CN102639081A - 牙齿支架 - Google Patents

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Abstract

本发明提供一种无细胞哺乳动物牙齿形支架，其包含趋化性、成骨性、成牙质性、成釉质性或成牙骨质性化合物。还提供一种在哺乳动物的嘴中代替牙齿的方法，其中牙齿缺失并且在嘴中在缺失牙齿的位置存在牙槽。所述方法包括在牙槽中植入具有丢失牙齿的形状的无细胞支架。此外，提供了一种制备牙齿支架的方法。所述方法包括合成哺乳动物牙齿形状的无细胞支架并加入至少一种趋化性、成骨性、成牙质性、成釉质性或成牙骨质性化合物。

Description

牙齿支架
相关申请的交叉引用
本申请要求2009年6月17日提交的美国临时申请号61/187,875和2010年6月11日提交的美国临时申请号61/354,164的权益；它们通过全文引用结合到本文中。
发明背景
本发明涉及组织工程支架。
生物医学工程和牙齿再生。掉牙通常由各种口腔疾病和生理起因引起，包括龋齿、牙周病、损伤、遗传病和老龄化(Amar 2003，Philstrom2005，Kim 2006)。掉牙可导致身体和精神的痛苦，其可降低个体的自尊和生活品质(Amar 2003，Philstrom 2005，Kim 2006)。许多形式的牙病和一些医学病况如不受控的糖尿病提高掉牙的风险。对于无牙症的治疗，目前的选择局限于使用牙齿移植物和/或常规的固定或可移动假体。
近来，生物医学工程工具的出现和发展已导致在医学领域新的患者护理范围。例如，初步人临床实验已报道在成骨不全的儿童中在全身灌注骨髓基质干细胞(BMSSC)或骨髓细胞之后骨形成水平提高(Horwitz 2001，Horwitz 2002)。在牙齿组织工程、材料科学和干细胞生物学领域近来的进展提出，牙齿再生将是可能的(Duailibi 2006)。此外，存在于牙齿或颅面组织的不同的间充质干细胞(MSC)的近来的鉴定扩展了在帮助牙齿组织(比如牙质、牙骨质和牙周韧带(PDL))再生中潜在的临床益处范围(Shi 2005)。存在于乳牙和固齿的髓组织中的牙齿组织远祖细胞可用于使牙质和牙槽骨再生(Shi 2005；Zhang 2005)。此外，由大鼠和猪牙蕾二者分离的细胞可用于生物工程解剖学校正牙冠，但是具有有限的可预测性(Duailibi 2004，Honda 2005，Young 2002，Young 2005)。
牙齿/牙周复合体通常称为个体器官。虽然认为该器官相对小，但是其结构和发育复杂性是公认的。牙齿结构由三种钙化的组织类型(牙釉质、牙质和牙骨质以及牙髓)组成。牙质占据牙齿的主体，而牙釉质和牙骨质分别覆盖牙冠和尖端部分。牙周组织具有对牙齿的支持作用，并且由牙骨质、牙周韧带、牙槽骨和牙龈组成。牙周韧带为通过贯穿纤维(Sharpey’s fiber)使牙骨质与牙槽骨连接的连接组织。牙周韧带能感知和缓冲咀嚼期间的机械力。
尽管牙齿结构复杂，但是生物医学工程技术的进展已产生两种目前采用的牙齿再生方法。第一种方法基于组织工程，目标是通过在支架生物材料中接种干细胞使牙齿再生(Young 2002，Duailibi 2004，Honda 2005)。该技术已显示牙周组织再生的有希望的结果(Nakahara2006)。第二种方法试图复制或模仿胚胎牙齿形成的发育过程(Nakahara 2006)。该方法利用由小鼠胎儿采集的胚胎组织(牙齿上皮和牙齿间充质)并需要了解在胚胎中调节早期牙齿发育的原理(Ohazama2004，Hu 2006，Nakao 2007)。采用这些方法，在许多研究中，将生物工程化的牙胚移植到动物宿主的身体中，所述动物宿主通常为啮齿动物，其中存在足够的血流来提供必要的营养物和氧，以使组织形成最佳(Nakahara 2006)。
在组织再生中使用干细胞以及遇到的挑战。干细胞为存在于正常组织中的静止的细胞群，其呈现不对称的细胞分裂的不同的特性，形成两种子系细胞-新的远祖细胞/干细胞和能形成分化的组织的另一种子系细胞(Hawkins 1998，Lin 1998)。牙齿间充质远祖细胞已被鉴定并且特征为人乳牙和固齿两者的牙髓(Gronthos 2000，Mooney 1996，Shi 2005)。如前面提及的，存在于未成熟的牙蕾中的这些后天的上皮和间充质牙齿干细胞/远祖细胞已证明能产生生物工程化的和解剖学的校正，但是使含有牙釉质、牙质、髓和牙槽骨的牙冠的大小微型化(Shi 2005；Zhang 2005)。
已知牙周韧带细胞它们的再生潜能，以引起形成固有层、牙骨质、骨和牙周韧带(Melcher 1985，McCulloh 1985)。对于由牙周韧带的主要外植体衍生的细胞的亚群，已证明牙周韧带干细胞体外形成矿化的沉积物的能力(Arceo 1991，Cho 1992)。相信牙周韧带干细胞需要合适的支架来诱导体内形成骨、牙质和牙骨质(Gronthos 2000，Krebsbach1998)。当将牙周韧带干细胞掺入到羟基磷灰石/磷酸三钙支架中并在小鼠背部的皮下区域中异位移植时，形成典型的牙骨质/牙周韧带样结构(Seo 2004)。此外，已证明在移植物内的I型胶原蛋白-阳性牙周韧带样组织与新形成的牙骨质连接，它在形态上与贯穿纤维类似(Seo2004)。
牙齿干细胞生物技术和细胞-介导的鼠科牙齿再生的近来的发展助长了研究者探究具有适当功能性质的活的牙齿再生的潜能(Duailibi2004，Ohazama 2004，Shi 2005)。可使用许多不同的干细胞使鼠科牙齿再生，以在体内协同形成牙齿结构(Duailibi 2004，Ohazama 2004，Young 2005)。此外，当移植到免疫受损的小鼠中时，分别通过人牙髓干细胞(DPSC)和牙周韧带干细胞(PDLSC)使牙质/髓组织和牙骨质/牙周复合体再生(Gronthos 2000，Seo 2004)。然而，由于人牙齿生长和发育的复杂性，用目前可用的再生生物技术，整个牙齿结构(包括牙釉质、牙质/髓复合体和牙周组织)作为人的功能实体的再生是一个挑战(Sonomaya 2006)。
在先前的研究中已报道了在牙齿组织的再生中使用干细胞的挑战(Duailibi 2004，Young 2002，Young 2005)。已公认，虽然在生物工程化的牙齿构造中形成多个微型牙冠是可能的，但是实际大小的整牙再生遇到许多挑战。这些挑战同样归结于牙齿发育的复杂性质(Duailibi 2006，Tummers 2003)。
细胞归位的概念。已提出，在支架内干细胞-接种的常规方法的目的是模仿细胞结构和在体外或体内重新产生功能组织等价物。细胞衍生自终端器官或更加未分化的来源比如骨髓(Schantz 2007)。这些方法受到问题的限制，比如来自细胞采集的供体部位发病率和在细胞-支架构造的移植部位的异质品质的组织形成(Schantz 2007)。因此，细胞归位的概念目前引起较多的关注。细胞归位目的是诱导期望的细胞在特定的解剖学部位归位至充满细胞因子的支架(Schantz 2007)。该方法试图体内组织再生，而无需细胞-接种。因此，细胞归位可为组织工程提供细胞方法的增强和为组织再生提供新型最小侵入的选择(Schantz2007)。
基于上述讨论，需要牙齿支架的进一步开发。本发明解决该需求。
概述
在一些实施方案中，提供了一种无细胞哺乳动物牙齿形支架。所述支架包含趋化性、成骨性、成牙质性、成釉质性或成牙骨质性化合物。
在其它实施方案中，提供了一种在哺乳动物的嘴中代替牙齿的方法。在这些实施方案中，牙齿缺失并且在嘴中在缺失牙齿的位置存在牙槽。所述方法包括在牙槽中植入具有丢失牙齿的形状的无细胞支架。
此外，提供了制备牙齿支架的方法。所述方法包括合成哺乳动物牙齿形状的无细胞支架并加入至少一种趋化性、成骨性、成牙质性、成釉质性或成牙骨质性化合物。
其它目的和特征部分是显而易见的，部分在下文中指出。
附图简述
本领域技术人员将理解以下描述的附图仅用于说明的目的。这些附图不旨在以任何方式限制本教导的范围。
图1为显示在实施例中描述的研究的设计的流程图。
图2为显示使用3D印刷系统(BioplotterTM)的支架制造的照片。图A显示用于产生支架的BioplotterTM；图B显示制造的大鼠下颌中央门牙根(左)和人臼齿形PCL-HA支架(右)；图C显示用于使支架灭菌的环氧乙烷灭菌器；图D显示用生长因子(SDF1和BMP-7)处理的支架；图E显示在移植前用于在支架中胶原蛋白交联的温育的支架；图F显示被生长因子和胶原蛋白凝胶负载的支架；图G显示在拔出槽和背部部位在大鼠中移植的支架。
图3为用于在大鼠背部移植的制造的人下颌臼齿形支架的照片。冠和根单独制造并后来融合。微通道明显。
图4为拔出下颌中央门牙然后在槽中移植根形支架的照片。图A显示下唇的回缩；图B显示牙龈瓣的切开和反射；图C显示左下颌中央门牙的无创伤拔出，显示槽的保存的骨壁；图D显示拔出的门牙和根形支架的比较；图E显示在拔出槽中移植的支架；图F显示缝合的和主要封闭的牙龈瓣。
图5为在大鼠背部部位中皮下移植的人下颌臼齿形支架的照片。图A显示制造的2-cm切口；图B显示产生皮下袋；图C显示将支架移植到袋中；图D显示主要闭合。
图6为显示下颌中央门牙支架的整体采集的照片。图A显示在采集之前明显的完全伤口愈合；图B显示为接近支架制造的切口；图C显示支架(右)和相邻的门牙(左)的整体采集。
图7为显示用于在背部部位移植的支架采集的程序的照片。图A显示在采集之前完全伤口愈合；图B显示为接近支架制造的切口；图C显示支架的筋膜包封；图D显示回收的支架。
图8为显示选择用于组织学分析的区域的染色的支架部分的显微照片。图A显示在下颌中央门牙支架中选择的三个区域；图B显示在人下颌臼齿支架中选择的四个区域。
图9为显示在拔出槽内的门牙根形支架的组织-支架界面的染色的支架部分的显微照片(测试和对照组)。图A显示描述在界面骨向内生长的冯科萨氏(VK)-染色的载玻片；图B显示苏木精和曙红(H&E)-染色的部分，其显示支架对槽壁的亲密适应和整合；图C显示证明在PCL-HA线之间明显的血管生成和软组织向内生长的较高放大图。
图10为显示来自背部部位的人下颌臼齿形支架的组织-支架界面的染色的支架部分的显微照片(测试和对照组)。图A显示在线周围和在线之间的组织的血管生成和向内生长；图B显示说明在支架和包封组织之间的整合的较高放大图。
图11为染色的支架部分的显微照片，其显示来自拔出槽的支架的代表性图，其显示测试支架(图A)与不含生长因子的对照支架(图B)的细胞密度差异。
图12为染色的支架部分的显微照片，其显示来自背部部位的支架的代表性图，其显示测试支架(图A)与不含生长因子的对照支架(图B)的细胞密度差异。
图13为显示在实验组和移植部位之间的细胞密度差异的图。GF+：测试；GF-：对照。“*”：p＜0.05。
图14为染色的支架部分的显微照片，其显示来自拔出槽的支架的代表性图，其显示测试支架(图A)与不含生长因子的对照支架(图B)的血管密度差异。
图15为染色的支架部分的显微照片，其显示来自背部部位的支架的代表性图，其显示测试支架(图A)与不含生长因子的对照支架(图B)的细胞密度差异。
图16为显示在实验组和移植部位之间的血管密度差异的图。GF+：测试；GF-：对照。“*”：p＜0.05。
图17为染色的支架部分的显微照片，其显示说明来自拔出槽(图A)与背部部位(图B)的支架的血管直径差异的代表性图。
图18为显示在实验组和移植部位之间的血管直径差异的图。GF+：测试；GF-：对照。“*”：p＜0.05。
图19为VK-染色的支架部分的显微照片，其显示来自拔出槽的测试组支架的代表性图，其显示矿化。
图20为VK-染色的支架部分的显微照片，其显示来自背部部位的测试组支架的代表性图，其显示矿化。
详述
本发明部分基于以下意外的发现，当移植到牙槽内时，牙齿形支架将吸引移殖到支架的细胞以提供活的牙齿，即使没有外源性地为支架提供细胞。
因此，在一些实施方案中，提供了一种无细胞哺乳动物牙齿形支架。所述支架包含趋化性、成骨性、成牙质性、成釉质性或成牙骨质性化合物。因此移植这些支架，而没有外源性施用的细胞。如在实施例中建立的，通过迁移进入支架的本地细胞，移植的支架的移殖充分进行。通过掺入到支架中的趋化性、成骨性、成牙质性、成釉质性或成牙骨质性化合物，移殖得到进一步助长。
所述化合物可具有任何结构，包括但不限于蛋白、低聚肽、小的有机分子(即，小于约2000mw或约1000mw或约500mw)、含金属离子的分子、碳水化合物或脂质。本文使用的趋化性化合物为吸引细胞的化合物。成骨性化合物为助长新骨合成的化合物。成牙质性化合物为助长新牙质合成的化合物。成釉质性化合物为助长牙齿牙釉质合成的化合物。成牙骨质性化合物为助长牙骨质合成的化合物。
本文使用的“支架”为对细胞的生长和/或组织的形成提供基质的结构。支架的有用的性质为多孔性、生物相容性和生物降解性、能支持细胞生长及其作为受控的基因-和蛋白-递送媒介物的用途(Murphy1999)。支架提供的三维大分子结构引导生物工程化的组织的最终形状(Murphy 1999)。
这些实施方案的支架可具有任何哺乳动物牙齿的形状。在这些实施方案的一些中，支架具有人门牙、人犬牙、人双尖牙或人臼齿的形状。
在这些实施方案中的化合物可为趋化性、成骨性、成牙质性、成釉质性或成牙骨质性的任何化合物。非限制性实例包括血小板-衍生的生长因子(PDGF)、内皮细胞生长因子(ECGF)、转换生长因子-β1(TGF-β1)、表皮生长因子(EGF)、肝细胞生长因子(HGF)、基质细胞-衍生的因子-1(SDF1)、骨形态发生蛋白(BMP)、TGF-β、生长和分化因子(GDF)、胰岛素样生长因子-1(IGF1)、血管内皮生长因子(VEGF)、成纤维细胞生长因子(FGF)、牙质基质蛋白、牙质涎腺蛋白、骨涎腺蛋白、牙釉蛋白或整联蛋白。
在一些实施方案中，所述化合物为具有趋化性性质的SDF1。SDF1为趋化因子，据信它对于创伤后组织修复在干细胞和远祖细胞补充(recruitment)中是必要的(Kollet 2003)。SDF1还可诱导造血远祖细胞在化学趋化性室内的迁移(Kim 1998)。此外，SDF1对于骨髓基质细胞向骨髓迁移是重要的，如间充质干细胞(MSC)响应SDF1刺激的剂量-依赖性迁移所显示(Win 2004)。SDF1还具有抗凋亡性质，直接保护造血干细胞免受在其它生长因子存在下γ-辐射的凋亡效应(Herodin 2003)。此外，可引导衍生自骨髓的间充质干细胞(MSC)朝向SDF1迁移(Schantz 2007)。
在其它实施方案中，所述化合物为BMP。BMP2、6和9显然是MSC成骨性分化的最有效的试剂，而其余的BMP在促进交付(commit)的成骨细胞前体和成骨细胞的末端分化方面更有效(Cheng 2003)。
在这些实施方案的一些方面中，所述BMP为BMP-7。BMP-7在将间充质细胞转化为骨和软骨中起到关键的作用。BMP-7处理足以诱导在各种细胞类型中成骨细胞分化的所有基因标记物(Chen 2004)。注意到，BMP-7已得到食品和药品管理局(FDA)的批准用于人临床使用。
许多研究已调查了外源性生长因子在将生长因子递送至移植部位的载体中的作用和行为。虽然载体可能不能贡献组织形成所需的任何另外的因素，但仍可以是生长过程的重要组分(Wozney 1990)。载体功能之一是保持移植部位的因子，并因此提高其局部浓度。载体还用作其中可形成组织并因此帮助限定其中可形成新组织的区域的环境(Whang 1998)。胶原蛋白或合成载体已用作递送媒介物，并且它们的物理化学性质以及产生的微观环境在诱导的结果中起作用。载体可为固体异种性(例如，羟基磷灰石)(Kuboki 1995，Murata 1998)、固体异源体性(聚乙烯聚合物)材料(Saito 1998，Isobe 1999)或自生的凝胶(Sweeney 1995，Schwartz 1998)、异源性(Bax 1999，Viljanen 1997)或异源体性来源(Santos 1998)以及上述的组合(Alpaslan 1996)。
载体功能之一是在移植部位保持因子并因此提供其局部浓度。胶原蛋白基质在初期浸渍期间保持至多65％的BMP，并在两个阶段中将它释放：在移植数小时内的初期阶段和取决于载体性质及其几何特性的第二阶段(Uludag 1999)。相信BMP不与载体结合(Uludag 1999)，而是物理截留于它的结构中，这使得某些设计与其它相比更有利于骨诱导(Tsuruga 1997)。在胶原蛋白海绵载体的情况下，大量的胶原蛋白交联和灭菌方法影响BMP沉淀，和随后胶原酶的海绵降解的抗性(Friess1999)。与聚合基质相比，胶原蛋白载体还可导致再生骨密度提高(Cochran 1997)。
BMP-7在将间充质细胞转化为骨和软骨中起到关键的作用。BMP-7处理足以诱导在各种细胞类型中成骨细胞分化的所有基因标记物(Chen 2004)。还值得注意到，BMP-7已得到食品和药品管理局(FDA)的批准用于人临床使用。
在这些支架的一些中，存在趋化性生长因子以及成骨性、成牙质性、成釉质性或成牙骨质性生长因子。在一个具体的实施方案中，所述趋化性生长因子为SDF1，并且所述成骨性、成牙质性、成釉质性或成牙骨质性生长因子为BMP-7。
这些实施方案的支架可进一步包含任何其它生物活性分子，例如抗生素或另外的趋化性生长因子或另一种成骨性、成牙质性、成釉质性或成牙骨质性生长因子。在一些实施方案中，通过加入例如人血清白蛋白(HSA)、羟乙基淀粉、葡聚糖或它们的组合，将支架加强。用于本申请组合物的这些化合物的合适的浓度为本领域技术人员已知的，或者无需过度实验可容易地确定。
支架中化合物的浓度根据化合物的性质、其生理作用和期望的治疗或诊断效果而变。治疗有效量通常为治疗剂显示期望的效果而无过度毒性的足够的浓度。在一些实施方案中，支架包含约10ng/g-1000μg/g支架的BMP-7在支架中和约10ng/g-1000μg/g支架的SDF1在支架中。在更具体的实施方案中，BMP-7以约100μg/g支架在支架中，并且SDF1以100μg/g支架在支架中。
可通过任何已知的方法将化合物掺入支架中。在一些实施方案中，将化合物嵌入凝胶(例如，掺入到支架的孔中的胶原蛋白凝胶)，如实施例所述。
或者，化学改性方法可用于将化合物共价连接在支架的表面上。使用本领域公知的偶联剂(比如醛化合物、碳二亚胺等)，可将支架的表面官能团与化合物的反应性官能团偶联，以形成共价键。此外，间隔分子可用于间隔表面反应性基团和生物分子的反应性基团，使得这些分子在基质的表面上更柔性。将生物分子与基质的内部或外部连接的其它类似方法为本领域技术人员已知。
或者可通过基于载体的系统(比如包封媒介物)将化合物引入到基质内或基质上。这些媒介物可用作缓释组合物。例如，可将生长因子微包封，以提供增强的稳定性和/或延长的递送。包封媒介物包括但不限于微粒、脂质体、微球体等，或任何上述的组合，以提供不同比例的期望的释放分布。试剂的受控-释放递送的其它方法为专业技术人员已知。此外，可将这些和其它系统组合和/或修改，以使试剂在基质内的整合/释放最佳。
聚合微球体可使用天然存在或合成的聚合物生产，并且为尺寸在0.1-500μm范围内的颗粒系统。聚合胶束和聚合物泡囊(polymeromes)为具有与微球体类似特性的聚合递送媒介物，并且也能促进本文描述的化合物的包封和基质整合。对于各种有效载荷的微球体的制造、包封和稳定在本领域技术范围内(例如参见，Varde&Pack(2004)ExpertOpin.Bio1.4(1)35-51)。通过聚合物的类型、聚合物分子量、共聚物组成、加入到微球体制剂的赋形剂和微球体尺寸，可调适微球体的释放速率。可用于形成微球体的聚合物材料包括PLA、PLGA、涂有DPPC的PLGA、DPPC、DSPC、EVAc、明胶、白蛋白、壳聚糖、葡聚糖、DL-PLG、SDLM、PEG(例如，ProMaxx)、透明质酸钠、二酮哌嗪衍生物(例如，Technosphere)、磷酸钙-PEG颗粒和/或寡糖衍生性DPPG(例如，Solidose)。可例如使用水/油单乳液方法、水-油-水双乳液方法或冻干实现包封。可利用几种工业包封技术(例如，
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Alkerme)。
