CN102639715A - 人源化抗-TNFα抗体药物针对类风湿性关节炎的药效预测方法及药效预测装置 - Google Patents
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Abstract
一种人源化抗-TNFα抗体药物针对类风湿性关节炎的药效预测方法,包括如下步骤:测量来自受试者的样品中ADAMTS4和ADAMTS5至少之一的含量;以及以ADAMTS4和ADAMTS5至少之一的含量作为指标含量,评价所述人源化抗-TNFα抗体药物针对所述受试者类风湿性关节炎是否有效。
Description
技术领域
本发明涉及以来自受试者的样品中ADAMTS4和ADAMTS5至少之一的含量为指标,预测人源化抗-TNFα抗体药物针对类风湿性关节炎的药效预测方法和药效预测装置。
背景技术
近年来,靶向肿瘤坏死因子(TNFα)的生物制剂已被用于缓解类风湿性关节炎,并且他们的药效已经被认可。阿达木单抗(Adalimumab,ADA)是由完全人源化抗TNFα单克隆抗体形成并靶向TNFα的生物制剂,使用被称为疾病活动度评分(DAS28)的临床指数发现其抑制类风湿性关节炎(RA)活动度。此外,报道了阿达木单抗不仅抑制类风湿性关节炎活动度,还抑制与类风湿性关节炎相关的骨质破坏。
但是,尽管有这种显著的药效,但也存在阿达木单抗无效的类风湿性关节炎。此外,阿达木单抗由于具有易于导致如肺囊虫肺炎和肺结核等传染病的不良副作用,通过在给药前预测阿达木单抗的药效,能够将阿达木单抗给药确实有效的病症例,,同时还可以防止不必要的副作用。
至今有报告关于鉴定如阿达木单抗生物制剂的药效预测因子(参考非专利文献1)的尝试。在上述报道中报道了,在给药阿达木单抗12周后,通过使用DNA微阵列和算法对阿达木单抗有效类风湿性关节炎患者与阿达木单抗无效类风湿性关节炎患者中的基因表达谱的区别进行分析,439种基因的组合是与阿达木单抗无效相关的。
然而,这种方法顶多只能是是回顾性试验,并没有量化表示阿达木单抗的药效。因此,目前的现况是,在前瞻性试验可以确认的可靠的阿达木单抗药效预测因子尚未得到鉴定。
已知,ADAMTS(具有血小板反应素基序(motif)的解离素和金属蛋白酶)4和ADAMTS5是属于ADAMTS家族的与软骨破坏有关的聚蛋白多糖酶(aggrecanase)。特别的,报道了在退行性关节炎鼠科模型上,ADAMTS5的缺失抑制软骨破坏。
然而,ADAMTS4和ADAMTS5至少之一的含量与针对类风湿性关节炎的人源化抗-TNFα抗体药物的药效之间的关联性尚不知晓。
现有技术文献
非专利文献
非专利文献1:Badot V等人,Arthritis Research Therapy 11,R57,2009
发明内容
发明所要解决的课题
本发明旨在解决上述现有技术中的各问题并达到以下目的。即,本发明的目的在于提供一种预测人源化抗-TNFα抗体药物针对类风湿性关节炎的药效预测方法和药效预测装置,所述药效预测方法和药效预测装置能够高可靠性且简便地预测人源化抗-TNFα抗体药物针对类风湿性关节炎的药效,还能够预测给药人源化抗-TNFα抗体药物后类风湿性关节炎的活动度,且通过将上述药物对人源化抗-TNFα抗体药物较为可靠地发生作用的患者给药从而能够防止不必要的副作用。
解决课题的手段
为了解决上述问题,本发明人进行了广泛的研究的结果得到如下见解。即,在给药阿达木单抗前类风湿性关节炎患者的外周血样中ADAMTS4和ADAMTS5至少之一的含量越高,则阿达木单抗针对类风湿性关节炎的药效越好的见解。没有前瞻性试验揭示通过测量给药阿达木单抗前的血样中ADAMTS4和ADAMTS5至少之一的含量能否预测阿达木单抗的药效,因此,这是由本发明人获得的新发现。
需要说明的是,所述“回顾性试验”是指处理以往和现在的数据,而“前瞻性试验”是指观察从现在开始发生的现象的试验。由于回顾性试验是对已知的事项进行处理,因而容易包含研究者的偏见,而对于此,前瞻性试验由于尚不知道结果,因而不存在研究者的偏见,可以得到更可靠的结果,从这一方面来说更优异。
