CN103109873A - 菊芋叶片酚类提取物及其制备方法和应用 - Google Patents

菊芋叶片酚类提取物及其制备方法和应用 Download PDF

Info

Publication number
CN103109873A
CN103109873A CN201310056376XA CN201310056376A CN103109873A CN 103109873 A CN103109873 A CN 103109873A CN 201310056376X A CN201310056376X A CN 201310056376XA CN 201310056376 A CN201310056376 A CN 201310056376A CN 103109873 A CN103109873 A CN 103109873A
Authority
CN
China
Prior art keywords
extract
jerusalem artichoke
phenols extract
leaf
phenols
Prior art date
Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
Granted
Application number
CN201310056376XA
Other languages
English (en)
Other versions
CN103109873B (zh
Inventor
刘玲
谌馥佳
隆小华
刘兆普
俞梦妮
Current Assignee (The listed assignees may be inaccurate. Google has not performed a legal analysis and makes no representation or warranty as to the accuracy of the list.)
BEIJING BI QING YUAN LANDSCAPING CO., LTD.
Original Assignee
Nanjing Agricultural University
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Nanjing Agricultural University filed Critical Nanjing Agricultural University
Priority to CN201310056376.XA priority Critical patent/CN103109873B/zh
Publication of CN103109873A publication Critical patent/CN103109873A/zh
Application granted granted Critical
Publication of CN103109873B publication Critical patent/CN103109873B/zh
Expired - Fee Related legal-status Critical Current
Anticipated expiration legal-status Critical

Links

Images

Classifications

    • Y—GENERAL TAGGING OF NEW TECHNOLOGICAL DEVELOPMENTS; GENERAL TAGGING OF CROSS-SECTIONAL TECHNOLOGIES SPANNING OVER SEVERAL SECTIONS OF THE IPC; TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
    • Y02—TECHNOLOGIES OR APPLICATIONS FOR MITIGATION OR ADAPTATION AGAINST CLIMATE CHANGE
    • Y02A—TECHNOLOGIES FOR ADAPTATION TO CLIMATE CHANGE
    • Y02A50/00—TECHNOLOGIES FOR ADAPTATION TO CLIMATE CHANGE in human health protection, e.g. against extreme weather
    • Y02A50/30—Against vector-borne diseases, e.g. mosquito-borne, fly-borne, tick-borne or waterborne diseases whose impact is exacerbated by climate change

Landscapes

  • Agricultural Chemicals And Associated Chemicals (AREA)
  • Medicines Containing Plant Substances (AREA)

Abstract

菊芋叶片酚类提取物及其制备方法和应用，将菊芋的新鲜叶片烘干，粉碎后得菊芋叶干粉；取菊芋叶干粉，置于减压回流提取装置中，加入去离子水，室温提取得水酚类提取液，然后浓缩或干燥水酚类提取物；或加入有机溶剂置于减压回流提取装置中，在回流或减压回流条件下提取，然后浓缩或干燥得有机溶剂酚类提取物；将菊芋叶片水酚类提取物或有机溶剂酚类提取物按体积比分别用石油醚、氯仿、乙酸乙酯和正丁醇依次分步萃取，最后浓缩或干燥得分步酚类提取物。本发明的提取物属于植物源（性）新农药，对番茄灰霉病菌、辣椒疫霉病菌、苹果炭疽病菌、小麦纹枯病菌和小麦全蚀病菌等多种作物病原菌有特效，并可作为一种天然的植物源杀菌剂及果蔬保鲜防腐剂。

