CN102830146A - 一种用于检测遗传毒性物质的纳米dna传感器及其检测方法 - Google Patents

Abstract

本发明涉及一种纳米DNA传感器及其检测遗传毒性物质的方法。本方法利用油胺还原氯化金合成了带氨基基团的纳米金，能在金电极表面自动分散成膜而修饰电极表面，带氨基基团的纳米金由于带正电可通过静电吸附带负电的双链DNA而将其固定于金电极表面，运用遗传毒性物质损伤双链DNA使得双链DNA中鸟嘌呤氧化峰电流改变的规律，可对遗传毒性物质进行检测。本发明用透射电镜表征纳米金结构和性质，并以2-氨基蒽为标准品，利用方波伏安法检测2-氨基蒽的线性范围为50nM～1.25×10³nM，检测下限为10nM，具有操作简单、检测时间短、可快速判断环境样品是否含有遗传毒性物质等特点。

Description

一种用于检测遗传毒性物质的纳米DNA传感器及其检测方法

技术领域

本发明涉及一种用于检测遗传毒性物质的纳米DNA传感器及其检测方法，属于生物技术领域。

背景技术

随着工业生产的飞速发展，成千上万种化学合成物源源不断地涌入市场和生活领域，其中部分化合物通过各种途径进入机体可对遗传物质造成损害，而引发基因突变、癌形成或致畸效应。脱氧核糖核酸(DNA)是大多数生物体的遗传物质，对遗传信息的保持和蛋白质的合成非常关键。而环境中存在的这些具有遗传毒性的物质，毒性机制大都以DNA为靶，对DNA的化学结构造成损伤，甚至导致DNA结构的断裂。可通过遗传毒性物质导致DNA损伤的原理来检测遗传毒性物质，对于生态毒理学的研究、新化合物的毒性鉴定及环境污染监控都具有重大的现实意义。

以对DNA损伤的原理检测遗传毒性物质的方法有很多，比如经典的生物学检测方法，Ames实验和单细胞凝胶电泳等，但这些方法常需要培养细菌或细胞，耗时较长常需要数日。电化学生物传感器具有操作简单、快速、灵敏等优点，被广泛用于分析方法的研究中。上世纪50年代，核酸DNA的碱基被发现具有电化学活性，将DNA吸附到电极表面，在一定的测试条件下DNA中的碱基会产生电化学信号。当遗传毒性物质与电极上吸附的DNA反应后可造成DNA损伤，从而DNA中碱基的电化学信号就会降低，其中以碱基鸟嘌呤氧化峰电流信号最为灵敏，因此用此信号的变化可判断遗传毒性物质对DNA的损伤作用，从而检测待测物质的遗传毒性大小。但是传统方法将双链DNA直接在三电极系统下给予正电压，吸附双链DNA到电极表面来制作的传感器，双链DNA容易脱落且检测灵敏度也有待提高。所以，构造一种新型的传感器加强DNA的固定和提高灵敏度，对于快速检测遗传毒性物质具有科学和实际应用价值。

发明内容

本发明的目的是提供一种纳米DNA传感器及其制备方法，还提供对遗传毒性物质的检测方法，以解决当前对遗传毒性物质检测需时长、操作步骤繁琐的问题，提高传感器检测的灵敏度。

实现本发明的技术方案是：

本发明提供的用于检测遗传毒性物质的纳米DNA传感器，包括电极材料，其特征在于，在电极材料的表面有经带氨基基团的纳米金形成的纳米金膜修饰，并吸附有双链DNA，所述的双链DNA是通过位于电极材料表面的纳米金膜中带氨基基团的纳米金带有的正电荷，以静电吸附方式吸附带负电的双链DNA而固定于电极材料的表面。经带氨基基团的纳米金形成纳米金膜修饰电极材料表面的具体方法是：将电极材料的表面分别经0.3μm、0.05μmα-Al₂O₃打磨，每一步均用双蒸水超声波洗净，在室温环境中，将经打磨和清洗洁净后的电极材料插入到带氨基基团的纳米金溶液中1小时，使溶液中带氨基基团的纳米金在电极材料表面自动分散成纳米金膜，然后用5mL双蒸水轻柔冲洗，用氮气吹干备用；所述的电极材料是金电极；所述的带氨基基团的纳米金溶液的制备方法是：将浓度为1mM的氯金酸溶液90mL与浓度为1mM的油胺1mL混合，磁力搅拌加热到80℃保持5min，1.2×10⁴g离心，弃去上清，所得沉淀用10mL超纯水洗涤，1.2×10⁴g离心后，重复超纯水洗涤2次后，溶于10mL超纯水中即得到带氨基基团的纳米金溶液；纳米金膜修饰的电极材料表面吸附并固定双链DNA的具体方法是：将纳米金膜修饰的电极材料插入含有双链DNA的醋酸溶液中，在三电极系统下，给予电压+0.5V保持5min，然后用5mL双蒸水轻柔冲洗，晾干，即实现将双链DNA吸附并被固定到纳米金膜修饰的电极材料表面；所述的含有双链DNA的醋酸溶液，醋酸溶液的pH值为4.75浓度为0.25M，其中双链DNA的浓度为10μg/mL，所述的双链DNA是小牛胸腺双链DNA。

