CN102716130B - 可转形穴位注射川芎嗪药及其制备方法 - Google Patents
可转形穴位注射川芎嗪药及其制备方法 Download PDFInfo
- Publication number
- CN102716130B CN102716130B CN 201210219485 CN201210219485A CN102716130B CN 102716130 B CN102716130 B CN 102716130B CN 201210219485 CN201210219485 CN 201210219485 CN 201210219485 A CN201210219485 A CN 201210219485A CN 102716130 B CN102716130 B CN 102716130B
- Authority
- CN
- China
- Prior art keywords
- ligustrazine
- medicine
- chitosan
- acupoint injection
- acetic acid
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Expired - Fee Related
Links
Images
Abstract
本发明涉及一种可转形穴位注射药及其制备方法。可转形穴位注射川芎嗪药，其特征在于它由川芎嗪、壳聚糖醋酸溶液和磷酸氢二钾溶液混合而成；各原料的配比为：川芎嗪∶壳聚糖醋酸溶液∶磷酸氢二钾溶液=2毫克∶1mL∶1mL。本发明为穴位注入药治疗疾病提供一种疗效较好、依从性高的新剂型药。
Description
技术领域
本发明涉及一种可转形穴位注射药及其制备方法。
背景技术
壳聚糖基温敏凝胶是2000年后才被提出的一种新型的可注射型水凝胶，具有良好的生物相容性,生物可降解性，且降解产物(寡聚糖和单糖)无毒性[1-3]。目前，壳聚糖基温敏凝胶广泛应用于组织工程修复和药物释放载体的研究中。
常用壳聚糖水凝胶包载一些比较敏感的蛋白类药物如胰岛素,或者生物半衰期比较短,口服不稳定,以及全身毒副作用比较大的药物[4-5]，从凝胶的内部作用力分析，该凝胶主要受静电和疏水作用力影响，不存在较强的共价作用力和稳定的结构，因此药物释放初期,主要是通过扩散作用而释放,后期则是连接通过水凝胶的溶蚀作用而被缓慢释放出来。如温敏凝胶在抗肿瘤药物方面的应用[6]，将肿瘤药物包裹于温敏水凝胶内后以液体形式注射到体内,温敏水凝胶在体内温度下发生相变形成固态凝胶可以起到药物储库的作用使药物缓慢释放,这就避免了患者频繁的用药,提高了患者的顺应性；眼部用药，温敏水凝胶可以以液体方式滴入眼内,剂量准确,给药方便。在眼内形成凝胶,可以延长药物滞留时间,大大提高药物利用度,因此可以降低药物不良反应,减少给药次数,提高患者顺应性；牙周局部用药，因壳聚糖本身具有抗酸、抗感染等作用，再将牙周用药包裹在该水凝胶内，杀菌、抑菌，具有作为牙周局部用药的潜力。
CS是胞外基质类似物,CS水凝胶具有三维多孔结构,它具有生物相容性好、成胶时间及体内降解时间可调控等优点,在软骨组织工程等领域已经得到应用[7-8]，组织工程采用可注射原位形成水凝胶.与预成型支架相比具有特定的优势:能填充任意形状的缺损,并在很大程度上降低植入对机体组织的侵入性，且能与各种治疗药物混合。可注射性水凝胶材料是携带细胞的载体,具有携带细胞、促进细胞体内移植区滞留及增殖与分化的作用。如将该凝胶与软骨细胞复合构建组织工程化软骨，用于修复关节软骨缺损。
温敏水凝胶，即温度敏感型水凝胶，该凝胶的形成过程不涉及化学反应，分子链间的交联通过分子间相互作用力（范德华力、疏水相互作用、氢键等）形成。在此可注射水凝胶在水中经过简单的相转变，不需要任何化学反应，因而在体内应用时会更简单、更安全。
从凝胶的材料来看，能够发生溶胶凝胶转变的天然聚合物体系很多，如动物胶、聚多糖等，天然大分子中，壳聚糖是有相当应用前景的的生物材料，Chenite[3]等首次报道了用壳聚糖和多羟基磷酸盐的水溶液作为溶胶体系。均聚和共聚的异丙基丙烯酰胺与聚氧化乙-聚氧化丙烯-聚氧化乙烯三嵌段共聚物是典型的温敏水凝胶,但它们不能生物降解,这就限制了其应用。从交联剂来看，有用戊二醛或者聚乙烯醇作为物理交联剂的，但因为戊二醛的毒性作用和聚乙烯醇的的过敏反应，其应用也受到限制。对水凝胶的分类、制备等目前已有研究[9]，温敏水凝胶体系在从溶胶转变为凝胶的过程中，影响因素较多，主要是温度、pH值等[10]。
