CN102697864B - 红茂草或其提取物的新用途 - Google Patents
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Abstract
本发明公开了红茂草或其提取物在制备治疗肝纤维化的药物中的用途。本发明的动物实验结果从血清学到肝组织病理学均证实红茂草或其提取物可使大鼠肝细胞变性坏死程度减轻，这说明红茂草或其提取物具有治疗肝纤维化的生物活性。
Description
技术领域
本发明属于医药领域，具体涉及红茂草或其提取物的新用途，特别涉及红茂草或其提取物在制备治疗肝纤维化的药物中的用途。
背景技术
红茂草学名[Dicranostigma leptopodum(max-im)]，俗称秃子花、秃疮花，又称勒马回。属罂粟科(Papaverales)秃疮花属(Dicranostigma Hook f.et Thoms)植物。二年或多年生草本，植物体含淡黄色汁液。茎2～5条，基生叶多数，茎生叶羽状全裂，簇生，散成莲座状。花1～3朵，呈鲜黄色，排列成聚伞花序，花瓣4；萼片2，早落；蒴果细圆筒形，长4～8cm，粗约4mm，成熟后向茎部裂为两瓣。根为肉质直根。红茂草生于海拔600～1300m的丘陵，草坡、路边、农田埂或墙上、屋顶等处。其耐旱、耐瘠薄等生活习性，在我国主要分布于甘肃、陕西、河南、山西、青海、四川、云南、西藏等省。红茂草在民间全草入药，能清热解毒、消肿止痛、杀虫，治疗扁桃腺炎，咽喉痛、淋巴结核(瘪疠、老鼠疮)，秃疤，疥癣等症。近几年人们对红茂草化学成分、药理作用等方面的研究发现其有广泛的药用价值，主要表现为：（1）抗菌、抑菌作用；（2）抗溶血和改善微循环的作用；（3）对中枢和平滑肌的抑制作用；（4）抗心律失常的作用；（5）对小鼠肝损伤的保护作用；（6）提高机体免疫力的作用。
针对红茂草对小鼠肝损伤的保护作用研究，张昱等（秃疮花有效成分对小鼠CCl4肝损伤的保护作用[J].青海医学院学报,2004,25(1):7-10）研究不同剂量的红茂草注射液对小鼠CCl4肝损伤的保护作用时发现,该制剂能明显降低CCl4引起的血清谷丙转氨酶(ALT)、碱性磷酸酶(ALP)、谷草转氨酶(AST)、乳酸脱氢酶(LDH)和肝脏丙二醛(MDA)水平的升高,并能维持血清超氧化物歧化酶(SOD)水平,使肝脏组织病理变化得以改善。毛爱红等（秃疮花提取物对小鼠免疫性肝损伤的保护作用[J].中国药理学通报，2004，20(28):940-943）发现红茂草提取物对卡介苗(BCG)和脂多糖(LPS)诱导的小鼠免疫性肝损伤具有一定的保护作用。
虽然关于红茂草的药理活性研究的文献较多，然而现有技术还没有报道有关红茂草或其提取物具有治疗肝纤维化的生物活性。
发明内容
本发明的目的在于通过大量试验研究，提供红茂草或其提取物的新用途，尤其提供红茂草或其提取物在制备治疗肝纤维化的药物中的用途。
肝脏遭到各种致病原侵袭时，引起肝脏损害与炎症反应，肝组织免疫系统同时被激活，进行组织修复。肝纤维化是指这种组织修复过程、过度及失控时，肝组织内细胞外基质过度增生与异常沉积所致肝脏结构和肝功能异常改变的一种病理过程。
本发明的动物实验结果从血清学到肝组织病理学均证实红茂草或其提取物可使大鼠肝细胞变性坏死程度减轻，这说明红茂草或其提取物具有治疗肝纤维化的生物活性。
