CN102861102A - 一种纳米银抑菌喷剂 - Google Patents
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Abstract
本发明涉及一种纳米银抑菌喷剂,其成分为纳米银离子胶体溶液、稳定剂、渗透压调节剂、pH调节剂、保湿剂以及发泡剂。本发明的纳米银抑菌喷剂以无硝酸根的银离子胶体为抑菌成分,具有抑菌效果好、质量稳定、抑菌快速且无刺激性等诸多优点,其对大肠杆菌、金黄色葡萄球菌、白色念珠菌、铜绿假单胞菌、流感嗜血杆菌、肺炎球菌、乙型链球菌等有较强抑制作用,适用于鼻腔、女性阴道等细菌性、真菌性感染的疾病。本发明制备方法简单,使用方便,疗效显著。
Description
技术领域
本发明涉及一种抑菌喷剂,具体涉及一种纳米银抑菌喷剂。
背景技术
纳米银作为最新一代的天然抗菌剂,纳米银杀菌具有广谱抗菌、无耐药性和安全无毒的特点。国内外研究人员研制出的相应的纳米银产品已应用于各领域。随着抗生素耐药性的日益严重,纳米银在消毒杀菌领域的研究和应用越来越受到了广泛关注,成为极具发展前景的一代抗菌药物。
研究表明,纳米银具有杀菌作用是纳米银粒子所具有的银离子,银离子通过以下三种途径抑制细菌的繁殖:
1、银离子攻击细菌内部的代谢酶中的—SH基团,使细菌的代谢酶失去活性,阻碍细菌的正常代谢;
2、银离子与细菌细胞壁上暴露的肽聚糖反应,使其不能将能量转运进细胞内,阻碍了细菌的正常生理活动;
3、银离子与细菌DNA碱性基结合改变了细菌DNA结构,抑制了DNA转录。尽管公认的纳米银抑菌作用是通过银离子作用的,但由于银离子溶液的稳定性较差,保质期时间较短,因此一般的纳米银产品中所用的纳米银大多是通过物理或化学的方法得到的纳米银级的金属银粒,如专利CN1857309A妇用纳米银喷剂中的银粉,其抑菌效果和抑菌速度均受到限制。迄今仅发现以银离子为抑菌源是通过硝酸银溶液,如专利CN102513544A。但硝酸银的稳定性和长期使用硝酸银溶液可出现局部红斑、充血、烧灼感等皮肤刺激症状限制了硝酸银溶液的使用。同时由于硝酸银的不稳定性,其溶液总伴随这亚硝酸盐的存在,而亚硝酸盐是一种强的致癌物。
因此,为解决上述技术问题,确有必要提供一种纳米银抑菌喷剂,以克服传统洗抑菌喷剂的所述缺陷。
发明内容
为解决上述问题,本发明的目的在于提供一种抑菌效果好、质量稳定、抑菌快速且无刺激性的纳米银抑菌喷剂。
为实现上述目的,本发明采取的技术方案为:一种纳米银抑菌喷剂,其成分为纳米银离子胶体溶液、稳定剂、渗透压调节剂、pH调节剂、保湿剂以及发泡剂。
本发明的纳米银抑菌喷剂进一步为:所述纳米银离子胶体溶液、稳定剂、渗透压调节剂、pH调节剂、保湿剂以及发泡剂的重量百分比分别为:10%-60%,0.5%-10%,0.5%-10%,0.1%-1%,0.5%-5%以及5%-15%,余量为去离子水。
本发明的纳米银抑菌喷剂进一步为:所述纳米银离子胶体溶液具体为无硝酸根的银离子胶体溶液。
本发明的纳米银抑菌喷剂进一步为:所述纳米银离子胶体溶液中的纳米银离子胶体的粒径为1nm~100nm,浓度以银量计为10ppm~1000ppm。
本发明的纳米银抑菌喷剂进一步为:所述纳米银离子胶体以单片微计算机自动监控浓度的银电极—电稳流与逆渗透分离技术相结合而制备。
本发明的纳米银抑菌喷剂进一步为:所述纳米银离子胶体溶液中纳米银离子胶体和去离子水的重量比为1:100。
本发明的纳米银抑菌喷剂进一步为:所述稳定剂具体为柠檬酸二钠、柠檬酸三钠、甘氨酸、甘油、葡萄糖、甘露醇、聚乙二醇、乙二胺、乙二胺四乙酸中的一种或多种。
本发明的纳米银抑菌喷剂进一步为:所述渗透压调节剂具体为柠檬酸二钠、柠檬酸三钠、甘氨酸、甘油、葡萄糖、甘露醇、聚乙二醇、乙二胺、乙二胺四乙酸中的一种或多种。