参考文献：
[1]蒋挺大.壳聚糖[M].北京:化学工业出版社,2001。
[2]Ruel E,Chenite A,Chaput C,et al.Characterization ofthermosensitive chitosan gels for the sustained delivery of drugs[J].Int JPharm,2000,203(8):89-98。
[3]Chenite A,Chaput C,Wang D,et al.Novel injectable neutralsolutions of chitosan form biodegradable gels in situ[J].Biomaterials,2000,21(21):2155-2161。
[4]Ruel-Garie′py E,et al.Thermosensitive chitosan-based hy-drogel for the local del ivery of pacl itaxe.lEurJPharm Biop-harm,2004,57:53-63。
[5]Wu J,Su ZG,Ma GH.A thermo-and pH-sensitive hydrogelcomposed of quaternized chitosan/glycerophosphate.Int JPharm,2006,315:1-11。
[6]YU L,CHANG GT,ZHANG H,etal.Injectable block copoly-merhydrogels for sustained release ofaPEGylated drug[J].IntJPharm,2008,348(1-2):95-106。
[7]Yeo Y,et al.Photocrosslinkable hydrogel for myocyte cellculture and injection.JbiomedMaterRes.PartB,2007,81:312-322．
[8]Xu B,et al.Development of Chitosan Hydrogel and
the Effect of C2C12Adhesion and Support.J Biomed EngRes,2008,27:121-124。
[9]魏宏亮,王连才,张爱英,等.可注射水凝胶的制备与应用.化学进展,2004,16(6):1008-1015。
[10]张雪雁,顾其胜.壳聚糖温敏凝胶的制备及其影响因素.2006年上海市医用生物材料研讨会:9-16。
发明内容
本发明的目的在于提供一种可转形穴位注射川芎嗪药及其制备方法，为穴位注入药治疗疾病提供一种疗效较好的新剂型药，其操作简单易行。
为实现上述目的，本发明所采取的技术方案是：可转形穴位注射川芎嗪药，其特征在于它由川芎嗪、壳聚糖醋酸溶液和磷酸氢二钾溶液混合而成；各原料的配比为：川芎嗪∶壳聚糖醋酸溶液∶磷酸氢二钾溶液=2毫克∶1mL∶1mL。
壳聚糖醋酸溶液的浓度为2wt%-2.5wt%(质量)。磷酸氢二钾溶液的浓度为14wt%-15wt%(质量)。
壳聚糖醋酸溶液的浓度为2.3wt%(质量)。磷酸氢二钾溶液的浓度为14.75wt%(质量)。
上述可转形穴位注射川芎嗪药的制备方法，其特征在于它包括如下步骤：
1）将壳聚糖溶于0.1M的醋酸溶液中，配制成浓度为2wt%-2.5wt%(质量)的壳聚糖醋酸溶液（用磁力搅拌器搅拌约1小时，使之充分溶解于醋酸中）；
2）用去离子水配制浓度为14wt%-15wt%(质量)的磷酸氢二钾溶液；
3）上述壳聚糖醋酸溶液、磷酸氢二钾溶液分别于4℃冰箱保存约0.5小时；
4）按各原料的配比为：川芎嗪∶壳聚糖醋酸溶液∶磷酸氢二钾溶液=2毫克∶1mL∶1mL，选取川芎嗪、壳聚糖醋酸溶液和磷酸氢二钾溶液混合，得到可转形穴位注射川芎嗪药。
随着穴位埋线在临床上的广泛应用，对埋线技术的要求也应当有所提高和革新，然而线体的改变可以很大程度上决定埋线的操作方法和技术，研制一种可以用简单穴位注射的方法，将温敏水凝胶川芎嗪药埋植入穴位，其操作简单易掌握，不仅可缓慢将药物导入病变组织，药物利用率高，且同时降低治疗频率，病人的依从性大大提高，由于综合了针刺、留针、穴位注射药物等多种治疗方法，其临床治疗效果将有望提高。为穴位注入药治疗疾病提供一种疗效较好、依从性高的新剂型药。
