CN103097446B

CN103097446B - 基于氰基丙烯酸酯以及包括苯妥英的5,5-二取代乙内酰脲的伤口愈合组合物

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Publication number: CN103097446B
Application number: CN201180039090.XA
Authority: CN
Inventors: 张生; 大拉斐尔·瑞兹
Original assignee: Adhezion Biomedical LLC
Current assignee: Adhezion Biomedical LLC
Priority date: 2010-08-11
Filing date: 2011-08-09
Publication date: 2015-06-24
Anticipated expiration: 2031-08-09
Also published as: WO2012021521A1; US20150071869A1; KR101515872B1; US20130136715A1; US8287901B2; US20120039838A1; CN103097446A; US8894986B2; EP2603552B1; US20150320905A1; US9101683B2; KR20130061717A; EP2603552A4; EP2603552A1; US9533071B2

Abstract

本发明涉及单体粘合剂组合物，其包含：稳定化的可聚合单体，例如1,1-二取代单体，1,1-二取代单体包括氰基丙烯酸酯；以及伤口愈合剂，其中所述伤口愈合剂是5,5-二取代乙内酰脲，5,5-二取代乙内酰脲包括苯妥英。本发明还涉及制备所述组合物的方法。

Description

基于氰基丙烯酸酯以及包括苯妥英的5,5-二取代乙内酰脲的伤口愈合组合物

技术领域

本发明涉及一种稳定的可灭菌的液体粘合剂组合物以及制备工业和医疗用途的这种组合物的方法，所述组合物含有伤口愈合加速剂5,5-二取代乙内酰脲，5,5-二取代乙内酰脲包括苯妥英。

背景技术

伤口护理一直是医疗专业人员面临的最具挑战性的任务之一。

在过去，已开发出很多用于局部伤口护理的伤口愈合剂和方法。一些传统的伤口愈合剂，尽管现在不再广泛应用，但在某些临床情形中仍然有利于伤口处理。这样的伤口愈合方法包括聚维酮碘、银以及聚六亚甲基双胍的液体或半固体制剂，所述制剂被局部使用或者被掺入到敷料中以促进伤口愈合。其它用于伤口愈合的传统方法包括生理盐水溶液、硝酸银软膏和敷料，所述敷料包括纱布、棉布、毛织品、以及合成或天然的绷带。

大多数传统的伤口愈合方法已经被现代的伤口护理技术所取代，而且越来越多的研究致力于开发促进伤口愈合的方法和试剂。

已经证明局部施用生物活性化合物是促进伤口愈合的有效方法。这些活性化合物包括生长因子、有丝分裂原和激素。然而，这类应用是受限的，因为难以调节活性化合物的剂量，并且所述化合物迅速降解。例如，Carpenter等的美国专利申请公开号20060188486公开了伤口愈合聚合物组合物，所述组合物以受控速率释放伤口愈合剂。所公开的伤口愈合剂包括蛋白质类生长因子、血管内皮生长因子、抗增生剂、抗微生物剂、抗炎剂、组织移植物以及伤口愈合细胞。

在促进伤口愈合的现代方法中最常用的技术之一是施用单体和聚合物组织粘合剂。被包括在这些粘合剂中的是1,1-二取代乙烯单体和聚合物，例如α-氰基丙烯酸酯。自从发现了这类单体和聚合物的粘合性之后，由于它们的固化速度、由此形成的粘合的强度及其相对的易用性，它们已被广泛应用。这些特征使得α-氰基丙烯酸酯粘合剂甚至成为医疗领域之外的多种应用的首要选择，包括在塑料、橡胶、玻璃、金属和木材粘合中的工业和家庭应用。

组织粘合剂作为局部伤口的愈合剂已被广泛研究。与缝合以及其它伤口闭合剂相比，氰基丙烯酸酯粘合剂表现出相似的美容结果，但更重要的是，其提高了伤口闭合的速率（Quinn等JAMA，277，1527-30，1997）。还发现，就美容外观而言，氰基丙烯酸酯组织粘合剂可以是用于面部裂口的皮肤闭合的优选方法（Simon等J.Emerg.Med.16，185，1998）。除了更快的伤口闭合以及更好的美容效果之外，氰基丙烯酸酯粘合剂与缝合或钉合相比的优点还包括更低的感染率。最近经FDA批准且可商购的局部皮肤粘合剂2-辛基氰基丙烯酸酯已显示出可能有利于伤口愈合的理想的水蒸汽透过率（WVTR）。（局部皮肤粘合剂由Adhezion Biomedical，LLC，Wyomissing，Pa.制造）

尽管尚未理解该特征的缘由，但已观察到氰基丙烯酸酯组合物固有地具有一定的抗微生物活性。特别是，人们相信氰基丙烯酸酯组合物本身防止某些类型的微生物在所述组合物中生长。但由于该性质是有限的，因此，为了进一步使用氰基丙烯酸酯粘合剂来增强伤口愈合，已将不同的伤口愈合剂掺入到氰基丙烯酸酯组织粘合剂中。例如，Narang的美国专利申请公开号20050042266以及Greff等的美国专利号5，684,042、5,762,919、5,811,091和5,783,177公开了可将有效量的抗微生物剂掺入到氰基丙烯酸酯粘合剂组合物中以促进伤口愈合。

Askill等的美国专利号6,214,332公开了抗微生物的氰基丙烯酸酯组合物，所述组合物还可以包含药物，例如生长因子如表皮生长因子、血小板衍生生长因子、转化生长因子、角化细胞生长因子和成纤维细胞生长因子。然而，作为一般性问题，将药物掺入到氰基丙烯酸酯粘合剂中一直是一个具有挑战性的任务。大多数药物不溶于氰基丙烯酸酯。此外，就算不是大多数也是很多的药物通过作为抑制剂或者作为引发剂起作用而对单体组合物的聚合速率产生负面影响。因此可能防止氰基丙烯酸酯的固化（聚合），或者引起过早聚合，导致不希望的对氰基丙烯酸酯储存稳定性的降低或破坏。另外，掺入药物也可能影响组合物的粘度以及氰基丙烯酸酯在固化时间和粘合强度方面得到的性能。此外，由于蛋白质与氰基丙烯酸酯的结合，基于蛋白质的药物可能失去活性，正如Greff等的美国专利号5,684,042所公开的。因此，在促进伤口愈合方面，仍需要更好的方法和组合物。

