CN103230426A - 一种用于治疗糖尿病及其并发症的药物组合物 - Google Patents

Abstract

本发明提供了小檗碱与三七总皂苷以及以它们作为有效成分的组合物在制备预防和治疗糖尿病及其并发症的药物中的用途。其中糖尿病的并发症选自糖尿病心脏病变、糖尿病肾脏病变、糖尿病视网膜病变、糖尿病周围神经病变和糖尿病血管病变。

Description

一种用于治疗糖尿病及其并发症的药物组合物

技术领域

本发明属于中药领域，具体涉及小檗碱（黄连素）与三七总皂苷的药物组合物在防治糖尿病及其并发症中的应用。 

背景技术

糖尿病是一种以慢性血葡萄糖水平增高为特征的代谢疾病，是由胰岛素分泌和/或作用缺陷所引起。其发病率及死亡率逐年上升，据世界卫生组织统计：2000年全球范围内糖尿病患者人数已达1.76亿，预计到2030年患者数将增加1倍，达到3.7亿。糖尿病不是单一疾病，而是复合病因引起的综合征，是包括遗传及环境因素在内的多种因素共同作用的结果，胰岛素是由胰岛β细胞合成和分泌，经血液循环到达体内各组织器官的靶细胞，与特异受体结合并引发细胞内物质代谢效应，整个过程中任何一个环节发生异常均可导致糖尿病。 

长期碳水化合物以及脂肪、蛋白质代谢紊乱可引起多系统损害，导致眼、肾、神经、心脏、血管等组织器官的慢性进行性病变、功能减退及衰竭，病情严重或应激时可发生急性严重代谢紊乱，这就是糖尿病并发症。糖尿病的慢性并发症可遍及全身各个重要器官，发病机制极为复杂，尚未完全阐明,目前认为与遗传易感性、胰岛素抵抗、高血糖、氧化应激等多方面因素的相互影响有关。高血糖引起的氧化应激是重要的共同机制，导致组织损伤。此外，直接或间接参与各种慢性并发症的发生、发展的有关因素还包括：胰岛素、性激素、生长激素、儿茶酚胺等多种激素水平异常；脂代谢异常、脂肪细胞的内分泌和旁分泌功能变化；炎症状态、血管内皮细胞功能紊乱、血液凝固及纤维蛋白溶解系统活性异常等。各种并发症可单独出现或以不同组合同时或先后出现。大多数糖尿病患者死于心、脑血管动脉粥样硬化或糖尿病肾病。与非糖尿病人群相比， 糖尿病人群所有原因死亡增加1.5-2.7倍，心血管病死亡率增加1.5-4.5倍，失明高10倍，下肢坏疽及截肢高20倍；此外，糖尿病肾病是致死性肾病的第一或第二位原因。主要慢性并发症有：糖尿病血管病变、肾脏病变、心脏病变、肝脏病变、视网膜病变、神经病变等等。 

糖尿病的治疗现代医学主要有胰岛素分泌促进剂、ɑ葡萄糖苷酶抑制剂、生长因子拮抗剂、血管紧张素转换酶抑制剂等，如胰岛素、双胍类、磺酰脲类等，但多存在严重的副作用和耐药性；随着糖尿病的病程的延长，都会不同程度出现各种各样的慢性并发症，而一旦出现并发症后则西药就很难控制。 

我国传统医学认为糖尿病属“消渴”症范畴，临床上分为阴虚热盛型、气阴两虚型、阴阳两虚型、血瘀气滞型。其降糖程度和速度远不及西药，但近年来研究成果显示，其对糖尿病的治疗不单单是以降血糖为唯一标准，而是从减轻蛋白非酶糖化、抑制醛糖还原酶等多方面，特别是通过整体调节，将益气养阴与活血化瘀结合起来，在改善糖尿病的并发症方面显示出明显的治疗优势。 

小檗碱（BBR，黄连素）为中药黄连的主要有效成分，黄连具有清热燥湿之功效，在传统医学文献中记载是治疗消渴症的常用中药。现代研究报道，小檗碱具有明显的降血糖、降血脂等作用。并且其对糖尿病的治疗作用已经得到普遍公认，在临床中也有应用。 

中药具有多途径、多靶点的作用效果，虽然其降糖程度和速度不如西药化合物，但其对糖尿病并发症的控制有其独特的优势，由于其重视整体调节，毒副作用小，因此得到临床医生的普遍认可。 

