CN102812972A - 防治苹果树腐烂病的植物提取物组合及制备方法 - Google Patents
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Abstract
本发明涉及一种植物源农药，特别是涉及一种防治苹果树腐烂病的植物提取物组合及制备方法。解决现有防治苹果树腐烂病的药物原料单一，效果不理想等问题，由0.5-1.5份苦豆子全株、1-3份苦参果实、0.5-1.5份川楝果实、0.3-0.7份大戟狼毒根、0.2-0.4份烟叶组成；本发明技术方案通过反复试验，提供了一种高效、低毒、低残留、与环境和谐的新型植物源农药，它对环境保护、解决苹果树生产中的毁灭性病害苹果树腐烂病、降低土壤中砷元素含量都具有深远意义。
Description
技术领域
本发明涉及一种植物源农药，特别是涉及一种防治苹果树腐烂病的植物提取物组合及制备方法。
背景技术
苹果腐烂病是一种毁灭性的病害，发生严重的果园，树体病疤累累，枝干残缺不全，甚至造成死树和毁园。据调查，2-3年幼树平均发病率9.5%，4-10年生的树为14.1%，10年生以上的为23%，最高达51.4%。长期以来，国内防治苹果腐烂病主要用化学药剂，其中以福美系列的福美胂为主要药剂，效果虽然比较理想，但连续使用会不同程度提高果树树体各部位和果园土壤中砷元素的含量，甚至使树体发生死皮和死树现象。所以，国家于2002年已经明令禁止使用福美胂。因此，开发新的防治苹果腐烂病的药剂迫在眉睫。科学研究发现许多植物中含有对腐烂病菌有抑制作用的活性物质。因而利用植物不同药学特性研制出的植物源农药具有广谱、低毒、安全等优点。针对苹果树腐烂病菌防治，研发有效的药剂植物性杀菌剂具有重要意义。如现有公开技术中大戟狼毒中的石油醚提取物对苹果树腐烂病菌有很好的防治效果。《公共植保与绿色防控》2010年16种中草药提取物对苹果腐烂病菌抑菌活性的测定一文，从16种中草药为吴茱英、长春花、漏芦、草澄茄、墨旱莲、辣寥、旋覆花、猫眼草、紫花杜鹃、连钱草、土木香、留兰香、鹅不食草、红蔑、天明精、紫苏子。中的提取物对苹果腐烂病都有一定的效果。申请号：02141772.5预防治疗苹果树腐烂病的乳油剂及制造方法 该乳油剂包含有雄黄、苦参、黄柏和柴油;申请号：02135218.6 防治果树腐烂病的中草药膏状制剂 按重量比选用对果树腐烂病原具有强烈抑杀作用的茵陈1-9、杠柳1-2.5、黄柏1-3、苦参1-3、鸡血藤1-2.5、雷公藤1-2.5、可广泛用于苹果、梨树、山楂、枣等果树腐烂病的防治。中药无公害技术防止苹果腐烂病技术，辽宁师范大学学报2006年6月，公开了可以使用苦参，苦楝皮丝等原料制成的药剂防止苹果腐烂病。
由此可见，多种植物都含有能够抑制腐烂病菌的物质存在，而且某些组合能够起到较好的治疗效果， 鉴于具有杀菌效果的植物种类较多，而且现有的技术方案中，大都是以苦参为原料的单品种杀菌剂，在长期使用后，病菌也会一定程度产生抗药性，本申请也在积极寻找一种更为有效的，治疗苹果腐烂病的方法，在防止苹果腐烂病的还可以探索效果更好的组合型杀菌剂。
发明内容
本发明为了解决现有防治苹果树腐烂病的药物原料单一，效果不理想等问题，提供了一种防治苹果树腐烂病的植物提取物组合制备方法。
