CN103169944A - 辅助调节血脂复合地龙蛋白制剂 - Google Patents

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Abstract

本发明公开了辅助调节血脂复合地龙蛋白制剂。复合地龙蛋白制剂由地龙蛋白、壳聚糖以及可选的辅料组成。本发明制剂组方合理、功效显著。南京公卫预防医学研究所根据卫生部发布的《保健食品检验与评价技术规范》(2003年版)中的《保健食品功能学评价程序和检验方法规范》对本发明制剂进行了辅助降血脂功能检验,包括脂代谢紊乱大鼠的动物试验和人体试食试验,结果证明本发明制剂具有辅助降血脂作用。本发明制剂为我国传统中药地龙在保健食品领域的应用作了有益的尝试和贡献。

Description

辅助调节血脂复合地龙蛋白制剂
技术领域
本发明涉及一种保健品,特别涉及一种辅助调节血脂复合地龙蛋白制剂。
背景技术
高脂血症是一种常见的心血管疾病,主要是由于血脂代谢紊乱引起的,在临床上分为原发性高脂血症和继发性高脂血症,常表现为高胆固醇血症(TC升高),高甘油三脂血症(TG升高)或二者兼有。其与动脉硬化及心血管疾病的发生发展有着紧密的联系,成为严重威胁人类健康的危险因素。因此,寻找疗效显著、安全可靠的降血脂药一直是医药工作者长期研究的重点课题。
高脂血症主要是指血清总胆固醇(TC≥5.2mmo1/L)或甘油三酯(TG≥1.65mmol/L)水平过高或(和)血清高密度脂蛋白—胆固醇(HDL-C)水平过低。高脂血症表现为脂蛋白、载脂蛋白等代谢异常。胆固醇(TC)与动粥性疾病的关系已颇肯定,有关甘油三酯(TG)与冠心病的关系,研究结果不尽一致,但越来越多的研究认为甘油三酯升高为冠心病发病的独立危险因素。总胆固醇、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)、甘油三酯及载脂蛋白B100(ApoB100)升高,高密度脂蛋白胆固醇、载脂蛋白A1(ApoA1)降低为冠心病的独立危险因素,且与冠状动脉病变程度呈正相关。
WHO2002年的世界卫生保健报告中,高脂血症为第二位心血管危险因素。心血管疾病所致死亡中,440万人死亡(7.9%)归因于胆固醇水平不理想(>3.8mmol/L);31%的30岁以上患者的心血管疾病归因于高胆固醇。据统计,美国成人中25%有高脂血症,30%达临界值,换言之,美国成人半数以上血脂超过正常。以往我国人群中有致动脉粥样硬化(As)作用的TG和胆固醇水平较西方人低,而有抗As作用的HDL—C水平较高,被认为是患As和冠心病(Coronary Heart Disease,CHD)较少的主要原因之一。但近年对我国健康人群血脂水平的调查发现TG和CHO水平均在上升。不久前,来自急性冠状动脉综合征临床研究和介人治疗国际研讨会上的信息表明,目前我国As的发病年轻化的倾向十分明显,有的地区发现最小的CHD发病年龄仅为16岁,并且高分布人群集中在20岁到30岁之间,已经打破了CHD只发生在老年人群的陈旧观念。导致上述“危机”的一个重要原因是高血脂。高脂血症不仅与冠心病密切相关,也成为高血压病、脑血管病症、糖尿病等疾病的一个重要危险因素。
中医学认为,血脂为膏脂之属,其代谢有赖于脏腑的气化作用,与脾之运化、肝之疏泄、肾之气化关系密切。若膏脂输化失常,清从浊化,则浊脂为患,其病因可能有多种,但年高而脏腑衰弱,气阴两虚为其主要病机之一。脏腑虚弱又以脾肝肾不足为重,脾之水谷精微运化功能失职,肝之疏泄失调,肾之温煦、滋养功能失常,使水谷精微清者化为浊,浊可酿痰致瘀,痰瘀阻滞,又防碍脾肝肾之气机,更使经脉滞涩不畅,致气血津液之气化、输布、转动及利用失常,从而膏脂积而不化,生痰致瘀为病。治疗当以调补脾肝肾、益气养阴、活血祛瘀化浊为法。
