CN103073448A - 含芳环结构的多胺衍生物及其制备方法和应用 - Google Patents

Abstract

本发明属于药物领域，特别涉及含芳环结构的多胺衍生物及其制备方法和应用。所述新型含芳环结构的多胺衍生物，其用于制备预防和治疗神经退行性疾病的药物时，相对现有药物具有更高的酶抑制活性和更低的肝毒性，具有更高的治疗指数。

Description

含芳环结构的多胺衍生物及其制备方法和应用

技术领域

本发明属于药物领域，特别涉及含芳环结构的多胺衍生物及其制备方法和应用。

背景技术

阿尔茨海默病（Alzheimer disease,AD）是由德国神经病理学家AloisAlzheimer于1907年发现的一种神经退行性疾病，表现为中枢神经系统退化，神经元胞内出现神经元纤维缠结和胞外出现老年斑的病理特征。在临床上患者逐渐出现记忆力减退、认知功能障碍、行为异常和社交障碍等，通常病情呈进行性加重，直到完全丧失独立生活能力。

AD是一种在老人群体中十分常见的神经衰退性疾病，已经成为继肿瘤、心脏病、脑血管病之后引起老年人死亡的第四大病因。随着世界人口老龄化进程的加快，AD病患者人数也将越来越多。2006年预防痴呆症国际会议上指出全世界有超过2600万AD患者，全球48%的早老性痴呆症患者在亚洲，形式非常严峻。

目前临床上治疗AD的药物主要是基于胆碱能假说而研究开发出来的乙酰胆碱脂酶抑制剂（Acetylcholinesterase Inhibitors,AChEIs），如他克林、多奈哌齐、加兰他敏、利斯的明等。该类药物的作用机制是通过抑制乙酰胆碱酯酶（AChE），提高患者脑内乙酰胆碱（acetylcholine，ACh）水平，此类药物可以明显的改善患者神经精神症状。

然而，哺乳动物体内除了AChE还存在着丁酰胆碱酯酶（BChE），研究发现，BChE也参与ACh的代谢过程，而且，随着AD的发病进程，AChE的水解活动下降到正常水平的55-67%，BChE的活动水平大幅度提高，在调节ACh的水平方面也起到了重要的作用，因此，近年来也有学者认为BChE可能是一个潜在的治疗靶点。

AD的成因复杂，其中涉及许多因素和相关靶点，针对这些相关靶点（如AChE和BChE），科学家们采用各种方案，设计出许多新颖的胆碱酯酶抑制剂。2006年，Elsinghorst等报道了烷氧基取代的芳香环通过酰胺或酰肼与他克林桥联的杂合物，对胆碱酯酶的抑制活性较他克林大大提高，对AChE的抑制活性达到5纳摩，对BChE的抑制活性达到皮摩级（IC₅₀=0.226nM），而且实验证明其烷氧基取代的芳香环可以作用在AChE的PAS部位。（Elsinghorst，PW，et al，J.Med.Chem.,2006，49，7540-7544)。其他一些研究小组也通过合理的药物设计，合成出一些以AChE和BChE为靶点的小分子抑制剂用于开发治疗AD药物，有些已经进入临床研究。

发明内容

本发明的目的在于提供可用于治疗神经退行性疾病药物尤其是预防及治疗阿尔茨海默氏病的含芳环结构的多胺衍生物。

本发明采用的技术方案如下：

含芳环结构的多胺衍生物，所述多胺衍生物为通式如式I、式II或式III所示的化合物或其药用盐：

其中，l=1或2，m＝1或2，n＝1-8。

Ar取代基中

表示Ar所取代的位置。

所述的药用盐优选盐酸盐。

本发明还进一步提供了一种所述含芳环结构的多胺衍生物的制备方法，步骤如下：

（1）饱和脂肪二胺与二叔丁氧基甲酸酐反应得到化合物a；

（2）将化合物a溶于有机溶剂中，在无机碱作用下与N-溴代烷基邻苯二甲酰亚胺反应，然后与二叔丁氧基甲酸酐反应，反应产物经过柱层析得到化合物b；所述有机溶剂可选择乙腈，所述无机碱可选用碳酸钾；