Description

菊芋叶片酚类提取物及其制备方法和应用
技术领域
本发明属于植物农药领域，具体涉及一类植物提取物及其制备方法和应用，特别涉及菊芋叶片提取物及其制备方法和其作为杀菌剂和保鲜剂在植物病害防治中的应用。
背景技术
随着人类社会的不断发展和人的认知水平的进一步深化，防治有害生物及克服其抗性、保障食品安全和保护环境已越来越受到广泛的关注。在农业领域，化学合成农药的滥用及其本身的缺点是导致病虫害产生抗性、农产品农药残留超标和生态环境遭到破坏的主要因素。为了解决这些现实问题，人们加大了对低毒、低残留、无污染、环境和谐的新型农药的开发力度，尤其是生物农药的研发，植物源（性）农药作为生物农药的重要组成部分因此而倍受重视，目前，国内外均有植物源（性）农药的研发报道。本发明得到了菊芋叶片提取物，富含酚类物质，经过反复试验证明：菊芋叶片酚类物质对许多植物病原菌有抑制作用，尤其是对番茄灰霉菌、苹果炭疽病菌、辣椒疫霉菌、小麦纹枯病菌具有明显的抑菌效果。本发明开拓了菊芋资源利用的新方向，提供一种防治植物病害的果蔬保鲜剂、杀菌剂的制备方法及应用。
菊芋是菊科（Compositae）向日葵属中能形成地下块茎的栽培种，又称洋生姜、洋姜、鬼子姜等，学名Helianthus tuberosus L.。菊芋喜温暖，但耐寒；喜湿润，但耐旱；喜肥沃，但耐贫瘠，耐盐碱，在我国大多地区都有种植，也可在滨海盐土栽培并用海水灌溉。菊芋的地上茎叶和地下块茎都是优良的饲料，地下块茎含丰富菊糖，可作蔬菜，也可以用于生产果糖糖浆和开发酒精，是未来的能源植物之一。菊芋因其具有良好的生物学特性以及经济价值，国内外对菊芋的研究工作主要集中在食品，饲料，栽培，生产果糖糖浆以及生态方面。而其能够经霜打和抵御多种病害，无须施用农药的特点易为人所忽视，因此国内外对其植株内成分抑制病原菌的研究至今仍是空白。本发明是在对菊芋叶片内化学物质抑菌活性研究的基础上，利用菊芋叶片中酚类化学物质开发植物源杀菌剂、果蔬保鲜剂，国内外尚属首例。
发明内容
解决的技术问题：本研究的目的在于提供了一种安全、有效、经济、无公害的天然植物源杀菌剂、果蔬保鲜剂及其制备方法，同时充分开发利用菊芋（Helianthus tuberosus L.)这一植物资源。为了实现上述目的，申请人比较了不同提取方法的离体抑菌效果，发现室温浸提法或减压回流法提取物酚类含量较多，而且在活体条件下，对番茄灰霉菌、苹果炭疽病菌、辣椒疫霉菌均有较好抑制效果，对果蔬的无害保鲜有良好的作用。
技术方案：
菊芋叶片酚类提取物，该提取物由下述步骤制备：
A．将菊芋的新鲜叶片烘干，粉碎后过40～60目筛，得菊芋叶干粉；
B．取菊芋叶干粉，加入5-10倍干粉重的去离子水，室温浸提3-5天，得水酚类提取液，然后浓缩或干燥水酚类提取物；或加入干粉重5-10倍的有机溶剂，在回流或减压回流条件下提取，提取温度为30～80℃，提取时间为4～8小时，或室温浸提3-5天，然后浓缩或干燥得有机溶剂酚类提取物；
C.将菊芋叶片水酚类提取物或有机溶剂酚类提取物按体积比分别用5-10倍的石油醚、氯仿、乙酸乙酯和正丁醇依次分步萃取，氯仿、乙酸乙酯和正丁醇的萃取对象均为上步的萃余相，最后浓缩或干燥得分步酚类提取物；
上述提取用的有机溶剂为甲醇、乙醇、丙酮、苯、二甲苯和乙酸乙酯中的任意一种或几种的混合。
菊芋叶片酚类提取物的制备方法，制备步骤为：
A．将菊芋的新鲜叶片烘干，粉碎后过40～60目筛，得菊芋叶干粉；
B．取菊芋叶干粉，加入5-10倍干粉重的去离子水，室温提取3-5天，得水酚类提取液，然后浓缩或干燥水酚类提取物；或加入干粉重5-10倍的有机溶剂，在回流或减压回流条件下提取，提取温度为30～80℃，提取时间为4～8小时，或浸提3-5天，然后浓缩或干燥得有机溶剂酚类提取物；
C.将菊芋叶片水酚类提取物或有机溶剂酚类提取物按质量比分别用5-10倍的石油醚、氯仿、乙酸乙酯和正丁醇依次分步萃取，氯仿、乙酸乙酯和正丁醇的萃取对象均为上步的萃余相，最后浓缩或干燥得分步酚类提取物；
上述提取用的有机溶剂为甲醇、乙醇、丙酮、苯、二甲苯和乙酸乙酯中的任意一种或几种的混合。
菊芋叶片酚类提取物的制备方法，优选制备步骤为：
A．将菊芋的新鲜叶片烘干，粉碎后过40～60目筛，得菊芋叶干粉；
B．取菊芋叶干粉，加入干粉重5-10倍的乙醇，在减压回流条件下提取，压力范围为：-0.08MPa～-0.09MPa，提取温度为30～60℃，提取时间为4～8小时，然后浓缩或干燥得有机溶剂酚类提取物；