本发明是发明人基于以上见解获得的,作为解决上述存在问题的手段,如下所示。即:
<1>一种人源化抗-TNFα抗体药物针对类风湿性关节炎的药效预测方法,特征在于包括如下步骤:
测量来自受试者的样品中ADAMTS4和ADAMTS5至少之一的含量;以及
以ADAMTS4和ADAMTS5至少之一的含量作为指标,评价所述人源化抗-TNFα抗体药物针对所述受试者的类风湿性关节炎是否有效。
<2>根据<1>所述的人源化抗-TNFα抗体药物针对类风湿性关节炎的药效预测方法,其中,所述人源化抗-TNFα抗体药物是阿达木单抗(ADA)。
<3>根据<1>或<2>所述的人源化抗-TNFα抗体药物针对类风湿性关节炎的药效预测方法,其中,所述来自受试者的样品中ADAMTS4和ADAMTS5至少之一的含量是ADAMTS4mRNA和ADAMTS5mRNA至少之一的表达含量。
<4>根据<3>所述的人源化抗-TNFα抗体药物针对类风湿性关节炎的药效预测方法,其中,通过实时PCR法测量所述ADAMTS4mRNA和ADAMTS5mRNA至少之一的表达量。
<5>一种人源化抗-TNFα抗体药物针对类风湿性关节炎的药效预测装置,其特征在于,包括:
测量单元,所述测量单元测量来自受试者的样品中ADAMTS4和ADAMTS5至少之一的含量;以及
评价单元,所述评价单元以ADAMTS4和ADAMTS5至少之一的含量作为指标,评价所述人源化抗-TNFα抗体药物针对所述受试者的类风湿性关节炎是否有效。
<6>根据<5>所述的人源化抗-TNFα抗体药物针对类风湿性关节炎的药效预测装置,其中,所述人源化抗-TNFα抗体药物是阿达木单抗(ADA)。
<7>根据<5>或<6>所述的人源化抗-TNFα抗体药物针对类风湿性关节炎的药效预测装置,其中,所述来自受试者的样品中ADAMTS4和ADAMTS5至少之一的含量是ADAMTS4mRNA和ADAMTS5mRNA至少之一的表达量。
<8>根据<7>所述的人源化抗-TNFα抗体药物针对类风湿性关节炎的药效预测装置,其中,通过实时PCR法测量所述ADAMTS4mRNA和ADAMTS5mRNA至少之一的表达量。
发明效果
根据本发明,可以提供一种人源化抗-TNFα抗体药物针对类风湿性关节炎的药效预测方法和药效预测装置,所述药效预测方法和所述药效预测装置能够解决上述现有技术中的各问题来达到上述目的,能够高可靠性且简便地预测人源化抗-TNFα抗体药物针对类风湿性关节炎的药效,还能够预测给药人源化抗-TNFα抗体药物后类风湿性关节炎的活动度,且通过将上述药物对人源化抗-TNFα抗体药物较为可靠地发生作用的患者给药从而能够防止不必要的副作用。
附图说明
图1A是显示低剂量组(给药阿达木单抗前ADAMTS4mRNA表达量(ADAMTS4/β-肌动蛋白)低于0.3×10-4)和高剂量组(给药阿达木单抗前ADAMTS4mRNA表达含量(ADAMTS4/β-肌动蛋白)等于或高于0.3×10-4)在给药阿达木单抗12周后的DAS28(12w)的图形。
图1B是显示给药阿达木单抗12周后在低剂量组(给药阿达木单抗前ADAMTS5mRNA表达量(ADAMTS5/β-肌动蛋白)低于4.0×10-4)和高剂量组(给药阿达木单抗前ADAMTS5mRNA表达量(ADAMTS5/β-肌动蛋白)等于或高于4.0×10-4)的DAS28(12w)的图形。
图2A是显示给药阿达木单抗前ADAMTS4mRNA表达量(ADAMTS4/β-肌动蛋白)与给药阿达木单抗12周后疾的DAS28(12w)变化的关系的图形。
图2B是显示给药阿达木单抗前ADAMTS5mRNA表达量(ADAMTS5/β-肌动蛋白)与给药阿达木单抗12周后的DAS28(12w)变化的关系的图形。
具体实施方式
一种人源化抗-TNFα抗体药物针对类风湿性关节炎的药效预测方法和药效预测装置