（3）将化合物b溶于无水乙醇或甲醇中，在水合肼的催化下肼解得到含化合物c的混合物；

（4）将含化合物c的混合物溶于有机溶剂中，在无机碱作用下，与N-溴代烷基邻苯二甲酰亚胺反应，然后与二叔丁氧基甲酸酐反应经过柱层析得到化合物d；所述有机溶剂可选择乙腈，所述无机碱可选用碳酸钾；

（5）将化合物d溶于无水乙醇或甲醇中，在水合肼催化下，肼解得到含化合物e的混合物；

（6）1-氨基萘、9-氨基蒽或1-氨基蒽醌溶于有机溶剂中，在无机碱或有机碱的催化下，与氯乙酰氯反应得到相应的化合物f1、f2或f3；所述有机溶剂可选择四氢呋喃或N,N-二甲基甲酰胺，催化剂可选择三乙胺；

（7）f1、f2或f3溶于乙腈或乙醇溶剂中，在有机碱或无机碱催化作用下，分别与a、c、e反应，对应得到g1、g2或g3；所述催化剂可选择三乙胺或K₂CO₃；

（8）g1、g2或g3溶于乙醇或甲醇中，用稀盐酸的乙醇溶液脱保护得到含芳环结构的多胺衍生物盐酸盐；将盐酸盐溶于水中，用无机碱调至碱性，再用有机溶剂萃取，蒸除有机溶剂得到相应的多胺衍生物h1、h2或h3。

所述的h1、h2或h3分别对应式I、式II或式III所示的化合物。

制备过程如下所示：

具体的，步骤1）中，分别配制饱和脂肪二胺与二叔丁氧基甲酸酐溶于有机溶剂的溶液，在有机碱的催化下，先将部分二叔丁氧基甲酸酐溶液与脂肪二胺的溶液混合，冷却至0℃；搅拌下再滴入剩余的二叔丁氧基甲酸酐（Boc₂O）溶液，反应完毕得到大量白色沉淀，纯化分离获得化合物a；

步骤（2）中，将化合物a溶于乙腈中，加无机碱如无水碳酸钾，室温搅拌10-15min，升温到40-50℃，分三批加入N-（4-溴丁基）邻苯二甲酰亚胺，反应过夜。蒸除乙腈，残余物分离纯化得淡黄色油状物(含杂质)。将该油状物溶于甲醇溶液中，加入Boc₂O，室温搅拌过夜。蒸除溶剂，残余物分离纯化得化合物b。

步骤（3）中，将化合物b溶于乙醇中，加水合肼，室温搅拌过夜至有大量白色不溶性固体出现，蒸除溶剂，残渣分离纯化得含化合物c混合物,不用分离直接进入下一步反应。

步骤（4）中，将含化合物c的混合物溶于乙腈中，加无机碱如无水碳酸钾，室温搅拌10-15min，升温到40-50℃，分三批分别加入N-（4-溴丁基）邻苯二甲酰亚胺，反应过夜。蒸除乙腈，残余物分离纯化得淡黄色油状物(含杂质)。将该油状物溶于甲醇溶液中，加入Boc₂O，室温搅拌过夜。蒸除溶剂，残余物分离纯化得化合物d。

步骤（5）中，将化合物d溶于乙醇中，加水合肼，室温搅拌过夜至有大量白色不溶性固体出现，蒸除溶剂，残渣分离纯化得含化合物e混合物,不用分离直接进入下一步反应。

步骤（6）中，冰浴条件下，将1-氨基萘、9-氨基蒽或1-氨基蒽醌和三乙胺加入四氢呋喃中，搅拌使其完全溶解。然后缓慢滴加氯乙酰氯，滴毕，升至室温搅拌至TLC检测原料点消失，蒸出溶剂，残余物分离纯化得到f1、f2或f3。

步骤（7）中，将f1、f2或f3和三乙胺加入无水乙醇中，然后将a、c或e加入上述悬浊液中，充分搅拌均匀。加热回流至TLC检测反应完成。蒸除溶剂，残余物分离纯化得到g1、g2或g3。

