CN103217526B - 光栅式荧光酶标分析仪测试标准板及其加工工艺 - Google Patents
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Abstract
本发明公开了一种光栅式荧光酶标分析仪测试标准板及其加工工艺。该标准板包括标准基板，标准基板内安装有若干个同规格且规则排列的酶标孔，每个酶标孔为一底部封闭的筒形结构，每个酶标孔的内底部固定有基质，基质的上表面涂覆有固体荧光材料，基质和与其对应的固体荧光材料构成荧光薄膜，荧光薄膜的发射波长及激发波长的表征作为该标准板的标准值。本发明的光栅式荧光酶标分析仪测试标准板的结构简单、标准统一、易于操作维护、价格便宜。
Description
技术领域
本发明涉及一种分析仪测试设备，尤其涉及一种光栅式荧光酶标分析仪测试标准板及其加工工艺。
背景技术
荧光是物质受激辐射产生的一种发光现象。当物质分子受到特定波长的光源照射时，分子吸收光子并使得处于基态的电子受激跃迁到激发态，处于激发态的电子不稳定，在跃迁回基态的过程中多余的能量以光子的形式释放出来，从而产生发光现象。通过此种方式发出的光称为荧光。
荧光酶标分析仪是利用荧光现象进行物质定性和定量分析仪的仪器，它具有背景干扰小、灵敏度高的特点。荧光酶标分析仪综合了免疫反应的高特异性、酶标分析仪的高通量和荧光信号高灵敏度的优势，近年来在食品安全、临床检验等领域得到了广泛的应用。荧光酶标分析仪通常一板可以进行96或384个样品的检测，并且可以使用第三方检测试剂。荧光酶标分析仪检测过程和原理一般如下：首先在酶标板中包被上抗体，然后将待检测的样本加入到酶标孔中，样本中的待测化合物就被包被在酶标孔上的特异性抗体捕获，经过洗涤后再次加入检测抗体，检测抗体与结合在捕获抗体上的目标物再次结合，形成“夹心汉堡式”的结构。接着经过洗涤后进一步加入酶联二抗，酶联二抗与“夹心汉堡复合物”中的检测抗体结合。经过洗涤后，进一步加入荧光底物，该底物在酶联二抗上酶的作用下发生反应生成具有强烈荧光信号的底物。荧光强度与产物的量正相关，产物的量与待检测样本中目标化合物的含量正相关。因此，可以根据反应后酶标孔中荧光信号的强度判定待测样品中目标化合物的含量。
荧光酶标分析仪检测结果的准确与否与仪器的计量性能密切相关，这些计量性能包括发射波长准确度、激发波长准确度、灵敏度、重复性等指标，这些计量性能指标的确认和校准必须通过计量标准来实现。荧光酶标分析仪从光学结构原理上大致可分为滤光片式或光栅式两种结构，滤光片式荧光酶标分析仪的波长准确度可以将滤光片拆下来在经过计量检定合格的紫外分光光度计上进行检测校准。但是光栅式的荧光酶标分析仪计量标准较为欠缺，结构多样，也没有制定相应的仪器检定规程或校准规范，无法进行仪器的检定或校准，研制光栅式荧光酶标分析仪的计量标准成为当务之急。
发明内容
本发明的目的在于提供一种结构简单、标准统一的光栅式荧光酶标分析仪测试标准板及其加工工艺。
为达到上述目的，本发明一方面提供了一种光栅式荧光酶标分析仪测试标准板，包括标准基板，所述标准基板内安装有若干个同规格且规则排列的酶标孔，每个所述酶标孔为一底部封闭的筒形结构，每个所述酶标孔的内底部固定有基质，所述基质的上表面涂覆有固体荧光材料，所述基质和与其对应的固体荧光材料构成荧光薄膜，所述荧光薄膜的发射波长及激发波长的表征作为该标准板的标准值。
本发明的光栅式荧光酶标分析仪测试标准板，所述基质为纸质或高分子聚合物材质。
