CN102796046A - 2–(4-羟基)苯甲酰氨基酸-4,4,5,5-四甲基-1,3-二氧基咪唑啉及其制备方法和应用 - Google Patents

Abstract

本发明公开了一种对2-(4-羟基)苯基-4，4，5，5-四甲基-1，3-二氧基咪唑啉的5位进行修饰而得到的通式为I的化合物及其制备方法和作为镇痛剂和抗炎剂的应用。本发明采用小鼠甩尾模型评价了本发明的化合物的镇痛活性，采用二甲苯耳后致炎模型评价了本发明的化合物的抗炎活性。实验结果表明，本发明的通式I的化合物具有优秀的镇痛和抗炎活性，临床上可作为镇痛抗炎剂应用。

Description

2–(4-羟基)苯甲酰氨基酸-4,4,5,5-四甲基-1,3-二氧基咪唑啉及其制备方法和应用

技术领域

本发明涉及一种人工合成的化合物及其制备方法和应用，特别是涉及一种对2-(4-羟基)苯基-4，4，5，5-四甲基-1，3-二氧基咪唑啉的5位进行修饰而得到的化合物，本发明还涉及其制备方法以及其在制备镇痛剂和抗炎剂药物中的应用。

背景技术

疼痛临床上最常见的症状之一，疼痛就其生物学意义来说，长期持续不止，便对机体构成一种难以忍受的精神折磨.严重影响学习、工作、饮食和睡眠，降低生活质量，产生一种不可忽视的经济和社会问题，而痛与炎症密切相关。由于有效的镇痛剂往往与依赖性相联系，所以发明新的无依赖性的镇痛抗炎剂具有重要价值。发明人曾经指出阿司匹林结构具有镇痛和抗炎活性，发明人还曾指出咪唑啉是一种有潜力的药效团。按照这种构想，发明人确实发现2-(4-羟基)苯甲酰氨基酸)-4，4，5，5-四甲基-1，3-二氧基咪唑啉确实有镇痛抗炎活性。于是，发明人提出本发明。

发明内容

本发明要解决的第一个技术问题是，提供通式为I的化合物(6a-l)：

式中，AA为Gly、L-Ala、L-Val、L-Phe、L-Pro、L-Leu、L-Ile、L-Ser、L-Thr、L-Tyr、L-Asp或L-Glu。

对所合成的通式为I的化合物(6a-l)进行编号：

6a中AA代表Gly，6b中AA代表L-Ala，6c中AA代表L-Val，6d中AA代表L-Phe，6e中AA代表L-Pro，6f中AA代表L-Leu，6g中AA代表L-Ile，6h中AA代表L-Ser，6i中AA代表L-Thr，6j中AA代表L-Tyr，6k中AA代表L-Asp，6l中AA代表L-Glu。

以上编号只是为了方便描述，并无任何对发明的限制意义。

本发明要解决的第二个技术问题是提供通式化合物(6a-l)的制备方法，该方法包括：

(1)0℃条件下2-硝基丙烷在氢氧化钠(6.0M)中滴加Br₂，加入无水乙醇反应1个小时，在84℃反应3小时制备2，3-二甲基-2，3-二硝基丁烷；

(2)2，3-二甲基-2，3-二硝基丁烷在50％乙醇中在0℃与氯化铵混合后3小时内分次加入锌粉，于10℃搅拌3小时，然后无水K₂CO₃拌样。用二氯甲烷于70℃提取制备2，3-二羟胺基-2，3-二甲基丁烷；

(3)2，3-二羟胺基-2，3-二甲基丁烷和5-甲酰水杨酸，室温反应16小时得到4，4，5，5-四甲基-2-(4-羟基)苯甲酸-咪唑-1，3-二醇；

(4)4，4，5，5-四甲基-2-(4-羟基)苯甲酸-咪唑-1，3-二醇与二氧化铅在甲醇中于室温反应24小时制备2-(4-羟基)苯甲酸)-4，4，5，5-四甲基-1，3-二氧基咪唑啉；

(5)在DCC、HOBt和NMM存在下将2-(4-羟基)苯甲酸-4，4，5，5-四甲基-1，3-二氧基咪唑啉与氨基酸甲酯偶联，制备2-(4-羟基)苯甲酰氨基酸甲酯-4，4，5，5-四甲基-1，3-二氧基咪唑啉；

