CN103169707B - 月桂酸单甘油酯的医药新用途 - Google Patents

Abstract

本发明请求保护月桂酸单甘油酯用于制备治疗或预防糖尿病药物的用途以及用于糖尿病治疗或预防的包含月桂酸单甘油酯的药物组合物，属于医药领域。月桂酸单甘油酯用于糖尿病治疗时，其降糖效果优于现有降糖药物吡咯列酮。其可以与现有降糖药物联用，与吡咯列酮联用在降低血糖水平、尿糖水平以及糖化血红蛋白水平方面均可以取得协同作用，在与吡咯列酮联用的基础上加用瑞舒伐他汀更能进一步降低糖尿病病人的血脂水平和血糖水平。月桂酸单甘油酯以及包含其的药物组合物用于糖尿病治疗时疗效确切、副作用低、心血管风险低，因此具备很好的医学应用前景。

Description

月桂酸单甘油酯的医药新用途

技术领域

本发明属于医药领域，具体涉及一种月桂酸单甘油酯的新的医药用途以及包含月桂酸单甘油酯的药物组合物，特别涉及月桂酸单甘油酯及相关药物组合物在治疗糖尿病和糖尿病合并高血脂症的用途。 

背景技术

糖尿病(diabetes mellitus,DM)是一组由环境和遗传因素共同作用引起的综合征，其基本病理特点为胰岛素分泌绝对或相对不足，或外周组织对胰岛素不敏感，引起以糖代谢紊乱为主，包括脂肪、蛋白质代谢紊乱的一种全身性疾病。许多研究证实，肥胖病人早在糖代谢出现异常之前，就存在脂代谢紊乱，多伴有不同程度的高血脂。主要的脂代谢异常表现为血甘油三脂（TG）升高、高密度脂蛋白-胆固醇（HDL-C）水平降低和低密度脂蛋白-胆固醇（LDL-C）的增多。糖尿病合并高脂血症具有以下危害：（1）高血糖合并高血脂可明显加速大、中动脉血管粥样硬化的进展。（2）在糖尿病微细血管病变的基础上再合并大、中动脉粥样硬化，更加重了相关器官的缺血，从而加速了器官功能减退和衰竭。因此，单纯控制血糖不能完全消除糖尿病患者冠心病等大血管并发症，控制血糖的同时，必须进行调脂治疗。 

糖尿病肾病（diabetic nephropathy,DN）已经成为糖尿病最常见的并发症之一，也是导致糖尿病患者致死率及致残率升高的主要原因之一。糖尿病肾病临床发病率高，对患者健康危害严重，并且很快将进入依赖肾脏透析维持生存的痛苦状态，给患者家庭和社会造成极为巨大的经济负担。 

月桂酸单甘油酯又名十二酸单甘油酯（glycerolMonolaurate，简称GML）　月桂酸单甘油酯由月桂酸和甘油直接酯化合成，外观一般为鳞片状或油状、白色或浅黄色的细粒状结晶。月桂酸单甘油酯（GML）具有抵抗病源微生物感染的能力，广泛应用于婴幼儿奶粉、米粉等产品以及焙烤食品中，不仅可以起到改善米面制品品质的作用，而且能够抑制HIV病毒、细胞巨化病毒、疱疹病毒、感冒病毒以及大量的细菌及原生物。其抗菌效果不受PH影响，而且抗菌效果安全高效，优于山梨酸、苯甲酸、对羟基苯甲酸酯等添加剂。 

近年来，月桂酸单甘油酯的医药用途也逐渐被科学家发现。美国明尼苏达大学研究小组以雌猴为对象进行的实验中发现，月桂酸单甘油酯（简称GML）可以有效帮助雌猴避免感染猴免疫缺陷病毒（SIV），研究者发现月桂酸单甘油酯则表现出了明显的抑制艾滋病病毒的效果。这一发现有望为人类预防艾滋病病毒感染提供新方法，而且月桂酸单甘油酯价格低廉，如果能够研发成药物势必降低该疾病的治疗费用。 

吡格列酮是噻唑烷二酮类抗糖尿病药物，属胰岛素增敏剂，其作用机制与磺酰脲类不同，作用机制与胰岛素的存在有关，可减少外周组织和肝脏的胰岛素抵抗，增加依赖胰岛素的葡萄糖的处理，并减少肝糖的输出。其作用机制是高选择性的激动过氧化物酶小体生长因子活化受体-γPPAR-γ 1 ，PPAR-γ的活化可调节许多控制葡萄糖及脂类代谢的胰岛素相关基因的转录。吡格列酮已经成为临床上用于治疗糖尿病的常用药，临床上使用的药物主要为其盐酸盐。 

瑞舒伐他汀是主要用于治疗高胆固醇和高脂血症的药物。美国FDA早在2003年8月根据临床试验结果，批准上市。临床试验结果显示，该药物可以降低总胆固醇、LDL-甘固醇以及甘油三酯水平，并可以升高HDL-甘固醇(有益甘固醇)水平。该药物最常见的副作用包括肌肉疼痛、胃痛、恶心、便秘以及虚弱等。此前有学者认为长期服用瑞舒伐他汀会造成肾脏损伤。但经过长期的临床试验表明，瑞舒伐他汀在造成肾脏损害方面，作用很小。Sorof J等人在《Long-term rosuvastatin treatment improves renal function in National Cholesterol Education Program Adult Treatment Panel III high-risk patients》（参见JACC,2007,No.49,327A:1002-131）一文中公开了在糖尿病或高血压等极易引起肾脏损害的疾病中，长期服用瑞舒伐他汀能够轻微改善患者的肾脏功能。 