另一种伤口愈合加速剂是苯妥英。苯妥英指的是二苯基乙内酰脲或5,5-二苯基咪唑烷-2,4-二酮，其最初于1937年作为癫痫患者治疗中有效的抗痉挛药被引入到治疗中。已注意到，苯妥英治疗癫痫发作的常见副作用是齿龈（牙龈）纤维性增生的发展。据信，这种现象的发生是由于苯妥英刺激成纤维细胞的响应性亚群合成更多的量的胶原蛋白。因而从苯妥英对结缔组织的明显的刺激作用得到了苯妥英在伤口愈合中的巨大潜力。

Kelly等的美国专利申请公开号20090022779公开了适合于局部施用到伤口部位的基于凝胶的苯妥英制剂。所公开的组合物含有溶解在凝胶的水性组分中的苯妥英以及截留苯妥英的固体粉末。胶凝剂可以选自藻酸、壳聚糖及其衍生物、和卡波姆。

体内及临床研究已经证明局部的苯妥英提供了作为伤口愈合剂的优点。通过将苯妥英施用于有手术伤口的牙周病患者来使用苯妥英的受控临床试验报道了，苯妥英加速伤口愈合并减轻炎症和疼痛（Shapiro，Exp.Med.Surg.16，41-53，1958）。而且，大量临床研究得出结论：苯妥英疗法对各种伤口类型的愈合具有有利效果，所述伤口包括手术伤口、烧伤、压疮、创伤性伤口、褥疮、静脉淤血性溃疡、和糖尿病溃疡，其中很多为难愈合且慢性的伤口（Naeini等J.Anim.Vet.Adv.12，1537-1545，2008；Talas等Biochem.Pharmacol.57，1085-1094，1999；Bhatia等，Dermatol.Online J.10，5，2004；Scheinfeld Dermatol.Online J.9，6，2003）。据信，苯妥英通过提高对伤口愈合有利的肉芽组织的形成，从而对组织生长具有刺激作用。

除了增强伤口愈合以外，苯妥英还具有抗微生物性质并显示出降低伤口的细菌荷载量，正如由许多临床研究证明的（Pendse等Int.J.Dermatol.32，214-7，1993）。此外，当施用到伤口部位上时，由于其膜稳定性质，局部苯妥英疗法能够缓解局部疼痛从而为患者舒适提供快速缓解。另外，苯妥英能够减轻炎症和伤口渗出。作为伤口愈合剂，苯妥英还有可能加速神经再生。其它优点为：苯妥英是使用安全，成本有效，以及与昂贵的替代物如合成生长因子的混合物相比，容易获得的。

考虑到苯妥英在促进伤口愈合中的确定功效，显然需要一种方法，通过所述方法可以以方便、稳定、有效和可重复的方式将苯妥英有效的伤口愈合性质提供给局部伤口。

对于特别是医疗用途的改进的粘合剂组合物也存在需求，所述组合物含有药物，但是其中粘合剂组合物的性能没有受到损害。

发明内容

本发明提供了在医疗领域中使用的可灭菌的、稳定的、可聚合氰基丙烯酸酯组合物，所述组合物含有5,5-二取代乙内酰脲伤口愈合加速剂，所述5,5-二取代乙内酰脲伤口愈合加速剂包括苯妥英。

本发明人发现了新型组合物，所述组合物将5,5-二取代乙内酰脲伤口愈合加速剂掺入到氰基丙烯酸酯粘合剂中，使得能够在伤口闭合和/或愈合过程期间将加速剂递送和释放到伤口部位氰基丙烯酸酯粘合剂膜和5,5-二取代乙内酰脲二者愈合伤口的理想特性的这种独特的组合，提供了在这之前尚未被经历过的增强的伤口愈合效果以及用于伤口护理的卓越技术。

本发明实现了氰基丙烯酸酯粘合剂和5,5-二取代乙内酰脲二者的组合益处。通过一种化合物5,5-二取代乙内酰脲、尤其是苯妥英的刺激组织生长、抗微生物、麻醉和抗炎的性质，增强了氰基丙烯酸酯的天然抗菌特性及其伤口密封和物理膜屏障性质。

在局部施用到伤口或切口之后，本发明的氰基丙烯酸酯粘合剂固化形成聚合物膜，所述聚合物膜提供了加速剂药物的受控且缓慢的释放。

无菌组合物的生产包括：将稳定化的可聚合单体和伤口愈合剂的均匀溶液置于容器中，将所述容器密封并将容器及混合物灭菌。与现有技术的粘合剂组合物相比，根据本发明生产、包装和灭菌的组合物是稳定的，并具有扩展的功用。

本发明还提供了一种方法，所述方法用于将愈合加速剂均匀地掺入到液体氰基丙烯酸酯单体粘合剂组合物中而不引起这样的粘合剂过早聚合。将愈合加速剂和氰基丙烯酸酯组合物的均匀混合物加热到升高的温度，以及在掺入加速剂之前用理想的稳定剂来稳定氰基丙烯酸酯单体（“预稳定”），这样两种处理的组合产生了稳定和均匀的含5,5-二取代乙内酰脲的氰基丙烯酸酯溶液。得到的含愈合加速剂的氰基丙烯酸酯组合物也可以被灭菌并表现出延长的储存期限。

