CN102746064B

CN102746064B - 一种微生物叶面肥及其制备方法与应用

Info

Publication number: CN102746064B
Application number: CN201210240486.7A
Authority: CN
Inventors: 展彬; 李环环; 杨瑞
Original assignee: Dezhou Yuanhe Agricultural Technology Development Co Ltd
Current assignee: Shandong Jintu Ecological Agriculture Technology Co.,Ltd.
Priority date: 2012-07-11
Filing date: 2012-07-11
Publication date: 2014-08-27
Anticipated expiration: 2032-07-11
Also published as: CN102746064A

Abstract

本发明涉及一种微生物叶面肥及其制备方法与应用，每升微生物叶面肥由以下原料混合制得：微生物发酵菌液0.3~0.5L，微量元素溶液0.2~0.3L，K₂SO₄0.05~0.15kg，NH₃H₂PO₄0.05~0.15kg，尿素0.1~0.25kg，酵母发酵粉渣0.05~0.15kg，已酸二乙氨基乙醇酯3~4g，余量水；本发明在叶面肥中添加了具有固氮、解磷、解钾、杀虫作用的多种微生物，有利于提高作物产量、品质、抗病抗虫害。

Description

一种微生物叶面肥及其制备方法与应用

技术领域

本发明涉及一种微生物叶面肥及其制备方法与应用，属于微生物肥料技术领域。

背景技术

植物吸收营养元素的途径主要有两个：根和叶。其中，向除作物根系以外的营养体表面施用肥料的措施叫做根外施肥，也称为叶面施肥。用于叶面施肥的肥料称为叶面肥料。

由于叶面肥料是直接喷施到叶上，不需要通过土壤，因此它有如下特点：(1)肥效高。叶面肥料直接喷施在叶面上，利用率较高，可以减少肥料总用量。(2)养分吸收快，肥效好。不需要通过根系吸收，茎杆运输等漫长的运输过程，叶面施肥可以及时迅速的改善植物营养状况。(3)针对性强。可以根据作物叶片缺素特征，及时喷施补充缺少的元素而改善症状。(4)补充根部对养分吸收的不足。植物生长后期由于根功能衰退，吸收养分能力差，通过施用叶面施肥可以提高产量、改善品质的作用。(5)施用方法简单易行，经济效益显著。

叶面肥料的多种优点使得它在农业中得到了广泛的应用，经过几十年的更新发展，目前已有数百种产品，早期的叶面肥料由于品种比较单一，且大多以无机营养成分为主，增产效果不明显。近来，随着多元叶面肥的生产，肥料类型的更新，叶面肥料的应用取得了很大的进展，增产效果也越来越明显。

中国专利文献CN101935241A(申请号：200910195985.7)公开了一种钾钙生物复合叶面肥,所述的钾钙生物复合叶面肥按重量百分比，该叶面肥由以下组分组成：含菌酵母有机原料：20-40％；硝酸钾：24.5-39.5％；硝酸铵钙:35-45％；氮酮：余量。其中含菌酵母有机原料中，菌的种类为枯草芽孢杆菌和胶冻样芽孢杆菌。

中国专利文献CN101935242A(申请号：200910195987.6)公开了一种生物硼复合叶面肥，所述的生物硼复合叶面肥按重量百分比，该叶面肥由以下组分组成：含菌酵母有机原料：35-55％；四水八硼酸钠：43-62％，氮酮：余量。其中含菌酵母有机原料中，菌的种类为枯草芽孢杆菌和胶冻样芽孢杆菌。

上述专利所述叶面肥对植物的生长有一定的促进作用，但营养不够全面，菌种种类少，在提高作物产量、品质、抗病抗虫害的效果无法满足需求。

发明内容

本发明针对现有技术的不足，提供一种营养全面、防虫抗病的微生物叶面肥及其制备方法与应用。

发明概述

本发明提供了一种微生物叶面肥及其制备方法与应用，该方法是将多种微生物的发酵液与微量元素溶液混匀，加入无机营养成分、植物生长调节剂混合而成，形成一种营养全面的微生物肥料。

发明详述

本发明是通过如下技术方案实现的：

一种微生物叶面肥料，每升微生物叶面肥由以下原料混合制得：

微生物发酵菌液0.3～0.5L，微量元素溶液0.2～0.3L，K₂SO₄0.05～0.15kg，NH₄H₂PO₄0.05～0.15kg，尿素0.1～0.25kg，酵母发酵粉渣0.05～0.15kg，己酸二乙氨基乙醇酯(DA-6)3～4g，余量水；

