CN102816831A - 弯曲菌分离、鉴定的试剂盒、制备和应用 - Google Patents

弯曲菌分离、鉴定的试剂盒、制备和应用 Download PDF

Info

Publication number
CN102816831A
CN102816831A CN2012102684425A CN201210268442A CN102816831A CN 102816831 A CN102816831 A CN 102816831A CN 2012102684425 A CN2012102684425 A CN 2012102684425A CN 201210268442 A CN201210268442 A CN 201210268442A CN 102816831 A CN102816831 A CN 102816831A
Authority
CN
China
Prior art keywords
liquid
gram
preparation
sodium
subsequent use
Prior art date
Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
Pending
Application number
CN2012102684425A
Other languages
English (en)
Inventor
许学斌
袁政安
金汇明
Current Assignee (The listed assignees may be inaccurate. Google has not performed a legal analysis and makes no representation or warranty as to the accuracy of the list.)
SHANGHAI DISEASE PREVENTION AND CONTROL CENTRE
Original Assignee
SHANGHAI DISEASE PREVENTION AND CONTROL CENTRE
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by SHANGHAI DISEASE PREVENTION AND CONTROL CENTRE filed Critical SHANGHAI DISEASE PREVENTION AND CONTROL CENTRE
Priority to CN2012102684425A priority Critical patent/CN102816831A/zh
Publication of CN102816831A publication Critical patent/CN102816831A/zh
Pending legal-status Critical Current

Links

Classifications

    • Y—GENERAL TAGGING OF NEW TECHNOLOGICAL DEVELOPMENTS; GENERAL TAGGING OF CROSS-SECTIONAL TECHNOLOGIES SPANNING OVER SEVERAL SECTIONS OF THE IPC; TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
    • Y02—TECHNOLOGIES OR APPLICATIONS FOR MITIGATION OR ADAPTATION AGAINST CLIMATE CHANGE
    • Y02A—TECHNOLOGIES FOR ADAPTATION TO CLIMATE CHANGE
    • Y02A50/00—TECHNOLOGIES FOR ADAPTATION TO CLIMATE CHANGE in human health protection, e.g. against extreme weather
    • Y02A50/30—Against vector-borne diseases, e.g. mosquito-borne, fly-borne, tick-borne or waterborne diseases whose impact is exacerbated by climate change

Landscapes

  • Measuring Or Testing Involving Enzymes Or Micro-Organisms (AREA)

Abstract

本发明涉及弯曲菌分离、鉴定的试剂盒、制备和应用，主要解决对空肠弯曲菌和非空肠弯曲菌等弯曲菌分离方法存在的漏检率高、鉴定步骤繁复且成本较高、筛选效能不够直观的技术难题。本发明技术方案：弯曲菌分离、鉴定的试剂盒，包括：选择性增菌液Ⅰ、选择性增菌液Ⅱ、改良卡尔马里琼脂平板、哥伦比亚血平板、微需氧产气袋、革兰染色液、氧化酶试剂、马尿酸纸片和马尿酸酶反应试剂；利用选择性分离培养基对应生长的弯曲菌典型菌落形态、简易生化和特异性酶-底物反应组合试验鉴定空肠弯曲菌或非空肠弯曲菌。

