CN103103132B - 一种利用磁性絮凝微粒收集藻体的方法与应用 - Google Patents
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Abstract
本发明公开了一种利用磁性絮凝微粒收集藻体的方法与应用。该方法首先将微藻培养液的pH值调至≥7.0，加入磁性絮凝微粒，混合搅拌，得到微藻细胞和磁性絮凝微粒的聚合物；接着通过磁场发生器对微藻细胞和磁性絮凝微粒的聚合物进行磁性吸附，分离得到微藻细胞和磁性絮凝微粒的聚合物。该方法能在6分钟内收集得到藻体，pH适用范围广，磁性絮凝微粒用量少，成本低，而且现场的操作性强，整个过程不会对微藻的组分产生破坏，且整个过程无污染。因此，本发明提供的方法可应用于大规模收集藻体。
Description
技术领域
本发明涉及一种收集藻体的方法，特别涉及一种利用磁性絮凝微粒收集藻体的方法与应用。
背景技术
能源微藻规模培养不仅可以固定太阳能，提供大量可再生能源需要的物质原料，还可以大量吸收二氧化碳，实现节能减排，发展循环经济，具有重要的经济意义，但是作为能源微藻产业链中的主要环节—微藻细胞的收集，一直是微藻生产中的难点之一，也是造成生产成本居高不下的原因之一。因此开发新型的、低耗能、高效率的收集方法成为目前能源微藻产业的研究焦点之一。
聚合氯化铝有较强的架桥吸附性能，在水解过程中，伴随发生凝聚，吸附和沉淀等物理化学过程，结构由形态多变的多元羧基络合物组成，絮凝体成型快，速度快，活性好，过滤性好，适用pH值范围宽，对管道设备无腐蚀性，且有效成份高，便于储存，运输。所以用聚合氯化铝制成的微粒对于微藻的采收有优良的效果，同时这种微粒具有两方面的功能，一方面有絮凝作用，另一方面也有电荷作用，采收效率很高。
目前常用的采收方法有下面几种：1）沉降法收集，利用藻细胞自身重力进行自然沉降和收集，该法成本较低但效率也低；2）离心法和泡载法收集，该法能耗较大，成本较高；3）过滤法收集，由于微藻体积小，一般滤纸很难过滤，采用超滤法会由于藻液的沉积而堵塞滤孔，过滤难以持续进行下去；4）疏水法是利用藻类疏水性并相互作用的原理收集藻细胞，但这种方法只对高盐浓度中的藻液适用，对淡水培养的藻液效果较差，所以不具有普遍性；5）电泳法在变压和整流过程中有电能损耗，所以现有的电泳法采收微藻能耗巨大，很难真正应用于工业大规模的采收；6）絮凝法收集耗时久，并且收集后的藻泥较为松散，占用较大的体积。
发明内容
本发明的首要目的在于克服现有技术的缺点与不足，提供一种利用磁性絮凝微粒收集藻体的方法。
本发明的另一目的在于提供所述的利用磁性絮凝微粒收集藻体的方法的应用。
本发明的目的通过下述技术方案实现：一种利用磁性絮凝微粒收集藻体的方法，包含以下步骤：
（1）调节微藻培养液pH≥7.0，加入磁性絮凝微粒，混合搅拌，得到微藻细胞和磁性絮凝微粒的聚合物；
（2）通过磁场发生器对微藻细胞和磁性絮凝微粒的聚合物进行磁性吸附，分离得到微藻细胞和磁性絮凝微粒的聚合物；
步骤（1）所述的微藻优选为蛋白核小球藻和斜生栅藻；
步骤（1）所述的pH值优选通过氢氧化钠或盐酸调节；
步骤（1）所述的磁性絮凝微粒通过包含以下步骤的方法得到：
①将四氧化三铁纳米颗粒分散到含有壳聚糖的醋酸溶液中，调节pH值至4.0～6.0，超声分散；
②将聚合氯化铝溶液加热至70℃，一边搅拌聚合氯化铝溶液一边往其中加入步骤①得到的溶液，反应，接着冷却；调节溶液的pH值为4.0，得到磁性絮凝微粒，即目标产物；其中，四氧化三铁纳米颗粒、壳聚糖和聚合氯化铝按质量比6：2：3配比；
步骤①所述的含有壳聚糖的醋酸溶液优选通过以下方法制备得到：在体积百分比1%的醋酸溶液中加入壳聚糖，溶解后得到；
步骤①所述的壳聚糖分子量取值优选为20万；
步骤①所述的超声分散的条件优选为30kHz频率，分散30min；