本发明的光栅式荧光酶标分析仪测试标准板，所述固体荧光材料为荧光素、cy3、cy5、Cy7、PE-Cy5、PE-Cy7、Alexa Fluor350、异硫氰酸荧光素、Alexa Fluor488、Cy3、AlexaFluor555、罗丹明、PE、PE-Cy3、APC、或Alexa Fluor647。
再一方面，本发明还提供了一种上述光栅式荧光酶标分析仪测试标准板的加工工艺，包括以下步骤：
加工出标准基板及酶标孔；
采用吸附法、共价交联法或共聚法将固体荧光材料涂覆在基质上形成荧光薄膜；
用经过计量检定合格的荧光分光光度计对上一步制备的荧光薄膜分别进行发射波长和激发波长的表征，所述荧光薄膜的发射波长及激发波长的表征作为该标准板的标准值；
将其上结合有固体荧光材料的基质裁剪成与酶标孔内径大小一致的圆形荧光薄膜，并采用粘合剂将圆形荧光薄膜粘合在酶标孔的内底部上；
将每个其内底部设有荧光薄膜的酶标孔固定装配于标准基板内。
本发明的加工工艺，所述基质为纸质或高分子聚合物材质。
本发明的加工工艺，所述固体荧光材料为荧光素、cy3、cy5、Cy7、PE-Cy5、PE-Cy7、AlexaFluor350、异硫氰酸荧光素、Alexa Fluor488、Cy3、Alexa Fluor555、罗丹明、PE、PE-Cy3、APC或Alexa Fluor647。
本发明的光栅式荧光酶标分析仪测试标准板包括标准基板，标准基板内安装有若干个同规格且规则排列的酶标孔，每个酶标孔为一底部封闭的筒形结构，每个酶标孔的内底部固定有基质，基质的上表面涂覆有固体荧光材料，基质和与其对应的固体荧光材料构成荧光薄膜，荧光薄膜的发射波长及激发波长的表征作为该标准板的标准值。从而提供了一种结构简单、标准统一、易于操作维护、价格便宜的荧光酶标分析仪计量测试标准板。
附图说明
图1为本发明的光栅式荧光酶标分析仪测试标准板的立体结构剖视图；
图2为图1的A处放大图。
具体实施方式
下面结合附图对本发明的具体实施方式进行详细描述：
参考图1和图2所示，本实施例的光栅式荧光酶标分析仪测试标准板包括标准基板1，标准基板1内安装有96个同规格且规则排列的酶标孔2，每个酶标孔2为一底部封闭的圆筒形结构，每个酶标孔2的内底部粘接固定有其材质为纸质或高分子聚合物的基质3，基质3的上表面涂覆有固体荧光材料4（例如荧光素、cy3、cy5、Cy7、PE-Cy5、PE-Cy7、Alexa Fluor350、异硫氰酸荧光素、Alexa Fluor488、Cy3、Alexa Fluor555、罗丹明、PE、PE-Cy3、APC、或Alexa Fluor647等），基质3和与其对应的固体荧光材料4构成荧光薄膜，荧光薄膜的发射波长及激发波长的表征作为该标准板的标准值。
本实施例中，上述光栅式荧光酶标分析仪测试标准板可采用如下工艺加工得到，具体包括以下步骤：
步骤1、首先加工出标准基板1及酶标孔2。
步骤2、采用吸附法、共价交联法或共聚法将固体荧光材料4涂覆在基质3上形成荧光薄膜。
步骤3、用经过计量检定合格的荧光分光光度计对上一步制备的荧光薄膜分别进行发射波长和激发波长的表征。具体来说，分别固定某一典型激发波长进行发射波长扫描，得到发射光谱中各个峰的波长值；然后分别固定某一典型的发射波长进行激发波长的扫描，得到激发光谱中各个峰的波长值。这些波长值分别作为该计量标准板的标准值。
步骤4、将其上结合有固体荧光材料4的基质3裁剪成与酶标孔2内径大小一致的圆形荧光薄膜，并采用粘合剂将圆形荧光薄膜粘合在酶标孔2的内底部上；