本发明的人源化抗-TNFα抗体药物针对类风湿性关节炎的药效预测方法至少包括:测量来自受试者的样品中ADAMTS4和ADAMTS5至少之一的含量的步骤(测量步骤)以及以ADAMTS4和ADAMTS5至少之一的含量作为指标来评价所述人源化抗-TNFα抗体药物针对所述受试者的类风湿性关节炎是否有效的步骤(评价步骤),并且根据需要,进一步包括其他步骤。
本发明的人源化抗-TNFα抗体药物针对类风湿性关节炎的药效预测装置至少包括:测量来自受试者的样品中ADAMTS4和ADAMTS5至少之一的含量的单元(测量单元);以及以ADAMTS4和ADAMTS5至少之一的含量作为指标来评价所述人源化抗-TNFα抗体药物针对所述受试者的类风湿性关节炎是否有效的单元(评价单元),并且根据需要,进一步包括其他单元。
<测量步骤和测量单元>
测量步骤是测量来自受试者的样品中ADAMTS4和ADAMTS5至少之一的含量的步骤。
测量单元是测量来自受试者的样品中ADAMTS4和ADAMTS5至少之一的含量的单元。
-来自受试者的样品-
作为上述来自受试者的样品,没有特别限制,可以根据目的适当选择,例如,其实例包括外周血,滑膜和滑膜液等。其中,外周血由于容易采取,故而优选。
作为上述受试者,没有特别限制,可以根据目的适当选择,其实例包括人。
-ADAMTS4-
已知上述ADAMTS(具有血小板反应素基序的解离素和金属蛋白酶)4是一种属于ADAMTS家族的与软骨破坏有关的聚蛋白多糖酶。
ADAMTS4基因的核苷酸序列,例如,是人类公知的,该核苷酸序列很容易从如GenBank(NCBI)的公共数据库得到。例如,人类ADAMTS4基因的核苷酸序列可根据NCBI登录号NM_005099得到。
-ADAMTS5-
已知上述ADAMTS(具有血小板反应素基序的解离素和金属蛋白酶)5是一种属于ADAMTS家族的与软骨破坏有关的聚蛋白多糖酶。
ADAMTS5基因的核苷酸序列,例如,是人类公知的,该核苷酸序列很容易从如GenBank(NCBI)的公共数据库得到。例如,人类ADAMTS5基因的核苷酸序列可根据NCBI登录号NM_007038得到。
-含量的测量-
作为测量上述来自受试者的样品中ADAMTS4和ADAMTS5至少之一的含量的方法,没有特别限制,可以根据目的适当选择,例如,其实例包括测量mRNA表达量的方法和测量蛋白表达含量的方法等。
作为测量上述mRNA表达量的方法,没有特别限制,可以根据目的适当选择,例如,其实例包括PCR法,实时PCR法,DNA阵列法和Northern杂交法等。
作为测量上述mRNA表达量的装置,没有特别限制,可以根据目的适当选择,例如,其实例包括PCR装置,实时PCR装置,DNA阵列装置和Northern杂交装置等。以上装置作为上述测量单元可以适当使用。
作为上述实时PCR方法,没有特别限制,可以根据目的适当选择,例如,其实例包括制作校准曲线并基于该校准曲线量化样本的方法(校准曲线法)。
作为用于上述校准曲线法的对照DNA模板,没有特别限制,可以根据目的适当选择,例如,其实例包括从健康人获得并纯化的所有cDNA、编入有ADAMTS4cDNA的质粒、和编入有ADAMTS5cDNA的质粒等。
作为上述实时PCR方法中使用的引物并不受特别限制,只要是能够扩增ADAMTS4和ADAMTS5至少之一的引物即可,可以根据目的适当选择。
作为上述实时PCR方法中使用的内源性对照并不受特别限制,可以根据目的适当选择,例如,其实例包括β-肌动蛋白和GAPDH(甘油醛-3-磷酸脱氢酶)等。
<评价步骤和评价单元>
上述评价步骤是以ADAMTS4和ADAMTS5至少之一的含量作为指标来评价所述人源化抗-TNFα抗体药物针对所述受试者的类风湿性关节炎是否有效的步骤。
上述评价单元是以ADAMTS4和ADAMTS5至少之一的含量来评价所述人源化抗-TNFα抗体药物针对所述受试者的类风湿性关节炎是否有效的单元。
-人源化抗-TNFα抗体药物-
作为上述人源化抗-TNFα(肿瘤坏死因子α)抗体药物并不受特别限制,可以根据目的适当选择,例如,优选阿达木单抗(ADA)。
-指标-