可转形穴位注射药，因其在常温(低于37度)为液体，在体温环境或者高于37度为凝胶状，可以用简单的穴位注射的方法埋植于穴位而得名，其基础是壳聚糖基温敏凝胶，在此基础上加入一定川芎嗪，埋植于穴位起到针药结合、类似于埋线治疗的效果。
本发明的有益效果是：本发明为穴位植入药，而作用类似于穴位埋线，为穴位注入药治疗疾病提供一种疗效较好、依从性高的新剂型药，其操作简单易行。
附图说明
图1是本发明可转形穴位注射川芎嗪药对局灶性脑缺血再灌注大鼠皮质区MMP-9的影响图(MMP-9×200)；图1中：a-模型组，b-可转形穴位注射药线组，c-川芎嗪胶原药线组，d-川芎嗪药物羊肠线组。
图2是本发明可转形穴位注射川芎嗪药对局灶性脑缺血再灌注大鼠皮质区TIMP-1的影响图(TIMP-1×200)；图2中：a-模型组，b-可转形穴位注射药线组，c-川芎嗪胶原药线组，d-川芎嗪药物羊肠线组。
具体实施方式
实施例1
可转形穴位注射川芎嗪药的制备方法，它包括如下步骤：
1）将壳聚糖溶于0.1M的醋酸溶液中，配制成浓度为2.3wt%(质量)的壳聚糖醋酸溶液（用磁力搅拌器搅拌约1小时，使之充分溶解于醋酸中）；
2）用去离子水配制浓度为14.75wt%(质量)的磷酸氢二钾溶液；
3）上述壳聚糖醋酸溶液、磷酸氢二钾溶液分别于4℃冰箱保存约0.5小时；
4）按各原料的配比为：川芎嗪∶壳聚糖醋酸溶液∶磷酸氢二钾溶液=2毫克∶1mL∶1mL，选取川芎嗪、壳聚糖醋酸溶液和磷酸氢二钾溶液混合，得到可转形穴位注射川芎嗪药（溶胶）。
应用：该可转形穴位注射川芎嗪药，目前被应用于科研实验研究中，观察其对局灶性脑缺血再灌注大鼠皮质区MMP-9、TIMP-1的影响。
MMP-9、TIMP-1实验的过程及条件
1、所有动物随机分为4组，处理方法如下：
模型对照组：10只，造模成功后，正常进食及饮水，不给予任何治疗，在观察日24小时后取材。
可转形川芎嗪药组（可转形穴位注射川芎嗪药组）：10只，造模成功后，大鼠清醒活动0.5h后行穴位埋药线治疗。注射剂量为0.3ml和0.6ml（依据川芎嗪胶原药线组同等药物含量），定准穴位，用5ml注射器，斜刺内关7mm深、直刺大椎13mm深，回抽无回血后，分别缓慢推入药液0.3ml和0.6ml，边退边注入，使其在体内形成半固体凝胶线状，埋线处常规消毒。在观察日24小时后取材。
川芎嗪胶原药线组：10只，埋线治疗时间和条件同上组，埋药线方法：自制药线长约6mm和12mm，其中药物含量约0.6mg和1.2mg（依据《实验针灸学》[18]实验动物与人用药量的换算方法计算）。大鼠大椎、内关穴备皮、常规消毒，药线及埋线针具经紫外照射消毒后，将6mm和12mm药线分别装入注射针头，斜刺内关7mm深，直刺大椎13mm深，轻推针灸针针柄将药线埋入，然后将注射针头缓慢退出，埋线处常规消毒。在观察日24小时后取材。
川芎嗪药物羊肠线组：10只，埋药线方法同川芎嗪胶原药线组。
2、免疫组化法检测大鼠脑皮质区MMP-9和TIMP-1的表达
在大鼠脑缺血0.5h再灌注7天，最后观察日24小时后，用10%
水合氯醛深度麻醉动物后开胸暴露心脏，剪开右心耳，经左心室、升主动脉插入灌胃针并用动脉夹固定，经灌胃针入口连接医用输液器快速冲洗生理盐水约250mL，随后用4%多聚甲醛(4℃，pH7.4)先快后慢灌注约80-100mL，断头取脑后，在4%多聚甲醛中固定6-8h，取视交叉后1-4mm脑块进行常规石蜡包埋，轮转式石蜡切片机连续切片，片厚约4μm。
MMP-9或TIMP-1免疫组化检测的实验步骤如下：
①石蜡切片从烤箱中拿出，用PBS（PH7.4）冲洗3次，每次3分钟。
②配置溶液（30%H2O21份+蒸馏水10份)混匀后将切片放入，室温10分钟以灭活内源性酶，PBS液洗3次，每次3分钟。
③根据两种抗体的要求，对组织抗原进行修复，微波3档15-20分钟
④滴加5%BSA封闭液，室温20分钟，甩去多余液体，不洗
⑤滴加MMP-9（1:200稀释）或TIMP-1（1:200稀释）的第一抗体，每张切片滴入约50μl的稀释液覆盖到组织，4℃过夜。
⑥次日37℃复温45min，PBS（pH7.4）洗3次，每次2分钟。
⑦滴加生物素化山羊抗小鼠IgG，37℃孵育20分钟，PBS（pH7.4）洗3次，每次2分钟。
⑧滴加试剂SABC，37℃孵育20分钟，PBS（pH7.4）洗4次，每次5分钟。
