CN102861278A - 具有降血脂活性的益智有效部位提取物及其制备和用途 - Google Patents

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Abstract

本发明公开了具有降血脂活性的益智有效部位提取物及其制备和用途。本发明益智有效部位提取物的各有效成分包括：寡糖、多糖类成分、黄酮类成分和二苯庚烷类化合物。本发明还公开了其制备方法，包括：(1)将益智粗粉用乙醇进行渗漉提取；(2)渗漉提取液减压浓缩，得到浓缩醇提取液；(3)浓缩醇提取液分别采用不同极性大小的有机溶剂进行萃取，将各萃取过程中的不溶物合并，干燥，即得。药效学研究显示，本发明益智有效部位提取物有较强的降血脂效应，不仅降低异常升高的TC、TG、LDL-C水平，还能提高HDL-C的水平，同时可导致HDL亚组分的组成发生变化。本发明益智有效部位提取物可用于制备成降血脂或治疗高脂血症药物。

Description

具有降血脂活性的益智有效部位提取物及其制备和用途
技术领域
本发明涉及一种中药有效部位，尤其涉及益智有效部位提取物及其制备方法，本发明还涉及益智有效部位提取物作为降血脂药物或治疗高脂血症的药理用途。
背景技术
益智为姜科山姜属植物益智Alpinia oxyphylla Miq的干燥成熟果实，为常用中药。中国药典记述，益智性味辛、温。归脾、肾经，有温脾止泻摄唾，暖肾固精缩尿之功效。现代药理研究表明：益智主要具有神经保护、抗癌、强心、舒张血管、提高免疫力、抗氧化、保护胃肠道、抗溃疡、镇痛、镇静催眠等作用。
长期高脂饮食可造成脂质代谢紊乱，促使动脉粥样硬化发生。HDL与动脉粥样硬化发生呈负相关。近年来的研究证明，高密度脂蛋白(highdensity lipoprotein，HDL)的亚组分HDL2是摄取外周胆甾醇并将其运至肝脏中代谢的主要载体，HDL2水平与冠心病的发病率及病情发展的负相关程度更加明显，故对HDL及HDL2/HDL比值的测定不仅是诊断动脉粥样硬化的指标，也是评价降脂药的指标。
发明内容
本发明目的之一是提供具有降血脂药效活性的益智有效部位提取物；
本发明目的之二是提供一种制备所述益智有效部位提取物的方法；
本发明目的之三是提供所述益智有效部位提取物的药理用途；
本发明的上述目的是通过以下技术方案来实现的：
一种具有降血脂活性的益智有效部位提取物，其有效成分包括：寡糖、多糖类成分、黄酮类成分及二苯庚烷类化合物。
本发明提供了制备所述益智有效部位提取物的方法，包括：
(1)将益智粗粉用乙醇进行渗漉提取；(2)渗漉提取液减压浓缩，得到浓缩醇提取液；(3)浓缩醇提取液分别采用不同极性大小的有机溶剂进行萃取，将各萃取过程中的不溶物合并，干燥，即得。
为了达到更好的提取效果，步骤(1)中所述的乙醇优选为50％-95％(v/v)乙醇；其中，按质量比计，益智粗粉与乙醇的质量比优选为1∶5-20；
步骤(2)中将渗漉提取液减压浓缩至1.5-2.5g生药/mL的浓缩醇提取液，其密度ρ＜1；
步骤(3)中所述的不同极性大小的有机溶剂包括正己烷、石油醚、二氯甲烷、氯仿、乙酸乙酯或正丁醇等有机溶剂；
更优选的，步骤(3)中所述的采用不同极性大小的有机溶剂进行萃取的方式包括：(a)首先，将浓缩醇提取液用正己烷萃取脱脂，正己烷萃取液减压浓缩得正己烷部分；(b)除去正己烷萃取过的水层部分中的己烷和乙醇，再接着分别用乙酸乙酯、正丁醇萃取，合并乙酸乙酯和正丁醇萃取液，减压浓缩回收溶剂，分别得到乙酸乙酯部分和正丁醇部分；(c)正丁醇萃取完后取出萃取过程中的不溶物，干燥，即得益智降血脂有效部位提取物；
步骤(a)中将浓缩醇提取液用体积比为2-0.5％的正己烷萃取脱脂；步骤(b)中优选采用旋蒸方法除去正己烷萃取过的水层部分中的己烷和乙醇，再接着分别用体积比为2-0.5％的乙酸乙酯、2-0.5％的正丁醇萃取。