作为上述指标,使用ADAMTS4和ADAMTS5至少之一的含量。上述指标,可以单独使用ADAMTS4的含量或ADAMTS5的含量,也可并用上述两者。
-评价-
作为评价上述人源化抗-TNFα抗体药物针对类风湿性关节炎是否有效的方法并不受特别限制,可以根据目的适当选择,例如,当ADAMTS4和ADAMTS5至少之一的含量在类风湿性关节炎患者中较多的情况下,可以评价为人源化抗-TNFα抗体药物针对该类风湿性关节炎患者有效。
作为具体例,在作为上述指标而使用ADAMTS4含量的情况下(详情参考下述实施例1),当ADAMTS4mRNA的表达量(ADAMTS4/β-肌动蛋白)为0.3×10-4以上时,可以评价为人源化抗-TNFα抗体药物针对类风湿性关节炎有效。
另外,在作为上述指标而使用ADAMTS5含量被用作指标的情况下(详情参考下述实施例1),当ADAMTS5mRNA的表达量(ADAMTS5/β-肌动蛋白)为4×10-4以上时,可以评价为人源化抗-TNFα抗体药物针对类风湿性关节炎有效。
作为进行上述评价的装置并不受特别限制,可以根据目的适当选择,例如,其实例包括电子计算器(计算机)等。上述装置可以作为评价单元适当使用。
另外,上述评价,还可以预测给药人源化抗-TNFα抗体药物后的DAS28。
上述DAS28是疾病活动度评分(Disease Activity Score)的缩写,是欧洲风湿病防治联合会为了将类风湿性关节炎活动度分值化而建立的,记载于:Fransen J.等人,Clin ExpRheumatol 2005,23(Suppl.39):S93-S99中。
作为预测给药人源化抗-TNFα抗体药物后DAS28的方法并不受特别限制,可以根据目的适当选择,例如,可以通过将类风湿性关节炎患者的外周血中ADAMTS4mRNA和ADAMTS5mRNA的至少之一的表达量拟合到下述实施例1中所示图形中(参见图2A和2B)来预测给药人抗-TNFα抗体药物后的DAS28。
<其他步骤和其他单元>
作为上述其他步骤没有特别限制,可以根据目的适当选择,例如,其实例包括通过综合考虑ADAMTS4和ADAMTS5至少之一与其他基因来进行评价的步骤。
作为上述其他单元没有特别限制,可以根据目的适当选择,例如,其实例包括通过综合考虑ADAMTS4和ADAMTS5至少之一与其他基因来进行评价的单元。
-其他基因-
作为其他基因没有特别限制,可以根据目的适当选择。其实例包括ADAMTS4和ADAMTS5之外的编码水解酶的基因,和在类风湿性关节炎受试者中特异性表达的基因等。
实施例
下面将参考实施例详细描述本发明,但本发明并不限于这些实施例。(实施例1:以ADAMTS4或ADAMTS5的含量作为指标来预测阿达木单抗(ADA)针对类风湿性关节炎的有效性)
以2008年6月至2009年6月,在琦玉医科大学综合医疗中心风湿免疫科就诊的类风湿性关节炎患者中的给药阿达木单抗(ADA)的33例患者为对象。
<测量步骤>
-外周血中ADAMTS4mRNA表达量的测定-
采集给药阿达木单抗(ADA)前的类风湿性关节炎患者的外周血(2.5毫升),然后注入PAXgene RNA采血管(注册商标,日本ベクトンデイツキンソン社制)中,使用PAXgeneBlood RNA Kit(注册商标,PreAnalytiX社制)萃取总RNA。使用逆转录酶将上述总RNA转化为总cDNA。以上述总cDNA为DNA模板,用Taqman(注册商标)Gene Expression Assay(Applied Biosystems社制)通过实时PCR法测定ADAMTS4的mRNA的表达量。需要说明的是,所用引物和探针使用(Taqman Gene(注册商标)Expression Assay(Hs00192708_ml,Applied Biosystems社制))中的引物-探针组。
以上所得到的ADAMTS4mRNA含量通过与β-肌动蛋白(内源性对照)mRNA含量的相对比值来进行定量化。