本发明还提供了用于施用无菌氰基丙烯酸酯粘合剂组合物的试剂盒，所述试剂盒包含涂敷器以及含有伤口愈合加速剂5,5-二取代乙内酰脲的氰基丙烯酸酯制剂。

本发明还提供了一种用于向组织施用本发明的无菌液体伤口愈合氰基丙烯酸酯组合物的方法，以及得到的膜。

具体实施方式

本发明涉及用于伤口处理的制剂和方法。本发明提供了氰基丙烯酸酯单体制剂，其含有伤口愈合加速剂5,5-二取代乙内酰脲，5,5-二取代乙内酰脲包括苯妥英。还提供了一种方法，所述方法用于通过将加速剂和氰基丙烯酸酯单体的均匀混合物加热到轻度升高的温度来将愈合加速剂掺入到氰基丙烯酸酯单体中。用合适量的理想的聚合抑制剂对含有氰基丙烯酸酯单体和愈合加速剂二者的制剂进行预稳定。用合适的灭菌方法对所述制剂进行灭菌，使得含5,5-二取代乙内酰脲的氰基丙烯酸酯制剂可被用在医疗领域中用于包括伤口闭合的伤口处理以及用于改善伤口愈合。根据本发明的优选实施方案，含有5,5-二取代乙内酰脲的无菌氰基丙烯酸酯制剂能够提供至少2年的长期稳定的储存期限。

据信，本发明的组合物适用于多种医疗情形，但应该特别适合于在外科情形中促进手术切口的愈合过程。此外，设想了这种基于氰基丙烯酸酯和5,5-二取代乙内酰脲二者的组合物在处理慢性伤口或那些难愈合的伤口中可以是最有利的。根据本发明，该组合物具有加速剂的伤口愈合活性以及氰基丙烯酸酯的伤口密封能力的效果以及其它已知益处，预期所述组合物将提供整体上改善的伤口愈合。在局部施用到伤口或手术切口之后，液体氰基丙烯酸酯粘合剂固化形成具有组织生长刺激性、抗微生物性和机械屏障性质的聚合物膜。通过将5,5-二取代乙内酰脲掺入到氰基丙烯酸酯聚合物内，能够实现加速剂药物的受控且缓慢的释放。

所述伤口愈合剂或加速剂是如下式I中示出的5,5-二取代乙内酰脲，其中R为任何烷基或芳基，优选为未取代或取代的苯基。每个R取代基可以相同或不同。

式I

优选的加速剂为5,5-二苯基乙内酰脲，也称作苯妥英、5,5-二苯基-2,4-咪唑烷二酮、5,5-二苯基-咪唑烷-2,4-二酮、phanantin、dintoin、以及dillantin。苯妥英的结构显示在式II中。

式II

用于在医疗应用中协助或加速伤口愈合的苯妥英的理想特征在于它是多功能的，或者能够同时提供一种以上的益处。如之前所讨论的，其功能包括：起到刺激组织生长的作用、作为镇痛剂缓解局部疼痛、作为减少伤口渗出物或流出物的试剂、以及作为抗炎剂减轻炎症。另外，它还起到抗微生物剂的作用，降低伤口和/或组织的细菌荷载量。抗微生物指的是它消灭包括细菌、真菌、病毒和微生物孢子在内的微生物，防止它们的发展及致病作用。

根据本发明，将有效量的伤口愈合促进剂掺入到预稳定的液体单体氰基丙烯酸酯粘合剂组合物中以形成均匀的液体粘合剂产物。将固体5,5-二取代乙内酰脲添加到液体氰基丙烯酸酯单体中，并在轻度升高的温度下在一段时间内搅拌该不均匀混合物以形成均匀混合物，因为它们在室温下不溶于氰基丙烯酸酯单体。

合适的温度范围从约40°C至约100°C，优选从约50°C至约90°C，更优选从约60°C至约90°C，甚至更优选从约70°C至约80°C。在该升高的温度下连续搅拌之后，氰基丙烯酸酯单体和伤口愈合加速剂的混合物在约1至2小时内变为均匀溶液。标准的混合设备及技术都是合适的。包括苯妥英在内的5,5-二取代乙内酰脲可以容易地从主要的化学品分销商获得。

根据本发明的实施方案，被掺入到氰基丙烯酸酯组合物中的5,5-二取代乙内酰脲的量根据氰基丙烯酸酯的类型而变化。不受具体理论的限制，据信，氰基丙烯酸酯侧基越短，则越多的伤口愈合加速剂能够被溶解到含所述氰基丙烯酸酯的溶液中。当与2-辛基氰基丙烯酸酯混合时，一般而言，苯妥英的存在量为约0.05%至约0.5%，优选为约0.05%至约0.3%，更优选为约0.1%至0.2%。（基于溶液中所有组分的总重量）。当与正丁基氰基丙烯酸酯单体混合时，苯妥英的存在量为约0.1%至约1%，优选为约0.2%至约0.8%，更优选为约0.3%至约0.5%。单体和聚合物领域的技术人员能够通过一些常规实验来确定可以加入到所使用的特定氰基丙烯酸酯中的5,5-二取代乙内酰脲的量。

在粘合剂组合物中可以包含一种或多种单体。可用在本发明中的单体容易发生聚合，例如阴离子聚合或自由基聚合，以形成聚合物。优选的单体包括式III的1,1-二取代乙烯单体：

HRC=CXY（III）

其中X和Y各自为强吸电子基团，并且R是H、--CH=CH₂，或者如果X或Y是氰基，则R是C₁-C₄烷基。

在式（I）范围内的单体的实例包括式CH₂=CX'Y的α-氰基丙烯酸酯、偏二氰乙烯、偏二氰乙烯的C₁-C₄烷基同系物、二烷基亚甲基丙二酸酯、酰基丙烯腈、乙烯亚磺酸酯以及乙烯磺酸酯，其中X'是--SO₂R'或--SO₃R'，Y'是--CN、--COOR'、--COCH₃、-SO₂R'或--SO₃R'，并且R'是H或烃基。

