CN102784111A

CN102784111A - 一种多巴胺受体激动剂类药物的缓释制剂

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Publication number: CN102784111A
Application number: CN2011101270095A
Authority: CN
Inventors: 李军; 孙丽芳
Original assignee: Shandong Luye Pharmaceutical Co Ltd; Nanjing Luye Pharmaceutical Co Ltd
Current assignee: Shandong Luye Pharmaceutical Co Ltd; Nanjing Luye Pharmaceutical Co Ltd
Priority date: 2011-05-17
Filing date: 2011-05-17
Publication date: 2012-11-21

Abstract

本发明涉及一种多巴胺受体激动剂类药物的缓释制剂，包括多巴胺受体激动剂类药物、生物可降解的药用高分子辅料和去突释附加剂，其中生物可降解的药用高分子辅料包括低分子量的可降解的药用高分子辅料和高分子量的可降解的药用高分子辅料。采用本发明制备的缓释制剂克服了现有技术中多巴胺受体激动剂类药物缓释制剂存在的突释问题和给药后1-4天释药量低的技术问题。

Description

一种多巴胺受体激动剂类药物的缓释制剂

技术领域

本发明涉及一种多巴胺受体激动剂类药物的缓释制剂

背景技术

多巴胺受体激动剂为治疗帕金森症的一类重要药物，目前临床使用的多巴胺受体激动剂有多巴胺激动剂类药物为罗替可丁(rotigotine)、普拉克索(pramipexole)、罗匹尼罗(ropinirole)、培高利特(pergolide)、特麦角脲(terguride)、喹高利特(quinagolide)、卡麦角林(cabergoline)及其它们的衍生物或药用盐；处于临床试验阶段的品种有sumanirole、pardoprunox(SLV-308)、adrogolide(ABT-431)，Dinapsoline和ergoline(BAM-1110))及它们的衍生物或药用盐等。

上述药物临床上多采用口服制剂或透皮制剂给药。虽然口服用药方便，但晚期帕金森症患者常常伴随记忆减退，会漏服药物，导致病情恶化；另外、口服给药后浓度波动较大，会导致副作用增加，并出现“开关效应”；胃肠道及肝脏首过效应导致生物利用度降低，如，罗替可丁由于肝首过效应，其口服生物利用度很低，仅为1％-5％，所以不适合于口服剂型。另一方面，普通透皮制剂如软膏、硬膏等透皮吸收存在不足，而且由于透皮吸收影响因素较多，药物吸收常有变动，而且、透皮吸收剂受到皮肤低渗透性的影响，也造成摄入量低，生物利用度低，个体差异大等问题，治疗效果受到限制，尤其对中晚期帕金森病患者，其疗效很受局限。

采用非肠道给药如注射给药可以避免首过效应，但是由于罗替可丁、普拉克索等半衰期短，仅有数小时，一日需多次给药。其它的一些药物，虽然半衰期相对长些，但是至少也需要每天或隔天给药，因此也难言有利于向帕金森症患者的给药。

因此，希望提供一种多巴胺受体激动剂类药物的长效缓释制剂，最好是不经过口服，而是例如经肌肉或皮下等给药，同时可持续平稳释放药物几周、几个月甚至更长，以最大限度减少帕金森病患者服药的痛苦。

CN1531428A(WO2002/015903)公开了一种罗替可丁的贮库型(Depot form)缓释制剂，其中使用了将罗替可丁盐酸盐悬浮于油性溶剂得到的所谓“贮库”，可以将给药间隔延长到1日以上。CN1531428A中虽然也通过引用在先文献EP0625069(CN1090172A)提到了可以制备罗替可丁的微粒或者微胶囊(即本发明中的缓释微球)实现缓释，但是对于罗替可丁的微胶囊、缓释微球等的组成、比例等并无任何公开。

要实现可以一周、两周甚至一个月乃至更长时间给药一次的长效缓释制剂，不仅要求缓释制剂能够在体内长期稳定地释放药物，使患者在上述给药期间体内能够保持有效的血药浓度，而且还要使该药物注射到体内时不会产生过大的副作用。这就要求制备缓释制剂时不仅要对药物量的使用范围有严格的要求，而且对辅料的使用及其用量的范围也要求很严格。只有这样，才能真正实现一周或两周以上甚至一个月给患者服药一次，并能达到很好的治疗效果。

上述CN1531428A和CN1090172A对于多巴胺受体激动剂类药物的缓释制剂和辅料并无任何公开，因此，实际上包括罗替可丁的多巴胺受体激动剂类药物长效缓释制剂(给药间隔长达1周或2周甚至一个月以上)仍然是未知的。

本发明人等为了实现多巴胺受体激动剂类药物的长效缓释目的进行了深入研究，发现通过采用生物可降解高分子均匀包埋药物而成制成注射用缓释微球、植入体和注射用凝胶等，通过经肌肉或皮下给药，可持续平稳释放药物几周至几个月，同时具有生物利用度高，血药浓度波动小，给药次数大大减少等优点。与传统口服制剂相比，可以减少副作用的产生，降低“开关效应”出现的频率，同时显著提高生物利用度，增加患者用药的依从性，最大程度的发挥该类药物的治疗效果。基于以上发现实现了本发明。