脂质体还可用于将化合物与支架整合。脂质体的试剂携带能力和释放速率可取决于脂质组成、尺寸、电荷、药物/脂质比率和递送方法。常规的脂质体由中性或阴离子脂质(天然或合成)组成。常用的脂质为卵磷脂，比如磷脂酰胆碱、磷脂酰乙醇胺、鞘磷脂、磷脂酰丝氨酸、磷脂酰甘油和磷脂酰肌醇。脂质体包封方法为本领域通常已知(Galovic等人(2002)Eur.J.Pharm.Sci.15，441-448；Wagner等人(2002)J.Liposome Res.12，259-270)。靶向的脂质体和反应性脂质体也可与试剂和基质组合使用。靶向的脂质体具有靶向配体，比如与它们的表面连接的单克隆抗体或外源凝集素，使得与特异性受体和/或细胞类型相互作用。反应性或多形态脂质体包括宽范围的脂质体，它们的共同性质是当特定的相互作用之后倾向于改变它们的相和结构(例如，pH-敏感性脂质体)。例如参见Lasic(1997)Liposomes in Gene Delivery(基因递送中的脂质体)，CRC Press，FL)。
这些实施方案的支架可使用专业技术人员公认有用的任何材料来制造。合适的基质材料例如在以下讨论：Ma和Elisseeff编辑(2005)Scaffolding in Tissue Engineering(在组织工程中支架化)，CRC，ISBN 1574445219；Saltzman(2004)Tissue Engineering：EngineeringPrinciples for the Design of Replacement Organs and Tissues(组织工程：代替器官和组织的设计的工程原理)，Oxford ISBN 019514130X。用于全部或部分支架的可能有用的材料的非限制性实例包括聚乙二醇、聚丙交酯、聚羟基乙酸、丙交酯-乙交酯共聚物、聚(己内酯)、聚酸酐、polyglactin、聚碳酸酯、聚酰胺、聚酸酐、聚氨基酸、聚原酸酯、聚乙缩醛、聚氰基丙烯酸酯、聚磷腈、可降解的聚氨酯、聚丙烯酸酯、乙烯-乙酸乙烯酯聚合物和其它酰基取代的纤维素乙酸盐和它们的衍生物、聚氨酯、聚苯乙烯、聚氯乙烯、聚氟乙烯、聚乙烯基吡咯烷酮、聚(乙烯基咪唑)、氯磺化聚烯烃、聚环氧乙烷、聚乙烯醇、特氟
Figure BPA00001514684400121
尼龙、琼脂糖、藻酸盐(例如，藻酸钙凝胶)、纤维蛋白、纤维蛋白原、纤维连接蛋白、胶原蛋白(例如，胶原蛋白凝胶)、明胶、透明质酸、几丁质和其它合适的聚合物和生物聚合物，或以上的类似物、混合物、组合和衍生物。
在一些实施方案中，支架由包含骨传导(osteoconductive)材料的组合物制造。骨传导材料的非限制性实例为羟基磷灰石(HA)。由于HA优良的生物相容性和高生物活性，它已用作骨代用品许多年(Liao2006，Nebahat 2006，Lijun 2006，Wei 2003)。
虽然HA具有良好的生物活性和骨传导性，但是它非常脆并且固有拉伸性质差。因此，在一些实施方案中，将HA与ε-聚己内酯(PCL)组合。由于PCL需要好几年才在体内降解并且为生物相容性、相对廉价和可大量得到，它是良好的骨支架材料(Rich 2002，Kim 2004)。PCL和HA的组合(PCL-HA)提供了生物活性、生物降解性和强度的期望的组合(Patcharaporn 2005，Rezwan 2006，Landis 1995，Ziv 1994)。认为复合物PCL-HA的材料具有生物相容性、细胞-粘合、增殖和分化的最佳支架性质(Zhao 2008)。在一些实施方案中，支架包含约80％重量聚己内酯和约20％重量羟基磷灰石的混合物。在其它实施方案中，支架包含约60％重量聚己内酯和约40％重量羟基磷灰石至约95％重量聚己内酯和约5％重量羟基磷灰石的任何数量。例如，支架可包含约70％重量聚己内酯和约30％重量羟基磷灰石。作为另一个实例，支架可包含约90％重量聚己内酯和约10％重量羟基磷灰石。
在一些实施方案中，支架具有高孔隙率。这种多孔结构为新的骨组织的细胞迁移、粘合和向内生长提供空间(Gazdag 1995，Rezwan2006，Mano 2004，Shin 2003，Kim 2001，Leong 2003)。
支架的孔和通道可被工程化，以具有各种直径。例如，支架的孔可具有数微米到数毫米的直径范围。在一些实施方案中，基质材料的孔包括微通道。微通道通常平均直径为约0.1μm-约1,000μm，例如，约50μm-约500μm(例如约100μm、150μm、约200μm、约250μm、约300μm、约350μm、约400μm、约450μm、约500μm或约550μm)。本领域技术人员将理解微通道直径的分布可具有任何分布，包括正态分布或非正态分布。在一些实施方案中，微通道为基质材料天然存在的特征。在其它实施方案中，将微通道工程化，以存在于基质材料中。
在一些实施方案中，将所述化合物嵌入微通道中的凝胶中。任何凝胶可用于该目的。在一些实施方案中，所述凝胶为胶原蛋白凝胶。
在各种实施方案中，支架进一步包含无孔牙冠(cap)。这种牙冠为支架提供进一步的强度和防止感染。所述无孔牙冠可简单地为与支架的其余部分相同的材料，除了没有孔。或者，所述无孔牙冠可为不同的材料，例如，典型的牙齿牙冠材料，比如陶瓷或金。
本文还提供了在哺乳动物的嘴中代替牙齿的方法。在这些实施方案中，牙齿缺失并且在嘴中在缺失牙齿的位置存在牙槽。所述方法包括在牙槽中植入具有丢失牙齿的形状的无细胞支架。
使用多种方法来制造多孔支架，包括颗粒浸出、气体发泡、电自旋、冷冻干燥、由浆料使陶瓷发泡和形成聚合海绵(Mikos 1994，Mooney 1996，Qing 2002，Sylvain 2006)。然而，通过使用这些方法制备的支架在控制孔的结构和互联性方面具有一些缺点，这可限制它们在组织工程中在细胞渗透方面的应用(Yeong 2004，Tan 2003)。
在一些实施方案中，所述方法进一步包括通过计算机辅助设计(CAD)制备缺失的牙齿的模型，以及使用bioplotter合成所述支架。这种方法可提供具有高孔隙率和良好互联性的支架。如在实施例中所描述的，可制备具有受控的和可再现的孔隙率和良好限定的3D微观结构的三维(3D)支架。已提出快速原型制造(RP)方法，比如融合沉积模型化、选择性激光烧结、3D印刷、多阶段喷射固化和3D绘图(Hutmacher 2001，Moroni 2006)。
快速原型制造的关键特征为固体自由形态制造(SFF)方法：将3D计算机模型切割成层的序列，其用于逐层构造复杂的物体。通过熔体的固化、层光聚合或使用激光束诱导的烧结(选择性激光烧结)或特殊粘合剂之一使颗粒粘合来生产层(Landers 2002)。近来，已引入专门化的快速原型制造系统(BioplotterTM，EnvisionTec，德国)，使得能设计和制造具有不同内部结构的具有解剖学形状的支架，从而能精确控制孔尺寸、孔隙率、渗透性和刚度(Landers 2002；Landers 2005)。使用BioplotterTM用于制造组织-特异性PCL-HA支架的原型制造方法需要目标组织或组织缺陷的3D形态信息，这些可通过计算机断层X射线照相法(CT)或磁共振成像(MRI)得到。当缺失牙齿在嘴的另一侧具有对应物时，该对应物可用作模型来为丢失的牙齿设计支架。
以上得到的信息随后用于通过CAD设计功能支架，并且转移到BioplotterTM系统。在该系统中，BioplotterTM机器熔融支架材料，并在收集板上逐层分配支架材料(例如，PCL-HA)。作为设计的一部分，可产生孔，例如微通道。通过RP系统制造的3D支架导致显著的细胞渗透，并因此具有理想支架的性质(Heo 2007)。通过为患者提供组织-特异性解剖学形状以及用于营养物运输和血管形成的最佳化的内部微观结构，这些3D支架可具有临床应用的可能。这些方法的其它细节在PCT公布WO2009006558中提供，该公布通过引用结合。
此外，提供了一种制备牙齿支架的方法。所述方法包括合成哺乳动物牙齿形状的无细胞支架并加入至少一种趋化性、成骨性、成牙质性、成釉质性或成牙骨质性化合物。在这些方法的一些实施方案中，所述牙齿的形状像在哺乳动物中缺失的牙齿，并且所述方法进一步包括通过计算机辅助设计(CAD)制备缺失牙齿的模型、以及用bioplotter合成所述支架。当缺失的牙齿在嘴中具有对应物(例如，臼齿)时，所述方法进一步包括进行类似的臼齿的CT扫描，例如在嘴的另一侧，其中CAD利用第二臼齿的CT扫描数据来设计所述支架。
在这些方法的一些实施方案中，所述化合物为血小板-衍生的生长因子(PDGF)、内皮细胞生长因子(ECGF)、转换生长因子-βl(TGF-β1)、表皮生长因子(EGF)、肝细胞生长因子(HGF)、基质细胞-衍生的因子-1(SDF1)、骨形态发生蛋白(BMP)、TGF-β、生长和分化因子(GDF)、胰岛素样生长因子-1(IGF1)、血管内皮生长因子(VEGF)、成纤维细胞生长因子(FGF)、牙质基质蛋白、牙质涎腺蛋白、骨涎腺蛋白、牙釉蛋白或整联蛋白。
在其它实施方案中，所述支架由包含骨传导材料的组合物制造。如以上所讨论的，可用的骨传导材料的实例为羟基磷灰石。其它实例为如以上所讨论的ε-聚己内酯和羟基磷灰石的混合物。在这些方法的各种实施方案中，支架包含直径在50-500μm之间的微通道。在另外的实施方案中，支架进一步包含无孔牙冠。
在一些实施方案中，用于描述和要求保护本发明的某些实施方案的表示成分的量、性质比如分子量、反应条件等的数字应理解为在一些情况下被术语“约”修饰。在一些实施方案中，所述术语“约”用于说明该值包括用于测定该值的装置或方法的平均值的标准偏差。在一些实施方案中，在书面说明书和所附权利要求中描述的数值参数为近似值，其可根据寻求通过具体实施方案得到的期望的性质而变。在一些实施方案中，应考虑所报道的有效数的数字并应用通常的四舍五入技术来解释所述数值参数。尽管描述本发明的一些实施方案的宽范围的数值范围和参数为近似值，但是在具体实施例中描述的数值尽可能精切地报道。在本发明的一些实施方案中呈现的数值可包含由在它们相应的测试测量中发现的标准偏差必然引起的某些误差。本文中数值范围的引用仅旨在用作单独提及落入该范围的每个单独值的简化方法。除非本文另外说明，否则将每个单独的值并入说明书中，就好像本文中单独引用了一样。
在一些实施方案中，除非另外说明，否则在描述具体实施方案的上下文中(特别是在某些权利要求的上下文中)使用的术语“一”和“该”及类似引用可解释为覆盖单数和复数两者。在一些实施方案中，本文(包括权利要求)使用的术语“或”用于指“和/或”，除非明确说明是仅指替代物或者替代物相互排他。
术语“包含”、“具有”和“包括”为开放式连接动词。一个或多个这些动词的任何形式或时态，比如“包含”、“包含”、“具有”、“具有”、“包括”和“包括”也是开放式的。例如，“包含”、“具有”或“包括”一个或多个步骤的任何方法不局限于仅具有那些一个或多个步骤，并且还可覆盖其它未列举的步骤。类似地，“包含”、“具有”或“包括”一个或多个特征的任何组合物或装置不局限于仅具有那些一个或多个特征，并且可覆盖其它未列举的特征。
本文描述的所有的方法可采用任何合适的顺序进行，除非本文中另外说明或者上下文明确地否定。关于本文中某些实施方案提供的任何和所有实施例或示例性语言(例如“比如”)的使用仅旨在更好地阐明本发明，并且不对另外要求保护的本发明的范围产生限制。在说明书中没有语言应解释为说明本发明的实施必要的任何未要求保护的要素。
本文公开的本发明的供选要素或实施方案的分组不应解释为限制。每个组成员可单独涉及和要求保护或者与该组的其它成员或本文发现的其它要素进行任何组合。出于方便或可专利性的原因，组中的一个或多个成员可包括在一个组中或从一个组中删除。当出现任何这种包括或删除时，说明书在本文中可视为包含修改的组，从而实现在所附权利要求中使用的所有马库什组合的书面描述。
在本申请中引用的所有的出版物、专利、专利申请和其它参考文献出于所有目的通过全文引用结合到本文中，和好像每个单独的出版物、专利、专利申请或其它参考文献具体和单独地说明出于所有目的通过全文引用结合的程度相同。本文中参考文献的引用不应解释为承认该参考文献为本发明的现有技术。
已经详细地描述了本发明，显而易见的是，在不偏离所附权利要求限定的本发明范围的情况下，修改、变化和等价实施方案是可能的。此外，应理解，本公开中的所有实施例作为非限制性实施例提供。
实施例
提供以下非限制性实施例来进一步说明本发明。本领域技术人员应理解，在以下实施例中公开的技术代表本发明发明人发现在本发明的实施中良好运作的方法，因此可认为构成其实施方式的实施例。然而，鉴于本公开，本领域技术人员应理解，在不偏离本发明精神和范围的情况下，在所公开的具体实施方案中可进行许多改变且仍得到相似或类似的结果。
实施例1：通过细胞归位的解剖学校正牙齿的再生
牙科学的基本使命之一为恢复患病的、丢失的和失去的牙齿结构。目前，对掉牙的常规处理包括使用或不使用外科手术放置的牙齿移植物的假牙修复术治疗。尽管已报道牙齿移植物的高成功率，但并不是没有并发症，比如疏松、感染和骨丢失。近来，在医师和科学家中存在可使用生物医学工程提示(cue)使单独的牙齿结构或整个牙齿再生的共同愿望。然而，该新兴领域遇到了几种障碍，其中最大的是再生和牙齿结构形态的复杂性。本研究提出使用生物工程化的牙齿支架和通过递送已知对牙齿发育重要的生长因子来建立整个牙齿器官的再生。使用BioplotterTM机器，通过ε-聚己内酯和羟基磷灰石(PCL-HA)的结合体的层沉积的快速原型制造，首先制造全尺寸人牙齿支架。并行地，还以3D构建Sprague Dawley大鼠的下颌中央门牙根形状的支架。该支架随后用基质细胞衍生的因子-1(SDF1)和骨形态发生蛋白7(BMP-7)灌注。有22只Spraque Dawley大鼠，测试组和对照组中各11只。在每只大鼠中，在背部部位皮下移植人下颌臼齿形支架，并且在外科手术拔出两个下颌中央门牙之一后在拔出槽内移植大鼠下颌门牙根形支架。测试组支架用SDF1和BMP-7浸渍，而对照组支架不含生长因子。在移植后9周时采集所有的移植的支架，并组织学评价组织向内生长、细胞渗透、血管生成和矿化。
材料和方法。在开始该研究之前，得到哥伦比亚大学学会动物护理和使用委员会(IACUC)的批准。该研究使用12周龄雄性SpragueDawley大鼠的下颌中央门牙拔出槽和皮下背部部位(Charles River，NY)。所有的部位接受PCL-HA支架。共有22只SD大鼠，将它们随机分成两组：测试组和对照组，两组中的每一组中有11只大鼠。如图1所示，分别为每只大鼠给予识别号-#1至#11和#12至#22-测试组和对照组。在购买后，在一周适应期期间，将大鼠成对保持在12小时亮/暗周期中，并且在支架移植的外科手术程序之前，随意喂食大鼠食物(Rodent Laboratory Chow 5001，Ormond Veterinary Supply，Ontario，加拿大)和水。表1概括了研究组和移植的支架数量。
表1.研究组和移植的支架数量
E＝拔出槽部位移植；D＝皮下背部移植。
每只大鼠的每个实验部位(下颌中央门牙拔出槽和皮下背部)由外科手术接受一个PCL-HA支架。拔出槽部位接受像下颌中央门牙的根的支架。背部部位接受人下颌臼齿形状的支架。在测试组大鼠中移植的支架用SDF1和BMP-7浸渍，而对照组接受仅具有胶原蛋白凝胶的支架。所有大鼠在外科手术后保持9周，随后采集支架用于实验室分析和定量。
支架制备。使用3D印刷系统(BioplotterTM，Envision TEC，Gladbeck，德国)，通过逐层沉积来制造大鼠下颌中央门牙根形状和人下颌臼齿形状的PCL-HA支架(图2A，B)。该复合物由80％重量聚己内酯(PCL)(Mw～65,000，Sigma，St.Louis，MO)和20％重量的羟基磷灰石(HA)(Sigma，St.Louis，MO)组成。将PCL-HA在室中于120℃下熔融，并通过27-规格金属针(DL technology，Haverhill，MA)分配，以产生夹在中间的线和互连的微通道(图3)。由于作为一块在其连续制造中遇到的困难，单独生产人下颌臼齿形支架的冠和根结构，并随后融合以形成整个牙齿(图3)。所有的支架包括通过直径为200μm的PCL-HA线的联锁结构产生的直径为200μm的微通道(图3)。支架的大分子3D结构意在促使形成最终结果的外部形态，而具有微通道的内部结构的目标是提供用于细胞占据和组织向内生长的空间。所有制造的支架在环氧乙烷灭菌器中灭菌24小时，随后用含有SDF1和BMP-7的胶原蛋白凝胶(测试组)和不含生长因子的胶原蛋白凝胶(对照组)处理(图2C)。使用无菌实验室技术，在层流净化罩中进行支架的处理。
对于测试组，将100ng/ml基质细胞-衍生的因子-1(SDF1)(R&Dsystems，MN)和100ng/ml骨形态蛋白-7(BMP-7)(R&D systems，MN)在2mg/ml中性牛I型胶原蛋白(
Figure BPA00001514684400191
R&D Systems，Minneapolis，MN)中组合。随后将生长因子-胶原蛋白溶液灌注到PCL-HA支架的微通道内，并在37℃下在潮湿的培育器中交联1小时。在PBS、10X PBS、NaOH的混合物中制备负载SDF1和BMP-7的胶原蛋白凝胶，概括于表2。基于前面的工作来选择SDF1和BMP-7的剂量。化学趋化性测定已显示，间充质干细胞朝向SDF1刺激物生长，在100ng/ml浓度下具有最大化学趋化性(Schantz 2007)。100ng/ml的BMP-7浓度已显示有效促进成骨细胞在胶原蛋白载体上生长(Laflamme 2008)。对照组支架在灭菌后未负载任何生长因子。而是，采用与测试组所述相同的方式，在外科手术前将空的胶原蛋白凝胶灌注到微通道内。
表2.递送至测试组支架内的生长因子溶液的细节。
  内含物   量(ml)
  10X PBS   1
  1N NaOH   0.14
  PBS   4.86
  胶原蛋白I   2(5mg/ml)
  BMP7   1(100ng/ml)
  SDF1   1(100ng/ml)
  总体积   10
外科手术程序。购买12周龄Sprague Dawley大鼠(CharlesRiver，NY)，并让它们适应约1周。所有的大鼠用克他命(80mg/kg，IP)和甲苯噻嗪(5mg/kg，IP)的混合物麻醉。在程序期间通过捏脚趾(toe-pinch)来监测麻醉的深度；并且当需要时，单独给予克他命(全部剂量的1/3：25mg/kg，IP)，以按需保持麻醉深度。在外科手术期间使用脉搏-血氧计装置来监测脉搏率和氧饱和水平。
在两组之间的外科手术技术相同(图4，5)。进行小心的无创伤外科手术拔出下颌中央门牙，接着立即在拔出槽内移植根形支架(图4C，D，E)。使用骨膜刀(Periotome)尽可能无创伤地进行拔出程序，小心保持槽的骨壁(图4C)。在移植构造期间，小心通过该构造的被动适合来保持唇壁(图4E)。在移植后，提出(advance)瓣片(flap)用于主要闭合，且每个槽用一个或两个单中断(single-interrupt)缝合封闭(使用polyglylactin缝合材料(Vicryl 5-0，Johnson and Johnson，NJ))(图4F)。
在相同的大鼠的背部部位，进行制备的人下颌臼齿形支架的皮下移植(图5)。放置2-cm长水平切口，并使用锋利的外科手术剪使皮下区域松弛和成袋(图5B)。在皮下产生的袋中移植人下颌臼齿形支架(图5C)。该部位用polyglylactin缝合材料(Vicryl 5-0，Johnson and Johnson，NJ)封闭，确保在闭合前没有截留的气泡(图5D)。放置多个单中断缝合，用于主要闭合。
当完成移植程序后，给予丁丙诺咖(0.05mg/kg，IP)用于止痛，随后重新安置到动物加强护理单元。在3-5天的恢复期期间，由兽医技术人员密切监测大鼠，并在12小时亮/暗周期中保持在单个占用的笼子中，并随意喂食大鼠食物(Rodent Laboratory Chow 5001，OrmondVeterinary Supply，Ontario，加拿大)和水9周，随后安乐死。在这9周期间，在常规基础上密切监测大鼠的任何感染或疾病迹象。当观察到这种迹象时，进行适当的治疗。监测剩余门牙的继续生长，以避免咬合不正和导致的营养不良。当产生指示时，夹住牙齿，以容易咀嚼。在外科手术后9周时，将每只大鼠人道安乐死，随后立即使用超剂量的戊巴比妥注射IP进行采集。
