CN105268989A - 一种抑制霉菌Gra04生长的纳米银制剂及其制备方法 - Google Patents
一种抑制霉菌Gra04生长的纳米银制剂及其制备方法 Download PDFInfo
- Publication number
- CN105268989A CN105268989A CN201510730645.5A CN201510730645A CN105268989A CN 105268989 A CN105268989 A CN 105268989A CN 201510730645 A CN201510730645 A CN 201510730645A CN 105268989 A CN105268989 A CN 105268989A
- Authority
- CN
- China
- Prior art keywords
- preparation
- nano silver
- gra04
- nano
- mol
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Pending
Links
Abstract
本发明公开了一种抑制霉菌Gra04生长的纳米银制剂及其制备方法，该纳米银制剂中纳米银的粒径为10～40nm，纳米银的浓度为4.04×10-5mol/L～16.16×10-5mol/L；其制备方法为先将NaOH水溶液加至AgNO3水溶液中，搅拌，弃去上清，再将稀氨水加至所得Ag2O沉淀中，搅拌，最后将PVP加至所得混合液中，搅拌，置于光化学反应仪中反应，离心，所得沉淀即为纳米银制剂。本发明所得纳米银制剂不仅成本低、稳定性强，而且缓释持久，不易产生耐药性。
Description
技术领域
本发明属于临床医学技术领域，具体涉及一种抑制霉菌Gra04生长的纳米银制剂及其制备方法。
背景技术
曲霉菌是一类条件致病真菌，广泛存在于自然界中，而其中烟曲霉菌更是主要致病菌，占曲霉80％，是白血病和晚期肿瘤患者严重真菌继发感染病原菌，发病率仅次于白色念珠菌病。另一方面，由烟曲霉菌引起的急性系统性或播散性感染严重危胁免疫力低下病人的生命，常预后不良，死亡率高达50％，甚至100％。近年来随着侵入性治疗的运用、骨髓移植、广谱抗生素的滥用等情况，烟曲霉菌感染呈上升趋势。
银是一种亮白色金属，它的一个重要特性是能杀灭细菌、真菌和霉菌等微生物。银离子Ag+、可溶性银化合物、含银的离子交换剂、比表面积极大的胶态银、纳米银等均具有杀菌作用，其中，银离子Ag+和纳米银对微生物的杀灭效果最好。然而，银离子Ag+在溶液中不稳定性，而限制了其推广应用。而纳米银比银离子Ag+具有更稳定的物理、化学特性，在电学、光学和催化等方面具有十分优异的特性。与抗菌药物及其他药物相比，纳米银具有极大的比表面积，提高了与细菌的亲和力。纳米银具有很强的穿透力，能充分接触并攻击病原体，从而发挥更强的生物效应，与传统无机抗菌剂效果相比，所具有的强效消毒杀菌功能有了质的飞跃，具有广谱、强杀菌、作用持久、无过敏、对人体无毒副反应等优点。这种活性极强且具有超强抗菌能力的纳米银微粒可应用于生活中各种领域。
发明内容
本发明的目的是克服现有技术的不足而提供一种抑制霉菌Gra04生长的纳米银制剂及其制备方法，该制剂不仅成本低、稳定性强，而且缓释持久，不易产生耐药性。
一种抑制霉菌Gra04生长的纳米银制剂，该制剂中纳米银的粒径为10～40nm，纳米银的浓度为4.04×10-5mol/L～16.16×10-5mol/L。
上述纳米银制剂的制备方法，包括以下步骤：
步骤1，将NaOH水溶液加至AgNO3水溶液中，搅拌，弃去上清，得到Ag2O沉淀；
步骤2，将稀氨水加至步骤1所得Ag2O沉淀中，搅拌，得混合液；
步骤3，将PVP加至步骤2所得混合液中，搅拌，置于光化学反应仪中反应，离心，所得沉淀即为纳米银制剂。
进一步地，步骤1中NaOH水溶液和AgNO3水溶液的浓度均为0.1mol/L，NaOH和AgOH的摩尔比为1.2：1。
进一步地，步骤2中稀氨水的质量分数为2％。
进一步地，步骤3中PVP的用量相当于AgNO3质量的5～9倍。
进一步地，步骤3中光化学反应仪的反应条件为500W汞灯、254nm紫外灯，灯管距离液面高度为9cm。
与目前应用在临床上的抗真菌药物相比，本发明的优点在于：
1.纳米银具有广谱、强杀菌、作用持久、无过敏、对人体无毒副反应等优点，其对烟曲霉菌Gra04有较好的杀灭和抑制作用，稳定性强，缓释耐久。
2.本发明可以减少烟曲霉菌Gra04的耐药性产生，这对临床上挽救危重病人、治疗并发症、保护其免疫力等有着重要意义。
附图说明
图1为纳米银制剂的TEM表征图谱，其中，图a中纳米银制剂粒径为10～15nm、图b中纳米银制剂粒径为20～25nm、图c中纳米银制剂粒径为30～40nm；
图2为纳米银制剂对Gra04的平板菌落计数法试验结果，其中a为不加纳米银的对照组，b、c、d图分别对应粒径10～15nm、20～25nm、30～40nm的纳米银，浓度均为8.08×10-5mol/L。
具体实施方式
实施例1纳米银制剂对Gra04的平板菌落计数法试验
纳米银制剂的制备方法，包括以下步骤：