本发明技术方案是，一种防治苹果树腐烂病的植物提取物组合制备方法，由0.5-1.5份苦豆子全株、1-3份苦参果实、0.5-1.5份川楝果实、0.3-0.7份大戟狼毒根、0.2-0.4份烟叶组成；
具体制备步骤为：
A，按质量比例称取5种植物，苦豆子全株：苦参果实：川楝果实：大戟狼毒根：烟叶，将苦豆子全株、苦参果实、川楝果实、大戟狼毒根、烟叶5种植物粉碎，过20目，混合加入提取罐中，混合物与溶剂的体积比为1：3-6，55℃温浸6-12小时，过滤得混合型植物提取物。
B，将A步骤中液体过滤装入减压浓缩机组，75℃-85℃浓缩，最终浓缩比是2-3.5。
C，B步骤中得到浓缩液与5%的浓硫酸体积比1：1混合溶解，过滤，收取滤液，冷却，放置12小时。
最后按照下列顺序和比例在其中加入助溶剂、乳化剂、增效剂、渗透剂等辅料制成杀菌剂。
提取物： 8-15重量份
助溶剂： 40-85重量份
乳化剂： 4-15重量份
增效剂： 0.1-1重量份
渗透剂： 0.6-5重量份
所述5种植物提取物中使用的溶剂除乙醇外还可以非限定性地选自：甲醇、1%的盐酸、自来水中的一种。
助溶剂选工业乙醇、甲醇、二氯甲烷中的一种：乳化剂是十二烷基硫酸钠、聚氧乙烯醚、脂肪醇聚氧乙烯醚、农乳1602、ABS-Ga、吐温-80中的任何一种；增效剂是甲醛、增效醚中任何一种；渗透剂是苄基苯酚聚氧乙烯醚、氮酮中的任何一种。
5种植物提取物杀菌剂优选为：
提取物 10重量份
工业乙醇 65重量份
ABS-Ga 4重量份
和农乳1602 7重量份
增效醚 0.2重量份
氮酮： 3.5重量份
按照本发明最优技术方案获得的提取物，参照植病研究法推荐的生长速率测定法，对苹果树腐烂病菌进行了生物活性测定：用打孔器取6mm菌落边缘生长旺盛的菌种，放在加药的PDA平板上培养，以培养基内加等量无菌水作对照，每次重复3次，置25℃下培养。用十字交叉法测每个菌落的直径，以其平均值代表菌落的直径，以下式求出抑制菌丝生长率:
抑制菌丝生长率=（对照菌落直径—处理菌落直径）/（对照菌落直径－0.6）×100%
表1: 苦豆子全株、苦参果实、川楝果实、大戟狼毒根、烟叶5种植物提取物对苹果腐烂病菌菌丝生长的抑制作用
注：A：菌落直径（mm）Colony Radius; B:抑制率（%）Inhabiting rate（%）
表2:不同浓度苦豆子全株、苦参果实、川楝果实、大戟狼毒根、烟叶5种植物提取物对苹果腐烂病菌菌丝生长的抑制作用
注：每种试剂为5个浓度，3次重复。
表3: 48h大戟狼毒乙醇提取物对苹果腐烂病菌菌的毒力
| 处理 | 毒力方程 y=* | EC50 （mg·ml-1） | 相关系数r |
| 苹果腐烂病菌 | y=6.5039+1.5688x | 0.19 | 0.9881 |
由表1可以看出苦豆子全株、苦参果实、川楝果实、大戟狼毒根、烟叶5种植物提取物对苹果腐烂病原菌有很好的抑制作用。2 mg·ml-1l和1 mg·ml-1在48h，72h的抑制率分别是97.13%，93.06%和90.43%，83.25%。表2和表3：对苹果腐烂病菌的抑制作用都是随着药剂浓度的增大，抑制活性增高，最高可达98.58%。其中两次测量结果2 mg·ml-1和1 mg·ml-1的抑菌率都在90%以上。48h的EC50为0.19 mg·ml-1。
本发明所述的杀菌剂通过在山西太原，忻州等地区的苹果园中进行腐烂病的防治，均取得了良好效果。
