CN102762981A - 过酸和2-羟基有机酸组合物及其处理物体的方法 - Google Patents

Abstract

本发明提供处理物品以控制微生物的方法和组合物。本发明处理物品的方法是使该物品表面接触水性组合物，所述的组合物含有：i）化学式为RC(O)OOH的有机过酸，其中R是甲基、乙基、正-丙基或仲-丙基；ii)选自酒石酸、柠檬酸、苹果酸、扁桃酸和乳酸的2-羟基有机酸；和iii)水；该水性组合物的pH为2.5-6.0。

Description

过酸和2-羟基有机酸组合物及其处理物体的方法

发明背景

消除环境微生物的安全可靠方法是日益增长的公众健康和农业所关心的问题。消除或减少环境微生物的现有方法不足以控制可能引起疾病和腐败变质的微生物。因此很需要能极大地减少环境中存在微生物的新方法和组合物。

本发明提供了符合这些需求的组合物。

发明简述

本发明涉及以下发现，即包含过氧乙酸、乳酸和(任选)十二烷基硫酸钠或另一种表面活性剂的水溶液，对减少物体表面污染的微生物显示有令人惊奇的效果。联用这些成分对减少附着于物体上微生物的效果比单用任何一种成分好很多。因此，本发明提供用于清洁消毒接触表面的组合物和方法。清洁或消毒表面可控制或减少受污染物体或其他物体表面的不良微生物。本发明第一方面提供清洁或消毒表面的方法，是使物体表面接触本发明的组合物。

本发明的组合物是水性组合物，其pH为2.5-6.0，其包含i)化学式为RC(O)OOH的有机过酸，其中R是甲基、乙基、正-丙基或仲-丙基；ii)选自酒石酸、柠檬酸、苹果酸、扁桃酸和乳酸的2-羟基有机酸；iii)水，和任选iv)阴离子表面活性剂。在一优选实施方式中，所述过酸是过氧乙酸（也称为过氧醋酸），所述有机酸是乳酸（也称为2-羟基丙酸），如果存在阴离子活性剂，优选十二烷基硫酸钠。由于该消毒水溶液中的过酸与过氧化氢、它们的相应酸和水（之间）存在平衡，或从该消毒水溶液的浓溶液中可形成过氧化氢、它们的相应酸和水，该水性消毒组合物也可能含有过氧化氢和相应的酸（就过氧乙酸而言为乙酸）。可提供该消毒组合物的浓缩液或即用型水制剂。也可作为用于消毒物体的试剂盒中的一个组成部分提供该组合物。

在某些实施方式中，要清洁或消毒的物体表面是有污染微生物风险的硬表面或软表面。

在其他实施方式中，所述表面属于日间护理环境、私人住宅、社区和机构的设施（如监狱、收容所、疗养院、辅助生活设施、宿舍、医疗或牙科诊所、日间护理设施、酒店业），公共交通、办公室和工厂的表面。在具体实施方式中，所述物体特别可能被不良或致病微生物污染，或需要额外地清洁消毒（如儿童玩具、浴室用具和表面、厨房和用具表面、租赁设备和服装表面、回收或退回的商品或衣服）。因此，在某些实施方式中，所述表面是食品加工环境（设备和工具，如收获、砧板、切割刀和刀片）的表面或医疗保健行业的表面。在其他实施方式中，所述表面是仪器（如医疗和牙科器材）表面。所述表面也可以是服装、座椅、水槽、浴缸、柜子、桌椅或其他家具的表面。

在某些实施方式中，用本发明组合物处理接触水的表面可预防或阻止生物膜形成。例如，使医院的水笼头和沐浴器和其他保健设施接触本发明组合物以预防其形成生物膜。这种生物膜如果不预防可能引起呼吸道和皮肤感染，包括伤口感染。

另一方面，本发明提供适用于本发明方法中的包装或形式的本发明组合物。

附图简述

图1是对水槽水悬浮的细胞的激发试验中所用五种处理试剂的比较，从左到右为a)氯化水：50-70ppm活性氯，pH 6.5；b)CS:市售的含柠檬酸和表面活性剂为主要活性成分的清洁剂产品；c)过氧乙酸:含70-80ppm过氧乙酸+0.01%表面活性剂；d)乳酸溶液：0.9-1.2%乳酸+0.01%表面活性剂；和e)FE:含70-80ppm过氧乙酸+0.9-1.2%乳酸+0.01%表面活性剂)所用的表面活性剂是十二烷基硫酸钠。

图2是在对树叶附着细胞的激发试验中五种处理试剂每种的比较。

图3是氯化水与本发明水溶液(FE:过氧乙酸、乳酸和十二烷基硫酸钠)对减少被处理物体腐败变质的能力的比较。

图4是氯化水与本发明水溶液(FE:过氧乙酸、乳酸和十二烷基硫酸钠)对减少被处理物体臭味的能力的比较。

图5是氯化水与本发明水溶液(FE:过氧乙酸、乳酸和十二烷基硫酸钠)对减少低含水量的新鲜色拉叶（Spring Mix）腐烂的能力的比较。

图6是氯化水与本发明水溶液(FE:过氧乙酸、乳酸和十二烷基硫酸钠)对减少低含水量的新鲜色拉叶（Spring Mix）臭味的能力的比较。

图7是氯化水与本发明水溶液(FE:过氧乙酸、乳酸和十二烷基硫酸钠)对抑制低含水量的新鲜色拉叶中微生物生长的能力的比较。

图8是氯化水与本发明水溶液(过氧乙酸、乳酸和十二烷基硫酸钠)对抑制低含水量的新鲜色拉叶腐败变质的能力的比较。

图9是氯化水与本发明水溶液(过氧乙酸、乳酸和十二烷基硫酸钠)对减少高含水量的新鲜色拉叶的腐蚀的能力的比较。

图10是氯化水与本发明水溶液(过氧乙酸、乳酸和十二烷基硫酸钠)对减少高含水量的新鲜色拉叶臭味的能力的比较。

图11是氯化水与本发明水溶液(过氧乙酸、乳酸和十二烷基硫酸钠)对抑制高含水量的新鲜色拉叶中土著微生物生长的能力的比较。

图12是氯化水与本发明水溶液(过氧乙酸、乳酸和十二烷基硫酸钠)处理抑制高湿度新鲜色拉叶水腐败能力的比较。

图13是氯化水与本发明水溶液(过氧乙酸、乳酸和十二烷基硫酸钠)对减轻菠菜腐败变质的能力的比较。

图14是氯化水与本发明水溶液(过氧乙酸、乳酸和十二烷基硫酸钠)对处理减轻菠菜臭味的能力的比较。

图15是氯化水与本发明水溶液(过氧乙酸、乳酸和十二烷基硫酸钠)对抑制在具有高含水量的菠菜中土著微生物生长的能力的比较。

图16是氯化水与本发明水溶液(过氧乙酸、乳酸和十二烷基硫酸钠)在抑制菠菜中腐败微生物的能力的比较。

发明详述

本发明涉及以下发现，即含有过氧乙酸、乳酸的水性组合物对减少物体表面污染微生物有令人惊奇的效果。联用这些成分对减少附着于物体上的微生物比单用任何一种成分效果好很多。

过氧乙酸的抗微生物活性依赖于其高氧化电势。氧化的机制是电子转移，因此，氧化剂越强，其电子转移给微生物越快，灭活或杀死微生物就越快。因此，根据以下表格，过氧乙酸的氧化电势比含氯消毒剂高但低于臭氧。

所选消毒剂的氧化电势

由于过氧乙酸分子的扩散慢于其半衰期，因此它将与周围的任何可氧化化合物发生反应，而可能损伤事实上所有类型与微生物相关的大分子，如糖、核酸（突变）、脂质（脂质过氧化）和氨基酸（如使苯丙氨酸转变成间-酪氨酸或邻-酪氨酸），最终使微生物细胞溶解。常规认为，具有可氧化的有机化合物的化学性质的2-羟基有机酸如乳酸不能与强氧化剂，具体指过酸一起使用。因此，特别令人惊奇的是本发明联用过氧乙酸和乳酸显示这二种化合物有协同作用，而不是互相抵消。

定义

必须注意，本说明书和权利要求书中所用的单数形式“一个”、“一种”和“这种”包括复数，除非另有清楚说明。因此，例如“一个表面活性剂”指包括二个或多个这种表面活性剂。

除非另有说明，本文所用的所有科学技术术语具有本领域普通技术人员共同理解的相同含意。所有范围均包括两端值。

当指本发明的水性组合物和方法时，“过酸”和“有机过酸”指结构式为RC(O)OOH的化合物，其中R是含1-3个碳原子的脂族基团。R可以是甲基、乙基、正-丙基或仲-丙基。特别优选的过酸是过乙酸/过氧乙酸/PPA/(CH₃C(O)OOH)。可采用上述有机过酸的混合物。

在水溶液中，有机过酸与过氧化氢处于化学平衡，因此，相应的有机酸与过氧化氢可能形成以下反应：

可用以下平衡方程计算每种反应物的浓度：

([RCOOOH][H₂O])/([RCOOH][H₂O₂])=K_ap(等式1)

其中：[RCOOOH]是过酸的摩尔浓度mole/L；[H₂O]是水的摩尔浓度mole/L；[RCOOH]是有机酸的摩尔浓度mole/L；和[H₂O₂]是过氧化氢的摩尔浓度mole/L；K_ap是该过酸平衡反应的表观平衡常数（等式I)。

表观平衡常数K_ap随所选过酸和温度而不同。过酸形成的平衡常数可参见D.Swern主编“有机过氧化物（Organic Peroxides）”第1卷，韦利科学公司（Wiley-Interscience），纽约，1970。在温度40°C下，过氧乙酸的表观平衡常数约为2.21。按照此平衡反应，有机过酸的水性组合物除了有机过酸外还含过氧化氢和相应的有机酸。

稀释后要经过相当长的时间才能达到新的平衡。例如，含约5%过氧乙酸的平衡液通常含约22%的过氧化氢。含约15%过氧乙酸的平衡液通常含约10%的过氧化氢。当将这些平衡液稀释成含约50ppm过氧乙酸的溶液时，5%过氧乙酸溶液稀释后产生的溶液含约220ppm的过氧化氢；15%过氧乙酸稀释后产生的溶液含约33ppm的过氧化氢。因此，在某些实施方式中，可在临用前，用水或含本发明消毒组合物其他组分的水性组合物稀释而得到所需浓度的过酸，从而提供本发明的消毒组合物。在某些实施方式中，可在临用前稀释得到所需浓度的本发明消毒组合物。