需要说明的是,β-肌动蛋白的引物和探针使用(Pre-Developed TaqMan(注册商标)AssayReagents(Human ACTB,NM_001101,Applied Biosystems社制))中的引物-探针组。
-外周血中ADAMTS5的mRNA表达量的测定-
采集给药阿达木单抗(ADA)前的类风湿性关节炎患者的外周血(2.5毫升),然后注入PAXgene RNA采血管(注册商标,日本ベクトンデイツキンソン社制)中,使用PAXgeneBlood RNA Kit(注册商标,PreAnalytiX社制)萃取总RNA。使用逆转录酶将上述总RNA转化为总cDNA。以上述总cDNA为DNA模板,用Taqman(注册商标)Gene Expression Assay(Applied Biosystems社制)通过实时PCR法测定ADAMTS4的mRNA的表达量。需要说明的是,所用引物和探针使用(Taqman Gene(注册商标)Expression Assay(00199841_ml,Applied Biosystems社制)中的引物-探针组。
以上所得到的ADAMTS5mRNA含量通过与β-肌动蛋白(内源性对照)mRNA含量的相对比值来进行定量化。
需要说明的是,β-肌动蛋白的引物和探针使用(Pre-Developed TaqMan(注册商标)Assay Reagents(Human ACTB,NM_001101,Applied Biosystems社制))中的引物-探针组。
<评价步骤>
每个风湿性关节炎患者的活动度,通过给药阿达木单抗(ADA)前及给药阿达木单抗(ADA)12周后的DAS28来评价【DAS28(0w)、DAS28(12w)】来评价。
关于阿达木单抗(ADA)是否有效,根据使用了DAS28的EULAR该改善标准,评价为“反应性良好”,“中度反应”或“无反应”。
需要说明的是,EULAR改善标准是欧洲风湿病防治联合会(EULAR)所规定的,记载于:Fransen J.等人,Clin Exp Rheumatol 2005;23(Suppl.39):S93-S99中。
关于给药阿达木单抗(ADA)12周后的基于EULAR改善标准的效果,反应性良好为15例,中度反应为11例,无反应为7例。此外,7例患者进入缓解期(DAS28(12w)<2.6)。
-低剂量组和高剂量组间的第一比较(ADAMTS4)-
关于给药阿达木单抗的33例类风湿性关节炎患者,通过借助采用来自健康人的总cDNA作为对照模板的校准曲线法的实时PCR法,对他们给药阿达木单抗前的ADAMTS4的mRNA的表达量(ADAMTS4/β-肌动蛋白)进行定量。然后,进行分群,在ADAMTS4的mRNA的表达量(ADAMTS4/β-肌动蛋白)低于0.3×10-4的情况下为低剂量组,而在0.3×10-4以上的情况下为高剂量组,并比较其DAS28(12w),结果显示,高剂量组的DAS28(12w)显著地低(见图1A)。
-低剂量组和高剂量组间的第二比较(ADAMTS5)-
关于给药阿达木单抗的33例类风湿性关节炎患者,通过借助采用来自健康人的总cDNA作为对照模板的校准曲线法的实时PCR法,对他们给药阿达木单抗前的ADAMTS5的mRNA的表达量(ADAMTS5/β-肌动蛋白)进行定量。然后,进行分群,在ADAMTS5的mRNA的表达量(ADAMTS5/β-肌动蛋白)低于4.0×10-4的情况下为低剂量组,而在4.0×10-4以上的情况下为高剂量组,并比较其DAS28(12w),结果显示,高剂量组的DAS28(12w)显著地低(见图1B)。
--GR组和NGR组间的第一比较(ADAMTS4)--
以ADAMTS4的含量作为指标,针对上述低剂量组和高剂量组,进一步分为GR组(反应性良好组)和NGR组(无反应+中度反应)的情况下的分类如表1所示。
表1
ADAMTS4 | GR | NGR | 总计 |
高剂量组 | 6 | 1 | 7 |
低剂量组 | 9 | 17 | 26 |
总计 | 15 | 18 | 33 |
x2p=0.016
