CN102655870A

CN102655870A - 预防和治疗动物胃肠道疾病及各类中毒症的兽用药物组合物及其方法(变体)

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Publication number: CN102655870A
Application number: CN2010800425162A
Authority: CN
Inventors: 亚历山大·弗拉基米罗维奇·季科夫斯基; 塞奇·维克托罗维奇·特列季亚科夫; 奥列格·亚历山大德罗维奇·图车耶夫
Original assignee: Individual
Current assignee: Individual
Priority date: 2009-09-23
Filing date: 2010-09-21
Publication date: 2012-09-05
Also published as: EA022957B1; RU2440121C2; UA99582C2; EA201200352A1; EP2481413A4; BR112012006515A2; WO2011037495A1; RU2009135348A; US20120196811A1; EP2481413A1

Abstract

本兽用药物组合物用于治疗动物的胃肠道疾病和各类中毒症，该药物组合物包括作为活性成分的水解木素和益生元，该益生元选自：乳果糖，低聚果糖，半乳糖和菊粉，该药物组合物剂型便于加入配制饲料使用，具有占质量30-95％的木素和占质量5-50％的益生元，剂型为粉剂或颗粒剂。预防和治疗动物(包括禽类)各类中毒症(包括真菌中毒症)的方法是，给动物喂食混有上述兽用药物组合物的配制饲料，每吨配制饲料中加入2-4.5千克本药物组合物，与配制饲料中真菌毒素的含量成正比。预防和治疗动物(包括牛和猪)胃肠道疾病(包括消化不良、肠胃炎、肠炎、结肠炎、肝炎和急性黄色肝萎缩及其中毒性疾病)的方法是，在动物进食30±10分钟内令其单独或集体口服混有权利要求1的本兽用药物组合物的饮水或饲料，每天1-2次，每次剂量为0.2-0.3克药物/每千克动物体重。从而确保提高治疗的有效性并消除使用水解木素，活性碳和其他已知的吸附剂的上述缺陷。将木素和益生元并用于对动物的预防和治疗，有助于取得积极的综合疗效：将吸附剂的副作用最小化、恢复胃肠道的自我平衡功能、使新陈代谢正常化，从而最终质的提高畜牧业的饲养和经济指标。

Description

预防和治疗动物胃肠道疾病及各类中毒症的兽用药物组合物及其方法(变体)

技术领域

本发明涉及药学领域，更具体地，涉及兽用药领域，可用于预防和治疗动物的胃肠道疾病和各类中毒症，动物包括禽类、牛和猪，各类中毒症包括真菌中毒症、消化不良、肠胃炎、肠炎、结肠炎、肝炎和急性黄色肝萎缩及其中毒性疾病。

背景技术

在畜牧业集约化和农场经济发展的条件下，伴随着动物品种和生产率的改善，我们应特别关注提高动物幼仔的成活率、同时提高动物的生产率。许多疾病，首先是胃肠道疾病(主要是急慢性消化不良)使得家畜幼仔(包括仔牛、仔猪)的死亡率提高。这些家畜疾病具有普遍性并带来大量经济损失，上述经济损失常因家畜生长期和患病家畜成熟期内幼仔的死亡和生产率的显著降低而出现。

由于此类疾病病因繁杂、分布范围广及其他因素，问题很难得到解决。在这种情况下，有必要寻找适合预防此类疾病的价廉特效药物。

白俄罗斯国内外的研究证实，由于生态环境复杂、不遵守家畜喂、养、用技术规范，以及缺乏用药监督，造成家畜自我平衡功能被破坏，机体出现破坏性病变。

在对动物的所有病理学研究中，相当数量的疾病属于非传染性疾病。家畜幼仔疾病在动物病理学中占有特殊地位。幼仔在出生后早期经常患病，这证明种畜患有因新陈代谢被破坏而出现的疾病。此外，应认识到，生长期动物的新陈代谢一般相当旺盛，因此其对被破坏的喂、养条件相当敏感。活生物体只能在其内部环境良好时才能正常运行(V.V.米秋申，《新生仔牛的消化不良症》，莫斯科，俄罗斯农业工业出版社，1989年，第123页；I.M.卡尔布特、L.M.皮沃瓦尔、A.G.乌里扬诺夫、V.M.谢格洛夫，《动物消化器官自身免疫失调的病理形态学和诊断学》//工业畜牧业中病理形态和诊断问题：全苏科学大会材料。维尔纽斯，1986年，第172-173页)。

兽医学著作中正在形成“内因性中毒”这个概念。

内因性中毒的致病因素比较复杂，正如众多疾病显示的那样，包括机体几乎所有器官和系统新陈代谢中的代谢性和功能性障碍。内因性中毒发展机制的基础是分解代谢过程优于合成代谢过程，这导致机体调节系统的代偿失调和该系统效应器成分(例如蛋白水解酶、激肽及其他血管活性肽、蛋白质脱水生物活性产物、炎症介质等)的毒素集结。

已有著作(S.S.阿布拉莫夫等，《动物普通内科-维捷布斯克》，维捷布斯克荣誉勋章国家兽医科学院出版，2006年，第217页；I.M.卡尔布特、L.M.皮沃瓦尔、A.G.乌里扬诺夫、V.M.谢格洛夫，《动物消化器官自身免疫失调的病理形态学和诊断学》//工业畜牧业中病理形态和诊断问题：全苏科学大会材料。维尔纽斯，1986年，第172-173页)表明，新生期和生长期动物对正在发生发展的中毒症最为敏感。新生动物这种高敏感性的原因之一是：与人类不同，在出生后最初几天里，新生动物一部分血液从内脏不经过肝脏的毛细血管网，而是通过开放性的静脉直接进入后腔静脉，然后从后腔静脉进入总血管网。家畜幼仔机体内毒素的过剩累积，以及解毒生理系统排毒的低效性，都必然要求使用特殊方式方法进行高效解毒治疗。

世界范围内工业畜牧业的另一显著问题是各类中毒症，其中的真菌中毒症是普遍存在的问题。根据有关著作的数据，不少于25-30％的配制饲料被真菌毒素污染。现代品种的家畜和禽类对环境的消极因素高度敏感，而中毒症的出现和慢性发展可最终导致相当程度的经济损失，因此，解决此类问题的形势不容乐观。此外，包括真菌毒素在内的很多毒素具有诱变和致癌属性，而且这些毒素可以通过动物源的食品进行传递并破坏人的身心健康。

我们的祖先以前就知道一些排解机体毒素的方法：使用灰、木炭和某些硅酸铝粘土来中和毒性作用。木炭经过实践的考验传承到上世纪70-80年代被正式登记评定为活性碳。随后广为人知并在医学实践中广为使用。基于合成的活性炭建立的微球肠道吸附剂的合成和研究的工作大大促进了其在医药上的应用。粉末状活性碳吸附剂的使用大大降低了木炭对胃肠道黏膜的损伤。80年代末期至90年代中期，除了基于改良的木炭化合物，基于高分散硅氧化物(有机聚合物单体)、纤维状热解纤维素(聚乙烯)和其他一系列天然/合成聚合物的肠道吸附剂被批准用于医学实践。现在，在兽医领域也有关于将木素、农用吸附剂、动物吸附剂、植物土壤和SV-1(CB-1)用作肠道吸附剂的报道。

已知含有木素的药物组合物被用于治疗动物疾病(SU № 803157，RU № 2096033，2141329，2302866)。

然而，上述药物组合物不具有必要的治疗特性、疗效不佳。

已知通过口服一种药物组合物，即肠道吸附剂-水解木素水悬浮液来预防和治疗动物胃肠道疾病的方法(RU № 2297214，首版)。

然而，在对毒素吸附具备显著积极特性的同时，上述药物组合物对畜牧业也有相当的副作用：在口粮中加入足够有效吸附毒素的此类药物，同时也会吸附饲料中部分生物活性成分(维他命、必需氨基酸、矿物质等)，这会对动物和禽类养殖的生产指标产生不良影响。将肠道吸附剂设定为水悬浮剂型的方法几乎不适合于在畜牧业领域广泛推广。

发明内容

本发明的目的是提供一种预防和治疗动物胃肠道疾病、各类中毒症的有效的药物组合物和使用上述药物组合物的治疗方法。

本发明解决上述技术问题的技术效果在于提高疗效，以及克服水解木素、活性炭和其他已知吸附剂使用过程中的不足。将木素和益生元并用于对动物的预防和治疗，有助于取得积极的综合疗效：将吸附剂相关的副作用最小化、恢复胃肠道的自我平衡、使新陈代谢正常化，从而最终质的提高畜牧业的饲养和经济指标。

本发明的用于治疗动物胃肠道疾病和各类中毒症的兽用药物组合物的实质是，本药物组合物包括作为活性成分的水解木素和益生元，该益生元选自：乳果糖，低聚果糖，半乳糖和菊粉，该药物组合物剂型便于加入配制饲料使用，具有占质量30-95％的木素和占质量5-50％的益生元，优选剂型为粉剂或颗粒剂。

本发明在动物(包括禽类)的各类中毒症(包括真菌中毒症)的预防和治疗方法方面的实质是，给动物喂食混有根据权利要求1的上述兽用药物组合物的配制饲料，每吨配制饲料中加入2-4.5千克本药物组合物，与配制饲料中真菌毒素的含量成正比。