不难购得上述过酸的平衡液。例如，不难购得过氧乙酸(CAS号79-21-0)水溶液，其含有过氧乙酸(35%)、过氧化氢(6.5%)、醋酸64-19-7(40%)、硫酸（约1%)和水(约17%)(所有是w/w)。

所述2-羟基有机酸选自酒石酸、柠檬酸、苹果酸、扁桃酸和乳酸。优选它们的占优势的生物旋光异构体。也提供消旋的2-羟基有机酸及其任何光学纯异构体。在某些实施方式中，优选(+)对映体（如L-乳酸、L(+)-乳酸)。优选的有机酸是L(+)-乳酸。

本文所用的术语“清洁”或“消毒”指减少表面除细菌内生孢子外的活菌。在某些实施方式中，接触本发明消毒组合物前后检测，至少减少了99.9%、99.99%、99.999%(如分别减少3、4或5对数值)或至少减少了3、4、5、6、7、8或更高对数值的活菌。在某些实施方式中，经消毒的表面病原体微生物水平达到或低于任何适用公共卫生条例规定的造成感染或患病风险的阈值就认为已安全。因此，所述消毒不需要完全消除或消灭所有形式微生物的生命。所述减少可以是物理去除或使微生物中毒而破坏或抑制微生物的生长。

术语“物体”指某些材料和实体。“物体”包括其表面。这些表面可以是硬表面（如玻璃、陶瓷、金属、石头、木材和聚合物表面），软表面（如弹性体或塑料表面、织物表面）。因此，表面可属于纺织或无纺材料的表面。设想有：保健所、医疗机构、牙科诊所、机关、学校、办公场所、卫生设施、家庭，酒店和工业部门的表面和物体。表面可以是仪器、设备、器材、工具、推车、家具、结构和建筑物的表面。例如，护理保健环境中的表面例子包括：医疗或牙科器械的表面，医疗或牙科器械，监测医疗和牙科患者健康的设备或电子仪器，地板-墙壁、天花板，或保健所用结构装置的表面。医院、手术室、生活辅助室、护理室，体弱、分娩和临床诊室的卫生护理表面。也设想有，病人护理设备（如呼吸器、诊断设备、分流设备、身体范围、轮椅、病床等），或手术和诊断设备的表面。还设想有，在使用期间需要消毒的物体。

“表面”可以是硬表面(如墙壁、地板、床板等)，或软表面，如织物或非织物表面（如手术用的衣服、布料、床单、绷带等）。健康护理表面包括人们健康护理活动接触的物体表面。

“器械”指可从消毒获益的医疗和牙科器械或工具。器械包括“医疗或牙科器材、设备、装置和仪器”。器械和工具包括但不限于：诊断仪器、盆、盘、握持器、镊子、剪、剪刀、锯子（如骨锯和骨刀）、修骨钳、止血钳、手术刀、凿子、钳、钻、钻头、锉子、悬吊具、切断器、台举器、磁夹、持针器、插架、夹子、牵引钩、园凿、刮匙、牵缩器、矫正器、穿孔器、牵引器、勺子、角膜刀、铲子、挤压器、套管针、扩张器、罐笼、玻璃仪器、输液管、导尿管、插管、塞子、支撑架、关节固定和相关设备。

在本明任何一方面和应用的某些其他实施方式中，前提条件是，所述物体不是食物、食物产品、包装的食品和/或不是食品加工环境中存在的物体，或不是接触食物之前或之后要消毒的物体。在某些实施方式中，该前提条件还有，所述表面和/或物体不是农业和兽医设施中存在的或使用的物体。

术语“基本上无”意味所指本发明组合物中存在的化合物或物质重量水平低于约300ppm，优选低于约150ppm，更优选低于约50ppm，最优选低于约10ppm或甚至1ppm。

本发明的组合物

因此，在一方面，本发明提供的组合物包含i)化学式为RC(O)OOH的有机过酸，其中R是甲基、乙基、正-丙基或仲-丙基；ii)选自酒石酸、柠檬酸、苹果酸、扁桃酸和乳酸的2-羟基有机酸；和iii)水。在某些实施方式中，该水性组合物的pH为2.5-6.0。在某些实施方式中，此pH为2.5-3.5、2.5-4.0、2.7-3.5、2.5-5.0、3.0-4.0、3.0-5.0、3.0-6.0或3.5-4.5。

本发明水性组合物中所用的合适2-羟基有机酸是酒石酸、柠檬酸、苹果酸、扁桃酸和乳酸（即2-羟基丙酸）。示范性的2-羟基有机酸是乳酸。可联用上述2-羟基有机酸中的二种或多种（如乳酸+柠檬酸；乳酸+酒石酸；乳酸+苹果酸；乳酸+扁桃酸）。

本发明的消毒组合物包含i)化学式为RC(O)OOH的有机过酸，其中R是甲基、乙基、正-丙基或仲-丙基；ii)选自酒石酸、柠檬酸、苹果酸、扁桃酸和乳酸的2-羟基有机酸；和iii)水，pH为2.5-7.8，其中过酸的浓度为40-250ppm(w/w)，2-羟基有机酸的浓度为0.1-1%(w/w)。在上述任何一项的其他实施方式中，该组合物以重量计的主要成分是水。在某些实施方式中，本发明组合物中水占重量的至少50%、60%、70%、80%、90%、95%、98%或99%。

在某些实施方式中，所述过酸是过氧乙酸，所述有机酸是乳酸，所述任选的阴离子表面活性剂是十二烷基硫酸钠。在其他实施方式中，该组合物中过酸的浓度为3-100ppm(w/w)，该组合物中2-羟基有机酸的浓度为0.1%-2%(w/w)，pH为2.5-5.0。在其他实施方式中，过酸的浓度为5-100ppm(w/w)。2-羟基有机酸的浓度为0.1-2%(w/w)。

在另一实施方式中，本发明的水性组合物所含过酸组分的浓度为60-80ppm(w/w)，所含2-羟基有机酸组分的浓度为0.2%-1.25%(w/w)，pH为2.8-4.2或3.8-4.2。

在某些实施方式中，该组合物中过酸的浓度为3-100ppm(w/w)，该组合物中2-羟基有机酸的浓度为0.1%-2%(w/w)，pH为2.5-5.0。在还有其他实施方式中，过酸的浓度为50-100ppm(w/w)，2-羟基有机酸的浓度为0.1%-1%(w/w)。在其他实施方式中，所述过酸是过氧乙酸，所述有机酸是乳酸(如L(+)-乳酸)。在还有其他实施方式中，过酸的浓度为60-90ppm或70-80ppm。在还有其他实施方式中，乳酸的浓度为0.1-0.8%或0.2-0.4%(w/w)。

在一特别优选的实施方式中，本发明提供的组合物，包含含水的过氧乙酸和乳酸（如L-(+)-乳酸）组分或基本上由其组成，pH为2.5-6.0，更优选pH为2.8-4.2或3.8-4.2，该组合物还可包含过氧化氢和乙酸，该组合物可以基本上无任何表面活性剂。在某些实施方式中，该水性组合物除L-(+)-乳酸外基本上无任何其他乳酸异构体。在上述任何一项的其他实施方式中，该组合物中过酸（如过氧乙酸）的浓度为30-300ppm(w/w)、60-80ppm(w/w)、50-200ppm(w/w)、60-160ppm(w/w)、120-160ppm(w/w)或140-160ppm(w/w)；该组合物中2-羟基有机酸（如乳酸）选择的浓度为0.1%-5%(w/w)、0.1%-2%、0.2%-1%、0.2%-0.6%或0.1%-0.5%，或约2%、3%或4%(w/w)；pH为2.5-6.0、2.5-5.0、2.8-3.2、2.5-3.5或2.6-3.2。在以上其他实施方式中，该组合物与要消毒物体的接触时间为10、20或30秒至2分钟，或约10、20、30或40秒。在其他实施方式中，过酸的浓度为30-100ppm(w/w)，2-羟基有机酸的浓度为0.3%-2.0%(w/w)。在特别优选的实施方式中，过酸的浓度为70-80ppm(w/w)，2-羟基有机酸的浓度为0.2%-0.4%(w/w)。在上述任何一项的其他实施方式中，该组合物的温度为35°F-45°F或环境温度。这些水性组合物可以无或基本上无表面活性剂，包括任何或所有的非离子表面活性剂、阳离子表面活性剂、或阴离子表面活性剂。该组合物中可存在较低水平的过氧化氢，通常为1-20ppm、5-15ppm或7-12ppm。在某些实施方式中，该水性组合物中存在的或由过氧化氢形成的过酸2-羟基有机酸的含量低于该组合物中相应2-羟基有机酸含量的1/10、1/5、1/20或1/50。在上述优选实施方式中，所述过酸是过氧乙酸，所述2-羟基有机酸选自酒石酸、柠檬酸、苹果酸、扁桃酸和乳酸之一种或多种。在以上任何一项的特别优选实施方式中，2-羟基有机酸是乳酸。在以上任何一项的某些实施方式中，该组合物是水溶液。

本发明组合物中也可存在催化剂，加入催化剂可加速有机过酸的反应速率达到平衡。典型的催化剂是强酸，如硫酸、磺酸、磷酸和膦酸。当稀释过酸组分产生所需水平的过酸时，也可能稀释催化剂。存在低水平的硫酸，例如约1ppm-50ppm对该消毒组合物的性能没有不良影响。

本发明的任何组合物任选还可包含在使用或接触物体过程中能减少或抑制该组合物形成泡沫的制剂。本发明的组合物也可以基本上无任何非离子、阴离子和/或阳离子表面活性剂，和/或基本上无任何增稠剂。

本发明组合物还可含着色剂以有利于检测物体上的该组合物。

如果在某些实施方式中，要将阴离子表面活性剂加入到本发明水性组合物中，可从该领域已知的食品安全或美容安全物质或洗衣安全材料C_6-18烷基硫酸盐和/或磺酸盐(如月桂基硫酸钠或钾)和它们的混合物中选择。优选抗微生物效果好且适口性好的烷基硫酸盐，特别是其钠盐或钾盐。十二烷基硫酸钠或月桂基硫酸钠是特别优选的阴离子表面活性剂。