⑨每张切片滴入50-100μl新鲜配制的DAB溶液，室温显色，显微镜下观察，蒸馏水洗涤。
⑩苏木素复染后，经过梯度酒精（70-100%、无水酒精）脱水干燥，二甲苯透明，中性树胶封固。
3、图像分析
图象分析采用HPIAS 2000型图像分析系统进行，所有切片均用同一光强度，同一放大倍数（200倍），观察阳性细胞表达的多少（镜下观察见胞核或胞浆染成棕黄色或棕褐色为阳性)，并且每个标本取3张连续切片观察皮质区相同面积，分析MMP-9和TIMP-1光密度值。
4、统计学分析
所有数据用SPSS17.0软件进行统计分析。数据都以均数±标准差
表示,组间比较均采用t检验，将p﹤0.05设为有显著差异。
实验结果如图1、图2所示：用免疫组化法检测MMP-9和TIMP-1的表达显示：MMP-9、TIMP-1阳性细胞见胞核或胞浆呈黄褐色。模型组MMP-9阳性细胞明显增多，可转形穴位注射川芎嗪药组可明显下调MMP-9表达。可转形穴位注射川芎嗪药组、川芎嗪胶原药线组和川芎嗪药物羊肠线组同时与模型组比较，有显著性差异（P＜0.05）；而可转形穴位注射川芎嗪药组（穴位注射可转形川芎嗪药组）的疗效明显优于川芎嗪药物羊肠线组和川芎嗪胶原药线组（P＜0.05）；川芎嗪胶原药线组与川芎嗪药物羊肠线组比较无显著性差异（P＞0.05）。模型组和三个治疗组均有TIMP-1表达，可转形穴位注射川芎嗪药组（穴位注射可转形川芎嗪药组）呈现高表达状态，与川芎嗪胶原药线组、川芎嗪药物羊肠线组比较有显著性差异（P＜0.05），川芎嗪胶原药线组与川芎嗪药物羊肠线组比较无显著性差异（P＞0.05）。见表1。表1各组大鼠皮质MMP-9、TIMP-1平均光密度值比较（％，）
注：△与模型组比较，P<0.05；▲与可转形穴位注射川芎嗪药线组比较，P<0.05；☆与川芎嗪药物羊肠线组比较，P>0.05
通过本实验，可以看出，该新型药有几个优点，第一，可转形穴位注射川芎嗪药（穴位注射可转形川芎嗪药）对脑缺血再灌注大鼠的脑保护作用明显优于其余两种药线，这可能是可转形穴位注射药的缓慢释放、并且能准确导向病变部位的原因。第二，其操作简单易行，可用简单的穴位注射的方法植入药，但作用类似于埋线。第三，因为药在体内是一个缓慢吸收和释放的过程，可以大大减少埋线频率。说明本发明为穴位注入药治疗疾病提供一种疗效较好、依从性高的新剂型药。
实施例2
与实施例1基本相同，不同之处在于：壳聚糖醋酸溶液的浓度为2wt%(质量)。磷酸氢二钾溶液的浓度为14wt%(质量)。
应用：该可转形穴位注射川芎嗪药，目前被应用于科研实验研究中，观察其对局灶性脑缺血再灌注大鼠皮质区MMP-9、TIMP-1的影响。MMP-9、TIMP-1实验的过程及条件。效果同实施例1。
实施例3
与实施例1基本相同，不同之处在于：壳聚糖醋酸溶液的浓度为2.5wt%(质量)。磷酸氢二钾溶液的浓度为15wt%(质量)。
应用：该可转形穴位注射川芎嗪药，目前被应用于科研实验研究中，观察其对局灶性脑缺血再灌注大鼠皮质区MMP-9、TIMP-1的影响。MMP-9、TIMP-1实验的过程及条件。效果同实施例1。
Claims (4)
1.可转形穴位注射川芎嗪药，其特征在于它由川芎嗪、壳聚糖醋酸溶液和磷酸氢二钾溶液混合而成；各原料的配比为：川芎嗪∶壳聚糖醋酸溶液∶磷酸氢二钾溶液=2毫克∶1mL∶1mL；
壳聚糖醋酸溶液的浓度为2wt%-2.5wt%；
磷酸氢二钾溶液的浓度为14wt%-15wt%。
2.根据权利要求1所述的可转形穴位注射川芎嗪药，其特征在于，壳聚糖醋酸溶液的浓度为2.3wt%。
3.根据权利要求1所述的可转形穴位注射川芎嗪药，其特征在于，磷酸氢二钾溶液的浓度为14.75wt%。
4.一种制备权利要求1所述可转形穴位注射川芎嗪药的方法，其特征在于它包括如下步骤：
1）将壳聚糖溶于0.1M的醋酸溶液中，配制成浓度为2wt%-2.5wt%的壳聚糖醋酸溶液；
2）用去离子水配制浓度为14wt%-15wt%的磷酸氢二钾溶液；
3）上述壳聚糖醋酸溶液、磷酸氢二钾溶液分别于4℃冰箱保存0.5小时；
4）按各原料的配比为：川芎嗪∶壳聚糖醋酸溶液∶磷酸氢二钾溶液=2毫克∶1mL∶1mL，选取川芎嗪、壳聚糖醋酸溶液和磷酸氢二钾溶液混合，得到可转形穴位注射川芎嗪药。