本发明在动物(包括牛和猪)胃肠道疾病(包括<中毒性>消化不良、肠胃炎、肠炎、结肠炎、肝炎、急性黄色肝萎缩)的预防和治疗方法的实质是，在动物进食30±10分钟内令其单独或集体口服混有权利要求1的兽用药物组合物的饮水或饲料，每天1-2次，每次剂量为0.2-0.3克药物/每千克动物体重。

本药物组合物在销售时使用的商标名称为“Ecofiltrum”，可采用水悬浮剂型，或者可将木素/益生元混入饲料，更加方便使用。

下面是本发明的一组实施例。

组合物1“Ecofiltrum800+200”

-水解木素80％

-乳果糖20％

组合物2“Ecofiltrum900+100”

-水解木素90％

-乳果糖10％

附图说明

下面是本药物组合物和治疗方法的实验性使用结果。该结果证实了取得上述技术效果的可能性。

图1显示的是患急性黄色肝萎缩仔猪肝脏的宏观图，图2显示的是健康(A)和患急性黄色肝萎缩(B)仔猪肝脏的宏观图，图3显示的是患肝炎仔猪肝脏的微观图，图4显示的是患急性黄色肝萎缩仔猪肝脏的组织切片图(蛋白质、脂肪和水肿营养不良、管结构显著离散、肝细胞渐进性坏死和坏死、苏木精-曙红<10×20>)，图5显示的是因患急性黄色肝萎缩而用Ecofiltrum药剂治疗的仔猪肝脏组织切片图(微滴状脂肪营养不良、间隙组织病灶性淋巴-巨噬细胞不显著浸润、管结构离散、苏木精-曙红<10×15>)，图6显示的是患肠胃炎和急性黄色肝萎缩仔猪肝脏组织切片图(肝细胞<微滴状>蛋白质和脂肪营养不良、管间窦状腺膨胀、苏木精-曙红<10×30>)，图7显示的是因患肠胃炎而用Ecofiltrum药剂治疗的仔猪肝脏组织切片图(苏木精-曙红<10×20>、肝管间淋巴-巨噬细胞不显著浸润、肝区不显著膨胀、肝细胞蛋白质营养不良、苏木精-曙红<10×30>)，图8显示的是患肝炎仔猪肝脏组织切片图(大病灶性淋巴-巨噬细胞浸润、肝细胞渐进性坏死和坏死、肝细胞蛋白质营养不良、管结构离散、苏木精-曙红<10×25>)，图9显示的是因患肝炎而用Ecofiltrum药剂治疗的仔猪肝脏组织切片图(淋巴-巨噬细胞不显著浸润、管结构局部离散、肝细胞蛋白质营养不良、苏木精-曙红<10×25>)。

具体实施方式

1.实验1

对“Ecofiltrum”组合物进行研究。研究客体为1月龄仔猪。研究课题为临床状态、临床试验指标、血检指标、病理解剖学和组织学研究结果。

研究的主要目的是检验Ecofiltrum药剂对仔猪肠胃炎、急性黄色肝萎缩、肝炎的疗效。

本研究综合采用了临床学、血液学、生物化学、病理解剖学和组织学研究方法。

本研究的科学创新在于首次检验了Ecofiltrum药剂对仔猪肠胃炎、中毒性急性黄色肝萎缩、肝炎的疗效。

1.1实验材料和方法

研究于2007年12月和2008年1-3月在白俄罗斯维捷布斯克州奥尔尚卡区国有养猪企业“周年农业综合体”、该区兽医实验室，以及维捷布斯克荣誉勋章国家兽医科学院病理解剖学和组织学教研室实验室、实用兽医和生物科学科研所诊断室进行。

实验共分4个组，每组15只1月龄仔猪。第1、2、3组仔猪分别患有急性黄色肝萎缩、肝炎和肠胃炎。实验组按照假定相似原则和患病程度逐步形成。第4组为健康仔猪。

患急性黄色肝萎缩的仔猪临床表现为一般性沉闷、周期性短时粪便稀薄(呈浅棕色)、肌无力、偶有抽搐、呕吐、厌食和某些情况下的四肢发绀。病仔猪在身长和发育上都劣于同龄健康仔猪。

患肝炎的仔猪临床表现为腹泻、沉闷(可至酣睡状态)、食欲下降(可至厌食状态)、心动过速和呼吸困难。猪体质量下降，但不如患急性黄色肝萎缩仔猪那样显著。粪便呈浅黏土色。

患肠胃炎的仔猪临床表现为沉闷、食欲下降和口渴。患病仔猪分成几小群聚集，鬃毛蓬松，部分仔猪躺倒。仔猪在进食时的行为特点明显：每日最初几次喂食时，仔猪争相进食，之后快速远离食槽并低头站立片刻，两腿叉开，也就是说出现胃痛症状。排便次数增多。粪便颜色从淡黄色变为灰褐色并带有酸臭味和黏液，有时伴有血丝。

解剖尸体(包括解剖带有肠胃炎、急性黄色肝萎缩、肝炎典型临床症状而被杀死的仔猪尸体)并对其肝脏进行组织学研究有助于更加准确地区分上述疾病(A.V.扎罗夫，1984年；A.V.先科等，2001年)。因此，在急性黄色肝萎缩条件下，仔猪肝脏稍显膨胀，组织松软，呈亮黄色或土黄色(图1)。

在最为典型的急性黄色肝萎缩的症状中，需要注意到肝脏出现斑点(马赛克状)这一特点。肝脏变为浅棕色和黄红色。不同色块分布不均。肝脏膈面的变化更为明显。在暗红色块可以很好地观察到器官的叶状结构，同时肝小叶中部因中央静脉膨胀而充血(图2)。

在薄壁组织的肝炎条件下，肝脏充血相当明显。有来自肝门淋巴腺的反应。肝脏的松弛度和糙度较不明显，呈灰黏土色或暗红色(图3)。

在肠胃炎条件下，肝脏内有退变现象。同时，心肌和肾脏也有变化。胃黏膜肿胀、松散、充血，偶有出血，被较稠黏液覆盖。还能观察到糜烂和溃疡。

在治疗前和治愈后，都从各组仔猪体内提取血液用于血液学和生物化学研究。确定各项血液指标并将其分为下列各组(表1)：

-用于研究色素代谢、蛋白质、糖、脂质、维他命和矿物质的样值；

-用于监控血液特定肝脏酶活性的样值；

-用于研究解毒功能的样值；

-用于分析排泄功能的样值。

表1：血检指标和实验1使用的方法

使用含有水解木素和乳果糖的Ecofiltrum药剂对所有患病仔猪进行治疗，剂量为0.3克药物/每千克动物体重，1天1次，直至治愈。根据临床症状的消失、食欲的恢复、实验室指标的向好趋势来判断仔猪是否痊愈。疗程结束、临床显示痊愈后，每组监测式宰杀仔猪一只，收集材料用于组织学研究。

所有实验室研究均在维捷布斯克荣誉勋章国家兽医科学院病理解剖学和组织学教研室实验室、实用兽医和生物科学科研所诊断室进行。

1.2研究结果

施以上述治疗后，患肠胃炎的仔猪在1-2天后恢复了食欲，2-3天后脱水症状消失(眼球回缩、皮肤弹性恢复)。腹泻在3-4天后停止。

患急性黄色肝萎缩仔猪的病情持续了5天，通过治疗，第2组仔猪肝炎的临床症状在4-5天后消失。

对血液的临床分析表明，各实验组仔猪的血红蛋白浓度和白细胞数量在治疗临近结束时都有下降。比如，第1-3组仔猪的血红蛋白浓度在实验结束前分别从94.75±2.076克/升降至89.1±2.945克/升、从91.46±3.039克/升降至83.1±1.45克/升、从101.5±5.35克/升降至85.6±2.57克/升(P＜0.01)；而白细胞数量分别从26.16±0.584×10⁹/升降至15.15±0.465×10⁹/升、从25.86±0.548×10⁹/升降至16.59±0.281×10⁹/升、从17.9±1.70×10⁹/升降至16.90±0.229×10⁹/升(P＜0.01)。这说明上述经治疗的仔猪的血浆指标在恢复、炎症在消失。

对血液的生物化学研究显示出更加显著的积极变化。表2显示的是用于判断受治仔猪的蛋白质、色素和脂肪代谢状态，以及肝脏特定酶活性的主要指标动态趋势。

分析表2可得出结论：通过治疗，仔猪肝脏实质机能得到恢复。作为脂质代谢指标的胆固醇的下降可以说明这一点。在治疗过程中，肝脏特定酶(谷草转氨酶AsAT、丙氨酸转氨酶AlAT、碱性磷酸酶AP)活性的稳定降低证明，血液血清中酶的活性也快速恢复正常标准，这首先是肝细胞“复活”的结果。实验组仔猪胆红素浓度的稳定下降说明仔猪细胞溶解综合症症状正在消失。随着该康复过程，乳清蛋白质正向变化(白蛋白分数增大)，这就意味着合成白蛋白的肝功能的恢复，并同时调整β-、γ-球蛋白水平。所有这些变化都表明受治仔猪的肝脏间叶细胞基质的抗原敏化作用显著降低。

组织学研究结果同样证明治疗措施的有效性。如果说在急性黄色肝萎缩病情初期可以观察到较高程度的脂肪、蛋白质和水肿营养不良、核固缩和核破裂、管结构离散(图4)等中毒症在组织病理学方面的典型症状(A.V.扎罗夫，1984年；M.S.扎科夫等，1983年；T.B.Goehring等，1984年)的话，那么在使用肝吸附剂SV-1后，营养不良症状表现得不再明显(主要是微滴状脂肪营养不良)。管结构得以部分修复，这主要得益于肝小叶淋巴细胞和巨噬细胞浸润的降低(图5)。