步骤1，将相当于AgNO3量1.2倍(摩尔比)的0.1mol/L的NaOH水溶液滴加到0.1mol/LAgNO3水溶液中，搅拌形成Ag2O沉淀，静置，倾去上层清液，反复多次；
步骤2，用量筒量取质量分数为2％的稀氨水，加至上述Ag2O沉淀中，快速搅拌5～10min左右，得到澄清透明的溶液；
步骤3，将相当于AgNO3质量5倍、7倍、9倍的PVP加入上述溶液中，标记为样品一(m(AgNO3)＝3.264g)、样品二(m(AgNO3)＝19.04g)、样品三(m(AgNO3)＝71.41g)，混合均匀后，置于光化学反应仪中，条件为汞灯500W、波长254nm左右的紫外灯下照射1h，灯管距离液面高度为9cm，得到的三种溶液进行离心，离心后得到浓度为8.08×10-5mol/L，粒径分别为10～15nm、20～25nm、30～40nm的纳米银制剂样品一、样品二、样品三。图1为纳米银制剂中纳米银颗粒的TEM图，其中，纳米银颗粒呈良好的单分散球型，大小均匀，粒径分布窄，不团聚。
平板菌落计数法试验：
将收集到的Gra04接种到YAG培养基(0.5％酵母提取物，2％琼脂，2％葡萄糖，微量元素)，置于37℃生化培养箱活化2天后，用5～10mL含有0.002％吐温80的磷酸盐缓冲液冲洗平皿表面收集新鲜孢子，计数109个/mL。分别取100μL三种不同粒径的纳米银制剂加到1.5mL的离心管中，标为样品1、样品2、样品3，对这三个样品分别用无菌水进行两次对半稀释。取10μL计数过的孢子加入到以上不同浓度的纳米银制剂中，置于37℃，220rpm摇床25min，取10μL的混合液加到990μL的无菌水中，取100μL均匀涂布到固体培养基中，生长2天后观察、拍照。由图2可知图a空白对照所得培养基中霉菌生长情况良好，图b、c、d添加了三种不同粒径纳米银制剂所得培养基中均无霉菌生长，说明浓度为8.08×10-5的三种粒径的纳米银都具有抑菌作用。
实施例2同一粒径不同浓度的纳米银制剂对Gra04抑菌率的测定试验
纳米银制剂的制备方法，包括以下步骤：
步骤1，将相当于AgNO3量1.2倍(摩尔比)的0.1mol/L的NaOH水溶液滴加到0.1mol/LAgNO3水溶液中，搅拌形成Ag2O沉淀，静置，倾去上层清液，反复多次；
步骤2，用量筒量取质量分数为2％的稀氨水，加至上述Ag2O沉淀中，快速搅拌5～10min左右，得到澄清透明的溶液；
步骤3，将相当于AgNO3质量9倍的PVP加入上述溶液中，标记为样品一(m(AgNO3)＝6.58g)、样品二(m(AgNO3)＝4.93g)、样品三(m(AgNO3)＝3.26g)、样品四(m(AgNO3)＝1.64g)、样品五(m(AgNO3)＝0.82g)，混合均匀后，置于光化学反应仪中，条件为汞灯500W、波长254nm左右的紫外灯下照射1h，灯管距离液面高度为9cm，得到的溶液进行离心，离心后得到粒径为10～15nm，浓度分别为16.16×10-5mol/L、12.12×10-5mol/L、8.08×10-5mol/L、4.04×10-5mol/L、2.02×10-5mol/L的纳米银制剂样品一、样品二、样品三、样品四、样品五。
测定将粒径约为10～15nm的纳米银稀释不同倍数后对Gra04的抗菌率：
活化培养收集到的Gra04菌株36小时，用5～10mL含有0.002％吐温80的磷酸盐缓冲液冲洗平皿表面收集新鲜孢子，计数2×108个/mL。取400μL不同浓度和粒径的纳米银制剂于离心管中，设置一组对照组，给样品标号。分别取40μL的菌悬液加到离心管中，震荡，与纳米银制剂完全混合。在37℃，220rpm摇床20min。取10μL的混合液加入到990μL的无菌水中，取150uL的混合液和30mL的培养基中倒两个固体培养基，培养24h后计数。结果如下表所示：
由上表可知，同一粒径纳米银系列稀释浓度的实验中，在2.02×10-5mol/L～16.16×10-5mol/L范围内纳米银的抑菌效果都非常显著，尤其8.08×10-5mol/L和4.04×10-5mol/L能完全抑制所有真菌孢子的生长。
实施例3同一浓度不同粒径的纳米银制剂对Gra04抑菌率的测定实验
纳米银制剂的制备方法，包括以下步骤：
步骤1，将相当于AgNO3量1.2倍(摩尔比)的0.1mol/L的NaOH水溶液滴加到0.1mol/LAgNO3水溶液中，搅拌形成Ag2O沉淀，静置，倾去上层清液，反复多次；
步骤2，用量筒量取质量分数为2％的稀氨水，加至上述Ag2O沉淀中，快速搅拌5～10min左右，得到澄清透明的溶液；
步骤3，将相当于AgNO3质量5倍、7倍、9倍的PVP加入上述溶液中，标记为样品样品一(m(AgNO3)＝4.93g)、样品二(m(AgNO3)＝28.75g)、样品三(m(AgNO3)＝108.18g)，混合均匀后，置于光化学反应仪中，条件为汞灯500W、波长254nm左右的紫外灯下照射1h，灯管距离液面高度为9cm，得到的溶液进行离心，离心后得到浓度为8.08×10-5mol/L，粒径分别为10～15nm、20～25nm、30～40nm的纳米银制剂样品一、样品二、样品三。