用在本发明中的优选的式（III）单体为α-氰基丙烯酸酯。这些单体在本领域中是已知的，并具有式（IV）：

其中R²是氢，并且R³是烃基或取代烃基；具有式--R⁴--O--R⁵--O--R⁶的基团，其中R⁴是具有2-4个碳原子的1,2-亚烷基，R⁵是具有2-12个碳原子的亚烷基，并且R⁶是具有1-6个碳原子的烷基；或者具有下式的基团：

其中R⁷是：

或-[C(CH₃)₂]_n-，其中n为1-10、优选1-8个碳原子，并且R⁸为有机部分。

合适的烃基和取代烃基的实例包括：具有1-16个碳原子的直链或支链烷基；被酰氧基、卤代烷基、烷氧基、卤素原子、氰基或卤代烷基取代的直链或支链C₁-C₁₆烷基；具有2-16个碳原子的直链或支链烯基；具有2-12个碳原子的直链或支链炔基；环烷基；芳烷基；烷芳基；以及芳基。

有机部分R⁸可以是取代或未取代的，并可以是直链、支链或环状、饱和、不饱和或芳族的。这样的有机部分的实例包括：C₁-C₈烷基部分、C₂-C₈烯基部分、C₂-C₈炔基部分、C₃-C₁₂脂环族部分、芳基部分例如苯基和取代苯基、以及芳烷基部分例如苄基、甲基苄基和苯乙基。其它有机部分包括取代烃部分，例如卤素（例如氯-、氟-和溴-取代的烃）和氧基-（例如烷氧基取代的烃）取代的烃部分。优选的有机基团为具有1至约8个碳原子的烷基、烯基和炔基部分，及其卤素取代的衍生物。特别优选的是4-8个碳原子的烷基部分。

在式（IV）的氰基丙烯酸酯单体中，R³优选为具有1-10个碳原子的烷基或者具有式--AOR⁹的基团，其中A为具有2-8个碳原子的二价直链或支链亚烷基或氧基亚烷基部分，并且R⁹是具有1-8个碳原子的直链或支链烷基部分。由式-AOR⁹表示的基团的实例包括1-甲氧基-2-丙基、2-丁氧基乙基、异丙氧基乙基、2-甲氧基乙基、以及2-乙氧基乙基。用在本发明中的优选的α-氰基丙烯酸酯单体为2-辛基氰基丙烯酸酯和丁基氰基丙烯酸酯。

在本发明的优选实施方案中，可以根据本领域中已知的方法制备氰基丙烯酸酯单体，例如美国专利号2,721,858和3,254,111，所述专利各自以其全文在此引作参考。一种这样的方法例如包括在升高的温度下使氰基乙酸酯和甲醛在碱性缩合催化剂的存在下进行反应以产生低分子量聚合物。随后是在高温高真空下在酸性和阴离子抑制剂的存在下进行的解聚（或裂解）步骤，产生了可以在高温高真空下在自由基和酸性抑制剂的存在下进行蒸馏的粗单体。在优选实施方案中，然后用自由基和酸性抑制剂配制蒸馏的2-氰基丙烯酸酯单体，以提供必要的稳定性和其它需要的物理性质。

不经过适当稳定的话，5,5-二取代乙内酰脲可能引起氰基丙烯酸酯的过早聚合。为了防止在加热溶解伤口愈合加速剂时氰基丙烯酸酯单体的过早聚合，以及为了提供含所述加速剂的氰基丙烯酸酯制剂的长期稳定性，在添加5,5-二取代乙内酰脲之前，用自由基和阴离子稳定剂的组合来稳定氰基丙烯酸酯单体（“预稳定的”）。在本发明的实施方案中，优选的主要自由基稳定剂是丁基羟基茴香醚（BHA）。其它自由基稳定剂包括但不限于：对苯二酚；儿茶酚；对苯二酚单甲醚以及受阻酚例如丁基羟基茴香醚；4-乙氧基苯酚；丁基羟基甲苯（BHT，2,6-二叔丁基丁基苯酚），4-甲氧基苯酚（MP）；3-甲氧基苯酚；2-叔丁基-4-甲氧基苯酚；2-叔丁基-4-甲氧基苯酚；2,2-亚甲基-双-(4-甲基-6-叔丁基苯酚)。

本领域普通技术人员可以使用已知技术而无需过多的实验就能确定稳定剂的使用量。MP的使用量为约1ppm至约4000ppm，优选约100ppm至约2000ppm。对苯二酚的使用量为约1ppm至约2500ppm，优选约50ppm至约1500ppm。BHT的使用量为约1ppm至约10000ppm，优选约500ppm至约5000ppm。

根据本发明的一些实施方案，优选的阴离子稳定剂是二氧化硫，其量为约2ppm至约500ppm，优选约10ppm至约200ppm，以在添加5,5-二取代乙内酰脲之前预稳定氰基丙烯酸酯单体。其它阴离子稳定剂可以是非常强的酸，包括但不限于高氯酸，盐酸，氢溴酸，甲苯磺酸，氟磺酸，磷酸，邻-、间-或对-磷酸，三氯乙酸和硫酸。所述非常强的酸的使用量为约1ppm至约250ppm，优选约5ppm至约50ppm。

本发明的组合物一般含有伤口愈合加速剂和稳定化的可聚合单体。所述可聚合单体、以及作为一个整体的组合物均为液体形式并提供粘合性质。本领域已知的其它组分也可以按其已知的效果并以已知的量被包含在所述组合物中。

根据本发明的一些实施方案，所述组合物可以任选地含有增稠剂。合适的增稠剂包括：聚氰基丙烯酸酯，氰基丙烯酸酯的部分聚合物，聚已内酯，烷基丙烯酸酯和乙酸乙烯酯的共聚物，聚烷基甲基丙烯酸酯，聚烷基丙烯酸酯，乳酸-乙醇酸共聚物，乳酸-己内酯共聚物，聚原酸酯，烷基甲基丙烯酸酯和丁二烯的共聚物，聚草酸酯，以及两侧为两条聚氧乙烯亲水链的聚氧丙烯三嵌段共聚物。优选的增稠剂为：如美国专利申请公开号2009/0318583中公开的氰基丙烯酸酯的部分聚合物，以及如美国专利申请公开号2009/0317353中公开的聚氧化烯烃的三嵌段共聚物。优选情况下，所述增稠剂在氰基丙烯酸酯单体组合中在室温下是可混溶的。