高脂血症日益威胁着人类健康,研究调整血脂的药物已成为全球关注的课题。降脂药能有效的减缓As的发生和发展,降低心血管疾病发病率。已有多项临床试验表明,即使未有明确冠心病(CHD)指征的病人,降低血脂水平亦有助于减少心脑血管疾病的发生。美国心肺血研究院进行7年的冠心病防止研究证实,降血脂药的应用可减少心脏病死亡率24%,减少非致死性心脏病发作率19%。
在发达国家,人群血脂水平增加和体重超重已成为日益突出的问题,而且这一问题的普遍性和严重性正在迅速增长。高血脂和肥胖还增加了发生II型糖尿病、心脑血管病的危险,并提高了死亡率。这一健康问题的严重性迫切需要人们开发新的不同降血脂和减肥的药物及功能食品。
调血脂药物的主要作用机制一般可归纳为如下五个途径:阻止胆酸或胆固醇从肠道吸收,促进胆酸或胆固醇随粪便排出:抑制胆固醇的体内合成,或促进胆固醇的转化;促进细胞膜上LDL受体表达,加速脂蛋白分解:激活脂蛋白代谢类,促进甘油三酯的水解;阻止其他脂质的体内合成,或促进其他脂质的代谢。
为满足人们对健康的需要,有必要开发出新型辅助调节血脂保健品。
发明内容
本发明的目的在于提供一种辅助调节血脂复合地龙蛋白制剂。
本发明所采取的技术方案是:
复合地龙蛋白制剂,由地龙蛋白、壳聚糖以及可选的辅料组成。
更进一步的,所述制剂由地龙蛋白、壳聚糖、大豆分离蛋白以及可选的辅料组成。
更进一步的,地龙蛋白、壳聚糖、大豆分离蛋白的质量比为:地龙蛋白:壳聚糖:大豆分离蛋白=(20~60):(15~55):(15~50)。
更进一步的,地龙蛋白、壳聚糖、大豆分离蛋白的质量比为:地龙蛋白:壳聚糖:大豆分离蛋白=(25~55):(20~50):(20~45)。
更进一步的,地龙蛋白、壳聚糖、大豆分离蛋白的质量比为:地龙蛋白:壳聚糖:大豆分离蛋白=(30~50):(25~45):(25~40)。
更进一步的,所述制剂为口服剂。
优选的,所述口服剂为胶囊剂、颗粒剂、片剂。
本发明的有益效果是:
本发明制剂组方合理、功效显著。南京公卫预防医学研究所根据卫生部发布的《保健食品检验与评价技术规范》(2003年版)中的《保健食品功能学评价程序和检验方法规范》对本发明制剂进行了辅助降血脂功能检验,包括脂代谢紊乱大鼠的动物试验和人体试食试验,结果证明本发明制剂具有辅助降血脂作用。本发明制剂为我国传统中药地龙在保健食品领域的应用作了有益的尝试和贡献。
具体实施方式
地龙蛋白是从地龙(蚯蚓)体内提取的多种具有生物活性的蛋白肽类物质,是地龙体内蛋白质、小分子多肽和氨基酸的总称。中华人民共和国卫生部2009年第18号公告批准地龙蛋白为新资源食品。
本产品以地龙蛋白粉和壳聚糖为主要功效成分,优选添加大豆分离蛋白等含有多种多肽和氨基酸及其他常规辅料,得到的产品具有调节血脂的功能,组方合理、功效显著,为我国传统中药地龙在食品领域的应用作了有益的尝试和贡献。
下面结合实施例和实验,进一步说明本发明。
实施例1
制剂的原料组成:
原料名称 用量/质量份
地龙蛋白 40
壳聚糖 30
大豆分离蛋白 26
二氧化硅 2
硬脂酸镁 2
将原料粉碎,混合均匀;
将混合均匀的原料充填至胶囊中,得到硬胶囊。
该硬胶囊的规格为0.375g/粒,人体的推荐日服量为每次4粒,每日3次。
实施例2
制剂的原料组成:
原料名称 用量/质量份
地龙蛋白 50
壳聚糖 25
大豆分离蛋白 21
二氧化硅 2
硬脂酸镁 2
制备工艺:
将原料粉碎,混匀,造粒,得到颗粒剂。
实施例3
制剂的原料组成:
原料名称 用量/质量份
地龙蛋白 45
壳聚糖 28
大豆分离蛋白 23
二氧化硅 2
硬脂酸镁 2
制备工艺:
将原料粉碎,混匀,压片,得到的片剂。
实施例4
制剂的原料组成:
原料名称 用量/质量份
地龙蛋白 20
壳聚糖 40
大豆分离蛋白 36
辅料 4
实施例5
制剂的原料组成:
