CN102727677B - 新复方阿胶浸膏粉配方及其制备和应用 - Google Patents

Abstract

本发明是一种新复方阿胶浸膏粉，可口服和外用，是由以下重量份的生药原料制成：阿胶10-45份，党参为0份或6-35份,黄芪为0份或6-35份，丹参5-24份，猪苓6-24份，茯苓6-22份，赤芍5-25份,蒲黄3-22份；其中，黄芪和党参不同时为0份。本发明将原有技术发挥不易复发的功底时效加长了，药效给力更牢固。且口服改良型处方浸膏对兔油酸所致的肺损伤有保护作用，而处方简化、工艺简便，能源节约，社会经济效益提高，使原有技术本来就具有的国际首创水平更上了一层。

Description

新复方阿胶浸膏粉配方及其制备和应用

技术领域

本发明涉及中药领域，具体是涉及一种新复方阿胶中药浸膏及其制备方法和应用，包括口服或外用两种用法的中药处方。

背景技术

一，国内外研究最新动态：

进入21世纪后，妇女下生殖道感染发病率依然逐年在上升，有如伤风感冒一样普遍。女性生殖道感染的流行病学、病原体的研究方面，以及对衣原体、支原体感染的研究，早已引起世界广泛重视。尤其支原体、衣原体已成为近年来逐渐上升的性传播疾病的病原体。它们侵犯宫颈和阴道，引起糜烂出血和脓性分泌物，尤其可导致宫颈黏膜增生和息肉，增加宫颈赘生物和癌变的危险性，有宫颈息肉的衣原体感染，阳性率高达62.5％。又由于衣原体和支原体感染往往与真菌、滴虫、淋球菌、尖锐湿疣、人类乳突状瘤、疱疹病毒等同时感染，有人将有宫颈糜烂的与无宫颈糜烂的相比，发现癌患病率要高10倍以上，由此得知，宫颈糜烂与宫颈癌在发病关系上，有其特殊内在的密切联系，又文献报道，从宫颈炎到息肉，通过HPV（人乳头状瘤病毒）PCR法检测，发现其阳性率亦越来越高，说明支原体和衣原体和人乳头状瘤病毒感染是正相关。又，在各种护理冲洗液风靡一时之后，发现天天用阴道冲洗液冲洗、甚至冲洗好几次，反而生殖道比没用冲洗以前，更容易发生炎症，更容易引起反复发作，这是由于经常常规用消毒药液冲洗阴道，反而破坏了阴道正常的保护性菌群，导致菌群失调，削弱了阴道原有的自洁作用所致，同时又因使用洗液后，无法正确判断致病菌；而市场有出售的一种可让病人在家自行应用的阴道冲洗器，因不是一次性的，反而容易因器械污染，而带来医原性感染，给医生诊治带来难度，常常因此反而延误了病情。至于引进国外利普刀设备技术、奥洛克妇科微创宫颈修复系统，虽然效果好，对宫颈表面损伤性比使用微波或激光、电灼方法要小，较少出现出血，不留疤痕等损伤后遗症，且修复均匀，被称“消融刀之母”，但费用太昂贵，且仍易复发，尤其依然不能解决的问题是：凡下生殖道有细菌和霉菌同时复合感染的患者，在使用一切仪器创伤性疗法前，仍然都须严格遵守原来国际规定的原则，即要先常规彻底治愈阴道霉菌病，达到三个疗程（每个疗程一个月，连续化验霉菌三次阴性）三个疗程化验总共9次，皆为阴性，才算治愈，然后，才能考虑对宫颈炎进行微创手术治疗操作。一旦违反程序，没有先将霉菌彻底治愈，而冒然动用器械对宫颈手术，必定导致手术创面严重复合感染的后患，成为极难以解决的医疗过失。

至于盆腔炎，慢性者更是涉及全身整体性的顽症，它既容易再次反复急性发作，况且如果是衣原体、支原体所致的慢性盆腔炎，整个机体就更容易产生细胞介导的过度免疫反应，则使发病机理更加复杂。近年来，由于性开放引起性病、流产感染、带环避孕致生殖道上行感染，发病率急剧上升、治疗又不彻底而反复发作，致使急、慢性盆腔炎继发不孕症的发病率也明显增加，成为当今世界性难题。

当前的治疗，应用中西医结合，全方位三联递进疗法，包括内服或肌注、静滴、阴道消毒液灌洗、灌肠加离子导入、腹部外敷、多功能盆腔治疗仪、微波治疗仪、光谱治疗仪、雾化仪、WR100型腔内仪、西药抗生素制剂局部阴道给药或全身性应用等方法五花八门。其中中成药方面，市场药种类繁多，而功能主治几乎处于同类，皆只局限于清热解毒、消炎祛湿、活血化瘀范围内的“翻新花样”，虽然有效，遗憾仍然容易不彻底并易复发；至于中药灌肠给药，虽然给药部位靠上、下生殖道最近，而且用药剂量比阴道给药大得多，遗憾为什么近期疗效并不理想，不能彻底，还容易复发？发明人通过了长期临床观察，发现这和以下四点有一定关系：一是临床西医西药，是不考虑《络学》概念的；二，即使中西医结合，会用中药灌肠法，甚至已经用了循经中药，但给药部位，却并没能遵循药物归经的传统思路，药物并没走在相匹配的经络路线上；三，采用的中药没有考虑遵循脉气是否最终主要集中到达盆腔生殖器官和下生殖道；四，用的药味能否同时提高整体性自我双向生理性动态调节平衡的能力，更好地发挥“行（全身）气血，营（一身）阴阳”的优越效果。

发明人1988年2月6日申请了专利《整脉口服液的配方与工艺流程》(专利号8815365.1)，公开了一种整脉口服液的配方和制备方法，该整脉口服液处方包括阿胶等十味中药，能有效治疗弥漫性血管渗漏综合症，其中包括口服治疗盆腔炎能彻底治愈，故1990年又从临床发展到将中药浸膏粉阴道途径给药，治疗阴道、宫颈炎和急慢性盆腔炎，发现更有创新特色。2001年希望将原老发明处方浸膏粉，通过协作，开发成阴道给药的制型，结果，遗憾未成。