本发明提供的用于检测遗传毒性物质的纳米DNA传感器的制备方法包括以下步骤：

步骤一、制备带氨基基团的纳米金溶液：取浓度为1mM的氯金酸溶液90mL与浓度为1mM的油胺1mL混合，磁力搅拌加热到80℃保持5min，1.2×10⁴g离心，弃去上清，所得沉淀加入超纯水10mL洗涤，1.2×10⁴g离心后，重复超纯水洗涤2次，溶于10mL超纯水中即得到带氨基基团的纳米金溶液。

步骤二、制备纳米金膜修饰的金电极：金电极表面分别经0.3μm、0.05μmα-Al₂O₃打磨，每一步均用双蒸水超声波洗净；在室温环境中，将经打磨和清洗洁净后的金电极，插入步骤一配制的带氨基基团的纳米金溶液中1小时，使带氨基基团的纳米金在金电极表面自动分散成纳米金膜，然后用5mL双蒸水轻柔冲洗，氮气吹干，即得到纳米金膜修饰的金电极。

步骤三：将纳米金膜修饰的金电极插入含有10μg/mL小牛胸腺双链DNA的0.25M的醋酸(pH4.75)溶液中，在三电极系统下，给予电压+0.5V保持5min，用5mL双蒸水轻柔冲洗，晾干后备用，即制得用于检测遗传毒性物质的纳米DNA传感器。

本发明提供的检测遗传毒性物质的方法包括以下步骤：

(1)滴加空白溶液8μL到纳米DNA传感器的表面，反应10min，用方波伏安法在测试液中扫描测得纳米DNA传感器上所固定的双链DNA中鸟嘌呤的氧化峰电流值，记作S_b；然后用5mL双蒸水冲洗；所述的空白溶液是：浓度为0.25M的醋酸(pH4.75)溶液；所述的测试液是：浓度为0.25M的醋酸(pH4.75)含10mM KCl的溶液；

(2)滴加待检测样品溶液8μL于同一纳米DNA传感器表面，反应10min，用方波伏安法在测试液中扫描测得纳米DNA传感器上所固定的双链DNA中鸟嘌呤的氧化峰电流值，记作S_s；

(3)计算S_s与S_b的百分比率S％＝(S_s/S_b)×100，按以下方法(a)确定遗传毒性物质的浓度和/或含量；或按以下方法(b)判断是否具有遗传毒性：

(a)S％的值与待测的某一遗传毒性物质浓度成反比，通过绘制标准曲线定量检测未知浓度的该遗传毒性物质；

(b)根据信噪比1∶10，S％＞85％认为不具有遗传毒性；S％＜85％判断具有遗传毒性。

本发明利用带氨基基团的纳米金其表面的氨基基团可与金电极的表面结合的性能，当金电极插入到带氨基基团的纳米金溶液中，带氨基基团的纳米金就在金电极表面自动分散成纳米金膜。带氨基基团的纳米金还带有正电荷，可静电吸附带负电的双链DNA，并在三电极系统下给予正电压(纳米金膜修饰的金电极为工作电极、甘汞电极为参比电极和铂丝电极为辅助电极)，可加速将溶于醋酸溶液中的双链DNA吸附并固定于金电极表面，从而制得检测遗传毒性物质的纳米DNA传感器，制作原理见图1。带氨基基团的纳米金带有正电荷对双链DNA的静电吸附，使得双链DNA不易脱落；并且，纳米金具有大比表面面积的特性，可增加对双链DNA的吸附量；纳米金还具有利于电子传导的特性，进而提高电化学响应信号。当遗传毒性物质与纳米DNA传感器电极表面固定的双链DNA反应后，造成双链DNA损伤，用方波伏安法扫描可检测到DNA鸟嘌呤氧化峰电流值发生降低，通过反应前后电流的百分比率可以判断样品是否具有遗传毒性。