采集和实验室程序。在采集之前，显然的是，保持下颌中央门牙拔出槽上的牙龈组织，而不暴露支架(图6A)。背部部位也显示其最佳的伤口愈合(图7A)。
整块(en bloc)采集下颌中的支架，包括剩余的相邻中央门牙和牙槽骨(图6)。回收背部支架，周围筋膜包封支架(图7)。将所有采集的构造储存在10％福尔马林中，随后运输至组织学实验室，用于5μm-厚载玻片制备和每个样品的苏木精和曙红(H&E)和冯科萨氏(VK)染色。
细胞归位、血管形成和矿化的定量。细胞归位、血管形成和矿化的定量基于研究组和移植部位之间的细胞密度、血管生成(血管数量和直径)、以及存在矿化中观察到的任何差异。
通过不知道哪只大鼠属于哪一组的盲法检验者来进行定量程序。在检验每个支架的载玻片之前，决定哪个区域有助于组织学数据分析。同意查看在载玻片上制备的支架的牙冠三分之一、中间三分之一和尖端三分之一的中间区域，如图8所示。因此，由拔出槽采集的支架具有三个评价的区域(图8A)，而由背部部位采集的支架由于存在两个根而具有四个评价的区域(图8B)。使用数字研究显微镜(LeicaDM6000，Leica，瑞士)在100X放大下充分检验每个载玻片。对载玻片进行数字照相。使用显微镜提供的软件程序Leica ApplicationSuite(LAS)在同意的区域内进行细胞和血管的定量。后来将计数转化为数量/mm2。使用计算机软件程序(Photoshop CS)测量血管直径并转化为毫米(mm)。还评价是否存在矿化。
统计分析。使用计算机程序(Microsoft Office Excel 2007)进行所有的统计分析。对于如前所述的每个变量，计算平均和标准偏差值。进行t-检验，以测定在两个实验组之间和在移植部位之间的显著性水平。p-值＜0.05认为是显著的。
结果
和PCL-HA支架的组织整合。如图9和图10中明显可知，来自两组的两个移植部位的所有的支架显示，组织-支架界面区域表现出相对紧密的组织与支架适应。未出现在两组之间存在任何显著的差异，这与移植部位无关。然而，整合的显微特性看起来在两个移植部位之间不同。对于在拔出槽内的支架，界面的特征在于显著的骨与支架适应，可能含有纤维衬里。一些界面呈现在支架的线之间的骨向内生长(图9A，B)。另外，在支架和槽壁的界面处存在血管生成和软组织向内生长的明确证据(图9C)。看起来组织在PCL-HA线周围和在PCL-HA线之间生长(图9C)。组织还沿着骨槽壁(图9C)。背部部位显示界面具有充分进入支架的内部区域内的软组织向内生长(图10A，B)。
细胞渗透和密度。利用PCL-HA支架的先前的研究已证明包含PCL-HA支架的线周围的细胞渗透和增殖(Heo 2007)。如图11和12所示，在每个移植部位的测试组和对照组之间存在显著的细胞密度(细胞/mm2)水平的差异。图11描述由拔出槽回收的支架的代表性区域，而图12表示来自背部部位支架的区域，分别测试组和对照组。由测试组支架观察到的细胞密度远大于由对照组观察到的细胞密度-p＝0.049和p＝0.001，分别拔出槽部位和背部部位。由拔出槽回收的支架具有比由背部部位回收的支架更密集的细胞群-p＝0.016和p＝0.002，分别测试组和对照组(图13)。
血管生成。在来自两个实验组的所有采集的支架内血管生成明显(图14，15)。通常，与对照组相比，在测试组支架中观察到的血管生成的程度(血管/mm2)更大，这与移植部位无关-p＝0.011和p＝0.002，分别拔出槽和背部部位(图16)。然而，在来自拔出槽的支架观察到的密度似乎总体更大，不管其在组间的统计非显著性-p＝0.222和p＝0.095，分别测试组和对照组(图16)。
在背部移植部位中的血管直径(μm)大于在拔出槽中-p＝0.028和p＝0.022，分别测试组和对照组(图18)。然而，在实验组之间没有统计差别-p＝0.426和p＝0.732，分别拔出槽和背部部位(图18)。载玻片的代表性照片显示，与由拔出槽采集的支架相比，看起来由背部部位采集的支架的血管直径大得多(图17A，B)。如图18所示，在背部支架内，在对照组内存在明显更大的血管直径平均值，但是该差别未达到统计显著性(p＝0.732)。
矿化。仅在测试组支架中观察到矿化区域(图19，图20)。来自测试组拔出槽和测试组背部移植部位的支架在冯科萨氏(VK)载玻片中显示矿化区域。在两种移植部位，良好地看到矿化进入支架，而在组织与支架界面区域无矿化。
讨论
细胞移植为基于细胞的治疗的默认(default)策略，其包括移植或注射培养物-膨胀或改性的组织远祖或完全形成的组织(Mooney 1996)。然而，培养物-膨胀的成体细胞的治疗性移植具有几个关键性的障碍，包括在延长的培养期期间有限的寿命、缓慢的增殖和失去细胞表型(Muschler等人2004)。因此，尤其是对于需要实质性离体(ex vivo)细胞操作的那些，已怀疑细胞递送方法的技术和经济可行性(Muschler等人2004)。近来，越来越多地关注通过细胞归位，接着经常通过精心安排天生细胞的形态发生而使组织再生(Stosich等人2007)。细胞归位定义为将内源性细胞主动补充到预定的解剖学隔室内，并代表在组织再生中还在研究的方法(Quesenberry 1998)。类似地，Schantz称该策略为“细胞归位”，并将它定义为“本地干细胞在细胞因子-负载的支架内诱导组织形成的部位-引导的归位”(Schantz 2007)。在许多成体组织中，干细胞归位和迁移对于正在进行的成熟细胞的代替和受损细胞的再生是关键性的(Laird等人2008)。
本结果表明，通过逐层沉积PCL-HA(直径200μm)产生的互连微通道(直径200μm)的内部结构有助于在界面区域亲密的组织与支架适应，接着是宿主细胞成功归位和血管向内生长进入大规模(～17mm)支架。含有SDF1和BMP-7的支架促进宿主细胞渗透。
由基质细胞在骨髓微环境中分泌的基质细胞-衍生的因子-1(SDF-1)通过表达其同源受体CXC趋化因子受体4(CXCR4)的远祖细胞的补充而在促进细胞归位中起到必要的作用(Vandervelde 2005)。CXCR4+阳性细胞包括CD34+造血干细胞(HSC)和间充质干细胞(MSC)在骨髓中(Brenner等人2004；Wynn等人2004；Honczarenko等人2006；Cheng等人2008)。由于这些细胞对于血管形成和骨再生是必要的，我们推测并入3D支架中的SDF-1不仅补充本地细胞而且还补充造血干细胞和MSC。
除了SDF1以外，支架还递送BMP-7。由于BMP-7在将间充质细胞转化为成骨细胞中起到中心作用，推测在我们的不含细胞的支架中观察到的异位或原位矿化通过由SDF1补充的干细胞/远祖细胞的BMP-7-介导的成骨性分化而实现。然而，结果显示，在含有SDF1和BMP-7的支架中，在两个移植部位，存在很少和不一致的矿化证据。次最优骨生成可能是由于BMP-7的快速释放，因为胶原蛋白在体内快速降解。
有趣的是，与背部相比，在拔出槽移植部位中观察到更少的矿化区域，尽管血液和骨髓细胞丰富。这可能是由于在除去下颌中央门牙之后拔出槽的愈合可能由于支架的移植而延迟。延长的外科手术持续时间还可导致像纸一样薄的唇壁更易于术后再吸收。由于牙齿和周围组织均极脆弱，已知大鼠下颌门牙的无创伤拔出程序极具技术难度。小的大鼠下颌的处理还使该程序进一步复杂。
在该研究中，组织学评价证实许多槽已失去它们的唇骨板。这可能是由于剩余的唇壁极薄。在唇再吸收和同时槽重塑的该过程期间，我们提高了可能增加破骨活性的可能性。先前已建立大鼠臼齿拔出槽的愈合过程分为三个阶段：早期阶段(1-5天)，期间血块的组织完成并且槽被上皮部分覆盖；骨形成阶段(5-20天)；和骨重塑阶段(20-60天)，此时幼骨成熟和牙槽脊重塑(Pietrokovski 1967)。组织形态测定分析已显示，由于在拔出后至多112天，高度和宽度均减小，无齿下颌经历显著的尺寸减小(Elsubeihi 2004)。考虑采集程序在移植后第9周进行的事实，可能重塑和收缩已在采集时主动发生。
总的来说，本发现在活体大鼠模型中证明，可诱导天生细胞迁移进入同时具有血管生成和血管形成的PCL-HA支架内。该研究强调，与在对照组的支架中相比，在用SDF1和BMP-7浸渍的PCL-HA支架中，细胞渗透和血管生成增大。经证明，与皮下背部部位相比，在拔出槽部位中细胞向内生长和血管生成的程度更大。这些发现证实在拔出槽部位中用SDF1和BMP-7浸渍的支架将呈现最大增殖潜能的假设。因此，通过证明在SDF1和BMP-7存在下在拔出槽中观察到的富集的细胞和血管密度，显示了使用细胞归位技术的牙齿原位再生的潜能。
实施例2：通过化学趋化性的再生；牙槽干细胞/远祖细胞的PDGF诱导的补充
干细胞/远祖细胞已从众多组织中分离。已知骨髓是干细胞/远祖细胞的富集来源之一，包括造血干细胞(HSC)和间充质干细胞/基质细胞(MSC)两者。虽然成纤维细胞样MSC首先在二十世纪七十年代在长骨的骨髓中发现，但是后来发现面部牙槽骨的骨髓含有与长骨MSC类似的细胞，但是可能具有朝向至少成骨性分化的更大的效力。由于牙槽MSC衍生自神经嵴/间充质细胞，在胚胎起源上与中胚层-衍生的附属MSC不同，本实施例研究通过MSC的化学趋化性使组织再生的新型模式。牙髓是牙齿唯一的软组织并且保持牙齿作为器官的动态平衡。根管治疗是最常见的牙齿处理之一，其中根除活的牙髓组织，并用生物惰性的热塑性材料代替。根管后的牙齿被剥夺生物学生存力，因此，易于再感染、折断和损伤。由于牙髓与牙槽骨髓连接，发明人认为可补充牙槽MSC以使牙髓组织再生。
由出于医学需要而牙齿拔出的多个健康患者得到小的牙槽骨样品。单核和附着的细胞轻微培养物-膨胀。通过免疫细胞化学和流式细胞计首先筛分早期通过的MSC(p3)，发现表达Stro-1、CD 105、CD73、CD44和CD90，但不表达CD34。牙槽MSC在相应的化学限定的介质中分化成为成骨性、成脂肪性、成软骨性和成肌性细胞。在多个细胞因子和生长因子的影响下，在transwell插入系统中研究牙槽MSC的迁移。
在多个时间点详述细胞迁移时，50ng/ml的PDGFββ是最显著的。证实了受体表达。
这些发现一起说明诱导内源性和/或移植的干细胞/远祖细胞朝向组织再生的补充。
参考文献
Alberektsson T和Johansson C 2001 Osteoinduction，osteoconduction and osseointegration.(骨诱导、骨传导和骨整合)Eur.Spine J.10 Suppl.2 S96-101。
Alhadlaq，A.和Mao，J(2004)。“Mesenchymal stem cells：isolationand therapeutics.(间充质干细胞：分离和治疗)”Stem Cells Dev 13(4)：436-48。
Alhadlaq，A.和Mao，J(2005)。“Tissue-engineered osteochondralconstructs in the shape of an articular condyle.(髁关节形状的组织-工程化的骨软骨构造)”J Bone Joint Surg Am 87(5)：936-44。
Alhadlaq，A.和Mao，J(2004)。“Adult stem cell driven genesis ofhuman-shaped articular condyle.(人形髁关节的成体干细胞驱动生成)”Ann Biomed Eng 32(7)：911-23。
Astrand P，Carlsson G，Changes in the alveolar process afterextractions in the white rat.A histologic and fluorescence microscopicstudy.(在白鼠中在拔出后牙槽处理的变化.组织学和荧光显微研究)Acta Odontol.Scand.27 1(1969)，第113-127页。
Alpaslan C，Irie K，Takahashi K，Ohashi N，Sakai H，Nakajima T，Ozawa H(1996)Long-term evaluation of recombinant human bonemorphogenetic protein-2 induced bone formation with a biologic andsynthetic delivery system.(使用生物学和合成递送系统长期评价重组体人骨形态发生蛋白-2诱导的骨形成)Br J of Oral Maxillofac Surg 34，414-418。
Amar S，Han X.The impact of periodontal infection on systemicdiseases.(牙周感染对全身性疾病的影响)Med Sci Monit 2003；9：RA291-RA299。
Amar S.Implications of cellular and molecular biology advances inperiodontal regeneration.(细胞和分子生物学进展在牙周再生中的影响)Anat Rec 1996：245：361-373。
Aoki H，Fujii M，Imamura T，Yagi K，Takehara K，Kato M和Miyazono K 2001 Synergistic effects of different bone morphogeneticprotein type I receptors on alkaline phosphatase induction.(不同的骨形态发生蛋白I型受体对碱性磷酸酶诱导的协同效应)J.Cell.Sci.1141483-9。
Aono A，Hazama M，Notoya K，Taketomi S，Yamasaki H，TsukudaR，Sasaki S和Fujisawa Y 1995 Potent ectopic bone-inducing activity ofbone morphogenetic protein-4/7 heterodimer.(骨形态发生蛋白-4/7杂二聚体的有效的异位骨-诱导活性)Biochem.Biophys.Res.Commun.210670-7。
Arceo N，Saulk JJ，Moehring J，Foster RA，Somerman MJ.Human periodontal cells initiate mineral like nodules in vitro.(人牙周细胞体外引发矿物样结节)J Periodontol 1991：62：499-503。
Artico M，Ferrante L，Pastore F S，Ramundo E O，Cantarelli D，Scopelliti D和Iannetti G 2003 Bone autografting of the calvaria andcraniofacial skeleton：historical background，surgical results in a series of15 patients，and review of the literature.(颅盖和颅面骨骼的骨自体移植：历史背景、一系列15个患者的外科手术结果以及文献综述)Surg.Neurol 60 71-9。
Arzate H，Chimal-Monroy J，Hernandez-Iagunas L，Diaz de Leon L.Human cementum protein extract promotes chondrogenesis andmineralization in mesenchymal cells.(人牙骨质蛋白提取物在间充质细胞中促进软骨形成和矿化)J Periodontal Res 1996：31：144-148。
Arzate H，Olsen SW，Page RC，Goan AM，Narayanan AS.Production of a monoclonal antibody to an attachment protein derivedfrom human cementum.(对由人牙骨质衍生的附属蛋白产生单克隆抗体)FASEB J 1992：6：2990-2996。
Ashman A，LoPinto J，Rosenlicht J.Ridge augmentation forimmediate postextraction implants：eight year retrospective study.(用于立即拔出后移植物的脊加强：八年回顾研究)Pract Periodontics AesthetDent 1995：7：85-94。
Astrand P，Carlsson G，Changes in the alveolar process afterextractions in the white rat.A histologic and fluorescence microscopicstudy.(在白鼠中在拔出后牙槽处理的变化.组织学和荧光显微研究)Acta Odontol.Scand.271(1969)，第113-127页。
Atala A，Bauer SB，Soker S，Yoo JJ，Retik AB.Tissueengineered autologous bladders for patients needing cystoplasty.(需要膀胱成形术的患者的组织工程化的自体膀胱)Lancet 2006；367：1241-6。
Balic A，Mina M.Analysis of developmental potentials of dentalpulp in vitro using GFP transgenes.(使用GFP转基因的牙髓体外发育潜力分析)Orthod Craniofac Res 2005：8：252-258。
Bartold PM，McCulloch CA，Narayanan AS，Pitaru S.Tissueengineering：a new paradigm for periodontal regeneration based onmolecular and cell biology.(组织工程：基于分子和细胞生物学的牙周再生新范例)Periodontol 20002000：24：253-269。
Bartold PM，Narayanan AS.Molecular and cell biology of healthyand diseased periodontal tissues.(健康和患病牙周组织的分子和细胞生物学)Periodontol 20002006：40：29-49。
Bartold PM，Narayanan AS.Periodontal regeneration.In：Biology ofthe periodontal connective tissues，Chapter 11.(牙周连接组织生物学，第11章中的牙周再生)Chicago：Quintessence Publishing，1998。
Bax BE，Wozney JM，Ashhurst DE(1999)Bone morphogeneticprotein-2increases the rate of callus formation after fracture of the rabbittibia.(骨形态发生蛋白-2提高兔胫骨骨折后骨痂形成的速率)CalcifTissue Int 65，83-89。
Becker W，Becker BE.Periodontal regeneration：a contemporaryevaluation.(牙周再生：当代评价)Periodontol 2000 1999：19：104-114。