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CN 201210219485 CN102716130B (zh) | 2012-06-29 | 2012-06-29 | 可转形穴位注射川芎嗪药及其制备方法 |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CN 201210219485 CN102716130B (zh) | 2012-06-29 | 2012-06-29 | 可转形穴位注射川芎嗪药及其制备方法 |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| CN102716130A CN102716130A (zh) | 2012-10-10 |
| CN102716130B true CN102716130B (zh) | 2013-10-09 |
Family
ID=46942088
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| CN 201210219485 Expired - Fee Related CN102716130B (zh) | 2012-06-29 | 2012-06-29 | 可转形穴位注射川芎嗪药及其制备方法 |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| CN (1) | CN102716130B (zh) |
-
2012
- 2012-06-29 CN CN 201210219485 patent/CN102716130B/zh not_active Expired - Fee Related
Non-Patent Citations (2)
| Title |
|---|
| 张雪雁，等.壳聚糖温敏凝胶的制备及其影响因素.《2006年上海市医用生物材料研讨会论文汇编》.2006,第9页第4段，第10页第3.1.4节，第12第4.1.3节至第16页. * |
| 王万鉄,等.川芎嗪注射液抗脑缺血-再灌流损伤作用机制的实验研究.《中华急诊医学杂志》.2001,第10卷(第3期),摘要. * |
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| CN102716130A (zh) | 2012-10-10 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| CN103079577B (zh) | 伤口修复剂组合物的制备工艺、管子及装置 | |
| Wang et al. | Insulin-loaded silk fibroin microneedles as sustained release system | |
| KR100483447B1 (ko) | 고체 또는 반-고체의 국부 투입 장치와 비경구적 투약을 위한 서방성 제제와 그 제제의 제조 방법 | |
| AU2010303414B2 (en) | Methods and compositions for skin regeneration | |
| Hached et al. | Biomaterial-assisted cell therapy in osteoarthritis: From mesenchymal stem cells to cell encapsulation | |
| AU2011208709B2 (en) | Hydrogel of microspheres | |
| CN101554369B (zh) | 一种外用复合油纳米乳喷雾剂和滴眼剂及其制备方法 | |
| Lyu et al. | Going below and beyond the surface: Microneedle structure, materials, drugs, fabrication, and applications for wound healing and tissue regeneration | |
| CN102120033A (zh) | 促口腔额面部多种创伤修复的复合生长因子的胶原蛋白缓释载体材料及其制备方法 | |
| CN112807288A (zh) | 一种特异靶向感染部位的中性粒细胞膜仿生纳米材料的制备方法 | |