本发明技术方案提供了一种高效、低毒、低残留、与环境和谐的新型植物源农药， 通过反复试验，发现苦豆子（Sophora alopecuroides L）、苦参（Sophora flavescens）、川楝（Fructus Toosendan）、大戟狼毒（Euphorbia fischeriana Steud．）、烟叶（Nicotiana tabacum）5种植物提取物组合具有较好的抑菌活性。它对环境保护、解决苹果树生产中的毁灭性病害苹果树腐烂病、降低土壤中砷元素含量都具有深远意义。与化学制备的农药相比，本发明具有以下特点和优点：
（1）苦豆子全株、苦参果实、川楝果实、大戟狼毒根、烟叶全部来自大自然中的植物，因此其提取物在自然条件下易分解，对生态环境安全，没有环境污染问题。（2）苦豆子全株、苦参果实、川楝果实、大戟狼毒根、烟叶5种植物提取物是一种多成分的复杂混合物，对苹果树腐烂病有可能有多个作用位点，因此不易产生抗药性。（3）实验证明，苦豆子全株、苦参果实、川楝果实、大戟狼毒根、烟叶5种植物提取物有显著的抑菌活性，药中的活性成分被树体快速吸收，病疤可快速愈合，并且在生长旺期的树上用药可促进产生新的愈合组织，降低了病疤被感染的几率。（4）本制剂使用方法简便易行，可以直接涂抹于患处，也可以喷雾处理，保护健皮免受伤害，也可以杜绝因刮割下的含病树渣处理不当而成为新的病原，浸染其他果树（5）苦豆子全株、苦参果实、川楝果实、大戟狼毒根、烟叶5种植物提取简单易行，十分有利于进行工业化生产。
具体实施方式
实施例1
1试验地点：山西太原小店区苹果园，果园树龄16年以上，腐烂病危害严重，品种以嘎啦和富士为主，
2试验时间：2010年3月
3试验方法：划道和刮皮
4制备成植物源杀菌剂。具体步骤为：
A 5种植物按照苦豆子全株：苦参果实：川楝果实：大戟狼毒根：烟叶质量比为1：2： 1：0.5：0.3的比例称取，将苦豆子全株、苦参果实、川楝果实、大戟狼毒根、烟叶5种植物粉碎，过20目，混合物与有机溶剂乙醇的体积比为1：3，55℃温浸6-12小时，过滤得混合型植物提取物。
B将A中过滤液体装入减压浓缩机组，75℃-85℃浓缩，最终浓缩比是3.5。
C ，B步骤中浓缩液与5%的浓硫酸体积比1：1混合溶解，过滤，收取滤液，冷却，放置12小时。
最后按照下列顺序和比例在其中加入助溶剂、乳化剂、增效剂、渗透剂等辅料制成杀菌剂。
C步骤提取物： 15重量份
助溶剂乙醇： 40重量份
乳化剂十二烷基硫酸钠： 15重量份
增效剂甲醛： 0.1重量份
渗透剂氮酮： 5重量份。
上述得到的植物杀菌剂稀释50倍，采用划道和刮皮两种施药方式，将药剂均匀涂抹于发病部位。
试验效果： 同一品种同种刮涂方法，两种药剂对苹果腐烂病的治愈情不同。划道情况下，除嘎啦品种中5种植物活性部位提取物对苹果腐烂病的治愈率比843康复剂高20%外，其它两个品种中5种植物活性部位提取物对苹果腐烂病的治愈率都比843康复剂低，富士低7.49%，珊厦低17.58%；刮皮情况下，富士品种中RSCS-AS对苹果腐烂病的治愈率比843康复剂高3.18%，其它两个品种中5种植物活性部位提取物对苹果腐烂病的治愈率跟843康复剂相同。不同品种同种处理对苹果腐烂病的治愈率也不相同。