本发明将益智药材进行采用现代提取分离技术制备得到了具有降血脂药效活性的有效部位。采用大鼠高脂血症模型、小鼠急性高脂血症模型的药效学研究结果显示，本发明所制备的益智有效部位提取物有较强的降血脂效应，不仅具有降低异常升高的TC、TG、LDL-C(低密度值蛋白胆固醇)水平(以降低血清LDL-C作用最明显)，还能提高HDL-C的水平，同时可导致HDL亚组分的组成发生变化，即：HDL2-C升高，HDL3-C降低，HDL2-C/HDL-C和HDL2-C/HDL3-C比值升高，提高HDL-C/LDL-C比值，本发明益智有效部位提取物降血脂作用特点表现在可使LDL-C明显降低。本发明益智有效部位提取物所具有的调血脂作用是在于阻止或延缓动脉粥样硬化的产生和发展，对治疗和预防高脂血症将发挥一定的作用。
本发明所述的“益智有效部位提取物”可以加入制备不同剂型时所需的各种辅料和药学上可接受的赋形剂或载体后，以常规的中药制剂方法制备成任何一种适宜的临床制剂，例如可以是片剂、口服液、颗粒剂、胶囊剂、软胶囊、滴丸或注射剂(粉针、冻干粉针、水针、输液等)等；其中，所述的辅料可以是抗氧络合剂、填充剂、骨架材料等；所述的药学上可接受的载体可以是木糖醇、甘露醇、乳糖、果糖、葡聚糖、葡萄糖、聚乙烯吡咯烷酮、低分子右旋糖酐、氯化钠、葡萄糖酸钙或磷酸钙中的一种或几种。
具体实施方式
下面结合具体实施例来进一步描述本发明，本发明的优点和特点将会随着描述而更为清楚。但这些实施例仅是范例性的，并不对本发明的范围构成任何限制。本领域技术人员应该理解的是，在不偏离本发明的精神和范围下可以对本发明技术方案的细节和形式进行修改或替换，但这些修改和替换均落入本发明的保护范围内。
实施例1益智降血脂有效部位提取物的制备
益智药材粉碎后过14目筛，用5倍药材重量的95％乙醇渗漉提取。提取时，先用95％乙醇浸泡，过夜后开始渗漉，收集渗漉液，然后继续用95％乙醇连续渗漉提取。合并提取液，减压浓缩回收95％乙醇，得醇提取液，其密度ρ＜1，计算95％乙醇渗漉提取率约为5％-15％之间。
取95％乙醇浓缩提取液，提取液中含醇量达0-90％，分别用体积比为0.5％的正己烷萃取3次脱脂，合并正己烷萃取液，减压浓缩得正己烷部分；采用旋蒸等方法将正己烷萃取过的水层部分中己烷和乙醇除去，在减压浓缩过程中有粘稠状物质析出，继续用体积比为0.5％的乙酸乙酯和0.5％的正丁醇各萃取3次，分别合并乙酸乙酯萃取液和正丁醇萃取液，减压浓缩回收溶剂，分别得到乙酸乙酯部分和正丁醇部分；在正丁醇萃取完后取出各萃取过程中的不溶物，合并，减压干燥，即得；计算醇提取物的不溶物提取率为4.2-10％之间。
经检测，本实施例所制备得到的益智有效部位(AOK)提取物的主要活性成分包括寡糖(oligosaccharides)、多糖类成分(polysaccharides)、黄酮类成分(flavonoids)以及二苯庚烷类化合物(diarylheptanoids，diphenylheptanoids)。
实施例2益智降血脂有效部位提取物的制备
益智药材粉碎后过20目筛，用20倍于药材重量的50％乙醇渗漉提取。提取时，先用50％乙醇浸泡，过夜后开始渗漉，收集渗漉液，然后继续用50％乙醇连续渗漉提取。合并提取液，减压浓缩回收50％乙醇，得醇提取液，其密度ρ＜1，计算50％乙醇渗漉提取率约为5％-15％之间。
取50％乙醇浓缩提取液，提取液中含醇量达0-90％，分别用体积比为2％的正己烷萃取3次脱脂，合并正己烷萃取液，减压浓缩得正己烷部分；采用旋蒸等方法将正己烷萃取过的水层部分中己烷和乙醇除去，在减压浓缩过程中有粘稠状物质析出，继续用体积比为2％的乙酸乙酯和2％的正丁醇各萃取3次，分别合并乙酸乙酯萃取液和正丁醇萃取液，减压浓缩回收溶剂，分别得到乙酸乙酯部分和正丁醇部分；在正丁醇萃取完后取出各萃取过程中的不溶物，合并，减压干燥，即得；计算醇提取物的不溶物提取率为4.2-10％之间。
经检测，本实施例所制备得到的益智有效部位(AOK)提取物的主要活性成分包括寡糖(oligosaccharides)、多糖类成分(polysaccharides)、黄酮类成分(flavonoids)以及二苯庚烷类化合物(diarylheptanoids，diphenylheptanoids)。