活化培养收集到的Gra04菌株36小时，用5～10mL含有0.002％吐温80的磷酸盐缓冲液冲洗平皿表面收集新鲜孢子，计数2×108个/mL。取400μL不同浓度和粒径的纳米银制剂于离心管中，设置一组对照组，给样品标号。分别取40μL的菌悬液加到离心管中，震荡，与纳米银制剂完全混合。在37℃，220rpm摇床20min。取10μL的混合液加入到990μL的无菌水中，取150uL的混合液和30mL的培养基中倒两个固体培养基，培养24h后计数。结果如下：
由上表可知，同一浓度(8.08×10-5mol/L)的纳米银制剂，在10nm～40nm粒径范围内抑菌效果都非常显著，尤其10～25nm的纳米银对真菌孢子的抑菌作用最明显。
Claims (6)
1.一种抑制霉菌Gra04生长的纳米银制剂，其特征在于：纳米银的粒径为10～40nm，纳米银的浓度为4.04×10-5mol/L～16.16×10-5mol/L。
2.权利要求１所述的抑制霉菌Gra04生长的纳米银制剂的制备方法，其特征在于：包括以下步骤：
步骤1，将NaOH水溶液加至AgNO3水溶液中，搅拌，弃去上清，得到Ag2O沉淀；
步骤2，将稀氨水加至步骤1所得Ag2O沉淀中，搅拌，得混合液；
步骤3，将PVP加至步骤2所得混合液中，搅拌，置于光化学反应仪中反应，离心，所得沉淀即为纳米银制剂。
3.根据权利要求１所述的抑制霉菌Gra04生长的纳米银制剂的制备方法，其特征在于：步骤1中NaOH水溶液和AgNO3水溶液的浓度均为0.1mol/L，NaOH和AgOH的摩尔比为1.2：1。
4.根据权利要求１所述的抑制霉菌Gra04生长的纳米银制剂的制备方法，其特征在于：步骤2中稀氨水的质量分数为2%。
5.根据权利要求１所述的抑制霉菌Gra04生长的纳米银制剂的制备方法，其特征在于：步骤3中PVP的用量相当于AgNO3质量的5～9倍。
6.根据权利要求１所述的抑制霉菌Gra04生长的纳米银制剂的制备方法，其特征在于：步骤3中光化学反应仪的反应条件为500W汞灯、254nm紫外灯，灯管距离液面高度为9cm。
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CN201510730645.5A CN105268989A (zh) | 2015-10-30 | 2015-10-30 | 一种抑制霉菌Gra04生长的纳米银制剂及其制备方法 |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CN201510730645.5A CN105268989A (zh) | 2015-10-30 | 2015-10-30 | 一种抑制霉菌Gra04生长的纳米银制剂及其制备方法 |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| CN105268989A true CN105268989A (zh) | 2016-01-27 |
Family
ID=55139314
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| CN201510730645.5A Pending CN105268989A (zh) | 2015-10-30 | 2015-10-30 | 一种抑制霉菌Gra04生长的纳米银制剂及其制备方法 |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| CN (1) | CN105268989A (zh) |
Cited By (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN108353946A (zh) * | 2018-04-28 | 2018-08-03 | 陈建峰 | 一种链霉素杀菌剂及其制备方法 |
| CN110710454A (zh) * | 2019-11-18 | 2020-01-21 | 广州市科瑨材料科技有限公司 | 氨基酸络合银脂质体及其制备方法和植物组织培养基 |
Citations (5)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US6054495A (en) * | 1996-02-20 | 2000-04-25 | The United States Of America As Represented By The Secretary Of The Navy | Synthesis of unagglomerated metal nano-particles at membrane interfaces |
| CN102228995A (zh) * | 2011-06-30 | 2011-11-02 | 华南理工大学 | 一种多糖-纳米银溶胶及其制备方法 |
| CN102935513A (zh) * | 2012-10-17 | 2013-02-20 | 武汉康银高科有限公司 | 一种稳定的纳米银溶胶与制备方法 |
| CN103961738A (zh) * | 2014-04-11 | 2014-08-06 | 武汉工程大学 | 一种壳聚糖-纳米银伤口敷料及其制备方法 |
| CN104174868A (zh) * | 2014-08-24 | 2014-12-03 | 湖南科技大学 | 一种以紫外光还原银氨溶液制备水溶性银纳米簇的方法 |
-