本发明所用的带氨基基团的纳米金溶液合成方法简单，采用油胺作为还原剂还原氯金酸生成带有氨基基团的纳米金溶液。通过控制油胺与氯金酸的的用量比，本发明所制得的带有氨基基团纳米金粒径为15±3nm，见图3。

本发明中纳米DNA传感器是利用遗传毒性物质与传感器电极表面固定的双链DNA反应后对DNA造成损伤的原理。首先将纳米DNA传感器与空白溶液反应后，在测试溶液中测得传感器电极表面固定的双链DNA中鸟嘌呤的氧化峰电流值S_b；然后再将该传感器与被测样品反应后，在测试溶液中测得鸟嘌呤氧化峰电流值S_s，对遗传毒性物质毒性效应的大小用S_s和S_b的百分比率来衡量，用以下公式表示：

S％＝(S_s/S_b)×100

将本发明的传感器用于检测具有遗传毒性效应的物质2-氨基蒽。图2所示纳米DNA传感器与不同浓度的2-氨基蒽标准品反应后的方波伏安法扫描图，随着2-氨基蒽浓度的增大，DNA鸟嘌呤氧化峰的电流不断降低。线性回归方程为：

S％＝-0.0628x+82.772，(r＝0.966)，

浓度的线性响应范围为50nM～1.25×10³nM，检测下限为10nM，见图4。根据标准曲线及线性回归方程可对未知浓度的2-氨基蒽进行检测。同理，可用于检测别的遗传毒性物质。

另外，本发明中该纳米DNA传感器可用于检测环境样品是否具有遗传毒性，根据信噪比1∶10，得出纳米DNA传感器判断环境样品是否有遗传毒性的标准，即S％＞85％认为不具有遗传毒性；S％＜85％判断具有遗传毒性，环境样本检测操作流程图见图5。

下面介绍本发明一种用于检测遗传毒性物质的纳米DNA传感器和检测方法，包括以下步骤：

一、一种用于检测遗传毒性物质的纳米DNA传感器的制备，包括以下步骤：

1、制备带氨基基团的纳米金溶液：

(1)取浓度为1mM的氯金酸溶液90mL与浓度为1mM的油胺1mL混合，磁力搅拌加热到80℃保持5min，1.2×10⁴g离心，弃去上清，所得沉淀即为带氨基基团的纳米金；

(2)往沉淀加入超纯水10mL洗涤，1.2×10⁴g离心后，重复超纯水洗涤2次，溶于10mL超纯水中即得到带氨基基团的纳米金溶液。

2、制备纳米金膜修饰的金电极：

(1)金电极表面分别经0.3μm、0.05μmα-Al₂O₃打磨，每一步均用双蒸水超声波洗净；

(2)在室温环境中，将经打磨和清洗洁净后的金电极，插入带氨基基团的纳米金溶液中1小时，使带氨基基团的纳米金在金电极表面自动分散组装成纳米金膜，然后用5mL双蒸水轻柔冲洗，氮气吹干，即得到纳米金膜修饰的金电极。

3、用纳米金膜修饰的金电极吸附和固定双链DNA：

(1)将纳米金膜修饰的金电极插入含有10μg/mL小牛胸腺双链DNA的0.25M的醋酸(pH4.75)溶液中；

(2)在三电极系统下(纳米金膜修饰的金电极为工作电极、甘汞电极为参比电极和铂丝电极为辅助电极)，给予电压+0.5V保持5min，用5mL双蒸水轻柔冲洗，晾干后备用，即制得用于检测遗传毒性物质的纳米DNA传感器。

二、一种检测遗传毒性物质的方法，包括以下步骤：

在三电极系统下(纳米DNA传感器为工作电极、甘汞电极为参比电极和铂丝电极为辅助电极)，电化学测试方法采用方波伏安法扫描，测试参数为：步电势15mV，脉冲幅度40mV，频率200Hz。测试液为5mL浓度为0.25M的醋酸(pH4.75)含10mM KCl溶液。所有实验步骤都在室温操作。