基于表1所示的分类,按下列公式计算灵敏度、特异性、阳性预测率和阴性预测率。结果如表2所示。
灵敏度(%)=A/(A+C)×100
特异性(%)=D/(D+B)×100
阳性预测率(PPV)(%)=A/(B+A)×100
阴性预测率(NPV)(%)=D/(D+C)×100
需要说明的是,在上述公式中的A至D具有以下涵义:
A:ADAMTS4的mRNA的表达量(ADAMTS4/β-肌动蛋白)属于高剂量组,且被分入GR组的病例数;
B:ADAMTS4mRNA的表达量(ADAMTS4/β-肌动蛋白)属于高剂量组,且被分入NGR组的病例数;
C:ADAMTS4mRNA的表达量(ADAMTS4/β-肌动蛋白)属于低剂量组,且被分入GR组的病例数;以及
D:ADAMTS4mRNA的表达量(ADAMTS4/β-肌动蛋白)属于低剂量组,且被分入NGR组的病例数病人数量。
表2
灵敏度 | 40.0% |
特异性 | 94.4% |
PPV | 85.7% |
NPV | 65.4% |
--GR组和NGR组间的第二比较(ADAMTS5)--
以ADAMTS5的含量作为指标,针对上述低剂量组和上述高剂量组,进一步分为GR组(反应性良好组)和NGR组(无反应+中度反应)的情况下的分类如表3所示。
表3
ADAMTS5 | GR | NGR | 总计 |
高剂量组 | 6 | 1 | 7 |
低剂量组 | 9 | 17 | 26 |
总计 | 15 | 18 | 33 |
x2p=0.016
基于表3所示的分类,按下列公式计算灵敏度、特异性、阳性预测率和阴性预测率。结果如表4所示。
灵敏度(%)=E/(E+G)×100
特异性(%)=H/(H+F)×100
阳性预测率(PPV)(%)=E/(F+E)×100
阴性预测率(NPV)(%)=H/(H+G)×100
需要说明的是,在上述公式中E至H具有以下涵义:
E:ADAMTS5mRNA的表达量(ADAMTS5/β-肌动蛋白)属于高剂量组,且被分入GR组的病例数;
F:ADAMTS5mRNA的表达量(ADAMTS5/β-肌动蛋白)属于高剂量组,且被分入NGR组的病例数;
G:ADAMTS5mRNA的表达量(ADAMTS5/β-肌动蛋白)属于低剂量组,且被分入GR组的病例数;以及
H:ADAMTS5mRNA的表达量(ADAMTS5/β-肌动蛋白)属于低剂量组,且被分入NGR组的病例数。
表4
灵敏度 | 40.0% |
特异性 | 94.4% |
PPV | 85.7% |
NPV | 65.4% |
从表2和表4的结果可知,ADAMTS4mRNA的表达量(ADAMTS4/β-肌动蛋白)、ADAMTS5mRNA的表达量(ADAMTS5/β-肌动蛋白)属于高剂量组的情况下,预测其属于GR组的阳性预测率(PPV)的每一个均高达85.7%,表明以给药阿达木单抗前ADAMTS4或ADAMTS5含量作为指标,可以预测对类风湿性关节炎的药效。
--缓解组(Re)和非缓解组(Nre)间的第一比较(ADAMTS4)--
以ADAMTS4的含量作为指标,针对上述低剂量组及高剂量组,进一步分入缓解组(Re)和非缓解组(Nre)的情况下的分类如表5所示。
表5
ADAMTS4 | 缓解组 | 非缓解组 | 总计 |
高剂量组 | 4 | 3 | 7 |
低剂量组 | 3 | 23 | 26 |
总计 | 7 | 26 | 33 |
x2p=0.09
基于表5所示的分类,按下列公式计算灵敏度、特异性、阳性预测率和阴性预测率。结果如表6所示。
灵敏度(%)=I/(I+K)×100
特异性(%)=L/(L+J)×100
阳性预测率(PPV)(%)=I/(J+I)×100
阴性预测率(NPV)(%)=L/(L+K)×100
在上述公式中,I至L具有以下涵义:
I:ADAMTS4mRNA的表达量(ADAMTS4/β-肌动蛋白)属于高剂量组,且被分入缓解组的病例数;
J:ADAMTS4mRNA的表达量(ADAMTS4/β-肌动蛋白)属于高剂量组,且被分入非缓解组的病例数;