步骤（8）中，将所得g1、g2或g3溶于无水乙醇中，冷却至0℃，加入HCl的醇溶液，自然升至室温，搅拌过夜至有大量固体生成，分离纯化得h1、h2或h3。

所述含芳环结构的多胺衍生物在制备预防、治疗神经退行性疾病药物中有着很好的应用。

所述多胺衍生物单独或与药用载体、辅剂或赋形剂共同制成所述药物。

所述药物剂型为片剂、丸剂、胶囊、注射剂、悬浮剂或乳剂。

本发明提供的含芳环结构的多胺衍生物，拓宽了多胺衍生物的研究及应用领域。本发明的化合物存在三个主要单元：芳环部分，连接剂和多胺部分，可以调节多胺链上碳的个数以调节对胆碱酯酶的作用模式及抑制活性。

式I、II或III的化合物的药用盐可以通过常规方法由母体化合物制备，例如通过将游离碱形式的这些化合物与化学计算量的适当酸在水中或在有机溶剂中或者在两者的混合物中制备。通常，非水性介质如乙醇、乙酸乙酯、乙醚、乙腈或异丙醇是优选的。

酸加成盐的实例包括无机酸加成盐和有机酸加成盐，无机酸加成盐如盐酸盐、氢溴酸盐、氢碘酸盐、硫酸盐、硝酸盐，有机酸加成盐如乙酸盐、马来酸盐、富马酸盐、柠檬酸盐、草酸盐、琥珀酸盐、酒石酸盐、苹果酸盐、扁桃酸盐和甲苯磺酸盐。

本发明所述的多胺衍生物对乙酰胆碱酯酶（AChE）和丁酰胆碱酯酶（BChE）均有不同程度的抑制活性和选择性，通过同时与AChE的催化位点（CAS）和外周结合位点（PAS）结合。当其用于制备预防和治疗神经退行性疾病，如阿尔茨海默氏病的药物时，与对照药他克林相比，具有更高的酶抑制活性和更低的肝毒性，具有更高的治疗指数。

本发明相对于现有技术，有以下优点：

本发明提供了新型的含芳环结构的多胺衍生物，其用于制备预防和治疗神经退行性疾病的药物时，相对现有药物具有更高的酶抑制活性和更低的肝毒性，具有更高的治疗指数。

具体实施方式

以下以具体实施例来说明本发明的技术方案，但本发明的保护范围不限于此：

实施例1

制备l=1，m=2，n=1时含1-氨基萘结构的多胺衍生物盐酸盐：

（1）制备化合物a：取Boc₂O4.36g(20mmoL)溶于6mL甲醇中；取1，3-丙二胺(50mmoL)，溶于质量浓度为10%的三乙胺的甲醇溶液30mL中，冷却至0℃；剧烈搅拌下滴加Boc₂O的甲醇溶液6mL，滴加完毕让反应液自然升至室温搅拌过夜至有大量白色沉淀生成；蒸出溶剂，剩余物溶于30mL氯仿中，用10%Na₂CO₃水溶液洗涤3×30mL，收集有机层，蒸出溶剂，得化合物a；

（2）制备化合物b：将化合物a溶于30mL乙腈中，加无水碳酸钾4.14g(30mmoL)，室温搅拌15min，升温到45℃，分三批加入N-（4-溴丁基）邻苯二甲酰亚胺共4.5g(16mmoL)，反应过夜。蒸除乙腈，残余物用30mL氯仿提取，3×40mL10%Na₂CO₃的水溶液洗涤，收集有机层，有机层用无水硫酸钠干燥，蒸除氯仿，得淡黄色油状物(含杂质)。将该油状物溶于甲醇溶液30mL中，加入Boc₂O4.36g(20mmoL)，室温搅拌过夜。蒸除溶剂，残余物用40mL氯仿提取，3×40mL水洗涤，收集有机层，有机层用无水硫酸钠干燥，蒸除氯仿，硅胶柱分离提纯得化合物b。