表2：实验期间仔猪血液血清部分生化动态指标(M±m)

注：^*与治疗前相比，P＜0.001

^**与治疗前相比，P＜0.01

在患肠胃炎条件下，与中毒性急性黄色肝萎缩患病初期观察到的情况相比，仔猪肝脏的变化要少得多。然而，放大10×30，发现肝细胞蛋白质和脂肪(微滴状)营养不良症状。肝区(肝管间窦状腺)因淋巴细胞和巨噬细胞浸润而膨胀(图6)。上述浸润程度在对仔猪使用肠道吸附剂后明显降低，管间窦状腺某种程度的缢缩也说明这一点(图7)。同时，实际上肝脏各处都出现程度较低的肝细胞(蛋白质)营养不良。

在患肝炎条件下，使用Ecofiltrum药剂后，仔猪机体炎症的严重性下降。如果说在患病初期还能在仔猪身上发现大病灶性淋巴-巨噬细胞浸润和小叶间结缔组织水肿的话(图8)，那么治疗后已可以观察到肝结构的修复性再生进程，少量的浸润、肝细胞渐进性坏死病灶和肝管离散的减少都可以说明这一点(图9)。

1.3结论

1.在治疗仔猪急性黄色肝萎缩、肝炎、肠胃炎(包括中毒性上述疾病)方面，Ecofiltrum药剂具有很好的疗效。用药剂量为0.3克药物/每千克动物体重，每天一次，疗程直至病症消失。

2.使用Ecofiltrum药剂后，患急性黄色肝萎缩仔猪的临床症状平均在5天后开始消失。在此期间，变化最多的实验室血液指标要么恢复正常标准，要么出现正常化的积极趋势。肝脏的形态学状态也得以恢复。

3.使用Ecofiltrum药剂后，患肝炎的仔猪平均在4-5天后开始康复。仔猪肝脏出现积极的再生进程，这首先是炎症缓解的结果，表现在白细胞数量的减少和肝细胞溶解强度的降低。

4.患肠胃炎仔猪的腹泻和机体脱水症状在用药3-4天后开始消失。肠道消化吸收进程恢复，导致蛋白质代谢和肝脏形态-功能状态正常化。

综上，基于治疗效果和一系列血液生化检测结果，可以得出结论：Ecofiltrum药剂是治疗(病因疗法)仔猪中毒性急性黄色肝萎缩、肝炎和肠胃炎的有效药物。

实验2

这是一次新的科学研究。实验目的是：研究预防和治疗结合型慢性真菌中毒症的Ecofiltrum药物组合物(定量加入肉用雏鸡配制饲料)的疗效，并与现有同类药物进行比较；确定上述药物组合物，即Ecofiltrum药剂的最优成分和剂量。

2.1实验材料和方法

为完成上述实验任务，在社会非政府组织“全俄家禽科研技术院扎戈尔斯基育种实验所动物饲养场”进行该科学生产实验。实验客体是Cobb-Avian-48肉用雏鸡。基于假定相似原则将上述肉用雏鸡分为7个组(2个对照组和5个实验组)，每组38只。给肉用雏鸡喂食充足的、营养成分均衡的干配制饲料，营养参数符合全俄家禽科研技术院的推荐值(2006年)。配制饲料的配方见附件1(第39页)。肉用雏鸡在5日龄前喂食“零”口粮，从第6天开始喂食实验用的配制饲料。肉用雏鸡的饲养条件符合畜牧业通行标准。实验期为5周(35天)。

绝大多数情况下在饲料原料中可以发现真菌毒素，甚至少量的真菌毒素也可以给专业的畜牧业企业带来很大损失。对有关著作的研究表明，保障饲料安全的最有效方法之一是使用吸附剂。毫无疑问，作为外导疗法的一环和一种独立的体内解毒方法，肠道吸附剂的使用具有很大前景，因为将动物消化道毒性物质吸聚并降低这些物质在血液中的浓度可以显著改善家禽的健康状况。这也是吸附剂在慢性病显性期发挥效力的生理学基础。

同时，最近一段时间，人们越来越重视正常菌群在保护机体免受外生毒素和基质、代谢产物内生毒素侵害方面的作用。考虑到消化道所起的作用，应特别注意到，肠道细菌菌群是外源物从消化道进入机体的第一道屏障，即“新陈代谢器官”。细菌扮演着生物吸附剂的角色，与生化酶和免疫系统一道参与解毒外源物的进程，也就是说，与其一道创造了一整套机制。这套机制不仅包括预防有毒物质的吸入，而且包括参与有毒物质的微生物分解进程。因此，为缓解真菌中毒症症状和最大程度保护机体，在有毒配制饲料中加入益生元类药剂与使用吸附剂具有同样的合理性，益生元是不易消化的食品添加剂，可以改善适应性共生微生物菌群的营养状况、促进其数量非特异性增加。

实际上，同样应特别考虑下列情况：使用一种药物治疗多类营养不良症有时效果很差，而使用最大剂量的该种药物则会引起一系列副作用。同时，合理使用多种成分的药物组合物可以更好地控制中毒进程。这种方法从很多角度看都很合理。然而，重要的不是在一种药物组合物中一下加入数种生物活性物质，而是确定这些活性物质的有效剂量，使花费最小化而药物成分间的调整作用最大化。使不同物理化学属性的药物成分相互激发药性，从而得到整体上的协同作用，类似于这种关于预防疾病的战略思维具有先天的通用性，有助于显著降低广谱外源物的消极影响。

考虑到上述情况，在实验过程中研究了在肉用雏鸡配制饲料中加入3种型号的Ecofiltrum药剂的可能性问题。上述Ecofiltrum药剂由“Leksir”有限责任公司的专家研制，药剂中水解木素与益生元的剂量比例各不相同。为此，给第1对照组(组1)雏鸡喂食不含真菌毒素的基本口粮(BR₁)，口粮的营养参数符合全俄家禽科研技术院的推荐值(表3)。给第2对照组(组2)喂食与组1类似的口粮(BR₂)，不过组2的饲料中含有可导致雏鸡生产率显著下降的真菌毒素(黄曲霉毒素B₁-0.087毫克/千克[3.4MRL]、赭曲霉毒素A-0.16毫克/千克[3.2MRL]、T-2毒素-0.39毫克/千克[3.9MRL]和烟曲霉毒素B₁-11.5毫克/千克[2.3MRL])。上述小型真菌的次级代谢物在俄罗斯中部地区大部分家禽企业中最为常见，并通过以下方式被加入配制饲料：将含有4种产菌毒株(禾谷镰刀菌、枝孢镰刀菌、串珠镰刀菌和黄曲霉)的玉米种子及其有毒代谢产物以真菌生物量形式加入配制饲料；或者，将实验室条件下产生的、相应真菌毒素的精选纯净提取物加入配制饲料。除了上述毒素生产菌株，实验组雏鸡口粮中不含任何其他外源物。

表3：实验2方案

第3-5实验组雏鸡的配制饲料被真菌毒素污染，但加入了不同水平的木素(1.0千克/吨、2.5千克/吨和4.0千克/吨)并配以乳果糖(0.5千克/吨)。3种型号的Ecofiltrum商业药剂，其中，成分的用量配比分别为2∶1、5∶1和8∶1。应当指出，若想全面研究某种型号Ecofiltrum药剂的效果，必然要求比对现有同类药剂。因此，在进行科学生产实验的过程中，增加了两个实验组，其中一组(组6)使用了最大量的水解木素(4.0千克/吨)，并配以另一种益生元(1.0千克/吨的低聚果糖)；而第7实验组则使用了与第6实验组同等数量(4.0千克/吨)的另一种水解木素同类物“聚乙烯”

(“Sayntek”股份公司生产)，不同的是，本型号聚乙烯含有大量水分(可至30％)且不含任何生物活性添加剂¹(1本科学生产实验所需数量的“聚乙烯”由“Leksir”有限责任公司提供)。在配制饲料制备阶段，通过逐步混合的方法将上述所有治疗和预防类药剂加入基本口粮中。

在雏鸡饲养后期，为研究口粮中的营养物质的消化吸收率，确定真菌毒素和维他命的排出情况，按照《家禽饲养科学研究守则》进行了消化实验。为此，在5周龄时从每组中挑选出3只公(♂)肉用雏鸡。消化实验分为两期：预试期共5天，核计期共3天。分别记录每一只雏鸡所食饲料和所排粪便的数量及化学成分。

科学生产实验结束后，进行生理生化研究。为完成计划分析量，按照《生理生化科学研究守则》，在36日龄时每组宰杀8只雏鸡(4母♀+4公♂)。血液、食糜和肝脏样本在宰杀时提取。

