CN103189362A

CN103189362A - 烷氧基咪唑-1-基甲基联苯羧酸的结晶形式

Info

Publication number: CN103189362A
Application number: CN2011800530695A
Authority: CN
Inventors: 保罗·R·法特里; 文卡特·R·萨兰迪
Original assignee: SHIWAN PHARMACEUTICALS Inc
Current assignee: Theravance Biopharma R&D IP LLC
Priority date: 2010-11-10
Filing date: 2011-11-09
Publication date: 2013-07-03
Anticipated expiration: 2031-11-09
Also published as: RU2013126403A; AU2011326622A1; US20120115920A1; CO6741224A2; CA2812598A1; SG189448A1; BR112013011715A2; US8802709B2; IL225303A0; US20150133518A1; WO2012064807A1; CN103189362B; NZ609804A; US9249105B2; EP2638017B1; MX2013005165A; AU2011326622B2; US20130267573A1; ES2567721T3; US8362060B2

Abstract

本发明提供4′-{2-乙氧基-4-乙基-5-[((S)-2-巯基-4-甲基戊酰基氨基)甲基]-咪唑-1-基甲基}-3′-氟联苯-2-甲酸的结晶盐形式。本发明还提供包含所述结晶化合物的医药组合物、用于制备所述结晶化合物的工艺和中间物以及使用所述结晶化合物治疗疾病(如高血压)的方法。

Description

烷氧基咪唑-1-基甲基联苯羧酸的结晶形式

技术领域

本发明涉及烷氧基咪唑-1-基甲基联苯羧酸的新颖结晶形式，其具有血管紧张素II1型受体拮抗剂活性和肾胰岛素残基溶酶抑制活性。本发明还涉及包含所述结晶化合物或由所述化合物制备的医药组合物、用于制备所述结晶化合物的工艺和中间物以及使用所述化合物治疗疾病(如高血压)的方法。

背景技术

共同受让的美国公开案第2008/0269305号及第2009/0023228号(都颁予阿莱格雷蒂(Allegretti)等人，于2008年4月23日提出)公开具有AT₁受体拮抗剂活性和肾胰岛素残基溶酶(NEP)酶抑制活性的新颖化合物，所述公开案的公开内容以引用的方式并入本文中。具体来说，这些申请案中具体公开了化合物4′-{2-乙氧基-4-乙基-5-[((S)-2-巯基-4-甲基戊酰基氨基)甲基]咪唑-1-基甲基}-3′-氟联苯-2-甲酸。

4′-{2-乙氧基-4-乙基-5-[((S)-2-巯基-4-甲基戊酰基氨基)甲基]咪唑-1-基甲基}-3′-氟联苯-2-甲酸的化学结构由式I表示：

当制备用于长期贮存的化合物时和当制备医药组合物和调配物时，通常需要获得既不吸湿又不溶解的治疗剂结晶形式。获得具有相对较高熔点(即，高于约100℃)，由此允许在不发生显著分解的情况下处理(例如，微粉化)物质的结晶形式也是有利的。

虽然赵(Chao)等人的美国专利公开案第2010/0081697号中已经报告式I化合物的结晶游离碱形式，但本发明的结晶形式具有不同并且特别有用的性质，包括较佳溶解度及经过改进的稳定性。

发明内容

本发明的一个方面涉及4′-{2-乙氧基-4-乙基-5-[((S)-2-巯基-4-甲基戊酰基氨基)甲基]咪唑-1-基甲基}-3′-氟联苯-2-甲酸的结晶半乙二磺酸盐，指定为形式I，其特征在于粉末x射线衍射图包含2θ值在9.89±0.20、11.66±0.20、13.55±0.20、18.41±0.20、20.42±0.20和22.46±0.20处的衍射峰。

本发明的另一个方面涉及4′-{2-乙氧基-4-乙基-5-[((S)-2-巯基-4-甲基戊酰基氨基)甲基]咪唑-1-基甲基}-3′-氟联苯-2-甲酸的结晶半乙二磺酸盐，指定为形式II，其特征在于粉末x射线衍射图包含2θ值在9.74±0.20、11.00±0.20、12.89±0.20、14.27±0.20、15.54±0.20、18.62±0.20和23.78±0.20处的衍射峰。

本发明的再另一个方面涉及4′-{2-乙氧基-4-乙基-5-[((S)-2-巯基-4-甲基戊酰基氨基)甲基]咪唑-1-基甲基}-3′-氟联苯-2-甲酸的结晶半萘二磺酸盐，其特征在于粉末x射线衍射图包含2θ值在4.84±0.20、9.41±0.20、10.82±0.20、17.39±0.20、24.17±0.20和24.65±0.20处的衍射峰。

本发明的又一个方面涉及4′-{2-乙氧基-4-乙基-5-[((S)-2-巯基-4-甲基戊酰基氨基)甲基]咪唑-1-基甲基}-3′-氟联苯-2-甲酸的结晶单乙二酸盐，其特征在于粉末x射线衍射图包含2θ值在6.1±0.20、11.0±0.20、13.0±0.20、14.4±0.20、15.2±0.20、16.5±0.20、17.3±0.20、18.4±0.20、21.9±0.20、23.9±0.20、24.3±0.20、24.5±0.20和26.1±0.20处的衍射峰。

本发明的另一个方面涉及用于制备所述式I化合物的结晶形式的工艺。在一个实施例中，用于制备4′-{2-乙氧基-4-乙基-5-[((S)-2-巯基-4-甲基戊酰基氨基)-甲基]咪唑-1-基甲基}-3′-氟联苯-2-甲酸的结晶形式的工艺包含a)用适当的平衡离子处理4′-{2-乙氧基-4-乙基-5-[((S)-2-巯基-4-甲基戊酰基氨基)甲基]咪唑-1-基甲基}-3′-氟联苯-2-甲酸；b)任选地进行加热、搅拌或超声处理以完全溶解；和c)允许形成固体并且分离所述固体以产生所述结晶形式。

本发明的另一个方面涉及用于纯化4′-{2-乙氧基-4-乙基-5-[((S)-2-巯基-4-甲基戊酰基氨基)甲基]咪唑-1-基甲基}-3′-氟联苯-2-甲酸的工艺。在一个实施例中，这种工艺包含形成4′-{2-乙氧基-4-乙基-5-[((S)-2-巯基-4-甲基戊酰基氨基)-甲基]咪唑-1-基甲基}-3′-氟联苯-2-甲酸的结晶形式。本发明还涉及由本文所述的工艺制备的产物。在具体实施例中，所述结晶形式为半乙二磺酸盐形式I、半乙二磺酸盐形式II、半萘二磺酸盐或单乙二酸盐。

本发明的一个方面涉及包含医药学上可接受的载剂和4′-{2-乙氧基-4-乙基-5-[((S)-2-巯基-4-甲基戊酰基氨基)甲基]咪唑-1-基甲基}-3′-氟联苯-2-甲酸的结晶形式的医药组合物。在具体实施例中，所述结晶形式为半乙二磺酸盐形式I、半乙二磺酸盐形式II、半萘二磺酸盐或单乙二酸盐。

本发明的另一个方面涉及包含所述式I化合物的结晶形式与一种或一种以上其它治疗剂的组合的组合物。因此，在一个实施例中，本发明涉及包含以下各物的组合物：(a)医药学上可接受的载剂和治疗有效量的所述式I化合物的结晶形式；和(b)治疗有效量的选自以下的药剂：利尿剂、β₁肾上腺素受体阻断剂、钙通道阻断剂、血管收缩素转化酶抑制剂、AT₁受体拮抗剂、肾胰岛素残基溶酶抑制剂、非类固醇消炎剂、前列腺素、抗脂质剂、抗糖尿病剂、抗血栓形成剂、肾素抑制剂、内皮素受体拮抗剂、内皮素转化酶抑制剂、醛甾酮醛固酮拮抗剂、血管收缩素转化酶/肾胰岛素残基溶酶抑制剂、加压素受体拮抗剂及其组合的药剂；其中将所述结晶形式和所述药剂调配在一起或分开独立地调配。当所述药剂分开独立地调配所述药剂时，可包括医药学上可接受的载剂。在具体实施例中，所述结晶形式为半乙二磺酸盐形式I、半乙二磺酸盐形式II、半萘二磺酸盐或单乙二酸盐。

本发明的又一个方面涉及用于治疗高血压或心力衰竭的方法，所述方法包含向需要治疗的患者投与治疗有效量的4′-{2-乙氧基-4-乙基-5-[((S)-2-巯基-4-甲基戊酰基氨基)甲基]咪唑-1-基甲基}-3′-氟联苯-2-甲酸的结晶形式。在具体实施例中，所述结晶形式为半乙二磺酸盐形式I、半乙二磺酸盐形式II、半萘二磺酸盐或单乙二酸盐。

本发明还涉及4′-{2-乙氧基-4-乙基-5-[((S)-2-巯基-4-甲基戊酰基氨基)甲基]咪唑-1-基甲基}-3′-氟联苯-2-甲酸的结晶形式用于制造药物的用途。另外，本发明涉及4′-{2-乙氧基-4-乙基-5-[((S)-2-巯基-4-甲基戊酰基氨基)甲基]咪唑-1-基甲基}-3′-氟联苯-2-甲酸的结晶形式的用途，其用于制造药物，尤其是用于制造用于治疗高血压或心力衰竭的药物。在具体实施例中，所述结晶形式为半乙二磺酸盐形式I、半乙二磺酸盐形式II、半萘二磺酸盐或单乙二酸盐。

附图说明

参考附图说明本发明的不同方面。

图1展示显示式I化合物的结晶半乙二磺酸盐形式I的粉末x射线衍射(PXRD)图。所述结晶半乙二磺酸盐形式I的特征还在于图2中的差示扫描量热法(DSC)热分析图、图3中的热解重量分析(TGA)迹线和图4中的动态水分吸附(DMS)分布。图5为结晶半乙二磺酸盐形式I的偏振光微观(PLM)图像。

图6显示式I化合物的结晶半乙二磺酸盐形式II的PXRD图。所述结晶半乙二磺酸盐形式II的特征还在于图7中的DSC热分析图、图8中的TGA迹线和图9中的DMS分布。图10为结晶半乙二磺酸盐形式II的PLM图像。

图11显示式I化合物的结晶半萘二磺酸盐的PXRD图。所述结晶半萘二磺酸盐的特征还在于图12中的DSC热分析图、图13中的TGA迹线和图14中的DMS分布。图15为结晶半萘二磺酸盐的PLM图像。

图16显示结晶半乙二磺酸盐形式II、结晶半萘二磺酸盐和先前描述的结晶游离碱形式的溶解度分布。

图17显示式I化合物的结晶单乙二酸盐的PXRD图。所述结晶单乙二酸盐的特征还在于图18中的DSC热分析图、图19中的TGA迹线和图20中的DMS分布。图21为结晶单乙二酸盐的PLM图像。

具体实施方式

本发明提供4′-{2-乙氧基-4-乙基-5-[((S)-2-巯基-4-甲基戊酰基氨基)甲基]咪唑-1-基甲基}-3′-氟联苯-2-甲酸的结晶形式。活性剂(即，式I化合物)含有一个具有(S)构型的手性中心。然而，所属领域的技术人员应理解，除非另有指示，否则本发明组合物中可存在微量(R)立体异构体，只要不因存在所述异构体而消除组合物总体的效用。另外，因为式I化合物含有碱性部分(咪唑)与酸性部分(羧酸)，所以其可呈两性离子形式。

式I化合物具有AT₁受体拮抗剂活性和NEP抑制活性。预期式I化合物的结晶形式具有相同的活性，并且因此在治疗疾病(如高血压和心力衰竭)方面具有相同的效用。因此，在其它用途中，本发明的结晶形式可用于制备用于治疗高血压或心力衰竭的医药组合物。

定义

当描述本发明的化合物、组合物、方法和工艺时，除非另有指示，否则以下术语具有以下含义。另外，除非使用情形另有明确指示，否则如本文所用的单数形式“一”和“所述”包括相应的复数形式。术语“包含”、“包括”和“具有”打算指包括…在内，且意味可能存在除所列元件以外的其它元件。除非另有指示，否则本文中所使用的表示成分的量、性质(如分子量)、反应条件等等的所有数字都应理解为在所有情况下都由术语“约”修饰。因此，本文所阐述的数字为可以取决于本发明设法获得的所需性质而变化的近似值。至少不试图限制对权利要求书范围应用等同原则，各数字至少应根据所报告的有效数字并且通过应用一般的四舍五入技术来解释。

如本文中所用的短语“具有式”或“具有结构”并不打算具有限制性并且以与通常使用术语“包含”相同的方式使用。

如本文中所用的术语“半”打算意味结晶形式通常含有约1.0摩尔当量游离碱(式I化合物)/约0.5±0.15摩尔当量平衡离子；并且在一个实施例中，含有约1.0摩尔当量游离碱/约0.5摩尔当量平衡离子。因此，半乙二磺酸盐形式(形式I和形式II)一般含有约1.0摩尔当量游离碱/约0.5±0.15莫耳当量1，2-乙二磺酸；并且在一个实施例中，含有约1.0摩尔当量游离碱/约0.5莫耳当量1，2-乙二磺酸。类似地，半萘二磺酸盐形式一般含有约1.0摩尔当量游离碱/约0.5±0.15莫耳当量萘-1，5-二磺酸；并且在一个实施例中，含有约1.0摩尔当量游离碱/约0.5莫耳当量萘-1，5-二磺酸。

术语“水合物”意味水分子并入晶格的单位晶胞中的结晶形式。水合物可包括一个或一个以上水分子，但水分子的数目还可以是一的一部分，如二分之一或四分之一。在本发明中，半萘二磺酸盐形式为水合物并且一般含有约1.0摩尔当量游离碱/约0.5±0.15摩尔当量萘-1，5二磺酸和约0.55±0.45摩尔当量水。在一个实施例中，半萘二磺酸盐形式含有约1.0摩尔当量游离碱/约0.5±0.15摩尔当量萘-1，5-二磺酸和约0.25±0.15摩尔当量水；并且在另一个实施例中，半萘二磺酸盐形式含有约1.0摩尔当量游离碱/约0.5摩尔当量萘-1，5-二磺酸和约0.25±0.15摩尔当量水。

本文中所用的术语“单”打算意味结晶形式通常含有约1.0摩尔当量游离碱(式I化合物)/约1.0±0.15摩尔当量平衡离子；并且在一个实施例中，含有约1.0摩尔当量游离碱/约1.0摩尔当量平衡离子。因此，结晶单乙二酸盐一般含有约1.0摩尔当量游离碱/约1.0±0.15摩尔当量乙二酸；并且在一个实施例中，含有约1.0摩尔当量游离碱/约1.0摩尔当量乙二酸。

