CN102775467A - 一种自组装寡肽在紫外照射下自组装成不同结构的方法 - Google Patents
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Abstract
本发明涉及一种自组装寡肽在紫外照射下自组装成不同结构的方法,包括:(1)将寡肽加入到六氟异丙醇中,震荡直至寡肽全部溶解,得到寡肽溶液;(2)在上述寡肽溶液中加入重蒸水进行稀释,将稀释后的寡肽溶液震荡,以混合均匀,再在室温下放置3~5天;(3)将步骤(2)得到的溶液放置到表面皿中,在室温条件下进行紫外线照射,最后将照射后的溶液晾干,即可。本发明的方法快速、简捷、高效、廉价并且操作方便,具有良好的应用前景。
Description
技术领域
本发明属于寡肽的自组装领域,特别涉及一种自组装寡肽在紫外照射下自组装成不同结构的方法。
背景技术
寡肽二苯丙氨酸(Phe-Phe,FF)是形成阿尔茨海默氏症和帕金森综合症等疾病有关的淀粉样肽粉样多肽的核心结构单元。由于二苯丙氨酸具有氢键、β折叠结构以及芳香环间的π-π作用,具有良好的自组装性质,因此能在水或有机溶剂中它能够通过分子之间的氢键、范德华力、π-π相互作用、配位键等非共价键作用而自组装形成稳定的类似蛋白质的二级或三级结构。另外,由于其良好的可降解性、生物相容性等优点使其备受关注。自从它被发现以来,不论是在医学还是纳米科技领域都引起了人们很大的研究兴趣。一直以来,许多科学家探索用不同的方法来调控其自组装过程。
自然界中广泛存在着紫外线的辐射,因此,研究紫外线对该类肽的聚集形态的影响,对于了解紫外线对该生物材料的应用影响和应用调控具有重要的意义。
发明内容
本发明涉及一种自组装寡肽在紫外照射下自组装成不同结构的方法,该方法快速、简捷、高效、廉价并且操作方便,具有良好的应用前景。
本发明的一种自组装寡肽在紫外照射下自组装成不同结构的方法,包括:
(1)将寡肽(上海强耀生物科技有限公司)加入到六氟异丙醇中,震荡直至寡肽全部溶解,得到寡肽溶液;
(2)在上述寡肽溶液中加入重蒸水进行稀释,将稀释后的寡肽溶液震荡,以混合均匀,再在室温下放置3~5天;
(3)将步骤(2)得到的溶液放置到表面皿中,在室温条件下进行紫外线照射(波长是365nm,功率是30w),最后将照射后的溶液晾干,即可。
步骤(1)中所述的六氟异丙醇与寡肽的用量比为50~60μL:0.005~0.006g。
步骤(1)所述的震荡为用微型振荡器轻微震荡,震荡时间为30~60s,震荡时所使用的容器为EP管,所述EP管的量程是0.1~1.5mL。
步骤(2)所述的稀释后的寡肽溶液中寡肽的浓度是0.2~0.3mg/mL。
步骤(2)所述的震荡为用微型振荡器轻微震荡,震荡时间为50~60s,震荡时所使用的容器为EP管,所述EP管的量程是1~5mL。
步骤(2)所述的放置时的温度约为23~25。C。
步骤(3)所述的进行紫外线照射中采用紫外线分析仪的型号是ZF-1三用紫外线分析仪(上海强运科技有限公司),照射时间分别为60min、120min。
步骤(3)所述的进行紫外线照射时,表面皿中溶液的体积为3mL。
步骤(3)中所述的晾干为将照射后的溶液取10~15μL滴到尼龙膜上晾干。
本发明在一定紫外照射条件下,寡肽聚集状态发生变化,对于了解紫外线对该生物材料的应用影响与应用调控具有重要的意义。
有益效果:
(1)该方法快速、简捷、高效、廉价并且操作方便。
(2)本发明所使用的原材料廉价易得,具有良好的可降解性及生物相容性,具有应用其做后续相关实验分析的潜力。
附图说明
图1为空白对照;
图2为对溶液照射60min后,滴到尼龙膜上晾干所拍摄的SEM图;
图3为对溶液的照射时间改为120min后,滴到尼龙膜上晾干所拍摄的SEM图;