原料名称 用量/质量份
地龙蛋白 30
壳聚糖 35
大豆分离蛋白 31
辅料 4
实施例6
制剂的原料组成:
原料名称 用量/质量份
地龙蛋白 60
壳聚糖 15
大豆分离蛋白 16
辅料 9
实施例7
制剂的原料组成:
原料名称 用量/质量份
地龙蛋白 25
壳聚糖 55
大豆分离蛋白 15
辅料 5
实施例8
制剂的原料组成:
原料名称 用量/质量份
地龙蛋白 26
壳聚糖 20
大豆分离蛋白 50
辅料 4
实施例9
制剂的原料组成:
原料名称 用量/质量份
地龙蛋白 50
壳聚糖 45
辅料 5
功能验证实验
以下实验中所使用的硬胶囊为按实施例1所述方法制备得到的硬胶囊。
实验方法及检验依据均为卫生部《保健食品检验与评价技术规范》(2003年版)。
一、辅助降血脂功能检验脂代谢紊乱模型大鼠试验
受试样品:复合地龙蛋白硬胶囊内容物。
试验动物:雄性清洁级SD大鼠40只,体重150~200g,由中国科学院上海实验动物中心提供,动物生产许可证号:SCXK(沪)2003-0003;动物使用许可证号:SYXK(苏)2002-0130。
高脂饲料:按卫生部《保健食品检验与评价技术规范》(2003年版)中的《保健食品功能学评价程序和检验方法规范》中的方法配制,其中基础饲料占78.8%、胆固醇占1%、猪油占10%、蛋黄粉占10%、胆盐占0.2%。
动物实验室:SPF级。
样品剂量配制:实验时称量受试样品复合地龙蛋白硬胶囊内容物3.75、7.50、22.50g,用纯净水配制成100ml的样液,分别供低、中、高三个剂量组动物灌胃使用。
试验方法:根据卫生部《保健食品检验与评价技术规范》(2003年版)记载的内容,采用脂代谢紊乱模型法——预防性给受试样品,对本发明产品进行脂代谢紊乱模型大鼠辅助降血脂功能检验。在实验环境下大鼠喂饲基础饲料观察5天,然后取尾血,测定血清总胆固醇(TC)、血清甘油三酯(TG)和血清高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)。根据血清总胆固醇(TC)水平,随机分为高脂对照组及低、中、高三个剂量组,分别给予纯净水及复合地龙蛋白硬胶囊内容物0.375g/kg BW、0.750g/kg BW和2.250g/kg BW(三个剂量组分别相当于人体推荐摄入量的5倍、10倍和30倍)。灌胃容量为10ml/kg BW。动物单笼饲养,自由摄取高脂饲料。定期称量体重,于实验结束时禁食16小时,测血清TC、TG、HDL-C水平。血清TC、HDL-C采用胆固醇CHOD-PAP法和PTA-Mg2+法测定,血清TG采用GPO-PAP法测定。
数据处理:采用SAS8.1统计软件对各试验组数据进行方差分析,用Dunnett’s t检验进行各剂量组与高脂对照组的比较。
试验结果:
本发明硬胶囊内容物对脂代谢紊乱大鼠体重的影响:试验期间各动物体重的变化见表1。方差分析结果表明,各组动物体重之间差异无统计学意义(P>0.05)。
表1本发明硬胶囊内容物对脂代谢紊乱大鼠体重(g)的影响
Figure BDA00002894168700061
Figure BDA00002894168700062
本发明硬胶囊内容物对各组动物血清TC含量的影响:见表2。如表2所示,经方差分析结果显示,试验前各组动物血清TC的检测值差异无统计学意义(F=1.04,P>0.05);高脂对照组试验前后TC水平差异有统计学意义(P<0.0001),说明高脂模型成立;试验后各组动物血清TC水平差异有统计学意义(F=7.72,P<0.001),经Dunnett’s t检验,本发明硬胶囊内容物中、高剂量组动物血清TC水平与高脂对照组比较差异有统计学意义(P<0.05)。表明本发明硬胶囊内容物在0.750g/kg BW/d和2.250g/kg BW/d剂量时,具有降低脂代谢紊乱大鼠血清TC的作用。