三七作为五加科多年生草本植物人参三七的根，其味甘微苦，性湿，归肝、胃经，生品化瘀止血，消肿定痛，用于咯血吐血、跌打肿痛、外伤出血；熟品补血和血、用于失血、贫血。因此，三七是中医传统用于体内外各种出血之证 及跌打损伤、瘀滞肿痛的要药。三七总皂苷是三七中的有效活性组分，现代研究证明其具有明显的活血化瘀作用，用于改善脑缺血、抑制血小板聚集、降低血液粘度、抗血栓等作用。 

发明内容

本发明提供小檗碱（黄连素）与三七总皂苷配伍用于防治糖尿病及其并发症的的应用，二者联用，发挥协同增效作用，对于防治糖尿病及其并发症具有良好效果。 

本发明提供了一种药物组合物，即小檗碱（黄连素）与三七总皂苷配伍组合，在制备防治糖尿病及其并发症的药物中的应用。 

本发明所述糖尿病的并发症包括糖尿病心脏病变、糖尿病肾脏病变、糖尿病视网膜病变、糖尿病周围神经病变、糖尿病血管病变。 

本发明提供了含有小檗碱（黄连素）与三七总皂苷的药物组合物（简称HS组合物），该组合物以小檗碱（黄连素）与三七总皂苷作为有效成分。具体地，本发明的组合物中小檗碱（黄连素）与三七总皂苷的重量比例为：0.4:1-40:1，优选1:1-6:1，更优选4：1。 

各原料的用量以重量份计为： 

小檗碱（黄连素）80-800份、三七总皂苷20-200份； 

优选为：小檗碱（黄连素）100-600份、三七总皂苷40-100份； 

更优选为：小檗碱（黄连素）240份、三七总皂苷60份。 

本发明的活性组分可以为市售产品，也可以由原药材按常规方法提取制备，本发明的药物组合物加入制备不同剂型时所需的各种常规辅料，如崩解剂、润滑剂、粘合剂等以常规的中药制剂方法制备成任何一种常用口服剂型，如颗粒剂、丸剂、散剂、片剂、胶囊剂、口服液或注射剂等。 

具体实施方式

以下通过实验例来进一步阐述发明所述药物的有益效果，这些实验例包括了本发明组合物对糖尿病并发症包括糖尿病心脏病变、糖尿病肾脏病变、糖尿病视网膜病变、糖尿病周围神经病变、糖尿病血管病变的治疗及预防作用。 

实施例1： 

取黄连根2500g，粉碎，用8倍量75%乙醇温浸，回收大部分乙醇，剩余乙醇浓缩放置，过滤，滤液加盐酸调pH至2，沉淀、放置，共提取3次，每次2小时，过滤的黄色沉淀合并，即得小檗碱。 

取三七根或叶2500g，加10倍量的水煎煮三次，每次1.5小时，滤过，合并滤液，浓缩，放置，取上清液，加于已处理好的D₁₀₁大孔吸附树脂柱上，以水清洗，再以20%乙醇清洗，最后以70%乙醇洗脱，收集洗脱液，回收乙醇，浓缩，减压干燥，以乙醇精制，即得三七总皂苷。 

以重量计，取上述小檗碱（黄连素）240份、三七总皂苷60份，混匀，得到药物组合物，以下称HS组合物。 

本实施例仅为小檗碱和三七总皂苷制备方法的示例性说明，不构成对本发明的限制，以上两种活性组分在现有技术中分别有公知的制备工艺和市售产品，应用于本发明同样能够取得与上述HS组合物相同的治疗效果。 

实验例 

一、对大鼠糖尿病肾病模型的影响 

大鼠适应性饲养一周后，随机分为空白对照组(10只)与造模组。造模组禁食不禁水12h后,经腹腔一次注射链脲菌素(STZ)50mg/kg,三天后以尾静脉取血测空腹血糖大于16.7mmol/L为造模成功,空白对照组注射等体积的生理盐水作为对照。一周后血糖仍不低于此水平的50只糖尿病大鼠随机分为给药试验组与 模型组并开始给药。试验共分六组，给药组每天灌胃给药一次。空白对照组每天给予蒸馏水10ml/kg，模型对照组每天给予蒸馏水10ml/kg，盐酸二甲双胍组每天给予盐酸二甲双胍片混悬液，以盐酸二甲双胍计的给药剂量为150mg/kg,小檗碱给药组以实施例1中的小檗碱作为试验药物每天给以240mg/kg，三七总皂苷给药组以实施例1中的三七总皂苷作为试验药物每天给以60mg/kg，HS组合物给药组以实施例1的HS组合物作为试验药物每天给以300mg/kg，共给药8周。末次给药前24h所有大鼠用代谢笼收集尿液，保存于-20℃冰箱中，用于测定尿微量蛋白（UMA）；末次给药后1h，大鼠腹腔注射水合氯醛300mg/kg麻醉，腹静脉采血，分离血清，检测血糖（Glu）、尿素氮（BUN）、肌酐(Cre)含量。结果见表1。 