图4为对溶液的照射时间改为200min后,滴到尼龙膜上晾干所拍摄的SEM图;
图5为对溶液的照射时间改为300min后,滴到尼龙膜上晾干所拍摄的SEM图;
图6为对溶液的照射时间改为400min后,滴到尼龙膜上晾干所拍摄的SEM图。
具体实施方式
下面结合具体实施例,进一步阐述本发明。应理解,这些实施例仅用于说明本发明而不用于限制本发明的范围。此外应理解,在阅读了本发明讲授的内容之后,本领域技术人员可以对本发明作各种改动或修改,这些等价形式同样落于本申请所附权利要求书所限定的范围。
实施例1
(1)取100mg/ml的六氟异丙醇溶液50μL放入到量程为1.5ml的EP管内;
(2)将称量好的寡肽0.005g加入到上述EP管内,用微型振荡器轻微震荡30s,直至寡肽全部溶解;
(3)取部分溶解好的寡肽溶液10μL放入到量程为5ml的EP管内,然后加入ddH2O5ml对其进行稀释,稀释后寡肽的浓度变为0.2mg/ml,然后将稀释后的溶液用微型震荡器轻微震荡60s,使其均匀混合;
(4)将最终得到的寡肽溶液在室温下放置3天;
(5)取部分(3ml)放置3天后的溶液到石英表面皿中。
(6)对样品不进行任何处理,然后取10μL滴到尼龙膜上晾干。依照以上步骤所得到结果的电镜图片如图1所示。
实施例2
(1)取100mg/ml的六氟异丙醇溶液50μL放入到量程为1.5ml的EP管内;
(2)将称量好的寡肽0.005g加入到上述EP管内,用微型振荡器轻微震荡30s,直至寡肽全部溶解;
(3)取部分溶解好的寡肽溶液10μL放入到量程为5ml的EP管内,然后加入ddH2O5ml对其进行稀释,稀释后寡肽的浓度变为0.2mg/ml,然后将稀释后的溶液用微型震荡器轻微震荡60s,使其均匀混合;
(4)将最终得到的寡肽溶液在室温下放置3天;
(5)取部分(3ml)放置3天后的溶液到石英表面皿中,在室温条件下使用ZF-1三用紫外线分析仪进行照射。
(6)对样品照射60min后,然后取10μL滴到尼龙膜上晾干。
依照以上步骤所得到结果的电镜图片及其结构的变化如图2所示。
实施例3
(1)取100mg/ml的六氟异丙醇溶液50μL放入到量程为1.5ml的EP管内;
(2)将称量好的寡肽0.005g加入到上述EP管内,用微型振荡器轻微震荡30s,直至寡肽全部溶解;
(3)取部分溶解好的寡肽溶液10μL放入到量程为5ml的EP管内,然后加入ddH2O5ml对其进行稀释,稀释后寡肽的浓度变为0.2mg/ml,然后将稀释后的溶液用微型震荡器轻微震荡60s,使其均匀混合;
(4)将最终得到的寡肽溶液在室温下放置3天;
(5)取部分(3ml)放置3天后的溶液到石英表面皿中,在室温条件下使用ZF-1三用紫外线分析仪进行照射。
(6)对样品照射120min后,然后取10μL滴到尼龙膜上晾干。
依照以上步骤所得到结果的电镜图片及其结构的变化如图3所示。
实施例4
(1)取100mg/ml的六氟异丙醇溶液50μL放入到量程为1.5ml的EP管内;
(2)将称量好的寡肽0.005g加入到上述EP管内,用微型振荡器轻微震荡30s,直至寡肽全部溶解;
(3)取部分溶解好的寡肽溶液10μL放入到量程为5ml的EP管内,然后加入ddH2O5ml对其进行稀释,稀释后寡肽的浓度变为0.2mg/ml,然后将稀释后的溶液用微型震荡器轻微震荡60s,使其均匀混合;
(4)将最终得到的寡肽溶液在室温下放置3天;
(5)取部分(3ml)放置3天后的溶液到石英表面皿中,在室温条件下使用ZF-1三用紫外线分析仪进行照射。
(6)对样品照射200min后,然后取10μL滴到尼龙膜上晾干。
依照以上步骤所得到结果的电镜图片及其结构的变化如图4所示。
实施例5