Berkovitz BKB，Holland GR，Moxham BJ.在Berkovitz BKB，Holland GR，Moxham BJ编辑的Color Atlas and Textbook of OralAnatomy，Histology and Embryology.(口腔解剖学、组织学和胚胎学彩图和教科书)中的Microscopic anatomy of oro-dental tissues.(口腔组织的显微解剖学)伦敦：Mosby-Wolfe，1992；109-228。
Berry JE，Zhao M，Jin Q，Foster BL，Viswanathan H，SomermanMJ.Exploring the origins of cementoblasts and their trigger factors.(成牙骨质细胞的起源和它们的触发因子的研究)Connect Tissue Res 2003：44.(Suppl.1)：97-102。
Bleul等人A highly efficacious lymphocyte chemoattractant，stromal cell-derived factor l(SDF-1)(高效淋巴细胞化学引诱物，基质细胞-衍生的因子1(SDF-1))J.Exp.Med.184：1101-1109，1996。
Bohl KS，Shon J，Rutherford B，Mooney DJ.Role of syntheticextracellular matrix in development of engineered dental pulp.(合成细胞外基质在工程化牙髓发育中的作用)Biomater Sci Polymer Ed 1998：9：749-764。
Bosshardt DD，Zalzal S，McKee MD，Nanci A.Developmentalappearance and distribution of bone sialoprotein and osteopontin in humanand rat cementum.(在人和大鼠牙骨质中骨涎腺蛋白和骨桥蛋白的发育外观和分布)Anat Rec 1988：250：13-33。
Bosshardt DD.Are cementoblasts a subpopulation of osteoblasts or aunique phenotype？(成牙骨质细胞是成骨细胞的亚群或独特表型？)JDent Res 2005：84：390-406。
Boyne P J 2001 Application of bone morphogenetic proteins in thetreatment of clinical oral and maxillofacial osseous defects.(骨形态发生蛋白在处理临床口腔和上颌面骨缺陷中的应用)J.Bone Joint Surg.Am.83A S 146-50。
Braut A，Kollar EJ，Mina M.Analysis of the odontogenic andosteogenic potentials of dental pulp in vivo using a collal-2.3-GFPtransgene.(使用collal-2.3-GFP转基因的牙髓体内牙原性和成骨性潜能的分析)Int J Dev Biol 2003：47：281-292。
Brown A，Stock G，Patel A A，Okafor C和Vaccaro A 2006Osteogenic protein-1：a review of its utility in spinal applications.(成骨性蛋白-1：其在脊柱应用中的效用的综述)Biodrugs 20243-51。
Burns JS，Abdallah BM，Guldberg P，Rygaard J，Schroder HD，Kassem M.Tumorigenic heterogeneity in cancer stem cells evolved fromlong-term cultures of telomeraseimmortalized human mesenchymal stemcells.(由端粒酶永生化(telomeraseimmortalized)人间充质干细胞的长期培养物演化的癌症干细胞的致癌异质性)Cancer Res 2005：65：3126-3135。
Carlisle E和Fischgrund J S 2005 Bone morphogenetic proteins forspinal fusion.(用于脊柱融合术的骨形态发生蛋白)Spine J.55 240-9。
Carlson NE，Roach RB.Platelet-rich plasma：clinical applications indentistry.(富含血小板的血浆：在牙科学中的临床应用)J Am DentAssoc 2002：133：1383-1386。
Castro-Malaspina H，Gay RE，Resnick G，Kapoor N，Meyers P，Chiarieri D，McKenzie S，Broxmeyer HE，Moore MA.Characterizationof human bone marrow fibroblast colonyforming cells(CFU-F)and theirprogeny.(人骨髓成纤维细胞集落形成细胞(CFU-F)和它们的后代的特性)Blood 1980：56：289-301。
Castro-Malaspina H，Rabellino EM，Yen A，Nachman RL，Moore MA.Human megakaryocyte stimulation of proliferation of bonemarrow fibroblasts.(骨髓成纤维细胞的增殖的人巨核细胞刺激)Blood1981：57：781-787。
Causa F，Netti A，Ambrosio G，Ciapetti G，Baldini N，PaganiS，Martini D，Giunti A.Poly-ε-caprolactone/hydroxyapatite compositesfor bone regeneration：In vitro characterization and human osteoblastresponse.(用于骨再生的聚ε-己内酯/羟基磷灰石复合物：体外表征和人成骨细胞响应)，2005，Journal of Biomedical Materials Research Part A76A(1)：151-162。
Chai Y，Jiang X，Ito Y等人Fate of the mammalian cranial neuralcrest during tooth and mandibular morphogenesis.(在牙齿和下颌形态发生期间哺乳动物颅神经嵴的命运)Development 2000；127：1671-9。
Chai Y，Slavkin HC.Prospects for tooth regeneration in the 21stcentury：a perspective.(21世纪牙齿再生前景：远景)Microsc Res Tech2003；60：469-79。
Chen D，HarrisMA，Rossini G，Dunstan C R，Dallas S L，FengJ Q，Mundy G R和Harris S E 1997 Bone morphogenetic protein2(BMP-2)enhances BMP-3，BMP-4，and bone cell differentiation markergene expression during the induction of mineralized bone matrixformation in cultures of fetal rat calvarial osteoblasts(在胎儿大鼠颅盖成骨细胞的培养物中，在诱导矿化的骨基质形成期间，骨形态发生蛋白2(BMP-2)增强BMP-3、BMP-4和骨细胞分化标记物基因表达)CalcifTissue Int.60283-90。
Chen D，Zhao M，Mundy GR(2004年12月)，Bone morphogeneticproteins(骨形态发生蛋白)，Growth Factors 22(4)：233-4。
Cheng，H.，Jiang，W.，Phillips，F.M.，Haydon，R.C.，Peng，Y.，Zhou，L.，Luu，H.H.，An，N.，Breyer，B.，Vanichakarn，P.，Szatkowski，J.P.，Park，J.Y.和He，T.C.Osteogenic activity of the fourteentypes of human bone morphogenetic proteins(BMPs).(14种人骨形态发生蛋白(BMP)的成骨性活性)J.Bone.Joint.Surg.Am.85A，1544，2003。
Chim，H.和Schantz，J.T.Human circulating peripheral bloodmononuclear cells for calvarial bone tissue engineering.(用于颅盖骨组织工程的人循环外周血液单核细胞)Plast.Reconstr.Surg.116，1726，2006。
Chim，H.，Hutmacher，D.W.，Chou，A.M.，Oliveira，A.L.，Reis，R.L.，Lim，T.C.和Schantz，J.T.A comparative analysis of scaffoldmaterial modifications for load-bearing applications in bone tissueengineering.(在骨组织工程中用于承载应用的支架材料改性的比较分析)Int.J.Oral Maxillofac.Surg.35，923，2006。
Chim，H.，Ong，J.L.，Schantz，J.T.，Hutmacher，D.W.和Agrawal，CM.Efficacy of glow discharge gas plasma treatment as a surfacemodification process for three-dimensional poly(D/L-lactide)scaffolds.(辉光放电气体等离子体处理作为用于三维聚(D/L-丙交酯)支架的表面改性的功效)J.Biomed.Mater.Res.65，327，2003。
Cho MI，Matsuda N，Lin WL，Moshier A，Ramakrishnan PR.Invitro formation of mineralized nodules by periodontalligament cells fromthe rat.(通过来自大鼠的牙周韧带细胞体外形成矿化结节)CalcifTissue Int 1992：50：459-467。
Choi RS，Riegler M，Pothoulakis C，Kim BS，Mooney D，VacantiM，Vacanti JP.Studies Studies of brush border enzymes，basementmembrane components，and electrophysiology of tissue-ehgineeredneointestine.(组织-工程化的新肠的刷状缘酶、基底膜组分和电生理学的研究)，J.ofPed.Surg.33(7)：991-996。
Chopp M，Zhang XH，Li Y，Wang L，Chen J，Lu D，Lu M，Rosenblum M.Spinal cord injury in rat：treatment with bone marrowstromal cell transplantation.(大鼠的脊髓创伤：使用骨髓基质细胞移植治疗)Neuroreport 2000：11：3001-3005。
Claveau I，Mostefaoui Y和Rouabhia M 2004 Basement membfaneprotein and matrix metalloproteinase deregulation in engineered humanoral mucosa following infection with Candida albicans.(被白色念珠菌感染后在工程化的人口腔黏膜中的基底膜蛋白和基质金属蛋白酶反调节)Matrix Biol.23477-86。
Crane，G.M.，Ishaug，S.L.和Mikos，A.G.Bone tissueengineering.(骨组织工程)Nat.Med.12，1322，1995。
D′Errico JA，Ouyang H，Berry JE，MacNeil RL，Strayhorn C，Imperiale MJ，Harris NL，Goldberg H，Somerman MJ.Immortalizedcementoblasts and periodontal ligament cells in culture.(在培养物中永生化成牙骨质细胞和牙周韧带细胞)Bone1999：25：39-47。
Deans RJ，Moseley AB.Mesenchymal stem cells：biology andpotential clinical uses.(间充质干细胞：生物学和潜在的临床应用)ExpHematol 2000：28：875-884。
Denizot F和Lang R 1986 Rapid colorimetric assay for cell growthand survival.Modifications to the tetrazolium dye procedure givingimproved sensitivity and reliability.(用于细胞生长和生存的快速比色测定.对四唑染色程序的修改产生改进的灵敏度和可靠性)J.Immunol.Methods 89 271-7。
Desbois C和Karsenty G 1995 Osteocalcin cluster：implications forfunctional studies.(骨钙素簇：功能研究的暗示)J.Cell.Biochem.57379-83。
De Wynter EA，Emmerson AJ，Testa NG.Properties of peripheralblood and cord blood stem cells.(外周血液和脐带血干细胞的性质)Baillieres Best Pract Res Clin Haematol 1999：12：1-17。
Dua HS，Azuara-Blanco A.Limbal stem cells of the cornealepithelium.(角膜上皮的缘干细胞)Surv Ophthalmol 2000：44：415-425。
Duailibi等人Long-term case history reports.(长期情况历史报告)JOral Implantol 2000：26：276-290。
Duailibi MT，Duailibi SE，Young CS，Bartlett JD，Vacanti JP，Yelick PC.Bioengineered teeth from cultured rat tooth bud cells.(来自培养的大鼠牙蕾细胞的生物工程化的牙齿)J Dent Res 2004：83：523-528。
Duailibi SE，Duailibi MT，Vacanti JP，Yelick PC.Prospects for toothregeneration.(牙齿再生的前景)Periodontology 2000.2006；41：177-87。
Elsubeihi E，Heersche J，Quantitative assessment of post-extractionhealing and alveolar ridge remodelling of the mandible in female rats.(雌性大鼠下颌的拔出后愈合和牙槽脊重塑的定量评价)，Archives of OralBiology 2004，49：5，第401-412页。
Eppley B L，Pietrzak W S和Blanton M W 2005Allograft andalloplastic bone substitutes：a review of science and technology for thecraniomaxillofacial surgeon.(同种异体移植和异源体骨代用品：颅颌面外科医生的科学与技术综述)J.Craniofac.Surg.16 981-9。
Fenton AH，Zarb GA，MacKay HF.Overdenture oversights.(覆盖义齿监察)Dent Clin North Am 1979：23：117-130。
Fibbe，W.E.，Pruijt，J.F.，van Kooyk，Y.，Figdor，C.G.，Opdenakker，G.和Wille，R.The role of metalloproteinases andadhesion molecules in interlukin-8-induced stem cell mobilization.(金属蛋白酶和粘着分子在interlukin-8-诱导的干细胞移动中的作用)Semin.Hematol.37，19，2000。
Fiedler，J.，Leucht，F.，Waltenberger，J.，Dehio，C和Brenner，R.E.VEGF-A and PlGF-1 stimulate chemotactic migration of humanmesenchymal progenitor cells.(VEGF-A和PlGF-1刺激人间充质远祖细胞的趋化性迁移)Biochem.Biophys.Res.Commun.334，561，2005。
Fong HK，Foster BL，Popowics TE，Somerman MJ.Thecrowning achievement：getting to the root of the problem.(造冠术成就：到达问题的根源)J Dent Educ 2005；69：555-70。
Friedenstein AJ，Ivanov-Smolenski AA，Chajlakjan RK，GorskayaUF，Kuralesova AI，Latzinik NW，Geraswimow UW.Origin of bonemarrow stromal mechanocytes in radiochimeras and heterotopictransplants.(在放射嵌合体和异位移植物中骨髓基质成纤维细胞的起源)Exp Hematol 1978：6：440-444。
Friedenstein AJ.Precursor cells of mechanocytes.(成纤维细胞的前体细胞)Int Rev Cytol 1976：47：327-359。
Fuchs JR，Hannouche D，Terada S，Vacanti JP，Fauza DO.Fetaltracheal augmentation with cartilage engineered from bonemarrow-derived mesenchymal progenitor cells.(使用由骨髓-衍生的间充质远祖细胞工程化的软骨的胎儿气管加强)J Pediatr Surg 2003：38：984-987。