（3）制备含化合物c混合物：将化合物b溶于30mL乙醇中，加水合肼0.5~0.7ml，室温搅拌过夜至有大量白色不溶性固体出现，蒸除溶剂，残渣溶于30mL氯仿中，3×30mL Na₂CO₃10%的水溶液洗涤，收集有机层，有机层用无水硫酸钠干燥，蒸除氯仿，得含化合物c混合物,不用分离直接进入下一步反应。

（4）制备化合物d：将含化合物c的混合物溶于30mL乙腈中，加无水碳酸钾4.14g(30mmoL)，室温搅拌15min，升温到45℃，分三批分别加入N-（4-溴丁基）邻苯二甲酰亚胺共4.5g(16mmoL)，反应过夜。蒸除乙腈，残余物用30mL氯仿提取，3×40mL Na₂CO₃10%的水溶液洗涤，收集有机层，有机层用无水硫酸钠干燥，蒸除氯仿，得淡黄色油状物(含杂质)。将该油状物溶于甲醇溶液30mL中，加入Boc₂O4.36g(20mmoL)，室温搅拌过夜。蒸除溶剂，残余物用40mL氯仿提取，3×40mL水洗涤，收集有机层，有机层用无水硫酸钠干燥，蒸除氯仿，硅胶柱分离提纯得化合物d。

（5）制备化合物e：将化合物d溶于30mL乙醇中，加水合肼0.5~0.7mL，室温搅拌过夜至有大量白色不溶性固体出现，蒸除溶剂，残渣溶于30mL氯仿中，3×30mL Na₂CO₃10%的水溶液洗涤，收集有机层，有机层用无水硫酸钠干燥，蒸除氯仿，得含化合物e混合物,不用分离直接进入下一步反应。

（6）制备化合物f1：冰浴条件下，将1-氨基萘（4.30g,30mmol）和三乙胺（8.35mL,60mmol）加入50mL四氢呋喃中，搅拌15min使其完全溶解。然后缓慢滴加氯乙酰氯（6mL,75mmol），滴毕，升至室温搅拌至TLC检测原料点消失，蒸出溶剂，残余物倒入50mL水中，抽滤，所得固体干燥后得到棕色固体，硅胶柱分离得到浅黄色固体。

（7）制备化合物g3：将f1（0.66g,3mmol）和三乙胺（6mL）加入20mL无水乙醇中，然后将e（l=1，m=2，n=1,4.5mmol）加入上述悬浊液中，充分搅拌均匀。加热回流至TLC检测反应完成。蒸除溶剂，残余物溶于35mL二氯甲烷中，3×30mL的10%的无水碳酸钠水溶液洗涤，收集有机层，用无水硫酸钠干燥，蒸除二氯甲烷，硅胶柱分离得到淡黄色油状物g3。

（8）制备化合物h3：将所得g3溶于8mL无水乙醇中，冷却至0°C，加入4mol/LHCl醇溶液4mL，自然升至室温，搅拌过夜至有大量浅黄色固体生成，离心分离，依次用无水乙醇、乙醚洗涤粗产物，真空干燥，得到白色固体。将白色固体溶于水，加K₂CO₃调至碱性，氯仿萃取，无水Na₂SO₄干燥后蒸干溶剂得淡黄色油状物h3。

（9）目标化合物的制备：将h3溶于乙醇中，通入HCl气体过夜，反应完毕蒸干溶剂得白色固体。产率：75.2%，¹H NMR(400MHz,D₂O)δ_H:8.07-8.10(m,1H),8.02(t,J=6.8Hz,2H),7.62-7.72(m,4H),4.38(s,2H),3.40(t,J=7.9Hz,2H),3.28(t,J=7.9Hz,2H),3.12-3.22(m,8H),2.26-2.34(m,2H),2.09-2.14(m,2H),1.82-1.86(m,4H).ESI-MS m/z:386.4(M+H-4HCl)⁺.Anal.Calad.for C₂₂H₃₉Cl₄N₅O·0.2H₂O:C,49.39%;H,7.42%;N,13.09%;found:C,49.11%;H,7.60%;N,12.96%。