公开号为CN101417130A发明专利申请公开了一种治疗糖尿病及其并发症的口服药物组合物，该口服药物组合物包含活性组分月桂酸单甘油酯和胰岛素增敏剂吡格列酮或罗格列酮。公开号为CN101903028A的发明专利申请公开了使用月桂酸、月桂酸钠或甘油三月桂酸酯与吉西他滨联合治疗胰腺癌的药物用途。发明内容 

为了更好地治疗糖尿病及其并发症，包括改善糖尿病肾病的治疗，本发明提供了一种药物组合物，该药物组合物的活性成分为月桂酸单甘油酯，该药物组合物用于糖尿病治疗时疗效确切、价格低廉。月桂酸单甘油酯作为一种添加剂已经广泛应用于食品行业，因此本发明涉及月桂酸单甘油酯的一种新的医药用途，即月桂酸单甘油酯用于制备治疗糖尿病药物中的用途。

本发明中月桂酸单甘油酯用于糖尿病的治疗或预防时，给药对象可以为动物或人，给药途径可以根据患者的病情和耐受程度选用合适的方式，优选采用口服方式给药，月桂酸单甘油酯的给药量会随给药对象或给药途径不同而发生变化。本发明中月桂酸单甘油酯用于自身免疫性肝炎且适用对象为人时，月桂酸单甘油酯的用量为0.01mg/kg·d ~100mg/kg·d，进一步优选月桂酸单甘油酯的用量为0.1mg/kg·d ~10mg/kg·d。其他动物的给药剂量可以根据人与动物的体表面积比进行换算得到，这对于本领域技术人员来说是容易得到的。 

本发明还提供了适用上述医药用途的包含月桂酸单甘油酯的药物制剂。具体地说，所述包含月桂酸单甘油酯的药物制剂可以为口服制剂。口服制剂如片剂、胶囊剂、颗粒剂，缓释片等。上述包含月桂酸单甘油酯的药物制剂均可采用该种剂型的常规制备工艺制备得到。 

由于糖尿病是一类全身性系统疾病，尤其是糖尿病并发症的治疗极其复杂。单一药物很难对于糖尿病及其并发症都具有很好的治疗效果。本发明通过筛选大量的候选药物，在服用月桂酸单甘油酯的同时服用盐酸吡咯列酮可以更好地控制血糖，大量的动物实验实验证明两种药物联合使用在改善糖尿病患者的血糖水平和降低糖尿病患者并发症的发生存在显著的协同作用。基于此，本发明提供一种治疗糖尿病的药物组合物，其药物有效成分由月桂酸单甘油酯和盐酸吡咯列酮组成。根据药物相互作用的强弱和对糖尿病的治疗效果，上述药物组合物中月桂酸单甘油酯和盐酸吡咯列酮的重量比优选为1：0.1-100，进一步优选为1：1-10。上述药物组合物用于糖尿病及其并发症治疗或预防时月桂酸单甘油酯的人用给药量为1-10mg/kg·d，盐酸吡咯列酮的人用给药量为0.1mg-10mg/kg·d。 

上述含有两种药物的药物组合物可以制备成合适的药物制剂用于糖尿病及其并发症的治疗和预防，优选为口服制剂，口服制剂如片剂、胶囊剂、颗粒剂，缓释片等。其中上述药物制剂的每一单位药物制剂中月桂酸单甘油酯的含量为0.1mg-100mg，其它药物的含量可以根据上述药物组合物中活性成分的配比计算得到。 

基于对药物疗效、副作用的统筹考虑，本发明对药物组合物中的活性组分进行了进一步优选。发明人惊奇的发现，当上述药物组合物用于糖尿病治疗时创造性地加入瑞舒伐他汀时可以显著降低药物的毒副作用，更能有效地降低糖尿病病人的心血管风险，增强药物的治疗效果。因此本发明还提供一种含有上述三种药物的药物组合物，即提供一种以月桂酸单甘油酯、盐酸吡咯列酮和瑞舒伐他汀为药物活性成分的药物组合物，优选地，上述的药物组合物中月桂酸单甘油酯、盐酸吡咯列酮和瑞舒伐他汀之间的重量比为10:(0.03～240):(0.01～160)，进一步优选为10:(0.2～100):(0.2～160)。 

上述含有三种药物活性成分的药物组合物可以制备成合适的药物制剂用于糖尿病及其并发症的治疗和预防，优选为口服制剂，口服制剂如片剂、胶囊剂、颗粒剂，缓释片等。其中上述药物制剂的每一单位药物制剂中月桂酸单甘油酯的含量为0.1mg-100mg，其它药物的含量可以根据上述药物组合物中活性成分的配比计算得到。 

发明人通过大量的药理学实验研究了月桂酸单甘油酯以及包含月硅酸单甘油酯的药物组合物对糖尿病的治疗效果。其中通过实施例15的研究发现，月桂酸单甘油酯各给药组的血糖水平、尿糖水平以及糖化血红蛋白水平相对于吡咯列酮给药组均显著降低，这表明月桂酸单甘油酯在治疗糖尿病过程中在降低血糖水平和尿糖水平方面优于现有糖尿病治疗药物吡格列酮。同时，不同重量配比月硅酸单甘油酯和盐酸吡咯列酮的药物组合物在降低糖尿病大鼠的血糖水平、尿糖水平以及糖化血红蛋白水平方面均较两种药物成分单独使用时的治疗效果，两种药物在降低糖尿病大鼠的血糖水平、尿糖水平以及糖化血红蛋白水平方面具有明显的协同作用。通过实施例16发现，在月硅酸单甘油酯和盐酸吡咯列酮药物组合物基础上加用瑞舒伐他汀则明显改善了对糖尿病的治疗效果，其降低糖尿病大鼠的血糖水平、尿糖水平以及糖化血红蛋白水平方面优于三种药物单独使用效果，也优于任意两种药物联合用药效果，这表明三种药物在降低糖尿病大鼠的血糖水平、尿糖水平以及糖化血红蛋白水平方面存在着显著的协同作用。 