Fujiwara N，Tabata MJ，Endoh M，Ishizeki K，Nawa T.Insulin-iikegrowth factor-1 stimulates cell proliferation in the outer layer of Hertwig′sepithelial root sheath and elongation of the tooth root in mouse molars invitro.(胰岛素样生长因子-1体外刺激Hertwig上皮根鞘的外层中的细胞增殖和小鼠臼齿中的牙根的伸长)Cell Tissue Res 2005；320：69-75。
Gazdag AR，Lane JM，Glaser D.Alternatives to autogenous bonegraft：Efficacy and indication.(自生骨移植物的替代物：功效和指示)JAm Acad Orthop Surg 1995；3：1-8。
Gazzerro E，Rydziel S和Canalis E 1999 Skeletal bonemorphogenetic proteins suppress the expression of collagenase-3 by ratosteoblasts.(骨骼骨形态发生蛋白抑制胶原蛋白酶-3通过大鼠成骨细胞的表达)Endocrinology 140 562-7。
Geiger M，Li R H和Friess W 2003 Collagen sponges for boneregeneration with rhBMP-2.(使用rhBMP-2用于骨再生的胶原蛋白海绵)Adv.Drug Deliv.Rev.55 1613-29。
Giannobile WV，Lee CS，Tomala MP，Tejeda KM，Zhu Z.Platelet-derived growth factor(PDGF)gene delivery for application inperiodontal tissue engineering.(用于牙周组织工程的血小板-衍生的生长因子(PDGF)基因递送)J Periodontol 2001：72：815-823。
Giannobile WV.Periodontaltissue engineering by growth factors.(通过生长因子的牙周组织工程化)Bonel996：19：23S-37S。
Giannoudis P V和Tzioupis C 2005 Clinical applications of BMP-7：the UK perspective.(BMP-7的临床应用：UK远景)Injury 36 Suppl.3S47-50。
Giannoudis P V，Dinopoulos H和Tsiridis E 2005 Bone substitutes：an update.(骨代用品：最新信息)Injury 36 Suppl.3 S20-7。
Gojo S，Gojo N，Takeda Y，Mori T，Abe H，Kyo S，Hata J，Umezawa A.In vivo cardiovasculogenesis by direct injection of isolatedadult mesenchymal stem cells.(通过直接注射分离的成体间充质干细胞的体内心血管生成)Exp Cell Res 2003：288：51-59。
Griffith，L.G.和Naughton，G.Tissue engineering-currentchallenges and expanding opportunities.(组织工程-现有的挑战和扩张机会)Scienee 295，1009，2002。
Groeneveld E H和Burger E H 2000Bone morphogenetic proteins inhuman bone regeneration.(在人骨再生中的骨形态发生蛋白)Eur.J.Endocrinol.1429-21。
Gronthos S，Chen S，Wang CY，Robey PG，Shi S.Telomeraseaccelerates osteogenesis of bone marrow stromal stem cells byupregulation of CBFAl，osterix，and osteocalcin.(通过上调CBFAl、osterix和骨钙素，端粒酶加速骨髓基质干细胞的骨生成)J Bone MinerRes 2003：18：716-722。
Gronthos S，Graves SE，Ohta S，Simmons PJ.The STRO-1+fraction of adult human bone marrow contains the osteogenicprecursors.(成体人骨髓的STRO-1+级分含有成骨性前体)Blood1994：84：4164-4173。
Gronthos S，Mankani M，Brahim J，Gehron Robey P，Shi S.Postnatal human dental pulp stem cells(DPSC)in vitro and in vivo.(体外和体内的后天人牙髓干细胞(DPSC))Proc Natl Acad Sci USA 2000：97：13625-13630。
Gronthos S，Zannettino AC，Graves SE，Ohta S，Hay SJ，SimmonsPJ.Differential cell surface expression of the STRO-1 and alkalinephosphatase antigens on discrete developmental stages in primary culturesof human bone cells.(STRO-1和碱性磷酸酶抗原对在人骨细胞的主要培养物中不连续发育阶段的差异化细胞表面表达)J Bone Miner Res1999：14：47-56。
Gronthos S，Zannettino AC，Hay SJ，Shi S，Graves SE，Kaortesidis A，S immons PJ.Molecular and cellular characterization ofhighly purified stromal stem cells derived from human bone marrow.(由人骨髓衍生的高纯基质干细胞的分子和细胞表征)J cell Sci 2003：116：1827-1835。
Guglielmotti M，Cabrini R，Alveolar wound healing and ridgeremodeling after tooth extraction in the rat：a histologic，radiographic，andhistometric study.(在大鼠中牙齿拔出后的牙槽伤口愈合和脊重塑：组织学、放射摄影和组织学研究)J.Oral Maxillofac.Surg.435(1985)，第359-364页。
Harada H，Mitsuyasu T，Toyono T，Toyoshima K.Epithelial stemcells in teeth.(牙齿中的上皮干细胞)Odontology 2002；90：1-6。
Harada H，Ohshima H.New perspectives on tooth development andthe dental stem cell niche.(牙齿发育和牙齿干细胞小生境的新的远景)Arch Histol Cytol 2004：67：1-11。
Hawkins N，Garriga G.Asymmetric cell division：from a toz.(不对称的细胞分裂：来自toz)Genes Dev1998：12：3625-3638。
Heijl L，Heden G，
Figure BPA00001514684400381
G，
Figure BPA00001514684400382
A.Enamel matrixderivative(EMDOGAIN)m the treatment of intrabony periodontalpockets.(在骨内牙周袋的治疗中的牙釉质基质衍生物(EMDOGAIN))JClin Periodontol 1997：24：705-714。
Heo SJ，Kim S E.Fabrication of porous scaffolds for bone tissueengineering using a 3-D robotic system：Comparison with conventionalscaffolds fabricated by particulate leaching.(使用3-D机器人系统制造用于骨组织工程的多孔支架：与通过颗粒浸出制造的常规支架的比较)Mol Cell Biol 2007；3：179-180。
Herodin，F.，Bourin，P.，Mayol，J.F.，Lataillade，J.J.和Drouet，M.Short-term injection of antiapoptotic cytokine combinations soon afterlethal gamma-irradiation promotes survival.(在致死的γ-辐射后立即短期注射抗凋亡细胞因子组合物促进生存)Blood.101：2609-2616。
Hirooka H.The biologic concept for the use of enamel matrix protein：true periodontal regeneration.(使用牙釉质基质蛋白的生物学概念：真正的牙周再生)Quintessence Int 1998：9：621-630。
Hogan B L 1996 Bone morphogenetic proteins：multifunctionalregulators of vertebrate development.(骨形态发生蛋白：脊椎动物发育的多功能调节剂)Genes Dev.101580-94。
Hollinger J O，Uludag J O和Winn S R 1998 Sustained releaseemphasizing recombinant human bone morphogenetic protein-2.(着重重组体人骨形态发生蛋白-2的缓释)Adv.Drug Deliv.Rev.31 303-18。
Honda MJ，Sumita Y，Kagami H，Ueda M.Histological andimmunohistochemical studies of tissue engineered odontogenesis.(组织工程化牙生成的组织学和免疫组织化学研究)Arch Histol Cytol 2005：68：89-101。
Horwitz EM，Gorden PL，Koo WK，Marx JC，Neel MD，McNallRY等人Isolated allogenic bone marrow-derived messenchymal cellsengraft and stimulate growth in children with osteogenesis imperfect：implications for cell therapy of bone.(分离的异源性骨髓-衍生的间充质细胞移植和刺激患有骨生成不全的儿童的生长：骨的细胞治疗的暗示)Proc Natl Acad Sci USA 2002；99；8932-7。
Horwitz EM，Prockop DJ，Gordon PL，Fitzpatrick LA，Neel MD，McCarville ME等人Clinical responses to bone marrow transplantationin children with severe osteogenesis imperfect.(对患有严重的骨生成不全的儿童骨髓移植的临床响应)Blood 2001；97：1227-31。
Howell TH，Fiorellini JP，Paquette DW，Offenbacher S，GiannobileWV，Lynch SE，A phase I/II clinical trial to evaluate a combination ofrecombinant human plateletderived gfowth factor-BB and recombinantinsulin-like growth factor in patients with periodontal disease.(评价重组体人血小板衍生的生长因子-BB和重组体胰岛素样生长因子的组合在患有牙周病的患者中的I/II期临床试验)J Periodontol1997：68：1186-1193。
Hu B，Nadiri A，Bopp-Kuchler S，Perrin-Schmitt F，Lesot H.Dentalepithelial histomorphogenesis in vitro.(体外牙齿上皮组织形态发生)JDent Res 2005；84：521-5。
Hu B，Nadiri A，Kuchler-Bopp S，Perrin-Schmitt F，Peters H，LesotH.Tissue engineering of tooth crown，root，and periodontium.(牙冠、根和牙周组织的组织工程)Tissue Eng 2006；12：2069-75。
Hu B，Unda F，Bopp-Kuchler S等人Bone marrow cells can giverise to ameloblast-like cells.(骨髓细胞可产生成釉细胞样细胞)J DentRes 2006；85：416-21。
Hutmacher DW，Goh JCH，Tech SH.An introduction tobiodegradable materials for tissue engineering applications.(用于组织工程应用的可生物降解的材料的介绍)Ann Acad Med Singapore 2001：30：183-191。
Hutmacher DW，Schantz JT，Zein I，Ng KW，Tan KC，Teoh SHMechanical Properties and Cell Cultural Response of PolycaprolactoneScaffolds Designed and Fabricated via Fused Deposition Modeling.(通过融合沉积模型化设计和制造的聚己内酯支架的机械性质和细胞培养响应)J Biomed Mat Res 2001，55：203-216。
Huysseune A，Van der heyden C，Sire JY.Early development ofthe zebrafrish(Danio rerio)pharyngeal dentition(Teleostei，Cyprinidae).(斑马鱼(Danio rerio)咽部牙列(真鱼骨总目，鲤科)的早期发育)AnatEmbryol(Berl)1998：198：289-305。
Ikada Y.在Ikada Y编辑的Tissue Engineering for Therapeutic Use1.Tokyo：Elsevier，1998；1-14中的Tissue engineering research trendsat Kyoto University.(京都大学的组织工程研究)。
Isobe M，Yamazaki Y，Mori M，Amagasa T(1999)Bone regenerationproduced in rat femur defects by polymer capsules containing recombinanthuman bone morphogenetic protein-2.(通过含有重组体人骨形态发生蛋白-2的聚合物囊，在大鼠股骨缺陷中产生的骨再生)J Oral MaxillofacSurg 57，695-8。
Israel D I，Nove J，Kerns K M，Kaufman R J，Rosen V，Cox K A和Wozney J M 1996 Heterodimeric bone morphogenetic proteins showenhanced activity in vitro and in vivo.(杂二聚体骨形态发生蛋白在体外和体内显示增强的活性)Growth Factors.13 291-300。
Ivanovski S，Haase HR，Bartold PM.Expression of bone matrixprotein mRNAs by primary and cloned cultures of the regenerativephenotype of human periodontal fibroblasts.(通过人牙周成纤维细胞的再生性表型的初级和克隆的培养物表达骨基质蛋白mRNA)J Dent Res2001：80：1665-1671。
Jackman WR，Draper BW，Stock DW.Fgf signaling is required forzebrafrish tooth development.(斑马鱼牙齿发育需要Fgf信号发生)DevBiol 2004：274：139-157。
Jemvall J，Thesleff I.Reiterative signaling and patterning duringmammalian tooth morphogenesis.(在哺乳动物牙齿形态发生期间反复的信号发生和图案化)Mech Dev 2000：92：19-29。
Jin QM，Anusaksathien O，Webb SA，Printz MA，Giannobile WV.Engineering of tooth supporting structures by delivery of PDGF genetherapy vectors.(通过递送PDGF基因治疗载体工程化牙齿支持结构)Mol Ther 2004：9：519-526。
Jin QM，Anusaksathien O，Webb SA，Rutherford RB，GiannobileWV.Gene therapy of bone morphogenetic protein for periodontal tissueengineering.(用于牙周组织工程的骨形态发生蛋白的基因治疗)JPeriodontol 2003：74：202-213。
Jin QM，Zhao M，Webb SA，Berry JE，Somerman MJ，GiannobileWV.Cementum engineering with threedimensional polymer scaffolds.(具有三维聚合物支架的牙骨质工程)J Biomed Mater Res A 2003：67：54-60。
Jorgensen C，Gordeladze J，Noel D.Tissue engineering throughautologous mesenchymal stem cells.(通过自体间充质干细胞的组织工程)Current Opin Biotechnol 2004：15：406-410。
Kaigler D，Mooney DJ.Tissue engineering impact on dentistry.(对牙科学的组织工程影响)J Dent Educ 2001：65：456-462。
Kang Q等人2004 Characterization of the distinct orthotopicbone-forming activity of 14 BMPs using recombinant adenoirus-mediatedgene delivery.(使用重组体腺病毒-介导的基因递送表征14种BMP的不同的原位成骨活性)Gene Ther.111312-20。