发明内容

本发明要解决的技术问题之一在于克服现有技术中多巴胺受体激动剂类药物缓释制剂中存在的前期药物释放缓慢的问题。

为解决上述技术问题，本发明提供了一种缓释制剂，包括多巴胺受体激动剂类药物和生物可降解的药用高分子辅料，其中多巴胺受体类激动剂药物重量含量为5-50％，药用高分子辅料重量含量为50-95％，所述生物可降解的药用高分子辅料包括低分子量的可降解的药用高分子辅料和高分子量的可降解的药用高分子辅料。

上述缓释制剂优选包括多巴胺受体激动剂类药物和生物可降解的药用高分子辅料，其中多巴胺受体激动剂类药物重量含量为10-30％，药用高分子辅料重量含量为70-90％，所述生物可降解的药用高分子辅料包括低分子量的可降解的药用高分子辅料和高分子量的可降解的药用高分子辅料。

上述低分子量的可降解的药用高分子辅料优选为低分子量的聚丙交酯乙交酯，更优选分子量为15000-35000的聚丙交酯乙交酯；高分子量的可降解的药用高分子辅料优选为高分子量的聚丙交酯乙交酯，更优选分子量为42000-75000的聚丙交酯乙交酯，其中低分子量的可降解的药用高分子辅料和高分子量的可降解的药用高分子辅料重量比为95∶5-5∶95。

本发明要解决的技术问题之二在于克服现有技术中多巴胺受体激动剂类药物缓释制剂中存在的突释问题。

为解决上述技术问题，本发明提供了一种缓释制剂，包括多巴胺受体激动剂类药物、生物可降解的药用高分子辅料和去突释附加剂，其中多巴胺受体激动剂类药物重量含量为5-50％，药用高分子辅料重量含量为40-94％，去突释附加剂重量含量为1-10％。

上述缓释制剂优选包括多巴胺受体激动剂类药物、生物可降解的药用高分子辅料和去突释附加剂，其中多巴胺受体激动剂类药物重量含量为20-35％，药用高分子辅料重量含量为55-77.5％，去突释附加剂重量含量为2.5-10％。

所述去突释附加剂为脂肪酸，该脂肪酸选自碳原子数为8-24的脂肪酸，优选为硬脂酸、软脂酸，油酸、癸酸、辛酸或木腊酸，更优选为硬脂酸。

本发明要解决的技术问题之三在于克服加入去突释附加剂后多巴胺受体激动剂类药物缓释制剂给药后1-4天释药量低的技术问题。

为解决上述技术问题，本发明提供了一种缓释微球，包括多巴胺受体激动剂类药物、去突释附加剂和生物可降解的药用高分子辅料，其中多巴胺受体激动剂类药物重量含量为5-50％，药用高分子辅料重量含量为40-94％，去突释附加剂重量含量为1-10％，该生物可降解的药用高分子辅料包括低分子量的可降解的药用高分子辅料和高分子量的可降解的药用高分子辅料。

上述缓释制剂优选包括巴胺受体激动剂类药物、去突释附加剂和生物可降解的药用高分子辅料，其中多巴胺受体激动剂类药物重量含量为20-35％，药用高分子辅料重量含量为55-77.5％，去突释附加剂重量含量为2.5-10％，该生物可降解的药用高分子辅料包括低分子量的可降解的药用高分子辅料和高分子量的可降解的药用高分子辅料。

本发明所述多巴胺受体激动剂类药物为罗替可丁、普拉克索、罗匹尼罗、培高利特、卡麦角林、特麦角脲、喹高利特、sumanirole、pardoprunox(SLV-308)、adrogolide(ABT-431)，Dinapsoline和ergoline(BAM-1110)及其它们的衍生物或药用盐中的一种、两种或两种以上的组合。

多巴胺受体激动剂类药物中，其药用盐为药物成分和无机酸、有机酸或酸性氨基酸形成的盐，其中，无机酸为盐酸、硫酸、磷酸或硝酸；有机酸为柠檬酸、延胡索酸、马来酸、乙酸、苯甲酸、甲磺酸、萘磺酸或对苯甲磺酸；酸性氨基酸为谷氨酸或天门冬氨酸等。

更具体的，普拉克索及其衍生物或药用盐为普拉克索的游离碱或普拉克索的二盐酸盐等；罗匹尼罗及其衍生物或药用盐为罗匹尼罗的游离碱或罗匹尼罗的盐酸盐等；培高利特及其衍生物或药用盐为培高利特的游离碱或培高利特的甲磺酸盐等；卡麦角林及其衍生物或药用盐为卡麦角林的游离碱或卡麦角林的二磷酸盐等；特麦角脲及其衍生物或药用盐为特麦角脲的游离碱或特麦角脲的马来酸盐等；喹高利特及其衍生物或其药用盐为喹高利特的游离碱或喹高利特的盐酸盐等；sumanirole及其衍生物或药用盐为sumanirole的游离碱或sumanirolede的马来酸盐等；pardoprunox(SLV-308)及衍生物或药用盐为pardoprunox的游离碱(CAS登记号为269718-84-5)或pardoprunox的盐酸盐(CAS登记号为269718-83-4)等；adrogolide(ABT-431)及其衍生物或药用盐为adrogolide、adrogolide的盐酸盐或其转化物A-86929等；Dinapsoline及其衍生物或药用盐为dinapsoline或dinapsoline的氢溴酸盐等；ergoline(BAM-1110，CAS登记号为155210-57-4)及其衍生物或药用盐为ergoline(BAM-1110)的马来酸盐等。