生化研究在全俄家禽科研技术院国家科研所下属的真菌中毒学认证实验室(认证证书：№ ROSS RU.00001.21PCH64)和实验中心进行。

记录的指标

畜牧学指标：

-雏鸡的成活率(每天记录死亡雏鸡的数量和死亡原因)；

-1日龄、3周龄和5周龄活鸡的体重(称重每只雏鸡)；

-日均进食量(每天记录，按整组计)；

-雏鸡饲养末期的日均增重量和每增重1千克活鸡体重耗费的饲料量(通过生长末期计算)(饲料转化率)；

-按照公式计算肉鸡的欧洲生产率指数(EBPI)：{(活鸡体重<千克>×成活率<％>)∶(饲养时间<天数>×饲料转化率<千克/千克>)}×100％

生理-生化指标：

-配制饲料营养物质的消化吸收率和真菌毒素的排出率；

-饲料和粪便的总氮(凯式法)；

-饲料的粗蛋白质(计算法)(N×6.25)；

-粪便的粗蛋白质(季式法)(N×6.25)；

-粗脂肪(索式法)；

-饲料和粪便的粗纤维(亨年伯格-肖曼酸碱水解法)；

-脂溶性维他命A和E(松香油和α-生育酚)(带紫外线检测的微柱正常相高效液相色谱法，B.D.Kalnitsky)；

-水溶性维他命B₂(核黄素)(荧光法)；

-饲料、粪便和肝脏中的真菌毒素(固相竞争性酶免疫测定法)(EIA)(G.P.Kononenko)；

-血浆总蛋白质(双缩尿法)；

-肝脏核酸(DNA+RNA)(西式法)；

-血浆葡萄糖(葡萄糖氧化酶法)；

-血浆总胆固醇(伊式法)；

-肝脏丙酮酸(安式法)；

-血液学指标(血红蛋白-氰化金属血红蛋白法，红细胞-用Camera Goryaeva计算，血细胞比容-毛细血管血液离心法)；

-小肠和大肠乳酸菌(乳酸杆菌和双歧杆菌)、条件性致病微生物菌群(肠杆菌)含量(选择培养基培养法)；

-非特异抗药性指标(血浆溶菌酶-浊度滴定法，血浆杀菌性-O.V.斯米尔诺娃和T.A.库兹米娜法，自然<正常>凝集素滴度<大肠杆菌>-米秋什尼科夫式凝集反应法)；

-大肠内容物的滴定酸度和乳酸含量(I.Gutmann和A.W.Wohlefeld法)；

利用个人电脑和Microsoft Excel 9.0，通过变分统计学方法(Student’s t-tests)对实验中所获数据进行生物计量学研究。

2.2研究结果和论述

5周的雏鸡养殖结果(表4)表明，进食基本口粮的第1对照组中所有雏鸡的成活率均处于很高水平(96-97％)且没有受到饲料因素的影响(孵化异常是发生死亡的主要原因)。整体来看，这种成活率完全符合此类雏鸡的标准并证明饲养场实验室“上佳”的兽医和卫生水平。

含有上述含量(组2)的两种镰刀霉(T-2毒素和烟曲霉毒素B₁)和两种曲霉(黄曲霉毒素B₁、赭曲霉毒素)的配制饲料引起的慢性真菌中毒症特点是：雏鸡成活率显著下降(下降了18.5％，P≤0.02)。雏鸡主要在饲养初期(前21天)死亡，死亡的主要是身体孱弱(营养不良)的雏鸡，而且其中大部分雏鸡都有此类真菌中毒症的典型病理解剖变化：口腔和嗉囊有大面积干酪状坏死斑、充血、肝脏肿大、胆管和胆囊肿大、消化道黏膜大量出血、砂囊黏膜表面发干密实、肺部有水肿现象、积水性心包炎、脾脏和胸腺病变萎缩、肾部有白色絮状覆盖物、肠炎、泄殖腔组织炎症、尿酸素质。第3-5组雏鸡(进食不同型号的Ecofiltrum药剂)的成活率有明显上升之势：随着药物组合物剂量的增加(从1.5千克/吨到4.5千克/吨)，成活率也分别提高了5.3％、10.6％和13.2％(P≤0.02)。有意思的是，第5和6组雏鸡的成活率分别提高了5.3％和2.7％(P≤0.10)，都要高于服用相同剂量(4千克/吨)“聚乙烯”那组(组7)同龄雏鸡的成活率指标。这毫无疑问表明，使用综合疗法治疗真菌中毒症要比单纯使用一种且不加乳果糖(0.5千克/吨)和低聚果糖(1.0千克/吨)的有机吸附剂具有实践上的合理性。

研究结果同样表明，在配制饲料质量不高和死亡率极高的大背景下，真菌有毒代谢产物的消极影响最明显地表现在对实验组雏鸡生长效率的抑制方面。比如，第2(阴性)对照组(组2)中3周龄(低18.7％，P≤0.001)和5周龄(低17.4％，P≤0.001)雏鸡的体重都要低得多。从畜牧学角度看，这完全符合镰刀霉和曲霉类衍生真菌毒素(T-2毒素、烟曲霉毒素B₁、黄曲霉毒素B₁、赭曲霉毒素)的衍生物对禽类机体的联合和协同效应的典型变化。

我们对公母雏鸡的数量比例已有所考虑，即50％公♂+50％母♀，在此基础上，我们计算出进食3种型号Ecofiltrum药剂的肉鸡平均体重(表2)，结果表明，上述三组雏鸡3周龄和5周龄时的平均体重明显增加：比阴性对照组(组2)雏鸡的平均体重分别增加了4.3-10.3％和4.7-12.9％(P≤0.10-0.001)，但是同时，比第1对照组(口粮中没有真菌毒素)雏鸡的平均体重还是要分别低17.5-13.1％和13.7-6.7％。不过还是要看到，在本指标的对比上，在整个饲养期服用最大剂量(4.5千克/吨)Ecofiltrum药剂的第5实验组雏鸡表现得更为出色。

同时，有必要指出，与阴性对照组(组2)相比，第4和第6组雏鸡(分别进食“2.5千克/吨的木素+0.5千克/吨的乳果糖”和“4.0千克/吨的木素+1.0千克/吨的低聚果糖”)的体重指标从统计角度讲很显著、从很多方面看很相似，这说明尽管这两种药物组合物的结构和成分不同，但仍有相似的生理活性。

因此，如果将真菌毒素的消极作用(表现为雏鸡体重相应下降17.4％)看作是100％的话，那么我们研究的药剂对外源物致命后果的“缓解”(“补偿”)能力可以换算成下列数字：组3-21％、组4-40％、组5-61％、组6-50％和组7-47％。雏鸡体重是评价慢性真菌中毒症条件下受测药剂药效的基本标准。但是，应该考虑到：体重指标在不同性别、不同年龄和因酶系统及保护和适应机制而处于不同发育阶段的雏鸡中分布得极不均衡。为避免肆意解释数据，我们对欧洲生产率指数(EBPI)进行了类似的计算，该指数不仅仅是一个综合了雏鸡体重和成活率的客观指标，也是工业家禽业条件下雏鸡饲养最有效和最需要的生长估计指标。

科学生产实验结果表明，在饲养末期，含有最大剂量木素的Ecofiltrum药剂一直稳稳领先(61％)。尽管雏鸡的成活率和体重数值不一，但组4和组6中的药剂(分别为“2.5千克/吨的木素+0.5千克/吨的乳果糖”和“4.0千克/吨的木素+1.0千克/吨的低聚果糖”)在总抗毒效果方面牢牢占据第二位(即50-53％)。使用最大剂量的已知“聚乙烯”则显得不太可取(41％)，而EF-1药剂(木素含量最少)则一直排名“垫底”(23％)。

表4：肉用雏鸡饲养的畜牧业指标(被真菌毒素污染的配制饲料中加入了Ecofiltrum药剂)

注：此表及以下各表中上标和下标¹…₅表示P≤0.10…P≤0.001的可靠性极限值，上标表示与阳性对照组(组1)对比，下标表示与阴性对照组(组2)对比，^*表示与服用已知“聚乙烯”(4千克/吨)的组(组7)对比。

组3的饲料含有EF-1药剂且被真菌毒素次级代谢物污染，我们从这组雏鸡获得了令人悲观的数据。应当指出，这一事实不仅可以从畜牧学综合指标中得出，也可以目测得到。进食含有最少剂量木素和0.5千克/吨的乳果糖的肉鸡，从外观上看要远劣于其他组雏鸡。特别是与第一阳性对照组(组1)雏鸡相比较时，这种外观上的优劣体现得更为明显。如果说从前者(BR₂组或BR₂+EF-1组雏鸡)中可以观察到诸如鸡翅膀状态不自然、羽毛褶皱、状态沉闷、站立不稳、不愿在笼中走动、经常性腹泻等现象的话，那么后者(BR₁或BR₂+EF-3组雏鸡)则观察不到上述类似症状。正相反，后者的易动性和食欲都很好，羽毛也很整洁。

EF-1组药剂中吸附剂材料的简单缺陷再次解释了获得悲观数据的原因。应当指出，药物中含有的生物活性物质可能对动物机体造成不同影响：这些活性物质所表现出来的综合作用一般要么是协同效应，要么是拮抗作用。本实验中使用了不同型号的Ecofiltrum药剂(药剂中各成分的剂量不同)，这有助于根该药剂的综合药效查明每种成分各自的疗效。

通过二元数学分析法可以发现，对3周龄雏鸡喂以不同型号Ecofiltrum药剂时，配制饲料中每千克水解木素(X值)可以将日均增重量平均提高5％，同时，该型号药剂中每千克益生元(Y值)可以将雏鸡生产率间接提高25％。可以看到，对照组雏鸡的体重变化从803克下降到634克，如果将阳性和阴性对照组之间的差异算作100％的话，那么雏鸡体重的“补偿率”公式表示为：[K(％)＝5X+25Y]。但是，在饲养末期，乳果糖的影响相对稳定，而肠道吸附剂的积极作用提升了一倍多，这说明在保护5周龄雏鸡免受饲料中的高浓度外源物消极影响方面，水解木素变得更有效力[K(％)＝10X+25Y]。综上，尽管每种型号Ecofiltrum药剂中的乳果糖都是较有活性的成分，然而在剂量上有优势(从1.0千克/吨到4.0千克/吨)的木素才是显著积极疗效的决定性因素。以上数据不止说明联合使用上述两种药物成分的合理性，还可以成为按照鸡龄以及经济性对真菌中毒症进行差别化预防的根据。