2015
- 2015-10-30 CN CN201510730645.5A patent/CN105268989A/zh active Pending
Patent Citations (5)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US6054495A (en) * | 1996-02-20 | 2000-04-25 | The United States Of America As Represented By The Secretary Of The Navy | Synthesis of unagglomerated metal nano-particles at membrane interfaces |
| CN102228995A (zh) * | 2011-06-30 | 2011-11-02 | 华南理工大学 | 一种多糖-纳米银溶胶及其制备方法 |
| CN102935513A (zh) * | 2012-10-17 | 2013-02-20 | 武汉康银高科有限公司 | 一种稳定的纳米银溶胶与制备方法 |
| CN103961738A (zh) * | 2014-04-11 | 2014-08-06 | 武汉工程大学 | 一种壳聚糖-纳米银伤口敷料及其制备方法 |
| CN104174868A (zh) * | 2014-08-24 | 2014-12-03 | 湖南科技大学 | 一种以紫外光还原银氨溶液制备水溶性银纳米簇的方法 |
Non-Patent Citations (2)
| Title |
|---|
| 张璐璐等: "不同制法纳米银的抗真菌活性研究", 《药学实践杂志》 * |
| 王瑜等: "不同粒径纳米银抗霉菌性能研究", 《皮革科学与工程》 * |
Cited By (3)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN108353946A (zh) * | 2018-04-28 | 2018-08-03 | 陈建峰 | 一种链霉素杀菌剂及其制备方法 |
| CN110710454A (zh) * | 2019-11-18 | 2020-01-21 | 广州市科瑨材料科技有限公司 | 氨基酸络合银脂质体及其制备方法和植物组织培养基 |
| CN110710454B (zh) * | 2019-11-18 | 2021-03-16 | 广州市科瑨材料科技有限公司 | 氨基酸络合银脂质体及其制备方法和植物组织培养基 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| Nandini et al. | Trichogenic-selenium nanoparticles enhance disease suppressive ability of Trichoderma against downy mildew disease caused by Sclerospora graminicola in pearl millet | |
| Cai et al. | Magnesium oxide nanoparticles: effective agricultural antibacterial agent against Ralstonia solanacearum | |
| Ahmed et al. | A review on plants extract mediated synthesis of silver nanoparticles for antimicrobial applications: a green expertise | |
| Suganya et al. | Blue green alga mediated synthesis of gold nanoparticles and its antibacterial efficacy against Gram positive organisms | |
| Yang et al. | Preparation and antibacterial activities of Ag/Ag+/Ag3+ nanoparticle composites made by pomegranate (Punica granatum) rind extract | |
| Manivasagan et al. | Extracellular synthesis of gold bionanoparticles by Nocardiopsis sp. and evaluation of its antimicrobial, antioxidant and cytotoxic activities | |
| Rajeshkumar et al. | Intracellular and extracellular biosynthesis of silver nanoparticles by using marine bacteria Vibrio alginolyticus | |