5种植物活性部位提取物划道下，珊厦品种病疤的治愈率为53.85%，富士为45.45%，嘎啦为70.00%，嘎啦品种的病疤治愈率最高；5种植物活性部位提取物刮皮下；珊厦和嘎啦品种病疤的治愈率都为100.00%，富士为88.89%，珊厦和嘎啦品种的病疤治愈率最高；843康复剂+划道下，珊厦品种的病疤治愈率为71.43%，富士为52.94%，嘎啦为50.00%，珊厦品种的病疤治愈率最高；843康复剂+刮皮下，珊厦和嘎啦品种的病疤治愈率都为100.00%，富士为85.71%，珊厦和嘎啦品种的治愈率最高。
表4 两种药剂同种刮涂方法防治苹果腐烂病的效果
实施例2
1试验地点：山西太原万柏林区苹果园，果园树龄16年以上，腐烂病危害严重，品种以嘎啦和富士为主，
2试验时间：2010年3月
3试验方法：喷雾
44制备成植物源杀菌剂。具体步骤为：
A 5种植物按照苦豆子全株：苦参果实：川楝果实：大戟狼毒根：烟叶质量比为1：2： 1：0.5：0.3的比例称取，将苦豆子全株、苦参果实、川楝果实、大戟狼毒根、烟叶5种植物粉碎，过20目，
混合物与有机溶剂甲醇的体积比为1： 6，55℃温浸6-12小时，过滤得混合型植物提取物。
B将A中过滤液体装入减压浓缩机组，75℃-85℃浓缩，最终浓缩比是2。
C ，B步骤中浓缩液与5%的浓硫酸体积比1：1混合溶解，过滤，收取滤液，冷却，放置12小时。
最后按照下列顺序和比例在其中加入助溶剂、乳化剂、增效剂、渗透剂等辅料制成杀菌剂。
C步骤提取物： 8重量份
助溶剂甲醇： 85重量份
乳化剂聚氧乙烯醚： 4重量份
增效剂醚： 1重量份
渗透剂苄基苯酚聚氧乙烯醚： 0.6重量份
上述杀菌剂稀释700倍，采用喷雾施药方式，将药剂均匀喷雾于整株果树。
试验效果：同一种药剂不同刮涂方法，刮皮的效果明显高于划道。5种植物活性部位提取物下，划道的治愈率为62.5%，刮皮的治愈率为95.8%，比划道高出33.3%；843康复剂下，划道的治愈率为56.7%，刮皮的治愈率为95.2%，比划道高出38.5%。对两种药剂不同刮涂方法之间进行显著性检验分析，结果表明，同种药剂下刮皮与划道对苹果腐烂病治愈的影响差异显著。
表5 同种药剂不同刮涂方法对苹果腐烂病治愈的情况
实施例3
1试验地点：山西忻州市郊区苹果园，果园树龄16年以上，腐烂病危害严重，品种以嘎啦和富士为主，
2试验时间：2010年3月
3试验方法：喷雾
4制备成植物源杀菌剂。具体步骤为：
A 5种植物按照苦豆子全株：苦参果实：川楝果实：大戟狼毒根：烟叶质量比为1：2： 1：0.5：0.3的比例称取，将苦豆子全株、苦参果实、川楝果实、大戟狼毒根、烟叶5种植物粉碎，过20目，
混合物与自来水的体积比为1：5，55℃温浸6-12小时，过滤得混合型植物提取物。
B将A中过滤液体装入减压浓缩机组，75℃-85℃浓缩，最终浓缩比是2.5。
C ，B步骤中浓缩液与5%的浓硫酸体积比1：1混合溶解，过滤，收取滤液，冷却，放置12小时。
最后按照下列顺序和比例在其中加入助溶剂、乳化剂、增效剂、渗透剂等辅料制成杀菌剂。
C步骤提取物： 10重量份
助溶剂二氯甲烷： 65重量份
乳化剂吐温-80： 10重量份
增效剂甲醛： 0.4重量份
渗透剂氮酮： 4重量份
提取物稀释200倍，采用喷雾施药方式，将药剂均匀喷雾于整株果树。