整体而言，基于我们已经分析过的指标，应当指出，各实验组雏鸡的体重、成活率和总体重增加量数值仍然相对较低。这说明这些药剂客观上还不足以完全消除由配制饲料中高浓度外源物(∑_毒素＝12.8MRL)带来的毒性作用。然而，与阴性对照组(组2)比较而言，(3周龄和5周龄)雏鸡体重显著可靠的增加和致病率的实质性下降都可以有力证明，含有高剂量木素的各种药剂能够将部分毒素从机体中有效排出并“缓解”慢性真菌中毒症的症状，从而证明在整个肉鸡饲养期内使用上述药剂预防和治疗有关疾病的合理性。

我们分析了针对真菌中毒症进行的其他同类实验的数据。需要强调和记住的是，绝大部分上述同类实验中都出现了：根据饲料中真菌毒素的含量，体重相对值在很大范围内变化，该范围可能与对照组数值的偏差区间(％)相似。但是，只有将这些数据与原始毒性水平进行比较，才能正确认识某种药物的疗效。在我们的实验中，饲料毒性很高，该毒性通过正确的治疗进行补偿并最终显著提高生产率。可以很肯定的预计，在大部分真菌毒素次级代谢物含量并不是很高(1-5MRL)的工业口粮中加入上述药物组合物同样可以获得显著疗效。因此，不用改变药剂配方，只需将药量减少1/3-2/3即可。

在分析雏鸡每日饲料进食量时也发现了类似的关系曲线(表5)。在实验中收集的材料同样表明，真菌毒素对雏鸡机体生长的抑制作用特别明显地体现在第2对照组：由于雏鸡的沉闷状态(包括丧失食欲)和黏膜的溃烂，饲养期平均每只雏鸡所食配制饲料的绝对量有所下降，而且饲料转化率也有所下降(2.19千克降至1.78千克/千克)。这些都反映出雏鸡代谢情况不佳，无法自主清除体内外源物，同时雏鸡的体能还多被“无功”消耗。

在此背景下，很能说明问题的是，由于雏鸡进食较多真菌毒素而相对日益增加的饲料费用，在口粮中添加我们研究的药剂后显著降低(降低了7-14％)，这只有在雏鸡代谢进程总体正常的条件下才可能出现。因为饲料转化率是生产率方面最重要的经济指标，以上数据不仅具有鲜明的经济背景，而且有助于我们通过研究机体对不同数量外源物的反馈，直接判断机体机能的高低，而通过这一点可以间接判断相应药剂的疗效。因此，有必要将药剂作用下从有毒饲料中吸收营养物质效率的不断提高与该药剂降低外源物对雏鸡机体生长抑制作用的积极影响联系起来。

同时，我们惊奇地发现，在口粮中加入高剂量木素(组5和组6)的同时，饲料转化率反而比预期的要低，上述预期是我们在分析组2、3和4的积极指标后得出的。上述“生物和生产指标水平不太稳定”这一现象，似可从平衡实验中找出原因，平衡实验表明，慢性真菌中毒症条件下所使用的高剂量的广谱吸附剂不仅能将有毒物质，也能将一些营养和生物活性物质有效排出机体，从而最终降低药剂总的积极疗效。

平衡实验的结果(表5)可以使我们从细节上研究真菌中毒症条件下指标变化的本质。配制饲料内的真菌毒素次级代谢物使几乎所有营养物质的消化指标下降了5.8-8.7％(P≤0.001)。变化(下降)最明显的指标是粗蛋白质、口粮中的糖类成分、粗脂肪和粗纤维素。干物质消化率和配制饲料总能量吸收率的下降(下降了6.6％，P≤0.001)共同造成了上述后果。氮残留和沉积量与雏鸡体重增重量的比率下降了9.0％(P≤0.001)，进入机体内的相当一部分氨基酸被不可逆分解并以非蛋白氮(尿酸)的形式被排出体外。这些变化，包括饲料消耗量的下降，都是由饲料吸收率和饲养期雏鸡生长速度的降低造成的，进食含有12.8MRL真菌毒素的饲料的阴性对照组(组2)的畜牧业指标正好可以证明这一点。

分析第3-7实验组营养物质的消化吸收率数值后，可以肯定地说，受测药剂的药效是积极的。饲料干物质的消化和总能量的吸收率平均提高了3.0-6.2％(P≤0.05-0.001)，特别是能耗成分吸收率也有提高，比如粗脂肪吸收率提高了1.5-3.7％(P≤0.10-0.001)，糖类(无氮提取物NFES)-4.4-8.6％(P≤0.05-0.001)，这都只能在部分毒素被“中和”的条件下才能发生。综上，联合使用吸附剂和益生元充分表明其具有降低毒素消极影响的能力，同时也说明利用协同效应预防真菌中毒症是有理论依据的。

表5：肉用雏鸡饲料吸收率、营养和生物活性物质消化率和肝脏维他命沉积率

*注：指标考虑了每组雏鸡饲养末期的体重和成活率。

然而，当我们把各型号Ecofiltrum药剂和“聚乙烯”加入有毒口粮时，作为反映机体与毒素进行生化对抗的“参与度”指标，雏鸡的粗蛋白质消化率(提高了2.0-3.9％和3.1％)和氮吸收率(提高了0.6-2.4％和1.6％，P≤0.05)仍然相对提高，这一点没有明显变化。与对照组(组1)进行比较的话，上述数值仍然是实验中最低的一组数据(P≤0.01-0.001)。上述情况可以使我们得出一个定论：没有任何一种药剂能够完全消除真菌毒素。所有实验组的雏鸡都无法获得必要数量的可塑材料(氮物质)。为了弥补可塑材料的不足，雏鸡会进食更多的饲料，但是同时被迫消耗饲料中的可获能量用以自主清除机体内的外源物。结果就是，尽管在口粮中加入了所研究的药剂，与阳性对照组(组1)相比，雏鸡的生长状况还是不佳，饲料转化率也很低。

如果再深一点研究在有毒饲料中添加吸附剂的问题，那么应当指出，几乎所有吸附剂都有自己的生物特性。一方面，吸附剂具有分子吸附的非特异性机制，可以将制约性和较高极性的生物活性物质从消化道内有效排出。从病理学角度看，这必然强化对消化道的不利影响，因为各种营养物质对动物的保护因素被破坏，被迫“中和”毒素而变得孱弱的机体内部储备也被损耗。但是，另一方面，吸附剂可以最大限度排出毒素，“预防”食物性毒血症的发展，从而“缓解”有毒饲料对禽类的消极影响。上述有关任何一种活性吸附剂的两个方面其实都是拮抗作用的体现。引导和利用拮抗作用(动物产能的角度)中积极的一面永远是学者和实践者感兴趣的课题。因此，基于两种相互作用的“交叉”而形成“妥协观点”，其特点就表现在利用某种吸附剂的预防效果上。尽管上述效果要取决于药剂的剂量、吸附能力、吸附特性，甚至是动物的生理状态，然而在真菌中毒症条件下，如果不对营养性进行相应“补偿”，药剂同样无法取得优于原始值(不含真菌毒素的“纯”饲料)的疗效。

应当承认，实验组雏鸡的营养物质消化率与对照组(组2)在置信区间方面没有大的差别。很明显，存在测量(或者所谓的“方法准确度”)误差的同时，我们所研究的药剂对饲料消化相对指标的直接影响不大，这种影响似乎被吸附剂的大剂量给抵消了。看一下研究结果，很“刺眼”的一点是，口粮中水解木素剂量的不断提高与机体的生理反应(饲料消化率的提高)不成正比。应当指出，当我们将干物质消化率(κ∏，DC)作为反映营养物质总吸收率的指标时，每加入1千克吸附剂，实验组雏鸡的DC值虽然也提高，但呈现出程度不大的下降趋势。具体而言，如果说将饲料中水解木素的剂量提高到1.5千克(组3和组4)可以使消化率提高2.4％(从73.0％到75.4％)的话，那么木素剂量提高到2.5-4.0千克/吨时，消化率提高得就没那么多了，只提高了0.7％(从75.4％到76.1％)。

显然，可以用木素的属性来解释上述不同增幅的原因：木素将部分营养物质与粪便“捆绑”起来，这样，营养物质被排出体外，随之为雏鸡补偿性进食饲料进而浪费饲料留下了“后患”。就这一点来说，应当理解，在饲料有毒的背景下，使用剂量不大的吸附剂无法对雏鸡的体格造成很大的积极影响，但是，过度使用活性吸附剂显然也对雏鸡没有好处。综上，我们认为应当将注意力放在降低药剂剂量、提高微生物发酵的现有前提条件上，以便通过不断提高营养物质的水解水平来“缓解”吸附剂的消极作用。