与现有技术相比,本发明具有如下有益效果:本发明的纳米银抑菌喷剂以无硝酸根的银离子胶体为抑菌成分,具有抑菌效果好、质量稳定、抑菌快速且无刺激性等诸多优点,其对大肠杆菌、金黄色葡萄球菌、白色念珠菌、铜绿假单胞菌、流感嗜血杆菌、肺炎球菌、乙型链球菌等有较强抑制作用,适用于鼻腔、女性阴道等细菌性、真菌性感染的疾病。本发明制备方法简单,使用方便,疗效显著。
具体实施方式
以下对本发明的纳米银抑菌喷剂进行进一步说明,但不作为对本发明的限制。
本发明的纳米银抑菌喷剂主要成分为纳米银离子胶体溶液、稳定剂、渗透压调节剂、pH调节剂、保湿剂以及发泡剂。所述纳米银离子胶体溶液、稳定剂、渗透压调节剂、pH调节剂、保湿剂以及发泡剂的重量百分比分别为:10%-60%,0.5%-10%,0.5%-10%,0.1%-1%,0.5%-5%以及5%-15%,余量为去离子水。
其中,所述纳米银离子胶体溶液具体为无硝酸根的银离子胶体溶液。在溶液中,纳米银离子胶体和去离子水的重量比为1:100。其中的纳米银离子胶体的粒径为1nm~100nm,浓度以银量计为10ppm~1000ppm。所述纳米银离子胶体是以单片微计算机自动监控浓度的银电极—电稳流与逆渗透分离技术相结合而制备的,从阳极上电解出的银在溶液中处于离子状态,此溶液存在明显的丁达尔现象,这是因为银离子在水溶液中与氢氧根形成氢氧化银胶体溶液。氢氧化银是一种软酸硬碱盐,稳定性较差,当遇到细菌上的巯基(-SH)时,银离子可与巯基结合形成软酸和软碱相结合的盐,从而抑制细菌作用的发挥。由于本发明的抑菌成分银源直接是银离子,因此其抑菌速度和抑菌效果均远优于通过物理或化学方法制备的纳米级的金属银制剂。本发明的制剂在相同的抑菌效果前提下,其银的用量是现有纳米级金属银制剂的1%-10%。
所述稳定剂用于增加纳米银胶体的稳定性,其具体为柠檬酸二钠、柠檬酸三钠、甘氨酸、甘油、葡萄糖、甘露醇、聚乙二醇、乙二胺、乙二胺四乙酸中的一种或多种。所加入的稳定剂均可和银离子形成较稳定的络合物或螯合物,这显著增大了银的稳定常数,保证了本发明制剂在有效期内的质量稳定。而在使用过程中,由于细菌蛋白上的巯基可与银离子形成更稳定的配合物,所以制剂中原银离子配合物与溶液中游离的银离子电离平衡被打破,银离子不断从原配合物中释放出来与细菌蛋白上的巯基结合,发挥抑菌作用。
所述渗透压调节剂用于提高银离子的抑菌速度,其具体为柠檬酸二钠、柠檬酸三钠、甘氨酸、甘油、葡萄糖、甘露醇、聚乙二醇、乙二胺、乙二胺四乙酸中的一种或多种。本发明研究出适宜的渗透压调节剂,促进银离子透过细胞膜进入细胞核中的速度,可有效保证本发明的制剂在2分钟内即达到最佳的抑菌效果。
为了保证本发明的纳米银抑菌喷剂的安全性、有效性和质量可控性,进行了系统的实验研究。多项实验与研究显示,发明的纳米银喷剂对鼻腔和阴道黏膜等部位均无刺激、无毒性、无明显的不良反应,对人体的正常的生理功能器官毫无影响。能有效抑制大肠杆菌、金黄色葡萄球菌、白色念珠菌、铜绿假单胞菌等。同时考察了高温、光照等条件下纳米银喷剂的稳定性,制订了本发明制剂的贮存条件和有效期,并建立了通过原子吸收等检测制剂质量的标准与方法。
实施方法
实施列1、取120ml纳米银胶体,加入20ml甘油,10ml聚乙二醇-400,起泡剂适量, 加去离子水至1000ml,搅拌均匀,即可制得1000ml的可用于妇科抑菌喷剂。
实施列2、取210 μg/ml纳米银胶体143 ml、吐温-80 5 ml、3.55 mol/L乙酸溶液20 ml、柠檬酸三钠20.3~24.8 g,矫味剂适量, 用去离子水定容至1000ml,摇匀,即得30 μg/ml纳米银溶液1000 ml。可用于鼻腔抑菌喷雾剂。
对实施例1、2进行抑菌试验
将试验菌24h斜面培养物用PBS洗下,稀释成浓度为3×106 cfu/ml的菌悬液。取药液或空白基质5ml 1管;取上述菌悬液0.1ml置于管中,开始计时,作用2min,5min,10min,20min,用无菌吸管分别移取药液管中溶液0.5ml投入含4.5mlPBS的试管内,充分混匀,作用10分钟,适当稀释,分别吸取1ml置于两个平皿,用凉至60℃的营养琼脂培养基(用于大肠菌、金葡菌、绿脓菌)或沙氏琼脂培养基(用于白念菌)20ml作倾注, 转动平皿,使其充分均匀,琼脂凝固后翻转平板,37℃培养48h。作活菌菌落计数。用双蒸水代替药液做相同的处理作为阳性对照管。