另外，本发明所述的红茂草提取物为红茂草的水提物。
在本发明的一个优选的实施例中，所述红茂草的水提物按如下方法制备而成：将干燥红茂草用乙醇加热回流提取，过滤，滤液弃掉后的剩余药渣，加水加热回流提取，再过滤，滤液浓缩至膏状物，即得。
在本发明的另一个优选的实施例中，所述红茂草的水提物按如下方法制备而成：将干燥红茂草用水加热回流提取，过滤，滤液浓缩至膏状物，即得。
优选地，本发明所述治疗肝纤维化的药物为口服药物。
与现有技术相比，本发明具有如下优点和显著进步：
（1）提供了一种新的开发红茂草或其水提物的制药思路。
（2）本实验的病理学结果表明，红茂草高剂量组大鼠肝细胞变性坏死程度减轻，提示红茂草或其提取物具抗肝纤维化作用。
具体实施方式
以下通过具体实施方式进一步描述本发明。由于已经根据以下优选实施例描述了本发明，因此任何等同替换对于本领域的普通技术人员而言都是显而易见的，且包括在本发明之中。
实施例1 红茂草水提物的制备
干燥红茂草400g，加入5.6L水加热回流提取2h，过滤，滤渣中加入4.8L水再加热回流提取1h，过滤，合并滤液，滤液浓缩至膏状物，即为所述提取物。冷冻干燥抽真空，得红茂草提取物的冻干粉。
实施例2 红茂草水提物的制备
干燥红茂草400g，加入5.6L水加热回流提取1.5h，过滤，滤渣中加入5.6L水再加热回流提取1.5h，过滤，合并滤液，滤液浓缩至膏状物，即为所述提取物。冷冻干燥抽真空，得红茂草提取物的冻干粉。
实施例3红茂草水提物的制备
干燥红茂草400g，加入5.6L的75%乙醇加热回流提取1.5h，过滤，弃掉滤液，滤渣中加入4L的75%乙醇，加热回流提取1.5h，过滤，弃掉滤液，滤渣中加入5.6L纯水加热回流提取2次，合并滤液后浓缩至膏状物，即为所述提取物。冷冻干燥抽真空，得红茂草提取物的冻干粉。
实施例4红茂草水提物的制备
干燥红茂草400g，加入4.8L的85%乙醇加热回流提取1.5h，过滤，弃掉滤液，滤渣中加入4L的85%乙醇，加热回流提取1.5h，过滤，弃掉滤液，滤渣中加入4.8L纯水加热回流提取2次，合并滤液后浓缩至膏状物，即为所述提取物。冷冻干燥抽真空，得红茂草提取物的冻干粉。
实施例5 红茂草水提物对肝纤维化大鼠肝脏纤维增生程度的影响
SPF级Wistar大鼠60只，体重190g~220g，雌雄各半，首次大鼠皮下注射纯CCl4 5ml / kg 体重，以后改为皮下注射CCl4 40%花生油溶液3ml / kg 体重，每3 天1 次，共6周。饲喂正常固体饲料，自由饮水。
造模结束后，大鼠被随机分为空白对照组、模型对照组、红茂草低、中、高剂量组和秋水仙碱组，共6组，每组10只。各组动物分别灌胃给蒸馏水、红茂草低、中、高剂量药液和秋水仙碱溶液，具体按表1的剂量给予相应受试物：
表1. 实验动物分组及给药
| 分组 | 样本量（只） | 剂量 |
| 空白对照组 | 10 | 同体积的蒸馏水 |
| 模型对照组 | 10 | 同体积的蒸馏水 |
| 阳性药组 | 10 | 灌胃秋水仙碱0.2mg·kg-1·d-1的水溶液 |
| 红茂草低剂量组 | 10 | 灌胃20mg·kg-1·d-1冻干粉（实施例3制备） |
| 红茂草中剂量组 | 10 | 灌胃40mg·kg-1·d-1冻干粉（实施例3制备） |
| 红茂草高剂量组 | 10 | 灌胃80mg·kg-1·d-1冻干粉（实施例3制备） |