如本文中所用的术语“熔点”或“熔融吸热线”意味通过差示扫描量热法观察到最大吸热流的温度，因为热转变对应于固-液相变。

术语“医药学上可接受的”是指当用于本发明时不会在生物学上或在其他方面不可接受的物质。举例来说，术语“医药学上可接受的载剂”是指可以并入组合物中并且投与患者而不引起不可接受的生物作用或以不可接受的方式与组合物的其它组分相互作用的物质。所述医药学上可接受的物质通常已满足毒物学和制造测试的所需标准，且包括由美国食品与药物管理局(U.S.Food and Drug Administration)鉴别为合适的非活性成分的物质。

术语“治疗有效量”意味当投与有需要的患者时足以实现治疗的量，即，获得所需治疗作用所需的药物的量。举例来说，用于治疗高血压的治疗有效量为例如减少、抑制、消除或预防高血压症状或者治疗潜在高血压的基本病因所需的化合物的量。在一个实施例中，治疗有效量为降低血压所需的量或维持正常血压所需的药物的量。另一方面，术语“有效量”意味足以获得所需结果的量，所需结果可能未必为治疗结果。举例来说，当研究包含AT₁受体的系统时，“有效量”可为拮抗所述受体所需的量。

如本文中所用的术语“治疗”意味对患者(如哺乳动物，尤其是人类)的疾病或医学病况(如高血压)进行治疗，包括：(a)预防所述疾病或医学病况发生，即，对患者进行预防性治疗；(b)改善所述疾病或医学病况，如通过消除患者的所述疾病或医学病况或引起所述疾病或医学病况消退；(c)抑制所述疾病或医学病况，如通过减缓或阻滞患者的所述疾病或医学病况的发展；或(d)减轻患者的所述疾病或医学病况的症状。举例来说，术语“治疗高血压”应包括预防高血压发生，改善高血压，抑制高血压，和减轻高血压的症状(例如，降低血压)。术语“患者”打算包括需要治疗或疾病预防，或目前正因特定疾病或医学病况的疾病预防或治疗而接受治疗的哺乳动物，如人类。术语“患者”还包括正评估本发明化合物的测试个体或正用于分析(例如动物模型)的测试个体。

本文中所用的所有其它术语都打算具有其所属领域的一般技术人员所了解的一般含义。

一般合成程序

本发明的结晶化合物可以如下文和实例中所描述由容易获得的起始物质合成。存在若干种可用于制造这些结晶化合物的方法。然而，应注意，结晶含量以及晶体特性(大小和形状)可以部分基于制备方法以及溶剂组成而改变。已观察到晶体具有片状、块状和针状形态。

应了解，尽管提供具体工艺条件(即，结晶温度、时间、反应物的摩尔比、溶剂、压力等)，但除非另外陈述，否则也可以使用其它工艺条件。在一些情况下，反应或结晶是在室温下进行，并且未测量实际温度。应理解，室温可以视为意味在通常与实验室环境中的环境温度相关的范围内的温度，且通常应在约15℃到约30℃范围内。在其它情况中，反应或结晶是在室温下进行，且实际测量温度并记录。

一般来说，本发明的结晶形式是通过首先用适当的平衡离子，即，1，2-乙二磺酸、萘-1，5-二磺酸或乙二酸处理4′-{2-乙氧基-4-乙基-5-[((S)-2-巯基-4-甲基戊酰基氨基)甲基]咪唑-1-基甲基}-3′-氟联苯-2-甲酸(本文中称为“游离碱”)来制备。

本发明中所采用的4′-{2-乙氧基-4-乙基-5-[((S)-2-巯基-4-甲基戊酰基氨基)甲基]-咪唑-1-基甲基}-3′-氟联苯-2-甲酸可以使用实例中所描述的程序或本申请案的背景技术部分中所描述的共同受让的美国申请案中所描述的程序由市售起始物质和试剂容易地制备。

为了制备本发明的结晶盐，通常使4′-{2-乙氧基-4-乙基-5-[((S)-2-巯基-4-甲基戊酰基氨基)甲基]-咪唑-1-基甲基}-3′-氟联苯-2-甲酸与约0.45到约1.2摩尔当量的适当平衡离子接触。在一个实施例中，使用约1.0到约1.2摩尔当量的1，2-乙二磺酸；且在一个特定实施例中，使用约1.1摩尔当量的1，2-乙二磺酸。在另一个实施例中，使用约1.0到约1.2摩尔当量的萘-1，5-二磺酸；且在一个特定实施例中，使用约1.1摩尔当量的萘-1，5-二磺酸。在另一个实施例中，使用约0.45到约0.65摩尔当量的萘-1，5-二磺酸；且在一个特定实施例中，使用约0.55摩尔当量的萘-1，5-二磺酸。在又一个实施例中，使用约0.9到约1.1摩尔当量的乙二酸；且在一个特定实施例中，使用约1.0摩尔当量的乙二酸。本发明方法中所描述的摩尔比率可以通过所属领域的技术人员可利用的各种方法容易地确定。举例来说，所述摩尔比率可以通过¹H NMR容易地确定。或者，可使用元素分析和HPLC方法来确定摩尔比率。

一般来说，在合适的惰性稀释剂或溶剂系统中进行结晶，其实例包括(但不限于)醇(例如甲醇、乙醇、异丙醇和异丁醇)、乙酸乙酯、乙腈、二氯甲烷、甲基叔丁基醚、四氢呋喃等及其混合物，且可任选地含有水。半乙二磺酸盐形式I的结晶可以使用醇(例如甲醇或乙醇)和甲基叔丁醚来进行。

在一个实施例中，半乙二磺酸盐形式II的结晶可以使用醇(例如乙醇)和甲基叔丁醚来进行。在另一个实施例中，半乙二磺酸盐形式II的结晶可以使用醇(例如乙醇)、甲基叔丁醚、水和乙酸乙酯来进行。在又一个实施例中，半乙二磺酸盐形式II的结晶可以使用醇(例如乙醇)、水和乙酸乙酯来进行。

半萘二磺酸盐的结晶可以使用醇(例如乙醇)和乙酸乙酯(任选地包括水)来进行。

单乙二酸盐的结晶可以使用乙腈、四氢呋喃和乙酸乙酯来进行。

一般来说，结晶是在室温下进行。然而，可能需要对混合物进行平缓加热(例如约30到80℃，更通常为约30到60℃)、搅拌或超声处理以辅助溶解。然后使混合物静置以便允许形成固体，然后分离所述固体以产生结晶形式。一般来说，固体将在室温下形成。然而，在这个步骤期间可以冷却混合物，例如冷却到约20到30℃。

在适量时间之后，将观察到晶体。在观察到晶体后，可减少母液的体积，并且分离并干燥晶体。自反应混合物中分离固体可以通过任何常规方法来实现，如沈淀、过滤、浓缩、离心、在真空下干燥等。还可以用惰性稀释剂洗涤固体。在一个实施例中，用乙醇、二噁烷或乙酸乙酯洗涤固体。

在初步结晶之后，后续处理程序可包括晶种以促进结晶。

结晶性质

尤其已发现形成式I化合物的结晶形式可用于纯化所述化合物自身。举例来说，本发明的结晶形式具有在98％到99％范围内的纯度。

如粉末x射线衍射领域内众所周知，PXRD图的相对峰高度取决于与样本制备和仪器几何形状有关的许多因素，而峰位置对实验细节相对不敏感。获得PXRD图和差示扫描量热法(DSC)热分析图，并且如实例9中所描述进行热解重量分析(TGA)和动态水分吸附(DMS)评估(也称为水分吸附-脱附分布)。因此，在一个实施例中，本发明的结晶化合物的特征在于PXRD图具有某些峰位置的PXRD图。在另一个实施例中，本发明的结晶化合物的特征在于DSC热分析图。在又一个实施例中，本发明的结晶化合物的特征在于TGA迹线。在另一实施例中，本发明的结晶化合物的特征在于偏振光微观(PLM)图像。

半乙二磺酸盐形式I

结晶半乙二磺酸盐形式I的特征在于PXRD图中的峰位置与图1中所显示的那些大体上一致。以下列出那些峰。仅列出相对峰高度(H％)为约15％或大于15％的峰。

¹距离基线的峰高度

²与最高的峰相比的峰高度百分比

*指出对于鉴别这种形式非常重要的峰

因此，在一个实施例中，结晶半乙二磺酸盐形式I的特征在于粉末x射线衍射(PXRD)图以包含2θ值在9.89±0.20、11.66±0.20、13.55±0.20、18.41±0.20、20.42±0.20和22.46±0.20处的衍射峰；且在另一个实施例中，其特征进一步在于在选自18.89±0.20、19.91±0.20、20.90±0.20、21.33±0.20、24.35±0.20、25.85±0.20、28.73±0.20和30.92±0.20的2θ值处具有一个或一个以上额外衍射峰。

在一个实施例中，结晶半乙二磺酸盐形式I的特征在于图2中的DSC热分析图。所述DSC热分析图显示，结晶半乙二磺酸盐形式I具有优良热稳定性，其中熔点为约158℃且在158℃以下无显著热分解。非复合物热分布在158℃下在熔融吸热线之前并未显示任何不合需要的吸热或放热峰，其表明这种结晶固体最可能是无水结晶形式。

在一个实施例中，结晶半乙二磺酸盐形式I的特征在于图3中的TGA分布。TGA迹线显示在低于约125℃的温度下少量损失溶剂和/或水(约1重量％)，其与损失残余水分或溶剂一致。

在一个实施例中，结晶半乙二磺酸盐形式I的特征在于图4中的DMS分布。这个DMS分布显示，这种形式在可接受的吸湿性程度下具有可逆的吸附/脱附分布。这种结晶形式在它曝露于从5％RH到高达90％RH的较宽湿度范围时具有较小重量增加(约0.38％)，并且在曝露于高达70％RH时具有小于约0.26％的重量增加。这就表明结晶半乙二磺酸盐形式I在环境条件下仅具有极小吸湿性风险。

在另一个实施例中，结晶半乙二磺酸盐形式I的特征在于图5中的PLM图像。

半乙二磺酸盐形式II

结晶半乙二磺酸盐形式II的特征在于PXRD图中的峰位置与图6中所显示的那些大体上一致。以下列出那些峰。仅列出相对峰高度(H％)为约15％或大于15％的峰。

¹距离基线的峰高度

²与最高的峰相比的峰高度百分比

*指出对于鉴别这种形式非常重要的峰

因此，在一个实施例中，结晶半乙二磺酸盐形式II的特征在于粉末x射线衍射(PXRD)图包含2θ值在9.74±0.20、11.00±0.20、12.89±0.20、14.27±0.20、15.54±0.20、18.62±0.20和23.78±0.20处的衍射峰；且在另一个实施例中，其特征进一步在于在选自17.81±0.20、18.14±0.20、21.44±0.20、22.25±0.20、23.15±0.20、24.80±0.20、25.28±0.20、26.03±0.20、26.58±0.20和28.01±0.20的2θ值处具有一个或一个以上额外衍射峰。

在一个实施例中，结晶半乙二磺酸盐形式II的特征在于图7中的DSC热分析图。所述DSC热分析图显示结晶半乙二磺酸盐形式II具有优良热稳定性，其中熔点为约182℃且在182℃以下无显著热分解。非复合物热分布在182℃下在熔融吸热线之前并未显示任何不合需要的吸热或放热峰，表明这种结晶固体最可能是无水结晶形式。

在一个实施例中，结晶半乙二磺酸盐形式II的特征在于图8中的TGA分布。TGA迹线显示在低于约180℃的温度下无溶剂和/或水损失，表明无水物质的相纯度。

在一个实施例中，结晶半乙二磺酸盐形式II的特征在于图9中的DMS分布。这个DMS分布显示，这种形式在可接受的吸湿性程度下具有可逆的吸附/脱附分布。这种结晶形式在它曝露于从5％RH到高达90％RH的较宽湿度范围时具有不显著的重量增加(约0.16％)，并且在曝露于高达70％RH时具有小于约0.10％的重量增加。这就表明结晶半乙二磺酸盐形式II在环境条件下仅具有极小吸湿性风险。

在另一个实施例中，结晶半乙二磺酸盐形式II的特征在于图10中的PLM图像。

半萘二磺酸盐

结晶半萘二磺酸盐的特征在于PXRD图中的峰位置与图11中所显示的那些大体上一致。以下列出那些峰。仅列出相对峰高度(H％)为约15％或大于15％的峰。

¹距离基线的峰高度

²与最高的峰相比的峰高度百分比

*指出对于鉴别这种形式非常重要的峰

因此，在一个实施例中，结晶半萘二磺酸盐的特征在于粉末x射线衍射(PXRD)图包含2θ值在4.84±0.20、9.41±0.20、10.82±0.20、17.39±0.20、24.17±0.20和24.65±0.20处的衍射峰；且在另一个实施例中，其特征进一步在于在选自14.05±0.20、18.65±0.20、19.55±0.20、20.21±0.20、21.44±0.20、23.48±0.20、25.69±0.20、26.65±0.20、28.79±0.20、29.63±0.20和30.52±0.20的2θ值处具有一个或一个以上额外的衍射峰。

在一个实施例中，结晶半萘二磺酸盐的特征在于图12中的DSC热分析图。DSC热分析图显示结晶半萘二磺酸盐形式具有优良热稳定性，其中熔点为约181℃且在181℃以下无显著热分解。热分布似乎显示100℃以下的浅吸热峰，其可能对应于晶格内所含的或吸附在结晶表面上的少量溶剂。

在一个实施例中，结晶半萘二磺酸盐的特征在于图13中的TGA分布。TGA迹线显示在低于约125℃的温度下损失少量溶剂和/或水(约0.5重量％)，其与残余的或晶格所包括的水分或溶剂损失一致。

在一个实施例中，结晶半萘二磺酸盐的特征在于图14中的DMS分布。这个DMS分布显示，这种形式在可接受的吸湿性程度下具有可逆的吸附/脱附分布。这种结晶形式在它曝露于从5％RH到高达90％RH的较宽湿度范围时具有较小重量增加(约0.97％)，并且在曝露于高达70％RH时具有小于约0.68％的重量增加。这就表明结晶半萘二磺酸盐在环境条件下仅具有极小吸湿性风险。