试验效果：喷雾处理不同品种间病疤平均愈合宽度不一样，5种植物活性部位提取物处理下，富士品种的病疤平均愈合宽度最宽，为2.122mm；嘎啦品种的病疤平均愈合宽度最窄，仅有1.624mm；珊厦品种的病疤平均愈合宽度居中，为1.832mm。843康复剂处理下，嘎啦品种的病疤平均愈合宽度最宽，为1.558mm；富士品种的病疤平均愈合宽度最窄，仅有1.484mm；珊厦品种的病疤平均愈合宽度居中，为1.526mm。对不同品种和不同药剂分别进行显著性分析，结果表明，不同品种间差异不显著，不同药剂间差异也不显著。
表6 两种药剂在不同品种间促进苹果腐烂病伤口愈合的情况
表7 不同品种间病疤平均愈合宽度显著性检验
表8 不同药剂间病疤平均愈合宽度显著性比较
Claims (3)
1.一种防治苹果树腐烂病的植物提取物组合制备方法，其特征在于：由0.5-1.5份苦豆子全株、1-3份苦参果实、0.5-1.5份川楝果实、0.3-0.7份大戟狼毒根、0.2-0.4份烟叶组成；
具体步骤为：
A、按质量比例称取5种植物，苦豆子全株：苦参果实：川楝果实：大戟狼毒根：烟叶，将苦豆子全株、苦参果实、川楝果实、大戟狼毒根、烟叶5种植物粉碎，过20目筛，混合加入提取罐，混合物与溶剂的体积比为1：3-6，55℃温浸6-12小时，过滤得混合型植物提取物，
B、将A得到液体过滤装入减压浓缩机组，75℃-85℃浓缩，最终浓缩比是2-3.5，
C，B步骤中浓缩液与5%的浓硫酸体积比1：1混合溶解，过滤，收取滤液，冷却，放置12小时，
最后按照下列顺序和比例在其中加入助溶剂、乳化剂、增效剂、渗透剂等辅料制成杀菌剂，
提取物： 8-15重量份
助溶剂： 40-85重量份
乳化剂： 4-15重量份
增效剂： 0.1-1重量份
渗透剂： 0.6-5重量份。
2.根据权利要求1所述的防治苹果树腐烂病的植物提取物组合制备方法，其特征在于：
所述5种植物提取物中使用的溶剂为乙醇、甲醇、1%的盐酸、自来水中的一种；助溶剂选工业乙醇、甲醇、二氯甲烷中的一种：乳化剂是十二烷基硫酸钠、聚氧乙烯醚、脂肪醇聚氧乙烯醚、农乳1602、ABS-Ga、吐温-80中的任何一种；增效剂是甲醛、增效醚中任何一种；渗透剂是苄基苯酚聚氧乙烯醚、氮酮中的任何一种。
3.根据权利要求1所述的防治苹果树腐烂病的植物提取物组合制备方法，其特征在于：由1份苦豆子全株、2份苦参果实、1份川楝果实、0.5份大戟狼毒根、0.3份烟叶组成；
具体步骤为：
A，5种植物按照苦豆子全株：苦参果实：川楝果实：大戟狼毒根：烟叶按质量比例称取，将苦豆子全株、苦参果实、川楝果实、大戟狼毒根、烟叶5种植物粉碎，过20目，混合物与溶剂的体积比为1：5，55℃温浸6-12小时，过滤得混合型植物提取物，
B，将A中过滤液体装入减压浓缩机组，75℃-85℃浓缩，最终浓缩比是2.5，
C，B步骤中浓缩液与5%的浓硫酸体积比1：1混合溶解，过滤，收取滤液，冷却，放置12小时，
最后按照下列顺序和比例在其中加入助溶剂、乳化剂、增效剂、渗透剂等辅料制成杀菌剂，
提取物 10重量份
工业乙醇 65重量份
ABS-Ga 4重量份
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氮酮 3.5重量份。
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