Description

弯曲菌分离、鉴定的试剂盒、制备和应用
技术领域
本发明涉及弯曲菌分离、鉴定的试剂盒、制备和应用，弯曲菌属中包括空肠弯曲菌或非空肠弯曲菌等弯曲菌的同步分离和鉴定方法，利用选择性分离培养基对应生长的弯曲菌典型菌落形态、简易生化和特异性酶-底物反应组合试验鉴定空肠弯曲菌或非空肠弯曲菌在内的其他弯曲菌的试剂盒和使用方法。
背景技术
弯曲菌属目前有30多个种，广泛寄生在自然界中的飞鸟和养殖的禽、畜动物中的肠道（结肠或空肠部位），长期定殖并随排泄物污染环境和食品，其中的空肠弯曲菌、结肠弯曲菌、海鸥弯曲菌属于已知的禽、畜动物类肉类制品明确检疫的病原菌，同时，也是能引起食源性传播和暴发的重要病原菌之一。国内的许多实验室（包括临床实验室和公共卫生实验室）在实际工作中无法通过可选择的常规微生物分离方法和材料达到分离空肠弯曲菌等弯曲菌的预期效果，反而受制于弯曲菌微需氧的苛氧条件、标准菌株不易保存和选择性培养基的批间质控要求繁琐、敏感性和特异性低以及缺少简单有效的对疑似菌落筛选方法和依赖鉴定用自动化生化反应试剂材料所需的昂贵费用，既费工又费时。本发明是基于传统细菌学技术简化，经提炼、加入创新材料组合成的检测程序，包括对多种复杂样品的预处理和增值，使用选择性平板的筛选、甄别包括空肠弯曲菌在内的所有弯曲菌的典型菌落，结合简易快速鉴别方法和特异性酶-底物反应组合试验在2个培养周期内鉴定空肠弯曲菌或非空肠弯曲菌的试剂盒和筛选方法，较之现阶段使用的传统分离平板和鉴定技术必须依赖自动化生化鉴定仪器或分子生物学为主的方法更具有易学、综合成本低、操作简单、快速、无需依赖特殊仪器且有特异性、准确性及阳性预期值高的优点。适用粪便（或者粪便拭子）、食品、环境水样等多种标本中包括空肠弯曲菌或非空肠弯曲菌的同步分离和鉴定。
发明内容
本发明的目的是提供一种可利用弯曲菌属所有不同种细菌的生物学特性和酶反应试验鉴定的弯曲菌分离、鉴定的试剂盒、制备和应用。主要解决对空肠弯曲菌和非空肠弯曲菌等弯曲菌分离方法存在的漏检率高、鉴定步骤繁复且成本较高、筛选效能不够直观的技术难题。本发明针对多种不同类型标本分别使用可选择性增菌液或专一性分离平板配合简单的生长条件甄别模式、独特的革兰染色形态和细菌特异性呼吸酶-底物反应特征综合建立而成的一套行之有效的分离和特异性鉴别试验，达到对包括空肠弯曲菌和非空肠弯曲菌等弯曲菌的分离、筛选和准确鉴定的效果。
本发明的技术方案为：弯曲菌分离、鉴定的试剂盒及其制备方法，包括：
1、选择性增菌液Ⅰ（卫斯理肉汤）：基础成分：胰化酪蛋白胨20.0g，N,N-二羟乙基甘氨酸缓冲液（Bicine buffer） 10.0g（sigmaB3876），氯化钠5.0g，酵母浸出物 2.5g，琼脂粉 1.0g，亚硫酸铁 0.25g，Na2S2O3 0.25g，丙酮酸钠 0.25g，蒸馏水983.75ml。碱性高铁血红素溶液 6.25ml（每100ml配方：高铁血红素0.32g，0.15N氢氧化钠溶液 100ml溶解混匀后，5磅30分钟，108℃冷却备用），10ml抗生素组合：氨曲南10mg/L，两性霉素B2mg/L，万古霉素10mg/L。肉汤基础经15磅15分钟（121℃）灭菌后冷却至50℃加入高铁血红素溶液和抗生素组合液后分装225ml/瓶备用。