在某些实施方式中，该组合物含氧化胺，氧化胺与过酸浓度的摩尔比为1或以上。许多过氧羧酸组分有强烈地令人讨厌或不可接受的臭味。将氧化胺加入过氧羧酸可减少这种不可接受的臭味。可制备含氧化胺的过氧羧酸，或在形成过氧羧酸后加入氧化胺。在一实施方式中，在食品生产中或为清洁或消毒食品加工设备或材料而采用氧化胺。在一实施方式中，在健康护理环境中采用氧化胺。以上任何一项的所述氧化胺无毒性。在一实施方式中，可遵照政府机关，如食品药品管理署颁布的指导方针使用氧化胺，而不需要用骷髅加X等标签表示有毒性。优选的氧化胺包括：辛基氧化胺（如辛基二甲基氧化胺）、月桂基二甲基氧化胺等。或者，可分开用氧化胺，施加于已用本发明组合物预先处理过的物体。在这种实施方式中，优选氧化胺的水性组合物。

氧化胺存在的量通常能有效减少过氧羧酸的臭味。氧化胺的合适含量水平包括氧化胺与过氧羧酸的摩尔浓度比为1或以上。在一实施方式中，此摩尔比大于或等于2。在一实施方式中，此摩尔比大于或等于3。在一实施方式中，此摩尔比为2-5。在一实施方式中，此摩尔比为3-5。辛基二甲基氧化胺的分子量比过氧乙酸大约3倍（如2.7），可椐此计算出合适的重量比(参见2009年11月24日颁布的美国专利7,622,606，在此并入本文供参考其中有关的合适氧化胺)。

示范性的氧化胺是化学式

所示的氧化胺，此式中R₁、R₂和R₃独立地选自有1-18个碳的饱和或不饱和直链或支链烷基和芳族基团等，它们可任选含杂原子O、N或P或聚（多）烷氧基基团。氧化胺的例子包括但不限于：烷基二甲基氧化胺、二烷基甲基氧化胺、烷基二烷氧基氧化胺、二烷基烷氧基氧化胺、二烷基醚氧化胺和二烷氧基醚胺。在一实施方式中，R₁是有4-18个碳的烷基，R₂和R₃是有1-18个碳的烷基。在一实施方式中，R₁是有6-10个碳的烷基，R₂和R₃是有1-2个碳的烷基。在一实施方式中，R₁是有8个碳的烷基（辛基），R₂和R₃是有1-2个碳的烷基。在一实施方式中，R₁是有12个碳的烷基（月桂基），R₂和R₃是有1-2个碳的烷基。在某些实施方式中，所述氧化胺是辛基二甲基氧化胺、肉豆蔻基二甲基氧化胺、二癸基甲基氧化胺、氧化甲基吗啉、四癸基二乙氧基氧化胺或月桂基二甲基氧化胺。

在某些实施方式中，所述过酸是过氧乙酸，所述有机酸是乳酸，所述任选的阴离子表面活性剂是月桂基硫酸钠。在其他实施方式中，该组合物中过酸的浓度为3-100ppm(w/w)，该组合物中2-羟基有机酸的浓度为0.1%-2%(w/w)，该组合物中阴离子表面活性剂的浓度为10-2500ppm，pH为2.5-5.0。在其他实施方式中，过酸的浓度为5-100ppm(w/w)，2-羟基有机酸的浓度为0.1-2%(w/w)，阴离子表面活性剂的浓度为50-400ppm。

该水性组合物中的过氧化氢浓度通常低于过酸浓度的5倍至10倍，它的存在可影响过酸与相应酸和过氧化氢之间的平衡或相互转换。例如，过氧化氢浓度可低于5ppm、10ppm或20ppm，取决于所选的过酸及其浓度。因此，该水性组合物中的过氧化氢浓度通常比过酸低很多。

因此，在某些实施方式中，本发明提供的水性组合物中含有i)化学式为RC(O)OOH的有机过酸，其中R是甲基、乙基、正-丙基或仲-丙基；ii)选自酒石酸、柠檬酸、苹果酸、扁桃酸和乳酸的2-羟基有机酸；和任选的iii)阴离子表面活性剂；其中该水性组合物的pH为2.5-6.0、4.0-6.0、3.5-4.5、3.0-5.0、3.6-4.2，包括2.5-5.0、2.5-4.5、2.5-3.5、2.7-3.5、3.6-4.6、2.8-3.2或约3.0（如3.0±0.2、3.0±0.3);和包括浓度40-250ppm(w/w)的过酸及包括浓度0.1-1%(w/w)的2-羟基有机酸。在其他实施方式中，该水性组合物所含的过酸是过氧乙酸，2-羟基有机酸是L-(+)-乳酸。在其他实施方式中，该组合物中过氧乙酸的浓度为50-100ppm(w/w)，该组合物中乳酸的浓度为0.1%-0.6%(w/w)。一优选的水性组合物所含的过氧乙酸浓度为60-80ppm(w/w)，乳酸浓度为0.1%-0.4%(w/w)。在以上任何一项的其他实施方式中，选择的pH范围为2.5-4.5、2.8-3.2、2.5-5.0和2.7-3.5。在以上任何一项的其他实施方式中，该组合物的温度为35°F-45°F或环境温度。这些水性组合物可以基本上无表面活性剂，包括任何或所有的非离子表面活性剂、阳离子表面活性剂、或阴离子表面活性剂。该组合物中可存在较低水平的过氧化氢，通常为1-20ppm、5-15ppm或7-12ppm。该水性组合物中存在的或形成的过氧酸2-羟基有机酸的含量低于该组合物中相应的2-羟基有机酸含量的1/10、1/5、1/20或1/50。

在某些实施方式中，通过在过酸组分中加入基本上无过氧化氢的2-羟基有机酸组分，或通过在基本上无过氧化氢的2-羟基有机酸组分中加入过酸组分，来制备该水性组合物。可浓缩得到的混合液或如上所述预先混合制备适合于接触上文所述物体的消毒浓度。在其他实施方式中，分别将基本上无过氧化氢的有机酸和过酸加入到水溶液中，用于洗涤或消毒物体。在某些实施方式中，在该组合物接触物体期间，为维持该组合物的pH和/或过酸浓度和/或2-羟基有机酸浓度，可通过一次或多次监测该组合物的pH、过酸浓度、2-羟基有机酸浓度或氧化还原电势，并加入浓缩的或预先混合的该水性组合物，以维持该水性组合物的pH和、过酸和乳酸浓度。

上述本发明的任何组合物具体还可包含在使用或接触物体过程中能减少或抑制该组合物形成泡沫的制剂。本发明的组合物也可以基本上无任何非离子、阴离子和/或阳离子表面活性剂，和/或基本上无任何增稠剂。

在另一实施方式中，该水性组合物中过酸的浓度为60-80ppm(w/w)，该组合物中2-羟基有机酸的浓度为0.2%-1.25%(w/w)，该组合物中阴离子表面活性剂的浓度为约150-200ppm(w/w)，pH为3.8-4.2，包括3.8和4.2。

本发明的水性组合物任选还可包含螯合剂，以螯合去除催化过氧化氢分解的金属。这些制剂包括但不限于能螯合二价金属阳离子的有机膦酸以其水可溶性盐。常用的螯合剂是1-羟基亚乙基-1，1-二膦酸。通常在临用前稀释该消毒组合物中的螯合剂，从而最大程度降低其影响。具体说，本发明的水性消毒组合物任选可包含能螯合镁和钙的制剂。

不受理论束缚，任选存在的阴离子表面活性剂的作用是降低该水性组合物的表面张力和粘稠度，以促进该组合物在物体表面的散布。粘度低有利于在食品表面散布，特别是在凹突不平表面层等上的散布而促进处理完全。粘度低也有利于清洗和残留液的快速干燥。

在某些实施方式中，该水性组合物减少了物体表面污染的微生物至少1或2个对数单位，更优选至少3个对数单位，还要优选至少4个对数单位。测定减少倍数的合适方法是本领域熟知的，在实施例中也有例举（如利用附着于莴苣叶的大肠杆菌或替代的李斯特病原菌）。在其他实施方式中，按照实施例中所述的任一方法，抑制10%、20%、30%、40%、20-50%的食物（如食品）腐败变质或延长保质期1、2、3、4或5天。

可提供预先混合或浓缩的该组合物，如本文所述用水稀释而获得接触物体的消毒组合物。设想预先混合或浓缩物在临用前需要用水稀释4-200倍、10-100倍、10-50倍、10-25倍、4-10倍（如5-、10-、20-、40-、50、100倍稀释）。

术语“基本上无”意味所指物质缺乏或仅存在微量不会实质性改变所指物质的性能。就过氧化氢而言，基本上无过氧化氢的2-羟基有机酸可以是无过氧化氢，否则只有低于0.1ppm(w/w)含量的过氧化氢。就过氧2-羟基有机酸而言，如果所指组合物中缺乏2-羟基有机过酸，或其量低于相应2-羟基有机酸的1/10、1/20、1/40或1/100，或是含过氧化氢组合物中的2-羟基有机酸与化学式为RC(O)OOH（其中R是甲基、乙基、正-丙基或仲-丙基）的有机过酸反应而先形成的反应产物，就认为消毒组合物基本上无2-羟基有机过酸。因此，在某些实施方式中，该消毒组合物或用于制备该消毒组合物的2-羟基有机酸组合物基本上无2-羟基有机过酸。

本发明的杀菌或消毒组合物可以是不同剂型，包括水溶液、悬浮液、凝胶、泡沫剂、雾剂（fogs）、喷雾剂和抹布（wipes）。其他类型产品包括杀菌泡沫、乳膏、摩丝等，和含有机和无机填充材料的组合物，如乳液、洗液、霜剂、糊剂等。也可采用杀菌雾剂和杀菌摩丝剂型的这种杀菌或消毒组合物。可将本发明的组合物制备成稀释的即用型组合物，或浓缩物而在临用前稀释。

根据产品性质各种剂型的组合物也可包含芳香剂。例如，对于厨房清洁抹布可能需要采用松油或柠檬油芳香剂，因为它们的清洁度吸引了许多消费者。此外，因类似的或其他原因，凝胶或喷雾好可以是芳香的。在某些实施方式中，该组合物以重量计的主要成分是水。在某些实施方式中，本发明组合物中的水占重量的至少50%、60%、70%、80%、90%、95%、98%或99%。