已经通过晶体结构的x射线衍射分析进一步表征结晶半萘二磺酸盐，得到以下晶格参数：单位晶胞为三斜晶系，其中尺寸

α＝80.754(8)，β＝79.286(7)，γ＝66.111(6)，空间群为P1bar；计算密度为1.337g/cm³。所得晶体结构证实化合物的化学组成为式I化合物，并且不对称单位含有两个对称的独立的{2-乙氧基-4-乙基-5-[((S)-2-巯基-4-甲基戊酰基氨基)甲基]咪唑-1-基甲基}-3′-氟联苯-2-甲酸分子、一个萘二硫酸根阴离子和大约半个水分子，从而确定这种晶体为水合物。根据所获得的原子位置计算的粉末x射线衍射峰与观察结果具有优良一致性。

在另一个实施例中，结晶半萘二磺酸盐的特征在于图15中的PLM图像。

单乙二酸盐

结晶单乙二酸盐的特征在于PXRD图中的峰位置与图17中所显示的那些大体上一致。以下列出那些峰。仅列出相对峰高度(H％)为约10％或大于10％的峰。2θ中的区域5°到40°中的尖衍射峰表明存在结晶物质。2θ中的区域15°到30°中的延伸晕对应于物质中的一些未结晶的非晶含量。

¹距离基线的峰高度

²与最高的峰相比的峰高度百分比

*指出对于鉴别这种形式非常重要的峰

因此，在一个实施例中，结晶单乙二酸盐的特征在于粉末x射线衍射(PXRD)图包含2θ值在6.1±0.20、11.0±0.20、13.0±0.20、14.4±0.20、15.2±0.20、16.5±0.20、17.3±0.20、18.4±0.20、21.9±0.20、23.9±0.20、24.3±0.20、24.5±0.20和26.1±0.20处的衍射峰；且在另一个实施例中，其特征进一步在于在选自15.8±0.20、18.1±0.20、19.1±0.20、20.3±0.20、20.5±0.20、22.3±0.20、22.8±0.20、24.9±0.20、27.4±0.20、27.8±0.20、30.6±0.20、31.4±0.20和36.9±0.20的2θ值处具有一个或一个以上额外的衍射峰。

在一个实施例中，结晶单乙二酸盐的特征在于图18中的DSC热分析图。所述DSC热分析图显示结晶单乙二酸盐具有优良热稳定性，其中熔点为约115℃。在熔融转变之前未观察到其它热事件，且在140℃以下未观察到显著热分解。

在一个实施例中，结晶单乙二酸盐的特征在于图19中的TGA分布。TGA迹线显示在熔融之前或熔融期间无质量损失。所述物质在140℃之后分解，如TGA迹线中的显著重量损失所证明。

在一个实施例中，结晶单乙二酸盐的特征在于图20中的DMS分布。这个DMS分布显示在吸附环节期间，所述物质逐渐获得材料从5％RH到90％RH的逐渐获得水分，而在干燥环节期间损失水分。水分最可能被所述物质内的非晶区含量吸收。在对固体进行水分吸附和脱附环节之后，固体仍呈已知的无水形式，如由通过粉末X射线衍射分析和差示扫描量热法所证实。

在另一个实施例中，结晶单乙二酸盐的特征在于图21中的PLM图像，所述PLM图像显示物质具有双折射性。

效用

式I化合物具有血管紧张素II1型(AT₁)受体拮抗剂活性和肾胰岛素残基溶酶(NEP)抑制活性，即，所述化合物能够抑制酶底物活性。化合物对AT₁受体的亲合性的一个量度为对结合AT₁受体的抑制常数(K_i)。pK_i值为K_i的以10为底的负对数。化合物抑制NEP活性的能力的一个量度为抑制浓度(IC₅₀)，其为导致NEP酶对底物的转化受到半最大抑制的化合物浓度。pIC₅₀值为IC₅₀的以10为底的负对数。式I化合物展现在AT₁受体下的pK_i大于或等于约7.0，且展现针对NEP的pIC₅₀大于或等于约7.0。

用于测定本发明的式I化合物以及结晶形式的性质(如AT₁受体结合和/或NEP抑制活性)的示范性分析描述于美国公开案第2008/0269305号和第2009/0023228号(都颁予阿莱格雷蒂(Allegretti)等人)中，并且说明性且非限制性地包括测量AT₁和AT₂结合和NEP抑制的分析。可用的二级分析包括：用于测量血管收缩素转化酶(ACE)抑制的分析；用于测量氨基肽酶P(APP)抑制的分析；和用于评定在麻醉大鼠中对ACE、AT₁和NEP的活体内抑制效能的药效学分析(塞默(Seymour)等人，高血压(Hypertension)7(增刊I)：I-35-I-42，1985；和威戈(Wigle)等人，加拿大生理学与药理学杂志(Can.J.Physiol.Pharmacol.)70：1525-1528，1992)，其中AT₁抑制测量为对血管紧张素II加压反应的抑制百分比，ACE抑制测量为血管紧张素I加压反应的抑制百分比，且NEP抑制测量为增加的尿液环状鸟嘌呤核苷3′，5′-单磷酸盐(cGMP)输出。可用的活体内分析包括有意识的自发性高血压大鼠(SHR)模型、可用于测量AT₁受体阻断的肾素依赖性高血压模型(因滕甘(Intengan)等人(1999)，循环(Circulation)100(22)：2267-2275；和巴迪亚(Badyal)等人(2003)，印度药理学杂志(Indian Journal of Pharmacology)35：349-362)和有意识的去氧皮质酮乙酸盐(DOCA-盐)大鼠模型、可用于测量NEP活性的体积依赖性高血压模型(特拉帕尼(Trapani)等人(1989)心血管药理学杂志(J.Cardiovasc.Pharmacol.)14：419-424；因滕甘等人(1999)高血压34(4)：907-913；和巴迪亚等人(2003)，同上)。SHR模型与DOCA-盐模型都可用于评估测试化合物降低血压的能力。DOCA-盐模型还适用于测量测试化合物预防或延缓血压升高的能力。预期本发明的式I化合物以及结晶形式在上文所列出的任何分析或类似性质的分析中都拮抗AT₁受体并且抑制NEP酶。因此，上述分析可用于测定本发明的结晶形式的治疗效用，例如，其作为抗高血压药剂的效用。所述结晶形式的其它性质和效用可使用所属领域的技术人员众所周知的其它活体外和活体内分析来证明。

因此，预期式I化合物的结晶形式可用于治疗和/或预防对AT₁受体拮抗和NEP抑制有反应的医学病况。举例来说，通过拮抗AT₁受体且因此干扰血管紧张素II对其受体的作用，预期结晶形式可用于预防血管紧张素II(一种强效血管加压剂)所产生的血压升高。另外，通过抑制NEP，还预期结晶形式可加强通过NEP代谢的内源肽(如钠利尿肽、铃蟾肽、缓激肽、降钙素、内皮素、脑啡肽、神经降压素、P物质和血管活性肠肽)的生物作用。举例来说，通过加强钠利尿肽的作用，预期所述结晶化合物可用于治疗青光眼。还预期本发明的结晶形式具有例如对肾脏、中枢神经、生殖和胃肠系统的其它生理作用。

预期本发明的结晶形式可用于治疗和/或预防医学病况，如心血管和肾脏疾病。尤其相关的心血管疾病包括心力衰竭，如充血性心力衰竭、急性心力衰竭、慢性心力衰竭，和急性与慢性失代偿性心力衰竭。尤其相关的肾病包括糖尿病性肾病和慢性肾病。本发明的一个实施例针对用于治疗高血压的方法，所述方法包含向患者投与治疗有效量的本发明的结晶形式。通常，治疗有效量是足以降低患者血压的量。在一个实施例中，结晶形式以口服剂型的形式投与。

本发明的另一个实施例针对用于治疗心力衰竭的方法，所述方法包含向患者投与治疗有效量的本发明的结晶形式。通常，治疗有效量是足以降低血压和/或改进肾功能的量。在一个实施例中，结晶形式以静脉内剂型的形式投与。当用于治疗心力衰竭时，所述结晶形式可与其它治疗剂(如利尿剂、钠利尿肽和腺苷受体拮抗剂)组合投与。

还预期本发明的结晶形式可用于预防性疗法，例如用于预防心肌梗塞后心功能不全进展、预防血管成形术后动脉再狭窄、预防血管手术后血管壁变厚、预防动脉粥样硬化和预防糖尿病性血管病变。

另外，作为NEP抑制剂，预期本发明的结晶形式可抑制脑啡肽酶，其将抑制内源性脑啡肽降解，且因此，所述化合物还可以用作镇痛剂。由于其NEP抑制性质，还预期所述结晶形式可用作止咳剂和止泻剂(例如，用于治疗水泻)，以及用于治疗月经失调、早产、痉挛前症、子宫内膜异位症、生殖病症(例如，男性和女性不孕不育症、多囊卵巢综合症、着床失败)以及男性和女性性功能障碍，包括男性勃起功能障碍和女性性唤起障碍。更具体来说，预期所述结晶形式可用于治疗女性性功能障碍，其通常定义为女性患者难以或不能对性表达感到满足。这一病症涵盖多种不同的女性性功能障碍，说明性且非限制性地包括性欲减退症(hypoactive sexual desire disorder)、性唤起障碍、性高潮障碍和性疼痛障碍。当用于治疗所述病症，尤其是女性性功能障碍时，结晶形式可与一种或一种以上如下第二药剂组合：PDE5抑制剂、多巴胺促效剂、雌激素受体促效剂和/或拮抗剂、雄激素和雌激素。

每剂量投与的结晶形式的量或每天投与的总量可以预先确定，或可基于个别患者通过考虑许多因素而确定，所述因素包括患者病况的性质和严重程度、所治疗的病况、患者的年龄、体重和一般健康状况、患者对活性剂的耐受性、投药途径、药理学考虑(如化合物的活性、效力、药物动力学和毒物学特征)和所投与的任何第二药剂等。罹患疾病或医学病况(如高血压)的患者的治疗可从预先确定的剂量或治疗医生所确定的剂量开始，且将持续一段预防、改善、抑制或减轻所述疾病或医学病况的症状所必需的时间。通常，应常规地监测接受所述治疗的患者以确定疗法的有效性。举例来说，在治疗高血压时，可使用血压测量来确定治疗的有效性。本文所述的其它疾病和病况的类似指标众所周知，且易于为治疗医生所用。医师的连续监测将确保将在任何指定时间投与结晶形式的最佳量，以及有助于确定治疗持续时间。这在还在投与第二药剂时尤其有价值，因为所述第二药剂的选择、剂量和疗法的持续时间也可能需要调整。以此方式，可在疗法过程中调整治疗方案和给药时程，以便投与最少量的活性剂来展现所需有效性，且另外，投药仅持续成功治疗疾病或医学病况所必需的时间。

因为预期本发明的结晶形式具有AT₁受体拮抗活性和NEP酶抑制活性，所以其还可用作调查或研究具有AT₁受体或NEP酶的生物系统或样本的探索工具，例如，用于研究AT₁受体或NEP酶起作用的疾病。任何具有AT₁受体和/或NEP酶的合适的生物系统或样本都可用于可在活体外或活体内进行的研究中。适于所述研究的代表性生物系统或样本包括(但不限于)：细胞、细胞提取物、质膜、组织样本、离体器官、哺乳动物(如小鼠、大鼠、天竺鼠、兔、狗、猪、人等)等，其中哺乳动物尤其相关。在本发明的一个特定实施例中，通过投与AT₁拮抗量的结晶形式来拮抗哺乳动物中的AT₁受体。在另一个特定实施例中，通过投与NEP抑制量的结晶形式来抑制哺乳动物中的NEP酶活性。所述结晶形式还可以通过使用所述形式进行生物学分析而用作探索工具。

当用作探索工具时，包含AT₁受体和/或NEP酶的生物系统或样本通常与AT₁受体拮抗量或NEP酶抑制量的结晶形式接触。在所述生物系统或样本曝露于所述结晶形式之后，使用常规程序和设备测定拮抗所述AT₁受体和/或抑制所述NEP酶的作用，如通过在结合分析中测量受体结合或在功能分析中测量配体介导的变化。曝露涵盖使细胞或组织与化合物接触、向哺乳动物投与化合物(例如通过腹膜内、静脉内或皮下投药)等。这个测定步骤可以涉及测量反应(定量分析)或可以涉及进行观察(定性分析)。测量反应涉及例如使用常规程序和设备(如放射性配体结合分析)测定结晶形式对生物系统或样本的作用和在功能分析中测量配体介导的变化。分析结果可用于确定活性程度以及达到所需结果所必需的化合物的量，即，AT₁受体拮抗量和/或NEP酶抑制量。通常，测定步骤将涉及测定AT₁受体配体介导的作用和/或测定抑制NEP酶的作用。

另外，本发明的结晶形式可用作评估其它化合物的探索工具，且因此也可用于筛选分析以发现例如具有AT₁受体拮抗活性和/或NEP抑制活性的新颖化合物。以此方式，结晶形式在分析中用作标准物以比较用测试化合物获得的结果与用结晶形式获得的结果，以便鉴别具有大致相等或优越活性的那些测试化合物(若存在)。举例来说，将测试化合物或一组测试化合物的K_i数据(例如，如通过结合分析所测定)与结晶形式的K_i数据相比较，以便鉴别具有所需性质的那些测试化合物(若存在)，例如K_i值约等于或优于本发明的结晶形式的测试化合物。本发明的这一方面包括(作为独立实施例)产生比较数据(使用适当分析)和分析测试数据以便鉴别相关的测试化合物。因此，可在生物学分析中通过包含以下步骤的方法来评估测试化合物：(a)用测试化合物进行生物学分析以提供第一分析值；(b)用本发明的结晶形式进行所述生物学分析以提供第二分析值；其中步骤(a)在步骤(b)之前、之后或与步骤(b)同时进行；和(c)比较得自步骤(a)的所述第一分析值与得自步骤(b)的所述第二分析值。示范性生物分析包括AT₁受体结合分析和NEP酶抑制分析。

医药组合物和调配物

本发明的结晶形式通常以医药组合物或调配物的形式投与患者。所述医药组合物可由任何可接受的投药途径投与患者，所述投药途径包括(但不限于)口服、经直肠、经阴道、经鼻、吸入、表面(包括经皮)、经眼和肠胃外投药模式。此外，结晶形式可以例如以每天多次剂量(例如每天两次、三次或四次)、以单一日剂量或单一周剂量的形式口服投与。所述领域的技术人员应理解，在结晶形式已经过调配后，其可能不再呈结晶形式，即，结晶形式可溶解于合适的载剂中。