2、选择性增菌液Ⅱ：按照上述培养基分装9ml/管，备用。
3、改良卡尔马里（KARMALI）琼脂平板：成分：活性炭4.0g，哥伦比亚琼脂基础990.0ml，一起加热溶解经15磅15分钟（121℃）灭菌后冷却至50℃加入抗生素添加剂10ml（丙酮酸钠50.0mg，放线菌酮50.0mg，头孢哌酮16.0mg，氯化铁血红素16.0mg，万古霉素10.0mg），调整pH至7.2（按冷却至25℃后测量值为标准）。倾注无菌平板置冰箱中，备用。
4、哥伦比亚血平板：哥伦比亚血琼脂基础950ml：特殊蛋白胨23.0g，琼脂份10.0g，氯化钠5.0g，淀粉1.0g，加蒸馏水950ml煮沸3次后冷却后调整pH至7.3（按冷却至25℃后测量值为标准）经15磅15分钟（121℃）灭菌后冷却至50℃加入50ml无菌脱纤维绵羊血，混匀后倾注无菌平板置冰箱中，备用。
5、微需氧产气袋：成分：碳酸氢钠8.0g，活性炭3.0g，枸橼酸2.0g，铁粉7g，无水硫酸铜1.5g，硅藻土10g，均匀干燥脱水后置锡纸袋内，真空封口，预计产气量为2.5-3.5升。使用方法：取剪刀在袋口1/3处斜开一小口，加入10ml蒸馏水后之置入容量为3.5升或7升的乐扣乐扣（LOCK-LOCK）密封盒中，加盖密封盒体后放入42℃培养。
6、革兰染色液：革兰染色液Ⅰ液：即结晶紫：取结晶紫酒精饱和液（结晶紫13.8g溶于95%酒精100ml内）10ml，1%草酸铵水溶液（草酸铵0.9g溶于90ml蒸馏水）90ml，混合均匀即可；革兰染色液Ⅱ液：即碘酒：取碘化钾2.0g溶于10ml蒸馏水中，再加碘粒1.0g，充分摇动使之溶解，再加蒸馏水300ml即可。储存于棕色瓶中备用；革兰染色液Ⅲ液：纯酒精液；革兰染色液Ⅳ液：即复红染液（碱性复红8.16g，溶于质量百分比浓度95%酒精100ml内，取10ml加入质量百分比浓度5%石碳酸水溶液90ml，临用时再以蒸馏水稀释10倍）或沙黄染色液（用2.5%沙黄酒精溶液10ml，加蒸馏水90ml）。使用方法：涂片用火焰固定后，加结晶紫染液1分钟，倾去染液，加碘液染液1分钟，水洗。用酒精液脱色半分钟，快速用流水冲去染液。最后加稀释复红复染半分钟，流水冲洗干净后待自然干燥后即可镜检。结果观察：革兰阳性菌呈深紫色；革兰阴性菌呈淡红色。
7、氧化酶试剂：成分：质量百分比浓度1%对-氨基-4-甲基苯胺盐酸盐水溶液。使用方法：取1片3×3cm的无菌滤纸，2次对折后将中心锐角部位与待测菌落表面接触后展开滤纸片后将氧化酶试剂直接滴加于纸片上，试剂与菌落接触扩散后立即（3秒左右）呈现红色-深红色-紫红色反应者为阳性，超过10秒后出现阳性者不作为阳性结果判断；不显色者为阴性。