Karring T，Nyman S，Gottlow J，Laurell L.Development of thebiological concept of guided tissue regenerationanimal and humanstudies.(引导的组织再生动物和人研究的生物学观念的发展)Periodontol 2000 1993：1：26-35。
Katchburian E，Arana V.Histologia e Embriologia Oral，第2版，巴西：Editorial Medica Panamericana.Guanabara Koogan，2005：151-179。
Kato M，Toyoda H，Namikawa T，Hoshino M，Terai H，Miyamoto S和Takaoka K 2006 Optimized use of a biodegradablepolymer as a carrier material for the local delivery of recombinant humanbone morphogenetic protein-2(rhBMP-2).(可生物降解的聚合物作为用于重组体人骨形态发生蛋白-2(rhBMP-2)的局部递送的载体材料的最佳用途)Biomaterials 272035-41。
Kawano S，Saito M，Handa K，Morotomi T，Toyono T，Seta Y，Nakamura N，Uchida T，Toyoshima K，Ohishi M，Harada H.Characterization of dental epithelial pro genitor cells derived fromcervical-loop epithelium in a rat lower incisor.(在大鼠下门牙中由颈-圈上皮衍生的牙齿上皮远祖细胞的表征)J Dent Res 2004：83：129-133。
Kenley R A，Yim K，Abrams J，Ron E，Turek T，Marden L J和Hollinger J O 1993 Biotechnology and bone graft substitutes.(生物技术和骨移植代用品)Pharm.Res 10 1393-401。
Kim BS.Development of biocompatible synthetic extracellularmatrices for tissue engineering.(用于组织工程的生物相容的合成细胞外基质的发展)Trends Biotechnol 2001；16：224-230。
Kim，C.H.和Broxmeyer，H.E.In vitro behavior of hematopoieticprogenitor cells under the influence of chemoattractants：stromalcell-derived factor-1，steel factor，and the bone marrow environment.(在以下化学引诱物的影响下造血远祖细胞的体外行为：基质细胞-衍生的因子-1、钢因子，和骨髓环境)Blood 91，100，1998。
Kim HW，Jonathan C.Hydroxyapatite/PCL composite coatings onhydroxyapatite porous bone scaffold for drug delivery.(用于药物递送的羟基磷灰石多孔骨支架上的羟基磷灰石/PCL复合物涂层)Biomaterials2004；25：1279-1287。
Kim J，Amar S.Periodontal disease and systemic conditions：abidirectional relationship.(牙周病和全身病况：双向关系)Odontology2006；94：10-21。
Kim SS，Utsunomiya H，Koski JA，Wu BM，Cima MJ，Sohn J，Mukai K，Griffith LG，Vacanti JP.Survival and function of hepatocyteson a novel three dimensional synthetic biodegradable polymer scaffoldwith an ihtrinsic network ofchannels.(肝细胞在含有固有通道网络的新型三维合成可生物降解的聚合物支架上的生存和功能)Ann Surg1998：28：8-13。
Kim SS，Vacanti JP.The current status of tissue engineering aspotential therapy.(组织工程作为潜在治疗的现状)Semin Pediatr Surg1999：8：119-123。
Koempel JA，Patt BS，O′Grady K，Wozney J，Toriumi DM(1998)The effect of recombinant human bone morphogenetic protein-2 on theintegration of porous hydroxyapatite implants with bone.(重组体人骨形态发生蛋白-2对多孔羟基磷灰石移植物与骨的整合的影响)J BiomedMater Res 41，359-363。
Koh YH，Jun IK，Kim HE.Fabrication of poly ε-caprolactone/hydroxyapatite scaffold using rapid direct deposition.(使用快速直接沉积来制造聚ε-己内酯/羟基磷灰石支架)Materials Letters 2006：第60卷：第9-10期：1184-1187。
Kollet，O.，Shivtiel，S.，Chen，Y.Q.，Suriawinata，J.，Thung，S.N.，Dabeva，M.D.，Kahn，J.，Spiegel，A.，Dar，A.，Samira，S.，Goichberg，P.，Kalinkovich，A.，Arenzana-Seisdedos，F.，Nagler，A.，Hardan，I.，Revel，M.，Shafritz，D.A.和Lapidot，T.HGF，SDF-1 and MMP-9 areinvolved in stress-induced CD34p stem cell recruitment to the liver.(HGF、SDF-1和MMP-9涉及应力-诱导的干细胞补充至肝)J.Clin.Invest.112，160，2003。
Kortesidis，A.，Zannettino，A.，Isenmann，S.，Shi，S.，Lapidot，T.和Gronthos，S.Stromal-derived factor-1 promotes the growth，survival，and development of human bone marrow stromal stem cells.(基质-衍生的因子-1促进人骨髓基质干细胞的生长、生存和发育)Blood 105，3793，2005。
Krebsbach PH，Mankani MH，Satomura K，Kuznetsov SA，RobeyPG.Repair of craniotomy defects using bone marrow stromal cells.(使用骨髓基质细胞对开颅术缺陷的修复)ransplantation 1998：66：1272-1278。
Kuboki Y，Saito T，Murata M，Takita H，Mizuno M，InoueM，Nagai N，Poole AR(1995)Two distinctive BMP-carriers inducezonal chondrogenesis and membranous ossification，respectively；geometrical factors of matrices for cell-differentiation.(两种不同的BMP-载体分别诱导带状软骨形成和膜骨化；用于细胞-分化的基质的几何因素)Connect Tissue Res 32，219-226。
Kucia，M.，Reca，R.，Miekus，K.，Wanzeck，J.，Wojakowski，W.，Janowska-Wieczorek，A.，Ratajczak，J.，and Ratajczak，M.Z.Traffickingof normal stem cells and metastasis of cancer stem cells involve similarmechanisms：pivotal role of the SDF-1-CXCR4 axis.(正常干细胞的往来和癌症干细胞的转移涉及类似的机理：SDF-1-CXCR4轴的中枢作用)Stem Cells 23，879，2005。
LatlammeC，Mahmoud R.Effect of BMP-2 and BMP-7 homodimersand a mixture of BMP-2/BMP-7 homodimers on osteoblast adhesion andgrowth following culture on a collagen scaffold.(在胶原蛋白支架培养后，BMP-2和BMP-7同型二聚体以及BMP-2/BMP-7同型二聚体混合物对成骨细胞粘合和生长的影响)，2008 Biomed.Mater.3 015008(第10页)。
Landers，R.，Pfrister，A(2005).Rapid prototyping in medicine.(医学中的快速原型制造)Internal Report，EnvisionTec，德国。
Landers，R.，U.Hubner等人(2002).“Rapid prototyping of scaffoldsderived from thermoreversible hydrogels and tailored for applications intissue engineering.(由热可逆的水凝胶衍生并适合应用于组织工程的支架的快速原型制造)”Biomaterials23(23)：4437-47。
Lang H，Schüler N，Nolden R.Attachment formation followingreplantation of cultured cells into periodontal defects.(在牙周缺陷内再植入培养的细胞之后的附属物形成)J Dent Res 1998：77：393-405。
Langer R，Vacanti JP.Tissue engineering.(组织工程)Science1993：260：920-926。
Lapidot，T.和Petit，I.Current understanding of stem cellmobilization：the roles of chemokines，proteolytic enzymes，adhesionmolecules，cytokines，and stromal cells.(干细胞移动的当前理解：趋化因子、蛋白水解酶、粘合分子、细胞因子和基质细胞的作用)Exp.Hematol.30，973，2002。
Laurell L，Gottlow J.Guided tissue regeneration update.(引导的组织再生更新)Int J Dent 1998：48：386-398。
Lekic P，McCulloch CA.Periodontal ligament cell population：thecentral role of fibroblasts in creating a unique tissue.(牙周韧带细胞群：成纤维细胞在产生独特的组织中的中枢作用)Anat Rec 1996：245：327-341。
Leong KF.Solid freeform fabrication of three-dimensional scaffoldsfor engineering replacement tissues and organs.(用于工程化代替组织和器官的三维支架的固体自由形态制造)Biomaterials 2003；24：2363-2378。
Lijun K，Yuan G，Guangyuan L.A study on the bioactivity ofchitosan/nano-hydroxyapatite composite scaffolds for bone tissueengineering.(用于骨组织工程的壳聚糖/纳米-羟基磷灰石复合物支架的生物活性研究)Eur Polym J 2006；42：3171-3179。
Lin H.The self-renewing mechanism of stem cells in the germline.(在种系中干细胞的自我更新机制)Curr Opin Cell Biol 1998：10：687-693。
Lindskog S.Formation of intermediate cementum.I.Earlymineralization of aprismatic enamel and intermediate cementum inmonkey.(中间体牙骨质的形成.I.在猴子中aprismatic牙釉质和中间体牙骨质的早期矿化)J Craniofac Genet Dev Biol 1982：2：147-160。
Liu H W，Chen C H，Tsai C L和Hsiue G H 2006 Targeted deliverysystem for juxtacrine signaling growth factor based on rhBMP-2-mediatedcarrier-protein conjugation.(基于rhBMP-2-介导的载体-蛋白缀合，用于juxtacrine信号生长因子的靶向递送系统)Bone 39 825-36。
Lu，L.和A.G.Mikos(1996).“The importance of new processingtechniques in tissue engineering.(在组织工程中新的加工技术的重要性)”MRS Bull 21(11)：28-32。
Lu L.，Stamatas G.，Mikos A，“Controlled release of transforminggrowth factor βl from biodegradable polymer microparticles.(来自可生物降解的聚合物微粒的转换生长因子βl的受控的释放)，J.of BiomedicalMaterials Res.Part A.，第50卷，第3期，第440-451页。
Lynch SE，Genco RJ，Marx RE.编辑，Tissue engineering.Applications in maxillofacial surgery and periodontics.(组织过程.在上颌面外科手术和牙周病学中的应用)，第1版，Carol Stream，IL：Quintessence Publishing，1999。
Lyons K M，Hogan B L和Robertson E J 1995 Colocalization ofBMP-7 and BMP-2 RNAs suggests that these factors cooperativelymediate tissue interactions during murine development.(BMP-7和BMP-2RNA的共同局部化表明，在鼠科发育期间这些因子协作介导组织相互作用)Mech.Dev.5071-83。
Ma PX，Choi JW.(AQ)Biodegradable polymer scaffolds with welldefined interconnected spherical pore network.(具有良好限定的互连球形孔网络的可生物降解的聚合物支架)Tissue Eng 2001：7：23-33。
Malekzeh R，Hollinger JO，Buck D，Adams DF，Mcallister BS.Isolation of human osteoblast-like cells and in vitro amplification fortissue engineering.(用于组织工程的人成骨细胞样细胞的分离和体外放大)J Periodontol 1998：69：1256-1262。
Mano JF，Sousa RA，Boesel LF.Bioinert biodegradable andinjectable polymeric matrix composites for hard tissue replacement：Stateof the art and recent developments.(用于硬组织代替的生物惰性的可生物降解的和可注射的聚合基质复合物：本领域的状况和近来的发展)Compos Sci Technol 2004；64：789-817。
Manolagas S C 1998 The role of IL-6 type cytokines and theirreceptors in bone.(IL-6型细胞因子和它们的受体在骨中的作用)Ann.NY Acad.Sci.840194-204。
Marion，N.W.和J.J.Mao(2006).“Mesenchymal stem cells andtissue engineering.(间充质干细胞和组织工程)”Methods Enzymol 420：339-61。
Mayer H，Scutt A M和Ankenbauer T 1996 Subtle differences in themitogenic effects of recombinant human bone morphogenetic proteins-2to-7 on DNA synthesis on primary bone-forming cells and identificationof BMP-2/4receptor.(对于主要成骨细胞，重组体人骨形态发生蛋白-2至-7对DNA合成的致有丝分裂效应的微妙差异和BMP-2/4受体的鉴定)Calcif.Tissue Int.58249-55。
McCulloch CA，Nemeth E，Lowenberg B，Melcher AH.Paravascular cells in endosteal spaces of alveolar bone contribute toperiodontal ligament cell populations.(在牙槽骨的骨内膜空间中的旁血管细胞有助于牙周韧带细胞群)Anat Rec 1987：219：233-242。
McCulloch CA.Origins and functions of cells essential forperiodontal repair：the role of fibroblasts in tissue homeostasis.(对于牙周修复必要的细胞的起源和功能：成纤维细胞在组织动态平衡中的作用)Oral Dis 1995：1：271-278。
McCulloch CA.Progenitor cell populations in the periodontalligament of mice.(在小鼠的牙周韧带中的远祖细胞群)Anat Rec 1985：211：258-262。