计算抑菌率:X=(A一B)/A ;X:抑菌率,%;A:阳性对照液平均菌落数;B:被试药液样品平均菌落数,实验结果如下:
表1 抑菌率实验结果
实验结果显示:
实例1 20μg/ml对大肠杆菌,金黄色葡萄球菌,白色念珠菌,铜绿假单胞菌2min,5min,10min,20min抑菌率均为100%。
实例2 30μg/ml对大肠杆菌,金黄色葡萄球菌,白色念珠球菌,铜绿假单胞菌2min,5min,10min,20min抑菌率均大于87%。
过敏试验与眼刺激性试验
1、过敏性实验
将豚鼠随机分成3组,每组16只,分别为试验组、阴性对照组和阳性对照组。于试验前24 h,将豚鼠背部两侧去毛(3 cm×3 cm)。对试验组豚鼠,给予受试物纳米银妇科抑菌喷剂诱导和激发处理。阳性对照组给予阳性致敏物2,4-二硝基氯苯诱导和激发处理。阴性对照组仅给以纳米银妇科抑菌喷剂激发处理。
依据“皮肤过敏反应评分标准”评分,计算各组豚鼠的反应评分平均值。根据试验组与阴性对照组豚鼠皮肤反应的差别,判断受试物纳米银喷剂的皮肤过敏作用,按出现过敏反应的动物比例计算致敏率,依据2“致敏强度分级标准”判断受试物纳米银妇科抑菌喷剂致敏反应的强度。
致敏率计算公式为:致敏率/% =[皮肤过敏反应阳性(不论程度轻重)的动物例数/该组受试动物总数]×100%。实验结果如下:
表2 纳米银妇科抑菌喷剂的皮肤致敏实验结果
表3 纳米银鼻腔抑菌喷雾剂的皮肤致敏实验结果
通过纳米银妇科抑菌喷剂与鼻腔抑菌喷剂的皮肤致敏实验结果可以看出,纳米银妇科抑菌喷剂与鼻腔抑菌喷剂有极轻度致敏性。
2、眼刺激性试验
取家兔,试验前先观察并记录每只家兔角膜、虹膜及结膜情况,已有病变或炎症者,剔除不用。取合格家兔3只,吸取受试物0.1ml滴入每只家兔右眼结膜囊内,左眼滴入0.1ml生理盐水作为正常对照。滴受试物纳米银妇科抑菌喷剂后,将右眼被动闭合4s,30s 后用生理盐水冲洗。于滴眼后1h、24h、48h、72h、7d、14d 和21d,肉眼观察家兔眼结膜、虹膜和角膜的损伤与恢复情况。如果72h内未出现刺激反应或第7天或第14天,眼睛刺激反应完全恢复,即可提前终止试验。按“家兔急性眼刺激反应的评分标准”对家兔眼角膜、虹膜和结膜的急性刺激反应进行评分,并分别计算每只动物在三个不同观察时间(24h、48h和72h)的角膜损害、虹膜损害、结膜充血和结膜水肿四方面的“平均评分”(即每只动物的24h、48h和 72h 评分之和除以观察数 3)。分别以动物眼角膜、虹膜和结膜充血、水肿的平均评分和恢复时间,判定受试物纳米银妇科抑菌喷剂对眼睛的刺激强度。实验结果如下表
表4 妇科喷剂家兔眼刺激性实验结果
由以上实验结果可见,纳米银妇科抑菌喷剂对眼睛无刺激性。
表5 家兔眼刺激性实验结果
由以上结果可见,纳米银妇科抑菌喷剂对眼睛无刺激性。
实施例1 阴道粘膜刺激性实验
实验分为染毒组、阴性对照组和空白对照组,每组 3 只家兔;
一次阴道黏膜刺激试验的染毒方法:将动物仰面固定,暴露出会阴和阴道口。将导管用纳米银妇科抑菌喷剂湿润后轻柔地插入阴道(4cm~5cm),并用注射器缓慢注入2ml 纳米银妇科抑菌喷剂,抽出导管,完成染毒。阴性对照组动物用生理盐水作同样处理。空白对照组不做任何处理。
多次阴道黏膜刺激试验的染毒方法:按上述2.1.2的染毒方法,每隔 24h 重复染毒一次,连续 5 天。阴性对照组动物用生理盐水作同样处理。空白对照组不做任何处理。
末次染毒后 24h,采用气栓法处死动物,剖腹取出完整的阴道,纵向切开,肉眼观察是否有充血、水肿等表现,供病理取材时参考。然后将阴道放入 10%福尔马林溶液中固定 24h以上,选取阴道的两端和中央三个部位的组织制片,HE 染色后,进行组织病理学检查。