实施例2

制备m=2，n=1时含1-氨基萘结构的多胺衍生物盐酸盐：

在步骤7中原料由实施例1的e（l=1，m=2，n=1）换成c（m=2，n=1），其余制备步骤同实施例1。

最后得到白色固体，产率：71.8%，¹H NMR(400MHz,D₂O)δ_H:8.07-8.10(m,1H),8.02(t,J=6.8Hz,2H),7.62-7.72(m,4H),4.38(s,2H),3.33(t,J=6.8Hz,2H),3.15-3.25(m,6H),2.12-2.20(m,2H),1.89-1.95(m,4H).ESI-MS m/z:329.3(M+H-3HCl)⁺.Anal.Calad.forC₁₉H₃₁Cl₃N₄O·0.6H₂O:C,50.87%;H,7.23%;N,12.49%;found:C,50.99%;H,7.40%;N,12.44%。

实施例3

制备n=2时含1-氨基萘结构的多胺衍生物盐酸盐：

在步骤7中原料由实施例1的e（l=1，m=2，n=1）换成a（n=2），其余制备步骤同实施例1。

最后获得白色固体，产率：72.3%，¹H NMR(400MHz,D₂O)δ_H:8.08-8.10(m,1H),8.02(t,J=7.8Hz,2H),7.61-7.72(m,4H),4.38(s,2H),3.33(t,J=7.2Hz,2H),3.13(t,J=7.6Hz,2H),1.82-1.98(m,4H).ESI-MS m/z:272.2(M+H-2HCl)⁺.Anal.Calad.for C₁₆H₂₃Cl₂N₃O·0.9H₂O:C,53.31%;H,6.93%;N,11.66%;found:C,53.45%;H,6.98%;N,11.68%。

实施例4

制备l=1，m=2，n=1时含9-氨基蒽结构的多胺衍生物：

在步骤6中原料由实施例1的1-氨基萘换成9-氨基蒽，不经过步骤9，其余制备步骤同实施例1。

最后获得浅黄色油状液体，产率：62.9%，¹H NMR(400MHz,CDCl₃)δ_H:8.56(s,1H),8.06(d,J=8.5Hz,2H),7.99(d,J=8.8Hz,2H),7.49-7.58(m,4H),4.52(s,2H),3.31(t,J=7.9Hz,2H),3.15(t,J=8.0Hz,2H),3.00-3.09(m,8H),2.13-2.21(m,2H),1.97-2.05(m,2H),1.69-1.73(m,4H).ESI-MS m/z:436.4(M+H)⁺.Anal.Calad.for C₂₆H₃₉N₅O₂:C,71.69%;H,8.56%;N,16.08%;found:C,71.48%;H,8.50%;N,16.30%。

实施例5

制备m=2，n=1时含9-氨基蒽结构的多胺衍生物：

在步骤6中原料由实施例1的1-氨基萘换成9-氨基蒽，步骤7中原料由实施例1的e（l=1，m=2，n=1）换成c（m=2，n=1），不经过步骤9，其余制备步骤同实施例1。

最后获得淡黄色油状液体，产率：64.6%，¹H NMR(400MHz,CDCl₃)δ_H:8.42(s,1H),7.96(d,J=8.4Hz,2H),7.92(d,J=8.8Hz,2H),7.41-7.52(m,4H),4.44(s,2H),3.20(t,J=7.5Hz,2H),2.96-3.06(m,6H),1.94-2.02(m,2H),1.71-1.81(m,4H).ESI-MS m/z:379.3(M+H)⁺.Anal.Calad.for C₂₃H₃₀N₄O:C,72.98%;H,7.99%;N,14.80%;found:C,72.63%;H,7.96%;N,14.90%。

实施例6

制备m=1，n=1时含9-氨基蒽结构的多胺衍生物：

在步骤6中原料由实施例1的1-氨基萘换成9-氨基蒽，步骤7中原料由实施例1的e（l=1，m=2，n=1）换成c（m=1，n=1），不经过步骤9，其余制备步骤同实施例1。