(6)在甲醇和氢氧化钠(2.0M)中脱去2-(4-羟基)苯甲酰氨基酸甲酯-4，4，5，5-四甲基-1，3-二氧基咪唑啉中的甲酯制备2-(4-羟基)苯甲酰氨基酸-4，4，5，5-四甲基-1，3-二氧基咪唑啉，即得。

该制备方法可以用图1的合成路线概括。

本发明所要解决的第三个技术问题是提供了所述的化合物在制备镇痛和抗炎药物中的应用。一种用于制备治疗疼痛和炎症药物的组合物，由有效量的所述的化合物6a-l和药学上可接受的载体或辅料组成。

本发明所要解决的第四个技术问题是在小鼠甩尾模型上评价本发明的化合物的镇痛活性。本发明的第五个目的是在小鼠二甲苯耳后致炎模型上评价本发明的化合物的抗炎活性。

附图说明

图1为2-(4-羟基)苯甲酰氨基酸-4，4，5，5-四甲基-1，3-二氧基咪唑啉的合成路线图。

i)2-硝基丙烷Br₂NaOH冰浴油浴；ii)NH₄Cl Zn 50％乙醇(冰浴)索氏提取油浴浓HCl；iii)甲醇；iv)PbO₂甲醇；v)HOBt、DCC和氨基酸甲酯(冰浴)NMM；vi)甲醇2N NaOH(冰浴)，6a中AA代表Gly，6b中AA代表L-Ala，6c中AA代表L-Val，6d中AA代表L-Phe，6e中AA代表L-Pro，6f中AA代表L-Leu，6g中AA代表L-Ile，6h中AA代表L-Ser，6i中AA代表L-Thr，6j中AA代表L-Tyr，6k中AA代表L-Asp，6l中AA代表L-Glu。

具体实施方式

以下结合实施例和试验数据，对本发明上述的和另外的技术特征和优点作更详细的说明。

实施例1 2，3-二硝基-2，3-二甲基丁烷的制备

7ml 2-硝基丙烷13ml的氢氧化钠(6M)滴加2ml的Br₂，在-5℃反应1小时，加入24ml无水乙醇在84℃反应3小时，转移到200ml冰水中得到无色结晶3g(73％)。白色结晶，产率80％，ESI/MS：177[M+H]⁺.

实施例2，3-二羟胺基-2，3-二甲基丁烷的制备

称取4g 2，3二硝基，2，3-二甲基丁烷于250ml茄形瓶中，加入氯化铵6.7g，加入50％的乙醇100ml使其悬浮，分次加入12g Zn粉(冰浴)，搅拌反应3h，过滤，滤液用浓HCl调节PH＝2，浓缩滤液，用无水K₂CO₃拌样，使颗粒均匀，三氯甲烷为提取剂，索氏提取16h，浓缩提取液成糊状后，三氯甲烷/石油醚结晶，过滤结晶为白色粉末，2.4g，白色粉末，产率：40％。ESI/MS：149[M+H]⁺.

实施例3 4，4，5，5-四甲基-2-(4-羟基)苯甲酸-咪唑-1，3-二醇的制备。

常温下，加1.48g 22，3-二羟胺基-2，3-二甲基丁烷于100ml茄瓶中，用大约20ml甲醇溶解，称取5-甲酰水杨酸2g，开始溶液黄色浑浊，大约10min过后，溶液变澄清，常温搅拌大约30min过后，溶液呈白色浑浊，24h以后，过滤得到白色粉末2.4g，产率80％。ESI/MS：298[M+H]⁺.

实施例42-(4-羟基)苯甲酸-4，4，5，5-四甲基-1，3-二氧基咪唑啉(4)的制备

1g 4，4，5，5-四甲基-2-(4-羟基)苯甲酸-咪唑-1，3-二醇，用大约400ml的甲醇溶解于500ml茄瓶中，溶液呈白色浑浊状态，加入约6.77g的PbO₂，常温搅拌约1h之后，反应液呈灰褐色，静止过夜，取上清蓝色液体，浓缩，60-80目的硅胶柱除去残留氧化亚铅，再次过200-300目的硅胶柱，纯化，纯品为蓝色颗粒晶体。产率20％。ESI/MS：292[M-H]^-；ESR为1∶2∶3∶2∶1五重峰；Mp 63℃；[a]_D ²⁰＝-4.63(c＝0.1，CH₃OH)；IR(KBr)：3642，3734，2439，2961，2343，1634，1558，1458，1351，1152，832.