步骤②中所述的搅拌的速度优选为300～400r/min；
步骤②中所述的反应的时间优选为60min；
步骤（1）所述的磁性絮凝微粒的用量优选为：低生物量微藻的分离：微藻培养液中微藻生物量＜108cell/ml，每升微藻培养中使用的磁性絮凝微粒为0.25g；高生物量微藻的分离：微藻培养液中微藻生物量≥108cell/ml，每升微藻培养中使用的磁性絮凝微粒为0.60g；
所述的微藻生物量优选通过如下方法测定得到：通过分光光度计测定藻细胞样品的最大吸收波长，不同藻液浓度的OD值对应不同藻液浓度的细胞数，建立OD值与微藻生物量的相关曲线，通过测定OD值计算出微藻生物量；
步骤（1）中所述的混合搅拌的时间优选为1～2min；
步骤（2）中所述的磁场发生器优选为电磁铁装置；其通过改变电压或者电流的大小就可以改变磁场的强度；
所述的电磁铁装置的操作参数优选为磁场强度为0.4T。
所述的利用磁性絮凝微粒收集藻体的方法适用于大规模收集藻体。
本发明相对于现有技术具有如下的优点及效果：
（1）本发明提供的利用磁性絮凝微粒收集藻体的方法收集藻体的速度快，能在6分钟内收集得到藻体，所收集的藻体的量（湿重）为：低生物量（微藻细胞数5×107cell/ml）：蛋白核小球藻是0.29g/L，斜生栅藻是0.28g/L；高生物量（微藻细胞数3×109cell/ml）：蛋白核小球藻是0.74g/L，斜生栅藻是0.68g/L。
（2）本发明提供的利用磁性絮凝微粒收集藻体的方法适用范围广，对含有藻体的液体在pH值≥7.0时，均可快速收集到藻体。
（3）本发明提供的利用磁性絮凝微粒收集藻体的方法，所使用的磁性絮凝微粒用量少，成本低。
（4）本发明在污水处理应用中也有较好的效果，污水处理后水体的pH在7.0左右，所以无需进行pH调节即可采收，比较省时省料。
（5）现场的操作性强，整个过程不会对微藻的组分产生破坏，且整个过程无污染。
附图说明
图1是蛋白核小球藻OD值与细胞密度的线性关系图。
图2是栅藻OD值与细胞密度的线性关系图。
图3是磁性絮凝微粒剂量对蛋白核小球藻和斜生栅藻采收回收率影响效果图。
图4是磁性絮凝微粒剂量对蛋白核小球藻和斜生栅藻采收凝集率影响效果图。
图5是磁性絮凝微粒剂量对蛋白核小球藻和斜生栅藻采收沉降速率影响效果图。
图6是pH对磁性絮凝微粒采收回收率影响效果图。
图7是pH对磁性絮凝微粒采收凝集率影响效果图。
图8是pH对磁性絮凝微粒采收沉降速率影响效果图。
具体实施方式
下面结合实施例及附图对本发明作进一步详细的描述，但本发明的实施方式不限于此。
具体实施方式中的测定方法：
（1）微藻的最大吸收波长：取微藻藻液3.5ml放入比色皿中，然后通过分光光度计扫描，波长范围为200nm～700nm。
（2）测定指标：
①回收率：
ODa---------原藻液液面下10cm的初始OD值；
ODb---------藻沉降后藻液液面下10cm的OD值；
回收率越大，采收效率越高。
②凝集率：F=V0/V1
V0---------藻沉降后藻泥的体积；
V1---------原藻液的总体积；
凝集率越小，说明藻细胞越密实，采收效果越好。
③沉降速率：测定在藻液液面下10cm处，获得OD值降低为原来的50％时所需的时间。V=S/T
S---------藻液液面下10cm处，即测定藻液液面下高度10cm；
T---------藻液液面下10cm处的OD值降低为原来的50％时所需的时间；
沉降速率越大，采收所用时间越短。
实施例1
回收蛋白核小球藻：
（1）磁性絮凝微粒的制备：称取0.3g Fe3O4纳米颗粒（20nm，阿拉丁公司，下同），将其分散到25ml含有壳聚糖的醋酸溶液（醋酸溶液的浓度为体积百分比1%，分子量为20万的壳聚糖的终浓度为4mg/ml）中。通过水浴加热方式加热50mL聚合氯化铝（广州齐云生物技术公司，下同）溶液（浓度是3mg/ml），待水浴温度达到预设的反应温度70℃后，在搅拌条件下缓慢加入上述25ml含有Fe3O4纳米颗粒的壳聚糖溶液，反应60min后，自然冷却至室温，调节溶液的pH值为4.0，得到磁性絮凝微粒；其中四氧化三铁纳米颗粒、壳聚糖和聚合氯化铝质量比为6：2：3。