8、马尿酸纸片和马尿酸酶反应试剂：马尿酸纸片制备方法：马尿酸钠1.0g，溶于50ml蒸馏水中（2%质量百分比浓度），经0.22μm孔径滤膜加压过滤后滴加于直径6.35mm无菌厚纸片中，烘干备用；马尿酸酶反应试剂：茚三酮溶液：茚三酮3.5g，加50ml丙酮和50ml正丁醇溶解混均后分装2.5ml于无菌棕色滴瓶中备用。快速马尿酸水解酶试验方法：取生理盐水0.1ml加于清洁小试管中，并投入马尿酸盐纸片1张，再加入50μl经1~2d培养的用被测菌的新鲜菌落或菌苔调制成的≥1010/ml浓厚菌悬液，36℃水浴2h，缓缓加入马尿酸盐试剂0.1ml，摇匀后36℃放置5分钟，呈深紫色变化者即为阳性。快速氧化酶与马尿酸水解酶试验（阳性）是判定空肠弯曲菌的唯一依据。
本发明的有益效果是：根据多种不同类型的标本选择先进行预增菌或直接使用选择性分离平板的方式达到对标本中目的菌进行有效分离，通过选择性分离平板生长的“疑似”典型菌落接种于纯化、非选择性平板的传代，在细菌的2次传代周期内完成培养条件甄别试验、独特的革兰染色形态、氧化酶试验、马尿酸酶水解试验等简易、有效、特异、准确的鉴定空肠弯曲菌和非空肠弯曲菌等弯曲菌的目的，而简易有效的操作过程也极大提高了单位时间的工作效率，使专业人员更易掌握和接受，客观上能有效减少整个试验过程中人为因素造成的随机误差。
具体实施方式
首先按照技术方案内容配制试剂盒，使用者根据不同检材选择使用增菌分离步骤或直接用选择性平板的分离步骤，选择3-5个疑似菌落的使用组合鉴别试验完成甄别试验。
1、不同检材的解释、采集要求和预处理方法。
1）、粪便：包括人（患者和带菌者）、家禽（畜）等动物性粪便标本尽可能新鲜采集约1g（拇指大小），液状便采约1ml，在1h-2h内进行接种培养。若短时间不能检测时，应使用商品化运送培养基保存，24h内送至实验室。粪便类样品一般采用直接分离法，即用棉签（拭子）挑取标本直接接种卡尔马里（KARMALI）平板后划线分离，平板置容量为3.5升的LOCK-LOCK塑料盒中，放入1个微需氧产气袋（已加入10ml蒸馏水）后盖紧密封后置42℃培养48h观察菌落生长结果。
2）、水：包括饮用水、生活用水、江、河、湖水和污水等液态标本用无菌玻璃或塑料瓶采集250ml-500ml，液体清澈者可使用孔径0.22μm-0.45μm滤膜进行负压过滤后将滤膜剪碎后置弯曲菌选择性增菌液Ⅱ中进行选择性增菌，增菌管置容量为7升的LOCK-LOCK塑料盒中，放入2个微需氧产气袋（已各加入10ml蒸馏水）后盖紧密封后置42℃培养24-48h后挑取增菌液1满环接种KARMALI平板后划线分离，平板置容量为3.5升的LOCK-LOCK塑料盒中，放入1个微需氧产气袋（已加入10ml蒸馏水）后盖紧密封后置42℃培养48h观察菌落生长结果。