因此，在一个实施例中，本发明涉及一种医药组合物，其包含医药学上可接受的载剂和4′-{2-乙氧基-4-乙基-5-[((S）-2-巯基-4-甲基戊酰基氨基)甲基]咪唑-1-基甲基}-3′-氟联苯-2-甲酸的结晶形式。所述医药组合物在需要时还可以含有其它治疗剂和/或调配剂。当论述组合物时，“本发明的结晶形式”在本文中还可以称为“活性剂”以将其与调配物的其它组分(如载剂)区分。

本发明的医药组合物通常含有治疗有效量的结晶形式。然而，所述领域的技术人员应承认，医药组合物可含有多于一个治疗有效量(如散装组合物)或少于一个治疗有效量(即，设计用于多次投药以达到治疗有效量的个别单位剂量)。通常，所述组合物将含有约0.01重量％到95重量％的活性剂，包括约0.01重量％到30重量％，如约0.01重量％到10重量％，其中实际量取决于调配物本身、投药途径、给药频率等。在一个实施例中，适于口服剂型的组合物例如可含有约5重量％到70重量％或约10重量％到60重量％的活性剂。

任何常规载剂或赋形剂都可用于本发明的医药组合物中。特定载剂或赋形剂的选择或载剂或赋形剂的组合将取决于正用于治疗特定患者的投药模式，或医学病况或疾病况态的类型。在这方面，适用于特定投药模式的组合物的制备完全在制药领域的技术人员的范畴内。另外，所述组合物中所使用的载剂或赋形剂在市面上有售。作为进一步说明，常规调配技术描述于雷明登氏药学理论与实践（Remington：The Science and Practice ofPharmacy)，第20版，利平科特.威廉斯.怀特出版公司(Lippincott Williams & White)，马里兰州巴尔的摩(Baltimore，Maryland)(2000)；和H.C.安塞尔(H.C.Ansel)等人，药物剂型与给药系统(Pharmaceutical Dosage Forms and Drug Delivery Systems)，第7版，利平科特.威廉斯.怀特出版公司，马里兰州巴尔的摩(1999)中。

可充当医药学上可接受的载剂的物质的代表性实例包括(但不限于)以下：糖类，如乳糖、葡萄糖和蔗糖；淀粉，如玉米淀粉和马铃薯淀粉；纤维素，如微晶纤维素，和其衍生物，如羧甲基纤维素钠、乙基纤维素和乙酸纤维素；粉末状黄芪胶；麦芽；明胶；滑石；赋形剂，如可可脂和栓剂蜡；油类，如花生油、棉籽油、红花油、芝麻油、橄榄油、玉米油和大豆油；二醇类，如丙二醇；多元醇，如甘油、山梨糖醇、甘露糖醇和聚乙二醇；酯类，如油酸乙酯和月桂酸乙酯；琼脂；缓冲剂，如氢氧化镁和氢氧化铝；褐藻酸；无热原质水；等张盐水；林格氏溶液(Ringer′s solution)；乙醇；磷酸盐缓冲溶液；压缩推进剂气体，如氟氯化碳和氢氟碳；和医药组合物中所采用的其它无毒相容物质。

医药组合物通常是通过将活性剂与医药学上可接受的载剂和一种或一种以上可选成分充分地且紧密地混合或掺合而制备。然后，可使用常规程序和设备使所得的均匀掺合的混合物定型或将其装入片剂、胶囊、丸剂、罐、筒、分配器等中。

因为本发明的结晶形式含有硫醇基，所以可进行额外考虑以减少或消除硫醇氧化形成二硫化物。在固体调配物中，这可以通过减少干燥时间、降低调配物的水分含量和包括抗氧化剂(如抗坏血酸、抗坏血酸钠、亚硫酸钠和亚硫酸氢钠)以及多种物质(如乳糖与微晶纤维素的混合物)来实现。在液体调配物中，可加入氨基酸、抗氧化剂或乙二胺四乙酸二钠与抗坏血酸的组合来改进硫醇稳定性。

在一个实施例中，医药组合物适合口服投药。适合口服投药的组合物可呈以下形式：胶囊、片剂、丸剂、口含片(lozenge)、扁囊剂、糖衣丸、散剂、颗粒；水性或非水性液体中的溶液或悬浮液；水包油或油包水型液体乳液；酏剂或糖浆等；各含有预先确定的量的活性剂。

当打算以固体剂型(胶囊、片剂、丸剂等)口服投药时，所述组合物通常将包含活性剂和一种或一种以上医药学上可接受的载剂，如柠檬酸钠或磷酸二钙。固体剂型还可以包含：填充剂或增量剂，如淀粉、微晶纤维素、乳糖、蔗糖、葡萄糖、甘露糖醇和/或硅酸；粘合剂，如羧甲基纤维素、褐藻酸盐、明胶、聚乙烯吡咯烷酮、蔗糖和/或阿拉伯胶；保湿剂，如甘油；崩解剂，如琼脂-琼脂、碳酸钙、马铃薯或木薯淀粉、褐藻酸、某些硅酸盐和/或碳酸钠；溶解延迟剂，如石蜡；吸收促进剂，如季铵化合物；湿润剂，如鲸蜡醇和/或单硬脂酸甘油酯；吸收剂，如高岭土和/或膨润土；润滑剂，如滑石、硬脂酸钙、硬脂酸镁、固体聚乙二醇、月桂基硫酸钠和/或其混合物；着色剂；和缓冲剂。

脱模剂、湿润剂、涂布剂、甜味剂、调味剂和香料、防腐剂和抗氧化剂也可以存在于医药组合物中。用于片剂、胶囊、丸剂等的示范性涂布剂包括用于肠溶衣的涂布剂，例如乙酸邻苯二甲酸纤维素、聚乙酸乙烯邻苯二甲酸酯、邻苯二甲酸羟丙基甲基纤维素、甲基丙烯酸-甲基丙烯酸酯共聚物、乙酸偏苯三酸纤维素、羧甲基乙基纤维素、乙酸丁二酸羟丙基甲基纤维素(hydroxypropyl methyl cellulose acetate succinate)等。医药学上可接受的抗氧化剂的实例包括：水溶性抗氧化剂，如抗坏血酸、半胱氨酸盐酸盐、硫酸氢钠、焦亚硫酸钠、亚硫酸钠等；油溶性抗氧化剂，如抗坏血酸棕榈酸酯、丁基化羟基茴香醚、丁基化羟基甲苯、卵磷脂、没食子酸丙酯、α-生育酚等；和金属螯合剂，如柠檬酸、乙二胺四乙酸、山梨糖醇、酒石酸、磷酸等。

也可以使用例如不同比例的羟丙基甲基纤维素或其它聚合物基质、脂质体和/或微球体来调配组合物以提供活性剂的缓慢或控制释放。另外，本发明的医药组合物也可以含有乳浊剂，且可经调配使得其任选以延迟方式在胃肠道的某些部分单独或优先释放活性剂。可使用的包埋组合物的实例包括聚合物质和蜡。活性剂也可以任选地与一种或一种以上上述赋形剂一起呈微囊封形式。

适合口服投药的液体剂型包括(作为说明)医药学上可接受的乳液、微乳液、溶液、悬浮液、糖浆和酏剂。液体剂型通常包含活性剂；和惰性稀释剂，例如水或其它溶剂；增溶剂和乳化剂，如乙醇、异丙醇、碳酸乙酯、乙酸乙酯、苯甲醇、苯甲酸苯甲酯、丙二醇、1，3-丁二醇、油(例如，棉籽油、花生油、玉米油、胚芽油、橄榄油、蓖麻油和芝麻油)、甘油、四氢呋喃醇、聚乙二醇和脱水山梨糖醇脂肪酸酯；和其混合物。悬浮液可含有悬浮剂，例如乙氧基化异硬脂醇、聚氧化乙烯山梨糖醇和脱水山梨糖醇酯、微晶纤维素、偏氢氧化铝、膨润土、琼脂和黄芪胶和其混合物。

当打算口服投药时，本发明的医药组合物可以单位剂型的形式进行包装。术语“单位剂型”是指适合投与患者的物理离散单元，即，各单元含有预定量的活性剂且经过计算以便单独或与一个或一个以上额外的单元组合产生所需治疗作用。举例来说，所述单位剂型可为胶囊、片剂、丸剂等。

在另一个实施例中，本发明组合物适合吸入投药，且通常将呈气溶胶或散剂的形式。所述组合物一般来说是使用众所周知的传递装置投与，如喷雾器、干粉吸入器或定剂量吸入器。喷雾器装置产生高速气流，其使所述组合物呈雾状喷射，从而被载运到患者的呼吸道中。示范性喷雾器调配物包含活性剂溶解于载剂中所形成的溶液，或将活性剂微粉化且与载剂组合所形成的可吸入尺寸的微粉化粒子的悬浮液。干粉吸入器投与呈自由流动的粉末形式的活性剂，所述活性剂在吸气期间分散于患者的气流中。示范性干粉调配物包含活性剂与赋形剂(如乳糖、淀粉、甘露糖醇、右旋糖、聚乳酸、聚丙交酯-共-乙交酯和其组合)的干式掺合物。定剂量吸入器使用压缩推进剂气体放出所测量的量的活性剂。示范性定剂量调配物包含活性剂于液化推进剂(如氟氯化碳或氢氟烷)中的溶液或悬浮液。所述调配物的可选组分包括共溶剂，如乙醇或戊烷；和表面活性剂，如脱水山梨糖醇三油酸酯、油酸、卵磷脂、甘油和月桂基硫酸钠。所述组合物通常是通过将冷却过或加压的氢氟烷加入含有活性剂、乙醇(如果存在)和表面活性剂(如果存在)的合适容器中来制备。为制备悬浮液，将活性剂微粉化，然后与推进剂组合。或者，也可通过喷雾干燥活性剂的微粉化粒子上的表面活性剂涂层来制备悬浮液调配物。然后将所述调配物装入气溶胶罐中，所述气溶胶罐构成吸入器的一部分。

本发明的结晶形式还可以肠胃外方式(例如，通过皮下、静脉内、肌肉内或腹膜内注射)投与。对于所述投药来说，活性剂是以无菌溶液、悬浮液或乳液的形式提供。用于制备所述调配物的示范性溶剂包括水、盐水、低分子量醇(例如丙二醇、聚乙二醇)、油、明胶、脂肪酸酯(例如油酸乙酯)等。肠胃外调配物也可含有一种或一种以上抗氧化剂、增溶剂、稳定剂、防腐剂、湿润剂、乳化剂和分散剂。表面活性剂、附加的稳定剂或pH值调节剂(酸、碱或缓冲液)和抗氧化剂尤其可用于为调配物提供稳定性，例如以便使酯和酰胺键联水解或化合物中所存在的硫醇二聚的程度最小化或避免发生。可通过使用无菌可注射介质、灭菌剂、过滤、照射或热促使这些调配物无菌。在一个特定实施例中，肠胃外调配物包含环糊精水溶液作为医药学上可接受的载剂。合适的环糊精包括含有6个或6个以上如同在淀粉酶中通过键联连接在1，4位的α-D-吡喃型葡萄糖单元的环状分子、β-环糊精或环庚直链淀粉。示范性环糊精包括环糊精衍生物，如羟丙基环糊精和磺丁基醚环糊精，如羟丙基-β-环糊精和磺丁基醚β-环糊精。用于所述调配物的示范性缓冲液包括基于羧酸的缓冲液，例如柠檬酸盐、乳酸盐和顺丁烯二酸盐缓冲溶液。

本发明的结晶形式还可以使用已知的经皮传递系统和赋形剂经皮投与。举例来说，可将所述化合物与例如丙二醇、聚乙二醇单月桂酸酯、氮杂环烷-2-酮等渗透增强剂混合，且并入贴片或类似的传递系统中。必要时，所述经皮组合物中也可使用其它赋形剂，包括胶凝剂、乳化剂和缓冲液。

必要时，本发明的结晶形式可与一种或一种以上其它治疗剂组合投与。因此，在一个实施例中，本发明的医药组合物含有与本发明的结晶形式共同投与的其它药物。举例来说，所述组合物可进一步包含一种或一种以上选自以下各物的群组的治疗剂(也称为“第二药剂”)：利尿剂、β₁肾上腺素受体阻断剂、钙通道阻断剂、血管收缩素转化酶抑制剂、AT₁受体拮抗剂、肾胰岛素残基溶酶抑制剂、非类固醇消炎剂、前列腺素、抗脂质剂、抗糖尿病剂、抗血栓形成剂、肾素抑制剂、内皮素受体拮抗剂、内皮素转化酶抑制剂、醛固酮拮抗剂、血管收缩素转化酶/肾胰岛素残基溶酶抑制剂和其组合。所述治疗剂在此项技术中众所周知，且实例描述于下文中。通过组合本发明的结晶化合物与第二药剂，可获得三重疗法；可仅使用两种活性组分来达成AT₁受体拮抗剂活性、NEP抑制活性和与第二药剂(例如β₁肾上腺素受体阻断剂)相关的活性。由于含有两种活性组分的组合物通常比含有三种活性组分的组合物更易于调配，因此所述双组分组合物提供优于含有三种活性组分的组合物的显著优势。因此，在本发明的又一个实施例中，医药组合物包含本发明的结晶化合物、第二活性剂和医药学上可接受的载剂。所述组合物中还可以包括第三活性剂、第四活性剂等。在组合疗法中，所投与的结晶形式的量以及第二药剂的量可以小于单一疗法中通常投与的量。

可将本发明的结晶形式与第二活性剂进行物理混合以形成含有两种药剂的组合物，或各药剂可存在于独立且不同的组合物中，所述组合物是同时或在独立时间投与患者。举例来说，可使用常规程序和设备将结晶形式与第二活性剂组合以形成包含本发明化合物的活性剂与第二活性剂的组合。另外，所述活性剂可与医药学上可接受的载剂组合以形成包含本发明的结晶形式、第二活性剂和医药学上可接受的载剂的医药组合物。在这一实施例中，通常混合或掺合所述组合物的组分以产生物理混合物。然后，使用本文中所描述的任何途径投与治疗有效量的所述物理混合物。

或者，活性剂可在投与患者之前保持独立且不同。在这一实施例中，所述药剂在投药之前并未物理混合在一起，而是以独立组合物的形式同时或在独立时间投与。所述组合物可单独包装，或可一起包装在试剂盒中。当在独立时间投与时，所述第二药剂通常将在投与所述结晶化合物后小于24小时内投与，所述投药时间在与投与所述结晶化合物同时到给药后约24小时范围内。这也称为相继投药。因此，可使用两种片剂同时或相继经口投与本发明的结晶形式与另一活性剂，其中每种活性剂用于一种片剂，其中相继可以意味投与所述结晶化合物后立即投与或在一定的预定时间后(例如，一小时后或三小时后)投与。或者，可以通过不同的投药途径投与所述组合，即，一种经口投与而另一种通过吸入投与。