（2）微藻培养液中蛋白核小球藻生物量的确定：通过分光光度计测定蛋白核小球藻样品【藻种由暨南大学赤潮与海洋生物学研究中心藻种室提供（已在文献“苯丙醇类抗生素对蛋白核小球藻生长的影响.暨南大学学报（自然科学版），2012（03）”公开），用经过改良的BG11培养基，在25℃，光照强度为1500μmol·m-2·s-1，光照条件12L:12D的培养箱培养】的最大吸收波长为540nm。用分光光度计测定其在540nm下的吸光度（OD540），重复3次，取平均值；同时采用细胞计数板计数获得细胞密度，重复3次，取平均值；建立OD值与蛋白核小球藻生物量的相关曲线，如图1所示。结果显示二者具有良好的线性关系。
改良的BG11培养基的配制过程如下：①首先配制母液：10g硝酸钠+400ml水得到硝酸钠母液，1g二水氯化钙+400ml水得到氯化钙母液，3g七水硫酸镁+400ml水得到硫酸镁溶液，3g磷酸氢二钾+400ml水得到磷酸氢二钾溶液，7g磷酸二氢钾+400ml水得到磷酸二氢钾母液，1g氯化钠+400ml水得到氯化钠母液；②步骤①配制的六种母液各10ml（共60ml）+940ml水，得到溶液A；③在100ml水中加入0.1g维生素B1，15×10-6g维生素B12和25×10-6g生物素，得到溶液B；④在1升水中先加入0.75g Na2EDTA，完全溶解再加：FeCl3.6H2O97mg、MnCl2.4H2O41mg、ZnCl25mg、CoCl2.6H2O2mg、Na2MoO4.2H2O4mg，得到溶液C；⑤1000ml溶液A+3ml溶液B和6ml溶液C，得到改良的BG11培养基。
（3）磁性絮凝微粒采收蛋白核小球藻
①在低生物量时的采收
在蛋白核小球藻培养的初始期（生物量是5×107cell/ml），取1L的蛋白核小球藻培养液于量筒中，调节pH值至7.0。然后加入0.250g实施例1制备的磁性絮凝微粒，混合搅拌均匀，观察到聚合物的生成，立刻放在电磁铁（磁场强度为0.4T）上进行采收，重复3次，取平均值。
测定结果可知，蛋白核小球藻的回收率高达95.12%（如图3和图6所示）；蛋白核小球藻的凝集率为0.044（如图4和图7所示）；蛋白核小球藻的沉降速率为1.6cm/min（如图5和图8所示），采收时间为10cm÷1.6cm/min=6.25min。
②在高生物量时的采收
蛋白核小球藻培养达到高生物量（生物量是3×109cell/ml）时，取1L的微藻培养液于量筒中，调节pH值至7.0。然后加入0.600g实施例1制备的磁性絮凝微粒，混合搅拌均匀，观察到聚合物的生成，立刻放在电磁铁（磁场强度为0.4T）上进行采收，重复3次，取平均值。
虽然高生物量的微藻难于采收，但是本发明提供的方法对于蛋白核小球藻处于高生物量时的回收率也高，蛋白核小球藻的回收率可达到94.40%（如图3和图6所示）；蛋白核小球藻的凝集率为0.100（如图4和图7所示）；蛋白核小球藻的沉降速率达到1.66cm/min（如图5和图8所示），采收时间为6.02min。
实施例2
回收斜生栅藻：
（1）磁性絮凝微粒的制备和微藻培养液中微藻生物量的确定方法同实施例1。
（2）斜生栅藻生物量的确定，方法同实施例1步骤（2），结果如图2所示，OD值与斜生栅藻生物量具有良好的线性关系。
（3）磁性絮凝微粒采收斜生栅藻
①在低生物量时的采收