3）、食品：采集定型包装或非定型包装500g-1000g，对部分表面含水的样品可以先使用棉签（拭子）直接接触样品表面进行多点涂抹后直接接种KARMALI平板后划线分离，平板置容量为3.5升的LOCK-LOCK塑料盒中，放入1个微需氧产气袋（已加入10ml蒸馏水）后盖紧密封后置42℃培养48h观察菌落生长结果；所有定型或非定型食品样品剪碎或均质后按照食品与弯曲菌选择性增菌液Ⅰ1:10比例进行混匀，增菌容器置容量为7升的LOCK-LOCK塑料盒中，放入2个微需氧产气袋（已各加入10ml蒸馏水）后盖紧密封后置42℃培养24-48h后挑取增菌液1ml转种于弯曲菌选择性增菌液Ⅱ中，增菌管置容量为7升的LOCK-LOCK塑料盒中，放入2个微需氧产气袋（已各加入10ml蒸馏水）后盖紧密封后置42℃培养24-48h后挑取增菌液1满环接种KARMALI平板后划线分离，平板置容量为3.5升的LOCK-LOCK塑料盒中，放入1个微需氧产气袋（已加入10ml蒸馏水）后盖紧密封后置42℃培养48h观察菌落生长结果。
2、检查方法
1）KARMALI选择性分离平板生长的“疑似”典型菌落的判断（48h）：初代分离的空肠弯曲菌和非空肠弯曲菌等弯曲菌落为无色，空肠弯曲菌落有明显的透明质样感，结肠弯曲菌落相对呈灰白色；空肠弯曲菌落为1-2mm，结肠弯曲菌落为2-3mm；总体来说：湿润、较透明、小且不规则的扁平菌落符合弯曲菌疑似菌落的特征。观察并选择3-5个弯曲菌疑似菌落进行组合鉴定试验。
2）哥伦比亚血平板纯化弯曲菌落特征：典型的空肠弯曲菌和非空肠弯曲菌等弯曲菌经42℃微需氧培养48h后菌落特征分别为：空肠弯曲菌落或菌苔为灰白、湿润、单个菌落2mm、呈扁平不规则状；结肠弯曲菌等非空肠弯曲菌落或菌苔为白色、湿润、单个菌落3mm、呈相对凸起的不规则形状。
3）组合鉴定试验程序Ⅰ：培养条件甄别试验-革兰染色-氧化酶-马尿酸盐水解酶试验-报告结果。即首先挑取弯曲菌疑似菌落分别划线接种于1/2个哥伦比亚血平板后分别置36℃普通培养箱进行常规培养和42℃微需氧培养48h后分别观察菌落生长情况：挑取普通培养箱不生长但是微需氧生长的同一样品对应生长的哥伦比亚血平板培养物依次进行革兰染色和氧化酶试验：革兰染色结果为典型的革兰阴性近似“短杆菌”且“似杆非杆”的呈扭曲状或螺旋状形态；氧化酶试验结果为非常快速的阳性反应。完成培养条件甄别试验-革兰染色-氧化酶试验的菌落符合弯曲菌属的生物学典型特征；随后当马尿酸盐水解酶试验为阳性结果时应报告为空肠弯曲菌；当马尿酸盐水解酶试验为阴性结果时应报告为弯曲菌属的阳性结果。
4）组合鉴定试验程序Ⅱ：革兰染色-培养条件甄别试验-氧化酶-马尿酸盐水解酶试验-报告结果。即首先挑取弯曲菌疑似菌落进行革兰染色：当革兰染色结果为典型的革兰阴性近似“短杆菌”且“似杆非杆”的呈扭曲状或螺旋状形态时初步判断“高度怀疑”，反之则排除弯曲菌；挑取革兰染色结果“高度怀疑”的菌落分别划线接种于1/2个哥伦比亚血平板后分别置36℃普通培养箱进行常规培养和42℃微需氧培养48h后分别观察菌落生长情况：挑取普通培养箱不生长但是微需氧生长的同一样品对应生长的哥伦比亚血平板培养物进行氧化酶试验。如果氧化酶试验结果为非常快速的阳性反应可以认为已经完成革兰染色-培养条件甄别试验-氧化酶的菌落符合弯曲菌属的生物学典型特征；随后当马尿酸盐水解酶试验为阳性结果时应报告为空肠弯曲菌；当马尿酸盐水解酶试验为阴性结果时应报告为弯曲菌属的阳性结果。