使用基于吸附剂的预防和治疗类药剂的另一问题是：对吸附剂极其敏感的维他命(诸如所有的极性低分子量物质)被过多排出机体外。研究维他命消化的重要性在于：维他命是可以保障机体正常生理生化进程的生物活性物质，而且，浓度不高的维他命就可以对机体的新陈代谢产生巨大影响。家禽自身实际上不能合成维他命，因此如果预计到雏鸡体内的维他命不足，一般采用在饲料中添加维他命和维他命-矿物质预混料的办法予以弥补。上述预混料也是饲料中最贵的成分之一。

阴性对照组(组2)的维他命沉积率下降了，而肝脏中维他命含量指标是实验中最低的。毫无疑问，腹腔消化进程和消化道黏膜生物活性物质摄取机制被破坏(原发性缺乏)、为使外源物失活而更多补偿性吸收维他命(继发性缺乏)，加之合成B类维他命的肠道正常菌群的生长被抑制，以上都是饲料里毒素水平较高条件下生物活性物质极少被吸收、极低被沉积的主要原因。

尽管前面我们列出了关于全面吸附作用的论据，根据已经多次提及的、关于利用吸附剂改善雏鸡健康状况的设想，从(进食含有吸附剂水解木素的)实验组雏鸡体内排出的脂溶性维他命(E)和水溶性维他命(B₂)显著减少。维他命更好地被吸收，更多的维他命被沉积在肝脏内(维他命沉积率平均提高了8-16％和7-24％，P≤0.10)。这是一次虽不特别但信息量丰富的测试，补充了我们对雏鸡在服用受测药剂条件下消除自身机体病变的认识。综上，通过上述实验，我们没有发现过度排出维他命的现象。但是，就像研究营养物质消化率时那样，对于进食较高剂量木素的雏鸡(组5-7)，其维他命沉积率也有随着木素剂量的增加而出现降低的趋势，这一趋势特别明显地表现在比之组3、组4雏鸡来说相对较低的维他命(尤其是维他命E)沉积率。

在探讨我们获得的研究结果时，应当指出，所有进食益生元的实验组雏鸡，其纤维物质的消化率都有显著提高(提高了3.3-3.5％)。众所周知，作为基质的纤维在雏鸡机体内实际上不会被禽类胃肠酶水解，因为其消化系统并不产生能够破坏糖类骨架结构的酶类。非淀粉类生物聚合物的消化是肠道共生微生物菌群的特有现象。在进食0.5千克/吨的乳果糖和1.0千克/吨的低聚果糖的实验组雏鸡里，上述菌群的数量和活性要更高些，但是总的来说，上述菌群的数量和活性在进食合成乳二糖的同龄雏鸡里最高。因此，微生物进程的激活不仅是营养物质消化率提高的重要生物学标准，也是调节患有慢性真菌中毒症雏鸡生产率的强有力因素(表5)。

在对科学生产实验过程中所获数据进行分析，同时也对第一部分研究进行一个特别的总结后，我们认为，从家禽饲养的生产性参数角度看，真菌中毒症条件下使用Ecofiltrum药剂具有积极作用。实验中所获畜牧业综合指标(成活率、体重和饲料转化率)使我们确信，在饲料中为预防和治疗疾病而加入高浓度的药物组合物可以有效降低消极作用。因此，尽管中毒症比较严重，实验组雏鸡比阴性对照组(组2)的表现还是要好得多：雏鸡不仅长势更好，也更“经济地”进食饲料，而且有效地将营养物质转化为体重的增长。但是，将第一种药物组合物(EF-1)加入有毒饲料后，尽管不是完全没有疗效，但远远不是最优成分组合的药剂，甚至与单纯使用纯粹的吸附剂(“聚乙烯”)比起来也是如此。同时，因为木素的过高的吸附活性，使用最大剂量的组合物(EF-3)同样也未能完全发挥其所含成分的抗毒潜力。当然，无论如何也不能把此类特殊的担心理解为一种反例。我们认为，最有建设性的看法是：上述论据教会我们要在有毒饲料中补充性(预防性)加入维他命，矿物质和其他生物活性成分。而后通过兽医专家对口粮成分、用量等方面的及时调整来增强药剂的疗效。

综上，基于中高剂量木素再分别加上乳果糖和低聚果糖的、由“Leksir”有限责任公司研制的Ecofiltrum药物组合物是有效的吸附剂和肠道微生物菌群生长刺激素。上述药剂可以在真菌中毒症条件下对家禽饲养的畜牧业指标产生积极影响，能够对传统的抗毒性饲料添加剂构成现实的竞争。使用综合型药剂预防真菌中毒症的正确性不容置疑，我们的实验结果就很能证明这一点。

现在，我们转向研究其他同样重要的指标。我们已多次谈到，饲料需求量、其它形式的动物机体中毒症，以及病理过程的严重程度都直接取决于被摄取的真菌毒素数量。因此，易被消化道吸收的低分子量外源物的平衡有助于补充说明各类添加剂的质量指标，有利于我们有效使用这些低分子量外源物预防真菌中毒症。

但是，在开始探讨实验数据之前，我们认为应当介绍一下真菌毒素测定方法的特点和生物体内真菌毒素的新陈代谢。

众所周知，现在有很多分析方法可以用于测定真菌(真菌毒素)代谢产物，其中之一是免疫酶测定法(EIA)。这种方法不仅被大家认可，而且具有高效性。借助该方法，我们可以不必测定我们研究的材料上某种真菌的所有变种，而只是对特定品系的真菌(一般是最常见的种类)进行测定。通过该方法无法测定外源物代谢产物。同时，真菌毒素进入机体后，在寄主机体(肝脏)和肠道正常微生物菌群酶系统的作用下发生根本性变化。很多基础性研究的结果表明，外源物不仅通过黏膜被快速摄取，而且随即快速新陈代谢(毒化或失活)并在48-72小时内以转化复合物的形态随粪便被完全排出体外。这意味着通过EIA法在雏鸡粪便里只能发现最初所食毒素中很少一部分(5-20％)没有发生变化的毒素。但是，在使用各种预防类药物时，上述数值会显著变大或变小。综上，“可见毒素排出”指标完全可以使我们根据受测药剂的剂量清楚地“看出”并明确该药剂的吸附性能。

平衡试验的结果表明(表6)，在进食有毒饲料的条件下，大部分真菌毒素(T-2毒素-可至82.1％，烟曲霉毒素B₁-可至74.6％，赭曲霉毒素A-可至86.6％)可被阴性对照组(组2)雏鸡的胃肠道摄取并产生了显著毒性。留在肝脏内的上述毒素数量也很多。当我们将“聚乙烯”加入有毒饲料后(组7)，真菌毒素排出率要比第2(阴性)对照组高很多，因此家禽饲养生产指标也相当高(表4)。具体而言，T-2毒素排出率提高了30％(P≤0.05)、赭曲霉毒素-77％(P≤0.001)、烟曲霉毒素-83％(P≤0.001)。真菌毒素对机体造成的营养负担下降，进而保护机体的力量被动员起来。结果，肝脏内毒素的绝对数量下降了15-24％(P≤0.02)。而且，毒素越少地进入机体，就越被有效地生化分解和失活。上面这些积极现象不仅有助于避免典型病理解剖变化的出现，而且相当程度地恢复了肝脏的自我平衡功能(包括肝脏的解毒功能)。

我们本期望使用含有水解木素和益生元的药剂后会获得很高的吸附活性，然而事与愿违：尽管上述两种药物成分的剂量不断增加(木素的剂量都已达到4.0千克/吨)，真菌毒素的“可见排出数量”仍然呈稳定下降趋势(根据饲料中添加量分别下降了18-40％，P≤0.02-0.01)。但是，有关肝脏内(动物机体内抵御和解毒外源物的主要器官)外源物含量的数据驳斥了我们对于实验剂量的Ecofiltrum药剂会强化和无障碍吸附消化道毒素进而使尽可能多的毒素进入循环系统的推测。研究结果表明，如果说阴性对照组的毒素残留数量最多、毒性最大的话(T-2毒素-可至9.5微克/千克，烟曲霉毒素-可至121.3微克/千克，赭曲霉毒素-可至1.1微克/千克)，那么当Ecofiltrum药剂中木素和益生元剂量不断加大时，雏鸡肝脏内真菌毒素次级代谢物的绝对数量平均(3种型号的Ecofiltrum药剂)下降了15-24％，而使用“聚乙烯”时平均下降了17％。

上述数据让人有点费解，因为这不太符合常规逻辑。10-30％的每日所食毒素跑到哪里去了？为什么肝脏中发现的毒素含量比较低？我们在消化道微生物菌群的数量参数中找到了答案。

研究结果表明(表6)，饲料中的真菌毒素极大影响了大肠的微生物环境。首先，真菌毒素使很多种肠杆菌的滴度降低了3/4-7/8，比如大肠杆菌和主要的两种乳酸菌(乳酸杆菌、双歧杆菌)。其次，在畜牧业中使用劣质饲料的最终结果就是：慢性生态失调，即微生物平衡朝着腐烂性和条件性致病细菌优于乳酸菌的方向发展(从1∶28200到1∶12300)，同时小肠内毒素数量不断增加(增加了1.6倍，P≤0.01)。在雏鸡整体情况不佳时，包括急性肠道传染病在内的传染病有可能出现。