上述多巴胺受体激动剂类药物中，最优选如下通式(Ia)所示的罗替可丁及其衍生物或药用盐：

所示的化合物或其药用盐，式中R1表示氢原子、C1-C10烷酰基或芳香酰基(优选氢原子、C2-C4烷酰基或芳香酰基)；R2表示氢原子、C1-C10烷基；优选C2-C4烷基；X表示碳原子或氮原子或氧原子或硫原子；n为1-10之中的任何一个整数(优选1-3)；其药用盐为罗替可丁游离碱和盐酸、醋酯、磷酸、硫酸、乳酸或柠檬酸所成的盐。罗替可丁类药物，优选罗替可丁乙酯、罗替可丁苯甲酯、罗替可丁丙酯、罗替可丁丁酯和罗替可丁异丁酯及其盐酸盐。

本发明生物可降解药用高分子辅料也可以选自聚丙交酯乙交酯、聚乳酸、聚乙醇酸、聚-3-羟基丁酸酯、聚内酯、聚酸酐、聚羟基丁酸酯羟基戊酸共聚物、聚丙烯葡聚糖、聚乳酸-聚乙二醇和聚羟乙酸-聚乙二醇中的一种、两种或两种以上组合。

上述多巴胺受体激动剂类药物的缓释制剂，优选为注射用微球、注射用凝胶、植入体等。

本发明所述长效缓释微球粒径优选为50-200微米之间。

本发明所述的微球可以采用本领域微球的常规制备方法制得，如采用喷雾干燥法、溶剂挥发法以及喷雾萃取法，但并不受限于本发明列举的方法。

当用溶剂挥发法制备本发明的微球时，首先用有机溶剂把多巴胺受体激动剂类药物和生物可降解的药用高分子辅料及去突释附加剂溶解，配制成有机相。另外，用水溶性的药用高分子辅料配制连续水相，将有机相通过细管注入到连续相中，在机械搅拌或者超声波等剧烈搅拌作用下，充分乳化以形成微球，然后挥发干有机溶剂，过滤分离所形成的微球，干燥即得。在必要的情况下，也可以按照常规方法对微球进行水洗、分级等后处理，进行减压烘干或者冻干等干燥处理，然后分装。

以上操作中，多巴胺受体激动剂类药物和生物可降解的药用高分子辅料及去突释附加剂如前所述。有机溶剂从操作角度应为具有足够挥发性、低残留的低沸点有机溶剂，具体说例如二氯甲烷、氯仿、乙酸乙酯、乙醚、以及由它们所组成的混合溶剂等。配制连续水相的水溶性的药用高分子辅料可以为聚乙烯醇、羧甲基纤维素钠、聚乙烯基吡咯烷酮、聚甲基丙烯酸钠和聚丙烯酸钠的一种、两种或两种以上组合，但不仅限于此。

在配制有机相的时候，多巴胺受体激动剂类药物和生物可降解的药用高分子辅料及去突释附加剂在有机溶剂中的含量只要有机溶剂能够溶解，就没有限制，不过从可行浓度及粘度的平衡和少用有机溶剂的角度出发，优选浓度为1-30％(w/v)。在用聚乙烯醇、羧甲基纤维素钠、聚乙烯基吡咯烷酮、聚甲基丙烯酸钠和聚丙烯酸钠中的一种、两种或两种以上组合配制连续水相时，其浓度没有特别限制，但根据其在水中的溶解度，在水相中的含量优选0.01-12.0％(w/v)，再优选0.01-10.0％(w/v)，更优选0.1-5％(w/v)。在将有机相注入水相并剧烈搅拌以形成微球时，有机相和水相的体积比应足以使有机相在水相中充分分散以形成足够细的粒度和均匀度的微球，但是如果水相过多，后处理复杂，成本提高，从以上角度出发，有机相与水相的体积比大致为1∶4～1∶100。

也可以采用喷雾干燥法制备微球。当采用喷雾干燥法制备多巴胺受体激动剂类药物的缓释制剂时，是以有机溶剂把多巴胺受体激动剂类药物和生物可降解的药用高分子辅料充分溶解配制成有机溶液；过滤，以常规喷雾干燥法制成微球。在必要的情况下，也可以按照常规方法对微球进行水洗，分级等后处理，然后分装。

上述喷雾干燥法制备微球时，有机溶剂可以使用二氯甲烷、氯仿、乙酸乙酯、二氧六环、乙醚、丙酮、四氢呋喃、冰醋酸及由它们所组成的混合溶剂等，但不仅限于此。

在配制有机相的时候，PLGA在有机溶剂中的含量，只要有机溶剂能够溶解该辅料，就没有限制，不过从可行浓度和节约有机溶剂的平衡角度出发，优选浓度为1-30％(w/v)。

也可以采用喷雾萃取法制备微球，当采用喷雾萃取法制备多巴胺受体激动剂类药物缓释制剂时，以“有机溶剂A”(可以溶解罗替戈汀或其药用盐和PLGA)把多巴胺受体激动剂类药物和生物可降解的药用高分子辅料充分溶解配制成有机溶液，将其喷雾至“有机溶剂B”(多巴胺受体激动剂类药物和生物可降解的药用高分子辅料在其中不溶解)或水中，经萃取而制成微球，在必要的情况下，也可按照常规方法对微球进行水洗，分级等的处理，然后分装。

上述喷雾萃取法制备微球时，“有机溶剂A”选自二氯甲烷、氯仿、乙酸乙酯、二氧六环、乙醚、丙酮、四氢呋喃、苯、甲苯、冰醋酸中的一种或几种，但不仅限于此。所述的“有机溶剂B”选自甲醇、乙醇、丙醇、异丙醇、石油醚、烷烃、石腊油中的一种或几种，但不仅限于此。