Claims (4)

1.弯曲菌分离、鉴定的试剂盒，包括：
1）、选择性增菌液Ⅰ：
基础成分：胰化酪蛋白胨20.0g，N,N-二羟乙基甘氨酸缓冲液10.0g，氯化钠5.0g，酵母浸出物 2.5g，琼脂粉 1.0g，亚硫酸铁 0.25g，Na2S2O3 0.25g，丙酮酸钠 0.25g，蒸馏水983.75ml；
碱性高铁血红素溶液 6.25ml；
10ml抗生素组合液：氨曲南10mg/L，两性霉素B2mg/L，万古霉素10mg/L；
上述组分混合后分装225ml/瓶备用；
2）、选择性增菌液Ⅱ：选择性增菌液Ⅰ分装9ml/管，备用；
3）、改良卡尔马里琼脂平板：成分：
活性炭4.0g，
哥伦比亚琼脂基础990.0ml，
抗生素添加剂10ml：丙酮酸钠50.0mg，放线菌酮50.0mg，头孢哌酮16.0mg，氯化铁血红素16.0mg，万古霉素10.0mg，
上述组分混合后倾注无菌平板置冰箱中，备用；
4）、哥伦比亚血平板：哥伦比亚血琼脂基础950ml：蛋白胨23.0g，琼脂粉10.0g，氯化钠5.0g，淀粉1.0g，加蒸馏水950ml煮沸3次后加入50ml无菌脱纤维绵羊血，混匀后倾注无菌平板置冰箱中，备用；
5）、微需氧产气袋：成分：碳酸氢钠8.0g，活性炭3.0g，枸橼酸2.0g，铁粉7g，无水硫酸铜1.5g，硅藻土10g，均匀干燥脱水后置锡纸袋内，真空封口；
6）、革兰染色液：革兰染色液Ⅰ液：结晶紫酒精饱和液10ml和1%草酸铵水溶液90ml的混合液；革兰染色液Ⅱ液：碘酒；革兰染色液Ⅲ液：纯酒精液；革兰染色液Ⅳ液：即复红染液；
7）、氧化酶试剂：成分：质量百分比浓度1%对-氨基-4-甲基苯胺盐酸盐水溶液；
8）、马尿酸纸片和马尿酸酶反应试剂：所述的马尿酸酶反应试剂为茚三酮溶液。
2.权利要求1所述试剂盒的制备方法，包括以下步骤：
1、选择性增菌液Ⅰ制备：
基础成分：胰化酪蛋白胨20.0g，N,N-二羟乙基甘氨酸缓冲液10.0g，氯化钠5.0g，酵母浸出物 2.5g，琼脂粉 1.0g，亚硫酸铁 0.25g，Na2S2O3 0.25g，丙酮酸钠 0.25g，蒸馏水983.75ml；
碱性高铁血红素溶液 6.25ml：每100ml配方：高铁血红素0.32g，0.15N氢氧化钠溶液 100ml溶解混匀后，5磅30分钟，108℃冷却备用；
10ml抗生素组合：氨曲南10mg/L，两性霉素B2mg/L，万古霉素10mg/L
基础成分经121℃15磅15分钟灭菌后冷却至50℃加入高铁血红素溶液和抗生素组合液后分装225ml/瓶备用；
2、选择性增菌液Ⅱ制备：选择性增菌液Ⅰ分装9ml/管，备用；
3、改良卡尔马里琼脂平板制备：成分：活性炭4.0g，哥伦比亚琼脂基础990.0ml，一起加热溶解经121℃15磅15分钟灭菌后冷却至50℃加入抗生素添加剂10ml，所述的抗生素添加剂由下述组分混合而成：丙酮酸钠50.0mg，放线菌酮50.0mg，头孢哌酮16.0mg，氯化铁血红素16.0mg，万古霉素10.0mg，按冷却至25℃后测量值为标准，调整pH至7.2，倾注无菌平板置冰箱中，备用；
4、哥伦比亚血平板制备：哥伦比亚血琼脂基础950ml：蛋白胨23.0g，琼脂粉10.0g，氯化钠5.0g，淀粉1.0g，加蒸馏水950ml煮沸3次，按冷却至25℃后测量值为标准，调整pH至7.3，经121℃15磅15分钟灭菌后冷却至50℃加入50ml无菌脱纤维绵羊血，混匀后倾注无菌平板置冰箱中，备用；
5、微需氧产气袋制备：成分：碳酸氢钠8.0g，活性炭3.0g，枸橼酸2.0g，铁粉7g，无水硫酸铜1.5g，硅藻土10g，均匀干燥脱水后置锡纸袋内，真空封口；
6、革兰染色液制备：革兰染色液Ⅰ液：即结晶紫：取结晶紫酒精饱和液10ml，1%草酸铵水溶液90ml，混合均匀即可；革兰染色液Ⅱ液：即碘酒：取碘化钾2.0g溶于10ml蒸馏水中，再加碘粒1.0g，充分摇动使之溶解，再加蒸馏水300ml即可，储存于棕色瓶中备用；革兰染色液Ⅲ液：纯酒精液；革兰染色液Ⅳ液：即复红染液：碱性复红8.16g，溶于质量百分比浓度95%酒精100ml内，取10ml加入质量百分比浓度5%石碳酸水溶液90ml，临用时再以蒸馏水稀释10倍或沙黄染色液；
7、氧化酶试剂制备：成分：质量百分比浓度1%对-氨基-4-甲基苯胺盐酸盐水溶液； 
8、马尿酸纸片和马尿酸酶反应试剂制备：马尿酸纸片制备方法：马尿酸钠1.0g，溶于50ml蒸馏水中，经0.22μm孔径滤膜加压过滤后滴加于直径6.35mm无菌厚纸片中，烘干备用；马尿酸酶反应试剂：茚三酮溶液：茚三酮3.5g，加50ml丙酮和50ml正丁醇溶解混均后分装2.5ml于无菌棕色滴瓶中备用。
3.权利要求1所述试剂盒在水中弯曲菌的同步分离和鉴定中的应用。
4.权利要求1所述试剂盒在食品中弯曲菌的同步分离和鉴定中的应用。
CN2012102684425A 2012-08-01 2012-08-01 弯曲菌分离、鉴定的试剂盒、制备和应用 Pending CN102816831A (zh)