实验结果
三组家兔一般状况良好,毛色光洁,活动自如,饮食正常,体质量增加,阴道外观无红肿充血,病理组织学检查显示,空白对照组阴道黏膜上皮细胞形态未见异常,未见血管扩张,肌层、外膜层无白细胞浸润,未见血管充血。阴性对照组和给药组阴道黏膜上皮细胞不完整,轻微破损,肌层、外膜层有少量白细胞浸润。组织破损可能是由于给药器械造成。结果见下表。
表6 阴道黏膜刺激反应结果
依据病理学结果显示,纳米银妇科抑菌喷剂对兔阴道粘膜刺激强度为无。
稳定性实验
实验包括加速试验和室温留样稳定性试验。加速试验:将纳米银抑菌喷剂,模拟上市包装,置54 ℃恒温箱内14天。于放置前、后分别测定有效成分含量。室温留样:将纳米银抑菌喷剂,模拟上市包装,置温度为25 ℃±2 ℃环境下,分别于第0、3、6、9和12个月末取样,测定有效成分含量。
表7加速试验结果
表8 室温留样试验结果
由试验结果可以看出,纳米银抑菌喷剂在54℃下,颜色无变化,无沉淀现象,且含量下降<15%。经过12个月的室温留样考察,喷雾剂同样无颜色变化,无沉淀现象,且含量在标准规定范围内。由此可见纳米银抑菌喷剂的质量是稳定可靠的。
以上的具体实施方式仅为本创作的较佳实施例,并不用以限制本创作,凡在本创作的精神及原则之内所做的任何修改、等同替换、改进等,均应包含在本创作的保护范围之内。
Claims (8)
1.一种纳米银抑菌喷剂,其特征在于:其成分为纳米银离子胶体溶液、稳定剂、渗透压调节剂、pH调节剂、保湿剂以及发泡剂。
2.如权利要求1所述的纳米银抑菌喷剂,其特征在于:所述纳米银离子胶体溶液、稳定剂、渗透压调节剂、pH调节剂、保湿剂以及发泡剂的重量百分比分别为:10%-60%,0.5%-10%,0.5%-10%,0.1%-1%,0.5%-5%以及5%-15%,余量为去离子水。
3.如权利要求1所述的纳米银抑菌喷剂,其特征在于:所述纳米银离子胶体溶液具体为无硝酸根的银离子胶体溶液。
4.如权利要求1所述的纳米银抑菌喷剂,其特征在于:所述纳米银离子胶体溶液中的纳米银离子胶体的粒径为1nm~100nm,浓度以银量计为10ppm~1000ppm。
5.如权利要求4所述的纳米银抑菌喷剂,其特征在于:所述纳米银离子胶体以单片微计算机自动监控浓度的银电极—电稳流与逆渗透分离技术相结合而制备。
6.如权利要求5所述的纳米银抑菌喷剂,其特征在于:所述纳米银离子胶体溶液中纳米银离子胶体和去离子水的重量比为1:100。
7.如权利要求1所述的纳米银抑菌喷剂,其特征在于:所述稳定剂具体为柠檬酸二钠、柠檬酸三钠、甘氨酸、甘油、葡萄糖、甘露醇、聚乙二醇、乙二胺、乙二胺四乙酸中的一种或多种。
8.如权利要求1所述的纳米银抑菌喷剂,其特征在于:所述渗透压调节剂具体为柠檬酸二钠、柠檬酸三钠、甘氨酸、甘油、葡萄糖、甘露醇、聚乙二醇、乙二胺、乙二胺四乙酸中的一种或多种。
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Legal Events
Date | Code | Title | Description |
---|---|---|---|
C06 | Publication | ||
PB01 | Publication | ||
C10 | Entry into substantive examination | ||
SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
C12 | Rejection of a patent application after its publication | ||
RJ01 | Rejection of invention patent application after publication |
Application publication date: 20130109 |