K:ADAMTS4mRNA的表达量(ADAMTS4/β-肌动蛋白)属于低剂量组,且被分入缓解组的病例数;以及
L:ADAMTS4mRNA的表达量(ADAMTS4/β-肌动蛋白)属于低剂量组,且被分入非缓解组的病例数。
表6
灵敏度 | 57.1% |
特异性 | 88.5% |
PPV | 57.1% |
NPV | 88.5% |
--缓解组(Re)和非缓解组(Nre)间的第二比较(ADAMTS5)--
ADAMTS5的含量以指标,针对低剂量组和高剂量组,进一步分入缓解组(Re)和非缓解组(Nre)的情况下的分类,如表7所示。
表7
ADAMTS5 | 缓解组 | 非缓解组 | 总计 |
高剂量组 | 5 | 2 | 7 |
低剂量组 | 2 | 24 | 26 |
总计 | 7 | 26 | 33 |
x2p=0.0003
基于表7所示的分类,按下列公式计算灵敏度、特异性、阳性预测率和阴性预测率。结果如表8所示。
灵敏度(%)=M/(M+O)×100
特异性(%)=P/(P+N)×100
阳性预测率(PPV)(%)=M/(N+M)×100
阴性预测率(NPV)(%)=P/(P+O)×100
在上述公式中,M至P具有以下涵义:
M:ADAMTS5mRNA的表达量(ADAMTS5/β-肌动蛋白)属于高剂量组,且被分入缓解组的病例数;
N:ADAMTS5mRNA的表达量(ADAMTS5/β-肌动蛋白)属于高剂量组,且被分入非缓解组的病例数;
O:ADAMTS5mRNA的表达量(ADAMTS5/β-肌动蛋白)属于低剂量组,且被分入缓解组的病例数;以及
P:ADAMTS5mRNA的表达量(ADAMTS5/β-肌动蛋白)属于低剂量组,且被分入非缓解组的病例数。
表8
灵敏度 | 71.4% |
特异性 | 92.3% |
PPV | 71.4% |
NPV | 92.3% |
从表6和表8的结果可知,在ADAMTS4mRNA的表达量(ADAMTS4/β-肌动蛋白)、ADAMTS5mRNA的表达量(ADAMTS5/β-肌动蛋白)被分入高剂量组的情况下,预测为缓解组的阳性预测率(PPV)分别高达57.1%(ADAMTS4)、71.4%(ADAMTS5)。
另外,在ADAMTS4mRNA的表达量(ADAMTS4/β-肌动蛋白)、ADAMTS5mRNA的表达量(ADAMTS5/β-肌动蛋白)被分入低剂量组的情况下,否定为缓解组(非缓解组)的阴性预测率(NPV)分别高达88.5%(ADAMTS4)、92.3%(ADAMTS5),相当高。
上述表示,以给药阿达木单抗前的ADAMTS4或ADAMTS5含量作为指标,可以预测患者是否会得到缓解。
--预测1:给药阿达木单抗后的DAS28(ADAMTS4)--
图2A显示给药阿达木单抗前外周血中ADAMTS4mRNA表达量(ADAMTS4/β-肌动蛋白)与给药阿达木单抗12周后DAS28(12w)的关系的研究结果。
如图2A所示,给药阿达木单抗前ADAMTS4mRNA表达量(ADAMTS4/β-肌动蛋白)与给药阿达木单抗12周后DAS28(12w)的变化呈负相关(r=-0.370)。
也就是说,这些结果表明,来自受试者的样品中给药阿达木单抗前ADAMTS4含量越高,人源化抗-TNFα抗体药物针对类风湿性关节炎越有效,并且基于来自给药阿达木单抗前的受试者的样品中ADAMTS4含量能够定量化并预测给药12周后人源化抗-TNFα抗体药物的药效。
--预测2:给药阿达木单抗后的DAS28(ADAMTS5)--
图2B显示给药阿达木单抗前外周血中ADAMTS5mRNA表达量(ADAMTS5/β-肌动蛋白)与给药阿达木单抗12周后DAS28(12w)的变关系的研究结果。
如图2B所示,给药阿达木单抗前ADAMTS5mRNA表达量(ADAMTS5/β-肌动蛋白)与给药阿达木单抗12周后DAS28(12w)的变化呈负相关(r=-0.476)。