步骤5、将每个其内底部设有荧光薄膜的酶标孔2固定装配于标准基板1内。
本实施例的光栅式荧光酶标分析仪测试标准板使用时：
当用于激发波长示值误差计量测试时，在光栅式荧光酶标分析仪中固定某一选定的发射波长，然后扫描激发波长，得到激发光谱中各个峰的波长λi，并与标准值λs相比较，得到一组激发波长的示值误差Δλi，取其中最大者作为激发波长的示值误差报告值。当用于发射波长示值误差计量测试时，在光栅式荧光酶标分析仪中固定某一选定的激发波长，然后扫描发射波长，得到发射光谱中各个峰的波长λi，并与标准值λs相比较，得到一组发射波长的示值误差Δλi，取其中最大者作为激发波长的示值误差报告值。
以上的实施例仅仅是对本发明的优选实施方式进行描述，并非对本发明的范围进行限定，在不脱离本发明设计精神的前提下，本领域普通工程技术人员对本发明的技术方案作出的各种变形和改进，均应落入本发明的权利要求书确定的保护范围内。
Claims (8)
1.一种光栅式荧光酶标分析仪测试标准板，其特征在于，包括标准基板(1)，所述标准基板(1)内安装有若干个同规格且规则排列的酶标孔(2)，每个所述酶标孔(2)为一底部封闭的筒形结构，每个所述酶标孔(2)的内底部固定有基质(3)，所述基质(3)的上表面涂覆有固体荧光材料(4)，所述基质(3)和与其对应的固体荧光材料(4)构成荧光薄膜，所述荧光薄膜的发射波长及激发波长的表征作为该标准板的标准值。
2.根据权利要求1所述的光栅式荧光酶标分析仪测试标准板，其特征在于，所述基质(3)为纸质或高分子聚合物材质。
3.根据权利要求2所述的光栅式荧光酶标分析仪测试标准板，其特征在于，所述固体荧光材料(4)为荧光素。
4.根据权利要求3所述的光栅式荧光酶标分析仪测试标准板，其特征在于，所述荧光素包括cy5、Cy7、PE-Cy5、PE-Cy7、Alexa Fluor 350、异硫氰酸荧光素、Alexa Fluor 488、Cy3、Alexa Fluor 555、罗丹明、PE、PE-Cy3、APC、或Alexa Fluor 647。
5.一种权利要求1所述的光栅式荧光酶标分析仪测试标准板的加工工艺，其特征在于，包括以下步骤：
加工出标准基板(1)及酶标孔(2)；
采用吸附法、共价交联法或共聚法将固体荧光材料(4)涂覆在基质(3)上形成荧光薄膜；
用经过计量检定合格的荧光分光光度计对上一步制备的荧光薄膜分别进行发射波长和激发波长的表征，所述荧光薄膜的发射波长及激发波长的表征作为该标准板的标准值；
将其上结合有固体荧光材料(4)的基质(3)裁剪成与酶标孔(2)内径大小一致的圆形荧光薄膜，并采用粘合剂将圆形荧光薄膜粘合在酶标孔(2)的内底部上；
将每个其内底部设有荧光薄膜的酶标孔(2)固定装配于标准基板(1)内。
6.根据权利要求5所述的加工工艺，其特征在于，所述基质(3)为纸质或高分子聚合物材质。
7.根据权利要求6所述的加工工艺，其特征在于，所述固体荧光材料(4)为荧光素。
8.根据权利要求7所述的加工工艺，其特征在于，所述荧光素包括cy5、Cy7、PE-Cy5、PE-Cy7、Alexa Fluor 350、异硫氰酸荧光素、Alexa Fluor 488、Cy3、Alexa Fluor 555、罗丹明、PE、PE-Cy3、APC、或Alexa Fluor 647。
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