表1各试验药物对大鼠糖尿病肾病模型的影响

注：与模型组比较*表示P＜0.05，**表示P＜0.01，***表示P＜0.001，以下各表均同 

由表1结果可见，造模8周后，大鼠血糖明显高于空白对照组，同时Glu、BUN、Cre含量也明显升高，说明肾脏受到明显损伤。盐酸二甲双胍可使动物Glu含量明显降低，Cre、UMA含量也低于模型对照组；单独给以小檗碱可使动物Glu、BUN、UMA含量低于模型对照组；而单独给以三七总皂苷则可使动物BUN、Cre、UMA含量低于模型对照组；HS组合物可明显降低血糖含量，同时Glu、BUN、Cre含量也明显低于模型对照组，说明HS组合物对糖尿病肾脏损害具有一定的保护 作用，且作用效果与单独应用小檗碱、三七总皂苷及盐酸二甲双胍都具有明显优势。 

二、对大鼠糖尿病视网膜病变模型的影响 

大鼠适应性饲养一周后，随机分成空白对照组(10只)与造模组。造模组禁食不禁水12h后,经腹腔一次注射链脲菌素(STZ)50mg/kg,三天后以尾静脉取血测空腹血糖大于16.7mmol/L为造模成功,空白对照组注射等体积的生理盐水作为对照。一周后血糖仍不低于此水平的50只糖尿病大鼠被随机均分成给药试验组与模型对照组并开始给药。试验共分六组，给药组每天灌胃给药一次。空白对照组每天给予蒸馏水10ml/kg，模型对照组每天给予蒸馏水10ml/kg，盐酸二甲双胍组每天给予盐酸二甲双胍片混悬液，以盐酸二甲双胍计的给药剂量为150mg/kg,小檗碱给药组以实施例1中的小檗碱作为试验药物每天给以240mg/kg，三七总皂苷给药组以实施例1中的三七总皂苷作为试验药物每天给以60mg/kg，HS组合物给药组以实施例1的HS组合物作为试验药物每天给以300mg/kg，共给药8周。末次给药后1h，大鼠腹腔注射水合氯醛300mg/kg麻醉，腹静脉采血，于血小板聚集仪上，检测血小板聚集百分率，结果见表2。末次给药后取眼球，做病理检查，结果见表3。 

表2各试验药物对糖尿病视网膜病变模型大鼠血小板聚集的影响

表2结果显示，模型对照组动物血小板聚集率明显增加，小檗碱、三七总 皂苷与HS组合物组可明显降低血小板聚集率，即抑制血小板聚集，以HS组合物组效果最好。 

病理检测结果 

空白对照组：眼球大体表面形态和切面结构正常；其中，通过眼底镜，能清楚辨别整体状态下的结膜、角膜、房水、玻璃体、视神经和视网膜等组成部分；眼球组织结构和细胞形态属于正常范围。 

模型对照组：眼球病变:大多数动物出现晶状体混浊、视网膜出血和巩膜硬化，无显著坏死和无肿块；眼球病理变化突出表现为视网膜血循环障碍，尤其是脉络膜毛细血管内皮细胞和周细胞的数量减少；角膜、房水、晶状体、玻璃体、视网膜和视神经等组织都出现不同程度的损伤性病理变化。 