更令人惊奇的是，发明人在实施例17中发现，月硅酸单甘油酯、瑞舒伐他汀和盐酸吡咯列酮三种药物联合使用对糖尿病合并高血脂大鼠具有非常好的治疗效果，三种药物联合用药不仅在降低糖尿病合并高血脂大鼠的血糖水平和尿糖水平上优于单药使用或任意两种药物联合给药，其在降低降低总胆固醇、血清甘油三酯、低密度胆固醇脂蛋白方面以及升高高密度胆固醇脂蛋白方面与单药组或两种药物联合给药组更具有显著的差异。这提示三种药物联合用药在降低血脂方面也具有显著的协同作用。临床实践中，糖尿病病人往往会伴随血脂升高，因此本发明药物组合物在降脂方面的效果具有十分重要的意义。 

总之，本发明与现有技术相比具有如下的显著进步： 

（1）月桂酸单甘油酯在降低血糖水平、尿糖水平以及糖化血红蛋白水平方面显著优于现有降糖药物，其作用全面，且其价格与现有降糖药物相比相对低廉，因此更易被糖尿病患者所接受和认同。

（2）月桂酸单甘油酯和现有降糖药物盐酸吡咯列酮之间存在显著协同作用，两种药物在改善血糖、血脂水平和改善糖尿病肾病方面具有协同作用（见实施例15），因此其可以与现有降糖药物联用优化降糖方案，减少各降糖药物的使用量，从而达到增强降糖效果、降低毒副作用的效果。与单独给药组相比，本发明的月桂酸单甘油酯和盐酸吡格列酮的药物组合物在改善血糖、尿糖、糖化血清蛋白、总胆固醇、甘油三酯、低密度胆固醇脂蛋白、高密度胆固醇脂蛋白水平方面具有显著差异，并产生了协同作用。 

（3）在月桂酸单甘油酯和盐酸吡咯列酮联合降糖的基础上，加用瑞舒伐他汀不仅可以使降糖效果进一步增强，更能降低糖尿病合并高血脂患者的胆固醇含量。本发明实施例17证明三种药物组成的复方药物在改善血糖、尿糖、糖化血清蛋白、总胆固醇、甘油三酯、低密度胆固醇脂蛋白、高密度胆固醇脂蛋白水平方面均与各单药组以及两种药物联合用药组的治疗效果具有显著差异，三种药物在上述指标的改善方面具有显著的协同作用。 

具体实施方式

    以下通过具体实施例进一步描述本发明，但本发明不仅仅限于以下实施例。 

实施例1   片剂

处方   月桂酸单甘油酯                   5g   

微晶纤维素                      1000g

2%羟丙基甲基纤维素溶液         适量

低取代羟丙基纤维素              80g 

硬脂酸镁                        50g

制备工艺：月桂酸单甘油酯过100目筛，微晶纤维素和低取代羟丙基纤维素过80目筛，称取处方量的月桂酸单甘油酯与低取代羟丙基纤维素、微晶纤维素混合均匀，加入2%羟丙基甲基纤维素溶液适量制粒，40℃干燥，16目筛整粒，干颗粒中加入处方量的硬脂酸镁混匀，压片即得。

实施例2   片剂

处方         月桂酸单甘油酯                    1000g    

微晶纤维素                      2000g

2%羟丙基甲基纤维素溶液         适量

低取代羟丙基纤维素              700g 

硬脂酸镁                        60g

制备工艺同实施例1。

实施例2   片剂

处方         月桂酸单甘油酯                  200g    

微晶纤维素                      2000g

2%羟丙基甲基纤维素溶液         适量

低取代羟丙基纤维素              700g 

硬脂酸镁                        60g

制备工艺同实施例1。

实施例3   片剂

处方         月桂酸单甘油酯                   1000g    

盐酸吡格列酮                     100g

微晶纤维素                      2000g

2%羟丙基甲基纤维素溶液         适量

低取代羟丙基纤维素              900g 

硬脂酸镁                        80g

制备工艺：月桂酸单甘油酯和盐酸吡咯列酮过100目筛，微晶纤维素和低取代羟丙基纤维素过80目筛，称取处方量的月桂酸单甘油酯、盐酸吡咯列酮与低取代羟丙基纤维素、微晶纤维素混合均匀，加入2%羟丙基甲基纤维素溶液适量制粒，40℃干燥，16目筛整粒，干颗粒中加入处方量的硬脂酸镁混匀，压片即得。