在本发明一实施方式中，利用该杀菌组合物来制备杀菌抹布。可用本发明的杀菌抹布来清洁各种硬表面和其他表面，包括人手和皮肤、医疗器械、台面、水槽、地板、墙壁、窗户等。本发明的抹布可用各种织物制成。对于本发明的此目的，所述织物包括布、纸以及纺织或无纺材料。可用合适的材料，如人造丝、尼龙或棉花、麻和它们的组合制造纺织或无纺织物。无纺织物的例子可参见美国专利3,786,615、4,395,454和4,199,322，其内容通过引用纳入本文。可用本领域已知的方法用该杀菌组合物浸泡所述织物或纸。可单独或以该领域已知的方式包装抹布，包括单独泡罩装或包裹或层叠多包装。

在另一实施方式中，将本发明的杀菌组合物配制成凝胶或胶状消毒组合物。除杀菌组合物外，本发明的消毒凝胶可包含增稠剂或胶凝剂，“胶凝剂”与“增稠剂”可互换使用。对于本发明的此目的，术语“凝胶”或“凝胶”消毒组合物指粘度约1,000-100,000厘泊，或在其他实施方式中粘度为2,000-50,000厘泊的杀菌性液体物质，虽然这个范围不是限制性的。洗手的凝胶粘度认为应低于工业清洗或消毒目的所用的凝胶。胶凝剂或增稠剂的例子包括但不限于天然树胶，如瓜尔胶和瓜尔胶衍生物、合成的聚合物、丙烯酸均聚物、丙酸共聚物、卡波姆、纤维素衍生物、褐藻酸、褐藻酸衍生物、水不溶性C₈-C₂₀醇、角叉菜胶、粘土、油、蜡、芦荟冰凉啫喱、煅制二氧化硅，它们的混合物等。胶凝消毒组合物中存在的胶凝剂含量占该胶凝组合物的约0.1-50wt%。在另一实施方式中，胶凝剂含量占胶凝消毒组合物的0.25-10wt%。胶凝剂含量取决于各种因素，包括胶凝剂的类型和所需凝胶的粘稠度。这种胶凝消毒剂有多种用途。在一具体实施方式中，可将该杀菌组合物与天然的芦荟胶混合形成杀菌芦荟制剂。当接触皮肤或想要接触皮肤时这种制剂特别有利。

在另一实施方式中，可将本发明的杀菌组合物配制成杀菌泡沫或泡沫组合物。这种杀菌泡沫或泡沫组合物包含杀菌组分和发泡剂。可根据所需应用和所得杀菌的性质采用该领域已知的任何发泡剂。

在另一实施方式中，本发明的杀菌组合物可以是杀菌气溶胶或气雾形式。气雾是杀菌剂气溶胶化过程产生的。杀菌剂的气溶胶颗粒可悬浮一定时间而消毒空气本身和表面，包括仪器不能接近的部分，如通风孔。杀菌剂气溶胶的颗粒大小约5-200微米。在另一实施方式中，气溶胶颗粒大小约20微米到约微米。

气雾可能对预防和控制疾病起主要作用的部分。大多数喷雾机采用高容积空气在压力下工作产生小水滴。本发明的杀菌组合物与大多数标准的喷雾机相容。合适喷雾机的例子包括：

热喷雾器和冷喷雾器。

作为一种组分，可将所述组合物制成物体（如器械）的喷雾浴液，或施加于较少移动物体的喷雾。

容器和试剂盒

在某些实施方式中，本发明提供装有本发明水性消毒组合物和用其处理污染物或上述其他物体的使用说明书的试剂盒。在某些其他实施方式中，该试剂盒提供的第一部分装有达到平衡或近乎平衡的过酸组合物。通常提供的该组合物为即用型，或者包含约5-35%重量的过酸（如过氧乙酸或混合过酸）和使用前应加多少水稀释的说明书。该试剂盒装有浸泡碗和滤网。可提供装在喷雾瓶中的即用型制剂。在其他实施方式中，该试剂盒在一个容器中提供浓缩的水性消毒组合物和任选装有一定量即用制剂的可填充气雾瓶。该试剂盒装有如何用水稀释浓缩液到合适倍数的说明。通常所述浓缩液比即用制剂浓4、5、6、8、10或20倍。该试剂盒特别适合消费者使用。

本发明的方法

在第二方面，本发明提供消毒物体的方法，所述方法包括使物体与本发明水性消毒组合物接触。可用该领域普通技术人员已知的任何合适工具使该组合物接触或施加于物体。例如，可用任何能确保被消毒表面与该消毒组合物之间良好接触的方法施加该组合物。这种方法包括：沐浴、洗涤、涂敷、涂刷、浸渍、浸泡、擦拭、喷雾和喷洒。可重复这些步骤以确保彻底接触。一旦施加后，停留时间应足够而发挥消毒作用到所需程度(如去除污染微生物至少2、3、4、5、6、7、或8倍)，再通过离心和/或排水，或用适合食物用的水（如饮用水）淋洗或清洗，从物体表面除去该组合物。可以任何顺序联用这些步骤。当存在的过酸2-羟基有机酸和十二烷基硫酸钠的量为公认的无害安全量（GRAS量）时不需要清洗。具体说，优选采用的过酸是挥发性的，因此物体上残留的少许很快被干燥。

停留时间随过酸(如过氧乙酸)，2-羟基有机酸（如L-(+)-乳酸和表面活性剂（如果有）的浓度而不同。然而，一般认为，物体表面与水性消毒组合物的接触停留时间为约10秒至约10分钟。更优选停留时间约20秒至1、2或4分钟。停留时间依据温度和过酸与2-羟基有机酸的浓度而不同。温度和浓度较低需要较长的接触时间，该领域普通技术人员不难凭经验确定。

应根据物体的热耐受性能采用水性消毒组合物/清洗组合物的温度。该消毒组合物可有效采用适合液态水的温度。常规的温度是环境温度或室温（如20°C-35°C)。然而，可根据待处理物体的耐热性能和加入过酸或2-羟基有机酸中水的来源，采用其他温度。

在某些实施方式中，这种接触减少了物体表面污染的微生物至少3或4个对数单位，更优选至少5个对数单位，还要优选至少6、7或8个对数单位。所述污染菌可以是人病原菌（如大肠杆菌菌株O157H7、单核细胞增生李斯特菌(Listeria moncytogenes)、沙门菌）或物体表面常见的土著微生物（indigenousmicroorganism）。

可在家庭应用和商品化应用本发明的水性消毒组合物。

在某些实施方式中，通过处理要减少的污染微生物是人的病原菌（如肠毒性细菌），包括但不限于杆菌（如大肠杆菌菌株O157H7、单核细胞增生李斯特菌、沙门菌）、病毒、真菌或霉菌。

还惊奇地发现该水性消毒组合物中的过酸(如过氧乙酸)与2-羟基有机酸（如L-(+)-乳酸联合制剂使用时特别有效，提供了长效消毒组合物。当连续用其处理多个物体时，必需添加过酸和2-羟基有机酸更新该组合物，维持过酸浓度于约60-80ppm，乳酸浓度于0.2-0.4%或约2.5%。

在某些实施方式中，提供的消毒组合物是预选混合的水性混合物（如约5-200倍浓缩液，5-、10-、20-、40-、50-或100-倍浓缩液），加入水后使之接触物体。在某些实施方式中，用清洗组合物调节过酸和/或2-羟基有机酸的浓度，根据实际检测的该清洗组合物中过酸和/或2-羟基有机酸的浓度和历史上的消耗数据，加入该预先混合液或浓缩液以维持它们的浓度。

在某些实施方式的商品化应用中，将所述物体转移到消毒组合物（如溶液）中，通过浸泡该组合物而接触消毒组分。产生的气泡有利于接触和/或混合该预先混合液。然后从消毒组合物中取出物体，任选用无过酸和2-羟基有机酸的水喷雾淋洗，和/或浸入无过酸和2-羟基有机酸的水中。下一步通过摇晃、离心、空气干燥或用毛巾擦拭物体去除淋洗水。

可利用本发明减少臭味的组合物来减少病原微生物菌群，如人、动物等的病原体。本发明减少臭味组合物具有对抗病原体，包括真菌、霉菌、细菌、芽孢菌和病毒，例如细小病毒、柯萨奇病毒、疱疹病毒、金色葡萄球菌、大肠杆菌、链球菌、军团杆菌、分枝杆菌等的活性。这类病原体可能引起各种疾病和病症，包括足癣、毛蹄疣病、乳腺炎或其他哺乳动物挤奶疾病、结核病等。此外，本发明组合物可杀死通过水、空气或物体表面传播的病原微生物。含该组合物的滤过液能减少空气和液体中的微生物菌群。

可采用本发明减少臭味的过氧羧酸组合物（如溶液）的浓缩液，以常规方法使之与物体或设备接触，向物体施加抗微生物或清洁组合物。例如，用该减少臭味组合物的减少臭味组分擦拭，用气雾喷射和/或浸泡物体。可用手或机器实施这种接触。

本发明的方法要求本发明组合物（如溶液）与物体的接触时间很短即有显著的抗微生物作用。这种接触时间因所用组合物的浓度、使用的方法和温度、物体上的污染程度、物体上的微生物量、环境、所需的消毒程度等而不同。优选时间至少约5-15秒。

在一实施方式中，利用加压喷雾施加本发明组合物（如溶液）。向物体施加喷雾时，和机械动作，优选搅动、擦拭、刷等移动物体的表面。搅拌可以是物理擦拭物体，通过加压喷雾作用、通过超声或其他方法搅拌。搅拌可提高喷雾液杀死微生物的效果，也许是由于使消毒液更好地接触到小缝隙或微生物小集落。用前可将喷雾液冷却至约2-5°C温度，冷却到2-10°C；对耐热物体可加热到温度约15-20°C，优选约20-60°C，以提高效果。

可自动化（如在生产线上）或手工进行喷雾施加。采用多个喷雾头以确保完全接触或采用其他喷雾工具。喷雾头可以是任何有效的喷雾图案模式。可利用喷雾密闭室将喷雾的组合物（如溶液）基本上限制在该室内。例如，生产线上的物体移动通过入口通道进入该密闭室在那里消毒液接触物体的所有表面。经过一些时间表面的水引流而干。喷雾密闭室也可喷射蒸气施加本发明的抗微生物或消毒组合物（如溶液）。这些喷射蒸汽可联用冷却水以确保处理的物体温度达到理想的温度，这样物体就不需要因喷雾的温度（煮沸沸点）而改变温度（如冷却）。