实施例5 2-(4-羟基)苯甲酰甘氨酸甲酯-4，4，5，5-四甲基-1，3-二氧基咪唑啉(5a)的制备

冰浴条件下，取2-(4-羟基)苯甲酸-4，4，5，5-四甲基-1，3-二氧基咪唑啉586mg，溶解于5ml的无水THF中，加入HOBT 272mg，称取DCC 500mg于烧杯中，用尽量少的无水THF溶解之后转移到反应液中，活化15min，加入HCl·Gly-OMe314mg，用NMM调节反应液PH＝12，过夜，TLC板检测反应结束后，过滤除去DCU，浓缩，残留物用少量EtOAc，溶解，以此用5％KHSO4，饱和NaCl，各洗三次。酯层用无水Na₂SO₄干燥，过滤除去Na₂SO₄，滤液浓缩，纯化。得到纯品200mg.蓝色颗粒，产率40％。ESR为1∶2∶3∶2∶1五重峰；ESI-MS(m/e)：364[M-H]^-；Mp 51℃；[a]_D ²⁰＝-0.667(c＝0.1，CH₃OH)；IR(KBr)：3432，3268，3066，2966，2343，1757，1648，1560，1470，1352，1301，1206，839，549.

实施例6 2-(4-羟基)苯甲酰丙氨酸甲酯-4，4，5，5-四甲基-1，3-二氧基咪唑啉(5b)的制备

冰浴条件下，取2-(4-羟基)苯甲酸-4，4，5，5-四甲基-1，3-二氧基咪唑啉586mg，溶解于5ml的无水THF中，加入HOBT 272mg，称取DCC 500mg于烧杯中，用尽量少的无水THF溶解之后转移置反应液中，活化15min，加入HCl.Ala-OMe578mg，用NMM调节反应液PH＝12，过夜，TLC板检测反应结束后，过滤除去DCU，浓缩，残留物用少量EtOAc，溶解，用5％KHSO₄，饱和NaCl各洗三次。酯层用无水Na₂SO₄干燥，过滤除去Na₂SO₄，滤液浓缩，纯化.得到纯品350mg.，蓝色结晶，产率50％.ESR为1∶2∶3∶2∶1五重峰；ESI-MS(m/e)：378[M-H]^-；Mp 66℃；[a]_D ²⁰＝-15.00(c＝0.1，CH₃OH)；IR(KBr)：3842，3743，3355，2831，2344，1757，1740，1648，1553，1452，1358，1303，1211，817.

实施例7 2-(4-羟基)苯甲酰缬氨酸甲酯-4，4，5，5-四甲基-1，3-二氧基咪唑啉(5c)的制备

冰浴条件下，取2-(4-羟基)苯甲酸-4，4，5，5-四甲基-1，3-二氧基咪唑啉586mg，溶解于5ml的无水THF中，加入HOBT 272mg，称取DCC 500mg于烧杯中，用尽量少的无水THF溶解之后转移置反应液中，活化15min，加入HCl.Val-OMe419mg，用NMM调节反应液PH＝12，过夜，TLC板检测反应结束后，过滤除去DCU，浓缩，残留物用少量EtOAc，溶解，用5％KHSO4，饱和NaCl各洗三次。酯层用无水Na₂SO₄干燥，过滤除去Na₂SO₄，滤液浓缩，纯化。得到纯品207mg。蓝色结晶，产率：50％.ESR为1∶2∶3∶2∶1五重峰；ESI-MS(m/e)：406[M-H]^-；Mp80℃；[a]_D ²⁰＝-8.33(c＝0.12，CH₃OH)；IR(KBr)：3607，2962，2343，1743，1646，1542，1365，1206，837.