实施例3益智降血脂有效部位提取物的制备
益智药材粉碎后过25目筛，用15倍药材重量的85％乙醇渗漉提取。提取时，先用85％乙醇浸泡，过夜后开始渗漉，收集渗漉液，然后继续用85％乙醇连续渗漉提取。合并提取液，减压浓缩回收85％乙醇，得醇提取液，其密度ρ＜1，计算85％乙醇渗漉提取率约为5％-15％之间。
取85％乙醇浓缩提取液，提取液中含醇量达0-90％，分别用体积比为1.5％的正己烷萃取3次脱脂，合并正己烷萃取液，减压浓缩得正己烷部分；采用旋蒸等方法将正己烷萃取过的水层部分中己烷和乙醇除去，在减压浓缩过程中有粘稠状物质析出，继续用体积比为1.5％的乙酸乙酯和1.5％的正丁醇萃取3次，分别合并乙酸乙酯萃取液和正丁醇萃取液，减压浓缩回收溶剂，分别得到乙酸乙酯部分和正丁醇部分；在正丁醇萃取完后取出各萃取过程中的不溶物，合并，减压干燥，即得；计算醇提取物的不溶物提取率为4.2-10％之间。
经检测，本实施例所制备得到的益智有效部位(AOK)提取物的主要活性成分包括寡糖(oligosaccharides)、多糖类成分(polysaccharides)、黄酮类成分(flavonoids)以及二苯庚烷类化合物(diarylheptanoids，diphenylheptanoids)。
实施例4益智降血脂有效部位提取物的制备
益智药材粉碎后过10目筛，用10倍于药材重量的60％乙醇渗漉提取。提取时，先用60％乙醇浸泡，过夜后开始渗漉，收集渗漉液，然后继续用60％乙醇连续渗漉提取。合并提取液，减压浓缩回收60％乙醇，得醇提取液，其密度ρ＜1，计算60％乙醇渗漉提取率约为5％-15％之间。
取60％乙醇浓缩提取液，提取液中含醇量达0-90％，分别用体积比为1.0％的正己烷萃取3次脱脂，合并正己烷萃取液，减压浓缩得正己烷部分；采用旋蒸等方法将正己烷萃取过的水层部分中己烷和乙醇除去，在减压浓缩过程中有粘稠状物质析出，继续用体积比为1.0％的乙酸乙酯和1.0％的正丁醇萃取3次，分别合并乙酸乙酯萃取液和正丁醇萃取液，减压浓缩回收溶剂，分别得到乙酸乙酯部分和正丁醇部分；在正丁醇萃取完后取出各萃取过程中的不溶物，合并，减压干燥，即得；计算醇提取物的不溶物提取率为4.2-10％之间。
经检测，本实施例所制备得到的益智有效部位(AOK)提取物的主要活性成分包括寡糖(oligosaccharides)、多糖类成分(polysaccharides)、黄酮类成分(flavonoids)以及二苯庚烷类化合物(diarylheptanoids，diphenylheptanoids)。
实验例1本发明益智有效部位(AOK)提取物对小鼠急性实验性高血脂模型的影响实验
一、供试样品：实施例1-4所制备的益智有效部位提取物(AOK)；
二、实验方法：给小鼠腹腔注射四丁酚醛(Tyloxapol)造成急性高血脂症模型。
将30-35g雄性小鼠按体重随机分成13组，对照组灌胃给蒸馏水，其余受试药的12组按剂量灌胃给药，1小时后对照组腹腔注射生理盐水，其它各组腹腔注射Tyloxapol 900mg/kg，20小时后摘眼球取血，2000 RPM离心分离血清，检测其降脂活性，包括测定血清甘油三酯TG，总胆甾醇TC，高密度脂蛋白胆甾醇HDL-C，亚组分高密度脂蛋白胆甾醇HDL3-C和游离脂肪酸FFA的含量。计算高密度脂蛋白-2-胆甾醇(HDL2-C)和低密度脂蛋白胆甾醇LDL-C的含量。
三、实验结果
实验结果见表1。实验结果表明：本发明益智药材的有效部位(AOK)提取物能明显降低血清TC，LDL-C含量，提高HDL-C，HDL2-C含量及HDL-C/LDL-C，HDL-C/TC，HDL2-C/HDL3-C和HDL2/TC的比值，小剂量作用更佳。本实验结果提示，本发明益智药材的有效部位(AOK)提取物的调血脂作用在部分方面优于安妥明的降血脂效果。
表1益智有效部位提取物对小鼠急性实验性高脂血症模型的影响实验结果
Figure BSA00000533093100071
备注：与高脂对照比较*p＜0.05；**p＜0.01；***p＜0.001；