C.将菊芋叶片有机溶剂酚类提取物按质量比分别用5-10倍的石油醚、氯仿、乙酸乙酯和正丁醇依次分步萃取，氯仿、乙酸乙酯和正丁醇的萃取对象均为上步的萃余相，最后浓缩或干燥得正丁醇酚类提取物。
所述菊芋叶片酚类提取物在番茄灰霉病、苹果炭疽病、辣椒疫霉病、小麦纹枯病、小麦赤霉病防治上的应用。
上述提取物防治番茄灰霉病的抑制中浓度EC50为1.3-7.6g/L。
上述提取物防治苹果炭疽病的抑制中浓度EC50为1.9-3.4g/L。
上述提取物防治辣椒疫霉病的抑制中浓度EC50为0.8-2.6g/L。
上述提取物防治小麦纹枯病的抑制中浓度EC50为0.2-5.2g/L。
上述防治方法为喷雾、浸泡或涂布菊芋叶片酚类提取物。
上述菊芋叶片酚类提取物的植物源杀菌剂、果蔬保鲜剂的制备方法中提取方法包括：室温浸提法、回流提取法或减压回流提取法，其中：
室温浸提法为：菊芋叶干粉置于提取溶剂中室温浸泡3-5天，获得提取液；
回流提取法为：菊芋叶干粉置于回流提取装置中加入提取溶剂，温度控制在溶剂的沸点±5℃，提取4～8小时，获得提取液；
减压回流提取法为：根据实用新型专利CN202315392U设置减压回流装置，在-0.08MPa～-0.09MPa、30～60℃，提取4～8小时，获得提取液。
经试验反复证明，本发明的菊芋叶干粉、水酚类提取物、有机溶剂酚类提取物或分步酚类提取物对番茄灰霉菌、苹果炭疽病菌、辣椒疫霉菌和小麦纹枯病菌等植物病原真菌有明显的抑制效果。并可有效防治番茄灰霉病、苹果炭疽病和辣椒疫霉病。
有益效果：本发明的菊芋叶片酚类提取物制备及应用与现有的常用杀菌剂相比，具有如下优点：
1.国内外首次将菊芋叶片酚类提取物应用于防治植物病害以及果蔬保藏，开拓了植物源农药与食品保鲜相结合的新用途及新思路。
2.提取工艺的优化尤其是减压回流装置的应用，大幅度地提高了提取效率，最大程度地减少了酚类物质的损失，可以适应大规模生产的需要。
3.对环境安全菊芋叶片杀菌剂中的有效酚酸类物质，是植物次生代谢产物，能参与自然的物质与能量代谢，施于植物上或环境中，不会引起生物富集，亦不致造成残留。
4.对非靶标生物相对安全。
5.对植物病原菌的作用机理不同于常规农药，使用后病原菌不易对其产生抗药性。
6.具有广谱抗菌活性，对多种植物病原真菌有抑制作用。
7.以常见植物菊芋为原料，原料来源广，价格低廉，生产成本低，生产工艺简单，适合各种规模生产。
附图说明
图1回流提取法的乙醇酚类提取物对小麦纹枯菌的抑制效果；
图2减压回流法的乙醇酚类提取物对小麦纹枯菌（第一排）、番茄灰霉病菌（第二排）、苹果炭疽病菌（第三排）以及辣椒疫霉病菌（第四排）的抑制效果；
图3减压回流法的乙醇酚类提取物对九种植物病原真菌的抑制效果（注：供试浓度为10g/L）；其中，A番茄灰霉菌、B苹果炭疽病菌、C玉米大斑病菌、D小麦全蚀病菌、E小麦赤霉病菌、F辣椒疫霉病菌、G稻瘟菌、H小麦纹枯菌、I油菜菌核病菌；
图4氯仿酚类提取物对小麦纹枯菌（第一排）、番茄灰霉病菌（第二排）、苹果炭疽病菌（第三排）以及辣椒疫霉病菌（第四排）的抑制效果；
图5乙酸乙酯酚类提取物对小麦纹枯菌（第一排）、番茄灰霉病菌（第二排）、苹果炭疽病菌（第三排）以及辣椒疫霉病菌（第四排）的抑制效果；
图6正丁醇酚类提取物对小麦纹枯菌（第一排）、番茄灰霉病菌（第二排）、苹果炭疽病菌（第三排）以及辣椒疫霉病菌（第四排）的抑制效果。
图7乙醇酚类提取物对番茄灰霉病的防治效果图。
具体实施方式
实施例1
（一）制备实施例
为了更清楚的理解本发明以及本提取物的药效，以下通过发明人给出的依本发明技术方案完成的如下实施例，对本发明作进一步的详细描述，这些仅是本发明较好的实施例，但不限于这些实施例。
菊芋叶片酚类提取物的制备
将菊芋的新鲜叶片40～60℃烘干，粉碎后过40～60目筛，获得菊芋叶干粉。按菊芋叶干粉：水=1：5～10（质量）的比例，室温浸提3-5天，过滤得提取液，采用Folin–Ciocalteu试剂法测定总酚含量，再经减压浓缩或干燥得固体酚类提取物，低温贮存备用。
菊芋叶片有机溶剂回流法酚类提取物的制备
将菊芋的新鲜叶片40～60℃烘干，粉碎后过40～60目筛，获得菊芋叶干粉。按菊芋叶干粉：乙醇=1：5～10（质量）的比例置于回流提取装置中加热提取，温度控制在乙醇的沸点±5℃，提取4～8小时，提取温度为30～80℃，过滤得酚类提取液；
采用Folin–Ciocalteu试剂法测定总酚含量，再经减压浓缩或干燥得固体酚类提取物，低温贮存备用。
菊芋叶片有机溶剂减压回流法酚类提取物的制备