实施例8 2-(4-羟基)苯甲酰苯丙氨酸甲酯-4，4，5，5-四甲基-1，3-二氧基咪唑啉(5d)的制备

按照实施例7得到纯品150mg，蓝色颗粒，产率35％。ESR为1∶2∶3∶2∶1五重峰；ESI-MS(m/e)：454[M-H]^-；Mp 80℃；[a]_D ²⁰＝-7.66(c＝0.12，CH₃OH)；IR(KBr)：3735，3420，2928，2345，1740，1646，1536，1380，1182，1003，679.

实施例9 2-(4-羟基)苯甲酰脯氨酸甲酯-4，4，5，5-四甲基-1，3-二氧基咪唑啉(5e)的制备

按照实施例7得到纯品350mg.蓝色结晶，产率60％.ESR为1∶2∶3∶2∶1五重峰；ESI-MS(m/e)：406[M-H]-；Mp 58℃；[a]D20＝-4.00(c＝0.13，CH₃OH)；IR(KBr)：3851，3736，2948，2343，1654，1449，1186，665.

实施例10 2-(4-羟基)苯甲酰亮氨酸甲酯-4，4，5，5-四甲基-1，3-二氧基咪唑啉(5f)的制备

按照实施例7得到纯品300mg.蓝色结晶，产率70％.ESR为1∶2∶3∶2∶1五重峰；ESI-MS(m/e)：420[M-H]^-；Mp 71℃；[a]_D ²⁰＝-11.00(c＝0.12，CH₃OH)；IR(KBr)：3843，3735，3607，3328，2935，2343，1620，1377，846，662

实施例11 2-(4-羟基)苯甲酰异亮氨酸甲酯-4，4，5，5-四甲基-1，3-二氧基咪唑啉(5g)的制备

按照实施例7得到纯品200mg.蓝色结晶，产率：30％.ESR为1∶2∶3∶2∶1五重峰；ESI-MS(m/e)：420[M-H]^-；Mp 65℃；[a]_D ²⁰＝-5.00(c＝0.11，CH₃OH)；IR(KBr)：3732，3183，2941，2343，1734，1545，1367，661.

实施例12 2-(4-羟基)苯甲酰丝氨酸甲酯-4，4，5，5-四甲基-1，3-二氧基咪唑啉(5h)的制备

按照实施例7.得到纯品100mg.蓝色结晶产率20％.ESR为1∶2∶3∶2∶1五重峰；ESI-MS(m/e)：394[M-H]^-；Mp 92℃；[a]_D ²⁰＝-15.33(c＝0.1，CH₃OH)；IR(KBr)：3842，3734，3429，2942，2343，1742，1647，1538，1358，1214，821，660.

实施例13 2-(4-羟基)苯甲酰苏氨酸甲酯-4，4，5，5-四甲基-1，3-二氧基咪唑啉(5i)的制备

按照实施例7.得到纯品160mg.蓝色结晶产率25％.ESR为1∶2∶3∶2∶1五重峰；ESI-MS(m/e)：408[M-H]^-；Mp：80℃；[a]_D ²⁰＝-6.77(c＝0.11，CH₃OH)；IR(KBr)：3842，3734，3436，2936，2343，1636，1531，1109.

实施例14 2-(4-羟基)苯甲酰酪氨酸甲酯-4，4，5，5-四甲基-1，3-二氧基咪唑啉(5j)的制备

按照实施例7.得到纯品150mg.产率25％.ESR为1∶2∶3∶2∶1五重峰；ESI-MS(m/e)：470[M-H]^-；Mp：87℃；[a]_D ²⁰＝-9.667(c＝0.1，CH₃OH)；IR(KBr)：3841，3734，3417，2931，2343，1725，1650，1531，1369，1211，824，661.

实施例15 2-(4-羟基)苯甲酰天冬氨酸甲酯-4，4，5，5-四甲基-1，3-二氧基咪唑啉(5k)的制备

按照实施例7.得到纯品500mg.蓝色结晶，产率60％.ESR为1∶2∶3∶2∶1五重峰；ESI-MS(m/e)：470[M-H]^-；Mp：65℃；[a]_D ²⁰＝-12(c＝0.1，CH₃OH)；IR(KBr)：3841，3734，3436，2945，2344，1742，1634，1542，1202，849.