在本发明的一个实施例中，套组以足以进行本发明方法的量包含第一剂型，其包含本发明的结晶形式；和至少一种额外剂型，其包含一种或一种以上本文中所阐述的第二药剂。第一剂型和第二(或第三等)剂型合起来包含治疗有效量的活性剂来治疗或预防患者的疾病或医学病况。

当包括第二药剂时，第二药剂以治疗有效量存在，使得其通常以在与本发明的结晶形式共同投与时产生治疗上有益的作用的量投与。与结晶形式组合投与的这些第二药剂的合适剂量在约0.05μg/天到约100mg/天范围内。第二药剂可呈医药学上可接受的盐、溶剂化物、光学纯立体异构体等形式。第二药剂也可呈前药形式，例如具有已酯化的羧酸基的化合物。因此，下文所列的第二药剂打算包括所有所述形式，且在市面上有售或可使用常规程序和试剂制备。

在一个实施例中，本发明的结晶形式与利尿剂组合投与。代表性利尿剂包括(但不限于)：碳酸酐酶抑制剂，如乙酰唑胺(acetazolamide)和双氯非那胺(dichlorphenamide)；环利尿剂，其包括磺酰胺衍生物，如乙酰唑胺、安布赛特(ambuside)、阿佐塞米(azosernide)、布美他尼(bumetanide)、布他唑胺(butazolamide)、氯米非那胺(chloraminophenamide)、氯非那胺(clofenamide)、氯帕胺(clopamide)、氯索隆(clorexolone)、二磺法胺(disulfamide)、乙塞唑胺(ethoxolamide)、呋塞米(furosemide)、美夫西特(mefruside)、甲醋唑胺(methazolamide)、吡咯他尼(piretanide)、托西迈(torsemide)、三酰胺(tripamide)和希伯胺(xipamide)，以及非磺酰胺利尿剂，如利尿酸和其它苯氧基乙酸化合物，如替尼酸(tienilicacid)、茚达立酮(indacrinone)和喹卡酯(quincarbate)；渗透性利尿药，如甘露糖醇；保钾利尿剂，其包括醛固酮拮抗剂，如螺内酯，和Na⁺通道抑制剂，如阿米洛利(amiloride)和三氨蝶呤(triamterene)；噻嗪和类噻嗪利尿剂，如阿尔噻嗪(althiazide)、苄氟甲噻嗪(bendroflumethiazide)、苄氢氯噻嗪(benzylhydrochlorothiazide)、苄噻嗪(benzthiazide)、布噻嗪(buthiazide)、氯噻酮(chlorthalidone)、氯噻嗪(chlorothiazide)、环戊噻嗪(cyclopenthiazide)、环噻嗪(cyclothiazide)、依匹噻嗪(epithiazide)、乙噻嗪(ethiazide)、芬喹唑(fenquizone)、氟甲噻嗪(flumethiazide)、氢氯噻嗪(hydrochlorothiazide)、氢氟噻嗪(hydroflumethiazide)、吲达帕胺(indapamide)、甲氯噻嗪(methylclothiazide)、美替克仑(meticrane)、美托拉宗(metolazone)、对氟噻嗪(paraflutizide)、泊利噻嗪(polythiazide)、喹乙宗(quinethazone)、四氯噻嗪(teclothiazide)和三氯噻嗪(trichloromethiazide)；和其组合。在一个特定实施例中，利尿剂选自阿米洛利、布美他尼、氯噻嗪、氯噻酮、双氯非那胺、利尿酸、呋塞米、氢氯噻嗪、氢氟噻嗪、吲达帕胺、甲氯噻嗪、美托拉宗、托西迈、三氨蝶呤和其组合。利尿剂将以足以提供每天约5到50mg的量投与，更通常为每天6到25mg，常用剂量为每天6.25mg、12.5mg或25mg。。

本发明的结晶形式还可以与β₁肾上腺素受体阻断剂组合投与。代表性β₁肾上腺素受体阻断剂包括(但不限于)醋丁洛尔(acebutolol)、阿普洛尔(alprenolol)、氨磺洛尔(amosulalol)、阿罗洛尔(arotinolol)、阿替洛尔(atenolol)、苯呋洛尔(befunolol)、倍他洛尔(betaxolol)、贝凡洛尔(bevantolol)、比索洛尔(bisoprolol)、波吲洛尔(bopindolol)、布新洛尔(bucindolol)、布库洛尔(bucumolol)、布非洛尔(bufetolol)、丁呋洛尔(bufuralol)、布尼洛尔(bunitrolol)、布拉洛尔(bupranolol)、布利定(bubridine)、丁非洛尔(butofilolol)、卡拉洛尔(carazolol)、卡替洛尔(carteolol)、卡维地洛(carvedilol)、塞利洛尔(celiprolol)、塞他洛尔(cetamolol)、氯拉洛尔(cloranolol)、地来洛尔(dilevalol)、依泮洛尔(epanolol)、艾司洛尔(esmolol)、茚诺洛尔(indenolol)、拉贝洛尔(labetolol)、左布诺洛尔(levobunolol)、甲吲洛尔(mepindolol)、美替洛尔(metipranolol)、美托洛尔(metoprolol)(如丁二酸美托洛尔和酒石酸美托洛尔)、莫普洛尔(moprolol)、纳多洛尔(nadolol)、萘肟洛尔(nadoxolol)、奈必洛尔(nebivalol)、尼普洛尔(nipradilol)、氧烯洛尔(oxprenolol)、喷布洛尔(penbutolol)、喷布洛尔(perbutolol)、吲哚洛尔(pindolol)、普拉洛尔(practolol)、丙萘洛尔(pronethalol)、普萘洛尔(propranolol)、索他洛尔(sotalol)、苏芬洛尔(sufinalol)、他林朵尔(talindol)、特他洛尔(tertatolol)、替利洛尔(tilisolol)、噻吗洛尔(timolol)、托利洛尔(toliprolol)、希苯洛尔(xibenolol)和其组合。在一个特定实施例中，β₁肾上腺素受体阻断剂选自阿替洛尔、比索洛尔、美托洛尔、普萘洛尔、索他洛尔和其组合。

在一个实施例中，本发明的结晶形式与钙通道阻断剂组合投与。代表性钙通道阻断剂包括(但不限于)氨氯地平(amlodipine)、阿尼帕米(anipamil)、阿雷地平(aranipine)、巴尼地平(barnidipine)、苄环烷(bencyclane)、贝尼地平(benidipine)、苄普地尔(bepridil)、克仑硫卓(clentiazem)、西尼地平(cilnidipine)、桂利嗪(cinnarizine)、地尔硫卓(diltiazem)、依福地平(efonidipine)、依高地平(elgodipine)、依他苯酮(etafenone)、非洛地平(felodipine)、芬地林(fendiline)、氟桂利嗪(flunarizine)、戈洛帕米(gallopamil)、伊拉地平(isradipine)、拉西地平(lacidipine)、乐卡地平(lercanidipine)、利多氟嗪(lidoffazine)、洛美利嗪(lomerizine)、马尼地平(manidipine)、米贝拉地尔(mibefradil)、尼卡地平(nicardipine)、硝苯地平(nifedipine)、尼古地平(niguldipine)、尼鲁地平(niludipine)、尼伐地平(nilvadipine)、尼莫地平(nimodipine)、拉西地平(lacidipine)、乐卡地平(lercanidipine)、利多氟嗪(lidoffazine)、洛美利嗪(lomerizine)、马尼地平(manidipine)、米贝拉地尔(mibefradil)、尼卡地平(nicardipine)、硝苯地平(nifedipine)、尼古地平(niguldipine)、尼鲁地平(niludipine)、尼伐地平(nilvadipine)、尼莫地平(nimodipine)、尼索地平(nisoldipine)、尼群地平(nitrendipine)、尼伐地平(nivaldipine)、哌克昔林(perhexiline)、普尼拉明(prenylamine)、里奥斯汀(ryosidine)、司莫地尔(semotiadil)、特罗地林(terodiline)、噻帕米(tiapamil)、维拉帕米(verapamil)和其组合。在一个特定实施例中，钙通道阻断剂选自氨氯地平、苄普地尔、地尔硫卓、非洛地平、伊拉地平、拉西地平、尼卡地平、硝苯地平、尼古地平、尼鲁地平、尼莫地平、尼索地平、里奥斯汀、维拉帕米和其组合。

本发明的结晶形式也可以与血管收缩素转化酶(ACE)抑制剂组合投与。代表性ACE抑制剂包括(但不限于)阿喹普利(accupril)、阿拉普利(alacepril)、贝那普利(benazepril)、贝那普利拉(benazeprilat)、卡托普利(captopril)、西那普利(ceranapril)、西拉普利(cilazapril)、地拉普利(delapril)、依拉普利(enalapril)、依那普利拉(enalaprilat)、福辛普利(fosinopril)、福辛普利拉(fosinoprilat)、咪达普利(imidapril)、赖诺普利(lisinopril)、莫西普利(moexipril)、蒙诺普利(monopril)、莫福普利(moveltopril)、喷托普利(pentopril)、培哚普利(perindopril)、喹那普利(quinapril)、喹普利拉(quinaprilat)、雷米普利(ramipril)、雷米普利拉(ramiprilat)、乙酸沙拉新(saralasin acetate)、螺普利(spirapril)、替莫普利(temocapril)、群多普利(trandolapril)、佐芬普利(zofenopril)和其组合。在一个特定实施例中，ACE抑制剂选自：贝那普利、依拉普利、赖诺普利、雷米普利和其组合。

在一个实施例中，本发明的结晶形式与AT₁受体拮抗剂(亦称为血管紧张素II1型受体阻断剂(ARB))组合投与。代表性ARB包括(但不限于)阿比沙坦(abitesartan)、苯甲基洛沙坦(benzyllosartan)、坎地沙坦(candesartan)、坎地沙坦西来替昔(candesartan cilexetil)、依利沙坦(elisartan)、恩布沙坦(embusartan)、伊诺他索沙坦(enoltasosartan)、依普罗沙坦(eprosartan)、福沙坦(fonsartan)、福拉沙坦(forasartan)、甘胺酰基洛沙坦(glycyllosartan)、厄贝沙坦(irbesartan)、伊索替林(isoteoline)、洛沙坦(losartan)、美多西米(medoximil)、米法沙坦(milfasartan)、奥美沙坦(olmesartan)、奥美沙坦(opomisartan)、普拉沙坦(pratosartan)、利匹沙坦(ripisartan)、沙普立沙坦(saprisartan)、沙拉新、沙美新(sarmesin)、他索沙坦(tasosartan)、替米沙坦(telmisartan)、缬沙坦(valsartan)、佐拉沙坦(zolasartan)和其组合。在一个特定实施例中，ARB选自坎地沙坦、依普罗沙坦、厄贝沙坦、洛沙坦、奥美沙坦、厄贝沙坦、沙普立沙坦、他索沙坦、替米沙坦和其组合。示范性盐包括甲磺酸依普罗沙坦、洛沙坦钾盐和奥美沙坦酯(olmesartan medoxomil)。通常，ARB将以足以每剂量提供约4到600mg的量投与，其中示范性日剂量在每天20到320mg范围内。

在另一个实施例中，本发明的结晶形式与肾胰岛素残基溶酶(NEP)抑制剂组合投与。代表性NEP抑制剂包括(但不限于)：坎沙曲(candoxatril)；坎沙曲拉(candoxatrilat)；右卡多曲(dexecadotril)((+)-N-[2(R)-(乙酰基硫甲基)-3-苯基丙酰基]甘胺酸苯甲酯)；CGS-24128(3-[3-(联苯-4-基)-2-(膦酰基甲氨基)丙酰胺基]丙酸)；CGS-24592((S)-3-[3-(联苯-4-基)-2-(膦酰基甲氨基)丙酰胺基]丙酸)；CGS-25155(N-[9(R)-(乙酰基硫甲基)-10-氧代-l-氮杂环癸烷-2(S)-基羰基]-4(R)-羟基-L-脯氨酸苯甲酯)；颁予海浦沃斯(Hepworth)等人(辉瑞公司(Pfizer Inc.))的WO2006/027680中所描述的3-(1-氨基甲酰环己基)丙酸衍生物；JMV-390-1(2(R)-苯甲基-3-(N-羟基氨基甲酰)丙酰基-L-异亮氨酸基-L-亮氨酸)；依卡曲尔(ecadotril)；磷阿米酮(phosphoramidon)；右旋塞奥芬(retrothiorphan)；RU-42827(2-(巯基甲基)-N-(4-吡啶基)苯丙酰胺)；RU-44004(N-(4-吗啉基)-3-苯基-2-(硫烷基甲基)丙酰胺)；SCH-32615((S)-N-[N-(1-羧基-2-苯基乙基)-L-苯基丙氨酰基]-β-丙氨酸)和其前药SCH-34826((S)-N-[N-[1-[[(2，2-二甲基-1，3-二氧杂环戊烷-4-基)甲氧基]羰基]-2-苯基乙基]-L-苯基丙氨酰基]-β-丙氨酸)；思洛芬(sialorphin)；SCH-42495(N-[2(S)-(乙酰基硫烷基甲基)-3-(2-甲基苯基)丙酰基]-L-甲硫氨酸乙酯)；思比诺芬(spinorphin)；SQ-28132(N-[2-(巯基甲基)-1-氧代-3-苯基丙基]亮氨酸)；SQ-28603(N-[2-(巯基甲基)-1-氧代-3-苯基丙基]-β-丙氨酸)；SQ-29072(7-[[2-(巯基甲基)-1-氧代-3-苯基丙基]氨基]庚酸)；塞奥芬(thiorphan)和它的前药消旋卡多曲(racecadotril)；UK-69578(顺式-4-[[[1-[2-羧基-3-(2-甲氧基乙氧基)丙基]环戊基]-羰基]氨基]环己烷甲酸)；UK-447，841(2-{1-[3-(4-氯苯基)丙基氨基甲酰]-环戊基甲基}-4-甲氧基丁酸)；UK-505，749((R)-2-甲基-3-{1-[3-(2-甲基苯并噻唑-6-基)丙基氨基甲酰]-环戊基}丙酸)；5-联苯-4-基-4-(3-羧基丙酰基氨基)-2-甲基戊酸和5-联苯-4-基-4-(3-羧基丙酰基氨基)-2-甲基戊酸乙酯(WO2007/056546)；颁予柯赫德(Khder)等人(诺华公司(Novartis AG))的WO2007/106708中所描述的达格鲁曲(daglutril)[(3S，2′R)-3-{1-[2′-(乙氧基羰基)-4′-苯基丁基]-环戊烷-l-羰基氨基}-2，3，4，5-四氢-2-氧代-1H-1-苯并吖庚因-1-乙酸]；和其组合。在一个特定实施例中，NEP抑制剂选自坎沙曲、坎沙曲拉、CGS-24128、磷阿米酮、SCH-32615、SCH-34826、SQ-28603、塞奥芬和其组合。NEP抑制剂将以足以每天提供约20到800mg的量投与，其中典型日剂量在每天50到700mg范围内，更常用每天100到600或100到300mg。