在配制有机溶液时，生物可降解的药用高分子辅料在“有机溶剂A”中的含量，只要“有机溶剂A”能溶解该辅料，就没有限制，不过从可行浓度和节约有机溶剂的平衡角度出发，优选浓度为1-30％(w/v)。

制备微球溶剂挥发法和喷雾干燥法相比，从制成的微球的粒径均匀度和操作简便性等来说，优选喷雾干燥法。从降低初始释放的角度来说，优选溶剂挥发法。

本发明所述的多巴胺受体激动剂类药物缓释制剂制备后，经过粒径分级或者如果粒径足够均匀的话也可以不分级，清洗、干燥后按照规定剂量分装，可以制成粉针剂注射剂，使用时在现场(in situ)配成注射剂。粉针剂可以是直接由上述微球制成，使用前用羧甲基纤维素钠注射液将微球混悬均匀，也可以在微球中混配规定量的羧甲基纤维素钠、甘露醇、葡萄糖等，使用前在其中加入规定量的注射用纯水，制成注射液。本发明所述的治疗与多巴胺受体有关的疾病的方法和治疗帕金森氏症的方法是采用上述本发明的罗替戈汀或其药用盐的注射液给予需要上述治疗的患者来进行的。给药方式只要是可以使用注射剂的，可以不拘使用。例如肌肉注射、皮下注射、皮内注射、腹内注射等。从给药方便角度来说，优选肌肉注射给药及皮下注射给药。

采用本发明的多巴胺受体激动剂类药物缓释制剂，可以实现不少于两周的间隔给药，改善了帕金森氏症患者的生活质量，避免了每日给药的缺陷。

本发明制备的缓释制剂，解决了多巴胺受体激动剂类药物缓释制剂存在突释的问题和前期药物释放缓慢的问题，实现了多巴胺受体激动剂类药物缓释制剂既无突释又可长期稳定释药，达到长效缓释的目的。

本发明的其他内容和优点通过以下详细叙述可以进一步明确。

具体实施方式

以下通过实施例和试验例来进一步说明罗替戈汀长效缓释，但并不限于此。

实施例1单一PLGA制备微球(理论载药量20％)

称取罗替戈汀0.3104g和PLGA 7525 4A 1.2083g，加二氯甲烷7.5ml搅拌溶解，在搅拌(1200-2000rpm)下用蠕动泵(100rpm)加入至750ml 0.5％PVA水溶液中，乳化2min后，降低搅拌速度挥发溶剂5h，将所得溶液经1200目筛过滤收集微球，并以纯化水冲洗1200目筛上微球3～5遍后，冻干，经100目筛过筛后，即得。

实施例2单一PLGA制备微球(理论载药量25％)

称取罗替戈汀0.3752g和PLGA7525 4A 1.1291g，按实施例1的方法制备，即得罗替戈汀微球。

实施例3单一PLGA制备微球(理论载药量30％)

称取罗替戈汀0.4522g和PLGA7525 4A 1.0511g，按实施例1的方法制备，即得罗替戈汀微球。

实施例4单一PLGA制备微球(理论载药量35％)

称取罗替戈汀0.5268g和PLGA7525 4A 0.9790g，按实施例1的方法制备，即得罗替戈汀微球。

实施例5单一PLGA制备微球(理论载药量40％)

称取罗替戈汀0.6043g和PLGA7525 4A 0.9019g，按实施例1的方法制备，即得罗替戈汀微球。

试验例1

取实施例1-5微球，通过模拟体内条件进行体外释放试验。

试验条件：温度：37±0.5℃，转速：50rpm

色谱条件与系统适用性试验用十八烷基键合硅胶为填充剂，以0.3％磷酸水溶液(取3mL磷酸，用水稀释至1000mL)-乙腈(66∶34)为流动相；柱温为35℃，检测波长为223nm，罗替可戈汀峰与其他峰的分离度应符合规定。理论塔板数按罗替戈汀峰计算不低于10000。

试验方法：照释放度测定法(《中国药典》2005年版二部附录X D)测定。分别精密称定上述微球各3份，每份约6mg，分别置于10mL具塞离心管中，加入含0.2％SDS释放介质磷酸盐缓冲液9.0mL，振摇至混悬后，放入37℃±0.5℃的水浴振荡器中，以50±3rpm的速度振荡，分别于3h、1d、2d、4d、6d、8d、10d、12d、14d、16d、18d、20d取出离心管，在5-8℃下，以3600rpm的转速离心10min。待离心结束后，取上清液6mL作为供试液，同时补充相同温度的释放介质6.0mL，振摇至混悬后放回水浴振荡器中振荡，取上述供试液用HPLC测定，按外标法计算累积释放量，在pH7.4的条件下，体外释药数据见表1。

表1不同理论载药量考察结果

罗替戈汀微球0.125和1天的释放量与药物在体内的突释有一定的相关性，释放量高，药物在体内的突释高。

由表1可以看出，随着微球的载药量从20％增加至40％，0.125天的释放量从1.33％增加至4.97％，1天的累积释放量从5.25％增加至20.45％，即微球在0.125天和1天两个时间点的药物释放明显增加。表1提示随着载药量的增加，罗替戈汀微球在体内释药的突释将会增加。

