-03-23 2020-04-21 兆科药业（合肥）有限公司 抗血小板溶栓素在制备治疗血栓性血小板减少性紫癜的药物中的应用
CN106854656A (zh) * 2016-10-14 2017-06-16 兆科药业（合肥）有限公司 一种异源二聚体蛇毒蛋白的制备方法

Citations (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN101838323A (zh) * 2010-02-03 2010-09-22 兆科药业（合肥）有限公司 一种抗血小板溶栓素及其制备方法
CN102088999A (zh) * 2008-07-10 2011-06-08 Csl百灵有限公司 用于治疗凝血细胞抑制剂诱导的凝血病的血管假性血友病因子或因子viii和血管假性血友病因子

Patent Citations (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN102088999A (zh) * 2008-07-10 2011-06-08 Csl百灵有限公司 用于治疗凝血细胞抑制剂诱导的凝血病的血管假性血友病因子或因子viii和血管假性血友病因子
CN101838323A (zh) * 2010-02-03 2010-09-22 兆科药业（合肥）有限公司 一种抗血小板溶栓素及其制备方法

Non-Patent Citations (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Title
血管性血友病因子的研究进展;祝怀平等;《国外医学输血及血液学分册》;20021231;第25卷(第2期);121-123 *

Also Published As

Publication number Publication date
CN103263663A (zh) 2013-08-28

Similar Documents

Publication Publication Date Title
CN101072506B (zh) 制备冻干血小板的方法、包括冻干血小板的组合物和使用方法
Cambien et al. Antithrombotic activity of TNF-α
Moccia et al. Endothelial remodelling and intracellular calcium machinery
Svensson et al. Desmopressin in treatment of haematological disorders and in prevention of surgical bleeding
TWI640629B (zh) Mammalian cell transplantation solution containing trehalose and polyglucose
KR101570446B1 (ko) 혈액 특히 말초 혈액으로부터 얻은 성체 줄기세포의 증대 방법 및 의학 분야의 관련 적용
CN107405391A (zh) 治疗外伤患者中的出血的血小板微粒的全身和局部应用
CN101601857A (zh) 低剂量促红细胞生成素用于刺激内皮祖细胞、器官再生以及减缓末端器官损伤进程的应用
EP2884992A1 (en) A method of preparing a growth factor concentrate derived from human platelets
EP3506915A2 (en) Human blood-derived products having decreased fibrinolytic activity and uses thereof in hemostatic disorders
CN107921113A (zh) 免疫调节组合物及其使用方法
TW200942247A (en) Virally-inactivated biological fluid, virally inactivating method thereof and use of the method
CN103263663B (zh) 一种抗血小板溶栓素在制备治疗vwf缺陷型血管栓塞性疾病的药物中的应用
CN108478600A (zh) 间充质干细胞外泌体在制备防治骨质疏松症药物中的应用
CN103263662B (zh) 一种抗血小板溶栓素在制备治疗低剪切力条件下血管栓塞性疾病的药物中的应用
US20140140987A1 (en) Manufacturing and Purification Processes of Complex Protein found in Fraction IV to make a separated Apo, Transferrin, and Alpha 1 Anti strepsin (A1AT) or A combined Transferrin/Apo/Human Albumin/A1AT and all new found proteins
JP2008536930A (ja) 損傷組織へのｂ細胞投与による組織機能の回復
Kassem et al. Mesenchymal stem cells and their extracellular vesicles: a potential game changer for the COVID-19 crisis
Anniss et al. Variable adhesion of different red blood cell products to activated vascular endothelium under flow conditions
Küntscher et al. Late remote ischemic preconditioning in rat muscle and adipocutaneous flap models
TW202002997A (zh) 來自十二指腸布隆納氏腺之幹細胞／前驅細胞及其分離和使用方法
McCully et al. Therapeutic mitochondrial transplantation
CN105732814B (zh) 抗人血管性血友病因子a3区的人鼠嵌合单克隆抗体及其制备方法和应用
WO2014027359A1 (en) A growth factor concentrate for treating tendinopathies
CN104918629B (zh) Sp肽或其衍生物在制备降低il‑13水平的药物中的应用

Legal Events

Date Code Title Description
C06 Publication
PB01 Publication
C10 Entry into substantive examination
SE01 Entry into force of request for substantive examination
C14 Grant of patent or utility model
GR01 Patent grant