表2本发明硬胶囊内容物对脂代谢紊乱大鼠血清TC(mmol/L)的影响
Figure BDA00002894168700071
Figure BDA00002894168700072
*高脂对照组TC水平试验前后比较有统计学差异(P<0.0001);
**与高脂对照组比较有统计学差异(P<0.05)。
本发明硬胶囊内容物对各组动物血清中TG含量的影响:见表3。表3结果显示,经方差分析试验前各组动物血清TG的检测值差异无统计学意义(F=0.04,P>0.05);高脂对照组试验前后TG水平有统计学差异(P<0.0001),说明高脂模型成立;试验后各组动物血清TG水平差异有统计学意义(F=11.58,P<0.001),经Dunnett’s t检验,本发明硬胶囊内容物低、中、高剂量组动物血清TG水平与高脂对照组比较差异有统计学意义(P<0.05)。结果表明本发明硬胶囊内容物在0.375/kg BW/d、0.750g/kg BW/d和2.250g/kg BW/d剂量时,具有降低脂代谢紊乱大鼠血清TC的作用,并且具有较好的剂量效应。
表3本发明硬胶囊内容物对脂代谢紊乱大鼠血清TG(mmol/L)的影响
Figure BDA00002894168700073
*高脂对照组TG水平试验前后比较有统计学差异(P<0.0001);
**与高脂对照组比较有统计学差异(P<0.05)。
本发明硬胶囊内容物对各组动物血清中HDL-C含量的影响:见表4。表4结果显示,经方差分析试验前各组动物血清HDL-C水平差异无统计学意义(F=1.66,P>0.05);试验后各组动物血清HDL-C水平差异无统计学意义(F=2.75,P>0.05)。结果表明本发明硬胶囊内容物在0.375/kg BW/d、0.750g/kg BW/d和2.250g/kg BW/d剂量时,对脂代谢紊乱大鼠血清高密度脂蛋白胆固醇水平无升高或降低作用。
表4本发明硬胶囊内容物对脂代谢紊乱大鼠血清HDL-C(mmol/L)的影响
Figure BDA00002894168700075
Figure BDA00002894168700076
Figure BDA00002894168700081
结论:
灌胃给予受试大鼠0.375/kg BW/d、0.750g/kg BW/d、2.250g/kg BW/d本发明硬胶囊内容物(相当于人体推荐摄入量的5倍、10倍、30倍)时,与高脂对照组相比,对受试大鼠的体重未见显著差异。
灌胃给予受试大鼠0.750g/kg BW/d、2.250g/kg BW/d本发明硬胶囊内容物(相当于人体推荐摄入量的10倍、30倍)时,具有降低脂代谢紊乱大鼠血清总胆固醇的作用。
灌胃给予受试大鼠0.375/kg BW/d、0.750g/kg BW/d、2.250g/kg BW/d本发明硬胶囊内容物(相当于人体推荐摄入量的5倍、10倍、30倍)时,具有降低脂代谢紊乱大鼠血清甘油三酯的作用。
灌胃给予受试大鼠0.375/kg BW/d、0.750g/kg BW/d、2.250g/kg BW/d本发明硬胶囊内容物(相当于人体推荐摄入量的5倍、10倍、30倍)时,对脂代谢紊乱大鼠血清高密度脂蛋白胆固醇水平无升高或降低作用。
根据《保健食品功能学评价程序和检验方法规范》中“辅助降血脂功能检验方法”动物实验的判定标准,可初步判定本发明硬胶囊对脂代谢紊乱大鼠具有辅助降血脂功能的作用。
二、辅助降血脂功能检验人体试食试验
受试样品:复合地龙蛋白硬胶囊。