盐酸二甲双胍组：眼球的造模病变明显减轻。 

小檗碱组：眼球的造模病变明显减轻。 

三七总皂苷组：眼球的造模病变明显减轻。 

HS组合物组：眼球的造模病变明显减轻，疗效有好于二甲双胍、小檗碱的趋势。 

结果发现：正常组无病变；造模处理各组出现不同发病率，其中，模型对照组发病率最高，空白对照组无病变，HS组合物组发病率最低。 

表3各试验药物对大鼠糖尿病视网膜病变模型的影响 

三、对大鼠糖尿病心肌病变模型的影响 

大鼠适应性饲养一周后，随机分成空白对照组(10只)与造模组。空白对照组大鼠饲以常规饲料,造模组大鼠饲以高脂高糖饲料(10%猪油、20%蔗糖、2%蛋黄粉、1%胆盐、67%常规饲料)。喂养六周后,造模组大鼠禁食不禁水12h，一次性腹腔注射链脲菌素(STZ)35mg/kg；空白对照组仅注射等容积的生理盐水。一周后,以尾静脉取血测空腹血糖大于12.0mmol/L为造模成功,将造模成功的40只糖尿病大鼠随机分为四组：模型对照组每天给予蒸馏水10ml/kg，小檗碱给药组以实施例1中的小檗碱作为试验药物每天给以240mg/kg；三七总皂苷给药组以实施例1中的三七总皂苷作为试验药物每天给以60mg/kg，HS组合物给药组以实施例1的HS组合物作为试验药物每天给以300mg/kg，共给药12周，同时除空白对照组外其余动物继续喂饲高脂高糖饲料。末次给药后1h，大鼠腹腔注射水合氯醛300mg/kg麻醉，腹静脉采血，分离血清，检测血糖（Glu）、总胆固醇（TC）、三酸甘油酯(TG)、游离脂肪酸（FFA）、白介素-2（IL-2）、肿瘤坏死因子（TNF-α）含量；剖开胸腔,迅速取出心脏,冰盐水冲洗,滤纸吸干,称量心脏重量,计算心脏质量指数(心重mg/体重g)；取心尖组织，固定，做病理检测；其余部位心肌组织液氮速冻，然后-80℃冰箱保存，用于检测其中丙二醛（MDA）含量和超氧化物歧化酶（SOD）活性。结果见表4、表5、表6。 

表4各试验药物对糖尿病心肌病变模型大鼠血中BG、TC、TG含量的影响

表5各试验药物对糖尿病心肌病变模型大鼠血中FFA、IL-2、TNF-α含量的影响

表6各试验药物对糖尿病心肌病变模型大鼠心脏指数、心肌组织中MDA含量、SOD活性的影响

由表4、5、6结果可见，模型对照组动物血中Glu、TC、TG、FFA、IL-2、TNF-α含量及心肌组织中MDA含量明显升高，SOD活性明显降低，与空白对照组比有明显差异，说明动物产生了明显的糖尿病心肌病变；而小檗碱、三七总皂苷及HS组合物给药组动物心脏指数明显低于模型对照组，说明心肌病变有改善；特别是MDA、SOD的含量变化，三七总皂苷与HS组合物组更明显。病理结果显示，空白对照组动物心肌组织结构正常，无变性坏死和炎症细胞浸润；模型对照组动物心肌组织出现多处断裂，间质增宽，水肿，有多处变性坏死灶，心肌纤维间可见大量炎症细胞浸润；小檗碱、三七总皂苷及HS组合物组动物心肌组织病理变化较模型对照组有不同程度减轻，尤其三七总皂苷及HS组合物组作用效果最明显。 

四、对糖尿病周围神经病变的影响 

大鼠适应性饲养一周后，随机分成空白对照组(10只)与造模组。空白对照组大鼠饲以常规饲料,造模组大鼠饲以高脂高糖饲料(10%猪油、20%蔗糖、2%蛋黄粉、1%胆盐、67%常规饲料)。喂养六周后,造模组大鼠禁食不禁水12h，一次性腹腔注射链脲菌素(STZ)35mg/kg；空白对照组仅注射等容积的生理盐水。1周后,以尾静脉取血测空腹血糖大于12.0mmol/L为造模成功,将造模成功的50只糖尿病大鼠随机均分为五组：模型对照组每天给予蒸馏水10ml/kg，盐酸二甲双胍组每天给予盐酸二甲双胍片混悬液，以盐酸二甲双胍计的给药剂量为150mg/kg,小檗碱给药组以实施例1中的小檗碱作为试验药物每天给以240mg/kg，三七总皂苷给药组以实施例1中的三七总皂苷作为试验药物每天给以60mg/kg，HS组合物给药组以实施例1的HS组合物作为试验药物每天给以300mg/kg，共给药12周，同时除空白对照组外其余动物继续喂饲高脂高糖饲料。末次给药后1h，大鼠分别进行摇尾试验：将各组大鼠分别置于固定架内，露尾，尾尖置恒温水浴箱，入水1cm，初始温度36℃,以2℃/s速度加热,记录大鼠尾抬出水面时的水温度，即为热痛阈值。然后大鼠腹腔注射水合氯醛300mg/kg麻醉，腹静脉采血，于全自动血流变检测仪上测定全血比粘度（高、中、低切值）。同时分离坐骨神经中段和腓肠神经,用10%福尔马林固定,做病理检查。结果见表7、表8。 