Meinel L，Fajardo R，Hofmann S，Langer R，Chen J，Snyder B，Vunjak-Novakovic G，Kaplan D.Silk implants for the healing of criticalsize bone defects.(用于使关键性尺寸骨缺陷愈合的丝移植物)Bone2005：37：688-698。
Melcher AH.Cells of periodontium：their role in the healing ofwounds.(牙周组织的细胞：它们在伤口愈合中的作用)Ann R Coll SurgEngl 1985：67：130-131。
Mikos AG，Lyman MD，Freed LE，Langer R.Wetting ofpoly(L-lactic acid)and poly(DL-lactic-co-glycolic acid)foams for tissueculture.(用于组织培养的聚(L-乳酸)和DL-乳酸-乙醇酸共聚物泡沫的润湿)Biomaterials 1993：15：55-58。
Mikos AG，Sarakinos G，Leite SM，Vacanti JP，Langer R.Laminatedthree-dimensional biodegradable foams for use in tissue engineering.(用于组织工程的层叠的三维可生物降解的泡沫)Biomaterials 1993：14：323-330。
Mikos KF.Preparation and characterization of poly L-lactic acidfoam.(聚L-乳酸泡沫的制备和表征)Polymer 1994；35：1068-1077。
Miletich I，Sharpe PT.Neural crest contribution to mammalian toothformation.(神经嵴对哺乳动物牙齿形成的贡献)Birth Defects Res CEmbryo Today 2004；72：200-12。
Mina M，Braut A.New insight into progenitor/stem cells in dentalpulp using Collal-GFP transgenes.(使用Collal-GFP转基因的牙髓中的远祖细胞/干细胞的新见解)Cells Tissues Organs 2004：176：120-133。
Miura M，Gronthos S，Zhao M，Lu B，Fisher LW，Robey PG，Shi S.SHED：stem cells from human exfoliated deciduous teeth.(SHED：来自人脱落的乳牙的干细胞)Proc Natl Acad Sci USA 2003：100：5807-5812。
Modino SA，Sharpe PT.Tissue engineering of teeth using adultstem cells.(使用成体干细胞的牙齿的组织工程)Arch Oral Biol 2005：50：255-258。
Moioli EK，Mao JJ.Chondrogenesis of mesenchymal stem cells bycontrolled delivery of transforming growth factor-beta3.(通过受控递送转换生长因子-β3的间充质干细胞的软骨形成)Conf Proc IEEE Eng MedBiol Soc.2006；1：2647-50。
Mooney DJ，Mikos AG.Growing new organs.(生长新的器官)SciAm 1999：280：60-65。
Mooney DJ，Powell C，Piana J，Rutherford B.Engineering dentalpulp-like tissue in vitro.(体外工程化牙髓样组织)Biomaterials 1996：12：865-868。
Mooney DJ.Novel approach to fabrication porous sponge of polyD，L-lactic-co-glycolic acid without the use of organic solvents.(不使用有机溶剂制造D，L-乳酸-乙醇酸共聚物的多孔海绵的新型方法)Biomaterials 1996；17：1417-1422。
Moradian-Oldak J.Amelogenins：assembly，processing and controlof crystal morphology.(牙釉蛋白：晶体形态学的组装、加工和控制)Matrix Biol 2001：20：293-305。
Moroni L，de Wijn JR，van Blitterswijk CA.3D fiber-depositedscaffolds for tissue engineering：Influence of pores geometry andarchitecture on dynamic mechanical properties.(用于组织工程的3D纤维-沉积的支架：孔几何形状和结构对动态机械性质的影响)Biomaterials2006；27：974-985。
Murphy W，Simmons C，Kaigler D，Mooney D，Bone Regenerationvia a Mineral Substrate and Induced Angiogenesis.(通过矿物基材和诱导的血管生成的骨再生)，Journal of Dental Research 2004 83：204-210。
Moss ML.Studies on dentin.I.Mantle dentin.(对牙质的研究.I.罩牙本质)Acta Anat(Basel)1999：87：481-507。
Moule AJ，Li H，Bartold PM.Donor variability in the proliferationof human dental pulp fibroblasts.(在人牙髓成纤维细胞的增殖中的供体变化性)Aust Dent J 1995：40：110-114。
Murata M，Inoue M，Arisue M，Kuboki Y，Nagai N(1998)Carrier-dependency of cellular differentiation induced by bonemorphogenetic protein in ectopic sites.(在异位部位通过骨形态发生蛋白诱导的细胞分化的载体-依赖性)Int J Oral Maxillofac Surg 27，391-396。
Murphy WL，Mooney DJ.Controlled delivery of inductive proteins，plasmid DNA and cells from tissue engineering matrices.(来自组织工程基质的诱导的蛋白、质粒DNA和细胞的受控递送)J Periodontal Res1999：34：413-419。
Muschler GF，Nakamoto C，Griffith LG.，Engineering principles ofclinical cell-based tissue engineering.(基于临床细胞的组织工程的工程原理)J BONE Joint Surg Am.2004 Jul；86-A(7)：1541-58。
Nakagawa T和Tagawa T 2000 Ultrastructural study of direct boneformation induced by BMPs-collagen complex implanted into an ectopicsite.(通过在异位部位内移植的BMP-胶原蛋白复合体诱导的直接骨形成的超结构研究)Oral Dis.6 172-9。
Nakahara T，Nakamura T，Kobayashi E等人In situ tissueengineering of periodontal tissues by seeding with periodontalligament-derived cells.(通过使用牙周韧带-衍生的细胞接种的牙周组织的原位组织工程)Tissue Eng 2004；10：537-44。
Nakahara T，Nakamura T，Kobayashi E等人Novel approach toregeneration of periodontal tissues based on in situ tissue engineering：effects of controlled release of basic fibroblast growth factor from asandwich membrane.(基于原位组织工程使牙周组织再生的新型方法：来自夹心膜的基础成纤维细胞生长因子的受控释放的影响)TissueEng 2003；9：153-62。
Nakahara T.A review of new developments in tissue engineeringtherapy for periodontitis.(用于牙周炎的组织工程治疗的新的发展的综述)Dent Clin North Am 2006；50：265-76，ix-x。
Nakao K，Morita R，Saji Y等人The development of abioengineered organ germ method.(生物工程化的有机微生物方法的发展)Nat Meth 2007；4：227-30。
Nakashima M，Akamine A.The application of tissue engineering toregeneration of pulp and dentin in endodontics.(在牙髓病学中使髓和牙质再生的组织工程的应用)J.Endod 2005：31：711-718。
Nakashima M，Bone morphogenetic proteins in dentin regenerationfor potential use in endodontic therapy.(潜在用于齿髓病学治疗的牙质再生中的骨形态发生蛋白)Cytokine&Growth Factor Reviews.2005：第16卷：第3期：369-376。
Nakashima M，Iohara K，Ishikawa M，Ito M，Tomokiyo A，Tanaka T，Akamine A.Stimulation of reparative dentin formation by exvivo gene therapy using dental pulp stem cells electrotransfected withgrowtb/differentiation factor 11(Gdf11).(使用被生长/分化因子11(Gdf11)电转染的牙髓干细胞通过活体外基因治疗来刺激修复性牙质形成)Hum Gene Ther 2004：15：1045-1053。
Nakashima The application of bone morphogenic proteins to dentaltissue engineering.(骨形态蛋白对牙齿组织工程的应用)NatureBiotechnology，第21卷，第9号，2003，第1025-1032页。
Nakatomi M，Morita I，Eto K，Ota MS.Sonic hedgehog signaling isimportant in tooth root development.(声刺猬式信号在牙根发育中是重要的)J Dent Res 2006；85：427-31。
Nakatsu M，Sainson R，Perez-del-Pulgar S，Aoto J，Aitkenhead M，Taylor K，Carpenter P，Hughes C，VEGF121 and VEGF 165 RegulateBlood Vessel Diameter Through Vascular Endothelial Growth FactorReceptor 2 in an In Vitro Angiogenesis Model.(在体外血管生成模型中VEGF121和VEGF 165通过血管内皮生长因子受体2调节血管直径)，Lab Invest 2003，83：12，第1873页。
National Institute for Dental and Craniofacial Research.StrategicPlan 2003-2008.(战略计划2003-2008)J Am Coll Dent 2003：70：43-55。
Nebahat D，Dilhan MK，Elvan B.Biocomposites ofnanohydroxyapatite with collagen and poly vinyl alcohol.(含有胶原蛋白和聚乙烯醇的纳米羟基磷灰石的生物复合物)Coll Surf B 2006；48：42-49。
Ohazama A，Modino SA，Miletich I，Sharpe PT.Stem-cell basedtissue engineering of murine teeth.(鼠科牙齿的基于干细胞的组织工程)J Dent Res 2004：83：518-522。
Onishi T，Ishidou Y，Nagamine T，Yone K，Imamura T，KatoM，Sampath T K，ten Dijke P和Sakou T 1998 Distinct and overlappingpatterns of localization of bone morphogenetic protein(BMP)familymembers and a BMP type II receptor during fracture healing in rats.(在大鼠骨折愈合期间骨形态发生蛋白(BMP)家族成员和BMP类型II受体的局部化的不同的和重叠的模式)Bone 22 605-12。
Owen M，Friedenstein AJ.Stromal stem cells：marrowderivedosteogenic precursors.(基质干细胞：骨髓衍生的成骨性前体)CibaFound Symp 1988：136：42-60。
Owen ME，Cave J，Joyner CJ.Clonal analysis in vitro ofosteogenic differentiation of marrow CFU-F.(骨髓CFU-F的成骨性分化的体外克隆分析)J Cell Sci 1987：87：731-738。
Payne TL，Skobe Z，Yelick PC.Regulation of tooth developmentby the noveltype I TGFβ family member receptor Alk8.(通过新型类型ITGFβ家族成员受体Alk8的牙齿发育的调节)J Dent Res 2001：80：1968-1973。
Peled，A.，Grabovsky，V.，Habler，L.，Sandbank，J.，Arenzana-Seisdedos，F.，Petit，I.，Ben-Hur，H.，Lapidot，T.和Alon，R.The chemokine SDF-1 stimulates integrin-mediated arrest of CD34cells on vascular endothelium under shear flow.(在剪切流下，在血管内皮上，趋化因子SDF-1刺激整联蛋白-介导的CD34细胞的捕获)J.Clin.Invest.104，1199，1999。
Peled，A.，Petit，I.，Kollet，O.，Magid，M.，Ponomaryov，T.，Byk，T.，Nagler，A.，Ben-Hur，H.，Many，A.，Shultz，L.，Lider，O.，Alon，R.，Zipori，D.和Lapidot，T.Dependence ofhuman stem cellengraftment and repopulation of NOD/SCID mice on CXCR4.(人干细胞移植和NOD/SCID小鼠的再殖对CXCR4的依赖性)Science 283，845，1999。
Peng Y，Kang Q，Cheng H，Li X，Sun M H，Jiang W，Luu H H，Park J Y，Haydon R C和He T C 2003 Transcriptional characterization ofbone morphogenetic proteins(BMPs)-mediated osteogenic signalling.(骨形态发生蛋白(BMP)-介导的成骨性信号发生的转录表征)J.Cell.Biochem.90 1149-65。
Perez MAA，Pitaru S，Fregoso AO，Gasga JR，Arzate H.Anticementoblastoma-derived protein antibody partially inhibitsmineralization on a cementoblastic cell line.(抗成牙骨质细胞瘤-衍生的蛋白抗体部分地抑制成牙骨质细胞细胞系上的矿化)J Struct Biol2003：143：1-13。
Perkins S，Fleischman RA.Stromal cell progeny of murin bonemarrow fibroblast colony-forming units are clonal endothelial-like cellsthat express collagen IV and laminin.(鼠科骨髓成纤维细胞群落-形成单元的基质细胞后代为表达胶原蛋白IV和层粘连蛋白的克隆内皮样细胞)Blood 1990：75：620-625。
Perrino MA，Yelick PC.Immunolocalization of Alk8 duringreplacement tooth development in zebrafish.(在斑马鱼中在代替牙齿发育期间Alk8的免疫定位)Cells Tissues Organs 2004：176：17-27。
Persidis A.Tissue engineering.(组织工程)Nature Biotechnol 1999：17：508-510。
Pietrokovski J，Massler M.Ridge remodeling after tooth extraction inrats.(在大鼠中在牙齿拔出之后的脊重塑)J.Dent.Res.461(1967)，第222-231页。
Pihlstrom BL，Michalowicz BS，Johnson NW.Periodontal diseases.(牙周病)Lancet 2005；366：1809-20。
Pitaru S，McCulloch CAG，Naryanan AS.Cellular origins anddifferentiation control mechanisms during periodontal development andwound healing.(在牙周发育和伤口愈合期间细胞来源和分化控制机理)J Periodontal Res 1994：29：81-94。
Plikus MV，Zeichner-David M，Mayer JA等人Morphoregulation ofteeth：modulating the number，size，shape and differentiation by tuningBmp activity.(牙齿的形态调节：通过调节Bmp活性来调节数量、尺寸、形状和分化)Evol Dev 2005；7：440-57。