所述的微生物发酵菌液是由枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)ACCC03120、胶冻样芽孢杆菌(Bacillus mucilaginosus)CICC23640、巨大芽孢杆菌(Bacillus megaterium)CICC21694、苏云金芽孢杆菌(Bacillus thuringiensis)CICC20565、褐球固氮菌(Azotobacter chroococcum)ACCC11104、酿酒酵母(Saccharomyces cerevisiae)CICC1044经发酵制得。

根据本发明优选的，上述微生物发酵菌液每毫升含有：枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)ACCC03120活菌数4～20×10⁷个、胶冻样芽孢杆菌(Bacillus mucilaginosus)CICC23640活菌数3～15×10⁷个、巨大芽孢杆菌(Bacillus megaterium)CICC21694活菌数2～10×10⁷个、苏云金芽孢杆菌(Bacillus thuringiensis)CICC20565活菌数3～15×10⁷个、褐球固氮菌(Azotobacter chroococcum)ACCC11104活菌数2.5～12.5×10⁷个、酿酒酵母(Saccharomycescerevisiae)CICC1044活菌数1.5～7.5×10⁷个。

根据本发明优选的，所述的微量元素溶液每升由如下原料混合配制：

ZnSO₄·7H₂O20～80g，FeSO₄·7H₂O20～40g，MgSO₄·7H₂O80～140g，CuSO₄·7H₂O20～40kg，H₃BO₃20～80g，MnSO₄·H₂O20～40g，螯合剂EDTA5～20g，充分混合反应12～24小时后，过滤。

本发明所述微生物叶面肥中N、P、K总含量达5～25wt％，微量元素含量达1～2wt％，有效活菌数达2～4×10⁸个/mL。

上述枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)ACCC03120、褐球固氮菌(Azotobacter chroococcum)ACCC11104均购自中国农业微生物菌种保藏管理中心。

上述胶冻样芽孢杆菌(Bacillus mucilaginosus)CICC23640、酿酒酵母(Saccharomycescerevisiae)CICC1044、巨大芽孢杆菌(Bacillus megaterium)CICC21694和苏云金芽孢杆菌(Bacillus thuringiensis)CICC20565均购自中国工业微生物菌种保藏管理中心。

酵母发酵粉渣是酵母生产中剩余的残渣，可通过市场购买。优选的，酵母发酵粉渣中有机质含量45～55wt％，钾含量8～15wt％，氮含量3～5wt％。

上述微生物叶面肥料的制备方法，包括如下步骤：

(1)将枯草芽孢杆菌ACCC03120、胶冻样芽孢杆菌CICC23640、巨大芽孢杆菌CICC21694、苏云金芽孢杆菌CICC20565在无菌条件下分别接种于液体种子培养基中，30～37℃条件下培养18～24h，然后按10～20wt％的接种量接种于液体发酵培养基中，在30～37℃培养3～5天；

分别制得含枯草芽孢杆菌ACCC03120活菌数3～8×10⁸个/mL的菌剂A、含胶冻样芽孢杆菌CICC23640活菌数3～8×10⁸个/mL的菌剂B、含巨大芽孢杆菌CICC21694活菌数1～5×10⁸个/mL的菌剂C、含苏云金芽孢杆菌CICC20565活菌数3～8×10⁸个/mL的菌剂D；

(2)将褐球固氮菌ACCC11104接种于液体种子培养基中，在25～30℃条件下液体培养18～24h，然后按10～20wt％的接种量将褐球固氮菌ACCC11104接种于液体发酵培养基中，在25～30℃培养3～5天。制得含有褐球固氮菌ACCC11104活菌数1～5×10⁸个/mL的菌剂E；

(3)将酿酒酵母CICC1044在无菌条件下接种于液体种子培养基中，的25～30℃条件下液体培养48～72h，然后按10～20wt％的接种量将酿酒酵母CICC1044接种于液体发酵培养基中，在25～30℃培养3～5天。制得含有酿酒酵母CICC1044活菌数1～5×10⁸个/mL的菌剂F；

(4)将步骤(1)～(3)制得的菌剂A、菌剂B、菌剂C、菌剂D、菌剂E、和菌剂F按体积比1～5：1～5：1～5：1～5：1～5：1～5的比例混合，制得复合微生物菌剂；