实施例4   片剂

处方         月桂酸单甘油酯                    5g    

盐酸吡格列酮                     500g

微晶纤维素                      100g

2%羟丙基甲基纤维素溶液         适量

低取代羟丙基纤维素              90g 

硬脂酸镁                        5g

制备工艺同实施例3。

实施例5   片剂

处方         月桂酸单甘油酯                   5g    

盐酸吡格列酮                     50g

微晶纤维素                      2500g

2%羟丙基甲基纤维素溶液         适量

低取代羟丙基纤维素              190g 

硬脂酸镁                        50g

制备工艺同实施例3。

实施例6   片剂

处方         月桂酸单甘油酯                  500g    

盐酸吡格列酮                    5g

微晶纤维素                      250g

2%羟丙基甲基纤维素溶液         适量

低取代羟丙基纤维素              120g 

硬脂酸镁                        20g

制备工艺同实施例1。

实施例7   片剂

处方         月桂酸单甘油酯                  120g    

盐酸吡格列酮                    12g

微晶纤维素                      350g

2%羟丙基甲基纤维素溶液         适量

低取代羟丙基纤维素              140g 

硬脂酸镁                        25g

制备工艺同实施例1。

实施例8   片剂

处方         瑞舒伐他汀钙                    10g

月桂酸单甘油酯                  50g    

盐酸吡格列酮                    30g

微晶纤维素                      350g

2%羟丙基甲基纤维素溶液         适量

低取代羟丙基纤维素              140g 

硬脂酸镁                        15g

制备工艺同实施例1。

实施例9   片剂

处方         瑞舒伐他汀钙                    0.2g

月桂酸单甘油酯                   10g    

盐酸吡格列酮                    10g

微晶纤维素                      350g

2%羟丙基甲基纤维素溶液         适量

低取代羟丙基纤维素              140g 

硬脂酸镁                        10g

制备工艺同实施例1。

实施例10   片剂

处方         瑞舒伐他汀钙                    16g

月桂酸单甘油酯                  50g    

盐酸吡格列酮                    10g

微晶纤维素                      350g

2%羟丙基甲基纤维素溶液         适量

低取代羟丙基纤维素              140g 

硬脂酸镁                        5g

制备工艺同实施例1。

实施例11   片剂

处方         瑞舒伐他汀钙                    40g

月桂酸单甘油酯                  10g    

盐酸吡格列酮                    100g

微晶纤维素                      350g

2%羟丙基甲基纤维素溶液         适量

低取代羟丙基纤维素              140g 

硬脂酸镁                        10g

制备工艺同实施例1。

实施例12  胶囊

处方          瑞舒伐他汀钙                    1600g

月桂酸单甘油酯                    100g

盐酸吡格列酮                    0.3g

预胶化淀粉                      6000g

微晶纤维素                      1000g

6%PVP的95%乙醇溶液             适量

硬脂酸镁                          50g

制备工艺：将处方中的瑞舒伐他汀钙、月桂酸单甘油酯、盐酸吡格列酮、预胶化淀粉、微晶纤维素和硬脂酸镁分别过100目筛，混匀，加6%PVP的95%乙醇溶液适量制粒，40℃烘干，18目筛整粒，胶囊充填即可。

实施例13  胶囊

处方          瑞舒伐他汀钙                    0.2g

月桂酸单甘油酯                    10g

盐酸吡格列酮                    100g

预胶化淀粉                      6000g

微晶纤维素                      1000g

6%PVP的95%乙醇溶液             适量

硬脂酸镁                          50g

制备工艺：将处方中的瑞舒伐他汀钙、月桂酸单甘油酯、盐酸吡格列酮、预胶化淀粉、微晶纤维素和硬脂酸镁分别过100目筛，混匀，加6%PVP的95%乙醇溶液适量制粒，40℃烘干，18目筛整粒，胶囊充填即可。

实施例14  缓释片

处方           瑞舒伐他汀钙                 10g

月桂酸单甘油酯                 100g

盐酸吡格列酮                 10

羟丙基甲基纤维素钠           40g

                   微晶纤维素                     100g

硬脂酸镁                      2g

制备工艺：将处方量的瑞舒伐他汀钙、月桂酸单甘油酯、盐酸吡格列酮、羟丙基甲基纤维素钠、微晶纤维素混匀，按照常规工艺制粒，干燥，整粒，加硬脂酸镁混匀，压片即得。

实施例15 月桂酸单甘油酯对糖尿病大鼠的影响

1.实验材料

1.1实验动物

体重180-200g的Wistar雄性大鼠，北京维通利华实验动物技术有限公司提供。

试剂

血糖测定试剂盒、尿糖测定试纸；链脲佐菌素（STZ），胰岛素放免试剂盒（北京华英生物技术研究所）。

实验方法

2.1糖尿病大鼠模型的建立：

选择Wistar雄性大鼠300只，体重180-200g，正常喂养一周后，按照体重随机区组法分为正常对照组和模型组，其中正常对照组10只，模型组290只。建立模型前，正常对照组和模型组均禁食（不禁水）24h，模型组以60mg/kg剂量一次性腹腔注射2%链脲佐菌素溶液（临用前用PH4.2的0.1M柠檬酸缓冲液配制成2%溶液），正常对照组腹腔注射同剂量柠檬酸-柠檬酸钠缓冲液，72h后于眼眶取血，静置后离心，分离血清，按照葡萄糖测定试剂盒说明书操作，在半自动生化仪上测定检测FBG，剔除血糖过高或过低者，选取空腹血糖>11mmol/l的大鼠作为实验模型。