1、滴加空白溶液(浓度为0.25M的醋酸溶液，pH为4.75)8μL到纳米DNA传感器的表面，反应10min，用方波伏安法在测试液中扫描测得纳米DNA传感器上所固定的双链DNA中鸟嘌呤的氧化峰电流值，记作S_b；然后用5mL双蒸水冲洗。

2、滴加待检测样品溶液8μL于同一纳米DNA传感器表面，反应10min，用方波伏安法在测试液中扫描测得纳米DNA传感器上所固定的双链DNA中鸟嘌呤的氧化峰电流值，记作S_s；

3、计算S_s与S_b的百分比率S％＝(S_s/S_b)×100，S％的值与待测的某一遗传毒性物质浓度成反比，通过绘制标准曲线可定量检测未知浓度的该遗传毒性物质。

4、对于环境样品的检测是否具有遗传毒性

(1)环境样本经过前处理。

(2)采用上述相同的电化学测试方法、条件和参数，测得纳米DNA传感器与空白溶液反应后的S_b和与样品反应后的S_s，计算S％。

(3)结果判断：，根据信噪比1∶10，S％＞85％认为不具有遗传毒性；S％＜85％判断具有遗传毒性。

附图说明

图1纳米DNA传感器制备中固定双链DNA于电极材料表面的原理图。采用三电极系统，纳米金膜修饰的金电极为工作电极、甘汞电极为参比电极和铂丝电极为辅助电极，这三支电极都插入含10μg/mL小牛胸腺双链DNA的0.25M的醋酸(pH4.75)溶液中，在电化学工作站控制下给予正电压，可加速将溶于醋酸溶液中的双链DNA吸附于金电极表面；并且纳米金膜中带氨基基团的纳米金带有正电荷，可静电吸附带负电的双链DNA，从而使得双链DNA不易脱落。

图2纳米DNA传感器与不同浓度的2-氨基蒽标准品反应后，在浓度为0.25M的醋酸(pH4.75)含10mM KCl的测试液中的方波伏安法扫描图：2-氨基蒽0nM(曲线a)、200nM(曲线b)、400nM(曲线c)、600nM(曲线d)、800nM(曲线e)。

图3带氨基基团的纳米金透射电镜图。由图所示，纳米金颗粒平均粒径大小为15±3nm。

图4纳米DNA传感器鸟嘌呤氧化峰电流值改变的百分比率(S％)与2-氨基蒽浓度的线性回归图。

图5纳米DNA传感器分析环境样品是否有遗传毒性的流程图。环境样品经前处理后，纳米DNA传感器先与空白溶液反应后测得电极上双链DNA鸟嘌呤的氧化峰电流值S_b，然后再将纳米DNA传感器与被测样品反应后测得鸟嘌呤氧化峰电流值S_s，计算S％＝(S_s/S_b)×100；根据信噪比1∶10，S％＞85％认为不具有遗传毒性，S％＜85％判断具有遗传毒性。

具体实施方式

实施例1

用于检测遗传毒性物质的纳米DNA传感器

1、制备带氨基基团的纳米金溶液：

(1)取浓度为1mM的氯金酸溶液90mL与浓度为1mM的油胺1mL混合，磁力搅拌加热到80℃保持5min，1.2×10⁴g离心，弃去上清，所得沉淀即为带氨基基团的纳米金；

(2)往沉淀加入超纯水10mL洗涤，1.2×10⁴g离心后，重复超纯水洗涤2次，溶于10mL超纯水中即得到带氨基基团的纳米金溶液。

2、纳米金膜修饰的金电极：

(1)金电极表面分别经0.3μm、0.05μmα-Al₂O₃打磨，每一步均用双蒸水超声波洗净；

(2)在室温环境中，将经打磨和清洗洁净后的金电极，插入带氨基基团的纳米金溶液中1小时，使带氨基基团的纳米金在金电极表面自动分散成纳米金膜，然后用5mL双蒸水轻柔冲洗，氮气吹干，即得到纳米金膜修饰的金电极。