(5)将步骤(4)制得的复合微生物菌剂与微量元素溶液混匀，然后加入K₂SO₄、尿素、酵母发酵粉渣和己酸二乙氨基乙醇酯(DA-6)混匀，加水定容，即得。

根据本发明优选的，所述步骤(1)中的液体种子培养基采用如下原料混合、经灭菌后制得：

酵母膏5g，蛋白胨10g，NaCl10g，加蒸馏水至1000mL，pH7.0～8.0；

根据本发明优选的，所述步骤(1)中的液体发酵培养基采用如下原料混合、经灭菌后制得：

玉米面15～25g，豆浆30～40mL，葡萄糖3～8g，(NH₄)₂SO₄3～7g，KH₂PO₄0.1～0.5g，MnSO₄0.1～0.3g，MgSO₄·7H₂O0.1～0.3g，加水至1000mL，pH7.0～8.0。

根据本发明优选的，所述步骤(2)中的液体种子培养基采用如下原料混合、经灭菌后制得：

葡萄糖20g，K₂HPO₄1g，MgSO₄·7H₂O0.2g，FeSO₄·7H₂O0.25g，Na₂MoO₄·2H₂O0.5g，CaCO₃0.5g，加水至1000mL，pH7.0～7.5。

根据本发明优选的，所述步骤(2)中的液体发酵培养基采用如下原料混合、经灭菌后制得：

蔗糖15～20g，MgSO₄·7H₂O0.2～0.5g，K₂HPO₄0.2～0.5g，NaCl0.2～0.5g，CaCl₂·2H₂O0.05～0.1g，酵母膏2～5g，微量元素液2～3滴，加水至1000mL，pH7.0～7.5；

上述微量元素液组分如下：

Na₂MoO₄·2H₂O5g，H₃BO₃5g，蒸馏水定容至1000mL。

根据本发明优选的，所述步骤(3)中的液体种子培养基采用如下原料混合、经灭菌后制得：

5°Bé麦芽汁1000mL；

根据本发明优选的，所述步骤(3)中的液体发酵培养基采用如下原料混合、经灭菌后制得：

蔗糖30～50g，可溶性淀粉1～3g，酵母粉30～50g，蛋白胨8～15g，NaCl3～8g，加水至1000mL，pH6.5～7.0。

根据本发明优选的，所述步骤(5)中的微量元素溶液按如下方法配制：

向50L的水中加入ZnSO₄·7H₂O1～4kg，FeSO₄·7H₂O1～2kg，MgSO₄·7H₂O4～7kg，CuSO₄·7H₂O1～2kg，H₃BO₃1～4kg，MnSO₄·H₂O1～2kg，螯合剂EDTA0.25～1kg，充分混合反应12～24小时后，过滤。

上述微生物叶面肥在农作物种植中的应用。

上述应用，步骤如下：将微生物叶面肥按每亩施用100mL的量兑水300～400倍后，喷施于农作物叶面，即可。本发明所述微生物叶面肥可根据作物生长需要在各个时期喷施。

有益效果

1、本发明所述微生物叶面肥料含多种微量元素，具有增强细胞活性、促进生根壮根、促进光合作用、增加叶绿素含量等多种功能；

2、本发明在叶面肥中添加了具有固氮、解磷、解钾、杀虫作用的多种微生物，有利于提高作物产量、品质、抗病抗虫害；

3、杀虫、施肥一次完成，即减少了虫害的发生，又提高了作物的品质和产量；

4、含有植物生长调节剂，可促进养分的吸收和转化；

5、本发明制备工艺简单，生产过程不需要大型设备，生产成本低，对环境污染低。

具体实施方法

下面结合实施例对本发明做进一步阐述，但本发明所保护范围不限于此。

实施例中枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)ACCC03120、褐球固氮菌(Azotobacterchroococcum)ACCC11104均购自中国农业微生物菌种保藏管理中心。

实施例中胶冻样芽孢杆菌(Bacillus mucilaginosus)CICC23640、酿酒酵母(Saccharomycescerevisiae)CICC1044、巨大芽孢杆菌(Bacillus megaterium)CICC21694和苏云金芽孢杆菌(Bacillus thuringiensis)CICC20565均购自中国工业微生物菌种保藏管理中心。