Priority Applications (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CN2012102684425A CN102816831A (zh) 2012-08-01 2012-08-01 弯曲菌分离、鉴定的试剂盒、制备和应用

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CN2012102684425A CN102816831A (zh) 2012-08-01 2012-08-01 弯曲菌分离、鉴定的试剂盒、制备和应用

Publications (1)

Publication Number Publication Date
CN102816831A true CN102816831A (zh) 2012-12-12

Family

ID=47301274

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
CN2012102684425A Pending CN102816831A (zh) 2012-08-01 2012-08-01 弯曲菌分离、鉴定的试剂盒、制备和应用

Country Status (1)

Country Link
CN (1) CN102816831A (zh)

Cited By (6)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN104313116A (zh) * 2014-09-30 2015-01-28 青岛康合伟业商贸有限公司 一种哥伦比亚血琼脂基础培养基
CN105063173A (zh) * 2015-09-01 2015-11-18 郑州安图生物工程股份有限公司 一种检测b群链球菌感染的方法及试剂盒
CN106834412A (zh) * 2015-12-03 2017-06-13 李和楼 一种幽门螺杆菌的检验方法
CN109022334A (zh) * 2018-09-20 2018-12-18 河南省农业科学院畜牧兽医研究所 用于弯曲菌的快速分离纯化培养方法
CN114657091A (zh) * 2022-03-03 2022-06-24 中国疾病预防控制中心传染病预防控制所 一种弯曲菌增菌培养液及其制备方法、应用
CN114686556A (zh) * 2020-12-31 2022-07-01 石家庄市疾病预防控制中心（石家庄市卫生检测中心） 一种胃内菌群的检测方法

Citations (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN1096819A (zh) * 1993-06-23 1994-12-28 铜陵市卫生防疫站 一种长效保存空肠弯曲菌群培养基及制备方法
CN1598544A (zh) * 2004-08-13 2005-03-23 汕头大学 一种检测空肠弯曲菌的方法
CN101403002A (zh) * 2008-09-26 2009-04-08 广州华峰生物科技有限公司 空肠弯曲菌基因快速诊断试剂盒及其检测方法

Patent Citations (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN1096819A (zh) * 1993-06-23 1994-12-28 铜陵市卫生防疫站 一种长效保存空肠弯曲菌群培养基及制备方法
CN1598544A (zh) * 2004-08-13 2005-03-23 汕头大学 一种检测空肠弯曲菌的方法
CN101403002A (zh) * 2008-09-26 2009-04-08 广州华峰生物科技有限公司 空肠弯曲菌基因快速诊断试剂盒及其检测方法

Non-Patent Citations (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Title
中华人民共和国卫生部: "GB 4789.9-2010－食品微生物学检验 空肠弯曲菌检验", 《食品安全国家标准》 *