3、纳米金膜修饰的金电极吸附和固定双链DNA：

(1)纳米金膜修饰的金电极插入含有10μg/mL小牛胸腺双链DNA的0.25M的醋酸(pH4.75)溶液中；

(2)在三电极系统下(纳米金膜修饰的金电极为工作电极、甘汞电极为参比电极和铂丝电极为辅助电极)，给予电压+0.5V保持5min，用5mL双蒸水轻柔冲洗，即制得用于检测遗传毒物的纳米DNA传感器，晾干后备用。

实施例2

利用实施例1制备的纳米DNA传感器检测2-氨基蒽

电化学测试方法采用在三电极系统下(以纳米DNA传感器为工作电极、铂丝电极为辅助电极、饱和甘汞电极电极为参比电极)，方波伏安法检测电极上双链DNA鸟嘌呤氧化峰电流，测试参数为：步电势15mV，脉冲幅度40mV，频率200Hz。测试液为5mL浓度为0.25M的醋酸(pH4.75)含10mM KCl溶液。所有实验步骤都在室温操作。

1.用双蒸水配制浓度梯度为0.1nM～10μM的标准品2-氨基蒽溶液。

2.滴加空白溶液(浓度为0.25M的醋酸溶液，pH为4.75)8μL到纳米DNA传感器的表面，反应10min，用方波伏安法在测试液中扫描测得纳米DNA传感器上所固定的双链DNA中鸟嘌呤的氧化峰电流值，记作S_b；然后用5mL双蒸水轻柔冲洗。

3.滴加一定浓度的标准品2-氨基蒽溶液8μL于该工作电极表面，同一纳米DNA传感器表面，反应10min，用方波伏安法在测试液中扫描测得纳米DNA传感器上所固定的双链DNA中鸟嘌呤的氧化峰电流值，记作S_s。

4.计算S％＝(S_s/S_b)×100，根据标品2-氨基蒽浓度与S％在一定范围内成反比，绘制标准回归曲线，可对未知浓度的2-氨基蒽进行检测进行定量测定。

实施例3

利用实施例1制备的纳米DNA传感器检测环境水样是否具有遗传毒性

1.水样采集后，先用滤纸过滤一次去掉泥沙等较粗杂质，然后再用0.45μm微孔滤器过滤一次去除水中悬浮颗粒物，再用0.22μm微孔滤器过滤一次，调整pH值为3。

2.分别用3mL甲醇、3mL水活化平衡Oasis HLB固相萃取小柱；上样到Oasis HLB萃取小柱上进行萃取流速3mL·min^-1，用11ml丙酮洗脱HLB柱，氮吹浓缩至800μL左右；将800μL剩余丙酮转移至2mL棕色样品瓶中，浓缩管壁用1ml丙酮冲洗2遍；用氮气将样品瓶吹干，1ml DMSO溶解。

3.水样分别做三个浓度梯度的0.75L、1.5L和3.0L水浓缩样，检测时记作低、中、高浓缩组。

4.分别将水样0.75L、1.5L和3.0L浓缩后的非挥发性有机提取物各取33μL，分别用双蒸水稀释至1mL，作纳米DNA传感器检测用。

5.按照实施实例2中相同的电化学检测方法、条件和参数，测得传感器与空白溶液反应后的S_b，再测得传感器与样品反应后的S_s；

6.计算出每个样品的S％＝(S_s/S_b)×100，根据信噪比1∶10，S％＞85％认为不具有遗传毒性；S％＜85％判断具有遗传毒性。

Claims (9)

1.一种用于检测遗传毒性物质的纳米DNA传感器，包括电极材料，其特征在于，在电极材料的表面有经带氨基基团的纳米金形成的纳米金膜修饰，并吸附有双链DNA。

2.根据权利要求1所述的用于检测遗传毒性物质的纳米DNA传感器，其特征在于，所述的双链DNA是通过位于电极材料表面的纳米金膜中带氨基基团的纳米金带有的正电荷，以静电吸附方式吸附带负电的双链DNA而固定于电极材料的表面。

3.根据权利要求1所述的用于检测遗传毒性物质的纳米DNA传感器，其特征在于，经带氨基基团的纳米金形成纳米金膜修饰电极材料表面的具体方法是：将电极材料的表面分别经0.3μm、0.05μmα-Al₂O₃打磨，每一步均用双蒸水超声波洗净；在室温环境中，将经打磨和清洗洁净后的电极材料插入到带氨基基团的纳米金溶液中1小时，使溶液中带氨基基团的纳米金在电极材料表面自动分散成纳米金膜，然后用5mL双蒸水轻柔冲洗，用氮气吹干备用。