在斜生栅藻【藻种由暨南大学赤潮与海洋生物学研究中心藻种室提供（已在文献“叔丁基对羟基茴香醚和诺氟沙星对水生生物的影响.生态科学，2007（1）”公开），用经过改良的BG11培养基，在25℃，光照强度为1500μmol·m-2·s-1，光照条件12L:12D的培养箱培养】培养的初始期（生物量是5×107cell/ml），取1L的斜生栅藻培养液于量筒中，调节pH值至7.0。然后加入0.250g实施例1制备的磁性絮凝微粒，混合搅拌均匀，观察到聚合物的生成，立刻放在电磁铁（磁场强度为0.4T）上进行采收，重复3次，取平均值。
测定结果可知，斜生栅藻的回收率高达94.23%（如图3和图6所示）；斜生栅藻的凝集率为0.042（如图4和图7所示）；斜生栅藻的沉降速率为1.59cm/min（如图5和图8所示），采收时间为6.28min。
②在高生物量时的采收
斜生栅藻培养达到高生物量（斜生栅藻生物量是3×109cell/ml）时，取1L的斜生栅藻培养液于量筒中，调节pH值至7.0。然后加入0.600g实施例1制备的磁性絮凝微粒，混合搅拌均匀，观察到聚合物的生成，立刻放在电磁铁（磁场强度为0.4T）上进行采收，重复3次，取平均值。
虽然高生物量的斜生栅藻难于采收，但是本发明提供的方法对高密度的斜生栅藻也有很高的回收率，达95.40%（如图3和图6所示）；斜生栅藻的凝集率为0.105（如图4和图7所示）；沉降速率达1.65cm/min（如图5和图8所示），采收时间为6.06min。
实施例3
（1）在低生物量时的采收效果测定：
在两种微藻培养的初始期（含有蛋白核小球藻的培养液同实施例1，微藻生物量为5×107cell/ml，含有斜生栅藻的培养液同实施例2，微藻生物量为5×107cell/ml,并进行采收，取1L的藻液（pH为7.0）于量筒中，然后分别向量筒中加入0、0.175、0.250、0.325、0.400、0.550、0.600和0.850g实施例1制备的磁性絮凝微粒，做三个重复，混合搅拌均匀，观察到聚合物的生成，立刻放在电磁铁（磁场强度为0.4T）上进行采收。
测定结果可知：不加微粒时，微藻的自然沉降回收率为10.02%，加入微粒后，微藻的回收率大大提高，当微粒剂量为0.250g/L时，微粒对微藻的作用最为明显，蛋白核小球藻回收率达95.12%，斜生栅藻回收率达94.23%（如图3所示）。
微藻自然沉降凝集率很低，在烧杯底部有很少的藻沉降，加入微粒后，微粒对藻的吸引力增加，当微粒剂量为0.250g/L时，蛋白核小球藻凝集率为0.044，斜生栅藻凝集率为0.042。随着微粒量的加入，最后沉降在烧杯底部的量也在增加，所以凝集率也在增大（如图4所示）。
微藻的自然沉降速率很小，当加入微粒后，微藻沉降速率明显增大，微粒量加入的不同，与藻结合的时间也不同，导致沉降的速率不同。其中加入0.250g/L沉降速率很快，蛋白核小球藻沉降速率都在1.60cm/min左右，斜生栅藻沉降速率都在1.59cm/min左右（如图5所示）。
（2）在高生物量时的采收
在两种微藻培养到高生物量（含有蛋白核小球藻的培养液同实施例1，微藻生物量为3×109cell/ml，含有斜生栅藻的培养液同实施例2，微藻生物量为3×109cell/ml）时进行采收，此时藻液pH为7.0，采收方法同步骤（1）低生物量的采收方法。
测定结果可知：不加微粒时，微藻的自然沉降回收率为12.026%，加入微粒后，微藻的回收率大大提高，当微粒剂量为0.600g/L时，微粒对微藻的作用最为明显，蛋白核小球藻回收率达到94.40%，斜生栅藻回收率达到95.40%（如图3所示）。
微藻自然沉降凝集率很低，在烧杯底部有很少的微藻沉降，加入微粒后，微粒对藻的吸引力增加，当微粒剂量为0.600g/L时，蛋白核小球藻凝集率为0.100，斜生栅藻凝集率为0.105。随着微藻生物量增加，最后沉积在底部的藻泥也在增加（如图4所示）。
微藻的自然沉降速率很小，向藻液加入0.600g/L的微粒量，微藻的沉降速率最大，蛋白核小球藻达到1.66cm/min，斜生栅藻为1.65cm/min（如图5所示）。
实施例4