将菊芋的新鲜叶片40～60℃烘干，粉碎后过40～60目筛，获得菊芋叶干粉。根据实用新型专利CN202315392U设置减压回流装置，按菊芋叶干粉：乙醇=1：5～10（质量）的比例置于减压回流提取装置中加热提取，提取压力范围为-0.08MPa～-0.09MPa，提取温度为30～60℃，提取时间为4～8小时，过滤得酚类提取液；
采用Folin–Ciocalteu试剂法测定总酚含量，再经减压浓缩或干燥得固体酚类提取物，低温贮存备用。
菊芋叶片溶剂分步酚类提取物的制备
将菊芋叶片水酚类提取物或有机溶剂酚类提取物，置于分液装置中，加入5-10倍（质量）的石油醚，充分搅拌后静置，待混合液澄清分层后，取出石油醚层，减压浓缩，得石油醚酚类提取物，低温贮存备用；石油醚提取后的剩余部分，加入5-10倍（质量）的氯仿，充分搅拌后静置，待混合液澄清分层后，取出氯仿层，减压浓缩，得氯仿酚类提取物，低温贮存备用；氯仿提取后的剩余部分，加入5-10倍（质量）的乙酸乙酯，充分搅拌后静置，待混合液澄清分层后，取出乙酸乙酯层，减压浓缩，得乙酸乙酯酚类提取物，低温贮存备用；乙酸乙酯提取后的剩余部分，加入5-10倍（质量）的正丁醇，充分搅拌后静置，待混合液澄清分层后，取出正丁醇层，减压浓缩，得正丁醇酚类提取物，低温贮存备用。各分步酚类提取物采用Folin-Ciocalteu试剂法测定总酚含量。
（二）试验实施例
不同溶剂和不同提取方法提取率比较试验
1、计算公式
各溶剂、各提取方法提取率的计算公式如下：
提取率(%)=提取物干样质量(g)/菊芋叶干粉质量(g)×100%
2、不同溶剂的提取率比较
采用回流提取法比较不同提取溶剂的提取率，各溶剂回流提取法对菊芋叶片的提取率参见表1，各溶剂回流提取法对菊芋叶片的提取率差异明显。水提取率最高，达到17.68%，石油醚提取率最低，为1.60%，从工业生产最优化和环境友好的角度出发，采用水或甲醇或乙醇不仅能够提高提取效率，而且能够节能环保。
3、不同提取方法提取率比较
以乙醇为例，比较室温浸提法、回流提取法和减压回流法3种提取方法的提取率为4.90%、10.65%、10.33%，减压回流法与回流提取法提取率差异不显著，却明显大于室温浸提法。综合抑菌活性试验结果及总酚含量测定，表明减压回流法最大程度地减少了酚类物质的损失，减压回流法为最佳提取方法。
表1不同溶剂对菊芋叶片提取率（回流法）
溶剂 石油醚 乙醚 丙酮 乙酸乙酯 乙醇 甲醇 水
提取率（%） 1.60 2.02 2.32 3.24 10.65 11.99 17.68
菊芋叶片酚类提取物中总酚含量测定
以没食子酸为标样，采用Folin-Ciocalteu试剂法测定不同提取方法及不同提取溶剂的总酚含量。
表2不同提取方法及提取溶剂的总酚含量
Figure BDA00002850333300061
注：CE:粗提物;A:回流法;B:室温浸提法;C:减压回流;PE:石油醚提取物;Chl:氯仿提取物;EA:乙酸乙酯提取物;NB:正丁醇提取物。
由表2可以看出减压回流法总酚含量明显高于另外两种方法，抑菌活性试验也表明减压回流法抑菌活性较好。正丁醇酚类提取物、乙酸乙酯酚类提取物总酚含量最高，结合抑菌活性试验表明，酚类物质含量和抑菌活性存在正相关性。以乙酸乙酯、正丁醇酚类提取物为例，结合提取物离体和活体抑菌活性试验表明，酚类物质对部分植物病原真菌如番茄灰霉病菌、小麦纹枯病菌、辣椒疫霉病菌和苹果炭疽病菌有特效。
菊芋叶片酚类提取物对植物病原真菌的抑制活性试验
在离体条件下，用菌丝生长速率法测定了菊芋叶片的乙醇、石油醚、氯仿、乙酸乙酯以及正丁醇酚类提取物对部分植物病原真菌的抑制活性，研究报告如下：
1、供试菌种小麦纹枯病菌（Rhizoctonia cerealis）、小麦赤霉病菌（Gibberella zeae）、小麦全蚀病菌（Gaeumannomyces graminis）、油菜菌核病菌（Sclerotinia sclerotiorum）、玉米大斑病菌（Exserohilum turcicum）、苹果炭疽病菌（Colletotrichum gloeosporioides）、番茄灰霉病菌（Botrytis cinerea）、水稻稻瘟病菌（Pyricularia grisea）、辣椒疫霉菌（Phytophthora capsiciLeonian）。菌种均为ACCC标准菌株，菌种由江苏省农科院提供。
2、试验方法菌丝生长速率法，抑菌率计算公式如下：
菌丝生长抑制率%=（对照菌落净直径－处理菌落净直径）/对照菌落净直径×100%
菌落净直径(cm)=菌落平均直径(cm)－菌饼直径(0.4cm)
3、试验结果菊芋叶片酚类提取物对植物病原真菌菌丝生长的抑制作用，结果如下：