试验例2罗替戈汀微球的体内释放试验

样品：实施例3微球

血浆样品的分析方法

血浆样品的预处理精密取血浆样品500μL置具塞试管中，加入内标溶液(1ng/mL苯海拉明甲醇-水(50∶50，v/v)溶液)100μL，加入100μL甲醇-水(50∶50，v/v)和100μL 1M Na₂CO₃溶液，混匀；加入3mL正己烷-二氯甲烷-异丙醇(300∶150∶15，v/v/v)，涡流混合1min，往复振荡15min(240次/分)，离心5min(3500rpm)，取上层有机相于另一试管中，25℃氮气流下吹干，残留物加入100μL流动相溶解，涡流混合，取20μL进行LC/MS/MS分析。

色谱条件色谱柱：Zorbax Extend-C₁₈柱，5μm粒径，150×4.6mm I.D.，美国Agilent公司；流动相：乙腈-水-甲酸(300∶300∶6，v/v/v)；流速：0.7mL/min；柱温：37℃；进样量：20μL。

质谱条件离子源：离子喷雾离子化源；离子喷射电压：5000V；温度：450℃；源内气体1(GS1，N₂)压力：50psi；气体2(GS2，N₂)压力：50psi；气帘气体(N₂)压力：15psi；正离子方式检测；扫描方式为多重反应监测(MRM)；DP电压：56V；碰撞气(N₂)压力：3psi；用于定量分析的离子反应分别为m/z 317.1→m/z 147.1(罗替戈汀)和m/z 256.1→m/z 167.1(苯海拉明)。

工作曲线的制备取空白血浆0.5mL，加入罗替戈汀标准系列溶液100μL，配制成相当于血浆浓度为0.01，0.03，0.10，0.30，1.00和2.00ng/mL的血浆样品按《中华人民共和国药典》2005年版二部“血浆样品的分析方法”项下依法操作，制备标准曲线。以血浆中待测物浓度为横坐标，待测物与内标物的峰面积比值为纵坐标，用加权(W＝1/x²)最小二乘法进行回归运算，求得的直线回归方程，即为标准曲线。

试验方法：健康beagle犬3只，一雌两雄，体重9-11kg，自由进食，自由饮水。取微球以罗替戈汀5.5mg/kg的剂量经犬肌肉注射给药，于给药后按0h和1h，3h，6h，24h，48h，96h，144h，192h，240h，288h，336h，384h，432h，480h经犬前肢静脉取血3mL，置肝素化试管中，6000rpm离心10min，分离血浆，-20℃保存，按上述分析方法进行测定。表1数据表明，实施例3制备的微球，在0.125天的释放量和1天的累积释放量分别为2.00％和9.53％。该微球在犬体内先有一个明显的突释，然后血药浓度下降，96小时后，血药浓度增加，至192小时达到Cmax。突释时的血药浓度明显高于Cmax，说明由实施例3制备的微球存在明显的突释现象。

实施例6单一PLGA制备微球+硬脂酸(理论载药量20％)

称取罗替戈汀0.3104g和PLGA7525 4A 1.1603g，硬脂酸0.0370g，按实施例1的方法制备，即得罗替戈汀微球。

实施例7单一PLGA制备微球+硬脂酸(理论载药量25％)

称取罗替戈汀0.3712g和PLGA7525 4A 1.0891g，硬脂酸0.0379g，按实施例1的方法制备，即得罗替戈汀微球。

实施例8单一PLGA制备微球+硬脂酸(理论载药量30％)

称取罗替戈汀0.4522g和PLGA7525 4A 1.0136g，硬脂酸0.0371g，按实施例1的方法制备，即得罗替戈汀微球。

实施例9单一PLGA制备微球+硬脂酸(理论载药量35％)

称取罗替戈汀0.5258g和PLGA7525 4A 0.9790g，硬脂酸0.0374g，按实施例1的方法制备，即得罗替戈汀微球。

实施例10单一PLGA制备微球+硬脂酸(理论载药量40％)

称取罗替戈汀0.6083g和PLGA7525 4A 0.8619g，硬脂酸0.0367g，按实施例1的方法制备，即得罗替戈汀微球。

试验例3

取实施例6-10微球，按试验1方法进行体外释放试验。体外释药数据见表2。

表2含硬脂酸的不同理论载药量考察结果

将表2数据和表1数据进行比较，加入硬脂酸后，载药量为20％-40％罗替戈汀微球，0.125天的释放量从1.33％～4.97％降为0.51％～3.58％，1天的累积释放量从5.25％～20.45％降为2.93％～10.29％，提示加入硬脂酸可以有效地降低突释效应。

试验例4罗替戈汀微球的体内释放试验

样品：实施例8微球

按试验2方法进行体内药动学试验。可以看出，加入硬脂酸后降低了突释效应，但同时1-4天的释药量低。

实施例11含辛酸且单一PLGA制备微球

称取罗替戈汀0.4520g，PLGA7525 4A 1.0119g和辛酸0.0371g(2.5％)，按实施例1的方法制备，即得罗替戈汀微球。

实施例12含木腊酸且单一PLGA制备微球

称取罗替戈汀0.4489g，PLGA7525 4A 1.0130g和木腊酸0.0373g(2.5％)，按实施例1的方法制备，即得罗替戈汀微球。

试验例5加入含不同碳原子数脂肪酸对罗替戈汀微球释药的影响

取实施例11-12微球，按试验1方法进行体外释放试验。体外释药结果见表3。

表3含不同碳原子数脂肪酸罗替戈汀微球考察结果

表3数据和表1(30％载药量)数据进行比较，罗替戈汀微球中加入碳原子数为8的辛酸和碳原子数为24的木腊酸后，在0.125天的释放量和1天的累积释放量分别为2.00％和9.53％降为1.01％～1.14％和2.84％～4.02％，说明均可有效降低突释。由表2(碳原子数为18的硬脂酸)和表3结果可知碳原子数在8-24的脂肪酸均可有效降低突释。