试验对象:选择在浙江省立同德医院门诊就诊的高血脂症患者。受试者纳入标准为:单纯高血脂异常的人群,保持平常饮食,半年内采血两次,两次血清总胆固醇(TC)均为≥5.2mmol/L或甘油三酯(TG)≥1.65mmol/L,受试对象排除以下人员:年龄在18岁以下或65岁以上、妊娠或哺乳妇女、对受试样品过敏者;合并有心、肝、肾和造血系统等严重全身性疾病患者或精神病患者;短期内服用与受试功能有关的物品,影响对结果的判断者;不符合纳入标准,未按规定服用复合地龙蛋白硬胶囊,无法判断功效或因资料不全等影响功效判断者。最后有效病例105例,试食组55例,对照组50例。所有患者均为非住院的高血脂症患者,受试期间保持平常饮食。
试验设计:由南京公卫预防医学研究所保健食品功能检验人员与浙江省立同德医院临床专家,根据《保健食品检验与评价技术规范》(2003年版)有关规定,共同设计试验方案。
试验分组:采用自身和组间两种对照设计,将受试对象按血脂水平随机盲法分为试食组和对照组,两组在性别、年龄、血脂水平上要求具有可比性。两组的性别、年龄构成和血脂水平见表5。
表5两组高血脂症患者的性别、年龄和血脂水平构成
试验方法:
受试物食用方法受试者在实施期间保持平常饮食,试食组患者服用复合地龙蛋白硬胶囊,使用方法为每日2次,每次6粒,每粒内容物0.375g,试食周期为45天。对照组为空白对照,不给受试物。
观察指标除血脂(血清TC、TG、HDL-C)功效性指标外,还包括精神、饮食、睡眠、大小便;血压、血常规、尿常规、粪常规;胸透、心电图、腹部B超;肾功能检查(血清尿素氮、肌酐水平);肝功能检查(血清总蛋白、白蛋白、谷丙转氨酶、谷草转氨酶)等试验指标。各项指标于试验开始及结束时各测一次,其中胸透、心电图、腹部B超仅在试验开始测量一次。疗效观察指标包括试验前后血脂(血清TC、TG、HDL-C)的测量及饮食情况的观察。
判定标准分有效和无效:
有效:TC降低>10%;TG降低>15%;HDL-C上升>0.104mmol/L。
无效:未达到有效标准者。
统计方法采用Excel数据库和SPSS10.0版统计软件进行处理,计数资料采用卡方检验;计量资料采用t检验。
试验结果:
一般情况观察试食组和对照组受试者的胸透、心电图、腹部B超在试食前均未见异常,实施前后精神、饮食、睡眠、大小便情况未见异常状况。两组患者血压变化情况见表6。从表6可见,两组患者试食前后血压无明显变化,试食期间未见任何不良反应。
表6两组患者试验前后血压(mmHg)比较
Figure BDA00002894168700092
Figure BDA00002894168700093
Figure BDA00002894168700101
实验室检查指标的变化两组患者试验后尿常规、粪常规等检查与试验前比较也均未见异常。两组患者主要实验室检查指标试验前后的变化分别见表7,从表7可见,两组患者试验前后各项指标均在正常范围内。
表7试验后两组患者主要实验室指标的变化
Figure BDA00002894168700102
Figure BDA00002894168700103
试验前后胆固醇变化情况:见表8。由表8可见,服用复合地龙蛋白硬胶囊的试食组病人试食后TC与试食前比较差异有显著意义(P<0.01)。与对照组比较差异也有显著意义(P<0.01),其平均下降百分率为11.00±5.90%,与对照组比较差异也有显著性(P<0.01)。
表8两组患者试食前后胆固醇(mmol/L)比较
Figure BDA00002894168700104
Figure BDA00002894168700105
*与试验前比较:t=7.02,P=0.000,P<0.0001;
#与对照组比较:t=5.32,P=0.000,P<0.0001;
###与对照组比较:t=8.14,P=0.000,P<0.0001。
试验前后甘油三酯变化情况:见表9。由表9可见,服用复合地龙蛋白硬胶囊的试食组病人试食后TG与试食前比较差异有显著意义(P<0.01)。与对照组比较差异也有显著意义(P<0.01),其平均下降百分率为21.39±12.98%,与对照组比较差异也有显著性(P<0.05)。