实施例15 2-(4-羟基)苯甲酰谷氨酸甲酯-4，4，5，5-四甲基-1，3-二氧基咪唑啉(5l)的制备

按照实施例7.得到纯品350mg.ESR为1∶2∶3∶2∶1五重峰；ESI-MS(m/e)：450[M-H]^-；Mp：68℃；[a]_D ²⁰＝-11(c＝0.1，CH₃OH)；IR(KBr)：3843，3734，3336，2932，2344，1742，1636，1545，1451，1201，828，666.

实施例16 2-(4-羟基)苯甲酰甘氨酸-4，4，5，5-四甲基-1，3-二氧基咪唑啉(6a)的制备

2-(4-羟基)苯甲酰甘氨酸甲酯-4，4，5，5-四甲基-1，3-二氧基咪唑啉200mg，用尽量少的甲醇溶解(冰浴)，用2N NaOH调节反应液PH＝14，TLC板检测反应结束后，用饱和KHSO₄调节反应液PH＝7.浓缩除去甲醇，残留物用KHSO₄调节PH＝2，用EtOAc萃取三次，合并酯层，酯层用饱和NaCl洗至中性，用无水Na₂SO₄干燥，过滤除去Na₂SO₄，滤液浓缩，得到纯品：150mg蓝色结晶，产率80％。ESI-MS(m/e)：349[M-H]^-；Mp 52.7℃；[a]_D ²⁰＝-30(c＝0.21，CH₃OH)；IR(KBr)：3841，3734，3609，2931，2343，1649，1558，1131，667，433；ESR为1∶2∶3∶2∶1五重峰。

实施例17 2-(4-羟基)苯甲酰丙氨酸-4，4，5，5-四甲基-1，3-二氧基咪唑啉(6b)的制备

按照实施例16得到：300mg蓝色结晶，产率90％。ESI-MS(m/e)：364[M-H]^-；Mp 74℃；[a]_D ²⁰-23(c＝0.2，CH₃OH)；IR(KBr)：3841，3734，3438，2395，2343，1651，1533，1459，417；ESR为1∶2∶3∶2∶1五重峰。

实施例18 2-(4-羟基)苯甲酰缬氨酸-4，4，5，5-四甲基-1，3-二氧基咪唑啉(6c)的制备

按照实施例16得到：250mg蓝色结晶，产率90％。ESI-MS(m/e)：392[M-H]^-；Mp 51℃；[a]_D ²⁰-23(c＝0.2，CH₃OH)；IR(KBr)：3642，3735，3430，2946，2344，1650，1534，1459，839，437；ESR为1∶2∶3∶2∶1五重峰。

实施例19 2-(4-羟基)苯甲酰苯丙氨酸-4，4，5，5-四甲基-1，3-二氧基咪唑啉(6d)的制备

按照实施例16得到：300mg蓝色结晶，产率80％。ESI-MS(m/e)：440[M-H]^-；Mp 56℃；[a]_D ²⁰＝-50(c＝0.1，CH₃OH)；IR(KBr)：3842，3734，3438，2947，2343，1647，1539，1457，1132，838，416；ESR为1∶2∶3∶2∶1五重峰。

实施例20 2-(4-羟基)苯甲酰脯氨酸-4，4，5，5-四甲基-1，3-二氧基咪唑啉(6e)的制备

按照实施例16得到：200mg蓝色结晶，产率90％。ESI-MS(m/e)：390[M-H]^-；Mp 60℃；[a]_D ²⁰-24(c＝0.2，CH₃OH)；IR(KBr)：3842，3734，3440，2951，2344，1637，1537，1458，1172，662，439；ESR为1∶2∶3∶2∶1五重峰。

实施例21 2-(4-羟基)苯甲酰亮氨酸-4，4，5，5-四甲基-1，3-二氧基咪唑啉(6f)的制备

按照实施例16得到：200mg蓝色结晶，产率90％。ESI-MS(m/e)：406[M-H]^-；Mp 92℃；[a]_D ²⁰-12.67(c＝0.3，CH₃OH)；IR(KBr)：3842，3734，3440，2945，2343，1651，1532；ESR为1∶2∶3∶2∶1五重峰。

实施例22 2-(4-羟基)苯甲酰异亮氨酸-4，4，5，5-四甲基-1，3-二氧基咪唑啉(6g)的制备

按照实施例16得到：300mg蓝色结晶，产率90％。ESI-MS(m/e)：406[M-H]^-；Mp 87℃；[a]_D ²⁰＝-22(c＝0.2，CH₃OH)；IR(KBr)：3842，3734，3440，1565，667；ESR为1∶2∶3∶2∶1五重峰。