中国专利申请200510025337.9《一种治疗盆腔炎的外用药物制剂》在8815365.1专利基础上公开了一剂种治疗盆腔炎的中药复方外用制剂（泡腾片和栓剂），其处方的原料药药味与8815365.1专利相同，仍是用该原中药外用处方的浸膏粉，通过阴道途径给药，来进行动物实验而得到有疗效的结果的，因为，实际上该申请的泡腾片和栓剂在动物实验阴道给药时，皆存在刺激性，该不足之处，泡腾片已在此药的临床《临床试验批件》中指明，且《批件》早已超过规定三年内实施时限，而废止。至于栓剂，早在动物实验时，发现又出现一样结果（注：即阴道又出现溃疡，有病理片保存为证），故该专利的栓剂，并没再申报国家新药。因此，200510025337.9的中药复方外用制剂（泡腾片和栓剂）并不能在临床中使用，没有实用性。

发明内容

本发明的目的是提供一种新复方阿胶浸膏粉，该浸膏粉既可直接作为临床散剂外用，也可作为口服冲剂或阴道给药等剂型的半成品。

本发明浸膏粉特征在于由以下重量份的中药生药原料制成：阿胶（或不同动物体内不同部位的结缔组织胶原成分所制得的胶质，包括肠系膜、骨、筋膜韧带等）10-45份，党参(或人参或太子参等等其他补气药)为0份或6-35份,黄芪为0份或6-35份，丹参5-24份，猪苓6-24份，茯苓6-22份，赤芍5-25份，蒲黄3-22份；其中，黄芪和党参不同时为0份，如果互相搭配同时应用,其各自剂量的范围，依然在以上单味黄芪的端值6-35份范围内。其中所用蒲黄可以是生和炒二者混合的。

本发明散剂,临床可直接口服或外用。

本发明是一种原料药的纯浸膏粉,亦可为制剂的中间体，加赋形剂制备成不同新剂型。

本发明的浸膏粉可以通过外用和口服给药。通过临床和实验已知本新复方阿胶浸膏粉口服可作为治疗多种疾病的有效药物，例如，首创作为肺损伤等疾病以防细胞膜和血管渗漏的药物应用，或作为妇科治疗急慢性盆腔炎药物的应用，既可口服，又可根据情况，通过阴道途径给药。临床亦可作为外用治疗皮肤溃疡（尤其糖尿病并发顽固老烂腿）、烫伤、烧伤、外伤出血药物的应用。

本发明的新复方阿胶浸膏粉还可作为治疗口腔溃疡膜型制剂的中间体。

本发明还提供了将浸膏粉作为有效药效成分和赋形剂制备新制剂的中间体。

本发明所说的新复方阿胶浸膏粉，通过以下两步骤制备：

（1）植物药制备：将茯苓单独洗净打成碎块，然后混入生药原料丹参、猪苓、赤芍、党参或/和黄芪；一起加水浸泡，再和纱布包好的蒲黄合并、包煎，先用猛火煮沸后，再文火煎煮3-4次，煎液静置自然沉淀，杂质弃之，再过滤；将滤液浓缩、干燥成块状的草药浸膏，待备用；也可将稠膏直接真空干燥或喷雾干燥，粉碎过筛后备用；

（2）将阿胶块用体积分数75%的酒精擦干净块面，打碎，在室温5℃以下的干燥条件下,将其研磨成粉末，然后和步骤（1）中已经粉碎好的草药浸膏粉，二者均匀混合成为干浸膏细粉（或直接将阿胶块和尚未粉碎好的块状草药浸膏,一起研磨成粉末）；在低温干燥环境条件下,过筛，低温臭氧等严格消毒，冷藏，制得新复方阿胶浸膏粉。

本新复方阿胶浸膏粉，临床外用称散剂，可作为治疗口腔溃疡膜型制剂的中间体；也可将其作为发展成其它各种制备新制剂的中间体之用。

本专利中药处方，其中阿胶为正宗驴皮胶。阿胶也可由其它哺乳动物的皮（如猪、牛、羊等皮代替）制成的胶质替代。凡以新鲜的动物结缔组织胶原为原料提炼的胶质，包括肠系膜、骨、肌筋膜韧带等为原料成分所制的动物胶，来与本中药方中的中草药相类似功能的中草药配方，可制得与本发明功能相似的浸膏。

本方中的蒲黄，可以是生与炒二者的混合应用，方中也可加入或以当归、三七、槐花、大、小蓟、茜草、地榆、苎麻根等药物，经性味寒温合理搭配，辨证论治，而代之。至于本处方草药中的丹参，猪苓、茯苓、赤芍、蒲黄五味，都可由同样可达到活血化瘀、防渗漏和改善并稳定免疫机能、凉血、利尿功效的其他中草药，辨证论治来代替，包括桃仁、红花、益母草、牛膝等另加入或代替。

（2），有关90年代临床用〈本新发明〉浸膏粉阴道给药，治疗各型各度宫颈感染炎症并伴有阴道炎的共74例（在江苏溧水县医院、浙江温州和瑞安医院验证），列表于下:

S*该Ⅲ度炎症的14例中有1例，用药20天共3-4次，仅为好转，并未彻底,故继续另用激光或微波一次后，同样随即阴道穹隆部填塞<本新发明>浸膏粉，只用一次，同样达到避免术后30天的阴道再淌臭水的效果而治愈，不易再复发。