(1)取100mg/ml的六氟异丙醇溶液50μL放入到量程为1.5ml的EP管内;
(2)将称量好的寡肽0.005g加入上述EP管内,用微型振荡器轻微震荡30s,直至寡肽全部溶解;
(3)取部分溶解好的寡肽溶液10μL放入到量程为5ml的EP管内,然后加入ddH2O5ml对其进行稀释,稀释后寡肽的浓度变为0.2mg/ml,然后将稀释后的溶液用微型震荡器轻微震荡60s,使其均匀混合;
(4)将最终得到的寡肽溶液在室温下放置3天;
(5)取部分(3ml)放置3天后的溶液到石英表面皿中,在室温条件下使用ZF-1三用紫外线分析仪进行照射。
(6)对样品照射300min后,然后取10μL滴到尼龙膜上晾干。
依照以上步骤所得到结果的电镜图片及其结构的变化如图5所示。
实施例6
(1)取100mg/ml的六氟异丙醇溶液50μL放入到量程为1.5ml的EP管内;
(2)将称量好的寡肽0.005g加入到上述EP管内,用微型振荡器轻微震荡30s,直至寡肽全部溶解;
(3)取部分溶解好的寡肽溶液10μL放入到量程为5ml的EP管内,然后加入ddH2O5ml对其进行稀释,稀释后寡肽的浓度变为0.2mg/ml,然后将稀释后的溶液用微型震荡器轻微震荡60s,使其均匀混合;
(4)将最终得到的寡肽溶液在室温下放置3天;
(5)取部分(3ml)放置3天后的溶液到石英表面皿中,在室温条件下使用ZF-1三用紫外线分析仪进行照射。
(6)对样品照射400min后,然后取10μL滴到尼龙膜上晾干。
依照以上步骤所得到结果的电镜图片及其结构的变化如图6所示。
Claims (9)
1.一种自组装寡肽在紫外照射下自组装成不同结构的方法,包括:
(1)将寡肽加入到六氟异丙醇中,震荡直至寡肽全部溶解,得到寡肽溶液;
(2)在上述寡肽溶液中加入重蒸水进行稀释,将稀释后的寡肽溶液震荡,以混合均匀,再在室温下放置3~5天;
(3)将步骤(2)得到的溶液放置到表面皿中,在室温条件下进行紫外线照射,最后将照射后的溶液晾干,即可。
2.根据权利要求1所述的一种自组装寡肽在紫外照射下自组装成不同结构的方法,其特征在于:步骤(1)中所述的六氟异丙醇与寡肽的用量比为50~60μL:0.005~0.006g。
3.根据权利要求1所述的一种自组装寡肽在紫外照射下自组装成不同结构的方法,其特征在于:步骤(1)所述的震荡为用微型振荡器震荡,震荡时间为30~60s,震荡时所使用的容器为EP管,所述EP管的量程是0.1~1.5mL。
4.根据权利要求1所述的一种自组装寡肽在紫外照射下自组装成不同结构的方法,其特征在于:步骤(2)所述的稀释后的寡肽溶液中寡肽的浓度是0.2~0.3mg/mL。
5.根据权利要求1所述的一种自组装寡肽在紫外照射下自组装成不同结构的方法,其特征在于:步骤(2)所述的震荡为用微型振荡器震荡,震荡时间为50~60s,震荡时所使用的容器为EP管,所述EP管的量程是1~5mL。
6.根据权利要求1所述的一种自组装寡肽在紫外照射下自组装成不同结构的方法,其特征在于:步骤(2)所述的放置时的温度为23~25°C。
7.根据权利要求1所述的一种自组装寡肽在紫外照射下自组装成不同结构的方法,其特征在于:步骤(3)所述的进行紫外线照射中采用的紫外线分析仪的型号是ZF-1三用紫外线分析仪,照射时间分别为60min、120min。
8.根据权利要求1所述的一种自组装寡肽在紫外照射下自组装成不同结构的方法,其特征在于:步骤(3)所述的进行紫外线照射时,表面皿中溶液的体积为3mL。
9.根据权利要求1所述的一种自组装寡肽在紫外照射下自组装成不同结构的方法,其特征在于:步骤(3)所述的晾干为将照射后的溶液取10~15μL滴到尼龙膜上晾干。
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