实施例23 2-(4-羟基)苯甲酰丝氨酸-4，4，5，5-四甲基-1，3-二氧基咪唑啉的制备

按照实施例16得到：280mg蓝色结晶，产率70％。ESI-MS(m/e)：380[M-H]^-；Mp 53℃；[a]_D ²⁰＝-6.77(c＝0.2，CH₃OH)；IR(KBr)：3842，3734，3441，2927，1650，1533；ESR为1∶2∶3∶2∶1五重峰。

实施例24 2-(4-羟基)苯甲酰苏氨酸-4，4，5，5-四甲基-1，3-二氧基咪唑啉(6i)的制备

按照实施例16得到：350mg蓝色结晶，产率90％。ESI-MS(m/e)：394[M-H]^-；Mp 72℃；[a]_D ²⁰＝-22(c＝0.15，CH₃OH)；IR(KBr)：3842，3734，3440，2958，2343，1634，1532，1358，1275，1130，835，434；ESR为1∶2∶3∶2∶1五重峰。

实施例25 2-(4-羟基)苯甲酰酪氨酸-4，4，5，5-四甲基-1，3-二氧基咪唑啉(6j)的制备

按照实施例16得到：200mg蓝色结晶，产率80％。ESI-MS(m/e)：456[M-H]^-；Mp 78℃；[a]_D ²⁰＝-106(c＝0.05，CH₃OH)；IR(KBr)：3841，3734，3609，2343，1651，1534，668ESR为1∶2∶3∶2∶1五重峰。

实施例26 2-(4-羟基)苯甲酰天冬氨酸-4，4，5，5-四甲基-1，3-二氧基咪唑啉(6k)的制备

按照实施例16得到：400mg蓝色结晶，产率90％。ESI-MS(m/e)：408[M-H]^-；Mp 68℃；[a]_D ²⁰＝-48(c＝0.1，CH₃OH)；IR(KBr)：3842，3734，3441，2961，2343，1651，1532，436；ESR为1∶2∶3∶2∶1五重峰。

实施例27 2-(4-羟基)苯甲酰谷氨酸-4，4，5，5-四甲基-1，3-二氧基咪唑啉(6l)的制备

按照实施例16得到：400mg蓝色结晶，产率90％。ESI-MS(m/e)：408[M-H]^-；Mp 85℃；[a]_D ²⁰＝-18.15(c＝0.2，CH₃OH)；IR(KBr)：3842，3734，3441，2929，2343，1657，1650，1198，663，436；ESR为1∶2∶3∶2∶1五重峰。

实施例28小鼠光辐射热甩尾法评价6a-l的镇痛作用

雄性ICR小鼠(20±2g)，实验前在实验温度下饲养一天。将小鼠装入特制的固定筒内，尾部暴露于外。测痛时以小型聚光灯产生的光束照射鼠尾，用秒表计从照射开始到甩尾反应潜伏期(tail flick latency，TFL)。调节聚光灯与鼠尾距离使剌激强度较为灵敏TFL为2-6s。实验开始时先测3次，每次间隔5min，取均值作为基础痛阈。将本发明的化合物溶解在水中，灌胃给药，按每次灌胃量为0.2ml以及1μmol/kg剂量调节浓度。每次试验设生理盐水组作平行对照。为防止皮肤烫伤，光照截止时间10s，间隔30min复测TFL以观察药物镇痛时效关系。以痛阈提高率评定药物镇痛强度：PTV＝AAPT/BPT(PTV＝痛阈提高率，BPT＝基础痛阈值，AAPT＝给药后痛阈值-基础痛阈值)。得到的结果列入表1。结果表明本发明的化合物具有明确的镇痛作用。

表1小鼠痛域提高率结果

n＝10；NS＝生理盐水4及6a-l剂量为1μmol/kg；a)与ns  组比，

p＜0.01；b)与n s组及4组比，p＜0.01

实施例29不同剂量6l的镇痛作用

采用实施例28的小鼠光辐射热甩尾模型评价了0.1μmol/kg、1μmol/kg和10μmol/kg三种剂量6l的镇痛作用。结果列入表2。结果表明6l剂量依赖地显示镇痛作用。