本新发明超越当今国内外治疗妇科生殖道炎症药物的临床特色是：一，由于本发明不是妇科微创手术，故对有下生殖道合并霉菌感染的宫颈炎患者，可直接用<本发明>浸膏粉（临床称散剂）治疗，不存在因细菌和霉菌两种微生物同时存在时，必须先对霉菌感染进行三个疗程的彻底治疗，然后再用本药。一般中度宫颈炎，用本新药5天后复查宫颈创面，就能在原来柱状上皮脱落部位，可见到新生的鳞状上皮再生（regeneration），逐渐由宫颈外围向内包绕覆盖,一般3周即可治愈。二，对上下生殖道炎症皆可防治兼顾，既可避免复发又避免再上行感染，且不产生耐药和菌群失调，既防又治，能独特避免微创术后30天的阴道再淌臭分泌物，且更廉价的六点特色；三，据临床观察，凡重度合并息肉或肥大的宫颈炎症而糜烂者，其中约仅有9%，用本浸膏粉20天,共3-4次后，并未彻底治愈者，则在检测证明却无霉菌感染的情况下，即可加用一次微创手术，随即在阴道穹隆部填塞<本新发明>散剂，不但同时可立即制止创面再出血感染，且生肌疗程明显缩短，尤其是能完全避免了物理疗法后，原来普遍要出现近30天时间的阴道不停地排臭液现象；也不必先要用价值昂贵进口货《爱宝疗浓缩液》来填塞，也不必还要再应用预防性抗生素和止血药，还能不易复发；四，用本中药阴道给药，比肛门灌其它中药的剂量既小又效果大为显著，这是因本用法的机理，根本完全是另外一条独特的中西医都是创新之路，且临床实践已证明效果比中药灌肠明显提高；另外，阴道途径用药，也可避免合并有慢性胃病者，在大剂量反复长期用口服药后，除对胃黏膜可能产生额外负担外，更可避免长期应用西药抗生素会引起菌群失调等。五，由于本新发明不仅保持原有技术在临床上已经存在的以上所提过的6项特色之外，而且本新发明浸膏的动物实验，又证明它比原有技术的药理更有特色。六，减去原有技术处方中川芎和白茅花，简化了须要另制备的工艺流程，能源节约，临床疗效不减。七，本发明的药方比<原有技术>的药性趋向平和，临床实践已证明,对中医临床偏寒证者，也可应用，故临床中医辨证施治的适应范围扩大了。八，散剂既可用推进器方法应用，也可直接用于其他局部外用，当然也可开发成制剂。九,本新发明既然不仅已将〈原有技术〉中的外用和口服不同药味的剂量，改进成既可外用又可口服的同一处方了，故节约了开发新药经费、人力及程序；另外，本专利又一并公布了关于本新发明口服治疗肺损伤的的动物实验研究结果，证明和原有技术口服一样有特效。

具体实施方式

本发明中所述<原有技术>是指专利号ZL8815365.1的处方。

实施例一复方阿胶浸膏粉的制备方法

根据阴阳气血及按湿热病症轻重不同差异，准备原料药的下列不同比例搭配：

处方一：阿胶45份，黄芪35份，党参12份；丹参24份，猪苓24份，茯苓22份，赤芍25份，蒲黄3份。

处方二：阿胶30份，黄芪0份，党参35份；丹参15份，猪苓6份，茯苓18份，赤芍15份，蒲黄15份。

处方三：阿胶22份，黄芪22份，党参0份；丹参18份，猪苓16份，茯苓12份，赤芍17份，蒲黄12份。

处方四：阿胶20份，黄芪10份，党参0份；丹参8份，猪苓8份，茯苓6份，赤芍8份，蒲黄6份。

处方五：阿胶10份，黄芪6份，党参6份；丹参5份，猪苓15份，茯苓15份，赤芍5份，蒲黄22份。

其中党参可用人参或太子参等等其他补气药代之。

复方阿胶浸膏粉制备成外用药的工艺流程，是分别两部分制备的：

1，植物药制备方面：将茯苓单独先洗净，以便打成碎块，然后混入其他混合洗过的植物药丹参、猪苓、赤芍、党参或/和黄芪中，再加入先用纱布袋包好的蒲黄，一起加水浸过药面2-3.5厘米左右（即约7.5-9倍水），浸泡数小时；先用猛火煮沸后，文火煎，煎煮3-4次，每次45分钟-70分钟，合并三或四次煎液，在室温摄氏1-10度环境下静置沉淀16-24小时，然后过滤；将滤液浓缩至稠膏，真空或喷雾干燥，后粉碎。

2，将阿胶块，以75%酒精擦干净块面，打碎，在室温5℃以下的室内干燥条件下，先将其研磨成粉末，和已经粉碎好的草药浸膏粉，均匀混合成为干浸膏细粉（亦可直接将已打成碎块的阿胶，和以上已经制得的尚未粉碎的植物药干燥浸膏碎块，一起进行粉碎）。

3，用80-100目过筛，然后低温干燥下臭氧消毒，冷藏，制得新复方阿胶浸膏粉，完全真空密封，临床称为散剂。应用时，可直接用喷雾装置或棉花带线置入阴道宫颈口和穹隆部，或包装管状推进器应用，也可作为开发为其他剂型的中间体。

4，至于浸膏制备口服冲剂，浸膏同样必须遵循以上分开两步骤的方法，即，阿胶是另行隔水烊化的,由此才能制得可溶解和有良好药效的剂型。

5，由于本散剂吸水性强，这正是有利消炎药理作用的发挥；又由于草药中粘性物质较多，在制备过程中，首先务必先要认真沉淀杂渣，并注意控制室内在最低湿度、干燥低温环境下，保证顺利稳妥过细筛目。