在本发明的某些实施方案中，所述组合物可以包含聚合加速剂。合适的聚合加速剂为：杯芳烃和氧杂杯芳烃，硅杂冠醚（silacrown），冠醚，环糊精及其衍生物，聚醚，脂肪族醇，各种脂肪族羧酸酯，过氧化苯甲酰，胺化合物例如三乙胺、二乙胺、丁胺、异丙胺、三丁胺、Ν,Ν-二甲基苯胺、Ν,Ν-二乙基苯胺、N,N-二甲基对甲苯胺、N,N-二甲基间甲苯胺、N,N-二甲基邻甲苯胺、二甲基苄胺、吡啶、甲基吡啶、乙烯基吡啶、乙醇胺、丙醇胺和乙烯二胺，季铵盐例如烷基铵盐、酰胺键合的铵盐、酯键合的铵盐例如烷基铵盐、酰胺键合的铵盐、酯键合的铵盐，盐和烷基咪唑啉盐，环硫化合物及衍生物，以及聚环氧烷烃及衍生物。

合适的冠醚包括但不限于：15-冠-5；18-冠-6；二苯并-18-冠-6；三苯并-18-冠-6；二环己基-18-冠-6；苯并-15-冠-5；二苯并-24-冠-8；二苯并-30-冠-10；不对称二苯并-22-冠-6；二甲基硅杂-11-冠-4；二甲基硅杂-14-冠-5；二甲基硅杂-17-冠-6；二苯并-14-冠-4；二环己基-24-冠-8；不对称二苯并-22-冠-6；环己基-12-冠-4；1,2-decalyl-15-冠-5；1,2-萘并-15-冠-5；3,4,5-萘基-16-冠-5；1,2-甲基-苯并-18-冠-6；1,2-甲基苯并-5,6-甲基苯并-18-冠-6；1,2-叔丁基-18-冠-6；1,2-乙烯基苯并-15-冠-5；1,2-乙烯基苯并-18-冠-6；1,2-叔丁基-环己基-18-冠-6；以及1,2-苯并-1,4-苯并-5-氧-20-冠-7。优选的冠醚是18-冠-6。

合适情况下，冠醚的使用量高达2000ppm，优选50至1000ppm，更优选100至500ppm。本领域普通技术人员可以使用已知技术而无需过多的实验就能确定使用量。

本发明的组合物还可以含有少量的着色剂，例如染料、色素和色素染料。合适的染料包括蒽的衍生物和其它复杂结构。这些染料包括但不限于：1-羟基-4-[4-甲基苯基氨基]-9,10-蒽二酮（D&C紫色2号）；9-(邻羧基苯基)-6-羟基-2,4,5,7-四碘-3H-呫吨-3-酮-，二钠盐，一水合物（FD&C红色3号）；6-羟基-5-[(4-磺基苯基)偶氮]-2-萘-磺酸的二钠盐（FD&C黄色6号）；2-(1,3-二氢-3-氧代-5-磺基-2H-吲哚-2-亚基)-2,3-二氢-3-氧代-1H-吲哚-5磺酸二钠盐（FD&C蓝色2号）；以及1,4-双(4-甲基苯胺基)蒽-9,10-二酮（D&C绿色6号）。

根据本发明的某些实施方案，本发明的氰基丙烯酸酯组合物中可以包含增塑剂。所述增塑剂优选不含任何水分并且不会对氰基丙烯酸酯组合物的稳定性造成不利影响。合适的增塑剂的实例包括但不限于：柠檬酸三丁酯（TBC）、乙酰柠檬酸三丁酯（ATBC）、癸二酸二甲酯、癸二酸二乙酯、磷酸三乙酯、磷酸三（2-乙基-己基）酯、磷酸三（对甲苯基）酯、己二酸二异癸酯（DIDA）、三乙酸甘油酯、三丁酸甘油酯、己二酸二辛酯（DICA）、豆蔻酸异丙酯（isopropyl myrisate）、硬脂酸丁酯，月桂酸、偏苯三酸三辛酯（trioctyl trimelliate）、戊二酸二辛酯（DICG）及其混合物。柠檬酸三丁酯、己二酸二异癸酯和乙酰柠檬酸三丁酯是优选的增塑剂，其使用量为0至30%，优选1%至20%，更优选2%至10%。

正如本发明中所发现的，在升高的温度下被掺入到氰基丙烯酸酯单体中的5,5-二取代乙内酰脲，在溶液冷却至室温后不会从氰基丙烯酸酯单体中沉淀出来。这一观察结果是重要的，因为室温下愈合加速剂在氰基丙烯酸酯单体中的均匀溶液能够实现在组织上的均匀分布以及更有效的向靶部位的药物递送。

下表1总结了在升高的温度下将苯妥英掺入到不同氰基丙烯酸酯单体溶液中的结果。如表1中所示，苯妥英在室温下不溶于2-辛基氰基丙烯酸酯（OCA）单体。在升高的温度下，苯妥英可溶于2-辛基氰基丙烯酸酯（OCA）和正丁基氰基丙烯酸酯（BCA）二者中。同样有趣的是注意到了，与较长烷基链的氰基丙烯酸酯（OCA）相比，苯妥英更加可溶于较短烷基链的氰基丙烯酸酯（BCA）。