表7各试验药物对糖尿病周围神经病变模型大鼠痛阈值的影响

表8各试验药物对糖尿病周围神经病变模型大鼠血液流变性的影响

由表7结果可见，模型对照组动物痛阈值明显提高，即其痛感显示不明显，说明神经功能明显下降；二甲双胍、小檗碱、三七总皂苷及HS组合物组动物则使上述症状明显改善，痛阈值明显低于模型对照组。表8结果表明模型对照组动物血液流变性异常，血液粘度增加，小檗碱、三七总皂苷及HS组合物组则可不同程度改善血液流变性，特别是三七总皂苷及及HS组合物组效果更明显。同时病理结果显示，模型组动物坐骨神经轴突有灶性萎缩变细现象，髓鞘有生脱鞘现象，而给药组则明显改善,结果显示HS组合物组效果要好于其他组。 

从以上实验可见，本发明的组合物对于糖尿病心脏病变、糖尿病肾脏病变、糖尿病视网膜病变、糖尿病周围神经病变、糖尿病血管病变等多种糖尿病并发症具有良好的预防和治疗效果，与二甲双胍及单独应用小檗碱（黄连素）、三七总皂苷具有明显的优势和特点，可以作为治疗和预防糖尿病及其并发症的药物。 

Claims (11)

1.小檗碱与三七总皂苷在制备预防和治疗糖尿病及其并发症的药物中的用途。 

2.根据权利要求1所述的用途，其中糖尿病的并发症选自糖尿病心脏病变、糖尿病肾脏病变、糖尿病视网膜病变、糖尿病周围神经病变和糖尿病血管病变。 

3.含有小檗碱与三七总皂苷的药物组合物在制备预防和治疗糖尿病及其并发症的药物中的用途。 

4.根据权利要求3所述的用途，其中糖尿病的并发症选自糖尿病心脏病变、糖尿病肾脏病变、糖尿病视网膜病变、糖尿病周围神经病变和糖尿病血管病变。 

5.一种用于预防和治疗糖尿病及其并发症的药物组合物，其中含有小檗碱与三七总皂苷作为有效成分，其中小檗碱与三七总皂苷的重量比例为：0.4:1-40:1。 

6.根据权利要求5所述的一种用于预防和治疗糖尿病及其并发症的药物组合物，其中小檗碱与三七总皂苷的重量比例为：1:1-6:1。 

7.根据权利要求6所述的一种用于预防和治疗糖尿病及其并发症的药物组合物，其中小檗碱与三七总皂苷的重量比例为：4：1。 

8.根据权利要求5-7中任一所述的药物组合物,其特征在于，组合物和药学上可接受的载体被制成临床上任何可接受的剂型。 

9.根据权利要求8所述的药物组合物,其特征在于，所述剂型选自片剂、胶囊、口服液、糖浆、颗粒、滴丸、口崩片、缓释片、缓释胶囊、 控释片、控释胶囊；水针、冻干粉针、无菌粉针、输液。 

10.根据权利要求8所述的药物组合物,其特征在于，所述药学上可接受的载体选自填充剂、粘合剂、润滑剂、崩解剂、助溶剂、表面活性剂、吸附载体；溶剂、抗氧剂、助溶剂、吸附剂、渗透压调节剂、pH调节剂。 

11.根据权利要求5所述的一种用于预防和治疗糖尿病及其并发症的药物组合物，其制备方法包括：取黄连根2500g，粉碎，用8倍量75%乙醇温浸，回收大部分乙醇，剩余乙醇浓缩放置，过滤，滤液加盐酸调pH至2，沉淀、放置，共提取3次，每次2小时，过滤的黄色沉淀合并，即得小檗碱； 

取三七根或叶2500g，加10倍量的水煎煮三次，每次1.5小时，滤过，合并滤液，浓缩，放置，取上清液，加于已处理好的D101大孔吸附树脂柱上，以水清洗，再以20%乙醇清洗，最后以70%乙醇洗脱，收集洗脱液，回收乙醇，浓缩，减压干燥，以乙醇精制，即得三七总皂苷； 

以重量计，取上述小檗碱240份、三七总皂苷60份，混匀，得到药物组合物。