分组与给药

2.2.1 正常对照组:灌胃同体积生理盐水；

2.2.2 模型对照组: 灌胃同体积生理盐水；

2.2.3 盐酸吡格列酮高组：灌胃给药吡格列酮10mg/kg；

2.2.4盐酸吡格列酮低组：灌胃给药吡格列酮0.1mg/kg；

2.2.5 月桂酸单甘油酯高组：灌胃给药月桂酸单甘油酯100mg/kg；

2.2.6 月桂酸单甘油酯中组：灌胃给药月桂酸单甘油酯10mg/kg

2.2.7月桂酸单甘油酯低组：灌胃给药月桂酸单甘油酯0.1mg/kg

2.2.8月吡一组：灌胃给药按照本发明实施例6 制备方法制备的药物组合物（月桂酸单甘油酯10mg/kg+盐酸吡格列酮0.1mg/kg）

2.2.9月吡二组：灌胃给药按照本发明实施例6 制备方法制备的药物组合物（月桂酸单甘油酯10mg/kg+盐酸吡格列酮10mg/kg）

2.2.10月吡三组：灌胃给药按照本发明实施例6 制备方法制备的药物组合物（月桂酸单甘油酯0.1mg/kg+盐酸吡格列酮0.1mg/kg）

2.2.11月吡四组：灌胃给药按照本发明实施例6 制备方法制备的药物组合物（月桂酸单甘油酯0.1mg/kg+盐酸吡格列酮100mg/kg）

其中，正常对照组大鼠10只，其它各组实验大鼠均为10只。

样本的制备及检测

于用药治疗期间，每周一次眼眶静脉采血，监测空腹血糖值变化。用药治疗第28天，禁食12h，末次给药1h后，腹主动脉取血，注入一洁净试管中静置，分离血清，立即检测FBG，其余血清样品分装于1.5ml冻存管中，-20℃冰箱保存等待相关生化、放免指标测定。

空腹血糖（FBG）的测定采用葡萄糖氧化酶法，糖化血清蛋白（GSP）含量测定采用果糖胺法，尿糖的测定采用尿糖试纸。 

数据统计处理

将以上所得实验数据按照以下方法进行统计学处理：

采用SPSS10.0统计软件，计算数据以均数±标准差（`x±s）表示，多组资料比较采用方差分析，组内比较采用t检验。以p<0.05为有统计学意义。

实验结果

3.1本发明药物组合物对糖尿病大鼠的血糖、尿糖的影响

由表1可知：

（1）本发明月桂酸单甘油酯单药给药组以及各组合物给药组对糖尿病大鼠血糖、尿糖的影响与模型组相比，都具有显著或极显著性差异。这表明月桂酸单甘油酯以及各药物组合物在改善糖尿病血糖、尿糖水平方面具有很好的作用。

（2）与吡格列酮高组和吡格列酮低相比，月桂酸单甘油酯各给药组的血糖水平和尿糖水平均显著降低，这表明月桂酸单甘油酯在治疗糖尿病过程中在降低血糖水平和尿糖水平方面优于现有糖尿病治疗药物吡格列酮。 

（3）与吡格列酮高组和吡格列酮低相比，组合物各给药组的血糖水平和尿糖水平均显著降低；与月桂酸单甘油酯高、中、低三个剂量组相比，组合物各给药组的血糖水平和尿糖水平均显著降低；这表明给药月桂酸单甘油酯和吡格列酮的药物组合物相对于两种药物单独用药具有显著改善糖尿病大鼠血糖和尿糖水平的优势，两种药物在降低血糖和尿糖水平方面存在明显的协同作用。 

表1 月桂酸单甘油酯及药物组合物对糖尿病大鼠血糖、尿糖的影响 

注:^▲与模型组比较，P＜0.05；^▲▲与模型组比较，P＜0.01；

^△与吡格列酮高组比较，P＜0.05；^△△与吡格列酮高组比较，P＜0.01；

^■与吡格列酮低组比较，P＜0.05；^■■与吡格列酮低组比较，P＜0.01；

^☆与月桂酸中组比较，P＜0.05； ^▼与月桂酸低组比较，P＜0.05； 

3.2本发明药物组合物对糖尿病大鼠糖化血清蛋白（GSP）的影响

糖化血清蛋白（GSP）是血浆中的蛋白质与葡萄糖非酶糖化过程中形成的一种高分子酮胺结构类似果糖胺的物质，它的浓度与血糖水平成正相关，并相对保持稳定，日间变异小。它的测定不受进食、运动、机体状况、即时血糖的影响。由于血浆蛋白的半衰期为17～20天，故GSP可以反映糖尿病患者检测前1～3周内的平均血糖水平。糖化血清蛋白水平的高低直接影响糖尿病病人将来各种慢性并发症的发生和发展。糖化血清蛋白处于较高水平时，说明患者存在着持续性高血糖，可能出现糖尿病肾病、动脉硬化、急性心肌梗死、脑血管意外、白内障等并发症。因此，临床常通过糖化血清蛋白指标来了解患者近阶段的血糖情况，评估糖尿病慢性并发症的发生与发展情况。

由表2可知： 

（1）本发明月桂酸单甘油酯单药给药组以及各组合物给药组对糖尿病大鼠糖化血清蛋白的影响与模型组相比，都具有显著或极显著性差异。这表明月桂酸单甘油酯以及各药物组合物在降低糖尿病患者的糖化血清蛋白水平方面具有很好的作用。

（2）与吡格列酮高组和吡格列酮低相比，月桂酸单甘油酯各给药组的糖化血红蛋白水平均显著降低，这表明月桂酸单甘油酯在治疗糖尿病过程中在降低糖化血红蛋白水平方面优于现有糖尿病治疗药物吡格列酮。 

（3）与吡格列酮高组和吡格列酮低相比，组合物各给药组的糖化血红蛋白水平均显著降低；与月桂酸单甘油酯高、中、低三个剂量组相比，组合物各给药组的糖化血红蛋白水平均显著降低；这表明给药月桂酸单甘油酯和吡格列酮的药物组合物相对于两种药物单独用药具有显著改善糖尿病大鼠糖化血红蛋白水平的优势，两种药物在降低糖化血红蛋白水平方面存在明显的协同作用。 