实施例中所述酵母发酵粉渣购自安琪酵母公司，有机质含量约50wt％，钾含量约10wt％，氮含量约4wt％，另外还含有氮、氨基酸、维生素、菌体蛋白等营养成份。

己酸二乙氨基乙醇酯(DA-6)购自郑州农达生化集团公司；乙二胺四乙酸(EDTA)购自天津市恒兴化学试剂制造有限公司。

实施例中所述培养基的原料均为本领域常用市售产品，配制方法按本领域现有技术制备；实施例中所用其他化学试剂均为常用市售产品。

实施例1

一种微生物叶面肥料的制备方法，包括如下步骤：

(1)将枯草芽孢杆菌ACCC03120、胶冻样芽孢杆菌CICC23640、巨大芽孢杆菌CICC21694、苏云金芽孢杆菌CICC20565在无菌条件下分别接种于液体种子培养基中，30℃条件下培养24h，然后按10wt％的接种量接种于液体发酵培养基中，在30℃培养3天；

分别制得含枯草芽孢杆菌ACCC03120活菌数8×10⁸个/mL的菌剂A、含胶冻样芽孢杆菌CICC23640活菌数6×10⁸个/mL的菌剂B、含巨大芽孢杆菌CICC21694活菌数4×10⁸个/mL的菌剂C、含苏云金芽孢杆菌CICC20565活菌数6×10⁸个/mL的菌剂D；

所述步骤(1)中的种子培养基采用如下原料混合、经灭菌后制得：

酵母膏5g，蛋白胨10g，NaCl10g，加蒸馏水至1000mL，pH7.0；

所述步骤(1)中的液体发酵培养基采用如下原料混合、经灭菌后制得：

玉米面20g，豆浆40mL，葡萄糖5g，(NH₄)₂SO₄5g，KH₂PO₄0.3g，MnSO₄0.2g，MgSO₄·7H₂O0.2g，加水至1000mL，pH7.0。

(2)将褐球固氮菌ACCC11104接种于液体种子培养基中，在28℃条件下液体培养24h，然后按10wt％的接种量将褐球固氮菌ACCC11104接种于液体发酵培养基中，在28℃培养3天。制得含有褐球固氮菌ACCC11104活菌数5×10⁸个/mL的菌剂E；

根据本发明优选的，所述步骤(2)中的种子培养基采用如下原料混合、经灭菌后制得：

葡萄糖20g，K₂HPO₄1g，MgSO₄·7H₂O0.2g，FeSO₄·7H₂O0.25g，Na₂MoO₄·2H₂O0.5g，CaCO₃0.5g，加水至1000mL，pH7.2。

蔗糖15g，MgSO₄·7H₂O0.2g，K₂HPO₄0.2g，NaCl0.2g，CaCl₂·2H₂O0.05g，酵母膏2g，微量元素液2滴，加水至1000mL，pH7.2；

上述微量元素液组分如下：

Na₂MoO₄·2H₂O5g，H₃BO₃5g，蒸馏水定容至1000mL。

(3)将酿酒酵母CICC1044在无菌条件下接种于液体种子培养基中，的30℃条件下液体培养48h，然后按15wt％的接种量将酿酒酵母CICC1044菌接种于液体发酵培养基中，在30℃培养4天。制得含有酿酒酵母CICC1044活菌数3×10⁸个/mL的菌剂F；

5°Bé麦芽汁1000mL，琼脂20g；

蔗糖40g，可溶性淀粉2g，酵母粉40g，蛋白胨10g，NaCl5g，pH7.0。

(4)将步骤(1)～(3)制得的菌剂A、菌剂B、菌剂C、菌剂D、菌剂E、和菌剂F按体积比2：1：1：2：3：1的比例混合，制得活菌数为5.6×10⁸个/mL复合微生物菌剂；

其中：枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)ACCC03120活菌数16×10⁷个/mL、胶冻样芽孢杆菌(Bacillus mucilaginosus)CICC23640活菌数6×10⁷个/mL、巨大芽孢杆菌(Bacillusmegaterium)CICC21694活菌数4×10⁷个/mL、苏云金芽孢杆菌(Bacillus thuringiensis)CICC20565活菌数12×10⁷个/mL、褐球固氮菌(Azotobacter chroococcum)ACCC11104活菌数15×10⁷个/mL、酿酒酵母(Saccharomyces cerevisiae)CICC1044活菌数3×10⁷个/mL。

(5)将步骤(4)制得的微生物发酵菌液100L与微量元素溶液50L混匀，然后加入K₂SO₄15kg，NH₄H₂PO₄10g，尿素20kg，酵母发酵粉渣10kg，己酸二乙氨基乙醇酯(DA-6)0.8kg，混匀，加水至200L，即得微生物叶面肥料；