Cited By (7)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN104313116A (zh) * 2014-09-30 2015-01-28 青岛康合伟业商贸有限公司 一种哥伦比亚血琼脂基础培养基
CN105063173A (zh) * 2015-09-01 2015-11-18 郑州安图生物工程股份有限公司 一种检测b群链球菌感染的方法及试剂盒
CN106834412A (zh) * 2015-12-03 2017-06-13 李和楼 一种幽门螺杆菌的检验方法
CN109022334A (zh) * 2018-09-20 2018-12-18 河南省农业科学院畜牧兽医研究所 用于弯曲菌的快速分离纯化培养方法
CN114686556A (zh) * 2020-12-31 2022-07-01 石家庄市疾病预防控制中心（石家庄市卫生检测中心） 一种胃内菌群的检测方法
CN114657091A (zh) * 2022-03-03 2022-06-24 中国疾病预防控制中心传染病预防控制所 一种弯曲菌增菌培养液及其制备方法、应用
CN114657091B (zh) * 2022-03-03 2023-08-11 中国疾病预防控制中心传染病预防控制所 一种弯曲菌增菌培养液及其制备方法、应用

Similar Documents

Publication Publication Date Title
CN100532568C (zh) 生物发光微生物数量抗干扰快速检测试剂盒
CN102816831A (zh) 弯曲菌分离、鉴定的试剂盒、制备和应用
CN102311990B (zh) 一种大肠菌群的显色培养基及其快速检测卡
CN101012477B (zh) 一种快速检测食品内微生物的方法及培养基
CN106011005B (zh) 一种解淀粉芽孢杆菌t600及其菌剂制备方法和应用
CN108949641B (zh) 一株短小芽孢杆菌菌株及其应用
CN101893589A (zh) 一种无菌检查方法及其使用的全封闭集菌安瓿培养器
CN103898016B (zh) 一株高产乳酸菌及其发酵蛋壳制备乳酸钙的方法
CN102071243B (zh) 一种快速检测啤酒中有害菌的方法
CN106011002B (zh) 一种巨大芽孢杆菌t317及其菌剂和菌剂制备方法
CN101497915B (zh) 用于快速检测金黄色葡萄球菌的试剂及其方法
CN103045529A (zh) 一种诱导烟草疫霉菌产生孢子囊并释放游动孢子的方法
CN109321500B (zh) 一株解淀粉芽孢杆菌菌株及其在防治油茶炭疽病害中的应用
CN104789635B (zh) 一种黑曲霉麸曲孢子活力的评价方法
CN112143676B (zh) 一株产碱性蛋白酶耐盐芽孢杆菌及其产碱性蛋白酶的方法与应用
CN103173381B (zh) 杏皮渣醋醋酸菌及其分离纯化方法和应用方法
CN1995373A (zh) 水中粪大肠菌群快检纸片
CN115074270B (zh) 一种植物乳杆菌及其作为发酵剂在制备辣白菜中的应用
CN105861623A (zh) 一种用于检测阪崎肠杆菌的显色培养基
CN104561234A (zh) 一种抗生素残留检测试剂盒及其应用
CN108977391A (zh) 一株对肉制品具有发色及防腐功能的乳酸菌株
CN109439582A (zh) 亳菊内生巨大芽孢杆菌及其应用
Shen et al. Comparative Study on Test Methods of Total Coliforms in Domestic Drinking Water
CN106167770B (zh) 一种巨大芽孢杆菌b16及其菌剂和菌剂制备方法
CN102199559B (zh) 一种枯草芽孢杆菌菌种及其用途

Legal Events

Date Code Title Description
C06 Publication
PB01 Publication
C10 Entry into substantive examination
SE01 Entry into force of request for substantive examination
C02 Deemed withdrawal of patent application after publication (patent law 2001)
WD01 Invention patent application deemed withdrawn after publication

Application publication date: 20121212