表2 本发明药物组合物对糖尿病大鼠糖化血清蛋白（GSP）的影响 

注:^▲与模型组比较，P＜0.05；^▲▲与模型组比较，P＜0.01；

^△与吡格列酮高组比较，P＜0.05；^△△与吡格列酮高组比较，P＜0.01；

^■与吡格列酮低组比较，P＜0.05；^■■与吡格列酮低组比较，P＜0.01；

^☆与月桂酸中组比较，P＜0.05； ^▼与月桂酸低组比较，P＜0.05；

实施例16  本发明药物组合物对糖尿病大鼠的影响

1.实验材料

实验动物和所需试剂同实施例15

2.实验方法

2.1糖尿病大鼠模型的建立：

造模方法同实施例15

2.2 分组与给药

2.2.1 正常对照组:灌胃同体积生理盐水；

2.2.2 模型对照组: 灌胃同体积生理盐水；

2.2.3 瑞舒伐一组：灌胃给药瑞舒伐他汀0.2mg/kg；

2.2.4 月吡一组：灌胃给药制备工艺同CN1596896A实施例1的复方片剂（月桂酸单甘油酯50mg/kg+吡格列酮10 mg/kg）；

2.2.5 月吡瑞一组：灌胃给药如本发明实施例9制备的片剂（月桂酸单甘油酯50 mg/kg+吡格列酮10 mg/kg+瑞舒伐他汀0.2mg/kg）； 

2.2.6 瑞舒伐二组：灌胃给药瑞舒伐他汀1.6mg/kg；

2.2.7 月吡二组：灌胃给药制备工艺同CN1596896A实施例1制备工艺制备的复方片剂（月桂酸单甘油酯5 mg/kg+吡格列酮1 mg/kg）；

2.2.8 月吡瑞二组：灌胃给药本发明实施例10制备的片剂（月桂酸单甘油酯5 mg/kg+吡格列酮1 mg/kg+瑞舒伐他汀1.6mg/kg）；

2.2.9瑞舒伐三组：灌胃给药瑞舒伐他汀4mg/kg；

2.2.10月吡三组：灌胃给药制备工艺同CN1596896A实施例1制备工艺制备的复方片剂（月桂酸单甘油酯1mg/kg+吡格列酮10mg/kg）；

2.2.11月吡瑞三组：灌胃给药本发明实施例11制备的片剂（月桂酸单甘油酯1mg/kg+吡格列酮10mg/kg+瑞舒伐他汀4mg/kg）。

2.2.12月桂酸组：灌胃给药月桂酸单甘油酯1mg/kg； 

2.2.13吡瑞组：灌胃给药吡格列酮10mg/kg+瑞舒伐他汀4mg/kg；

其中，正常对照组大鼠10只，其它各组实验大鼠均为10只。

样本的制备及检测同实施例15

2.4 数据统计处理

所得实验数据采用SPSS10.0统计软件，计算数据以均数±标准差（`x±s）表示，多组资料比较采用方差分析，组内比较采用t检验。以p<0.05为有统计学意义。

实验结果

3.1本发明药物组合物对糖尿病大鼠的血糖、尿糖的影响

由表3可知：

（1）月桂酸单甘油酯组以及药物组合物组对糖尿病大鼠血糖、尿糖的影响与模型组相比，都具有显著或极显著性差异。这表明月桂酸单甘油酯以及本发明药物组合物在改善糖尿病血糖、尿糖水平方面具有很好的作用。

（2）与瑞舒伐各单药组、月吡复方各组相比，月吡瑞复方组在改善糖尿病血糖、尿糖水平方面显著优于瑞舒伐单药组和月吡复方组；与月桂酸单甘油酯单独用药组及吡瑞复方组相比，月吡瑞复方组糖尿病的血糖水平和尿糖水平显著降低。这表明复方药物相对于三种单独用药或任意两种联合给药的血糖水平和尿糖水平均具有显著的优势，三种药物活性成分在治疗糖尿病方面具有显著降低血糖和尿糖取得了很好的协同作用。 

（3）实验结果表明，月桂酸单甘油酯、吡格列酮和瑞舒伐他汀的药物组合物可以用于治疗糖尿病，并且效果显著。尤其是重量比为10：（1～50）：（0.2～160）的月桂酸单甘油酯、吡格列酮和瑞舒伐他汀的药物组合物在降低血糖、尿糖方面取得了意想不到的技术效果。该优选的重量比是基于月桂酸单甘油酯、吡格列酮和瑞舒伐他汀药物疗效的实验证实。 

表3 本发明药物组合物对糖尿病大鼠血糖、尿糖的影响 

注:^▲与模型组比较，P＜0.05；^▲▲与模型组比较，P＜0.01；

^△△与瑞舒伐一组比较，P＜0.01；^＃与月吡一组比较，P＜0.05；

^★★与瑞舒伐二组比较，P＜0.01；^☆与月吡二组比较，P＜0.05；

^＆＆与瑞舒伐三组比较，P＜0.01；^▼与月吡三组比较，P＜0.05；

^■与吡瑞组比较，P＜0.05；^◆与月桂酸组比较，P＜0.05；

3.2本发明药物组合物对糖尿病大鼠糖化血清蛋白（GSP）的影响

由表4可知：

（1）与模型组相比，月桂酸单甘油酯以及本发明药物组合物对糖尿病大鼠糖化血红蛋白的影响具有显著或极显著性差异，月桂酸单甘油酯以及本发明药物组合物在改善糖尿病糖化血红蛋白水平方面具有很好的作用。