在某些实施方式中，将所述物体浸入含一定量本发明组合物（如溶液）的水槽中。优选搅动组合物以提高该组合物的效力，和提高该组合物减少家禽产品所伴有微生物的速度。可用常规方法，包括超声波、使空气鼓泡通过该组合物，机械方法如搅棒、滤网、浆叶、刷子、液体射流泵驱动，或这些方法的组合。在某些实施方式中，可加热本发明的消毒组合物提高该溶液杀死微生物的效果。

在本发明另一可选择实施方式中，用本发明的泡沫剂处理物体。通过使用前或使用时混和增泡表面活性剂与本发明消毒液制备这种泡沫剂。增泡表面活性剂的性质可以是非离子、阴离子或阳离子型。有用类型的表面活性剂包括但不限于以下：氧化胺、碱金属硫酸盐、烷基醚磺酸盐、磺酸盐（或酯）、季胺化合物、烷基肌氨酸、醇乙氧基化物、醇乙氧基化物羧酸酯、甜菜碱和烷基酰胺。可在临用时混和增泡表面活性剂与其他成分，制备消毒组合物。所用溶液的增泡剂含量约50ppm到约2.0wt%。使用时将加压空气注入混和液，然后通过起泡装置如泡沫罐或吸附固定于墙壁上的发泡罐将泡沫施加于物体。

在本发明另一实施方式中，用粘稠或凝胶形式的组合物处理物体使组合物粘在表面。利用现有技术，如黄原胶、聚合物增稠剂、纤维素增稠剂等使该组合物或消毒组合物粘稠或胶凝。也可采用杆状胶束形成系统，如氧化胺和阴离子反离子。可采用增稠剂或凝胶形成剂的浓缩产品或在临用时与消毒液混和。所用的增稠剂或胶凝剂水平范围通常在约100ppm到约0.1wt-%或约0.1到约1wt-%，或1--10wt-%。在增稠剂或胶凝状态下，该消毒液能长时间维持与物体接触而提高抗微生物效力。

以下实施例说明而非限制本发明。

实施例

实施例1.本实施例说明本发明水性消毒组合物的用途。如图1-16所示，本发明的组合物能有益地去除各种物体表面的微生物，抑制所处理物体上土著微生物的生长，能去除物体表面的模型病原菌。本发明的方法和组合物还显示能极大地改善易腐败物体的保质期和极大地减慢易腐败物体的变质。可将这种发现扩大用于各种微生物，如细菌、酵母菌和霉菌。

A.保质期研究的标准程序

用此法来测定用消毒液、一般具体指本发明的消毒液处理后产品的保质期。

制品

冷却的8个20加仑容器装入~45°F的75%水。

用锡泊纸包裹的十二个5-加仑桶高压灭菌至少一天然后加工

1.根据产品的类型，采用相应的OTR桶；切割、标记和密封装袋。装好的袋子置于生物安全柜中UV照射2小时以最大程度减少污染。

加工

1.临用前配制化学消毒剂。所有计算依据质量/质量，

2.只装满容器的3/4，从而防止加工过程中的溢出，

3.将原料品轻轻放入有盖的不锈钢篮子中，装满其3/4，

4.当篮子浸入化学消毒液中开始计时，

5.轻轻上下转圈移动篮子30秒，

6.从装化学溶液的容器中取出含产品的经处理篮子，立即移入另一个装有3/4清洗水的容器中，

7.在水中上下转圈移动10次去除经处理产品大部分表面残留的化学物质，

8.倒置装有经处理产品的篮子，轻轻排空内含物移到烘干槽衬板上

9.重复步骤‘3’至‘8’直到烘干槽衬板装满。盖好烘干槽盖子离心20分钟，

10.出空烘干槽衬板上已干燥的产品移入无菌桶中，让干燥的经过处理的产品再静置10-15分钟使其水份与环境平衡，达到与相应生产设施相同的水份。

11.清洗所有的工具、设备和容器

12.重复步骤‘1’到‘11’用于其他消毒水的处理。

装袋和密封

1.注意每次装袋时的规模，

2.装满袋时目标产品的质量，

3.用合适的密封机密封袋，

4.贮存在45°F盒子中进行评价：在感兴趣的适当日期作微生物分析，开袋评价（OBE）和目视检查。

评价

1.采用合适形式的OBE，

2.目视检查产品和拍照各种化学物样品的差异

OBE水份测定-称重叶子的最初质量，将叶子移到折叠的纸巾上用手压干水渍去除外部水份，取最后的重量，

计算：所用的贮存液与浓缩液体积

水份差：

差＝(M_之前)-(M_之后)

水份百分比：

3.从第一次分析前到同一袋子通过保质期后，目视分析以确保袋子都有标记，

4.通过连续稀释和铺开接种计数经过处理产品的微生物菌群，

5.例如在第1、5、7、9、12和15天回收的样品作微生物和OBE

分析

B．悬浮细胞激发试验（Challenge Test）的标准程序

采用此程序测定消毒液对悬浮于液体的微生物的抗微生物活性。

工艺参数和处理

1.温度：45F

2.停留时间：30±10秒

pH:3±0.3

3.替代的病原菌：大肠杆菌K12，英诺克李斯特菌（Listeriainnocua），

替代的腐败微生物：荧光假单胞菌（Pseudomonas flourescens），酿酒酵母菌

执行测试

1.将1.00mL含10⁸cfu/g贮存培养物移入含有9.00克测试溶液的试管中，

2.涡旋搅拌混合15秒，

3.将1ml经过处理的样品移入9mL巴特菲尔德磷酸缓冲液中停止反应，

4.通过连续稀释和铺开接种计数活的残留细胞，

5.确保操作时的温度保持在45±1°F(如果全部试验在室温下进行，在化学变化的动力学改变显著时只从冰箱取出一个试管)。

C.附着细胞激发试验的标准操作程序

用此法检测消毒剂对附着于叶子表面微生物的抗微生物活性。

工艺参数和处理

1.温度：45°F

2.停留时间45秒

3.pH：3±0.3

4.处理：水、氯化水、CS、乳酸、过氧乙酸、FE消毒剂（即含过氧乙酸和乳酸的水性消毒剂），16种水平

5.测试产品：长叶莴苣、菠菜、新鲜色拉叶（spring mix）

6.替代病原菌：大肠杆菌K12、英诺克李斯特菌

7.测试微生物：产品叶子上的土著微生物（需氧菌平板总数[APC]、酵母菌和霉菌[YM]数）。

样品制备

1.取3-4片待测产品叶子置于6”x6”x5”灭菌聚丙烯(PP)篮子中。如果测试产品是长叶莴苣，将其切成2”x4”大小方块。

2.用1-mL移液器回收1.00mL含10⁸cfu/g的贮存培养物，通过点滴小液滴慢慢将接种物液点滴到叶子表面。干燥前小心不要摇动PP篮子引起液滴从叶子上跌落，

3.将装有点有菌液叶子的篮子置于生物安全柜中并通风(~0.5W.C.)1.75小时，

4.从柜中取出装有点有菌液叶子的篮子移入40-45°F冷室/冰箱中0.25小时。

点有菌液叶子的处理

1.将装有点有菌液叶子的PP篮子放置在45°F含3L水的灭菌容器中摇动45秒，

2.立即将经过处理的篮子浸入45°F自来水中清洗10秒钟，

3.从篮子中取出经过处理的叶子，用无菌钳将其放入胃托袋(stomacherbag)中，

4.在胃托袋上标记叶子的相关处理，

5.用其他试验处理重复步骤1-4。

处理过的叶子的计数

1.在装着经过处理叶子的胃托袋中加入磷酸盐液直到10倍稀释，

2.使胃托袋中的磷酸盐缓冲液和经过处理叶子消化（stomach）30秒钟，

3.将叶子振荡回磷酸盐缓冲液并重复消化另外30秒，

4.去除被消化样品中的缓冲液，通过连续稀释和铺开接种计数残留细胞，

5.重复步骤1-4的所有其他处理。

D.制备微生物贮存培养液的标准操作程序

用此程序制备用于悬浮和附着细胞激发试验的10⁸-10⁹cfu/mL贮存培养菌。在加入测试液前计数贮存培养菌的细胞浓度。

1.贮存培养菌的活化

a.所有步骤都在无菌环境（如生物安全箱中）下进行。

b.用无菌环工具从纯贮存培养菌中回取一环细菌细胞，通过无菌操作将该环细胞移到装有10ml无菌生长培养液（肉汤）的试管中。

c.重复步骤“b”三次。

d.在最适生长温度下培养步骤“b”和“c”的接种试管2天以活化微生物，

e.步骤“b”至“d”指第一次细胞转移(1^stT)，

f.回收第一次试管1^stT的0.1-mL生长培养液无菌操作转移到另一个装有10-mL无菌生长培养液的试管中，

g.取50-100-uL生长培养液样品铺开接种于琼脂平板上验证第一次试管菌是纯培养菌，

h.重复步骤“g”2次，

i.在所选择的最适温度下培养平板和转移的#2号管细菌，

j.步骤“f”至“i”称为2^ndT，

k.用100mL生长介质重复步骤“f”到“i”，作为3^rdT，

l.将从3^rdT获得的锥形培养烧瓶菌贮存在冰箱中过夜，

m.取出步骤“l”中的3^rdT烧瓶，并将其等量地转移到4个离心管中，

n.10,000RPM离心装有纯贮存培养菌的试管10分钟，

o.立即倒干生长培养液，细胞沉淀在离心管底部，

p.向沉淀细胞加入相同量的无菌去离子水，

q.涡旋振荡松散和重悬沉淀的细胞，

r.重复步骤“n”和“o”二次以上，

s.为获得最终10⁸-10⁹菌落形成单位数/克(cfu/gm)重悬的培养细胞，在步骤“r”的沉淀细胞中加入原先体积1/10的无菌去离子水，

t.用匙子将所有的重悬培养细胞移入一离心管形成最终的悬浮贮存培养菌。

本发明消毒液去除产品表面微生物的效力。

结果

下表显示用或不用表面活性剂对悬浮细胞激发试验的结果：

下表显示附着细胞激发试验的结果

由于采用了本发明的水溶液以上结果显示了惊奇效果，显著提高了对微生物的去除改善了产品的保质期。

实施例2.此实施例表明存在2-羟基有机酸（如乳酸）极大地减少了产品处理期间过氧乙酸的消耗，说明了本发明水性消毒组合物的用途。如下文所示，本发明的溶液在去除各种产品表面微生物期间有利于保存过氧乙酸。本发明的方法和组合物也显示极大地改善了产品的保质期和极大地减少了产品的腐败变质。应将这种节约扩大用于各种微生物，如细菌、酵母菌和霉菌。