表2不同给药剂量下6l的镇痛作用

n＝10；a)与ns组比，p＜0.01；b)与ns组及1u mol/kg组比p＜0.05

实施例30小鼠二甲苯耳致炎模型评价6a-l的抗炎作用

雄性ICR小鼠(20±2g)，实验前在实验温度下饲养一天。将本发明的化合物溶解在水溶液中，每次实验设生理盐水组作平行对照，灌胃给药，按每次灌胃量为0.2ml以及1μmol/kg剂量调节浓度。给药后半小时将30μL二甲苯均匀涂抹在小鼠右耳上，涂抹完毕2小时后处死小鼠，立即剪下双侧耳朵，将两只耳朵对齐后用9mm打孔器打下二片，称量得到两只耳朵的差重。得到的结果列入表3。结果表明本发明的化合物具有明确的抗炎作用。

表3化合物6a-s的抗炎作用

N＝12；NS＝生理盐水；6a-l及4剂量为1μmol/kg；Aspirin剂量为165μmol/kg；a)与NS组比，p＜0.01；b)与NS及4(母核)组比，p＜0.01；c)与NS，4(母核)及aspirin组比p＜0.01

实施例31不同剂量6l的抗炎作用

采用实施例30的小鼠二甲苯耳致炎模型模型评价了0.1μmol/kg、1μmol/kg和10μmol/kg三种剂量6l的抗炎作用。结果列入表4。结果表明6l剂量依赖地显示抗炎作用。

表4不同给药剂量下6l的抗炎作用

n＝12；a)与1μmol/kg比较p＜0.05，与0.1μmol/kg比较p＜0.01；b)与0.1μmol/kg比较p＜0.01；c)与NS比较p＜0.05

以上所述的实施例仅仅是对本发明的优选实施方式进行描述，并非对本发明的范围进行限定，在不脱离本发明设计精神的前提下，本领域普通技术人员对本发明的技术方案作出的各种变形和改进，均应落入本发明权利要求书确定的保护范围内。

Claims (3)

1.一种通式为I的化合物：

式中，AA为Gly、L-Ala、L-Val、L-Phe、L-Pro、L-Leu、L-Ile、L-Ser、L-Thr、L-Tyr、L-Asp或L-Glu。

2.一种制备权利要求1所述化合物的方法，其特征在于包括以下步骤：

(1)0℃条件下2-硝基丙烷在氢氧化钠(6.0M)中滴加Br₂，加入无水乙醇反应1个小时，在84℃反应3小时制备2，3-二甲基-2，3-二硝基丁烷；

(2)2，3-二甲基-2，3-二硝基丁烷在50％乙醇中在0℃与氯化铵混合后3小时内分次加入锌粉，于10℃搅拌3小时，然后无水K₂CO₃拌样。用二氯甲烷于70℃提取制备2，3-二羟胺基-2，3-二甲基丁烷；

(3)2，3-二羟胺基-2，3-二甲基丁烷和5-甲酰水杨酸，室温反应16小时得到4，4，5，5-四甲基-2-(4一羟基)苯甲酸-咪唑-1，3-二醇；

(4)4，4，5，5-四甲基-2-(4-羟基)苯甲酸-咪唑-1，3-二醇与二氧化铅在甲醇中于室温反应24小时制备2-(4-羟基)苯甲酸)-4，4，5，5-四甲基-1，3-二氧基咪唑啉；

(5)在DCC、HOBt和NMM存在下将2-(4-羟基)苯甲酸-4，4，5，5-四甲基-1，3-二氧基咪唑啉与氨基酸甲酯偶联，制备2-(4-羟基)苯甲酰氨基酸甲酯-4，4，5，5-四甲基-1，3-二氧基咪唑啉；

(6)在甲醇和氢氧化钠(2.0M)中脱去2-(4-羟基)苯甲酰氨基酸甲酯-4，4，5，5-四甲基-1，3-二氧基咪唑啉中的甲酯制备2-(4-羟基)苯甲酰氨基酸-4，4，5，5-四甲基-1，3-二氧基咪唑啉，即得。

3.权利要求1所述的化合物在制备镇痛和抗炎药物中的用途。

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