表3不同提取方法及溶剂对小麦纹枯菌菌丝生长的抑制效果
抑菌率（%） 回流法 减压回流法 室温浸提法
乙醇 78.15 74.94 64.32
石油醚 31.24 41.75 53.18
氯仿 87.29 69.01 72.41
水 5.21 50.15 63.73
注：供试提取物浓度为10g/L。
从表3可以看出，回流法氯仿提取物的抑菌效果最好，其次是回流法和减压回流法乙醇提取物的抑菌活性较好，但是氯仿毒性较大，不适宜大规模工业生产和对环境友好的要求，因此，实际生产中应采用减压回流法乙醇提取菊芋叶片活性物质。
表4乙醇酚类提取物回流法与减压回流法对小麦纹枯菌的毒力比较
提取方法 抑制毒力回归线（Y=） R2 EC50(g/L)
回流法 Y=2.0744X+3.7100 0.9881 4.187
减压回流法 Y=1.1281X+4.6214 0.9236 2.166
从表4的结果可以看出，减压回流法对小麦纹枯菌的抑制作用强于回流法，总的来说，减压回流法是一种提取效率高，对酚类物质损失少的提取方法，采用减压回流装置，操作简单，适合大规模生产。
表5乙醇酚类提取物（减压回流法）对植物病原真菌菌丝生长的抑制效果
Figure BDA00002850333300081
注：供试提取物浓度为10g/L.
从表5的结果可以看出，乙醇酚类提取物（减压回流法）对不同植物病原真菌均有一定的抑制效果，说明本发明的乙醇酚类提取物抑菌谱广泛，可以用于多种植物病害的防治；尤其对番茄灰霉病菌、辣椒疫霉病菌和苹果炭疽病菌的抑制效果显著，抑制率分别可达98.22%、87.85%和89.77%。
表6乙醇酚类减压回流提取物对植物病原真菌菌丝生长的毒力
供试菌种 抑制毒力回归线（Y=） R2 EC50(g/L)
番茄灰霉病菌 Y=3.9169+3.0913X 0.9449 2.241
苹果炭疽病菌 Y=4.2301+2.2054X 0.9760 2.234
辣椒疫霉病菌 Y=4.2628+1.8256X 0.9804 2.534
小麦纹枯菌 Y=4.6214+1.1281X 0.9236 2.166
表7氯仿酚类提取物对植物病原真菌菌丝生长的毒力
供试菌种 抑制毒力回归线（Y=） R2 EC50(g/L)
番茄灰霉病菌 Y=4.6260+0.4273X 0.9605 7.504
苹果炭疽病菌 Y=4.4985+0.9574X 0.9932 3.340
辣椒疫霉病菌 Y=5.1637+2.8329X 0.9367 0.875
小麦纹枯菌 Y=3.5867+1.9878X 0.9389 5.140
表8乙酸乙酯酚类提取物对植物病原真菌菌丝生长的毒力
供试菌种 抑制毒力回归线（Y=） R2 EC50(g/L)
番茄灰霉病菌 Y=4.1315+3.2260X 0.9985 1.859
苹果炭疽病菌 Y=3.8459+3.6501X 0.9810 2.071
辣椒疫霉病菌 Y=4.7927+3.3296X 0.9837 1.154
小麦纹枯菌 Y=5.8072+1.5429X 0.9389 0.300
表9正丁醇酚类提取物对植物病原真菌菌丝生长的毒力
供试菌种 抑制毒力回归线（Y=） R2 EC50(g/L)
番茄灰霉病菌 Y=4.7523+2.4435X 0.9496 1.263
苹果炭疽病菌 Y=3.7826+4.3293X 0.9858 1.911
辣椒疫霉病菌 Y=5.2237+2.9430X 0.9858 0.839
小麦纹枯菌 Y=6.0028+1.5789X 0.9956 0.232
从表6-9的结果可以看出，氯仿、乙酸乙酯以及正丁醇酚类提取物对四种植物病原真菌均有一定的抑制效果，本发明用于番茄灰霉病、苹果炭疽病和辣椒疫霉病的防治以及果蔬保鲜剂的使用是可行的。
菊芋叶片酚类提取物对番茄灰霉病的防治试验
将经挑选的番茄先用表面消毒剂洗果，接着用去离子水冲洗、晾干，然后分别用浓度为1g/L、2g/L的乙醇酚类提取物溶液、乙酸乙酯酚类提取物溶液和正丁醇酚类提取物溶液浸果2min，晾干，再在果实表面接种番茄灰霉菌饼，单果包装，于23～25℃和98%RH条件下培养4天后，统计病情指数和防治效果。试验设空白对照，并以防治灰霉的杀菌剂多菌灵作为商品杀菌剂对照，多菌灵溶液浓度为1g/L、2g/L。
病果分级标准依据病果病斑直径确定，具体划分为：0级，无病斑；1级，0～1cm；3级，1～2cm；5级，2～3cm；7级，3～4cm；9级，4cm以上。
试验结果如表10：
表10菊芋叶片酚类提取物对番茄灰霉病的防治试验
Figure BDA00002850333300101