上述微量元素溶液按如下方法配制：

向50L的水中加入ZnSO₄·7H₂O2.3kg，FeSO₄·7H₂O1.2kg，MgSO₄·7H₂O5.6kg，CuSO₄·7H₂O1.2kg，H₃BO₃2.3kg，MnSO₄·H₂O1.2kg，螯合剂EDTA0.5kg，充分混合反应24小时后，过滤。

经检测，微生物叶面肥料中N、P、K总含量达10wt％，微量元素大于1wt％，有效活菌数达2.8×10⁸个/mL。

实施例2

如实施例1所述的制备方法制得的微生物叶面肥料，不同之处在于，步骤(4)中，将制得的菌剂A、菌剂B、菌剂C、菌剂D、菌剂E和菌剂F按体积比1﹕1﹕2﹕2﹕2﹕2的比例混合，制得复合微生物菌剂，总菌数为5×10⁸个/mL。

其中：枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)ACCC03120活菌数8×10⁷个/mL、胶冻样芽孢杆菌(Bacillus mucilaginosus)CICC23640活菌数6×10⁷个/mL、巨大芽孢杆菌(Bacillusmegaterium)CICC21694活菌数8×10⁷个/mL、苏云金芽孢杆菌(Bacillus thuringiensis)CICC20565活菌数12×10⁷个/mL、褐球固氮菌(Azotobacter chroococcum)ACCC11104活菌数10×10⁷个/mL、酿酒酵母(Saccharomyces cerevisiae)CICC1044活菌数6×10⁷个/mL。

实施例3

如实施例1所述的制备方法制得的微生物叶面肥料，不同之处在于，将实施例2制得的微生物发酵菌液100L与实施例1中微量元素溶液50L混合均匀，加入K₂SO₄15kg，NH₄H₂PO₄15kg，尿素25kg，酵母发酵粉渣20kg，己酸二乙氨基乙醇酯(DA-6)0.8kg，混匀，加水至200L，即得微生物叶面肥料。

经检测，微生物叶面肥料中N、P、K总含量达15wt％，微量元素大于1wt％，有效活菌数达2.5×10⁸个/mL。

实施例4

如实施例1所述的制备方法制得的微生物叶面肥料，不同之处在于，步骤(5)中将步骤(4)制得的微生物发酵菌液90L与微量元素溶液50L混合均匀，加入K₂SO₄15kg，NH₄H₂PO₄25kg，尿素40kg，酵母发酵粉渣10kg，己酸二乙氨基乙醇酯0.8kg，混匀，加水至200L，即得微生物叶面肥料。

经检测，微生物叶面肥料中N、P、K总含量达20wt％，微量元素大于1wt％，有效活菌数达2.5×10⁸个/mL。

试验例

微生物叶面肥对农作物品质提升实验：

试验品种：西瓜(京欣一号)

试验方法：采用随机区组法，每组面积100m²，设5个重复组，按500mL/亩的量施用叶面肥料，施用方法为：将微生物叶面肥100mL与40L的水混匀后，喷施于作物叶面，叶面肥料采用上述实施例1和实施例3制得的微生物叶面肥。分别标记为处理组1和处理组2。

按100mL/亩的量施用量施用叶面肥料，施用方法为：将微生物叶面肥500mL与150L的水混匀后，喷施于作物叶面，叶面肥料采用专利CN101935241A、CN101935242A中实施例1的叶面肥料，分别标记为处理组3和处理组4。

按40L/亩的量喷施水于作物叶面作为对照组。

上述组别，除所施叶面肥料不同，其他管理均相同。

待西瓜成熟后，测定单个西瓜重量，计算平均单果重量。并用水果糖度测定仪测定西瓜糖度，计算平均糖度。检测结果如下：

表1不同处理对西瓜糖度的影响

处理	对照组	处理组1	处理组2	处理组3	处理组4
						糖度(Birx)	12.4	14.1	13.9	13.3	13.5
糖度增加(Birx)		1.7	1.5	0.9	1.1

表2不同处理对西瓜产量的影响

处理	对照组	处理组1	处理组2	处理组3	处理组4
						单果重量(kg)	4.21	4.85	4.95	4.65	4.60
增产(％)		15.2％	17.6％	10.5％	9.3％