在又一个实施例中，本发明的结晶形式与非类固醇消炎剂(NSAID)组合投与。代表性NSAID包括(但不限于)阿西美辛(acemetacin)、乙酰水杨酸、阿氯芬酸(alclofenac)、阿明洛芬(alminoprofen)、氨芬酸(amfenac)、氨普立糖(amiprilose)、阿莫西普林(amoxiprin)、阿尼罗酸(anirolac)、炎爽痛(apazone)、阿扎丙宗(azapropazone)、贝诺酯(benorilate)、苯噁洛芬(benoxaprofen)、贝皮利隆(bezpiperylon)、溴哌莫(broperamole)、布氯酸(bucloxicacid)、卡洛芬(carprofen)、环氯茚酸(clidanac)、双氯芬酸(diclofenac)、二氟尼柳(diflunisal)、地弗他酮(diftalone)、依诺利康(enolicam)、依托度酸(etodolac)、依托昔布(etoricoxib)、芬布芬(fenbufen)、芬氯酸(fenclofenac)、芬克洛酸(fenclozic acid)、非诺洛芬(fenoprofen)、芬替酸(fentiazac)、非普拉宗(feprazone)、氟芬那酸(flufenamic acid)、氟苯柳(flufenisal)、氟洛芬(fluprofen)、氟比洛芬(flurbiprofen)、呋罗芬酸(furofenac)、异丁芬酸(ibufenac)、布洛芬(ibuprofen)、吲哚美辛(indomethacin)、吲哚洛芬(indoprofen)、伊索克酸(isoxepac)、伊索昔康(isoxicam)、酮洛芬(ketoprofen)、酮洛酸(ketorolac)、洛非咪唑(lofemizole)、氯诺昔康(lornoxicam)、甲氯芬那酸(meclofenamate)、甲氯芬那酸(meclofenamic acid)、甲芬那酸(mefenamic acid)、美洛昔康(meloxicam)、美沙拉嗪(mesalamine)、咪洛芬(miroprofen)、莫非布宗(mofebutazone)、萘丁美酮(nabumetone)、萘普生(naproxen)、尼氟酸(niflumicacid)、奥沙普秦(oxaprozin)、奥昔平酸(oxpinac)、羟基保泰松(oxyphenbutazone)、苯基丁氮酮(phenylbutazone)、吡罗昔康(piroxicam)、吡洛芬(pirprofen)、普拉洛芬(pranoprofen)、双水杨盐、舒多昔康(sudoxicam)、柳氮磺吡啶(sulfasalazine)、舒林酸(sulindac)、舒洛芬(suprofen)、替诺昔康(tenoxicam)、硫平酸(tiopinac)、噻洛芬酸(tiaprofenic acid)、硫噁洛芬(tioxaprofen)、托芬那酸(tolfenamic acid)、托美丁(tolmetin)、三氟米酯(triflumidate)、齐多美辛(zidometacin)、佐美酸(zomepirac)和其组合。在一个特定实施例中，NSAID选自依托度酸、氟比洛芬、布洛芬、吲哚美辛、酮洛芬、酮洛酸、美洛昔康、萘普生、奥沙普秦、吡罗昔康和其组合。

在又一个实施例中，本发明的结晶形式与抗脂质剂组合投与。代表性抗脂质剂包括(但不限于)斯他汀(statin)，如阿托伐他汀(atorvastatin)、氟伐他汀(fluvastatin)、洛伐他汀(lovastatin)、普伐他汀(pravastatin)、罗苏伐他汀(rosuvastatin)和辛伐他汀(simvastatin)；胆甾醇酯转移蛋白(CETP)；和其组合。

在又一个实施例中，本发明的结晶形式与抗糖尿病剂组合投与。代表性抗糖尿病剂包括(但不限于)：可注射药物，如胰岛素和胰岛素衍生物；口服有效药物，包括双胍(如二甲双胍)、升糖素拮抗剂、α-葡糖苷酶抑制剂(如阿卡波糖(acarbose)和米格列醇(miglitol))、美格列奈(meglitinide)(如瑞格列奈(repaglinide))、噁二唑烷二酮、碘酰脲类(如氯磺丙脲(chlorpropamide)、格列美脲(glimepiride)、格列吡嗪(glipizide)、格列本脲(glyburide)和妥拉磺脲(tolazamide))、噻唑烷二酮(如吡格列酮(pioglitazone)和罗格列酮(rosiglitazone))；和其组合。

在一个实施例中，本发明的结晶形式与抗血栓形成剂组合投与。代表性抗血栓形成剂包括(但不限于)阿司匹林(aspirin)、抗血小板剂、肝素和其组合。本发明化合物还可以与肾素抑制剂组合投与，其实例包括(但不限于)阿利吉仑(aliskiren)、依那吉仑(enalkiren)、瑞米吉仑(remikiren)和其组合。在另一个实施例中，本发明化合物与内皮素受体拮抗剂组合投与，其代表性实例包括(但不限于)波生坦(bosentan)、达洛生坦(darusentan)、替唑生坦(tezosentan)和其组合。本发明化合物还可以与内皮素转化酶抑制剂组合投与，其实例包括(但不限于)磷阿米酮、CGS26303和其组合。在又一个实施例中，本发明的结晶形式与醛固酮拮抗剂组合投与，其代表性实例包括(但不限于)依普利酮(eplerenone)、螺内酯和其组合。

组合治疗剂也可能有助于利用本发明化合物的其它组合疗法。举例来说，ACE抑制剂依拉普利(呈顺丁烯二酸盐形式)与利尿剂氢氯噻嗪的组合(以商标

销售)或钙通道阻断剂氨氯地平(呈苯磺酸盐形式)与ARB奥美沙坦(呈酯衍生物前药形式)的组合或钙通道阻断剂与斯他汀的组合也都可以与本发明的结晶形式一起使用。双重作用剂也可能有助于利用本发明的结晶形式的组合疗法。举例来说，还可以包括血管收缩素转化酶/肾胰岛素残基溶酶(ACE/NEP)抑制剂，如：AVE-0848((4S，7S，12bR)-7-[3-甲基-2(S)-硫烷基丁酰胺基]-6-氧代-1，2，3，4，6，7，8，12b-八氢吡啶并[2，1-a][2]苯并吖庚因-4-甲酸)；AVE-7688(艾尔帕曲(ilepatril))和它的母体化合物；BMS-182657(2-[2-氧代-3(S)-[3-苯基-2(S)-硫烷基丙酰胺基]-2，3，4，5-四氢-1H-1-苯并吖庚因-1-基]乙酸)；CGS-26303([N-[2-(联苯-4-基)-1(S)-(1H-四唑-5-基)乙基]氨基]甲基膦酸)；CGS-35601(N-[1-[4-甲基-2(S)-硫烷基戊酰胺基]环戊基羰基]-L-色氨酸)；法西多曲(fasidotril)；法西多曲拉(fasidotrilate)；依那普利拉；ER-32935((3R，6S，9aR)-6-[3(S)-甲基-2(S)-硫烷基戊酰胺基]-5-氧全氢噻唑[3，2-a]吖庚因-3-甲酸)；根码替亚拉(gempatrilat)；MDL-101264((4S，7S，12bR)-7-[2(S)-(2-吗啉乙酰基硫)-3-苯基丙酰胺基]-6-氧代-1，2，3，4，6，7，8，12b-八氢吡啶并[2，1-a][2]苯并吖庚因-4-甲酸)；MDL-101287([4S-[4α，7α(R*)，12bβ]]-7-[2-(羧甲基)-3-苯基丙酰胺基]-6-氧代-1，2，3，4，6，7，8，12b-八氢吡啶并[2，1-a][2]苯并吖庚因-4-甲酸)；奥马曲拉(omapatrilat)；RB-105(N-[2(S)-(巯基甲基)-3(R)-苯基丁基]-L-丙氨酸)；山帕曲拉(sampatrilat)；SA-898((2R，4R)-N-[2-(2-羟基苯基)-3-(3-巯基丙酰基)噻唑烷-4-基羰基]-L-苯基丙氨酸)；Sch-50690(N-[1(S)-羧基-2-[N2-(甲磺酰基)-L-赖氨酰基氨基]乙基]-L-缬氨酰基-L-酪氨酸)；和其组合。在一个特定实施例中，ACE/NEP抑制剂选自：AVE-7688、依那普利拉、法西多曲、法西多曲拉、奥马曲拉、山帕曲拉和其组合。

其它治疗剂，如α₂-肾上腺素受体促效剂和加压素受体拮抗剂，也可能有助于组合疗法。示范性α₂-肾上腺素受体促效剂包括可乐定(clonidine)、右美托咪定(dexmedetomidine)和胍法辛(guanfacine)。示范性加压素受体拮抗剂包括托伐普坦(tolvaptan)。

以下调配物说明本发明的代表性医药组合物。

供口服投药的示范性硬明胶胶囊

将本发明的结晶形式(50g)、喷雾干燥的乳糖(440g)和硬脂酸镁(10g)充分掺合。然后将所得组合物装入硬明胶胶囊中(每个胶囊500mg组合物)。或者，将所述结晶形式(20mg)与淀粉(89mg)、微晶纤维素(89mg)和硬脂酸镁(2mg)充分掺合。然后使混合物通过45号筛目的美国筛，并且装入硬明胶胶囊中(每个胶囊200mg组合物)。

供口服投药的示范性明胶胶囊调配物

将本发明的结晶形式(100mg)与聚氧乙烯脱水山梨糖醇单油酸酯(50mg)和淀粉(250mg)充分掺合。然后将混合物装入明胶胶囊中(每个胶囊400mg组合物)。

或者，将所述结晶形式(40mg)与微晶纤维素(Avicel PH103；259.2mg)和硬脂酸镁(0.8mg)充分掺合。然后将混合物装入明胶胶囊(尺寸号1，白色，不透明)中(每个胶囊300mg组合物)。

供口服投药的示范性片剂调配物

使本发明的结晶形式(10mg)、淀粉(45mg)和微晶纤维素(35mg)通过20号筛目的美国筛，并且充分混合。在50℃到60℃下干燥如此制造的颗粒，并且使其通过16号筛目的美国筛。将聚乙烯吡咯烷酮溶液(4mg，呈于无菌水中的10％溶液形式)与羧甲基淀粉钠(4.5mg)、硬脂酸镁(0.5mg)和滑石(1mg)混合，然后使这种混合物通过16号筛目的美国筛。然后向颗粒中加入羧甲基淀粉钠、硬脂酸镁和滑石。混合后，用压片机压制混合物，得到重100mg的片剂。

或者，将所述结晶形式(250mg)与微晶纤维素(400mg)、热解二氧化硅(10mg)和硬脂酸(5mg)充分掺合。然后压制所述混合物，形成片剂(每个锭剂665mg组合物)。

或者，将所述结晶形式(400mg)与玉米淀粉(50mg)、交联羧甲基纤维素钠(25mg)、乳糖(120mg)和硬脂酸镁(5mg)充分掺合。然后压制所述混合物，形成单面刻痕片剂(每个片剂600mg组合物)。

或者，将所述结晶形式(100mg)与玉米淀粉(100mg)与明胶(20mg)的水溶液充分掺合。干燥所述混合物并且研磨成精细粉末。将微晶纤维素(50mg)和硬脂酸镁(5mg)与所述明胶调配物混合，造粒并且压制所得混合物，形成片剂(每个片剂100mg活性剂)。

供口服投药的示范性悬浮液调配物

将以下成分混合以形成每10mL悬浮液含有100mg活性剂的悬浮液：

供口服投药的示范性液体调配物

合适的液体调配物为含有例如柠檬酸盐、乳酸盐和顺丁烯二酸盐缓冲溶液等基于羧酸的缓冲液的液体调配物。举例来说，将本发明的结晶形式(其可以与DMSO预先混合)与100mM柠檬酸铵缓冲液掺合并且将pH值调节到pH5，或与100mM柠檬酸溶液掺合并且将pH值调节到pH2。所述溶液还可以包括溶解赋形剂，如环糊精，例如，所述溶液可包括10重量％羟丙基-β-环糊精。

其它合适的调配物包括含或不含环糊精的5％NaHCO₃溶液。

供注射投药的示范性可注射调配物

将本发明的结晶形式(0.2g)与0.4M乙酸钠缓冲溶液(2.0mL)掺合。必要时，使用0.5N盐酸水溶液或0.5N氢氧化钠水溶液将所得溶液的pH值调整到pH4，然后加入足够的注射用水以提供20mL的总体积。然后，通过无菌过滤器(0.22微米)过滤混合物以提供适合注射投药的无菌溶液。

供吸入投药的示范性组合物

将本发明的结晶形式(0.2mg)微粉化，然后与乳糖(25mg)掺合。然后，将这一掺合过的混合物装入明胶吸入筒中。使用例如干粉吸入器投与所述筒的内含物。

或者，使微粉化的结晶形式(10g)分散在通过将卵磷脂(0.2g)溶解于去矿物质水(200mL)中而制备的溶液中。将所得悬浮液喷雾干燥，然后微粉化以形成包含平均直径小于约1.5μm的粒子的微粉化组合物。然后以当通过吸入器投药时每个剂量足以提供约10μg到约500μg本发明化合物的量将微粉化组合物装入含有加压1，1，1，2-四氟乙烷的定剂量吸入器筒中。

或者，将所述结晶形式(25mg)溶解于经过柠檬酸盐缓冲的(pH5)等张盐水(125mL)中。搅拌混合物且进行超声波处理直到化合物溶解为止。检查溶液的pH值且必要时，通过缓慢加入1N氢氧化钠水溶液将其调整到pH5。使用喷洒器装置投与所述溶液，使得每剂量提供约10μg到约500μg活性剂。