6，真空浓缩干燥设备以及臭氧消毒、碾碎机等都是常规设备。

实施例二新复方阿胶浸膏粉阴道途径给药治疗作用研究

（一）新复方阿胶浸膏粉对大鼠急性盆腔炎治疗作用研究

1、实验药品

1.1名称：新复方阿胶浸膏粉（试验用名：jj-0808，实施例一处方制得），棕色，人用量1.5～2g/人（按原料药浸膏粉计算）。

1.2阳性对照药：妇乐颗粒剂，四川宝光药业有限公司生产，6g×袋，1次12g，每日2次，开水冲服。灌胃给药（ig），动物用量2.4g/kg。

1.3其他用药

盐酸氯胺酮注射液，规格：2ml:0.18/×10支，江苏恒瑞医药股份有限公司。

新卫牌碘伏消毒液，江苏兴化新卫消毒剂厂。

地西泮注射液，天津金耀氨基酸有限公司，规格：2ml:10mg/2ml×10支。

硫酸阿托品，上海禾丰制药有限公司。

2.实验动物及实验用菌

2.1实验动物

2.1.1品系：SD大鼠，清洁级，雌性，体重200～250g。

2.1.2合格证号：SCXK(苏)2008-004

2.1.3提供单位：南京医科大学实验动物中心

2.1.4实验环境：清洁级

2.2实验用菌：大肠杆菌，由南京医科大学微生物教研室提供。浓度1×10⁹/ml。

3.新复方阿胶浸膏粉对大鼠急性盆腔炎的治疗作用

3.1实验方法

3.1.1动物实验模型制作

动物麻醉方法：

取硫酸阿托品，配成0.025mg/ml浓度的注射剂（溶剂：生理盐水），大鼠麻醉前半小时先行给予0.25mg/ml阿托品0.1ml/100g(ip)；

取地西泮注射液，按1支地西泮注射液（2ml:10mg）和1支盐酸氯胺酮注射液（2ml:0.1g）对等混匀，将混合麻醉液按0.2ml/100g对大鼠进行ip麻醉。

盆腔炎动物模型制作：

取清洁级，体重合格，SD雌性大鼠，用混合氯胺酮麻醉液，按0.2ml/100g，ip麻醉；

大鼠麻醉后，固定在手术板上，腹部去被毛3×4cm区域，用碘伏消毒后移送无菌手术台，按无菌操作要求，治大鼠腹中线切开皮肤，刀口长2cm分离出大鼠右侧子宫，于子宫和卵巢交界0.5cm处，至卵巢端向下至阴道方向插入7号带钩注射针头，治子宫内壁由下向上划擦三下，长度2cm，造成子宫内膜机械损伤，再注入子宫1×10⁹大肠杆菌液0.1ml/只，轻轻抽出针头，并对针头进针口封胶，防泄漏大肠杆菌液，缝合皮肤，用碘伏进行创口消毒，大鼠置温暖处，待其苏醒。剔除状态不佳大鼠，进行分组试验;

次日对合格试验大鼠，按体重随机分组（其间连续三天，创口用碘伏消毒），进行试验研究。动物试验分组见表1（妇乐颗粒用量为人等效量,jj-0808为临床等效量2倍）。

表1jj-0808大鼠急性盆腔炎实验分组（A：7天给药，B：14天给药）

观察指标：

肉眼观察：子宫有无充血，肿胀，僵硬，脏器有无粘连。

肿胀率测定：用游标卡尺，量造模侧（右）子宫外径及对照组侧（左）子宫外径。

肿胀率按下式计算：

（造模侧子宫外径－对照侧子宫外径）/对照侧子宫外径×100%；

抑制率按下式计算：

（给药组肿胀率－阴性对照组肿胀率）/阴性对照组肿胀率×100%；

发情率测定：观察每组动物发情大鼠数。按下式计算：

发情动物数/动物总数（每组）×100%；

脏器/体重系数测定：测出造模侧子宫卵巢重量(g)，按下式计算：

子宫或卵巢(g)重量/体重(g)×100%；

病理观察指标：

对各鼠各病变进行累计积分，按均数（X±SD）进行t检验。

实验结果：

1、jj-0808对大鼠盆腔炎给药七天试验结果：

试验结果可见：jj-0808在子宫的肿胀率频数分布的比较中，肿胀率≥20的比例为2/12，而妇乐颗粒组为6/12，阴性对照组为9/12，jj-0808和阴性组相比有显著性差异（P<0.01）；jj-0808平均肿胀率为9.3±13.3，和阴性对照组（27.6±16.1）比，两者有显著性差异（P<0.01）；其肿胀抑制率(66%)、发情率(58.3%)均高于阴性对照组和妇乐颗粒组，jj-0808和妇乐颗粒组子宫内膜损伤的病理积分均较阴性对照组有明显差别且有显著差异（P<0.01），见表2～表4.

表2jj-0808对大鼠急性盆腔炎治疗作用分析(给药7天)

**和阴性对照组比P<0.01；

表3jj-0808对大鼠急性盆腔炎治疗作用分析（给药7天）

表4jj-0808对大鼠急性盆腔炎病理积分比较（给药7天）

**和阴性对照组比P<0.01

2、jj-0808对大鼠盆腔炎给药14天试验结果：

试验结果可见：jj-0808对大鼠给药14天后，子宫的平均肿胀率为2.81±3.1和妇乐颗粒组（13.5±11.3）、阴性对照组（17.6±9.9）相比，有明显差别且有显著性差异（P<0.01）。其肿胀抑制率（66%）也高于妇乐颗粒组（28%）、其发情比例为8/12和妇乐颗粒组（4/12）、阴性对照组（4/12）相比，有明显差别。jj-0808和妇乐颗粒组的病理积分均较阴性对照组有明显差别，且有显著差异（P<0.05）。见表5～表7。

表5jj-0808对大鼠急性盆腔炎治疗作用分析(给药14天)

**和阴性对照组比P<0.01，##和妇乐颗粒组比P<0.01。

表6jj-0808对大鼠急性盆腔炎治疗作用分析（给药14天）

表7jj-0808对大鼠急性盆腔炎病理积分比较（给药14天）

*和阴性对照组比P<0.05。

结论：

新复方阿胶浸膏粉系中药临床经验方，其对妇女阴道宫颈炎，急慢性盆腔炎多年来的临床应用，有明显疗效且不易复发。本试验研究采用对大鼠子宫内膜炎机械损伤，再加以大肠杆菌感染的方式，造成大鼠子宫炎症，类似于人的急慢性盆腔炎。此模型和临床感染方式相似，再以该剂型进行阴道给药，予以治疗，见有明显疗效。在急性盆腔炎试验中，造模后三天，是炎症高峰。解剖可见:子宫充血、肿胀。相当于临床急性发作，即行经阴道给药，于给药第七天、十四天分阶段测定各项指标，进行动态观察。并根据炎症的红肿热痛等症状，设定了子宫脏器系数、子宫炎症肿胀率，是否干扰动物的正常发情及子宫的病理学检查等指标，进行疗效评价。结果可见：该药对子宫肿胀有明显抑制作用，能够保持动物的正常发情，减轻子宫的损伤。其子宫的脏器体重系数的指标由于大鼠发情率比较高，因此该系数稍大于其他组。总之，该药对试验性盆腔炎，疗效确切。为临床用药提供了试验依据。试验体现了该剂型经阴道给药有一定的优越性，对其机理可进一步探索研究。