无表面活性剂20秒钟停留时间悬浮细胞激发试验的协同效果

实验处理的分组是：自来水、氯化水、FE消毒洗涤水（给定实验中指定的FE、FE消毒液、过氧乙酸和乳酸溶液）。实验参数是：

40-45°F，

停留时间20秒，

pH：

水(~7)

氯化水(6.5-7.1)

乳酸(3.8-4.0)

过氧乙酸(6.5-6.8)

FE消毒洗涤水(2.7-3.2)

替代微生物是含链霉素抗性基因的英诺克李斯特菌或大肠杆菌K-12。

实验过程如下

1.取100mL含~10⁸菌落形成单位数/克(cfu/g)植物乳杆菌(ATCC14917)贮存培养液移入装有9.0ml测试处理液的试管中

2.旋涡振摇混合15秒

3.取1ml处理样品液移入9ml巴特菲尔德磷酸盐缓冲液中停止反应

4.通过连续稀释和1-mL转移菌铺开接种计数活的残留细胞，

5.保证操作温度维持在40-45°F(如果所有试验在室温下进行在化学变化动力学显著时只从冰箱中取出一个试管)

6.重复步骤1-5二次以上

7.用水槽水重复步骤1-6

8.用氯化水重复步骤1-6

9.用不同水平FE重复步骤1-8

10.用不同水平乳酸重复步骤1-8

11.用不同水平过氧乙酸重复步骤1-8

12.用英诺克李斯特菌(ATCC33090)重复步骤1-11。

估算减少的对数值

1.活性对数值是对消毒过程中被灭活微生物百分数的一种衡量，定义为灭活对数=Log₁₀(N_o/N_T)；其中N₀是活微生物最初的注入浓度，N_T是存活微生物的浓度。因为M cfu/g=贮存培养液的微生物群体；Wcfu/g=“水处理”液中的微生物群体，X cfu/g=“X”处理液中的微生物菌群，“处理X”引起的降低对数值=Log(w/x)。

结果和结论

表2.1.氯化水、乳酸洗涤水、过氧乙酸洗涤水和FE消毒洗涤水减少悬浮英诺克李斯特菌细胞的对数值比较

表2.2.氯化水、乳酸(LA)洗涤水、过氧乙酸(PA)洗涤水和FE消毒洗涤水减少悬浮植物乳杆菌细胞的对数值比较

测试的FE消毒液(此地是上述乳酸和过氧乙酸的混合物)减少英诺克李斯特菌和植物乳杆菌的对数值显著好于PA洗涤水和LA洗涤水。这清楚地表明LA与PA联用有协同作用。含70ppm PA和2000ppm LA的FE消毒洗涤水在20秒停留时间期间减少了~3-log₁₀的英诺克李斯特菌。乳酸和过氧乙酸联用提供的细菌减少对数值比单用过氧乙酸不加乳酸显著高约2-4倍。

实施例3.此实验比较了消毒水对植物病原体悬浮液的作用。

工艺参数和处理

处理：自来水、氯化水、FE消毒洗涤水，

温度40-45°F：停留时间30秒

pH:

水(~7)

氯化水(6.5-7.1)

FE消毒洗涤水(2.7-3.2)

病原体：

五株大肠杆菌O157:H7(F4546,F4637,SEA13B88,TW14359,960218)的混合菌液

五株单核细胞增生李斯特菌(ATCC 19115,ATCC51414,ATCC15313,FRR B2472(SCOTT A),1838)的混合液

五株沙门菌(新港沙门菌，田纳西沙门菌，慕尼黑沙门菌，古巴沙门菌，圣保罗沙门菌)的混合液

贮存培养菌的活化

1.通过在生物安全柜中无菌操作连续转移贮存的培养菌到最优培养基中培养，实现贮存培养菌的活化，

2.从贮存的培养菌取一小环(~100uL)纯培养菌，转移到装有10ml美国典型培养物保藏中心（ATCC）或发表文献推荐的各微生物特异性最佳生长培养肉汤试管中，

3.按照ATCC或已发表文献的推荐在最适培养条件下培养接种物直到其生长到对数生长期，

4.通过划线接种和铺开接种验证转移培养菌的纯度，

5.回收1.5-ml步骤3的培养肉汤移入装有150ml美国典型培养物保藏中心（ATCC）或发表文献推荐的各微生物特异性最佳生长培养肉汤的250-mL锥形烧瓶中，

6.按照ATCC或已发表文献的推荐，在最适培养条件下培养接种物直到其生长到对数生长期

7.通过划线接种验证转移培养菌的纯度，

8.通过铺开接种和1ml转移菌连续稀释，计数步骤6培养肉汤的细菌浓度，

9.冷却150ml锥形烧瓶贮存培养菌至冰箱温度1-4小时后接种。

接种物的制备和例举

1.将第二次转移的锥形烧瓶中的150ml冷却贮存培养菌等体积分装到三个50ml离心管中（每管50ml）,

2.4°C，10,000RPM离心15分钟，

3.倒干每个离心管中的液体肉汤留下沉淀细胞，

4.用含0.1%蛋白胨的5ml水充满步骤3的离心管，涡旋振荡松散和混合沉淀细胞，

5.将重悬的贮存培养菌倒入一个离心管中形成~10⁸cfu/gm的接种物。

通过用1ml转移菌的连续稀释液划线接种，计数和验证步骤‘5’获得的微生物菌群。

方法

6.将1.00mL的~10⁸cfu/g大肠杆菌O157:H7五个菌株混合贮存培养液转移到装有9ml测试液的试管中，

7.涡旋振摇混合15秒，

8.将1ml经过处理的样品移入9mL巴特菲尔德磷酸缓冲液中停止反应，

9.通过连续稀释和用1ml转移菌铺开接种计数活的残留细胞，

10.确保操作时的温度保持在40-45°F(如果全部试验在室温下进行，在化学变化的动力学改变显著时只从冰箱取出一个试管)，

11.重复步骤1-5两次以上，

12.用水槽水重复步骤1-6，

13.用氯化水(10ppm活性氯，pH 6.5-7)重复步骤1-6，

14.用另一水平的FE重复步骤1-8，

15.用另一批五株单核细胞增生李斯特菌混和液重复步骤1-8，

16.用另一批五株沙门菌混和液重复步骤1-8。

结果和结论

表3.1.氯化水和测试FE消毒洗涤水减少悬浮大肠杆菌O157:H7细胞的对数值比较

表3.2.氯化洗涤水和测试FE消毒洗涤水减少悬浮沙门菌细胞的对数值比较

表3.3.含氯洗涤水和测试的FE消毒洗涤水减少悬浮的单核细胞增生李斯特菌细胞的对数值比较

与自来水对照相比，10pmm氯化水能减少每种病原菌群约~1-log₁₀。二种浓度的FE消毒洗涤水平板计数无残留菌落，记录到的结果<1.0log₁₀cfu/mL。因此，与自来水相比，FE消毒洗涤水导致的大肠杆菌和沙门菌减少大于7-log₁₀；单核细胞增生李斯特菌减少大于5.2-log₁₀。观察到单核细胞增生李斯特菌减少较低并非表明FE消毒洗涤水对该病原菌效果较差，因为此报告结果受到最初的贮存接种物群（数量）的限制。

实施例4.这些实验的目的是测定消毒水对附着于叶子表面的植物病原体的抗微生物活性

工艺参数和处理

处理：自来水、氯化水、FE消毒洗涤水，

温度40-45°F：停留时间30秒

pH:

水(~7)

氯化水(6.5-7.1)

FE消毒洗涤水(2.7-3.2)

测试产品：切成方块的长叶莴苣叶子和成熟的菠菜叶子

病原体：

五株大肠杆菌O157:H7(F4546,F4637,SEA13B88,TW14359,960218)的混合菌液

五株单核细胞增生李斯特菌(ATCC 19115,ATCC51414,ATCC15313,FRR B2472(SCOTT A),1838)的混合液

五株沙门菌(新港沙门菌，田纳西沙门菌，慕尼黑沙门菌，古巴沙门菌，圣保罗沙门菌)的混合液

贮存培养菌的活化

1.通过在生物安全柜中无菌操作连续转移贮存的培养菌到最优培养基中培养，实现贮存培养菌的活化，

2.从贮存的培养菌取一小环(~100uL)纯培养菌，转移到装有10ml美国典型培养物保藏中心（ATCC）或发表文献推荐的各微生物特异性最佳生长培养肉汤试管中，

3.按照ATCC或已发表文献的推荐，在最适培养条件下培养接种物直到其生长到对数生长期，

4.通过划线接种和铺开接种验证转移培养菌的纯度，

5.回收步骤3的1.5-ml培养肉汤移入装有150ml美国典型培养物保藏中心（ATCC）或发表文献推荐的各微生物特异性最佳生长培养肉汤的250-mL锥形烧瓶中，

6.按照ATCC或已发表文献的推荐，在最适培养条件下培养接种物达到对数生长期末，

7.通过划线接种验证转移培养菌的纯度，

8.通过铺开接种和1ml转移菌连续稀释，计数步骤6培养肉汤的细菌浓度，

9.冷却150ml锥形烧瓶贮存培养菌至冰箱温度1-4小时后接种。

接种物的制备和计数

1.将第二次转移的锥形瓶烧瓶中的150ml冷却贮存培养菌等体积分装到三个50ml离心管中（每管50ml）,

2.4°C，10,000RPM（转/分钟）离心15分钟，

3.倒干每个离心管中的液体肉汤留下沉淀细胞，

4.用5ml含5%无菌马血清的溶液充满步骤3的离心管，涡旋振荡松散和混合沉淀细胞，

5.将重悬的贮存培养菌倒入一个离心管中形成~10⁸cfu/gm的接种物。

6.通过用1ml转移菌的连续稀释液铺开接种，计数和验证步骤‘5’所获得的微生物菌群。

样品制备

1.取4片待测产品叶子置于6”x6”x5”灭菌聚丙烯(PP)篮子中。如果测试产品是长叶莴苣，将其切成1.5”x2.5”大小方块。

2.在步骤1的四片叶子中，二片的上表皮应朝上，二片的下表皮应朝下，

3.用100uL移液器回收50uL含约10⁸cfu/g菌的贮存培养菌，通过点滴小液滴（10-15滴）慢慢将接种物液滴到每张叶子表面。滴叶子前保证除去移液器尖头外侧的过量贮存菌。干燥前小心不要摇动PP篮子引起液滴从叶子上跌落，