实例

提供以下制备和实例来说明本发明的具体实施例。然而，除非有具体指示，否则这些具体实施例不打算以任何方式限制本发明的范围。

除非另有指示，否则以下缩写具有以下含义，且本文中使用且未加以定义的任何其它缩写具有其标准公认含义：

EtOAc 乙酸乙酯

EtOH 乙醇

MeCN 乙腈

MeOH 甲醇

MTBE 甲基叔丁基醚

THF 四氢呋喃

TFA 三氟乙酸

除非另外指示，否则所有物质(如试剂、起始物质和溶剂)都是购自市面供应商(如西格玛-奥德里奇(Sigma-Aldrich)、弗卢卡里德尔德汗(Fluka Riedel-de Haёn)、斯特雷姆化学品公司(Strem Chemicals Inc.)等)并且不经进一步纯化即使用。

实例1

4′-{2-乙氧基-4-乙基-5-[((S)-2-巯基-4-甲基戊酰基氨基)甲基]咪唑-1-基甲基}-3′-氟联苯-2- 甲酸的结晶半乙二磺酸盐形式I的制备

不进行种晶的气相扩散制备

将4′-{2-乙氧基-4-乙基-5-[((S)-2-巯基-4-甲基戊酰基氨基)甲基]-咪唑-1-基甲基}-3′-氟联苯-2-甲酸(840mg)溶解于EtOH(33.6mL)中，并且将等分试样(0.6mL，1.0当量)放在4mL小瓶中。向其中加入1，2-乙二磺酸(63μL，1，2-乙二磺酸于MeOH中的0.5M溶液；1.1.当量)。将这个4mL小瓶放在含有MTBE的20mL小瓶中。将所述20mL小瓶加盖并且贮存在室温下。出现固体，对其进行过滤，用二氧杂环己烷洗涤且干燥，产生固体物质，其不经进一步表征即用于下一步骤。

将4′-{2-乙氧基-4-乙基-5-[((S)-2-巯基-4-甲基戊酰基氨基)甲基]-咪唑-1-基甲基}-3′-氟联苯-2-甲酸(50mg，95μmol，1.0当量)溶解于20mL小瓶中的温热EtOH(2mL)中。加入1，2-乙二磺酸于MeOH(210μL，1.1当量)中的0.5M溶液，且简单地使混合物升温。将这一20mL小瓶放在含有MTBE(10mL)的较大小瓶中。然后用所述固体物质对所述20mL小瓶进行种晶，然后将所述较大小瓶加盖且贮存在室温下直到观察到固体。移除液体且用二氧杂环己烷(1mL)洗涤所述固体，然后在真空下干燥，产生固体半乙二磺酸盐物质(约25mg)。

半乙二磺酸盐晶种制备

在加热下，将4′-{2-乙氧基-4-乙基-5-[((S)-2-巯基-4-甲基戊酰基氨基)甲基]-咪唑-1-基甲基}-3′-氟联苯-2-甲酸(0.2g，0.4mmol，1.0当量)溶解于EtOH(6.0mL)中。在60℃下，在真空下将1，2-乙二磺酸水合物干燥30分钟，产生固体乙二磺酸。加入固体乙二磺酸(79mg，420μmol，1.1当量)并且简单地加热所述混合物来辅助溶解。加入MTBE(45mL)直到接近饱和。用所述固体半乙二磺酸盐物质对所得混合物进行种晶，并且缓慢搅拌过夜。在小瓶底上出现精细沉淀物，对其进行过滤，用二氧杂环己烷洗涤并且干燥，产生固体白色半乙二磺酸盐物质(70mg)。

利用种晶的制备

在加热下将4′-{2-乙氧基-4-乙基-5-[((S)-2-巯基-4-甲基戊酰基氨基)甲基]-咪唑-1-基甲基}-3′-氟联苯-2-甲酸(193mg，366μmol，1.0当量)溶解于EtOH(2mL)中。加入1，2-乙二磺酸水合物(83.8mg，402μmol，1.1当量)并且简单地加热所述混合物来辅助溶解。加入MTBE(10mL)直到接近饱和。过滤所得混合物并且用所述固体白色半乙二磺酸盐物质对滤液进行种晶。小瓶底上出现固体，对其进行过滤，用二氧杂环己烷洗涤且在真空下干燥，产生固体产物(60mg)。如以下实例中所描述，通过粉末X射线衍射、差示扫描量热法和热解重量分析来分析这一产物，并且指定为结晶半乙二磺酸盐形式I。这个数据呈现在图1到图3中。

实例2

4′-{2-乙氧基-4-乙基-5-[((S)-2-巯基-4-甲基戊酰基氨基)甲基]咪唑-1-基甲基}-3′-氟联苯-2- 甲酸的结晶半乙二磺酸盐形式II的制备

利用种晶的第一制备

在轻微加热下将4′-{2-乙氧基-4-乙基-5-[((S)-2-巯基-4-甲基戊酰基氨基)甲基]-咪唑-1-基甲基}-3′-氟联苯-2-甲酸(666mg，1.3mmol，1.0当量)溶解于EtOH(6.6mL)中。在60℃下，在真空下将1，2-乙二磺酸水合物干燥30分钟，产生固体乙二磺酸。将固体乙二磺酸(260mg，1.4mmol，1.1当量)加入到所述混合物中，将其简单地加热来辅助溶解。加入MTBE(25mL)直到接近饱和。过滤所得混合物并且用半乙二磺酸盐形式I对滤液进行种晶。烧瓶底上出现固体，对其进行过滤，用二氧杂环己烷洗涤且在真空下干燥，产生白色固体(530mg)。

将一部分这种白色固体(430mg)溶解于温热EtOH(1.7mL)中。逐滴加入MTBE(6mL)直到接近饱和点。过滤所得混合物，然后用所述白色固体种晶且在室温下冷却。然后过滤所述混合物且用二氧杂环己烷洗涤固体。然后在真空下将所述固体干燥过夜，产生白色固体产物(0.4g)。所述白色固体产物晶体与所述半乙二磺酸盐形式I起始物质的晶体相比似乎更大且成形更良好。

利用种晶的随后制备

将4′-{2-乙氧基-4-乙基-5-[((S)-2-巯基-4-甲基戊酰基氨基)甲基]-咪唑-1-基甲基}-3′-氟联苯-2-甲酸(13.5g，25.6mmol，1.0当量)与1，2-乙二磺酸(5.4g，28mmol，1.1当量)混合。加入10％EtOH水溶液(0.9∶0.1EtOH∶H₂O，130g，2500mmol)且搅拌所得混合物来辅助溶解(约5分钟)。过滤所述混合物，将EtOAc(1750mL)以250mL逐份加入到滤液中直到接近饱和。用半乙二磺酸盐形式I(10mg)对所得混合物进行种晶，且允许在室温下静置(加盖)。出现固体，对其进行过滤，用EtOH洗涤且在真空下干燥，产生白色固体半乙二磺酸盐产物(13.9g；纯度95％)。如以下实例中所描述，通过粉末X射线衍射、差示扫描量热法和热解重量分析来分析这一半乙二磺酸盐产物。据测定，这一半乙二磺酸盐产物为与所述结晶半乙二磺酸盐形式I种晶物质不同的半乙二磺酸盐结晶形式，并且指定为结晶半乙二磺酸盐形式II。这一数据呈现于图6到图8中。

实例3

4′-{2-乙氧基-4-乙基-5-[((S)-2-巯基-4-甲基戊酰基氨基)甲基]咪唑-1-基甲基}-3′-氟联苯-2- 甲酸的结晶半乙二磺酸盐形式II的制备(不进行种晶)

在65℃下在真空下将1，2-乙二磺酸水合物干燥7天，产生固体乙二磺酸。将所述固体乙二磺酸(0.4g，2.1mmol，1.1当量)与4′-{2-乙氧基-4-乙基-5-[((S)-2-巯基-4-甲基戊酰基氨基)-甲基]咪唑-1-基甲基}-3′-氟联苯-2-甲酸(1.0g，1.9mmol，1.0当量)组合并且溶解于10％EtOH水溶液(0.9∶0.1EtOH∶H₂O，10g，200mmol)中。加入EtOAc(150mL)直到接近饱和。过滤所得混合物且允许固体在室温下静置约3天，此后观察到致密的晶体生长。过滤固体，用EtOH洗涤且在真空下干燥，产生1.0g固体。然后通过粉末X射线衍射、差示扫描量热法和热解重量分析来分析产物。据测定，这一产物为结晶半乙二磺酸盐形式II。

实例5

半乙二磺酸盐形式I和半乙二磺酸盐形式II的再浆化

将半乙二磺酸盐形式II(50mg，80μmol)和半乙二磺酸盐形式I(50mg，80μmol)与EtOH(420μL)和MTBE(1.6mL，13mmol)的预混溶液组合。将所述混合物加盖且在室温下搅拌。过滤所得固体且用二氧杂环己烷洗涤，产生固体(86mg)，其据测定为半乙二磺酸盐形式II。

将半乙二磺酸盐形式II(50mg，80μmol)和半乙二磺酸盐形式I(50mg，80μmol)与EtOH(420μL)和MTBE(1.6mL，13mmol)的预混溶液组合。加入水(20μL)且将所述混合物加盖并且在室温下搅拌。过滤所得固体且用二氧杂环己烷洗涤，产生固体(67mg)，其据测定为半乙二磺酸盐形式II。

因此，结晶半乙二磺酸盐形式II与结晶半乙二磺酸盐形式I相比似乎更稳定。另外，随后努力重复实例1中所描述的条件，产生结晶半乙二磺酸盐形式II而不是所述结晶半乙二磺酸盐形式I。

实例6

4′-{2-乙氧基-4-乙基-5-[((S)-2-巯基-4-甲基戊酰基氨基)甲基]咪唑-1-基甲基}-3′-氟联苯-2- 甲酸的结晶半萘二磺酸盐的制备

不进行种晶的制备

将4′-{2-乙氧基-4-乙基-5-[((S)-2-巯基-4-甲基戊酰基氨基)甲基]-咪唑-1-基甲基}-3′-氟联苯-2-甲酸(1.0g，1.9mmol，1.0当量)与萘二磺酸盐(0.6g，2.1mmol，1.1当量)混合。加入EtOH(10mL)，随后进行超声处理以促进溶解，产生部分混浊的溶液。加入水(20μL)，随后减缓加入EtOAc(50mL)直到接近饱和。在真空下过滤所述混合物，且允许固体在室温下静置约3天。过滤所述混合物，用EtOH洗涤且在真空下干燥，产生标题结晶半萘二磺酸盐(1.2g)。

半萘二磺酸盐晶种制备

将萘二磺酸盐(0.17g，0.58mmol，1.1当量)溶解于EtOH(3mL)中。加入4′-{2-乙氧基-4-乙基-5-[((S)-2-巯基-4-甲基戊酰基氨基)甲基]-咪唑-1-基甲基}-3′-氟联苯-2-甲酸(280mg，530μmol，1.0当量)且简单地加热所述混合物来辅助溶解。加入EtOAc(19mL)直到接近饱和。过滤所述混合物且允许在室温下静置，直到观察到少量沉淀物。过滤所述溶液，用半乙二磺酸盐形式II种晶，且允许在室温下静置。过滤所得晶体，用二氧杂环己烷洗涤且在真空下干燥过夜，产生半萘二磺酸盐固体(250mg)。

将萘二磺酸盐(960mg，3.3mmol，1.1当量)溶解于EtOH(20mL)中。在搅拌下加入4′-{2-乙氧基-4-乙基-5-[((S)-2-巯基-4-甲基戊酰基氨基)甲基]-咪唑-1-基甲基}-3′-氟联苯-2-甲酸(1.6g，3.0mmol，1.0当量)。在搅拌下缓慢加入EtOAc(180mL)直到接近饱和。过滤所述混合物，用所述半萘二磺酸盐固体种晶，且允许在室温下静置过夜。过滤所述混合物，且用二氧杂环己烷洗涤所述固体，然后在真空下干燥约2天，产生标题结晶半萘二磺酸盐(1.4g)。

利用种晶的随后制备

将4′-{2-乙氧基-4-乙基-5-[((S)-2-巯基-4-甲基戊酰基氨基)甲基]-咪唑-1-基甲基}-3′-氟联苯-2-甲酸(13.5g，25.6mmol，1.0当量)与萘二磺酸盐(8.1g，28mmol，1.1当量；预先在研钵中经过研磨)混合。在搅拌下经20分钟加入EtOH(130mL)，产生稍微混浊的溶液。过滤所述溶液且加入EtOAc(640mL)直到接近饱和，产生稍微混浊的溶液。将所述溶液过滤两次，产生澄清溶液。然后用半萘二磺酸盐(约10mg)对所述溶液进行种晶，且允许在室温下静置(加盖)。过滤所得固体，用EtOH洗涤且在真空下干燥，产生白色固体(16.9g)。将一部分这一固体(510mg)与EtOH(0.5mL)混合。加入若干份等分试样的水(750μL)来辅助溶解。加入EtOAc(15mL)且允许所述混合物在室温下静置直到固体开始形成。再加入EtOAc(15mL)，允许在室温下静置。过滤所得固体，且用EtOH洗涤，产生标题结晶半萘二磺酸盐(0.1g)。

然后如以下实例中所描述，通过粉末X射线衍射、差示扫描量热法和热解重量分析来分析这一产物，并且指定为结晶半萘二磺酸盐。这一数据呈现于图11到图13中。

实例7

将萘二磺酸盐(3.7g，12.9mmol，0.55当量)与EtOH(100mL)混合且进行超声处理来辅助溶解。过滤所得溶液且用EtOH(20mL)冲洗。加入4′-{2-乙氧基-4-乙基-5-[((S)-2-巯基-4-甲基戊酰基氨基)甲基]-咪唑-1-基甲基}-3′-氟联苯-2-甲酸(12.4g，23.5mmol，1.00当量)且搅拌所得混合物。加入EtOAc(1450mL)直到接近饱和。过滤所得混合物，然后用半萘二磺酸盐种晶且允许在室温下静置。过滤所得固体，用EtOH洗涤且在真空下干燥过夜，产生呈白色结晶固体状的标题化合物(11.8g)。

实例8

4′-{2-乙氧基-4-乙基-5-[((S)-2-巯基-4-甲基戊酰基氨基)甲基]咪唑-1-基甲基}-3′-氟联苯-2- 甲酸的结晶单乙二酸盐的制备

将等摩尔量的4′-{2-乙氧基-4-乙基-5-[((S)-2-巯基-4-甲基戊酰基氨基)甲基]-咪唑-1-基甲基}-3′-氟联苯-2-甲酸(2g)与乙二酸二水合物(478mg)混合且通过搅拌溶解于MeCN(2mL)和THF(2.5mL)的溶液中，并且进行超声处理，产生澄清溶液。加入EtOAc(40mL)，且充分混合所得溶液并允许在平缓的氮气流下蒸发。在溶剂蒸发若干小时后形成白色固体，将其收集，过滤，且用过量EtOAc洗涤。