表9两组患者试食前后甘油三酯(mmol/L)比较
Figure BDA00002894168700111
*与试验前比较:t=4.22,P=0.000,P<0.0001;
#与对照组比较:t=3.81,P=0.000,P<0.0001;
###与对照组比较:t=4.00,P=0.000,P<0.0001。
试验前后高密度脂蛋白胆固醇变化情况:见表10。由表10可见,两组受试者试验前后HDL-C,无论自身比较,还是组间比较,差异均无显著性(P>0.05)。
表10两组患者试食前后高密度脂蛋白胆固醇(mmol/L)
两组患者试食有效率的比较根据判断标准,试验后两组TC、TG和总的有效率比较分别见表11、表12、表13。服用复合地龙蛋白硬胶囊45天后,高血脂症患者的TC下降有效率为60.00%,与对照组(2.00%)比较,差异有显著性(P<0.01);高血脂症患者的TG下降有效率为69.09%,与对照组(34.00%)比较,差异有显著性(P<0.01);高血脂症患者的降脂总有效率为80.00%,与对照组(40.00%)比较,差异有显著性(P<0.01)。
表11两组高血脂症患者试食对TC有效率的比较
Figure BDA00002894168700115
2=40.238P<0.01
表12两组高血脂症患者试食对TG有效率的比较
Figure BDA00002894168700116
Figure BDA00002894168700121
2=12.929P<0.01
表13两组高血脂症患者试食总有效率的比较
Figure BDA00002894168700122
2=17.607P<0.01。
结论:
试食复合地龙蛋白硬胶囊前后高血脂症患者的精神、睡眠、饮食、大小便、血压未见异常,与对照组比较未见显著性差异。试食前后两组血、尿、粪常规,肝功能和肾功能均未见显著性差异。试食期间病人未见不良反应,
试食复合地龙蛋白硬胶囊的55名高血脂症患者,其TC、TG水平均比服用前明显下降(P<0.01),与对照组比较也有显著性差异(P<0.01,P<0.01),而HDL-C的变化则未见显著性差异。
所试复合地龙蛋白硬胶囊对试食组的TC下降有效率为60.00%,明显高于对照组的有效率2.00%(P<0.01);对试食组的TG下降有效率为69.09%,明显高于对照组的34.00%(P<0.01);对试食高血脂症患者的降脂总有效率为80.00%,明显高于对照组患者的有效率40.00%(P<0.01)。
根据辅助降血脂功能人体试食试验结果判定原则,所试复合地龙蛋白硬胶囊具有辅助降血脂功能的作用。

Claims (7)

1.复合地龙蛋白制剂,由地龙蛋白、壳聚糖以及可选的辅料组成。
2.根据权利要求1所述的复合地龙蛋白制剂,其特征在于:所述制剂由地龙蛋白、壳聚糖、大豆分离蛋白以及可选的辅料组成。
3.根据权利要求2所述的复合地龙蛋白制剂,其特征在于:地龙蛋白、壳聚糖、大豆分离蛋白的质量比为:地龙蛋白:壳聚糖:大豆分离蛋白=(20~60):(15~55):(15~50)。
4.根据权利要求3所述的复合地龙蛋白制剂,其特征在于:地龙蛋白、壳聚糖、大豆分离蛋白的质量比为:地龙蛋白:壳聚糖:大豆分离蛋白=(25~55):(20~50):(20~45)。
5.根据权利要求4所述的复合地龙蛋白制剂,其特征在于:地龙蛋白、壳聚糖、大豆分离蛋白的质量比为:地龙蛋白:壳聚糖:大豆分离蛋白=(30~50):(25~45):(25~40)。
6.根据权利要求1~5任意一项所述的复合地龙蛋白制剂,其特征在于:所述制剂为口服剂。
7.根据权利要求6所述的复合地龙蛋白制剂,其特征在于:所述口服剂为胶囊剂、颗粒剂、片剂。
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