Claims (9)

1.菊芋叶片酚类提取物，其特征在于该提取物由下述步骤制备：
A．将菊芋的新鲜叶片烘干，粉碎后过40～60目筛，得菊芋叶干粉；
B．取菊芋叶干粉，加入5-10倍干粉重的去离子水，室温浸提3-5天，得水酚类提取液，然后浓缩或干燥水酚类提取物；或加入干粉重5-10倍的有机溶剂，在回流或减压回流条件下提取，提取温度为30～80℃，提取时间为4～8小时，或室温浸提3-5天，然后浓缩或干燥得有机溶剂酚类提取物；
C.将菊芋叶片水酚类提取物或有机溶剂酚类提取物按体积比分别用5-10倍的石油醚、氯仿、乙酸乙酯和正丁醇依次分步萃取，氯仿、乙酸乙酯和正丁醇的萃取对象均为上步的萃余相，最后浓缩或干燥得分步酚类提取物；
上述提取用的有机溶剂为甲醇、乙醇、丙酮、苯、二甲苯和乙酸乙酯中的任意一种或几种的混合。
2.菊芋叶片酚类提取物的制备方法，其特征在于制备步骤为：
A．将菊芋的新鲜叶片烘干，粉碎后过40～60目筛，得菊芋叶干粉；
B．取菊芋叶干粉，加入5-10倍干粉重的去离子水，室温提取3-5天，得水酚类提取液，然后浓缩或干燥水酚类提取物；或加入干粉重5-10倍的有机溶剂，在回流或减压回流条件下提取，提取温度为30～80℃，提取时间为4～8小时，或浸提3-5天，然后浓缩或干燥得有机溶剂酚类提取物；
C.将菊芋叶片水酚类提取物或有机溶剂酚类提取物按质量比分别用5-10倍的石油醚、氯仿、乙酸乙酯和正丁醇依次分步萃取，氯仿、乙酸乙酯和正丁醇的萃取对象均为上步的萃余相，最后浓缩或干燥得分步酚类提取物；
上述提取用的有机溶剂为甲醇、乙醇、丙酮、苯、二甲苯和乙酸乙酯中的任意一种或几种的混合。
3.菊芋叶片酚类提取物的制备方法，其特征在于制备步骤为：
A．将菊芋的新鲜叶片烘干，粉碎后过40～60目筛，得菊芋叶干粉；
B．取菊芋叶干粉，加入干粉重5-10倍的乙醇，在减压回流条件下提取，压力范围为：-0.08MPa～-0.09MPa，提取温度为30～60℃，提取时间为4～8小时，然后浓缩或干燥得有机溶剂酚类提取物；
C.将菊芋叶片有机溶剂酚类提取物按质量比分别用5-10倍的石油醚、氯仿、乙酸乙酯和正丁醇依次分步萃取，氯仿、乙酸乙酯和正丁醇的萃取对象均为上步的萃余相，最后浓缩或干燥得正丁醇酚类提取物。
4.权利要求1所述菊芋叶片酚类提取物在番茄灰霉病、苹果炭疽病、辣椒疫霉病、小麦纹枯病、小麦赤霉病防治上的应用。
5.根据权利要求4所述菊芋叶片酚类提取物在番茄灰霉病、苹果炭疽病、辣椒疫霉病、小麦纹枯病、小麦赤霉病防治上的应用，其特征在于提取物防治番茄灰霉病的抑制中浓度EC50为1.3-7.6 g/L。
6.根据权利要求4所述菊芋叶片酚类提取物在番茄灰霉病、苹果炭疽病、辣椒疫霉病、小麦纹枯病、小麦赤霉病防治上的应用，其特征在于提取物防治苹果炭疽病的抑制中浓度EC50为1.9-3.4 g/L。
7.根据权利要求4所述菊芋叶片酚类提取物在番茄灰霉病、苹果炭疽病、辣椒疫霉病、小麦纹枯病、小麦赤霉病防治上的应用，其特征在于提取物防治辣椒疫霉病的抑制中浓度EC50为0.8-2.6 g/L。
8.根据权利要求4所述菊芋叶片酚类提取物在番茄灰霉病、苹果炭疽病、辣椒疫霉病、小麦纹枯病防治上的应用，其特征在于提取物防治小麦纹枯病的抑制中浓度EC50为0.2-5.2 g/L。
9.根据权利要求4所述菊芋叶片酚类提取物在番茄灰霉病、苹果炭疽病、辣椒疫霉病、小麦纹枯病、小麦赤霉病防治上的应用，其特征在于防治方法为喷雾、浸泡或涂布菊芋叶片酚类提取物。
CN201310056376.XA 2013-02-22 2013-02-22 菊芋叶片酚类提取物及其制备方法和应用 Expired - Fee Related CN103109873B (zh)