表1.在不同氰基丙烯酸酯中掺入苯妥英。

本发明含苯妥英的液体单体氰基丙烯酸酯粘合剂组合物的稳定性通过加速老化试验得到证实，所述试验在烘箱中在80℃下进行了约13天。基于计算，在80℃下13天的加速老化等于2年的储存期限，在80℃下1天的加速老化等于约56天的储存期限。在整个老化试验过程中，所有含苯妥英的氰基丙烯酸酯粘合剂样品均保持流体粘稠度。粘度是稳定性的度量（工业标准），所述样品的稳定性列于下表2中。用Brookfield DV-II+Pro粘度计测量含苯妥英的氰基丙烯酸酯组合物的粘度。在每个测量后用丙酮清洗轴和样品室。将约7ml的氰基丙烯酸酯组合物放到样品室中，并将所述室放到位。在样品在样品室中得到平衡后，开启发动机。对所公开的组合物的粘度平行测量三份。在下一个样品测量前，用丙酮去除任何残留物。

表2.含苯妥英的氰基丙烯酸酯粘合剂组合物在80℃加速老化试验之前（第0天）和之后的粘度。

含苯妥英的氰基丙烯酸酯粘合剂组合物的粘度随着加速老化的进行而增加，但是老化的样品在第13天后的粘度在可接受的范围内，不影响从涂敷器分配粘合剂的能力。实际上，最优选的氰基丙烯酸酯粘合剂组合物（a、b、d、f和h）在加速老化试验后的粘度增加是非常小的，表明所述粘合剂组合物是稳定的。

根据本发明，可以使用任何合适的涂敷器来储存以及向皮肤的受影响区域施用所述组合物。合适的涂敷器和包装系统可以是任何容器，所述容器维持其内含物的无菌性及完整性。优选的容器也是与所选灭菌方法相容的容器，所述灭菌包括辐照。理想情况下，构成合适容器的材料在最大灭菌剂量下是辐照稳定的。合适的容器也理想地提供湿气屏障，因此它与氰基丙烯酸酯单体组合物相容。合适的涂敷器可以是任何容器构造，例如但不限于拭子、小瓶、小袋、注射器、安瓿或瓶子，其具有适合的机构、表面或尖端以将氰基丙烯酸酯组合物从所述容器分配并施用到皮肤上。

在实施方案中，用于本发明组合物的优选的包装或容器具有多层不同材料，包括聚合物和金属。最优选的是其中内层为腈类聚合物并且外层为聚丙烯的容器。合适的包装体也可以由腈类聚合物内层和铝外层构成。所述腈类聚合物材料优选为共聚物组合物，特别是2-丙烯酸甲酯与1,3-丁二烯和2-丙烯腈的聚合物，该聚合物由BPPetrochemicals以商标“BAREX”出售。聚合物提供了高阻隔性，确保了储存在其中的氰基丙烯酸酯粘合剂产物的稳定性。聚合物提供的优越的阻隔性使其成为用于构建本发明的包装体的理想内层材料。聚合物在所有相对湿度水平下均提供对氧的高阻隔性。这确保了无论周围环境的湿度如何，都能始终维持对氧的高阻隔性。此外，聚合物的水蒸汽阻隔性与其它塑料包装材料相当，而且根据本发明，所述阻隔性最终通过固定在所述聚合物上的外层得到增强。

在实施方案中，本发明适用于单次使用的容器并可以适用于涂敷器，其中希望通过添加伤口愈合剂来补充任选的灭菌处理，从而维持所述组合物高度的长时间无菌性和稳定性。类似地，在实施方案中，本发明也可以适用于多次使用的容器或涂敷器，其中希望维持所述组合物针对微生物作用的高度的长时间无菌性和稳定性，尽管在第一次使用该组合物后丧失了最初的无菌性。

在使用所述组合物前，本发明的伤口愈合剂的抗微生物性质可能会起作用以破坏可能存在或生长在可聚合单体组合物中的微生物。在所述组合物在需要的施用部位例如伤口或切口上聚合后，本发明的伤口愈合剂的抗微生物性质起作用以破坏施用部位中及其周围的微生物。如上文所述，很多抗微生物剂也能作为聚合抑制剂起作用，然而，本发明的伤口愈合剂没有这样的作用并且不影响单体材料的聚合。

用于医疗应用的氰基丙烯酸酯粘合剂组合物优选为无菌的。单体组合物和/或其容器和/或包装的灭菌可以通过任何方法来完成，所述方法包括但不限于化学、物理和辐照技术。化学方法的实例包括但不限于暴露于环氧乙烷和过氧化氢。物理方法的实例包括但不限于通过加热（干热或湿热）或杀菌釜（retort canning）灭菌。辐照方法的实例包括但不限于γ射线辐照、电子束辐照以及微波辐照。优选的灭菌方法为化学和辐照方法，包括但不限于电子束（E束）、γ射线辐照以及X射线。

当用E束辐照对组合物进行灭菌时，足以使粘合剂组合物无菌的施用剂量范围典型地为约5kGy至50kGy，更优选约12kGy至25kGy。优选在环境大气条件下执行E束辐照，辐照暴露时间优选在60秒内。任何标准电源都是合适的，包括直线加速器，其产生以千瓦（KW）度量的辐照。电子束功率越大，能处理的产物体积越大。在约2KW至约30KW、优选约5KW至约20KW、更优选约10KW至约20KW范围内的电子束功率下辐照本发明的氰基丙烯酸酯粘合剂组合物。E束辐照通常涉及高能量电子的使用。电子束能量范围为1百万至10百万电子伏特（MeV），优选3MeV至10MeV，更优选5MeV至10MeV。

为了减少生物负载量，可以在E束灭菌前将本发明的氰基丙烯酸酯粘合剂组合物过滤通过0.2μm滤器。也可以在最终的E束辐照前用加热或环氧乙烷对本发明的粘合剂组合物进行灭菌。

在本发明的优选实施方案中，对所述组合物进行灭菌以提供至少10^-3的无菌保证水平（SAL）。这指的是灭菌后单个单元为非无菌的可能性是千分之一。在更优选的实施方案中，无菌保证水平可以为至少10^-4、10^-5或10^-6。在将本发明的氰基丙烯酸酯粘合剂组合物灭菌后，通过抑菌和抑真菌试验分析它们的无菌水平。在用挑战性微生物例如枯草芽孢杆菌（Bacillus subtilis）、白色念珠菌（Candida albicans）和黑曲霉（Aspergillus niger）测试后，没有观察到微生物的任何生长，表明本发明的组合物是无菌的。