然后如以下实例中所描述，通过粉末X射线衍射、差示扫描量热法和热解重量分析来分析这一产物，并且指定为结晶单乙二酸盐(纯度＞98％)。这一数据呈现于图17到图19中。

实例9

粉末X射线衍射

使用理学(Rigaku)的迷你弗莱克丝(MiniFlex)X射线衍射仪或赛默(Thermo ARL)的X′Tra X射线衍射仪对固体进行粉末X射线衍射分析。X射线源为Cu-Kα辐射

其中输出电压为30kV且电流为15mA(理学)或输出电压为45kV且电流为40mA(赛默ARL)。所述仪器用布拉格-布伦塔诺(Bragg-Brentano)几何方式操作，其中入射、偏离和散射狭缝经过设定以使样本处的强度最大。测量时，将少量粉末(5到25mg)轻轻压到样本夹上以形成平滑表面，且进行X射线曝露。用2θ-2θ模式，2θ从2°到40°以0.03°的步长和2.0°/分钟的扫描速度来扫描样本。通过理学标准测量软件(Rigaku Standardmeasurement software)(1.2.0.0版)或赛默ARL测量软件(Thermo ARL measurementsoftware)(1.2.0.0版)来控制数据获取，且通过杰得软件(Jade software)(7.5.1版)加以分析。用硅金属标准物(理学)或石英标准物(赛默)在±0.02°2θ角内校准仪器。

应记住，用于数据收集的布拉格-布伦塔诺几何倾向于优选取向。在这些条件下，衍射峰的相对强度可能不能代表将从球状颗粒的理想化分布或从根据单晶数据模拟的衍射图获得的真实相对强度。还有可能在一些衍射图中由于广泛的优选取向而看不到一些峰。

热分析

差示扫描量热法(DSC)实验是使用具有热分析控制器的TA仪器型号Q-100模组来进行。收集数据且使用TA仪器通用分析软件(TA Instruments Universal Analysis software)加以分析。准确称取每一种结晶形式的样本到带盖铝盘中。在5℃下的5分钟等温平衡时间后，使用10℃/分钟的线性加热速率将样本从0℃加热到200℃。

使用装备有高分辨能力的TA仪器型号Q-50模组来进行热解重量分析(TGA)。使用TA仪器热分析控制器收集数据且使用TA仪器通用分析软件加以分析。将经过称重的样本放在铂盘上，且用10℃的加热速率从环境温度到200℃进行扫描。在使用期间用氮气流吹扫天平和炉腔。

动态水分吸附评估

使用VTI大气微量天平SGA-100系统(VTI公司，海尔勒阿(Hialeah)，FL33016)对每一种结晶形式进行动态水分吸附(DMS)测量。使用经过称重的样本，且在分析开始时将湿度设定为环境值。DMS分析由5％RH/步的扫描速率在5％RH到90％RH的整个适度范围组成。在25℃以等温方式进行DMS操作。

热稳定性

将经过称重的结晶物质样本贮存在40℃(开放容器)和75％相对湿度下一个月。然后通过以下HPLC方法分析样本：

管柱：安捷伦(Agilent)左波克斯(Zorbox)SB-C18，4.6×250mm，5μm(零件号880975-902)。移动相A：80％H₂O，20％MeCN，0.01％TFA。移动相B：80％MeCN，20％H₂O，0.01％TFA。流速：1mL/min。注入体积：20μL。检测器：250nm。

取决于溶解度，制备呈于100％MeCN中的0.2到0.5mg/mL储备溶液形式的样本以供注射到HPLC上。

通过HPLC面积百分比(％AUC)确定样本的纯度。如下表中所示，所有样本都显示极小纯度损失，因此显示所有形式都具有优良热稳定性。然而，发现半乙二磺酸盐形式II和半萘二磺酸盐形式与先前已知的游离碱形式相比更稳定。

样本	纯度变化
		游离碱形式*	-2.9％
半乙二磺酸盐形式II	-0.3％
		半萘二磺酸盐形式	-0.1％

*如颁予赵等人的美国专利公开案第2010/0081697号中所描述来制备

溶解度

经24小时周期，在若干个pH值范围下评估结晶物质的样本。使用以下缓冲液系统：

HCl缓冲液pH1.15

HCl缓冲液pH1.94

邻苯二甲酸氢钾缓冲液pH2.97

乙酸盐缓冲液pH4.17

乙酸盐缓冲液pH5.16

磷酸盐缓冲液pH6.04

磷酸盐缓冲液pH7.0。

将结晶物质的样本(7到8mg)与2mL每一种缓冲液组合在5mL玻璃小瓶中。然后将小瓶安装到自动旋转器上且在室温下旋转24小时。使用0.45μm过滤器(PVDF膜)将所得悬浮液过滤到洁净小瓶中供HPLC分析。

发现半乙二磺酸盐形式II和半萘二磺酸盐形式与游离碱相比在pH＞3时都更可溶，如图16中详细描述。

X射线结构分析

将尺寸为0.45×0.40×0.15mm的结晶半萘二磺酸盐的大块晶体安装在玻璃纤维上。使用利用Mo Kα辐射之游标κ-CCD衍射仪获得X射线结构数据。在120±2°K的温度下收集数据且使用SHELXS-97和SHELXL-97软件加以分析。推导出以下晶格参数：单位晶胞为三斜晶系，其中尺寸

α＝80.754(8)°，β＝79.286(7)°，γ＝66.111(6)°，空间群为P1bar；计算密度为1.337g/cm³。根据所推导的原子位置计算的粉末x射线衍射峰与使用散装粉末状样本获得的观察结果具有优良一致性。

所得分子结构证实化学组成为式I化合物且不对称单元含有两个对称的独立的{2-乙氧基-4-乙基-5-[((S)-2-巯基-4-甲基戊酰基氨基)甲基]咪唑-1-基甲基}-3′-氟联苯-2-甲酸分子、一个萘二硫酸根阴离子和水，从而确定这种晶体为水合物。在这一特定实验中，观察到约半个水分子。

尽管本发明已参考本发明的特定方面或实施例描述，但所属领域的一般技术人员应了解，在不偏离本发明的真实精神和范围的情况下可做出各种改变或可替换等价物。另外，在可应用的专利形态和法规所允许的程度上，本文中所引用的所有公开案、专利和专利申请案都是以全文引用的方式并入本文中，其引用的程度就如同各文件已个别地以引用的方式并入本文中一般。

Claims

1.一种4′-{2-乙氧基-4-乙基-5-[((S)-2-巯基-4-甲基戊酰基氨基)甲基]咪唑-1-基甲基}-3′-氟联苯-2-甲酸的结晶半乙二磺酸盐，其中所述结晶半乙二磺酸盐是选自：(a)形式II，其特征在于粉末x射线衍射图包含2θ值在9.74±0.20、11.00±0.20、12.89±0.20、14.27±0.20、15.54±0.20、18.62±0.20和23.78±0.20处的衍射峰；和形式I，其特征在于粉末x射线衍射图包含2θ值在9.89±0.20、11.66±0.20、13.55±0.20、18.41±0.20、20.42±0.20和22.46±0.20处的衍射峰。

2.根据权利要求1所述的结晶半乙二磺酸盐，其中形式II的特征进一步在于在选自17.81±0.20、18.14±0.20、21.44±0.20、22.25±0.20、23.15±0.20、24.80±0.20、25.28±0.20、26.03±0.20、26.58±0.20和28.01±0.20的2θ值处具有一个或一个以上额外的衍射峰。

3.根据权利要求1所述的结晶半乙二磺酸盐，其中形式II的特征在于粉末x射线衍射图中的峰位置与图6中所示的图案的峰位置实质上一致。

4.根据权利要求1所述的结晶半乙二磺酸盐，其中形式II的特征在于熔点为约182℃的差示扫描量热法热分析图。

5.根据权利要求1所述的结晶半乙二磺酸盐，其中形式II的特征在于差示扫描量热法热分析图与图7中所示的差示扫描量热法热分析图实质上一致。

6.一种用于制备根据权利要求1所述的结晶半乙二磺酸盐形式II的工艺，其包含：

a)用1，2-乙二磺酸处理4′-{2-乙氧基4-乙基-5-[((S)-2-巯基-4-甲基戊酰基氨基)甲基]咪唑-1-基甲基}-3′-氟联苯-2-甲酸；

b)任选地进行加热、搅拌或超声处理以完成溶解；和

c)允许固体形成且分离所述固体，产生所述结晶半乙二磺酸盐形式II。

7.根据权利要求1所述的结晶半乙二磺酸盐，其中形式I的特征进一步在于在选自18.89±0.20、19.91±0.20、20.90±0.20、21.33±0.20、24.35±0.20、25.85±0.20、28.73±0.20和30.92±0.20的2θ值处具有一个或一个以上额外的衍射峰。

8.根据权利要求1所述的结晶半乙二磺酸盐，其中形式I的特征在于粉末x射线衍射图中的峰位置与图1中所示的图案的峰位置实质上一致。

9.根据权利要求1所述的结晶半乙二磺酸盐，其中形式I的特征在于熔点为约158℃的差示扫描量热法热分析图。

10.根据权利要求1所述的结晶半乙二磺酸盐，其中形式I的特征在于差示扫描量热法热分析图与图2中所示的差示扫描量热法热分析图实质上一致。

11.一种4′-{2-乙氧基-4-乙基-5-[(（S)-2-巯基-4-甲基戊酰基氨基)甲基]咪唑-1-基甲基}-3′-氟联苯-2-甲酸的结晶半萘二磺酸盐，其特征在于粉末x射线衍射图包含2θ值在4.84±0.20、9.41±0.20、10.82±0.20、17.39±0.20、24.17±0.20和24.65±0.20处的衍射峰。

12.根据权利要求11所述的结晶半萘二磺酸盐，其特征在于在选自14.05±0.20、18.65±0.20、19.55±0.20、20.21±0.20、21.44±0.20、23.48±0.20、25.69±0.20、26.65±0.20、28.79±0.20、29.63±0.20和30.52±0.20的2θ值处具有一个或一个以上额外的衍射峰。

13.根据权利要求11所述的结晶半萘二磺酸盐，其特征在于粉末x射线衍射图中的峰位置与图11中所示的图案的峰位置实质上一致。

14.根据权利要求11所述的结晶半萘二磺酸盐，其特征在于熔点为约181℃的差示扫描量热法热分析图。

15.根据权利要求11所述的结晶半萘二磺酸盐，其特征在于差示扫描量热法热分析图与图12中所示的差示扫描量热法热分析图实质上一致。

16.一种用于制备根据权利要求11所述的结晶半萘二磺酸盐的工艺，其包含：

a)用萘-1，5-二磺酸处理4′-{2-乙氧基-4-乙基-5-[(（S)-2-巯基-4-甲基戊酰基氨基)甲基]咪唑-1-基甲基}-3′-氟联苯-2-甲酸；

b)任选地进行加热、搅拌或超声处理以完成溶解；和

c)允许固体形成且分离所述固体，产生所述半萘二磺酸盐。

17.一种4′-{2-乙氧基-4-乙基-5-[(（S)-2-巯基-4-甲基戊酰基氨基)甲基]咪唑-1-基甲基}-3′-氟联苯-2-甲酸的结晶单乙二酸盐，其特征在于粉末x射线衍射图包含2θ值在6.1±0.20、11.0±0.20、13.0±0.20、14.4±0.20、15.2±0.20、16.5±0.20、17.3±0.20、18.4±0.20、21.9±0.20、23.9±0.20、24.3±0.20、24.5±0.20和26.1±0.20处的衍射峰。

18.根据权利要求17所述的结晶单乙二酸盐，其特征在于在选自15.8±0.20、18.1±0.20、19.1±0.20、20.3±0.20、20.5±0.20、22.3±0.20、22.8±0.20、24.9±0.20、27.4±0.20、27.8±0.20、30.6±0.20、31.4±0.20和36.9±0.20的2θ值处具有一个或一个以上额外的衍射峰。

19.根据权利要求17所述的结晶单乙二酸盐，其特征在于粉末x射线衍射图中的峰位置与图17中所示的图案的峰位置实质上一致。

20.根据权利要求17所述的结晶单乙二酸盐，其特征在于熔点为约115℃的差示扫描量热法热分析图。

21.根据权利要求17所述的结晶单乙二酸盐，其特征在于差示扫描量热法热分析图与图18中所示的差示扫描量热法热分析图实质上一致。

22.一种用于制备根据权利要求17所述的结晶单乙二酸盐的工艺，其包含：

a)用乙二酸处理4′-{2-乙氧基-4-乙基-5-[((S）-2-巯基-4-甲基戊酰基氨基)甲基]咪唑-1-基甲基}-3′-氟联苯-2-甲酸；

b)任选地进行加热、搅拌或超声处理以完成溶解；和

c)允许固体形成且分离所述固体，产生所述结晶单乙二酸盐。

23.一种医药组合物，其包含医药学上可接受的载剂和根据权利要求1、11或17所述的结晶化合物。

24.根据权利要求23所述的医药组合物，其进一步包含选自以下的第二治疗剂：利尿剂、β₁肾上腺素受体阻断剂、钙通道阻断剂、血管收缩素转化酶抑制剂、AT₁受体拮抗剂、肾胰岛素残基溶酶抑制剂、非类固醇消炎剂、前列腺素、抗脂质剂、抗糖尿病剂、抗血栓形成剂、肾素抑制剂、内皮素受体拮抗剂、内皮素转化酶抑制剂、醛固酮拮抗剂、血管收缩素转化酶/肾胰岛素残基溶酶抑制剂和其组合。

25.一种用于纯化4′-{2-乙氧基-4-乙基-5-[((S)-2-巯基-4-甲基戊酰基氨基)甲基]咪唑-1-基甲基}-3′-氟联苯-2-甲酸的工艺，其包含形成根据权利要求1、11或17所述的结晶化合物。

26.根据权利要求1、11或17所述的化合物，其是用于治疗。

27.根据权利要求26所述的化合物，其是用于治疗高血压或心力衰竭。

28.一种根据权利要求1、11或17所述的化合物的用途，其是用于制造药物。

29.根据权利要求28所述的用途，其中所述药物是用于治疗高血压或心力衰竭。