TG：血清甘油三酯；TC：总胆甾醇；HDL-C：高密度脂蛋白胆甾醇；HDL3-C：亚组分胆甾醇；LDL-C：低密度脂蛋白。
实验例2本发明益智有效部位(AOK)提取物对大鼠实验性高脂血症模型的影响实验
一、供试样品：实施例1-4所制备的益智有效部位提取物(AOK)；
二、实验方法：将体重172.4±3.4g的雄性SD大鼠，常规饲养适应一周后，按体重随机分成5组，每组11只。一组喂食普通饲料，其余4组喂食高脂饲料(1％胆甾醇，0.3％胆盐，10％大油和89％普通饲料)。正常和高脂对照组给予蒸馏水，受试药组分别给予安妥明350mg/kg，供试样品药组给100mg/kg，500mg/kg，每日上午按0.4ml/100g体重灌胃给药，共20天。第21天心脏穿刺取血，分离血清检测降血脂活性：测定血清甘油三酯TG，总胆甾醇TC，高密度脂蛋白胆甾醇HDL-C，亚组分高密度脂蛋白胆甾醇HDL3-C和游离脂肪酸FFA的含量。并计算亚组分高密度脂蛋白胆甾醇(HDL2-C)和低密度脂蛋白胆甾醇LDL-C的含量。
三、实验结果
实验结果见表2。实验结果表明：本发明益智有效部位(AOK)有效部位能明显降低高脂血症大鼠中的TG，TC和LDL-C含量，小剂量作用更佳。虽HDL绝对值无明显影响，但HDL亚组分的组成却发生了变化，HDL2-C升高，HDL2-C/HDL-C和HDL2-C/HDL3-C比值升高，其降血脂效果明显优于安妥明。
表2益智有效部位提取物对大鼠实验性高脂血症模型的影响实验结果
Figure BSA00000533093100081
备注：与高脂对照比较*p＜0.05；**p＜0.01；***p＜0.001；
      与安妥明照比较Δp＜0.05；ΔΔp＜0.01；ΔΔΔp＜0.001；
TG：血清甘油三酯；TC：总胆甾醇；HDL-C：高密度脂蛋白胆甾醇；HDL3-C：亚组分胆甾醇；LDL-C：低密度脂蛋白。

Claims (10)

1.具有降血脂活性的益智有效部位提取物，其特征在于，其有效成分包括：寡糖、多糖类成分、黄酮类成分和二苯庚烷类化合物。
2.一种制备权利要求1所述益智有效部位提取物的方法，包括：
(1)将益智粗粉用乙醇进行渗漉提取；(2)渗漉提取液减压浓缩，得到浓缩醇提取液；(3)浓缩醇提取液分别采用不同极性大小的有机溶剂进行萃取，将各萃取过程中所得到的不溶物合并，干燥，即得。
3.按照权利要求2所述的方法，其特征在于：按v/v计，步骤(1)中所述的乙醇为50％-95％乙醇。
4.按照权利要求2所述的方法，其特征在于：按质量比计，步骤(1)中益智粗粉与乙醇的质量比为1∶5-20。
5.按照权利要求2所述的方法，其特征在于：步骤(2)中将渗漉提取液减压浓缩至1.5-2.5g生药/mL的浓缩醇提取液，其密度ρ＜1。
6.按照权利要求2所述的方法，其特征在于：步骤(3)中所述的不同极性大小的有机溶剂包括正己烷、石油醚、二氯甲烷、氯仿、乙酸乙酯或正丁醇。
7.按照权利要求2所述的方法，其特征在于：步骤(3)中所述的采用不同极性大小的有机溶剂进行萃取的方式包括：(a)首先，将浓缩醇提取液用正己烷萃取脱脂，正己烷萃取液减压浓缩得正己烷部分；(b)除去正己烷萃取过的水层部分中的己烷和乙醇，接着分别用乙酸乙酯、正丁醇萃取，合并乙酸乙酯和正丁醇萃取液，减压浓缩回收溶剂，分别得到乙酸乙酯部分和正丁醇部分；(c)正丁醇萃取完后取出各萃取过程中的不溶物，干燥，即得。
8.按照权利要求7所述的方法，其特征在于：步骤(a)中将浓缩醇提取液用体积比为2-0.5％的正己烷萃取脱脂；步骤(b)中采用旋蒸方法除去正己烷萃取过的水层部分中的己烷和乙醇，再接着分别用体积比为2-0.5％的乙酸乙酯、2-0.5％的正丁醇萃取。
9.权利要求1所述的益智有效部位提取物在制备降血脂相关药物或保健品中的用途。
10.一种治疗或预防高脂血症的药物组合物，其特征在于：由治疗上有效量的权利要求1所述的益智有效部位提取物和药学上可接受的载体组成。
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