4.将装有点有菌液叶子的篮子放在照片1所示放有特里拉德（Drierite）的生物安全柜中1-1.5小时，温度70-80°F，相对湿度38-48%，确保整个干燥过程柜内温度平稳(<±2°F)，

5.确保干燥结束时叶子不枯萎。。

点有菌液叶子的处理

从PP酸坛(carboy)中取3L测试液移入5-L灭菌PP桶中

1.在3L溶液中加入所需体积的最后成分，如需要用灭菌钳彻底混合，

2.将二片点有菌液叶子（一片滴在上表面，另一片滴在下表面）移入灭菌的空PP篮子中，

3.将装有点有菌液叶子的PP篮子放入含3L测试溶液完全制剂的灭菌容器中，

4.维持测试液温度于40-45°F，

5.用钳子将叶子轻轻推入测试液中确保所有时间叶子都完全浸没，防止叶子折叠和重叠

6.一旦叶子完全浸没30秒开始停止手表计时，

7.用灭菌钳从篮子中取出经过处理的叶子放入胃托袋中，

8.用叶子处理的相关标记，标记胃托袋，

9.用消毒的橡皮瓜锤将叶子搓揉成碎片，

10.用该试验的其他处理方法重复步骤1-7，

11.步骤13后每种处理必需做一式三次，

12.每次重复必需分开进行，以避免干燥过程中由于细菌死亡引起的错误，测试的顺序如下：

a.第1次重复：不点有菌液对照，点有菌液对照，用水洗去所点菌液，用氯化水洗去所点菌液，用FE1洗去所点菌液，用FE2洗去所点菌液各一份样品，

b.第2次重复：不点有菌液对照，点有菌液对照，用水洗去所点菌液，用氯化水洗去所点菌液，用FE1洗去所点菌液，用FE2洗去所点菌液各一份样品，

c.第3次重复：不点有菌液对照，点有菌液对照，用水洗去所点菌液，用氯化水洗去所点菌液，用FE1洗去所点菌液，用FE2洗去所点菌液各一份样品，

13.每次复制后必需立即进行样品细菌计数。

处理叶子方法的例举

1.取100mL磷酸盐缓冲液加入含经过处理的揉碎叶子的胃托袋中直到稀释100倍，

2.胃托袋装入磷酸盐缓冲液后处理叶子30秒，

3.将叶子返回磷酸盐缓冲液中，重复消化另外30秒，

4.胃托袋样品中的缓冲液，通过连续稀释和1ml转移菌铺开接种计数残存细胞，

5.重复步骤1-4做所有的其他处理。

对数减少的估算

M cfu/g=无任何处理叶子上的微生物菌群；

R cfu/g=用水溶液作“水处理”的微生物菌群；

W cfu/g=“水处理”叶子上的微生物菌群

X cfu/g=“X处理”叶子上的微生物菌群

因此“处理X”导致的对数减少=Log(w/x)

用机械方法除去的微生物=R

干燥过程中死亡的微生物=M–W–R

结果

表4.1.40-45°F自来水减少附着于菠菜和长叶莴苣叶上的病原菌对数（三次重复实验的平均值

自来水洗涤去除了叶子上0.3-1.5log₁₀个接种细胞（三次实验平均值）表明没有实现完全去除附着的细菌。这可能是由于环境湿度相对较低（为20-23%而非方案所列的38-48%）导致叶子脱水和枯萎。

表4.2.与自来水洗涤相比，氯化水去除了更高对数值的附着于菠菜和长叶莴苣上的病原菌（三次实验平均值）

10ppm氯化水提供了更高的0.1-log₁₀至1.4-log₁₀病原菌减少。菠菜为2.3-log₁₀与替代的附着细胞结果相比出乎意料地高，如自来水清洗结果所示，可能是细胞没能完全附着于叶子上所致。

表4.3.FE消毒洗涤水40-45°F减少附着于菠菜和长叶莴苣叶子上病原菌的对数值更高(三次重复实验平均值)

测试的FE消毒洗涤水(69ppm过氧乙酸和4800ppm乳酸)与自来水洗涤相比，提供了病原菌的更高的2.1-log₁₀至3.4-log₁₀减少。

与氯化水相比，FE消毒液提供了附着于叶子病原菌更高的2-log₁₀减少。此外，40°F贮存的铺开接种平板表明受伤的细胞在一周内不能在冰箱温度下生长。如果细菌细胞不能在富营养的琼脂平板上生长，它们很可能在经过处理的新鲜产品上也不能生长。

实施例5.这些实验评价了用于洗涤产品时过氧乙酸的消耗或删除。目的是比较消耗600加仑含氯洗涤水，600加仑过氧乙酸洗涤水和600加仑FE消毒洗涤水所需的剁碎长叶莴苣叶用量。

工艺参数和处理

处理：氯化水、过氧乙酸洗涤水和FE消毒洗涤水，

温度38-40°F：停留时间20秒

pH:

氯化水(6.5-7.1)

过氧乙酸洗涤水（6.5-6.8)

FE消毒洗涤水(2.7-3.2)

产品：1.5”x2”方块长叶莴苣叶子

A.消耗600加仑过氧乙酸洗涤水的长叶莴苣叶用量测定

1.对前导生产线系统进行全面消毒。

2.用自来水充满第二水槽，第二贮存池，第二过滤罐。

3.使水在该系统中重循环使用直到系统中的水冷却到40°F。

4.校准该大功率系统并利用该大功率系统监测洗涤水中的PAA浓度，

5.将PAA加入到第二过滤罐中直到达到此工艺的目标限度，

6.通过切片机（translicer）将长叶莴苣叶切成方块，

7.将2”x2”块状长叶莴苣收集到手提袋中，.

8.记录每个袋子的重量然后将长叶莴苣移入第二水槽，

9.收集每箱中的三个未处理袋（1个上部，1个中部和1个底部长叶莴苣叶袋），

10.收集F2末期（1个装箱开始时，1个装箱中间和1个装箱结束时）三个处理长叶莴苣叶袋，

11.将白色袋放在底部漏水处，如需要可使漏出的水返回水槽中，

12.将白色袋放在底部离心出口处以收集叶子离心时排出的液体，如需要可使收集的水返回水槽中，

13.对于箱中的余留水重复步骤‘e’到‘k’，直到FE浓度降低到工艺的最低限度，

14.例举收集样品中的微生物菌群(APC和酵母菌及霉菌)

B.消耗600加仑FE洗涤水的长叶莴苣叶用量测定

1.对前导生产线系统进行全面消毒。

2.用自来水充满第一水槽、第二水槽，第一贮存池、第二贮存池，第一过滤罐、第二过滤罐。

3.使水在该系统中重循环使用直到系统中的水冷却到40°F。

4.打开第一和第二水槽系统的旁路开关，此时水就不会流经过滤系统而是从水槽再循环连续流入相关的贮存池，

5.将化学成分加入到两个水槽中直到达到此工艺的目标限度，

6.将大功率监测系统的探头放在第一水槽(F1)、第一贮存池(R1)、第二水槽(F2)和第二贮存池(R2)验证FE浓度，

7.收集F1和F2的水样品，

8.装配长叶莴苣叶子箱连接垃圾大铁桶，

9.将全部长叶莴苣叶从箱子转移到输送机上，

10.保证F1上面的盖子密封，将切片机的“开/关”旋转到“开”，

11.开动输送机将叶子转运到切片机“开”，

12.保证切碎的长叶莴苣均匀递送到水槽没有聚集和团聚，

13.收集每箱中的三个未处理长叶莴苣叶袋（1个上部，1个中部和1个底部长叶莴苣），

14.收集F2末期（1个装箱开始时，1个装箱中间和1个装箱结束时）三个处理长叶莴苣叶袋，

15.验证装箱前后第一水槽(F1)、第一贮存池(R1)、第二水槽(F2)和第二次贮存池(R2)的pH、温度和FE浓度，

16.将白色袋放在底部漏水处，如需要可使漏出的水返回水槽中，

17.将白色袋放在底部离心出口处以收集叶子离心时排出的液体，如需要可使收集的水返回水槽中

18.对于箱中的余留水重复步骤‘e’到‘o’，直到FE浓度降低到工艺的最低限度，

19.计数收集样品中的微生物菌群(APC和酵母菌及霉菌)

C.测定可能消耗600加仑氯化水的长叶莴苣叶用量低于最佳用量

1.对前导生产线系统进行全面消毒。

2.用自来水充满第一水槽、第二水槽、第一贮存池、第二贮存池、第一过滤罐和第二过滤罐，

3.使水在该系统中重循环使用直到系统中的水冷却到40°F。

4.打开第一和第二水槽系统的旁路开关，此时水就不会流经过滤系统而是从水槽再循环连续流入相关的贮存池，

5.将化学成分加入到两个水槽中直到达到此工艺的目标限度，

6.探测HACH系统的第一水槽(F1)、第一贮存池(R1)、第二水槽(F2)和第二贮存池(R2)验证氯化水的浓度，

7.收集F1和F2的水样品，

8.将装有长叶莴苣叶子的箱连接垃圾大铁桶，

9.将长叶莴苣叶从箱子转移到输送机上，

10.保证F1上面的盖子密封，将切片机的“开/关”旋转到“开”，

11.开动输送机将叶子转运到切片机“开”，

12.保证切碎的长叶莴苣均匀递送到水槽没有聚集和团聚，

13.收集每箱中的三个未处理长叶莴苣叶袋（1个上部，1个中部和1个底部长叶莴苣），

14.收集F2末期（1个装箱开始时，1个装箱中间和1个装箱结束时）三个处理长叶莴苣叶袋，

15.验证装箱前后第一水槽(F1)、第一贮存池(R1)、第二水槽(F2)和第二贮存池(R2)的pH、温度和氯化水浓度，

16.将白色袋放在底部漏水处，如需要可使漏出的水返回水槽中，

17.将白色袋放在底部离心出口处以收集叶子离心时排出的液体，如需要可使收集的水返回水槽中，

18.例举收集样品中的微生物菌群(APC和酵母菌及霉菌)