关于pH对磁性絮凝微粒加入微藻的影响分析
（1）在低生物量时的采收
在两种微藻培养的初始期（含有蛋白核小球藻的培养液同实施例1，微藻生物量为5×107cell/ml，含有斜生栅藻的培养液同实施例2，微藻生物量为5×107cell/ml，并进行采收，取1L的藻液于量筒中并加入0.250g实施例1制备的磁性絮凝微粒，然后用盐酸和氢氧化钠调节藻液的pH，范围是4.0～12.0，做三个重复，混合搅拌均匀，观察到聚合物的生成，立刻放在电磁铁（磁场强度为0.4T）上进行采收。
测定结果可知：当pH≥7.0时，两种微藻的回收率都很高，达到95%以上，原因可能是在此pH范围内，微粒和藻细胞能行成稳定的电位，有利于两者的结合，从而加快微藻的沉降。其中当pH=10.0时，蛋白核小球藻的回收率最大，为95.30%，当pH=8.0时，斜生栅藻的回收率最大，为95.26%；两种藻凝集率变化不大，都在0.042左右（如图6和图7所示）。
在pH≥7.0，由于微粒和藻细胞能形成稳定的絮凝团，所以沉降速率很快，其中当pH=11.0时，蛋白核小球藻沉降速率达到1.52cm/min，当pH=10.0时，斜生栅藻沉降速率达到1.50cm/min（如图8所示）。
综上所述，当微粒加入量为0.250g，pH≥7.0时，微藻的采收效果很好。
（2）在高生物量时的采收
在两种微藻培养到高生物量（含有蛋白核小球藻的培养液同实施例1，微藻生物量为3×109cell/ml，含有斜生栅藻的培养液同实施例2，微藻生物量为3×109cell/ml，并进行采收，取1L的藻液于量筒中并加入0.600g实施例1制备的磁性絮凝微粒，其他条件和步骤（1）相同。
测定结果可知：当pH≥7.0，两种微藻的回收率都很高，都达到94%左右，当pH=8.0时，蛋白核小球藻的回收率为94.66%，当pH=9.0时，斜生栅藻的回收率为94.51%；两种微藻的凝集率变化不大，都在0.10左右（如图6和图7所示）。
当pH≥7.0时，由于微粒和藻细胞能形成稳定的絮凝团，所以沉降速率很快，其中蛋白核小球藻和斜生栅藻的沉降速率都可达到1.67cm/min左右，（如图8所示）。
综上所述，对于采收高生物量的微藻，微粒加入量为0.600g，pH≥7.0时，微藻的采收效果都很好。
对比实施例1
（1）改变微粒组分的比例进行采收效果对比。在对比实验中，四氧化三铁纳米颗粒、壳聚糖和聚合氯化铝按质量比为6：5：6方式制备微粒，然后进行下述实验。
（2）微藻采收效果对比实验
①在低生物量时的采收
在两种微藻培养的初始期（含有蛋白核小球藻的培养液同实施例1，微藻生物量为5×107cell/ml，含有斜生栅藻的培养液同实施例2，微藻生物量为5×107cell/ml），两种微藻培养液各取1L于不同的量筒中，调节pH值至7.0。然后加入0.250g步骤（1）制备的微粒，混合搅拌均匀，观察到聚合物的生成，立刻放在电磁铁（磁场强度为0.4T）上进行采收，重复3次，取平均值。
测定结果可知，蛋白核小球藻回收率为66.38%，低于实施例1的蛋白核小球藻回收率95.12%，斜生栅藻的回收率为55.32%；低于实施例2的斜生栅藻回收率94.23%；蛋白核小球藻的凝集率为0.055，高于实施例1的蛋白核小球藻凝集率0.044，斜生栅藻的凝集率为0.056，高于实施例2的斜生栅藻凝集率0.043；蛋白核小球藻的沉降速率为0.421cm/min，低于实施例1的蛋白核小球藻沉降速率1.6cm/min，斜生栅藻的沉降速率为0.474cm/min，低于实施例2的斜生栅藻沉降速率1.59cm/min。
②高生物量时的采收
在两种微藻培养到高生物量（含有蛋白核小球藻的培养液同实施例1，微藻生物量为3×109cell/ml，含有斜生栅藻的培养液同实施例2，微藻生物量为1×109cell/ml）时，两种微藻培养液各取1L于不同的量筒中，调节pH值至7.0。然后加入0.600g步骤（1）制备的微粒，混合搅拌均匀，观察到聚合物的生成，立刻放在电磁铁（磁场强度为0.4T）上进行采收，重复3次，取平均值。