4.根据权利要求1或2或3所述的用于检测遗传毒性物质的纳米DNA传感器，其特征在于，所述的电极材料是金电极。

5.根据权利要求3所述的用于检测遗传毒性物质的纳米DNA传感器，其特征在于，所述的带氨基基团的纳米金溶液的制备方法是：将浓度为1mM的氯金酸溶液90mL与浓度为1mM的油胺1mL混合，磁力搅拌加热到80℃保持5min，1.2×10⁴g离心，弃去上清，所得沉淀用10mL超纯水洗涤，1.2×10⁴g离心后，重复超纯水洗涤2次后，溶于10mL超纯水中即得到带氨基基团的纳米金溶液。

6.根据权利要求1至4中任一项所述的用于检测遗传毒性物质的纳米DNA传感器，其特征在于，纳米金膜修饰的电极材料表面吸附并固定双链DNA的具体方法是：将纳米金膜修饰的电极材料插入含有双链DNA的醋酸溶液中，在三电极系统下，给予电压+0.5V保持5min，然后用5mL双蒸水轻柔冲洗，晾干，即实现将双链DNA吸附并被固定到纳米金膜修饰的电极材料表面。

7.根据权利要求6所述的用于检测遗传毒物的纳米DNA传感器，其特征在于，所述的含有双链DNA的醋酸溶液，醋酸溶液的pH值为4.75浓度为0.25M，其中双链DNA的浓度为10μg/mL，所述的双链DNA是小牛胸腺双链DNA。

8.一种用于检测遗传毒性物质的纳米DNA传感器的制备方法，包括以下步骤：

步骤一、制备带氨基基团的纳米金溶液：取浓度为1mM的氯金酸溶液90mL与浓度为1mM的油胺1mL混合，磁力搅拌加热到80℃保持5min，1.2×10⁴g离心，弃去上清，所得沉淀加入超纯水10mL洗涤，1.2×10⁴g离心后，重复超纯水洗涤2次，溶于10mL超纯水中即得到带氨基基团的纳米金溶液。

步骤二、制备纳米金膜修饰的金电极：金电极表面分别经0.3μm、0.05μmα-Al₂O₃打磨，每一步均用双蒸水超声波洗净；在室温环境中，将经打磨和清洗洁净后的金电极，插入步骤一配制的带氨基基团的纳米金溶液中1小时，使带氨基基团的纳米金在金电极表面自动分散成纳米金膜，然后用5mL双蒸水轻柔冲洗，氮气吹干，即得到纳米金膜修饰的金电极。

步骤三：将纳米金膜修饰的金电极插入含有10μg/mL小牛胸腺双链DNA的0.25M的醋酸(pH4.75)溶液中，在三电极系统下，给予电压+0.5V保持5min，用5mL双蒸水轻柔冲洗，晾干后备用，即制得用于检测遗传毒性物质的纳米DNA传感器。

9.一种检测遗传毒性物质的方法，包括以下步骤：

(1)滴加空白溶液8μL到权利要求1所述的纳米DNA传感器的表面，反应10min，用方波伏安法在测试液中扫描测得纳米DNA传感器上所固定的双链DNA中鸟嘌呤的氧化峰电流值，记作S_b；然后用5mL双蒸水冲洗；所述的空白溶液是：浓度为0.25M的醋酸(pH4.75)溶液；所述的测试液是：浓度为0.25M的醋酸(pH4.75)含10mM KCl的溶液；

(2)滴加待检测样品溶液8μL于同一纳米DNA传感器表面，反应10min，用方波伏安法在测试液中扫描测得纳米DNA传感器上所固定的双链DNA中鸟嘌呤的氧化峰电流值，记作S_s；

(3)计算S_s与S_b的百分比率S％＝(S_s/S_b)×100，按以下方法(a)确定遗传毒性物质的浓度和/或含量；或按以下方法(b)判断是否具有遗传毒性：

(a)S％的值与待测的某一遗传毒性物质浓度成反比，通过绘制标准曲线定量检测未知浓度的该遗传毒性物质；

(b)根据信噪比1∶10，S％＞85％认为不具有遗传毒性；S％＜85％判断具有遗传毒性。

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