下表3显示了与表2中相同的某些优选的氰基丙烯酸酯组合物在用E束辐照灭菌前后的粘度。在灭菌后没有观察到本发明组合物的粘度的显著变化。灭菌后这些组合物的粘度仅有少量增加，表明灭菌对组合物的影响是非显著性的。

表3.含苯妥英的氰基丙烯酸酯粘合剂组合物在灭菌前后的粘度。

本发明的组合物在灭菌前后测得的的粘度变化理想地在约0%和100%之间，优选在约0%和约80%之间，更优选在约0%和约40%之间。本发明的优点在于粘合剂组合物的完整性在灭菌后得到保持，因为在文献中已报道了，氰基丙烯酸酯组合物的粘度往往在灭菌后改变。现有技术中报道的氰基丙烯酸酯粘合剂表现出由灭菌引起粘度增加400%或更多。还有，灭菌经常被有意地用来增加氰基丙烯酸酯粘合剂的粘度。本发明的组合物及所述组合物的制备方法使原本会观察到的由于灭菌引起的氰基丙烯酸酯粘合剂的粘度变化最小化。

通常，对于医疗目的而言，粘合剂的储存期限应为至少一年；然而，超出该储存期限的增加的储存期限为制造商和消费者两者都提供了增加的经济优势。在本文中使用时，储存期限指的是在组合物和/或容器的降解所发生的程度不会使所述组合物和容器不能以它们预期的方式或为预期的目的进行使用的情况下，所述容器和其中的组合物在环境条件（接近室温）或更低的条件下能够被保存的时间长度。因此，虽然组合物和容器之一或两者会发生一些降解，但是降解程度不能达到使组合物和/或容器不再能被使用的程度。在本文中使用时，“延长的储存期限”指的是储存期限为至少12个月，优选至少18个月，更优选至少24个月，甚至更优选至少30个月。

为了评估与上述相同的一些制剂在灭菌后的稳定性，执行加速老化试验。在本文中使用时，“稳定性”指的是所得组合物在规定的时间长度内维持商业上可接受的形式。也就是说，所述组合物不会过早聚合或者以其它方式改变形式或降解至使所述组合物不能用于它预期的目的。因此，尽管所述组合物可能发生一些聚合或增稠，例如可通过组合物粘度的变化测量到的，但是这样的变化不会广泛到破坏或显著损害所述组合物的有用性。在烘箱中在80℃下执行加速老化试验13天。基于计算，80℃下13天的加速老化等于2年的储存期限，80℃下1天的加速老化等于56天的储存期限。在整个老化过程中，所有氰基丙烯酸酯粘合剂样品保持流体粘稠度及良好的颜色。通过粘度测试证实老化的样品的稳定性。氰基丙烯酸酯粘合剂组合物的粘度随着加速老化的进行而略有增加，表明灭菌后氰基丙烯酸酯组合物极少发生过早聚合，使得它们特别适合医疗应用。所述组合物在加速老化第0天、第3天、第6天、第10天、第13天的平均粘度分别为6.04、7.66、9.91、14.8和24.7厘泊（cps）。另外，据预期，在加速老化结束时，粘度的这一少量增加既不会影响氰基丙烯酸酯粘合剂的性能，也不会影响所述组合物从涂敷器进行分配的能力，表明这些无菌氰基丙烯酸酯组合物提供了至少两年的储存期限。

因此，本发明的含5,5-二取代乙内酰脲的粘合剂组合物为在医疗领域中的应用提供了稳定的储存期限。在加速老化试验、包装和灭菌过程期间，本发明的氰基丙烯酸酯粘合剂组合物的稳定性得到维持，因而储存期限得到维持。在优选实施方案中，所述单体液体粘合剂组合物基本上没有可影响单体的功用的显著聚合。

本发明的氰基丙烯酸酯组合物的固化时间的合适范围为约5至约120秒，更优选约10至约80秒，甚至更优选约15至约70秒。

本发明还提供了用于施用含伤口愈合加速剂5,5-二取代乙内酰脲的氰基丙烯酸酯粘合剂组合物的试剂盒，所述试剂盒包括其中含有有效量的氰基丙烯酸酯组合物的涂敷器。可以使用任何合适的涂敷器将本发明的组合物施用到皮肤的受影响区域。合适的涂敷器可以是任何容器，例如但不限于拭子、小瓶、或者任何构造，所述构造具有合适的机构、表面或尖端来储存并从容器递送所述氰基丙烯酸酯组合物。所述试剂盒还可以含有其它适当的实用要素以适合具体应用，包括但不限于手术工具、其它药物和施用说明。当与其它治疗剂或药物一起使用本发明时，可以为氰基丙烯酸酯组合物和所述治疗剂提供单独的容器。可以单独包装单个涂敷器以维持无菌条件。例如，可以将每个涂敷器包装在塑料或任何其它合适的封闭材料中。然后可以将多个涂敷器包装在运输用的盒子中。

就促进伤口愈合而言，本发明的氰基丙烯酸酯组合物特别适用于医疗应用。在使用中，氰基丙烯酸酯粘合剂组合物作为液体被施用到待密封的组织，然后在与组织接触后允许所述组合物聚合形成抗微生物屏障膜。被掺入到氰基丙烯酸酯组合物内的5,5-二取代乙内酰脲在其施用于皮肤期间和之后，可以加速伤口愈合过程。

在检查完本发明的以下实施例后，对于本领域的技术人员来说，本发明的其它目的、优点和新颖特征将变得显而易见。实施例被包括在内以便更清楚地证实本发明的整体性质，因而对本发明是说明性而非限制性的。

通过加速老化试验评估本发明的氰基丙烯酸酯组合物的储存期限稳定性。80℃下13天的加速老化等于室温下2年。将含苯妥英的氰基丙烯酸酯单体样品放置在80℃的烘箱中。在第3天、第6天、第10天和第13天取样用于测量粘度和固化时间，以评估所述粘合剂的稳定性。