（2）与瑞舒伐各单药组、月吡复方各组相比，月吡瑞复方组在改善糖尿糖化血红蛋白水平方面显著优于瑞舒伐单药组和月吡复方组；与月桂酸单甘油酯单独用药组及吡瑞付房租相比，月吡瑞复方组糖尿病的糖化血红蛋白水平显著降低。这表明复方药物相对于三种单独用药或任意两种联合给药的糖化血红蛋白水平均具有显著的优势，三种药物活性成分在治疗糖尿病方面具有显著降低糖化血红蛋白取得了很好的协同作用。 

（3）实验结果表明，月桂酸单甘油酯、吡格列酮和瑞舒伐他汀的药物组合物可以用于治疗糖尿病，并且效果显著。尤其是重量比为10：（1～50）：（0.2～160）的月桂酸单甘油酯、吡格列酮和瑞舒伐他汀的药物组合物在降低糖化血红蛋白方面取得了意想不到的技术效果。该优选的重量比是基于月桂酸单甘油酯、吡格列酮和瑞舒伐他汀药物疗效的实验证实。 

表4本发明药物组合物对糖尿病大鼠糖化血清蛋白（GSP）的影响 

注: 注:^▲与模型组比较，P＜0.05；^▲▲与模型组比较，P＜0.01；

^△△与瑞舒伐一组比较，P＜0.01；^＃与月吡一组比较，P＜0.05；

^★★与瑞舒伐二组比较，P＜0.01；^☆与月吡二组比较，P＜0.05；

^＆＆与瑞舒伐三组比较，P＜0.01；^▼与月吡三组比较，P＜0.05；

^■与吡瑞组比较，P＜0.05；^◆与月桂酸组比较，P＜0.05；

实施例17  本发明药物组合物对糖尿病合并高血脂大鼠的影响

1.实验材料

1.1实验动物 

体重180-200g Wistar雄性大鼠120只，由北京维通利华实验动物技术有限公司提供。

1.2试剂 

血糖测定试剂盒、TG测定试剂盒、TC测定试剂盒、LDL-C测定试剂盒、HDL-C测定试剂盒（中生北控生物科技股份有限公司）；链脲佐菌素（STZ），胰岛素放免试剂盒（北京华英生物技术研究所）。

实验方法

2.1糖尿病合并高血脂症动物模型的建立：

选择Wistar雄性大鼠120只，体重300-350g，正常喂养一周后，按照体重随机区组法分为正常对照组和模型组，其中正常对照组10只，模型组110只。正常对照组喂饲普通饲料，模型组喂饲高糖高脂饲料，连续8周。8周后，禁食12小时，模型组以30mg/kg剂量一次性腹腔注射2%链脲佐菌素溶液（临用前用PH4.2的0.1M柠檬酸缓冲液配制成2%溶液），正常对照组腹腔注射同剂量柠檬酸-柠檬酸钠缓冲液，72h后于眼眶取血，静置后离心，分离血清，按照葡萄糖测定试剂盒说明书操作，在半自动生化仪上测定检测FBG，剔除血糖过高或过低者，选取空腹血糖>11mmol/l为主，兼见胆固醇（TC）、血清甘油三酯（TG）含量升高与正常对照组存在显著差异的大鼠为成功模型纳入试验。

2.2 分组与给药 

2.2.1 正常对照组:灌胃同体积生理盐水；

2.2.2 模型对照组: 灌胃同体积生理盐水；

2.2.3 瑞舒伐组：灌胃给药瑞舒伐他汀4mg/kg；

2.2.4 月桂酸单甘油酯组：灌胃给药月桂酸单甘油酯20mg/kg；

2.2.5 吡格列酮组：灌胃给药吡格列酮4mg/kg；

2.2.6 月吡组：灌胃给药月桂酸单甘油酯20mg/kg+吡格列酮4mg/kg；

2.2.7瑞吡组：灌胃给药瑞舒伐他汀4mg/kg+吡格列酮4mg/kg；

2.2.8 月瑞组：灌胃给药月桂酸单甘油酯20mg/kg+瑞舒伐他汀4mg/kg；

2.2.9 月吡瑞组：灌胃给药本发明实施例14制备的胶囊（月桂酸单甘油酯20mg/kg+吡格列酮4mg/kg+瑞舒伐他汀4mg/kg）；

其中，正常对照组大鼠10只，其它各组实验大鼠均为10只。

样本的制备及检测

于用药治疗期间，每周一次眼眶静脉采血，监测空腹血糖值变化。用药治疗第28天，禁食12h，末次给药1h后，腹主动脉取血，注入一洁净试管中静置，分离血清，立即检测FBG，其余血清样品分装于1.5ml冻存管中，-20℃冰箱保存等待相关生化、放免指标测定。试验结束，处死动物，同时称取肝脏，计算肝指数。肝指数=肝重（g）/体重（g）×100。

空腹血糖（FBG）的测定采用葡萄糖氧化酶法，尿糖的测定采用尿糖试纸，总胆固醇（TC）、甘油三酯（TG）含量测定采用酶比色法，低密度胆固醇脂蛋白（LDL-C）含量测定采用聚乙烯硫酸沉淀法、高密度胆固醇脂蛋白（HDL-C）含量测定采用磷钨酸-镁沉淀法。 

数据的统计方法

将以上所得实验数据按照以下方法进行统计学处理：采用SPSS10.0统计软件，计算数据以均数±标准差（`x±s）表示，多组资料比较采用方差分析，组内比较采用t检验。以p<0.05为有统计学意义。