实施例13含0.5％硬脂酸且单一PLGA微球

称取罗替戈汀0.4528g，PLGA7525 4A 1.0432g和硬脂酸0.0078g(0.5％)，按实施例1的方法制备，即得罗替戈汀微球。

实施例14含1％硬脂酸且单一PLGA微球

称取罗替戈汀0.4528g，PLGA7525 4A 1.0362g和硬脂酸0.0158g(1％)，按实施例1的方法制备，即得罗替戈汀微球。

实施例15含5％硬脂酸且单一PLGA微球

称取罗替戈汀0.4528g，PLGA7525 4A 0.9751g和硬脂酸0.0758g(5％)，按实施例1的方法制备，即得罗替戈汀微球。

实施例16含10％硬脂酸且单一PLGA微球

称取罗替戈汀0.4492g，PLGA7525 4A 0.9028g和硬脂酸0.1532g(10％)，按实施例1的方法制备，即得罗替戈汀微球。

实施例17含15％硬脂酸且单一PLGA微球

称取罗替戈汀0.4528g，PLGA7525 4A 0.8261g和硬脂酸0.2258g(15％)，按实施例1的方法制备，即得罗替戈汀微球。

试验例6加入不同含量脂肪酸后对微球释药的影响

取实施例13-17微球，按试验1方法进行体外释放试验。体外释药结果见表4。

表4含不同含量硬脂酸罗替戈汀微球考察结果

比较表4和表1结果，可以看出，硬脂酸含量小于等于1％时，在0.125天的释放量和1天的累积释放量为1.91％～1.20％和5.70％～10.96％，与不含硬脂酸的实施例3微球比较无明显变化，说明无明显降低突释效果；硬脂酸含量为5-10％时，0.125天的释放量和1天的累积释放量降低为0.75％～1.16％之间和2.25％～3.53％之间，可有效降低药物的突释。表4数据还显示，随着硬脂酸含量的增加，药物的释放随之延缓。

试验例7 PLGA 5050 2.5A制备微球体内试验

取实施例3微球，再用PLGA 5050 2.5A替换实施例3中的PLGA7525 4A其它条件不变，制备微球，体内试验方法同试验例2方法。

可以看出，PLGA 5050 2.5A微球前期释药速度较快，释药周期较短。

实施例18两种分子量PLGA组合(95∶5)的罗替戈汀微球

称取罗替戈汀0.4504g和PLGA7525 4A 0.9973g，PLGA5050 2.5A 0.0521g(重量比95∶5)，按实施例1的方法制备，即得罗替戈汀微球。

实施例19两种分子量PLGA组合(50∶50)的罗替戈汀微球

称取罗替戈汀0.4489g和PLGA7525 4A 0.5261g，PLGA5050 2.5A 0.5256g(重量比50∶50)，按实施例1的方法制备，即得罗替戈汀微球。

实施例20两种分子量PLGA组合(5∶95)的罗替戈汀微球

称取罗替戈汀0.4508g和PLGA7525 4A 0.0519g，PLGA5050 2.5A 0.9968g(重量比5∶95)，按实施例1的方法制备，即得罗替戈汀微球。

试验例8不同比例高分子组合对微球释药的影响

取实施例18-20微球，按试验1方法进行体外释放试验。体外释药结果见表5。

表5两种分子量PLGA组合制备微球体外释药数据

由表5可以看出，当微球内PLGA 5050 2.5A含量从5％增加到95％时，微球1-4天的释药量增加，其中1天累积释放量从9.10％增加到16.12％，4天累积释放量从29.36％增加到53.34％；当两种分子量的PLGA重量比为50∶50时，与表1实施例3数据相比，1-4天的药物释放量增加，其中1天累积释放量从9.53％增加到12.32％，4天累积释放量从22.90％增加到45.44％，同时释放周期平稳。

实施例21含硬脂酸(1％)且两种分子量PLGA组合(50∶50)的罗替戈汀微球

称取罗替戈汀0.4507g，PLGA7525 4A 0.5170g及PLGA5050 2.5A 0.5177g(重量比50∶50)和硬脂酸0.0155g(1％)，按实施例1的方法制备，即得罗替戈汀微球。

实施例22含硬脂酸(2.5％)且两种分子量PLGA组合(50∶50)的微球

称取罗替戈汀0.4491g，PLGA7525 4A 0.5060g及PLGA5050 2.5A 0.5055g(重量比50∶50)和硬脂酸0.0371g(2.5％)，按实施例1的方法制备，即得罗替戈汀微球。

实施例23含硬脂酸(7.5％)且两种分子量PLGA组合(50∶50)的微球

称取罗替戈汀0.4510g，PLGA7525 4A 0.4680g及PLGA5050 2.5A 0.4701g(重量比50∶50)和硬脂酸0.1119g(7.5％)，按实施例1的方法制备，即得罗替戈汀微球。

实施例24含硬脂酸(10％)且两种分子量PLGA组合(50∶50)的微球

称取罗替戈汀0.4503g，PLGA7525 4A 0.4479g及PLGA5050 2.5A 0.4501g(重量比50∶50)和硬脂酸0.1520g(10％)，按实施例1的方法制备，即得罗替戈汀微球。