（二）新复方阿胶浸膏粉对兔阴道黏膜刺激作用的研究

1.药品名称

1.1名称：本发明新复方阿胶浸膏粉，浅棕色，人用量1-2g/日

2.实验动物

2.1新西兰兔，雌性，体重2.0-2.2kg

3.新复方阿胶浸膏粉刺激试验

3.1试验方法及结果

3.1.1方法：取新西兰兔16只，随机分成4组，每组4只，雌性，分别为新复方阿胶浸膏粉组（100mg/kg）、正常黏膜对照组、损伤黏膜给药组（100mg/kg）和损伤黏膜对照组。损伤组用带钩针头自阴道内向外按不同方向划4道划痕，针尖应见少量组织和微量血水。各组动物经阴道每日给药1次，连续一周，于末次给药24小时后，处死家兔，肉眼观察阴道及相关附件的病理变化，并取阴道组织置于10%福尔马林中，切片HE染色，进行病理学检查，做出刺激评价。各组留1只作7天恢复期观察，检查方法同前。

3.1.2.实验分组：

表8新复方阿胶浸膏粉刺激实验分组

3.1.3.判断标准：

肉眼观察

充血 0 ＋ ＋＋ ＋＋＋ ＋＋＋＋（0－4分）

水肿 0 ＋ ＋＋ ＋＋＋ ＋＋＋＋（0－4分）

病理切片观察(光镜)

每份样品四指标总分0－8分，轻度刺激，可以接受，11－16分，刺激强，不能接受，9－10分，为中等刺激。

3.2.试验结果显示：

正常黏膜给药组肉眼观察黏膜未见异常，损伤伤黏膜给药组也未见明显充血、水肿、出血、溃疡、坏死等炎症反应，和损伤黏膜对照组相比，未见刺激加重。

病理学检查给药组见轻度炎细胞浸润，属轻度刺激。见表9、表10、表11。

表9新复方阿胶浸膏粉连续1周对阴道黏膜局部反应肉眼检查结果

表10新复方阿胶浸膏粉对家兔阴道黏膜刺激作用的病理检查n=3

4.试验结论：

新复方阿胶浸膏粉正常黏膜给药组肉眼未见明显充血水肿溃疡坏死等强刺激现象，病理仅见1兔炎细胞浸润0～+，属轻度刺激。恢复期兔阴道黏膜正常；损伤黏膜给药组对实验兔阴道黏膜刺激明显轻于损伤黏膜对照组，且恢复期正常；而损伤黏膜对照组恢复期仍见炎细胞浸润，刺激性明显高于给药组。表明药物对损伤黏膜有一定的治疗作用。

（三）由于本新发明浸膏阴道途径给药，是按原有技术的基础原理自我稳定性改进而来的，既然临床应用疗效上，尚没发现他们之间有大区别，而且动物实验中的急性期一开始的7或14天，原有技术和阳性药疗效对比又是共显有效，互相间始终并不存在明显差异，说明该阶段老发明药效没有显示出超过阳性口服对照药的能力。既然抓住了老发明的这不足的缺陷，为要更客观地追究本新发明药效到底是什么面目，就要另设计出新方案，在专利公开前一律对实验人员保密新设计方案的动机，必须仍用原来的阳性口服药作对照（要同一厂家生产、实验剂量要完全相等），前后实验要同在一所国家药监局法定指定单位、同一研究室、操作组人员不变、实验动物和实验程序方法相同，但还加上只是仅仅特意再将实验时间，设置在和原有实验的气候外环境存在最大差异的严寒季节，让动物处于自然繁殖非旺盛季节，这种苛刻加大客观外环境的不利条件，是提高治疗难度，让得出的对比疗效结果，更有说服力的可靠性。那末，既然原有技术实验的日期范围是2004年4～6月，正是交配旺盛季节（可查上报国家新药档案），则将本新发明实验日期范围就定在2008年10月～09年1月，预实验后，正式实验已入严寒11月底。目标盯住急性早期〈本新发明〉组到底又会出现何结果。

（1），急性盆腔炎治疗后子宫肿胀率对比：一，本发明组（实验表格中标为jj-0808），在急性期阴道给药治疗7天，平均子宫肿胀率已明显下降，和同组阴性（模型）对照组比较，已经消肿2/3，P〈0.01；而将同组口服阳性药对照组和阴性对照组对比，却无统计学意义差异；二，而查专利号200510025337.9资料，在实验相对应的7天或14天的肿胀率数据中，得知原有技术组或者同组口服阳性药对照组，各自和同组阴性模型对照组对比的结果，却同样都显示有显著改善的，皆为P〈0.05；再将原有技术组7天或14天的数据，分别又和同组口服阳性对照组再对比，均差异很小，却是无统计学意义差异；三，又再继续看本发明组急性期治疗14天的结果,其本身的平均肿胀率还继续明显急剧下降，更加接近正常对照组的指标了，故不仅本发明组和阴性（模型）对照组之间，继续保持更显著的差异，又是P〈0.01，而且由于同组口服阳性药对照组治疗14天的肿胀率，却还是下降很少，既大不如过去处于温暖气候外环境时，自己在原有技术实验中治疗14天的消肿能力，且和14天同组本发明组对比，居然出现更有非常显著的统计学意义的差异，P〈0.01。