试验结果

3．1本发明药物组合物对糖尿病合并高血脂大鼠血糖和尿糖的影响

   本发明在实验中不仅设立了单独给药组，而且相应地设立了两个活性组分药物组、三个活性组分药物组，通过实验结果（具体见表5）我们发现，无论与单独给药组月桂酸单甘油酯组、吡格列酮组、瑞舒伐他汀组相比，还是与含有两个活性组分组如月吡组、瑞吡组和肝瑞组相比，本发明药物组合物在降低血糖和尿糖方面取得了协同的作用，并且与各治疗组相比都具有显著或极显著性差异。

    这进一步表明，本发明的药物组合物对于糖尿病合并高血脂大鼠的血糖水平的改善具有突出的治疗效果。 

表5 本发明药物组合物对糖尿病大鼠血糖、尿糖的影响 

注:^▲与模型组比较，P＜0.05；^▲▲与模型组比较，P＜0.01；

^△与瑞舒伐组比较，P＜0.05；^△△与瑞舒伐组比较，P＜0.01；

^※与吡格列酮组比较，P＜0.05；^■与月桂酸单甘油酯组比较，P＜0.05；

^＃与月吡组比较，P＜0.05；^★与瑞吡组比较，P＜0.01；^＆＆与月瑞组比较，P＜0.01。

本发明药物组合物对糖尿病合并高血脂大鼠血脂的影响

通过实验结果（具体见表6）我们发现，无论与单独给药组月桂酸单甘油酯组、吡格列酮组、瑞舒伐他汀组相比，还是与含有两个活性组分组如月吡组、瑞吡组和肝瑞组相比，本发明药物组合物在降低总胆固醇、血清甘油三酯、低密度胆固醇脂蛋白方面以及升高高密度胆固醇脂蛋白方面具有显著性差异，并且具有协同作用。

    这进一步表明，本发明的药物组合物对于糖尿病合并高血脂大鼠的血脂水平的改善具有显著的治疗效果。 

表6　本发明药物组合物对糖尿病合并高血脂大鼠血脂的影响 

注:^▲与模型组比较，P＜0.05；^▲▲与模型组比较，P＜0.01；

^△与瑞舒伐组比较，P＜0.05；^△△与瑞舒伐组比较，P＜0.01；

^※与吡格列酮组比较，P＜0.05；^■与月桂酸单甘油酯组比较，P＜0.05；

^＃与月吡组比较，P＜0.05；^★与瑞吡组比较，P＜0.01；^＆＆与月瑞组比较，P＜0.01。

对于本领域的技术人员来说，根据实施例17的实验步骤，将其它重量比的月桂酸单甘油酯、吡格列酮和瑞舒伐他汀的药物组合物替换上述实验用药的药物组合物进一步考察其它重量比的月桂酸单甘油酯、吡格列酮和瑞舒伐他汀的药物组合物治疗糖尿病合并高血脂大鼠是很容易想得到的，本发明还重点考察了重量比为10:0.03:0.01和10:240:160的月桂酸单甘油酯、吡格列酮和瑞舒伐他汀的药物组合物药物疗效，结果发现，重量比为10:0.03:0.01和10:240:160的月桂酸单甘油酯、吡格列酮和瑞舒伐他汀的药物组合物在降低总胆固醇、血清甘油三酯、低密度胆固醇脂蛋白方面以及升高高密度胆固醇脂蛋白方面取得了预料不到的治疗效果，并具有协同改善总胆固醇、血清甘油三酯、低密度胆固醇脂蛋白以及高密度胆固醇脂蛋白水平的作用。结合以上实验结果，重量比为10:(0.03～240):(0.01～160)的月桂酸单甘油酯、吡格列酮和瑞舒伐他汀的药物组合物在降低总胆固醇、血清甘油三酯、低密度胆固醇脂蛋白方面以及升高高密度胆固醇脂蛋白方面取得了预料不到的治疗效果，并具有协同改善总胆固醇、血清甘油三酯、低密度胆固醇脂蛋白以及高密度胆固醇脂蛋白水平的作用，尤其是重量比为10:(0.2～100):(0.2～160) 月桂酸单甘油酯、吡格列酮和瑞舒伐他汀的药物组合物治疗糖尿病合并高血脂症的效果更优、有效率更高。 

Claims (2)

1.一种治疗或预防糖尿病的药物组合物，其特征在于它含有盐酸吡格列酮和月桂酸单甘油酯。

2.如权利要求1 所述的药物组合物，其特征在于药物组合物中月桂酸单甘油酯和盐酸吡咯列酮的重量比为1 ：0.1-100。

3.如权利要求2所述的药物组合物，其特征在于药物组合物中月桂酸单甘油酯和盐酸吡咯列酮的重量比为1 ：1-10。

4. 如权利要求2 所述的药物组合物，其特征在于药物组合物中月桂酸单甘油酯的人用给药量为1-10mg/kg·d，盐酸吡咯列酮的人用给药量为0.1mg-10mg/kg·d。

5. 一种治疗或预防糖尿病的药物组合物，其特征在于它由瑞舒伐他汀、盐酸吡格列酮和月桂酸单甘油酯组成。

6. 如权利要求5 所述的药物组合物，其特征在于药物组合物中月桂酸单甘油酯、盐酸吡咯列酮和瑞舒伐他汀之间的重量比为10:(0.03 ～ 240):(0.01 ～ 160)。

7．如权利要求6 所述的药物组合物，其特征在于药物组合物中月桂酸单甘油酯、盐酸吡咯列酮和瑞舒伐他汀之间的重量比为10:(0.2 ～ 100):(0.2 ～ 160)。

8. 如权利要求1-7任一所述的药物组合物，其特征在于所述药物组合物为其口服制剂，所述口服制剂为其片剂、胶囊剂或颗粒剂。

9. 权利要求1或5所述的药物组合物在制备治疗或预防糖尿病的药物中的用途。