每天灌胃1次，连用8周，各组末次给药后禁食12 小时，称重，经戊巴比妥钠腹腔注射麻醉，取大鼠右小叶肝脏，剪取约0. 5 厘米厚度肝组织，中性甲醛缓冲液固定，石蜡包埋，切片为5μm厚度。经多级酒精脱水，二甲苯透明，作HE 染色，天狼猩红染色，光镜下拍摄病理组织照片，观察纤维组织增生程度的变化情况。
通过观察病理切片后发现：
空白对照组：大鼠肝组织中肝小叶结构清晰完整，肝细胞索排列整齐，无肝细胞变怀坏死，无炎细胞浸润，无纤维增生。
模型对照组：大鼠肝组织可见肝细胞排列紊乱，肝细胞空泡样变性、坏死，汇管区大量纤维组织增生并有散在炎性细胞浸润，大部分大鼠可见纤维组织增生延伸到肝小叶，分隔肝小叶形成假小叶。
阳性药组：大鼠肝细胞变性坏死减轻，部分大鼠可见假小叶。
高剂量组：大鼠肝细胞变性坏死减轻，部分大鼠可见假小叶。
中剂量组：大鼠肝细胞变性、坏死仍较明显，汇管区纤维组织增生，部分大鼠可见假小叶。
低剂量组：大鼠肝细胞变性、坏死仍较明显，汇管区纤维组织增生，部分大鼠可见假小叶。
光镜下观察，纤维组织增生情况以“+ + + +”为最严重，“－”为无纤维增生。正常组大鼠肝组织切片显示无肝纤维化形成，模型组纤维增生明显，说明模型已造模成功。高剂量组和阳性药组对肝纤维化大鼠均有改善，可明显降低大鼠纤维增生程度(P＜0.01）。各组的Riddit 分析的R 值见表2。
表2各组大鼠组织胶原纤维增生程度分级比较情况（n=10）
| 组别 | - | + | + + | + + + | + + + + | R值 |
| 空白对照组 | 10 | 0 | 0 | 0 | 0 | 0.091 |
| 模型对照组 | 0 | 0 | 1 | 8 | 1 | 0.902$ |
| 阳性药组 | 0 | 6 | 3 | 1 | 0 | 0.417* |
| 红茂草低剂量组 | 0 | 2 | 3 | 5 | 0 | 0.638 |
| 红茂草中剂量组 | 0 | 3 | 5 | 2 | 0 | 0.564 |
| 红茂草高剂量组 | 0 | 7 | 2 | 1 | 0 | 0.385* |
与空白对照组比较，$ P＜0.01；
与模型对照组比较，* P＜0.01。
本实验的病理学结果表明，红茂草高剂量组大鼠肝细胞变性坏死程度减轻，提示红茂草或其提取物具抗肝纤维化作用。
Claims (1)
1.红茂草提取物在制备治疗肝纤维化的药物中的用途，所述提取物为红茂草的水提物，所述红茂草的水提物按如下方法制备而成：干燥红茂草400g，加入5.6L的75%乙醇加热回流提取1.5h，过滤，弃掉滤液，滤渣中加入4L的75%乙醇，加热回流提取1.5h，过滤，弃掉滤液，滤渣中加入5.6L纯水加热回流提取2次，合并滤液后浓缩至膏状物，即为所述水提物。
2．红茂草提取物在制备治疗肝纤维化的药物中的用途，所述提取物为红茂草的水提物，所述红茂草的水提物按如下方法制备而成：干燥红茂草400g，加入4.8L的85%乙醇加热回流提取1.5h，过滤，弃掉滤液，滤渣中加入4L的85%乙醇，加热回流提取1.5h，过滤，弃掉滤液，滤渣中加入4.8L纯水加热回流提取2次，合并滤液后浓缩至膏状物，即为所述水提物。
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