| WO2014179262A1 (en) | Low molecular weight hyaluronic acid for treating keloid scars, hypertrophic scars and burn scars with contracture | |
| Amourizi et al. | Polymeric and composite-based microneedles in drug delivery: regenerative medicine, microbial infection therapy, and cancer treatment | |
| Yao et al. | Promotion of collagen deposition during skin healing through Smad3/mTOR pathway by parathyroid hormone-loaded microneedle | |
| CN113476666A (zh) | 一种可注射型长效缓释褪黑素的关节软骨修复材料、制备方法及其应用 | |
| CN105263507A (zh) | 使用sdf-1减轻瘢痕形成 | |
| Hou et al. | Near-infrared triggered ropivacaine liposomal gel for adjustable and prolonged local anaesthesia | |
| Chen et al. | Layered GelMA/PEGDA hydrogel microneedle patch as an intradermal delivery system for hypertrophic scar treatment | |
| Katiyar et al. | Novel strategies for designing regenerative skin products for accelerated wound healing | |
| Long et al. | Microneedles for in situ tissue regeneration | |
| Lin et al. | Biodegradable double-network GelMA-ACNM hydrogel microneedles for transdermal drug delivery | |
| Li et al. | Hydrogel-forming microneedles with applications in oral diseases management | |
| CN108587998A (zh) | 一种外泌体、外泌体的制备方法及其在制备皮肤浅表性肿瘤的药物中的应用 | |
| CN106176573B (zh) | 一种可溶性中空微针及其制备方法 | |
| CN102716130B (zh) | 可转形穴位注射川芎嗪药及其制备方法 | |
| Alavi et al. | Revolutionizing Wound Healing: Exploring Scarless Solutions through Drug Delivery Innovations |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| C06 | Publication | ||
| PB01 | Publication | ||
| C10 | Entry into substantive examination | ||
| SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
| C14 | Grant of patent or utility model | ||
| GR01 | Patent grant | ||
| CF01 | Termination of patent right due to non-payment of annual fee | ||
| CF01 | Termination of patent right due to non-payment of annual fee |
Granted publication date: 20131009 Termination date: 20200629 |