实施例25含辛酸(2.5％)且两种分子量PLGA组合(50∶50)的微球

称取罗替戈汀0.4490g，PLGA7525 4A 0.5101g及PLGA5050 2.5A 0.5091g(重量比50∶50)和辛酸0.0380g(2.5％)，按实施例1的方法制备，即得罗替戈汀微球。

实施例26含木腊酸(2.5％)且两种分子量PLGA组合(50∶50)的微球

称取罗替戈汀0.4520g，PLGA7525 4A 0.5055g及PLGA5050 2.5A 0.5062g(重量比50∶50)和木腊酸0.0379g(2.5％)，按实施例1的方法制备，即得罗替戈汀微球。

实施例27含硬脂酸(2.5％)且两种分子量PLGA组合(95∶5)的微球

称取罗替戈汀0.4507g，PLGA7525 4A 0.9621g及PLGA5050 2.5A 0.0505g(重量比95∶5)和硬脂酸0.0369g(2.5％)，按实施例1的方法制备，即得罗替戈汀微球。

实施例28含硬脂酸(2.5％)且两种分子量PLGA组合(5∶95)的微球

称取罗替戈汀0.4514g，PLGA7525 4A 0.0501g及PLGA5050 2.5A 0.9610g(重量比5∶95)和硬脂酸0.0370g(2.5％)，按实施例1的方法制备，即得罗替戈汀微球。

试验例9不同含量硬脂酸且两种分子量PLGA组合的罗替戈汀微球体外试验

取实施例21-24微球，体外试验方法同试验例1，结果见表6。

表6不同含量硬脂酸且两种分子量PLGA组合微球体外释药数据

将表6与表5实施例19结果比较，可以看出，当两种分子量PLGA7525 4A与5050 2.5A的组合比值为50∶50，微球中加入2.5-7.5％的硬脂酸含量时，1-4天的药物释放量降低，累积药物释放曲线更为接近线性。

试验例10不同分子量的脂肪酸且两种分子量PLGA组合的罗替戈汀微球体外试验

取实施例22、25、26微球，体外试验方法同试验例1，结果见表7。

表7不同分子量的脂肪酸且两种分子量PLGA组合微球体外释药数据

将表7与表5实施例19结果比较，可以看出在处方中加入含量为2.5％的辛酸、硬脂酸和木蜡酸时，均可降低1-4天的药物释放量，药物从微球中的释放曲线趋于线性，结果提示：碳原子数在8-24的脂肪酸均可以达到药物释放平稳的需求。

试验例11含硬脂酸(2.5％)和两种分子量PLGA不同比例组合的罗替戈汀微球体外试验

取实施例22、27、28微球，体外试验方法同试验例1，结果见表8。

表8含硬脂酸的两种分子量PLGA不同比例组合微球体外释药数据

从表8可以看出，当硬脂酸含量为2.5％，两种分子量PLGA7525 4A与5050 2.5A的比值为95∶5时，1-4天的药物释放量偏低，而比值为5∶95时，1-4天的药物释放量偏高，且到第10天时累积释放已达93.26％，释放周期短；两种分子量PLGA7525 4A与50502.5A的比值为50∶50时，药物释放相对平稳，可持续释放14天。

试验例12含硬脂酸(2.5％)和PLGA7525 4A与PLGA5050 2.5A按比例混合微球的体内试验

按PLGA7525 4A和PLGA5050 2.5A比例(90∶10，80∶20，70∶30，50∶50)，含2.5％硬脂酸，其它同实施例1制备微球，体内试验方法同试验例2。

可以看出，两种分子量PLGA按不同比例混合后，随着PLGA5050 2.5A含量的增加，微球1-4天的释药量增加，体内释药曲线趋于平稳，当两种分子量比例为50∶50时，体内释药曲线平稳且无突释效应。

以上研究结果表明，两种不同分子量的PLGA按比例混合后可有效弥补单一PLGA的缺点，即15000-30000的PLGA(PLGA2.5A)可提高微球1-4天的释药量，而42000-75000的PLGA(PLGA4A)能够保证药物的释药周期，从而获得体内释药平稳的微球。

试验例13含2.5％硬脂酸PLGA 7525 5A和PLGA 5050 2.5A按比例混合微球的体外试验

研究采用PLGA(7525 5A)和PLGA(5050 2.5A)按不同比例混合(90∶10，80∶20，70∶30)，含2.5％硬脂酸，其它同实施例1制备微球，体外释药试验方法同试验例1，体外释药数据见表9。

表9 7525 5A和5050 2.5A不同比例组合(含硬脂酸)制备微球体外释药数据

由表9可以看出，PLGA(7525 5A)和PLGA(5050 2.5A)以不同比例混合后，制备的微球的释药特性与PLGA(7525 4A)和PLGA(5050 2.5A)制备的微球的释药特性相似，随微球内PLGA(5050 2.5A)含量的增加，微球1-4天释药量随之增加，其中，当7525 5A∶5050 2.5A从90∶10变化到70∶30时，1天的累积释放量从4.28％增加到7.24％，4天的累积释放量从24.29％增加到30.21％。由于微球中含有2.5％的硬脂酸，微球0.125和1天的药物释放量较小，提示，该微球的体内突释小。