结果和结论

表5.1.根据产业化规模试验在存在有机物质时消耗过氧乙酸/PA而非乳酸/LA

表5.2.根据产业化规模试验过氧乙酸但无乳酸的洗涤水减少的土著微生物

	需氧菌平板计数
			Log cfu/g
未处理	3.4
		PA洗涤水	2.7
减少对数	0.7

表5.3根据产业化规模试验在存在有机物质时消耗测试的FE消毒洗涤水（过氧乙酸/PA/PAA和乳酸/LA）

表5.4.根据产业化规模试验FE消毒洗涤水减少的土著微生物

	需氧菌平板计数
			Log cfu/g
未处理	5.1
		PA洗涤水	2.5
减少对数	2.6

表5.5.根据产业化规模试验在存在有机物质时消耗的10ppm含氯洗涤水

表5.6.根据产业化规模试验含氯洗涤水减少的土著微生物

	需氧菌平板计数
			Log cfu/g
未处理	5.1

PA洗涤水	3.9
		减少对数	1.2

消耗FE消毒液中的过氧乙酸比不加乳酸的过氧乙酸溶液少5倍(500%)。这表明在相同体积和浓度的过氧乙酸下，测试的FE消毒液比不加乳酸的过氧乙酸消毒液消毒了五倍更多的产品。此外，处理1磅长叶莴苣所需的游离氯磅数是测试FE消毒液的8.5倍(850%)更多，表明每磅测试的FE消毒液比每磅氯化水消毒了8.5倍更多的产品。

73-84ppm过氧乙酸洗涤水，FE消毒洗涤水(59-69ppm PA和2,389-2,724ppm LA)和1.2-7.6ppm的游离氯洗涤水分别减少了0.7、2.6和1.2-log₁₀的土著微生物。虽然在研究中的FE消毒液低于最适下限，但其减少附着于长叶莴苣叶子的土著微生物对数值仍比氯化水和过氧乙酸洗涤水分别高2.2倍和3.7倍。

实施例6.此实施例集中关注该消毒液可应用的各种表面

接种物制备：用10ml灭菌的营养肉汤(NB)使冻干的铜绿假单胞菌(ATCC9027)再成水化物，混合均匀。取0.1mL贮存液转移到10mL的NB中37°C培养24小时。划线培养富集细菌验证纯度。取10ml富含菌的贮存液移入1,000mL的NB中37°C培养24小时。产生~10⁸cfu/mL静止相培养菌贮藏液。将该贮液冷却至4℃1小时。通过用9ml巴特菲尔德磷酸缓冲液连续稀释和在营养琼脂（TSA）预浇的琼脂平板上铺开接种，计数该静止相培养菌贮藏液的微生物菌群。

非食物表面接种：摇动和回荡锥形烧瓶均匀混和1000mL的~10⁸cfu/mL贮存培养菌液。将1000mL培养菌分装入20个离心管（每个50ml），4C、10,000rpm离心15分钟。用50ml的NB重悬贮存培养菌沉淀，合并20个离心管的重悬培养菌成为1,000mL的~10⁸cfu/mL接种贮存培养菌。取15mL铜绿假单胞菌接种贮液和试样非食物表面(2.5cmx5cm)放入灭菌的50mL离心管中37°C培育24小时。24小时后，将该试样移入灭菌的培养皿，置于35℃炉中干燥1小时。将该试样切片置于不锈钢薄片、木片、载玻片和塑料薄片上。

接种后的非食物表面的处理：每个接种的试样取1mL测试液分散涂在2.5cmx2.5cm作了标记的区域内60秒。将预湿的棉花拭子浸渍在含硫代硫酸钠的10ml巴特菲尔德磷酸缓冲液中，接触60秒后擦拭该试样上面的标记区域取菌。将拭子棉花立即放入含硫代硫酸钠的10ml巴特菲尔德磷酸缓冲液中并混和，从上述试管中取1ml立即移入9ml巴特菲尔德磷酸缓冲液中。处理的总时间包括接触时间，取棉花拭子的时间和转移时间共90秒。每种溶液进行一式二份处理。每种处理溶液减少的细菌与用城市水处理作比较。

表6.1PA溶液(100和140ppm)、LA溶液(2500和7500ppm)和FR溶液(2500ppm LA+100ppm PA、2500ppm LA+140ppm PA、7500ppm LA+100ppm PA和7500ppm LA+140ppm PA)减少附着于木片试样上的铜绿假单胞菌(ATCC 9027)的对数值

表6.2PA溶液(60-100ppm)，LA溶液(1250和2500ppm)和FR溶液(1250ppm LA+60ppm PA、1250ppm LA+100ppm PA、2500ppm LA+60ppmPA和2500ppm LA+100ppm PA)减少附着于不锈钢试样上的铜绿假单胞菌(ATCC 9027)的对数值

表6.3PA溶液(60-800ppm)，LA溶液(2500和5000ppm)和FR溶液(2500ppm LA+60ppm PA、2500ppm LA+80ppm PA、5000ppm LA+60ppm PA和5000ppm LA+80ppm PA)减少附着于塑料试样上的铜绿假单胞菌(ATCC9027)的对数值

表6.4PA溶液(60和80ppm)，LA溶液(1250和2500ppm)和FR溶液(1250ppm LA+60ppm PA、1250ppm LA+80ppm PA、2500ppm LA+60ppm PA和2500ppm LA+80ppm PA)减少附着于玻璃试样上的铜绿假单胞菌(ATCC9027)的对数值

本文，不论上文或下文，引用的所有出版物、专利和专利申请的内容纳入本文作参考，其程度与每份出版物、专利或专利申请专门和个别纳入作参考相同。

Claims (26)

1.一种用于清洁消毒非食品物体的水性组合物，其包含：

i）化学式为RC(O)OOH的有机过酸，其中R是甲基、乙基、正-丙基或仲-丙基；

ii）选自酒石酸、柠檬酸、苹果酸、扁桃酸和乳酸的2-羟基有机酸；

其中，所述的水性组合物的pH为2.5-6.0，包含浓度40-250ppm(w/w)的过酸和浓度0.1-1％(w/w)的2-羟基有机酸，上述数值范围均包括端值。

2.如权利要求1所述的组合物，其特征在于，它还包含iii)阴离子表面活性剂。

3.如权利要求1所述的组合物，其特征在于，其中所述过酸是过氧乙酸，所述2-羟基有机酸是L-(+)-乳酸。

4.如权利要求3所述的组合物，其特征在于，该组合物中的过氧乙酸浓度为50-100ppm(w/w)，组合物中的乳酸浓度为0.1％-0.6％(w/w)。

5.如权利要求3所述的组合物，其特征在于，所述组合物中的过氧乙酸浓度为60-80ppm(w/w)，组合物中的乳酸浓度为0.1％-0.4％(w/w)。

6.如权利要求3所述的组合物，其特征在于，其中所述pH为2.5-4.5。

7.如权利要求1所述的组合物，其特征在于，其中所述pH为2.8-3.2。

8.如权利要求1所述的组合物，其特征在于，其中所述pH约为3.0。

9.如权利要求1所述的组合物，其特征在于，该组合物的温度为35°F-45°F。

10.如权利要求1所述的组合物，其特征在于，该组合物基本上没有非离子表面活性剂、阳离子表面活性剂或阴离子表面活性剂。

11.如权利要求1所述的组合物，其特征在于，该组合物是溶液、凝胶剂、泡沫剂或悬浮液。

12.一种处理非食品物体的方法，其特征在于，所述的方法通过使物体表面接触权利要求1-11任何一项所述水性组合物来进行。

13.如权利要求12所述的方法，其特征在于，所述接触的时间至少10秒钟。

14.如权利要求12所述的方法，其特征在于，所述接触的时间10秒至1分钟。

15.如权利要求12所述的方法，其特征在于，其中所述过酸是过氧乙酸，所述2-羟基有机酸是L-(+)-乳酸。

16.如权利要求15所述的方法，其特征在于，所述组合物中的过氧乙酸浓度为50-100ppm(w/w)，组合物中的乳酸浓度为0.1％-0.6％(w/w)。

17.如权利要求15所述的方法，其特征在于，所述组合物中的过氧乙酸浓度为60-80ppm(w/w)，组合物中的乳酸浓度为0.1％-0.4％(w/w)。

18.如权利要求15所述的方法，其特征在于，所述组合物中的过氧乙酸浓度为70-80ppm(w/w)，组合物中的乳酸浓度为0.2-0.4％(w/w)。

19.如权利要求15所述的方法，其特征在于，所述组合物的温度选择室温、环境温度或35°F-85°F。

20.如权利要求15所述的方法，其特征在于，所述组合物的温度选择室温、环境温度或35°F-45°F。

21.如权利要求12所述的方法，其特征在于，所述组合物基本上没有非离子表面活性剂、阳离子表面活性剂或阴离子表面活性剂。

22.如权利要求12所述的方法，其特征在于，其中在所述组合物接触物体期间，为了维持所述pH、过酸或2-羟基有机酸的浓度，作为对检测所述水性组合物的pH、过酸的浓度、氧化还原电势或2-羟基有机酸浓度任一或多种的反应，向所述水性组合物中加入附加量的过酸或2-羟基有机酸。

23.如权利要求12所述的方法，其特征在于，其中，通过将基本上无过氧化氢的2-羟基有机酸组合物加入到过酸组合物中，或通过将过酸组合物加入到基本上无过氧化氢的2-羟基有机酸组合物中，从而形成所述水性组合物。

24.如权利要求12所述的方法，其特征在于，其中将基本上无过氧化氢的2-羟基有机酸和过酸分别加到用于运送或洗涤物体的水性流体中。

25.如权利要求12所述的方法，其特征在于，其中通过杀死物体上或附着于物体的细菌或抑制其生长来对所述的物体进行清洁消毒处理。

26.一种用于清洁消毒非食品物体的试剂盒，所述试剂盒包括：

i)容纳权利要求1-11任何一项所述水性消毒组合物的容器，或容纳浓缩将其稀释可获得权利要求1-11所述的水性消毒组合物浓缩水性组合物的容器。

ii)将所述水性消毒组合物施加到物体上的使用说明书。

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