用Brookfield DV-II+Pro粘度计测量含苯妥英的氰基丙烯酸酯组合物的粘度。在每个测量后用丙酮清洗轴和样品室。将约7ml的氰基丙烯酸酯组合物放到样品室中，并将所述室放到位。在样品在样品室中得到平衡后，开启发动机。对所公开的组合物的粘度平行测量三份。在下一个样品测量前，用丙酮去除任何残留物。

使用猪皮（4x4平方英寸）测量固化时间，所述猪皮通过用被异丙醇饱和的无菌纱布擦拭皮肤表面来制备。因此从猪皮上去除了所有油性物质。然后用无菌纱布擦拭所述表面以去除异丙醇。向猪皮施用氰基丙烯酸酯组合物的薄膜，其后用秒表记录经过时间。然后，当用戴手套的手指触摸所述膜而没有发生液体转移时，所述膜被确定为干燥的，此时通过停止计时器来记录固化时间。

实施例

实施例1

在配有温度计和磁力搅拌棒的三颈圆底烧瓶中，用BHA和SO₂稳定118.7g含有270ppm的18-冠-6的2-辛基氰基丙烯酸酯单体，将其与0.12g苯妥英混合并在80℃下搅拌约2小时。冷却后，未观察到沉淀，所得氰基丙烯酸酯组合物为澄清且均匀的溶液。

实施例2

用BHA和SO₂稳定包含80%的2-辛基氰基丙烯酸酯和20%的正丁基氰基丙烯酸酯的氰基丙烯酸酯单体混合物。在三颈圆底烧瓶中使251.1g这样的氰基丙烯酸酯混合物与0.25g苯妥英混合。将所得均匀混合物加热至78℃并搅拌约一小时，直至所有苯妥英均溶解在氰基丙烯酸酯单体中。冷却至室温后，在室温下将均匀溶液搅拌过夜以检查苯妥英与氰基丙烯酸酯单体的混溶性。向该溶液添加10ppm的SO₂以稳定含有苯妥英的氰基丙烯酸酯组合物。

实施例3

在配有温度计和磁力搅拌棒的三颈圆底烧瓶中，将用BHA和SO₂稳定的115.6g正丁基氰基丙烯酸酯单体与0.35g苯妥英混合，并在80℃下搅拌直至所有可见的苯妥英固体粒子都溶解在正丁基氰基丙烯酸酯中。冷却后，未观察到沉淀，所得氰基丙烯酸酯组合物为澄清且均匀的溶液。所得组合物的粘度和固化时间分别为5.36cps和14秒。

实施例4

使115.8g含有分别作为自由基和阴离子稳定剂的BHA和SO₂的2-辛基氰基丙烯酸酯单体与0.116g苯妥英在三颈圆底烧瓶中混合。将所得混合物在70℃下搅拌约1小时直至所有苯妥英白色粉末都溶解在2-辛基氰基丙烯酸酯单体中，以制备含有苯妥英的氰基丙烯酸酯组合物。在溶液冷却至室温后，没有观察到苯妥英的沉淀。

尽管参照优选实施方案对本发明进行了描述，但本发明不局限于给出的具体实施例，本领域的技术人员在不背离本发明的精神和范围的情况下可以做出其它实施方案和改变。

Claims

1.单体粘合剂组合物，其包含α-氰基丙烯酸酯单体、有效稳定所述α-氰基丙烯酸酯单体的量的丁基羟基茴香醚和二氧化硫、以及以组合物的重量计0.05％至0.3％的苯妥英的无菌均匀混合物，所述α-氰基丙烯酸酯单体选自2-辛基氰基丙烯酸酯、正丁基氰基丙烯酸酯、以及以重量计80％的2-辛基氰基丙烯酸酯和以重量计20％的正丁基氰基丙烯酸酯的混合物。

2.权利要求1的单体粘合剂组合物，还包含聚合加速剂。

3.权利要求1的单体粘合剂组合物，还包含增塑剂。

4.权利要求1的单体粘合剂组合物，还包含增稠剂。

5.权利要求1的单体粘合剂组合物，其中组合物包含2ppm至500ppm的二氧化硫。

6.权利要求1的单体粘合剂组合物，其中组合物包含10ppm至200ppm的二氧化硫。

7.权利要求1的单体粘合剂组合物，其中组合物包含以组合物的重量计0.1％至0.2％的苯妥英。

8.权利要求1的单体粘合剂组合物，其中所述组合物经辐照灭菌。

9.权利要求8的单体粘合剂组合物，其中所述组合物经电子束辐照灭菌。

10.权利要求1的单体粘合剂组合物，其中组合物在80℃储存13天后保持流体粘稠度。

11.制备权利要求1-10任一项的单体粘合剂组合物的方法，所述方法包括：用丁基羟基茴香醚和二氧化硫预稳定α-氰基丙烯酸酯单体，所述α-氰基丙烯酸酯单体选自2-辛基氰基丙烯酸酯、正丁基氰基丙烯酸酯、以及以重量计80％的2-辛基氰基丙烯酸酯和以重量计20％的正丁基氰基丙烯酸酯的混合物，在60℃至90℃的温度下将以组合物的重量计0.05％至0.3％的苯妥英与预稳定的α-氰基丙烯酸酯单体混合以形成均匀混合物，以及对所述均匀混合物灭菌。

12.用于施用权利要求1至10任一项的单体粘合剂组合物的试剂盒，其中所述试剂盒包括含有所述组合物的容器。

13.权利要求12的试剂盒，其中所述容器包括涂敷器，所述涂敷器具有包含腈类聚合物的内层，以及包含聚丙烯或铝的外层，以及其中组合物在涂敷器中灭菌。

14.权利要求1-10任一项的单体粘合剂组合物在制备用于伤口愈合和伤口闭合的药物中的应用。