（2）急性盆腔炎治疗后发情率对比：一，原有技术组阴道给药，不仅要到急性期治疗28天的总比例或慢性期治疗28天，各自的发情率和模型（阴性）对照组对比，才出现皆为P〈0.05，而且同组阳性口服对照药在急性期各阶段也都有疗效提高趋势的，故和原有技术组数据始终接近，只是表现得差些，造成不论急性或慢性期，阳性口服对照药和模型（阴性）对照组对比，始终还是并无统计学意义差异，故发情率本来已成为原有技术专利的特色根据了。二，再看本发明组发情率，却显示出早在急性期治疗7天，就已经和正常（空白）对照组数据完全相等，坚持巍然挺立在最理想的尽头顶端了，毫不减退；造成本发明组和同组口服阳性药对照组或和正常对照组之间，差距都是更加大（注：口服阳性药对照组发情率只有25%，而本发明组或正常对照组都是58.3%，口服阳性药对照组和这二者之间，皆差了一倍以上的距离）。更特别的是，本实验7天的口服阳性药对照组的发情率，不但没有像原有技术资料中所显示的发情率那样是增加的趋势，竟然反而出现了它连保持像同组阴性模型对照组的发情率的水平都达不到了！这更是原有技术资料中，从来没出现过的（反而出现比阴性模型对照组的33.3%更低了8.3%！明显反其道而行之！这也许是有和严寒季节清热解毒苦寒败胃药灌胃，动物消化道内环境一时难以适应，而显发情率反而差，也有些关连）。三，再看本发明组给药14天，发情率却增加到66.6%了，比同组正常对照组发情率为50%的数据，还超过16.6%，表明疗效还继续夯实，更遗憾的是，同组口服阳性药对照组，只能达到和阴性（模型）对照组数据相等的水平（注：只同为33.3%，即阳性药对照组只是本新发明组发情率66.6%的一半）。

（3）本新发明“独显和稳态”的独特性：

一，有效时效在急性期能独显：总括以上两类急性早期治疗阶段的所有多种不同对比，得知本发明组和同组的阳性药对照组数据之间的走向，始终都出现非常显著差距，最后又以越来越加大，意想不到14天治疗，竟然互相间会出现P〈0.01来告终！更尤其在发情率上，甚至出现分道扬镳，背道而驰，确证本发明组是独显功效；而以往原有技术实验里，同样急性早期阶段的以上两项实验对比，原有技术组却始终并没独显本领，反而是和阳性对照药所有数据靠拢，始终同时保持同步趋势地增加，差异很小，从来没见有统计学意义的差异，故两组是同步共显有效。那末，请注意：原有技术组能和阳性对照组表现出有统计学意义差异而独显功效，则是要到慢性期的，在用检测血液流变学时，各自和空白对照组对比时，才独显治愈本领的，或者通过微观病理检测对比，这才呈现出独显功效的特殊性的。那末，既然本实验急性期一开始的治疗阶段，能并不受外环境气候变恶劣的干扰，令以上两类实验所有项目的指标，反而竟然都能坚持独显自我稳定的能力，首先是功力表现比原有技术组提前了，是其独显时效范围比原有技术组加长的结果。

二，自身药理功底的独显：既然已知寒冷季节，急性早期一开始治疗阶段，口服阳性药对照组能减轻子宫肿胀的效果，表现很差，而本发明组，却反而非常明显地显示出竟然自己有主动向正常对照组指标靠拢的坚持恢复的力量，是自身逆流上行的药力也在给力，且从急性期7天起，减轻子宫肿胀率的能力是自动越来越明显加强，以至于14天和阳性药对照组对比，才会奇异地皆亦出现P〈0.01的差异的。而相反，春暖花开季节里实验的原有技术组，治疗了14天，它自身药力，还尚没能表现超越其同组阳性药对照组，说明在急性期早期用原有技术组，根本毫无冒尖独显的功底。

三，严寒气候外环境竟独显自身发情率药效：交配季节原有技术的急性期实验里，原有技术组和阳性药对照组各自发情率始终都是同步共显“逐渐在改善”（只是阳性药组稍差点）。但是本实验，阳性药对照组发情率一直处于严重抑制状态，一开始的7天，反而居然连同组阴性模型对照组都不如；治疗到14天，仅只能达到同组阴性模型对照组的水平。而同组本发明组内环境同处于急性炎症状态下，同样在严寒的外环境里，发情率却竟然表现始终正常，甚至到治疗14天，还能进展到独自超过同组正常对照组。它能无比坚强单独显示自我稳定，令原有技术组也是甘拜下风，望尘莫及的。本发明以上两类实验项目7到14天治疗指标，和阳性对照药之间对比，差异如此大相径庭，统统都是以往原有技术实验中，从来未出现过的。

四，微观病理仍同样稳态：从不同角度对比，一是：既然外环境气候变差了，可是同样急性早期治疗，微观病理非以绿色抗生素抗炎为优势特征的本发明组和模型对照组对比，却仍然能和以绿色抗生素抗炎为优势特征的阳性药对照组同样和模型对照的对比一样，都达到P〈0.05；二是：虽然本发明组实验所处的严寒季节，和气候适宜实验的原有技术组所处外环境大有差异，但同样是急性期早期治疗，各自和同组阴性（模型）对照组的病理检验结果对比，竟然同样都是P〈0.05。本发明虽没有适宜的季节环境，不过，但能达到和原有技术同样水平的病理改善的稳态，正表明了本发明不易复发更夯实和更耐久的根据。

通过中药处方和工艺都简化改进，本新发明反而比原有技术组更有优势。

（三）在新复方阿胶浸膏粉对兔阴道黏膜刺激作用的研究结果中，发现〈本新发明〉对有损伤的阴道黏膜，不仅有保护作用，而且已经表明有明显修复和治疗损伤黏膜的功效。这和以往在临床用原有技术或本发明浸膏粉，治疗下生殖道炎症，都显效，是一致的，故不再以苯酚胶损伤宫颈和阴道来观察本品对下生殖道的疗效。何况，2002年实验已用苯酚胶阴道损伤下生殖道后，给于原有技术浸膏粉治疗来和模型对照组对比过，得知有非常明显的统计学差异（国家专利局以及南医大药理研究所都有资料可追究查实）。

（四）虽然外用有以上优点，可是，根据临床循证和辨证论治的经验，不是所有盆腔炎都适合阴道给药，如子宫脱垂症（阴挺）、阴道严重疤痕形成、严重阴道畸形或狭窄等等不便外用者依然存在，何况，本处方口服，除用于治疗急、慢性盆腔炎之外，临床还可用于不少内、外等科疾病的急救和恢复期或慢性过程中的调理，故重视口服和外用制剂的同时开发，则社会和经济效益就更大。