表6：Ecofiltrum药剂条件下雏鸡肠道真菌毒素和微生物含量平衡表

分析表中的数据后可以指出，尽管已知药剂“聚乙烯”可以将腐生菌含量提高0.8-2.3倍，但相对而言，在生物群落里依然是腐烂性肠杆菌(以大肠杆菌为主要代表)占主导地位，这使得大肠里氨的形成大大提高(提高了0.4倍，P≤0.01)。以上情况说明，由于蛋白质降解最终产物对雏鸡机体的消极作用增强，单一药物无法完全发挥积极疗效。在这方面，Ecofiltrum药剂的疗效就不会被质疑，因为药剂中含有不能被雏鸡机体吸收的乳糖，而乳糖可以在实验组雏鸡消化道内刺激乳酸杆菌和双歧杆菌的生长(比之阴性对照组，两种杆菌的数量增加了2-8倍，P≤0.01)。毫无疑问，通过使有益的特种微生物共生菌群“占领”肠道(1∶38000)，Ecofiltrum药剂不仅可以促进正常菌群的形成、(通过竞争机制)抑制肠道条件性致病菌群的繁殖，还可以帮助提高机体对胃肠道感染和来自饲料的消极作用的稳定性。

很能说明问题的是，在乳果糖剂量(0.5千克/吨)不变的情况下，随着木素剂量的不断增加(从1.0千克/吨到4千克/吨)，盲肠内容物中积蓄的乳酸(发酵菌群的最终代谢产物)也越来越多，进而有机酸总量也整体提高。看来，吸附剂可以减少自由形态毒素的数量从而创造一个更加优良的胃肠道环境，而与之具有同等意义的是部分乳果糖向肠道下游的转移，因为乳果糖和乳酸菌群在肠道下游的“互动”是药剂中这两种成分协同效应显现的基础。同时，尽管进食低聚果糖的雏鸡消化道类似部位内乳酸和滴定酸度的含量差不多，但是乳酸菌群与腐烂性菌群的比例达到1∶18200，从微生物学角度看，这不仅说明低聚果糖选择性效应的下降，而且有助于我们查明某种益生元的实际优势。

作为一个小结，应当指出，使用益生元治疗真菌中毒症若要取得特效，主要取决于能否改善那些在消化道存活下来并获得毒素分解能力的微生物菌群的营养状况。以前的研究表明，微生物细胞器内的代谢进程，例如氧化或杂交，在很多方面与高等动物解毒过程的第II阶段的酶促反应相同。这种生化进程的原则相似性不仅促使微生物被毒性外源物(原始外源物中间代谢产物)毒化而死亡，而且帮助某些种类的微生物存活，该微生物能够将外源有毒物代谢转化为无毒化合物。在积极繁殖、与胃肠道内外源物“协作”的同时，共生微生物可以降低这些外源物对寄主机体造成的营养负担、“缓解”真菌中毒症的症状，这决定了Ecofiltrum药剂的远大前景，也被我们的研究显著证明。但是，在被迫使用劣质饲料和固定添加本综合性药剂的情况下，为了更好地采取治疗措施，我们建议通过一次性使用含有生理改良品种微生物的多菌株益生元药剂来定期“升级”肠道微生物菌群的性能。

蛋白质代谢参数和一系列总的代谢指标足够反映受所研究因素影响的雏鸡机体内结构性可塑材料的使用效果。研究结果(表7)表明，阴性对照组2(进食有毒口粮)雏鸡血液中的自由形态氨基酸总量要远高于阳性对照组1的同龄雏鸡(高40％，P≤0.001)，但是血清蛋白质含量要低13.7％(P≤0.001)。分析所获数值后可以指出，慢性真菌中毒症伴随着生物合成进程强度的降低。在生物合成进程中，实验组雏鸡体内很大一部分氨基酸没有在消化过程中被吸收，而是作为残留物积蓄在血液里。

尽管一部分蛋白质(氨基酸)极性结构单体从消化道被伪排出，这些单体可以成为高家禽生产率的制约性因素，但是，使用基于水解木素的受测添加剂是正确的一步，因为具有显著的慢性过程症状的实验组雏鸡血浆蛋白质含量(提高了2.5-5.4％)和代谢活性组织中的核酸含量(提高了10-27％，P≤0.10-0.02)都有稳定提高。自由氨基酸含量有所下降(下降了4-15％，P≤0.05-0.01)，这些都表明受测药剂对机体内蛋白质生物合成进程的刺激和对劣质饲料毒性的缓解作用。

众所周知，氮氧代谢不仅是主要的、最常见的毒性机制，而且是机体遭大部分真菌毒素侵袭的最薄弱环节。蛋白质承担大量的生理功能，对蛋白质合成的抑制会显著改变蛋白质的功能以及蛋白质相关的酶系统。结果，很多由蛋白质调节的重要生命进程强度降低，而机体抵御众多内外因素的能力发生变化。因为相当一部分肝脏蛋白质是酶活蛋白，所以肝脏产生某类蛋白质的能力(即使是在有限的范围上)决定着整个代谢进程、补偿性变化的类型以及组织的结构与功能。同时，被破坏的蛋白质代谢进程不仅是毒性病理学中最常见、最难解决的课题，而且在很多情况下都是加重此类病情的因素。但是，在雏鸡口粮中加入我们研究的吸附剂后，可以显著(13-50％、40％和35％，相应地)缓解大量外源物带来的毒性并激活机体巨大的适应潜力。同时，肠道吸附剂的积极作用间接表现在促进酶蛋白的加快合成方面。要知道，酶蛋白是酶促反应的有力“调节器”，而酶促反应是农畜家禽新陈代谢正常化、提高农畜家禽生产率和改善所获产品质量所必需的。

受污染饲料中的真菌毒素对其它新陈代谢参数也造成显著影响。可以确定的是，组2雏鸡肝脏的血清葡萄糖和丙酮酸含量分别降低了18.1％(P≤0.02)和5.6％(P≤0.05)，而血清胆固醇和总脂质含量分别提高了31.2％(P≤0.01)和35.8％(P≤0.01)。雏鸡出现低色指数性贫血症状：红细胞的血红蛋白饱和度显著下降(下降了21.5％，P≤0.05)，红血球体积补偿性增加(增加了17.3％，P≤0.05)。综上，我们可以得出结论：在饲料染毒的背景下，中间代谢被显著抑制，为获禽类生长所需代谢能量而进行的基质氧化效率降低。

在临床实践中，类似情况特别常见于糖类和脂质代谢被破坏、肝脏因不堪生理重负而功能失常的高产动物中。葡萄糖含量的下降不仅证明饲料中无氮提取物吸收状况的恶化(平衡实验中已出现过此类现象，表3)，而且证明禽类周缘组织对该能量源的吸收被破坏(葡萄糖→葡萄糖-6-磷酸→丙酮酸)。“葡萄糖”和“丙酮酸”这两个指标的关系清楚地说明慢性真菌中毒症条件下禽类机体氧化-还原进程，包括第一阶段-糖酵解过程，强度的全面下降。

当提及雏鸡脂质代谢的变化时，首先不应当忘记脂肪代谢和糖类代谢的紧密关系。众所周知，脂肪酸在肝脏内的分解会导致乙酰辅酶A的形成。这种辅酶A乙酸与草酰乙酸一起在克雷伯氏循环中降解为最终产物(二氧化碳和水)。但是，如果糖类(葡萄糖)的分解不能产生足够数量的丙酮酸(草酰乙酸前体物)，那么脂肪酸的氧化通过酮体的形成进行，酮体比脂肪能更好地在周缘组织内氧化。因为酮体只能在肝脏内形成，所以周缘组织的脂肪动员会激发脂肪浸润。另一方面，生酮物质(例如糖、醋酸、亮氨酸、缬氨酸等)是内生脂质来源。因此，抑制克雷伯氏循环中脱氢酶的活性将为内生脂质的合成创造良好条件：生酮物质易变为乙酰辅酶A并经过数个阶段形成脂质和胆固醇。当氧化进程被抑制时，被血液“运送”的脂肪或重新合成的甘油三酯不会被分解、氧化或排出，而是会长存于组织细胞中并参与血液循环。综上，饲料中含有真菌毒素背景下的代谢效果表现在糖类和蛋白质转化为各类脂质化合物方面，这导致能量代谢从糖类氧化“转换”为脂质降解。

生化研究证实了侵入性成像的结果。在解剖阴性对照组(组2)雏鸡时，发现肝脏的颜色、组织结构和构成都有病变-这些都是脂肪浸润综合症的典型症状。肝脏颜色为黄色或棕色，组织松软，腹部表面有出血现象。组织学角度看，营养不良的特点是肝细胞的退化病变和脂肪空泡的增殖，结果是肝脏体积增大、组织松软、易被撕裂，过多的脂肪沉着使肝脏变色。看来，浸润病变导致肝脏在整个机体代谢中的功能被破坏，这对饲养期禽类的生产率和成活率造成了消极影响。同时，我们研究的药剂不仅有助于防止典型病理解剖病变(脂肪肝)的出现，而且还几乎完全恢复了肝脏的包括解毒功能的自我平衡功能。

进食含有真菌毒素和所研究药剂的饲料的实验组雏鸡的类似指标说明，雏鸡生理生化进程全面正常化。其中，在运输机制和血红蛋白合成正常化过程中为周缘组织提供足够氧气的作用明显。我们研究的指标也恢复到生理正常值，与第1对照组(口粮不含真菌毒素)同龄雏鸡的指标几乎没有区别。综上，我们的药剂有助于克服雏鸡糖类、脂质和能量代谢的消极变化(效率提高了50-70％)。