也就是说,这些结果表明,来自受试者的样品中给药阿达木单抗前ADAMTS5含量越高,人源化抗-TNFα抗体药物针对类风湿性关节炎越有效,并且基于来自给药阿达木单抗前的受试者的样品中ADAMTS5含量能够定量化并预测给药12周后人源化抗-TNFα抗体药物的药效。
产业上的利用可能性
本发明的人源化抗-TNFα抗体药物针对类风湿性关节炎的药效预测方法根据给上述药物之前的某一时刻的ADAMTS4和ADAMTS5至少之一的含量,能够可靠性高且简便地预测人源化抗-TNFα抗体药物针对类风湿性关节炎的药效;还可以预测给上述药物之后的类风湿性关节炎的活动度,另外,通过将上述药物给药更确实有效的患者从而可以给规避不必要的副作用,因此,能够适当地用于医疗诊断和治疗。
本发明的人源化抗-TNFα抗体药物针对类风湿性关节炎的药效预测装置根据给上述药物之前的某一时刻的ADAMTS4和ADAMTS5至少之一的含量,能够可靠性高且简便地预测人源化抗-TNFα抗体药物针对类风湿性关节炎的药效;还可以预测给上述药物之后的类风湿性关节炎的活动度,另外,通过将上述药物给药更确实有效的患者从而可以给规避不必要的副作用,因此,能够适当地用于医疗诊断和治疗。
Claims (8)
1.一种人源化抗-TNFα抗体药物针对类风湿性关节炎的药效预测方法,其特征在于,包括如下步骤:
测量来自受试者的样品中ADAMTS4和ADAMTS5至少之一的含量;以及
以ADAMTS4和ADAMTS5至少之一的含量作为指标,评价所述人源化抗-TNFα抗体药物针对所述受试者的类风湿性关节炎是否有效。
2.根据权利要求1所述的人源化抗-TNFα抗体药物针对类风湿性关节炎的药效预测方法,其中,所述人源化抗-TNFα抗体药物是阿达木单抗(ADA)。
3.根据权利要求1或2所述的人源化抗-TNFα抗体药物针对类风湿性关节炎的药效预测方法,其中,所述来自受试者的样品中ADAMTS4和ADAMTS5至少之一的含量是ADAMTS4mRNA和ADAMTS5mRNA至少之一的表达量。
4.根据权利要求3所述的人源化抗-TNFα抗体药物针对类风湿性关节炎的药效预测方法,其中,通过实时PCR法测量所述ADAMTS4mRNA和ADAMTS5mRNA至少之一的表达量。
5.一种人源化抗-TNFα抗体药物针对类风湿性关节炎的药效预测装置,其特征在于,包括:
测量单元,所述测量单元测量来自受试者的样品中ADAMTS4和ADAMTS5至少之一的含量;以及
评价单元,所述评价单元以ADAMTS4和ADAMTS5至少之一的含量作为指标,评价所述人源化抗-TNFα抗体药物针对所述受试者的类风湿性关节炎是否有效。
6.根据权利要求5所述的人源化抗-TNFα抗体药物针对类风湿性关节炎的药效预测装置,其中,所述人源化抗-TNFα抗体药物是阿达木单抗(ADA)。
7.根据权利要求5或6所述的人源化抗-TNFα抗体药物针对类风湿性关节炎的药效预测装置,其中,所述来自受试者的样品中ADAMTS4和ADAMTS5至少之一的含量是ADAMTS4mRNA和ADAMTS5mRNA至少之一的表达量。
8.根据权利要求7所述的人源化抗-TNFα抗体药物针对类风湿性关节炎的药效预测装置,其中,通过实时PCR法测量所述ADAMTS4mRNA和ADAMTS5mRNA至少之一的表达量。
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Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
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津坂憲政等: "投与前血中ADAMTS5発現量をもとにしたRAに対するインフリキシマブ有効性予測", 《日本リウマチ学会総会・学術集会・国際リウマチシンポジウムプログラム・抄録集》, vol. 5318, 19 March 2009 (2009-03-19) * |
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