结果分析：

由表1和表2中可看出，施用叶面肥对西瓜的生长具有显著的促进作用，能显著提高西瓜的产量和品质。其中，施用本发明叶面肥的西瓜糖度比未施用叶面肥提高1.5度左右，施用专利CN101935241A、CN101935242A中所述叶面肥糖度比未施用叶面肥提高1度左右；施用本发明叶面肥的西瓜产量比未施用叶面肥的西瓜增产15％以上，比施用专利CN101935241A、CN101935242A中所述叶面肥增产10％左右。说明本发明叶面肥作用效果优CN101935241A、CN101935242A中所述叶面肥。

微生物叶面肥在农作物种植中防虫效果实验

试验品种：北京四季小白菜

试验方法同上。

采用棋盘式取样方法，记载每小区虫害株数，按下列公式计算防治效果：

防治效果(％)＝(对照区虫害株数-处理区虫害株数)/对照区虫害株数×100％

检测结果：

表3不同处理对虫害防治效果的影响

处理	处理组1	处理组2	处理组3	处理组4
					防治效果(％)	81％	83％	61％	58％

结果分析：

由表3中可以看出，施用叶面肥能减少虫害的发生。其中，施用本发明叶面肥对虫害的防治效果高于专利CN101935241A、CN101935242A中实施例1中所述叶面肥。本发明叶面肥的虫害的防治效果在80％以上，而CN101935241A、CN101935242A中实施例1中所述叶面肥的防治效果只有60％左右。说明本发明叶面肥作用效果优于CN101935241A、CN101935242A中所述叶面肥。

Claims

1.一种微生物叶面肥料，每升微生物叶面肥由以下原料混合制得：

微生物发酵菌液0.3~0.5L，微量元素溶液0.2~0.3 L，K₂SO₄0.05~0.15kg，NH₄H₂PO₄0.05~0.15kg，尿素0.1~0.25kg，酵母发酵粉渣0.05~0.15kg，己酸二乙氨基乙醇酯3~4g，余量水；

所述的微生物发酵菌液是由枯草芽孢杆菌（Bacillus subtilis）ACCC03120、胶冻样芽孢杆菌（Bacillus mucilaginosus）CICC23640、巨大芽孢杆菌（Bacillus megaterium）CICC21694、苏云金芽孢杆菌（Bacillus thuringiensis）CICC20565、褐球固氮菌（Azotobacter chroococcum）ACCC11104、酿酒酵母（Saccharomyces cerevisiae）CICC1044经发酵制得；

所述微生物发酵菌液每毫升含有：枯草芽孢杆菌（Bacillus subtilis）ACCC03120活菌数4～20×10⁷个、胶冻样芽孢杆菌（Bacillus mucilaginosus）CICC23640活菌数3～15×10⁷个、巨大芽孢杆菌（Bacillus megaterium）CICC21694活菌数2～10×10⁷个、苏云金芽孢杆菌（Bacillus thuringiensis）CICC20565活菌数3～15×10⁷个、褐球固氮菌（Azotobacter chroococcum）ACCC11104活菌数2.5～12.5×10⁷个、酿酒酵母（Saccharomyces cerevisiae）CICC1044活菌数1.5～7.5×10⁷个。

2.如权利要求1所述的微生物叶面肥料，其特征在于，所述的微量元素溶液每升由如下原料混合配制：

ZnSO₄·7H₂O 20~80g，FeSO₄·7H₂O 20~40g，MgSO₄·7H₂O 80~140g，CuSO₄·7H₂O 20~40kg，H₃BO₃ 20~80g，MnSO₄·H₂O 20~40g，螯合剂EDTA 5~20g，充分混合反应12~24小时后，过滤。

3. 如权利要求1所述的微生物叶面肥料，其特征在于，所述酵母发酵粉渣中有机质含量45～55wt%，钾含量8～15wt%，氮含量3～5wt%。

4. 权利要求1所述微生物叶面肥料的制备方法，包括如下步骤：

（1）将枯草芽孢杆菌ACCC03120、胶冻样芽孢杆菌CICC23640、巨大芽孢杆菌CICC21694、苏云金芽孢杆菌CICC20565在无菌条件下分别接种于液体种子培养基中，30~37℃条件下培养18~24h，然后按10~20wt%的接种量接种于液体发酵培养基中，在30～37℃培养3~5天；