| Bhat et al. | Photo-irradiated biosynthesis of silver nanoparticles using edible mushroom Pleurotus florida and their antibacterial activity studies | |
| CN102860923B (zh) | 一种纳米银抑菌洗手液及其制备方法 | |
| Fatima et al. | Extracellular mycosynthesis of silver nanoparticles and their microbicidal activity | |
| CN1953664A (zh) | 生物学上稳定的银纳米颗粒的抗微生物活性 | |
| Liu et al. | Biosynthesis of silver nanoparticles with antimicrobial and anticancer properties using two novel yeasts | |
| JP2012526777A (ja) | 殺生物剤のナノ構造組成物及びナノ構造の殺生物剤組成物を得る方法 | |
| CN102499260A (zh) | 具有铜/碳-核/壳结构的铜纳米材料在抗菌方面的应用 | |
| CN105998062A (zh) | 一种含纳米银与卡那霉素的抗菌组合 | |
| Shahbandeh et al. | Conjugation of imipenem to silver nanoparticles for enhancement of its antibacterial activity against multidrug-resistant isolates of Pseudomonas aeruginosa | |
| Khalid et al. | Calixarene coated gold nanoparticles as a novel therapeutic agent | |
| Ortega et al. | Polymer mediated synthesis of cationic silver nanoparticles as an effective anti-fungal and anti-biofilm agent against Candida species | |
| CN105268989A (zh) | 一种抑制霉菌Gra04生长的纳米银制剂及其制备方法 | |
| Nelsonjoseph et al. | Synthesis and characterization of silver nanoparticles using Acremonium borodinense and their anti-bacterial and hemolytic activity | |
| Kantipudi et al. | Diospyros assimilis root extract assisted biosynthesised silver nanoparticles and their evaluation of antimicrobial activity | |
| Wolny-Koładka et al. | Silver nanoparticles toxicity against airborne strains of Staphylococcus spp. | |
| CN107568265B (zh) | 一种塑料用银-稀土复合抗菌剂 | |
| Batool et al. | Study of biogenically fabricated transition metal oxides nanoparticles on oral cavity infectious microbial strains | |
| Nayeri et al. | Phyto-mediated silver nanoparticles via Mellisa officinalis aqueous and methanolic extracts: Synthesis, characterization and biological properties |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| C06 | Publication | ||
| PB01 | Publication | ||
| C10 | Entry into substantive examination | ||
| SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
| RJ01 | Rejection of invention patent application after publication |
Application publication date: 20160127 |
|
| RJ01 | Rejection of invention patent application after publication |