实施例三本发明浸膏对兔油酸所致肺损伤保护作用研究

一、实验药品

1.络安泰JJ0908（本实施中也称JJ0908）（内用）（本发明浸膏）棕褐色浸膏含浸膏粉0.47g/mL

2.络安泰JJ0808（本实施中也称JJ0808）（对照）（原有技术处方）棕褐色浸膏粉

3.油酸上海凌峰化学试剂有限公司化学纯

二、实验动物

新西兰白兔（2.1～2.3kg，雌雄各半，40只）南京安立默科技有限公司提供；

三、动物实验条件：

实验地点：南京医科大学动物实验楼

动物实验室：温度20－24℃，湿度40-70％

四、实验方法

5.1预实验

5.1.1实验目的

摸索造模使用油酸剂量：0.06、0.07、0.08ml/kg

取新西兰白兔10只，隔日禁食12小时，分为给药兔、模型兔和空白兔，给药兔先灌胃给药JJ0908（剂量：3g/kg），给药1小时后经耳缘静脉注射油酸（剂量梯度：0.06、0.07、0.08ml/kg），5小时后处死取肺，观察肺损伤情况，模型兔只给油酸不给药，通过实验结果选择合适的油酸造模剂量和给药剂量。

实验结果显示，给药剂量浸膏粉3g/kg，造模剂量耳缘静脉注射油酸0.06ml/kg，为实验最佳剂量。

5.2正式实验

取新西兰白兔34只，分成四组，分别为空白组（8只）、给药组A（络安泰JJ0908，3g/kg，9只）、给药组B（络安泰JJ0808，3g/kg，8只）和模型组（9只），禁食12小时，空白组不给药不注射油酸，给药组A先灌胃给药JJ0908（剂量：3g/kg）、给药组B先灌胃给药JJ0808（剂量：3g/kg），给药1小时后给药组A和给药组B经耳缘静脉注射油酸（剂量：0.06ml/kg），5小时后处死取肺，观察肺损伤情况。模型组先给水10ml/kg，一小时后经耳缘静脉注射油酸（剂量：0.06ml/kg），5小时后处死取肺，观察肺损伤情况。

各组动物全肺拍片，并取材至10%福尔马林中，备制片供光镜检查。

实验分组：

表12络安泰对油酸所致兔肺损伤保护作用研究的实验分组

5.3考察指标：

5.3.1.宏观观察肺部损伤情况；

按照肺部充血、水肿、脏器重量、出血程度将损伤分为5级：0、1、2、3、4级。

0级为正常，无明显充血水肿，全肺湿重9～11g

1级为轻度损伤，肺出现局部轻度充血（+）、水肿（+），全肺湿重12～13g

2级为中度损伤，肺右侧出现中度局部充血（++）、水肿（++），全肺湿重13～14g

3级为重度损伤，肺左、右均侧出现充血（++～+++）、水肿（++～+++），且右侧较左侧严重，全肺湿重15～16g

4级为严重损伤，肺边缘及肺左、右侧出现严重充血（+++）、水肿（+++），及不同程度出血，全肺湿重大于16g

说明：

0级、1级、2级、3级、4级分别为0分、1分、2分、3分、4分，以积分进行统计分析。

5.3.2全肺脏器系数

全肺脏器系数(g/kg)=全肺湿重(g)/禁食后体重(kg）

5.3.3光镜检查肺部损伤标准

1.支气管黏膜炎症

充血：0、+、++、+++

炎细胞浸润：0、+、++、+++

2.肺泡壁炎症

充血：0、+、++、+++

水肿：0、+、++、+++

炎细胞浸润：0、+、++、+++

3.肺泡腔炎症

充血：0、+、++、+++

水肿：0、+、++、+++

炎细胞浸润：0、+、++、+++

4.其他病变

出血：0、+、++、+++

脓肿：0、+、++、+++

说明：

0、+、++、+++分别为0分、1分、2分、3分，将积分相加后作为总分进行统计分析并进行T-检验。

六、络安泰JJ0908对兔油酸所致肺损伤保护作用实验研究结果

1.由表13可见各组肺重和脏器系数分别为：正常对照组（10.45±1.08g，4.87±0.55g/kg）、模型组（16.06±2.23g，7.25±0.97g/kg）、络安泰JJ0908A（12.88±1.86g，5.96±0.86g/kg）、络安泰JJ0808B（13.64±2.21g，6.4±0.83g/kg）,对比显示给药组肺重和脏器系数均低于模型组，显示其损伤明显减轻，且有显著性差异（P<0.05）。

表13络安泰对油酸所致兔肺损伤保护作用研究的结果（全肺重及脏器系数）

“*”和模型对照组相比有显著性差异（P<0.05）

2.由表14可见各组实验兔全肺损伤等级积分分别为：

空白对照组：0.13±0.35

模型对照组：3.56±0.77

给药组JJ0908（A）：1.78±0.51

给药组JJ0808（B）：2.00±1.07

该结果显示各给药组损伤均明显低于模型对照组，且有显著性差异（P<0.05）。

表14络安泰对油酸所致兔肺损伤保护作用研究的结果（肉眼观察全肺损伤）

注：“*”和模型对照组相比有显著性差异（P<0.05）

3.由表15可见模型组4级病变比例明显高于给药组。

空白对照组：其中4级病变为0例 占总数0/8

模型对照组：其中4级病变为6例 占总数6/9

给药组络安泰JJ0908（A）：其中4级病变为0例 占总数0/9

给药组络安泰JJ0808（B）：其中4级病变为1例 占总数1/8

表15络安泰对油酸所致兔肺损伤保护作用研究的结果（肉眼观察全肺损伤级分频数分布）

组别	动物数（n）	0≤X<2分	2≤X<3分	3≤X<4分	X=4分
						空白对照组	8	8	0	0	0
模型对照组	9	0	2	1	6
						JJ0908（A）	9	5	4	0	0
JJ0808（B）	8	3	4	0	1

4.对实验兔肺光镜检查的结果（见表16、表17）

表16络安泰对油酸所致兔肺损伤保护作用研究的结果（光镜检查肺损伤）

注：“**”和模型对照组相比有显著性差异（P<0.01）。

表18络安泰对油酸所致兔肺损伤保护作用研究的结果（光镜检查肺损伤积分频数分布）

组别	动物数（n）	X≤3分	3<X≤6分	6<X≤10分	X>10分
						空白对照组	8	8	0	0	0
模型对照组	9	0	5	2	2
						JJ0908（A）	9	6	3	0	0
JJ0808（B）	8	7	1	0	0