最后获得黄色油状液体，产率：69.6%，¹H NMR(400MHz,CDCl₃)δ_H:8.72(s,1H),8.23(d,J=8.4Hz,2H),8.14(d,J=8.7Hz,2H),7.65-7.74(m,4H),4.66(s,2H),3.47(t,J=7.5Hz,2H),3.25-3.35(m,4H),3.18(t,J=7.8Hz,2H),2.29-2.37(m,2H),2.14-2.22(m,2H).ESI-MSm/z:365.3(M+H)⁺.Anal.Calad.for C₂₂H₃₀N₄O₂:C,72.50%;H,7.74%;N,15.37%;found:C,72.78%;H,7.81%;N,15.59%。

实施例7

制备n=4时含9-氨基蒽结构的多胺衍生物盐酸盐：

在步骤6中原料由实施例1的1-氨基萘换成9-氨基蒽，步骤7中原料由实施例1的e（l=1，m=2，n=1）换成a（n=4），其余制备步骤同实施例1。

最后获得白色固体，产率：71.4%，¹H NMR(400MHz,D₂O)δ_H:8.69(s,1H),8.20(d,J=7.6Hz,2H),8.11(d,J=8.7Hz,2H),7.63-7.72(m,4H),4.58(s,2H),3.33(t,J=7.7Hz,2H),3.06(t,J=7.5Hz,2H),1.84-1.92(m,2H),1.72-1.79(m,2H),1.51-1.54(m,4H).ESI-MS m/z:349.3(M+H-2HCl) .Anal.Calad.for C₂₂H₃₁Cl₂N₃O₂:C,60.00%;H,7.09%;N,9.54%;found:C,59.93%;H,7.06%;N,9.44%。

实施例8

制备n=2时含9-氨基蒽结构的多胺衍生物盐酸盐：

在步骤6中原料由实施例1的1-氨基萘换成9-氨基蒽，步骤7中原料由实施例1的e（l=1，m=2，n=1）换成a（n=2），其余制备步骤同实施例1。

最后获得浅黄色固体，产率：74.2%，¹H NMR(400MHz,D₂O)δ_H:8.61(s,1H),8.10(d,J=8.4Hz,2H),8.01(d,J=8.7Hz,2H),7.52-7.61(m,4H),4.49(s,2H),3.26(t,J=7.4Hz,2H),3.01(t,J=7.7Hz,2H),1.73-1.87(m,4H).ESI-MS m/z:332.2(M+H-2HCl)⁺.Anal.Calad.for C₂₀H₂₅Cl₂N₃O·0.4H₂O:C,59.82%;H,6.48%;N,10.46%;found:C,59.90%;H,6.43%;N,10.40%。

实施例9

制备n=1时含9-氨基蒽结构的多胺衍生物盐酸盐：

在步骤6中原料由实施例1的1-氨基萘换成9-氨基蒽，步骤7中原料由实施例1的e（l=1，m=2，n=1）换成a（n=1），其余制备步骤同实施例1。

最后获得浅黄色固体，产率：69.2%，¹H NMR(400MHz,D₂O)δ_H:8.59(s,1H),8.08(d,J=30.2Hz,4H),7.57-7.63(m,4H),4.57(s,2H),3.37(t,J=7.7Hz,2H),3.15(t,J=7.7Hz,2H),2.16-2.24(m,2H).ESI-MS m/z:308.2(M+H-2HCl)⁺.Anal.Calad.for C₁₉H₂₃Cl₂N₂O·0.6H₂O:C,58.35%;H,6.24%;N,10.74%;found:C,58.42%;H,6.09%;N,10.59%。