测定结果可知，蛋白核小球藻回收率为60.31%，低于实施例1的蛋白核小球藻回收率94.40%，斜生栅藻的回收率为60.01%，低于实施例2的斜生栅藻回收率95.40%；蛋白核小球藻的凝集率为0.105，略高于实施例1的蛋白核小球藻凝集率0.100，斜生栅藻的凝集率为0.108，略高于实施例2的斜生栅藻凝集率0.105；蛋白核小球藻的沉降速率为0.621cm/min，远低于实施例1的蛋白核小球藻沉降速率1.66cm/min，斜生栅藻的沉降速率为0.655cm/min，远低于实施例2的斜生栅藻沉降速率1.65cm/min。
通过以上实施例和对比实施例可以看出，本发明提供的磁性絮凝微粒能有效收集微藻，实现了快速高效回收，并且微粒制备方法简单，适用于工业规模化采收。
上述实施例为本发明较佳的实施方式，但本发明的实施方式并不受上述实施例的限制，其他的任何未背离本发明的精神实质与原理下所作的改变、修饰、替代、组合、简化，均应为等效的置换方式，都包含在本发明的保护范围之内。
Claims (9)
1.一种利用磁性絮凝微粒收集藻体的方法，其特征在于包含以下步骤：
(1)调节微藻培养液pH≥7.0，加入磁性絮凝微粒，混合搅拌，得到微藻细胞和磁性絮凝微粒的聚合物；
(2)通过磁场发生器对微藻细胞和磁性絮凝微粒的聚合物进行磁性吸附，分离得到微藻细胞和磁性絮凝微粒的聚合物；
所述的磁性絮凝微粒通过以下步骤制备得到：
①将四氧化三铁纳米颗粒分散到含有壳聚糖的醋酸溶液中，调节pH值至4.0～6.0，超声分散；
②将聚合氯化铝溶液加热至70℃，一边搅拌聚合氯化铝溶液一边往其中加入步骤①得到的溶液，反应，接着冷却；调节溶液的pH值为4.0，得到磁性絮凝微粒；其中，四氧化三铁纳米颗粒、壳聚糖和聚合氯化铝按质量比6：2：3配比。
2.根据权利要求1所述的利用磁性絮凝微粒收集藻体的方法，其特征在于：所述的微藻为蛋白核小球藻或斜生栅藻。
3.根据权利要求1所述的利用磁性絮凝微粒收集藻体的方法，其特征在于：所述的含有壳聚糖的醋酸溶液通过以下方法制备得到：在体积百分比1％的醋酸溶液中加入壳聚糖，溶解后得到。
4.根据权利要求1所述的利用磁性絮凝微粒收集藻体的方法，其特征在于：步骤①中所述的超声分散的条件为30kHz分散30min；
步骤②中所述的搅拌的速度为300～400r/min；
步骤②中所述的反应的时间为60min。
5.根据权利要求1所述的利用磁性絮凝微粒收集藻体的方法，其特征在于：所述的磁性絮凝微粒的用量为：低生物量微藻的分离：微藻培养液中微藻生物量＜108cell/ml，每升微藻培养中使用的磁性絮凝微粒为0.25g；高生物量微藻的分离：微藻培养液中微藻生物量≥108cell/ml，每升微藻培养中使用的磁性絮凝微粒为0.6g。
6.根据权利要求5所述的利用磁性絮凝微粒收集藻体的方法，其特征在于：所述的微藻生物量通过如下方法测定得到：通过分光光度计测定藻细胞样品的最大吸收波长，不同藻液浓度的OD值对应不同藻液浓度的细胞数，建立OD值与微藻生物量的相关曲线，通过测定OD值计算出微藻生物量。
7.根据权利要求1所述的利用磁性絮凝微粒收集藻体的方法，其特征在于：步骤(1)中所述的混合搅拌的时间为1～2min。
8.根据权利要求1所述的利用磁性絮凝微粒收集藻体的方法，其特征在于：步骤(2)中所述的磁场发生器为电磁铁装置；
所述的电磁铁装置的操作参数为磁场强度为0.4T。
9.权利要求1所述的利用磁性絮凝微粒收集藻体的方法的应用，其特征在于：所述的利用磁性絮凝微粒收集藻体的方法应用于大规模收集藻体。
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