Priority Applications (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CN201310056376.XA CN103109873B (zh) 2013-02-22 2013-02-22 菊芋叶片酚类提取物及其制备方法和应用

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CN201310056376.XA CN103109873B (zh) 2013-02-22 2013-02-22 菊芋叶片酚类提取物及其制备方法和应用

Publications (2)

Publication Number Publication Date
CN103109873A true CN103109873A (zh) 2013-05-22
CN103109873B CN103109873B (zh) 2015-04-29

Family

ID=48408260

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
CN201310056376.XA Expired - Fee Related CN103109873B (zh) 2013-02-22 2013-02-22 菊芋叶片酚类提取物及其制备方法和应用

Country Status (1)

Country Link
CN (1) CN103109873B (zh)

Cited By (4)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN105724441A (zh) * 2016-02-19 2016-07-06 江苏大丰盐土大地农业科技有限公司 一种菊芋叶片二氯甲烷提取物乳化物及其制备方法和应用
CN112136881A (zh) * 2020-09-22 2020-12-29 山东安谱检测科技有限公司 含菊芋提取物的水果保鲜剂及其制备方法
CN112690291A (zh) * 2020-12-23 2021-04-23 山东菊芋农业科技有限公司 一种菊芋根提取物及抑菌活性应用
CN112841229A (zh) * 2021-01-27 2021-05-28 烟台恩倍得化工科技有限公司 一种含有菊芋叶提取液的组合物及其制备方法和应用

Citations (4)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN1883276A (zh) * 2006-07-07 2006-12-27 南京农业大学 菊芋叶片开发的植物源杀菌剂
CN101973882A (zh) * 2010-10-08 2011-02-16 九环菊芋生物产业股份有限公司 一种从菊芋叶中提取绿原酸的方法
CN102146144A (zh) * 2011-03-18 2011-08-10 晨光生物科技集团天津有限公司 一种菊粉的提取精制方法
CN102199641A (zh) * 2011-03-05 2011-09-28 兰州理工大学 从酶解菊芋渣中提取糖的方法

Patent Citations (4)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN1883276A (zh) * 2006-07-07 2006-12-27 南京农业大学 菊芋叶片开发的植物源杀菌剂
CN101973882A (zh) * 2010-10-08 2011-02-16 九环菊芋生物产业股份有限公司 一种从菊芋叶中提取绿原酸的方法
CN102199641A (zh) * 2011-03-05 2011-09-28 兰州理工大学 从酶解菊芋渣中提取糖的方法
CN102146144A (zh) * 2011-03-18 2011-08-10 晨光生物科技集团天津有限公司 一种菊粉的提取精制方法

Non-Patent Citations (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Title
FUJIA CHEN ET AL.: "Phenolics and antifungal activities analysis in industrial crop Jerusalem artichoke (Helianthus tuberosus L.) leaves", 《INDUSTRIAL CROPS AND PRODUCTS》, no. 7, 31 May 2013 (2013-05-31), pages 339 - 345 *
李玉平等: "25 种菊科植物提取物对3 种植物病原菌的药效试验", 《西北农林科技大学学报》, vol. 31, no. 4, 25 August 2003 (2003-08-25), pages 123 - 126 *
李玉平等: "几种菊科植物杀菌活性的初步研究", 《西北农林科技大学学报》, vol. 30, no. 1, 25 February 2002 (2002-02-25), pages 68 - 72 *