实施例10

制备l=1，m=2，n=1时含1-氨基蒽醌结构的多胺衍生物盐酸盐：

在步骤6中原料由实施例1的1-氨基萘换成1-氨基蒽醌，其余制备步骤同实施例1。

最后获得亮黄色固体，产率：64.7%，¹H NMR(400MHz,D₂O)δ_H:8.52(d,J=8.4Hz,1H),7.95-8.00(m,2H),7.69-7.83(m,3H),4.36(s,2H),3.40(t,J=7.9Hz,2H),3.28(t,J=7.9Hz,2H),3.12-3.22(m,8H),2.26-2.34(m,2H),2.09-2.14(m,2H),1.82-1.86(m,4H).ESI-MSm/z:465.5(M+H-4HCl)⁺.Anal.Calad.for C₂₆H₃₉Cl₄N₅O₃·0.1H₂O:C,50.92%;H,6.44%;N,11.42%;found:C,51.04%;H,6.15%;N,11.11%。

实施例11

制备m=2，n=1时含1-氨基蒽醌结构的多胺衍生物盐酸盐：

在步骤6中原料由实施例1的1-氨基萘换成1-氨基蒽醌，步骤7中原料由实施例1的e（l=1，m=2，n=1）换成c（m=2，n=1），其余制备步骤同实施例1。

最后获得亮黄色固体，产率：80.8%，¹H NMR(400MHz,D₂O)δ_H:8.48(d,J=8.3Hz,1H),7.86-7.90(m,2H),7.73-7.78(m,4H),7.66(t,J=8.1Hz,1H),4.34(s,2H),3.38(t,J=7.0Hz,2H),3.24-3.28(m,4H),3.19(t,J=7.8Hz,2H),2.14-2.22(m,2H),1.91-2.04(m,4H).ESI-MS m/z:309.3(M+H-3HCl)⁺.Anal.Calad.for C₂₃H₃₁Cl₃N₄O₃·0.1H₂O:C,53.16%;H,6.05%;N,10.78%;found:C,53.07%;H,5.74%;N,10.68%。

实施例12

制备n=2时含1-氨基蒽醌结构的多胺衍生物盐酸盐：

在步骤6中原料由实施例1的1-氨基萘换成1-氨基蒽醌，步骤7中原料由实施例1的e（l=1，m=2，n=1）换成a（n=2），其余制备步骤同实施例1。

最后获得亮黄色固体，产率：76.2%，¹H NMR(400MHz,D₂O)δ_H:8.46(d,J=6.8Hz,1H),7.84-7.88(m,2H),7.62-7.76(m,4H),4.33(s,2H),3.38(t,J=7.3Hz,2H),3.18(t,J=7.7Hz,2H),1.88-2.04(m,4H).ESI-MS m/z:352.2(M+H-2HCl)⁺.Anal.Calad.for C₂₀H₂₃Cl₂N₃O₃·0.2H₂O:C,56.13%;H,5.51%;N,9.82%;found:C,56.06%;H,5.18%;N,9.63%。

生物学评估

乙酰胆碱脂酶（AChE）抑制实验

选择实施例1～12制备的化合物，采用Ellman（Ellman，GL，Courtney，KD，et al，Biochem.Pharmacol.1961，7，88-95)报道的比色法在37℃评估AChE抑制活性。测试溶液由以下各项组成：0.1M磷酸缓冲液pH8.0，1mM5,5-二硫代双(2-硝基苯甲酸)(DTNB,Ellman’s试剂)，0.02单位AChE(SigmaChemical Co.,来源于电鳗)和1mM乙酰硫代胆碱作为酶促反应的底物。将检测的化合物加入测定溶液中并与酶在37℃下预孵育15分钟。该时间后，加入底物。用多功能酶标仪记录在412nm的吸光度变化2分钟，比较反应速率，计算由于测试化合物的存在导致的百分比抑制。用至少三次的独立测量值计算反应速率，计算相对不含化合物的对照，由于测试化合物的存在导致的百分比抑制。测定产生50%的AChE抑制的化合物浓度（IC₅₀）。