试验例12罗替戈汀微球体外体内相关性试验

以实施例22的微球体外累积释放数据和体内释药数据作相关性图，线性方程为y＝1.2137x-3.7464，r＝0.9943。可以看出，罗替戈汀微球体外药时与体内吸收百分率具有较好相关性，表明选择的体外释放条件进行微球体外释放的评价可用于预测微球体内释药情况。

试验列13 PLGA分子量的测定

仪器与试剂

Agilent 1100型高效液相色谱仪(包括四元泵、柱温箱、自动进样器、RID检测器、HP-ChemStation带GPC软件)、色谱柱：Styragel

HT3(7.8x300mm，10μm、分子量范围：500～30000，Styragel

6E(7.8x300mm，10μm、分子量范围：5000～600000)、四氢呋喃(色谱纯，SK CHEMICAL，G6EE3H)、聚苯乙烯分子量标准品(Fluka，1226627)测定样品：PLGA 7525 5A，PLGA 7525 4A，PLGA 7525 2.5A(Lakeshore Biomaterials公司)

方法选择

本品分子量的测定采用分子排阻色谱法。因高分子PLGA为脂溶性的，且无紫外吸收，故采用四氢呋喃为溶剂及流动相，示差折光检测器进行检测；因本品使用的高分子PLGA分子量(Mw)约为50000，选择的色谱柱应包含此范围，并尽可能使所测样品分子量分布范围处于中间位置，因此，选择Styragel

HT3(7.8x300mm，10μm、分子量范围：500～30000)色谱柱与Styragel

6E(7.8x300mm，10μm、分子量范围：5000～600000)色谱柱串联使用；因PLGA的性质与聚苯乙烯类似，故本方法选择的是F1uka公司提供的包含样品分子量范围的聚苯乙烯混标标准品(分子量范围：500～2500000)。

测定方法

取测定样品适量，加流动相制成每1ml中约含1mg的溶液，振摇，作为供试品溶液。另取聚苯乙烯分子量标准品1套，(3瓶，每瓶为含4种标准分子量的混标)，加流动相制成1.0mg/ml的溶液，作为对照品溶液。照分子排阻色谱法(中国药典2005版二部附录VH)测定，采用凝胶色谱柱，以四氢呋喃为流动相，柱温：30℃，流速为1.0ml/min，示差折光检测器；检测器温度35℃。取乙腈适量，用流动相稀释500倍，取稀释后溶液20μl，注入液相色谱仪，记录色谱图，理论板数按乙腈峰计不少于10000。

取上述对照品溶液各20μl，分别注入液相色谱仪，记录色谱图，由GPC软件计算回归方程。取供试品溶液20μl，同法测定，用GPC软件算出供试品的重均分子量、数均分子量及分子量分布。测定结果，如表10、11、12。

表10 PLGA分子量测定结果

Lakeshore Biomaterials公司PLGA检验报告，结果见表11，

表11 PLGA分子量检验报告

表12 PLGA分子量分布

结论：本发明所述的PLGA分子量为15000-35000和42000-75000，结果见表12。

Claims

1.一种缓释制剂，包括多巴胺受体激动剂类药物和生物可降解的药用高分子辅料，其中多巴胺受体激动剂类药物重量含量为5-50％，药用高分子辅料重量含量为50-95％，其特征在于所述生物可降解的药用高分子辅料包括低分子量的可降解的药用高分子辅料和高分子量的可降解的药用高分子辅料。

2.一种缓释制剂，包括多巴胺受体激动剂类药物、生物可降解的药用高分子辅料和去突释附加剂，其中多巴胺受体激动剂类药物重量含量为5-50％，药用高分子辅料重量含量为40-94％，去突释附加剂重量含量为1-10％。

3.根据权利要求1或2所述的缓释制剂，其中所述多巴胺受体激动剂类药物为普拉克索、罗匹尼罗、培高利特、卡麦角林、特麦角脲、喹高利特、sumanirole、Pardoprunox、adrogolide、Dinapsoline和Ergoline及其它们的衍生物或药用盐中的一种、两种或两种以上的组合。

4.根据权利要求1或2所述的缓释制剂，其中所述生物可降解的药用高分子辅料为丙交酯乙交酯、聚乳酸、聚乙醇酸、聚-3-羟基丁酸酯、聚内酯、聚酸酐、聚羟基丁酸酯羟基戊酸共聚物、聚丙烯葡聚糖、聚乳酸-聚乙二醇和聚羟乙酸-聚乙二醇中的一种、两种或两种以上的组合。

5.根据权利要求1或2所述的缓释制剂，其中所述生物可降解的药用高分子辅料为分子量是5000-100000道尔顿的聚丙交酯乙交酯，其中丙交酯和乙交酯的聚合比例为95∶5-5∶95。

6.根据权利要求1或2所述的缓释制剂，其中所述缓释制剂为注射用微球、注射用凝胶或植入体。

7.根据权利要求2所述的缓释制剂，其中所述去突释附加剂为脂肪酸。

8.根据权利要求7所述的缓释制剂，其中所述脂肪酸选自硬脂酸、软脂酸、油酸、癸酸、辛酸或木腊酸中的一种、两种或两种以上的组合。

9.根据权利要求7或8所述的缓释制剂，其中所述生物可降解的药用高分子辅料为低分子量的聚丙交酯乙交酯和高分子量为聚丙交酯乙交酯组成，其重量比为95∶5-5∶95。

10.根据权利要求9所述的缓释制剂，其中所述低分子量的聚丙交酯乙交酯的分子量为15000-35000，高分子量为聚丙交酯乙交酯的分子量为42000-75000。