在被迫使用劣质饲料的背景下，另一个世界性问题是免疫问题。众所周知，现代品种的禽类对外部饲养条件的要求很高。现在禽类的生长要快得多，而且每单位的增重不要求太多饲料(甚至与10年前相比也是如此)。但是，肉鸡和产蛋鸡为高产“付出的代价”却经常是抵抗力的下降。在鸡舍狭小封闭的空间里，在毒素增多和抗原负担加重的背景下，这会导致大量的经济支出。在研究免疫抑制问题时，应当指出，饲料中的真菌毒素(还有工厂内循环的免疫抑制病毒)通过抑制机体内蛋白质的生物合成和淋巴器官的发育而成为一种巨大的施压因素-不仅抑制细胞和体液免疫，而且压制某些非特异性机体保护因素。

表7：Ecofiltrum药剂条件下雏鸡的部分新陈代谢指标、蛋白质代谢和抵抗力参数

研究结果表明，进食的口粮中含有较高剂量木素和益生元的雏鸡(组4-6)比其他组雏鸡的非特异性抵抗力指标都要高(表7)。具体而言，在有关药剂作用下，机体体液抗菌的一系列指标(血液溶菌酶和血清杀菌活性、对大肠杆菌的正常抗体滴度)都有明显提高的趋势(平均提高了30-42％，P≤0.10-0.01)，这同禽类的高生产率一起，像预期的那样，决定了饲养期雏鸡极高的成活率指标(表2)。看来，上述情况出现的原因不仅在于蛋白质代谢的正常化(尽管这也很重要)，而且在于共生微生物菌群的显著特点：大量微生物菌群可以发挥辅助肠道巨噬细胞的作用，通过盲目易位至薄壁组织器官来刺激免疫系统，强化肠道黏膜保护机制、“保护”免疫系统整体上免受损坏。考虑到家禽企业兽疫情况的严峻性，上述情况完全可以是饲料被真菌毒素污染背景下工业化使用Ecofiltrum药剂的积极一面的有力辩护。

整体而言，我们认为根据上述研究可以得出结论：实验数据确定无疑地表明，“Leksir”有限责任公司研制的Ecofiltrum药剂是具有足够疗效的抗菌剂。但是，在毒性水平很高时，最有效的是那些联合使用水解木素和乳果糖且肠道吸附剂剂量为2.5-4.0千克/吨的药剂，因为它们能动员患有结合型慢性真菌中毒症的禽类机体的保护性力量，同时又不带来明显的消极后果。实验组的某些畜牧业指标要优于单纯使用水解木素时的指标，这是有必然性的，因为提及Ecofiltrum药剂时，我们应该明白，这是一种可以对机体的新陈代谢和功能起到综合性生理影响的药剂。高效的肠道吸附剂将毒素排出，同时在乳果糖的影响下共生微生物菌群在利用外源物方面的作用大增，这些都是专业预防和治疗类药物的特点，所以可以将Ecofiltrum药剂看作是机体自我平衡最重要的因素之一。还需指出，我们使用的、用于模拟中毒症的单端孢霉烯族真菌毒素是非极性化合物，使用我们推荐的基本剂量的吸附剂极难将其从体内排出。但是，我们使用的、用于解毒的综合性药剂毫无疑问具有显著的机体保护性能，使其在饲料被非极性真菌毒素污染条件下饲养肉用雏鸡具有额外的优势。

我们对使用三种型号的Ecofiltrum药剂(组3-5)、一种含木素和低聚果糖的组合物(组6)和“聚乙烯”(组7)条件下的经济指标进行了分析，结果(表8)表明配制饲料的平均市场价为11.8卢布/千克、药剂价格分别为230-140、200和90卢布/千克，当按照1.5-4.5、5.0和4.0千克/吨的剂量加入饲料中时，饲料的整体价格并没有提高多少(分别提高了320-570、510和310卢布/吨)。

计算生产花费后的结果是，3种型号Ecofiltrum药剂在所有情况下(1.5-4.5千克/吨)都有经济合理性。同时，肉用雏鸡饲料中含有真菌毒素，这必然导致大量的经济支出(约为13100卢布/千只雏鸡)。在现有饲料价格行情下使用上述药剂可以将花费分别降低15、48和45％，或1920、6240和5830卢布/每千只雏鸡。上述结果也是由各种型号Ecofiltrum药剂的生理学效应决定的：Ecofiltrum药剂可以预防(自然或人为因素带来的)外源物引起的内生性中毒的发展、使解毒进程正常化、非特异性提高抵抗力，进而改善禽类饲养的生产性指标。

根据抛物线原理可以推测(数学模拟)到，向有毒饲料中添加更高剂量(超过4.0千克/吨)的水解木素不会降低雏鸡产肉中生产性支出，因为药剂成本会升高、吸附作用会过度。从经济学角度(约为7000卢布/千只雏鸡)看，对于大部分雏鸡养殖企业来说，最优方案是：木素剂量不超过2.8-3.2千克/吨，乳果糖剂量保持0.5千克/吨不变。

经济核算表明，由于药剂成本较高而药效较低，木素加低聚果糖的药物组合物同样展现了积极的效果。在补偿未知损失方面，上述结果与使用“聚乙烯”时类似。综上，由于低聚果糖必然带来与药剂成本相同的额外支出，所以上述药剂的经济性相当低(低了7/17)。

表8：肉用雏鸡饲料有毒条件下，使用Ecofiltrum药剂的经济效益核算

在工业畜牧业条件下，运用合理的方法，使用我们研究的药剂带来的经济效益(回报)可以2.6-3.6倍于直接成本(与购买药剂的费用有关)。同时，由于“聚乙烯”价格较低，经济效益可以4-5倍于直接成本。

2.3结论

基于上述研究，可以得出下列结论：

1.将各种剂量(1.5-4.5千克/吨)的综合性Ecofiltrum药剂加入营养物质平衡的配制饲料中对肉用雏鸡生产率指标(成活率和活鸡体重)产生了积极作用。为使最常见浓度(12.8MRL)的真菌毒素对生产率的影响降低，使用最大剂量的本药剂要显著优于类似药剂“聚乙烯”。

2.患有慢性真菌中毒症且进食有毒饲料的雏鸡，该饲料中含有2.5-4.5千克/吨的Ecofiltrum药剂，比进食类似饲料但不含Ecofiltrum药剂或含有低剂量(1.5千克/吨)Ecofiltrum药剂的同龄雏鸡状况要好得多。这可以被认为是雏鸡在饲养期内更有效吸收饲料和更高的成本回报的结果。整体而言，使用各种剂量的Ecofiltrum药剂可以使慢性真菌中毒症的消极后果平均降低40-60％。在饲料中含有高浓度真菌毒素的背景下，乳果糖在益生元类中表现得最好、积极作用最大。

3.在有毒配制饲料中添加各种剂量木素和乳果糖、低聚果糖的结果是，微生物菌群在消化道内的解毒作用增强。毒素对雏鸡机体造成的营养负担的降低和吸附剂对部分毒素的排出为大部分代谢指标的正常化创造了有利前提：机体内蛋白质生物合成进程加快、氧化和还原进程优化、雏鸡更有效地吸收和沉积脂溶性及水溶性维他命、非特异性抵抗力提高，这些都是雏鸡生产率提高的生理生化基础。

4.木素剂量为2.5千克/吨和4.0千克/吨的两种Ecofiltrum药剂可以使经济效益达到6000卢布/每千只雏鸡。得益于药剂成分(活性吸附剂和微生物菌群生长刺激素)的独特效力，45-48％的由饲料中高浓度真菌毒素带来的经济损失得以补偿。然而，在控制木素含量的条件下可以实现特定药物的最合理的应用，过量剂量的木素将降低其积极的效果。

综上，我们创造了一种用于预防和治疗动物胃肠道疾病和各类中毒症的药物组合物，以及使用上述药物组合物的预防和治疗方法。

该药物组合物确保了疗效的提高，并且免受水解木素、活性炭和其他已知吸附剂的上述缺陷。此外，联合使用木素和益生元用以预防和治疗有关疾病有助于获得积极的综合疗效：将吸附剂的副作用最小化、恢复胃肠道的自我平衡功能、使新陈代谢正常化，从而最终质的提高畜牧业的饲养和经济指标。

Claims

1.一种用于预防和治疗动物胃肠道疾病和各类中毒症的兽用药物组合物，该药物组合物包括作为活性成分的水解木素和益生元，该益生元选自：乳果糖，低聚果糖，半乳糖和菊粉，该药物组合物剂型适合于加入配制饲料中使用，该药物组合物具有占质量30-95％的木素和占质量5-50％的益生元。

2.如权利要求书1所述的药物组合物，其特征在于，所述药物组合物是粉剂或颗粒剂。

3.一种用于预防和治疗动物各类中毒症的方法，该动物包括禽类，该中毒症包括真菌中毒症，所述方法包括给动物喂食混有如权利要求书1所述的兽用药物组合物的配制饲料，每吨配制饲料中加入2-4.5千克所述药物组合物，与配制饲料中真菌毒素的含量成正比。

4.一种用于预防和治疗动物胃肠道疾病的方法，该动物包括牛和猪，该胃肠道疾病包括消化不良、肠胃炎、肠炎、结肠炎、肝炎和急性黄色肝萎缩及其中毒性疾病，所述方法包括在动物进食30±10分钟内令其单独或集体口服混有如权利要求1所述的兽用药物组合物的饮水或饲料，每天1-2次，每次剂量为0.2-0.3克药物/每千克动物体重。