丁酰胆碱脂酶（BChE）抑制实验

选择实施例1～12制备的化合物，采用Ellman报道的比色法在37℃评估BChE抑制活性。测试溶液由以下各项组成：0.1M磷酸缓冲液pH8.0，1mM5,5-二硫代双(2-硝基苯甲酸)(DTNB,Ellman’s试剂)，0.01单位来源于马血清的BChE和1mM丁酰硫代胆碱作为酶促反应的底物。将检测的化合物加入测定溶液中并与酶在37℃下预孵育15分钟。该时间后，加入底物。用多功能酶标仪记录在412nm的吸光度变化2分钟，比较反应速率，计算由于测试化合物的存在导致的百分比抑制。用至少三次的独立测量值计算反应速率，将IC₅₀定义为相对于没有抑制剂下将酶活性降低50%的每种化合物的浓度。

化合物的细胞毒实验

1.配制药物浓度：将合成的多胺衍生物用培养液稀释为0.1,1，10,20,50μmol/L五个浓度；

2.接种细胞：取对数生长期肿瘤细胞用完全培养基配成单个细胞悬液，移入37℃的CO₂培养箱中培养48小时；

3.加药：分样品组、对照组和空白组加药，继续培养48小时；

4.显色：在培养结束前4小时，每孔加入一定浓度的MTT溶液，继续培养4h后每孔加入10%DMSO，使结晶物充分溶解；

5.测吸光度值：选择波长，检测各孔吸光度值，记录结果(实验重复三次)；

6.肿瘤细胞半数抑制率的计算：抑制率(%)=[(A_对照-A_空白)-(A_加药A_空白)]/(A_对照-A_空白)×100%

以上活性测试结果在表1中显示。

表1为各实施例化合物AChE、BChE抑制活性以及细胞毒结果。

本发明中实施例相对现有药物他克林具有更高的酶抑制活性和更低的肝毒性，具有更高的治疗指数，因此可以将其应用于制备预防和治疗神经退行性疾病的药物。

上述实施例为本发明优选的实施方式，但本发明的实施方式并不受上述实施例的限制，其他的任何未背离本发明所作的改变均应为等效的置换方式，都包含在本发明的保护范围之内。

Claims (5)

1.含芳环结构的多胺衍生物，其特征在于，所述多胺衍生物为通式如式I、式II或式III所示的化合物或其药用盐：

其中，l = 1或2，m＝1或2，n＝1-8。

2.如权利要求1所述的含芳环结构的多胺衍生物，其特征在于，所述的药用盐为盐酸盐。

3.权利要求1所述含芳环结构的多胺衍生物的制备方法，其特征在于，步骤如下：

（1）饱和脂肪二胺与二叔丁氧基甲酸酐反应得到化合物a；

（2）将化合物a溶于有机溶剂中，在无机碱作用下与N-溴代烷基邻苯二甲酰亚胺反应，然后与二叔丁氧基甲酸酐反应，反应产物经过柱层析得到化合物b；

（3）将化合物b溶于无水乙醇或甲醇中，在水合肼的催化下肼解得到含化合物c的混合物；

（4）将含化合物c的混合物溶于有机溶剂中，在无机碱的作用下，与N-溴代烷基邻苯二甲酰亚胺反应，然后与二叔丁氧基甲酸酐反应经过柱层析得到化合物d； 

（5）将化合物d溶于无水乙醇或甲醇中，在水合肼催化下，肼解得到含化合物e的混合物；

（6）1-氨基萘、9-氨基蒽或1-氨基蒽醌溶于有机溶剂中，在有机碱或无机碱的催化下，与氯乙酰氯反应得到化合物f1、f2或f3；

（7）f1、f2或f3溶于乙腈或乙醇溶剂中，在有机碱或无机碱作用下，分别与a、c、e反应，对应得到g1、g2或g3；

（8）g1、g2或g3溶于乙醇或甲醇中，用盐酸的乙醇溶液脱保护得到含芳环结构的多胺衍生物盐酸盐；将盐酸盐溶于水中，调至碱性，再用有机溶剂萃取，蒸除有机溶剂得到相应的多胺衍生物式I化合物h1、式II化合物h2或式III化合物h3。

4.含芳环结构的多胺衍生物及其药用盐在制备预防、治疗神经退行性疾病药物中的应用。

5.如权利要求4所述的应用，其特征在于，所述药物剂型为片剂、丸剂、胶囊、注射剂、悬浮剂或乳剂。