分别制得含枯草芽孢杆菌ACCC03120活菌数3～8×10⁸个/mL的菌剂A 、含胶冻样芽孢杆菌CICC23640活菌数3～8×10⁸个/mL的菌剂B、含巨大芽孢杆菌CICC21694活菌数1～5×10⁸个/mL的菌剂C、含苏云金芽孢杆菌CICC20565活菌数3～8×10⁸个/mL的菌剂D；

（2）将褐球固氮菌ACCC11104 接种于液体种子培养基中，在25～30℃条件下液体培养18～24h，然后按10~20wt%的接种量将褐球固氮菌ACCC11104接种于液体发酵培养基中，在25～30℃培养3~5天，制得含有褐球固氮菌ACCC11104 活菌数1～5×10⁸个/mL的菌剂E；

（3）将酿酒酵母CICC1044在无菌条件下接种于液体种子培养基中，在25~30℃条件下液体培养48~72h，然后按10~20wt%的接种量将酿酒酵母CICC1044接种于液体发酵培养基中，在25～30℃培养3~5天，制得含有酿酒酵母CICC1044活菌数1～5×10⁸个/mL的菌剂F；

（4）将步骤（1）～（3）制得的菌剂A、菌剂B、菌剂C、菌剂D、菌剂E和菌剂F按体积比1~5：1~5：1~5：1~5：1~5：1~5的比例混合，制得复合微生物菌剂；

（5）将步骤（4）制得的复合微生物菌剂与微量元素溶液混匀，然后加入K₂SO₄、NH₄H₂PO₄、尿素、酵母发酵粉渣和己酸二乙氨基乙醇酯混匀，加水定容，即得。

5. 如权利要求4所述的制备方法，其特征在于，所述步骤（1）中的液体种子培养基采用如下原料混合、经灭菌后制得：

酵母膏 5g，蛋白胨 10g，NaCl 10g，加蒸馏水至1000mL，pH 7.0~8.0；

所述步骤（1）中的液体发酵培养基采用如下原料混合、经灭菌后制得：

玉米面15~25g，豆浆30~40mL，葡萄糖3~8g，(NH₄)₂SO₄3~7g，KH₂PO₄0.1~0.5g，MnSO₄0.1~0.3g，MgSO₄·7H₂O 0.1~0.3g，加水至1000mL，pH 7.0~8.0。

6. 如权利要求4所述的制备方法，其特征在于，所述步骤（2）中的液体种子培养基采用如下原料混合、经灭菌后制得：

葡萄糖 20g，K₂HPO₄1g，MgSO₄·7H₂O 0.2g，FeSO₄·7H₂O 0.25g，Na₂MoO₄·2H₂O 0.5g，CaCO₃0.5g，加水至1000mL，pH7.0~7.5；

所述步骤（2）中的液体发酵培养基采用如下原料混合、经灭菌后制得：

蔗糖15~20g，MgSO₄·7H₂O 0.2~0.5g ，K₂HPO₄ 0.2~0.5g，NaCl 0.2~0.5g，CaCl₂·2H₂O 0.05~0.1g，酵母膏2~5g，微量元素液2~3滴，加水至1000mL，pH7.0~7.5；

上述微量元素液组分如下：

Na₂MoO₄·2H₂O 5g，H₃BO₃ 5g，蒸馏水定容至1000mL。

7. 如权利要求4所述的制备方法，其特征在于，所述步骤（3）中的液体种子培养基采用如下原料混合、经灭菌后制得：

5°Bé麦芽汁1000mL；

所述步骤（3）中的液体发酵培养基采用如下原料混合、经灭菌后制得：

蔗糖30~50g，可溶性淀粉1~3g，酵母粉30~50g，蛋白胨8~15g，NaCl 3~8g，加水至1000mL，pH 6.5~7.0。

8. 如权利要求4所述的制备方法，其特征在于，所述步骤（5）中的微量元素溶液按如下方法配制：

向50L的水中加入ZnSO₄·7H₂O 1~4kg，FeSO₄·7H₂O 1~2kg，MgSO₄·7H₂O 4~7kg，CuSO₄·7H₂O 1~2kg，H₃BO₃ 1~4kg，MnSO₄·H₂O 1~2kg，螯合剂EDTA 0.25~1kg，充分混合反应12~24小时后，过滤。

9.权利要求1所述微生物叶面肥在农作物种植中的应用，步骤如下：将微生物叶面肥按每亩施用100mL的量兑水300~400倍后，喷施于农作物叶面，即可。