Cited By (7)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN105724441A (zh) * 2016-02-19 2016-07-06 江苏大丰盐土大地农业科技有限公司 一种菊芋叶片二氯甲烷提取物乳化物及其制备方法和应用
CN105724441B (zh) * 2016-02-19 2018-08-14 江苏大丰盐土大地农业科技有限公司 一种菊芋叶片二氯甲烷提取物乳化物及其制备方法和应用
CN112136881A (zh) * 2020-09-22 2020-12-29 山东安谱检测科技有限公司 含菊芋提取物的水果保鲜剂及其制备方法
CN112690291A (zh) * 2020-12-23 2021-04-23 山东菊芋农业科技有限公司 一种菊芋根提取物及抑菌活性应用
CN112690291B (zh) * 2020-12-23 2022-03-18 山东菊芋农业科技有限公司 一种菊芋根提取物及抑菌活性应用
CN112841229A (zh) * 2021-01-27 2021-05-28 烟台恩倍得化工科技有限公司 一种含有菊芋叶提取液的组合物及其制备方法和应用
CN112841229B (zh) * 2021-01-27 2021-12-28 烟台恩倍得化工科技有限公司 一种含有菊芋叶提取液的组合物及其制备方法和应用

Also Published As

Publication number Publication date
CN103109873B (zh) 2015-04-29

Similar Documents

Publication Publication Date Title
Amini et al. Antifungal activity of three medicinal plant essential oils against some phytopathogenic fungi
Suleiman Fungitoxic activity of neem and pawpaw leaves extracts on Alternaria solani, causal organism of yam rots
CN106615085A (zh) 一种微生物、植物源复合果蔬保鲜剂
Brenes et al. Olive glutaraldehyde-like compounds against plant pathogenic bacteria and fungi
San Aye et al. Effect of some plant extracts on Rhizoctonia spp. and Sclerotium hydrophilum
CN103238634B (zh) 苋菜在植物病害防治中的应用
CN102812972B (zh) 防治苹果树腐烂病的植物提取物组合及制备方法
CN102827790B (zh) 一种枯草芽孢杆菌菌株a97、菌剂及制备方法和应用
CN103109873B (zh) 菊芋叶片酚类提取物及其制备方法和应用
Leontopoulos et al. Potential use of polyphenolic compounds obtained from olive mill waste waters on plant pathogens and plant parasitic nematodes
Baral et al. Biological and chemical assessment of water hyacinth (Eichhornia crassipes (mart.) Solms.) of Phewa Lake, Nepal
Tiwari et al. Allelopathic impact of cyanobacteria on pathogenic fungi
CN104472552A (zh) 一种黄粉虫提取物及其分离方法和应用
Hashem et al. Impact of some safe agricultural treatments on insect pests, vascular wilt disease management and Roselle (Hibiscus sabdariffa L.) productivity under Siwa Oasis conditions
CN102388925B (zh) 一种防治烟草青枯病的植物源杀菌剂
Okwu et al. Chemical composition and in vitro antifungal activity screening of seed and leaf extracts from Afromonum melenguata and Monodora myristica against Sclerotium rolfsii of cowpea plant
Zhang et al. Preparation and antimicrobial activity of tannin polymers from Platycarya strobilacea infructescence
Coşoveanu et al. Antifungal activity of macroalgae extracts
Rodino et al. In vitro efficacy of some plant extracts against damping off disease of tomatoes
Ata et al. In vitro Evaluation of Cymbopogon nardus essential oil against leaf disease fungus of narra (Pterocarpus indicus Wild)
Latinović et al. Bryophyte extracts suppress growth of the plant pathogenic fungus Botrytis cinerea
CN105432631A (zh) 一种天然角型呋喃香豆素化合物作为农业杀菌剂的用途
CN101263813B (zh) 千层纸素a作为生物农药在防治农作物病害中的应用
Diba et al. Antifungal activity of Satureja hortensis alcoholic extract against Aspergillus and Candida species
CN110742076A (zh) 甘草苷在防治作物卵菌及真菌病害中的用途

Legal Events

Date Code Title Description
C06 Publication
PB01 Publication
C10 Entry into substantive examination
SE01 Entry into force of request for substantive examination
ASS Succession or assignment of patent right

Owner name: BEIJING BIQING GARDEN GREENING ENGINEERING CO., LT

Free format text: FORMER OWNER: NANJING AGRICULTURAL UNIVERSITY

Effective date: 20140812

C41 Transfer of patent application or patent right or utility model
COR Change of bibliographic data

Free format text: CORRECT: ADDRESS; FROM: 210095 NANJING, JIANGSU PROVINCE TO: 100073 FENGTAI, BEIJING

TA01 Transfer of patent application right

Effective date of registration: 20140812

Address after: 100073 Beijing city Fengtai District Taipingqiao 15 floor 5 floor No. 512

Applicant after: BEIJING BI QING YUAN LANDSCAPING CO., LTD.

Address before: Weigang Xuanwu District of Nanjing Jiangsu province 210095 No. 1

Applicant before: Nanjing Agricultural University

C14 Grant of patent or utility model
GR01 Patent grant
CF01 Termination of patent right due to non-payment of annual fee
CF01 Termination of patent right due to non-payment of annual fee

Granted publication date: 20150429

Termination date: 20210222