由表16、表17、表18显示的兔肺损伤积分为：空白对照组0.13±0.35、模型对照组6.88±2.93、给药组络安泰JJ0908（A）2.56±2.13、给药组络安泰`JJ0808（B）2.25±1.75。各给药组积分均明显低于模型对照组且有显著性差异（P<0.01），显示给药组对肺具有明显保护作用。

七、实验结论

预实验结果显示，油酸（0.06ml/kg）经兔耳缘静脉注射后5小时后可引起兔肺严重的急性损伤。表现为充血、水肿、出血并伴有全肺重量明显上升，不予治疗可存活3天以上。正式实验使用该剂量造模并给药，其结果各给药组络安泰JJ0908（A）及络安泰JJ0808（B）均表现出对油酸所致肺损伤具有明显保护作用。无论从肺重（正常对照组为10.45±1.08，模型组为16.06±2.23，络安泰JJ0908（A）为12.88±1.06，络安泰JJ0808（B）为13.64±2.29克）、全肺脏器系数（正常对照组为4.87±0.55，模型组为7.25±0.97，络安泰JJ0908（A）为5.96±0.86，络安泰JJ0808（B）为6.4±0.83）、全肺损伤积分（正常对照组为0.13±0.35，模型组为3.56±0.77，络安泰JJ0908（A）为1.78±0.51，络安泰JJ0808（B）为2.00±1.07）及光镜检查病理积分（模型组为6.88±2.93，络安泰JJ0908（A）为2.55±2.13，络安泰JJ0808（B）为2.25±1.75）均显示给药组络安泰（内用和对照）损伤数据明显低于模型组，且有显著性差异（P<0.05或P<0.01），表现出对油酸引起的肺损伤有明确的保护作用。

结论：

药物络安泰（络安泰JJ0908和络安泰JJ0808）对兔灌胃给药（3g/kg）均表现出对油酸所致兔肺损伤具有明确的保护作用。

关于实施例二的实施例三中，也就是本新发明前后有两种不同实验病种，盆腔炎外用阴道途径给药的实验代号，和肺损伤内用的口服代号，各有所指，千万不可混淆。虽然，本新发明组的口服处方和阴道途径给药的是同一个处方，然而由于本新发明组浸膏用在阴道途径给药实验里的，已经先标为单纯地“JJ0808”为代号了，是2008年8月制备，同年进行了阴道给药治疗盆腔炎实验，且该实验报告已归档，不可改动。本新发明组口服治疗肺损伤实验的浸膏，是于2009年再制备的，同年进行了实验，标出的代号为JJ0908，两个实验间隔近一年。现在另要注意的是，原有技术口服处方（专利号ZL8815365.1）浸膏粉和〈本新发明〉组阴道给药的浸膏，是同时在2008年就制成的，既然单纯的代号JJ0808（即前面是没有“络安泰”三个字的）已经在2008年，用作为本《新复方阿胶浸膏粉阴道给药》实验里的〈本新发明〉组浸膏的代号了，因此，为了要将口服治疗肺损伤实验用的〈原有技术〉组浸膏，和一年前已经完成的阴道给药治疗盆腔炎的实验中所指的是〈本新发明〉组处方浸膏的代号JJ0808，能绝对彻底有所分开，不仅将2008年制得的<原有技术>口服处方代号前面，加上“络安泰”三个字，起名为“络安泰JJ0808”之外，为使同是肺损伤实验组内的这两种不同处方的口服浸膏代号，能相对应起来，成为同一报告中可对比的两种口服实验组，故在2009年制得的〈本新发明〉组的口服处方浸膏代号JJ0908的前面，也同样加上了“络安泰”三个字。不过还请注意，在口服治疗肺损伤实验报告的表格中，因格子太小而简化，也有标成JJ0808的，而它是指口服络安泰JJ0808的更简化的表达而已，仍指的是原有技术口服浸膏样品的代号，绝对别和阴道途径给药实验报告里所指的JJ0808混淆。

Claims (8)

1.一种新复方阿胶浸膏粉，由以下重量份的生药原料制成：阿胶10-45份，党参0份或6-35份,黄芪0份或6-35份，丹参5-24份，猪苓6-24份，茯苓 6-22份，赤芍5-25份,蒲黄3-22份；其中，黄芪和党参不同时为0份。

2.如权利要求1所述的新复方阿胶浸膏粉，其特征在于所述蒲黄是生蒲黄或炒蒲黄或者它们的混合物。

3.权利要求1所述的新复方阿胶浸膏粉在制备治疗肺损伤口服药物中的应用。

4.权利要求1所述的新复方阿胶浸膏粉在制备防治急慢性盆腔炎药物中的应用。

5.如权利要求4所述的应用，其特征是通过口服或阴道途径给药。

6.权利要求1所述的新复方阿胶浸膏粉在制备治疗皮肤溃疡、烫伤、烧伤、外伤出血外用药物中的应用。

7.权利要求1所述的新复方阿胶浸膏粉在制备治疗口腔溃疡膜型制剂的中间体中的应用。

8.一种权利要求1所说的新复方阿胶浸膏粉的制备方法，其步骤特征为：

（1）植物药制备：将茯苓单独洗净打成碎块，然后混入生药原料丹参、猪苓、赤芍、党参或/和黄芪；一起加水浸泡，再和纱布包好的蒲黄合并、包煎，先用猛火煮沸后，再文火煎煮3-4次，煎液静置自然沉淀，杂质弃之，再过滤；将滤液浓缩、干燥成块状的草药浸膏，待备用；也可将稠膏直接真空干燥或喷雾干燥，粉碎过筛后备用；

（2）将阿胶块用体积分数75%的酒精擦干净块面，打碎，在低温5℃以下的干燥条件下，将其研磨成粉末，然后和步骤（1）中已经粉碎好的草药浸膏粉，均匀混合成为干浸膏细粉；或者在低温干燥条件下，将尚未研磨成粉末的块状草药浸膏，与阿胶块共同研磨成粉末；然后过筛，臭氧消毒，冷藏。