Polson AM.Periodontal regeneration.(牙周再生)Chicago：Quintessence Publishing Co.，1994。
Quesenberry PJ，Becker P，Stewart FM.Phenotype of theengrafting stem cellin mice.(在小鼠中移植干细胞的表型)Stem Cells.1998；16Suppl 1：33-5。
Qing C，Jian Y，Jianzhong B，Shenguo W.A novel porous cellsscaffold made of polylactide-dextran blend by combining phase-separationand particle leaching techniques.(通过相分离和颗粒浸出技术组合，由聚丙交酯-葡聚糖共混物制备的新型多孔细胞支架)Biomaterials 2002；23：4483-4492。
Quinones CR，Caffesse RG.Current status of guided tissueregeneration.(引导的组织再生的现状)Periodontal 20001995：9：55-68。
Rahaman MN，Mao JJ.Stem cell-based composite tissue constructsfor regenerative medicine.(用于再生药物的基于干细胞的复合物组织构造)Biotechnol Bioeng 2005；91：261-84。
Rao MS.Multipotent and restricted precursors in the central nervoussystem.(在中枢神经系统中多效和受限的前体)Anat Rec 1999：257：137-148。
Rezwan K，Chen Q，Blaker J.Biodegradable and bio active porouspolymer/inorganic composite scaffolds for bone tissue engineering.(用于骨组织工程的可生物降解的和生物活性多孔聚合物/无机复合物支架)Biomaterials 2006；27：3413-3431。
Rich J，Jaakkola T，Tirri T.In vitro evaluation of polye-caprolactone-co-DL-lactide/bioactive glass composites.(e-己内酯-DL-丙交酯共聚物/生物活性玻璃复合物的体外评价)Biomaterials 2002；23：2143-2150。
Ripamonti U，Reddi AH.Tissue engineering，morphogenesis，andregeneration of the periodontal tissues by bone morphogenetic proteins.(通过骨形态发生蛋白的牙周组织的组织工程、形态发生和再生).CritRev Oral Biol Med 1997：8：154-163。
Rouabhia M，Ross G，Page N和Chakir J 2002 Interleukin-18 andgamma interferon production by oral epithelial cells in response toexposure to Candida albicans or lipopolysaccharide stimulation.(响应于暴露于白色念珠菌或脂肪多糖刺激，通过口腔上皮细胞生产白细胞间介素-18和γ干扰素)Infect.Immun.70 7073-80。
Rubio D，Garcia-Castro J，Martin MC，de la Fuente R，Cigudosa JC，Lloyd AC，Bernad A.Spontaneous human adult stem celltransformation.(自发人成体干细胞转化)Cancer Res 2005：65：3035-3039[勘误在Cancer Res 2005：65：4969中]。
Rutherford RB，Ryan ME，Kennedy JE，Tucker MM，CharetteMF.Platelet-derived growth factor and dexamethasone combined with acollagen matrix induce regeneration of the periodontium in monkeys.(与胶原蛋白基质组合的血小板-衍生的生长因子和地塞米松在猴子中诱导牙周组织再生)J Clin Periodontal 1993：20：537-544。
Sainio K，Raatikainen-Ahokas A.Mesonephric kidney-stem cellfactory？(中肾-干细胞工厂？)Int J Dev Biol 1999：43：435-439。
Saito N和Takaoka K 2003 New synthetic biodegradable polymers asBMP carriers for bone tissue engineering.(作为用于骨组织工程的BMP载体的新的合成可生物降解的聚合物)Biomaterials 24 2287-93。
Saito N，Okada T，Toba S，Miyamoto S，Takaoka K(1999)Newsynthetic absorbable polymers as BMP carriers：plastic properties ofpoly-D，L-lactic acidpolyethylene glycol block copolymers.(作为BMP载体的新的合成可吸收的聚合物：聚-D，L-乳酸聚乙二醇嵌段共聚物的塑性性质)J Biomed Mater Res 47，104-110。
Sampath T K，Coughlin J E，Whetstone R M，Banach D，Corbett C，Ridge R J，Ozkaynak E，Oppermann H和Rueger D C 1990 Bovineosteogenic protein is composed of dimers of OP-1 and BMP-2A，twomembers of the transforming growth factor-beta superfamily.(牛成骨性蛋白由OP-1和BMP-2A(转换生长因子-β总科的两个成员)的二聚体组成)J.Biol.Chem.26513198-205。
Santos E，Badin S，Shenker B，Shapiro I，Ducheye P，Si-Ca-Pxerogels and bone morphogenetic protein act synergistically on rat stromalmarrow eell differentiation in vitro.(Si-Ca-P干凝胶和骨形态发生蛋白对大鼠基质骨髓细胞体外分化起协同作用)J Biomed Mater Res 41，87-94。
Schantz J，Chim H，Whiteman M.Cell Homing in TissueEngineering：SDF-1 Mediates Site-Directed Homing of MesenchymalStem Cells within Three-Dimensional Polycaprolactone Scaffolds.(组织工程中的细胞归位：SDF-1介导间充质干细胞在三维聚己内酯支架内的部位-导向的归位)Tissue Engineering 2007：第13卷：11：2615-2624。
Schantz，J.T.和Ng，K.W.A Manual for Primary Human CellCulture.(主要人细胞培养物手册)New Jersey：World Scientific，2004。
Schantz，J.T.，Hutmacher，D.W.，Chim，H.，Ng，K.W.，Lim，T.C.和Teoh，S.H.Induction of ectopic bone formation by using humanperiosteal cells in combination with a novel scaffold technology.(通过人骨膜细胞与新型支架技术组合使用来诱导异位骨形成)Cell Transplant.11，125，2002。
Scott，L.J.，Clarke，N.W.，George，N.J.，Shanks，J.H.，Testa，N.G.和Lang，S.H.Interactions of human prostatic epithelial cells withbone marrow endothelium ：binding and invasion.(人前列腺上皮细胞与骨髓内皮的相互作用：粘合和侵入)Br.J.Cancer 84，1417，2001。
Seale P，Rudnicki MA.A new look at the origin，function，andstem-cell″status of muscle satellite cells.(肌肉卫星细胞的起源、功能和干细胞情况新貌)Dev Biol 2000：218：115-124。
Seo BM，Miura M，Gronthos S等人Investigation of multipotentpostnatal stem cells from human periodontalligament.(来自人牙周韧带的多效后天干细胞的研究)Lancet 2004；364：149-55。
Sharpe PT，Young CS.Test-tube teeth.(试管牙齿)Sci Am 2005；293：34-41。
Shi S，Bartold PM，Miura M，Seo BM，Robey PG，GronthosS(2005)The efficacy of mesenchymal stem cells to regenerate and repairdental structures.(间充质干细胞使牙齿结构再生和修复的功效)OrthodCraniofac Res 8：191-199。
Shi S，Gronthos S，Chen S，Reddi A，Counter CM，Robey PG，Wang CY.Bone formation by human postnatal bone marrow stromal stemcells is enhanced by telomerase expression.(端粒酶表达增强通过人后天骨髓基质干细胞的骨形成)Nat Biotechnol.2002 Jun；20(6)：587-91。
Shi S，Gronthos S.Perivascular niche of postnatal mesenchymal stemcells in human bone marrow and dental pulp.(在人骨髓和牙髓中后天间充质干细胞的血管周小生境)J Bone Miner Res 2003：18：696-704。
Shi S，Robey PG，Gronthos S.Comparison of human dental pulp andbone marrow stromal stem cells by cDNA microarray analysis.(通过cDNA显微阵列分析来比较人牙髓和骨髓基质干细胞)Bone 2001：29：532-539。
Shieh SJ，Vacanti JP.State-of-the-art tissue engineering：from tissueengineering to organ building.(组织工程领域状况：从组织工程到器官构建)Surgery 2005 137：1-7。
Shimizu Y.在Ikada Y编辑Tissue Engineering for Therapeutic Use2.Tokyo：Elsevier，1998；119-22中的Tissue engineering for softtissues.(用于软组织的组织工程)。
Shin H，Jo S，Mikos AG.Biomimetic materials for tissueengineering.(用于组织工程的仿生材料)Biomaterials 2003；24：4353-4364。
Simmons PJ，Torok-Storb B.Identification of stromal cellprecursors in human bone marrow by a novel monoclonal antibody，STRO-1.(通过新型单克隆抗体STRO-1在人骨髓中鉴别基质细胞前体)Blood 1991：78：55-62。
Simonsen JL，Rosada C，Serakinci N，Justesen J，Stenderup K，Rattan SI，Jensen TG，Kassem M.Telomerase expression extends theproliferative life-span and maintains the osteogenic potential of humanbone marrow stromal cells.(端粒酶表达延长增殖寿命并保持人骨髓基质细胞的成骨性潜力)Nat Biotechnol 2002：20：592-596。
Sittinger M，Bujia J，Rotter N，Reitzel D，Minuth WW，Burmester GR.Tissue engineering and autologous transplant formation：practical approaches with resorbable biomaterials and new cell culturetechniques.(组织工程和自体移植形成：使用可再吸收的生物材料和新的细胞培养物技术的实践方法)Biomaterials 1996：17：237-242。
Slavkin HC，Bringas P Jr，Bessem C，Santos V，Nakamura M，Hsu MY，Snead ML，Zeichner-David M，Fincham AG.Hertwig′sepithelial root sheath differentiation and initial cementum and boneformation during long-term organ culture of mouse mandibular firstmolars using serumless，chemically defined medium.(使用无血清的化学限定的培养基，在小鼠下颌第一臼齿的长期器官培养期间，Hertwig上皮根鞘分化和初期牙骨质及骨形成)J Periodontal Res 1989：24：28-40。
Smith AJ，Murray PE，Sloan AJ，Matthews JB，Zhao S.Transdentinalstimulation of tertiary dentinogenesis.(第三牙质生成的经牙质刺激)AdvDent Res 2001：15：51-54。
Smith AJ.Tooth tissue engineering and regeneration-a translationalvision！(牙齿组织工程和再生-移动构想！)J Dent Res 2004：83：517。
Sodek J.A new approach to assessing collagen turnover by using amicroassay.A highly efficient and rapid turnover of collagen in ratperiodontal tissues.(通过使用微观测定来评价胶原蛋白翻转的新的方法。在大鼠牙周组织中胶原蛋白的高度有效和快速翻转)Biochem J1976：160：
Sonoyama W，Liu Y，Fang D，Yamaza T，Seo BM，Zhang C，Liu H，Gronthos S，Wang C，Shi S，Wang S，Mesenchymal StemCell-Mediated Functional Tooth Regeneration in Swine.(猪中间充质干细胞-介导的功能性牙齿再生)，PLoS ONE.2006；1(1)：e79。
Steele-Perkins G，Butz KG，Lyons GE等人Essential role forNFI-C/CTF transcription-replication factor in tooth root development.(在牙根发育中NFI-C/CTF转录-复制因子的基本作用)Mol Cell Biol2003；23：1075-84。
Sternlicht M D和Werb Z 2001 How matrix metalloproteinasesregulate cell behavior.(基质金属蛋白酶如何调节细胞行为)Annu.Rev.Cell Dev.Biol.17 463-516。
Stock UA，Vacanti JP.Tissue engineering：current state andprospects.(组织工程：现状和前景)Annu Rev Med 2001：52：143-151。
Stosich MS，Bastian B，Marion NW，Clark PA，Reilly G，Mao JJ，Vascularized adipose tissue grafts from human mesenchymal stem cellswith bioactive cues and microchannel conduits.(使用生物活性线索和微通道导管，由人间充质干细胞的血管化的脂肪组织移植)Tissue Eng.2007 Dec；13(12)：2881-90。
Sumikawa DA，Marshall GW，Gee L，Marshall SJ.Microstructureof primary tooth dentin.(初级牙齿牙质的微观结构)Pediatr Dent 1999：21：439-444。
Susan Liao，Kazuchika T.Human neutrophils reaction to thebiodegraded nano-hydroxyapatite/collagen andnano-hydroxyapatite/collagen/poly L-lactic acid composite.(人中性白细胞对生物降解的纳米羟基磷灰石/胶原蛋白和纳米羟基磷灰石/胶原蛋白/聚L-乳酸复合物的反应)J Biomed Mater Res 2006；76A：820-825。
Suzuki Y，Tanihara M，Suzuki K，Saitou A，Sufan W和NishimuraY 2000 Alginate hydrogel linked with synthetic oligopeptide derived fromBMP-2 allows ectopic osteoinduction in vivo.(与衍生自BMP-2的合成低聚肽连接的藻酸盐水凝胶能体内异位骨诱导)J.Biomed.Mater.Res.50 405-9。
Sweeney TM，Opperman LA，Persing JA，Ogle RC(1995)Repair ofcritical size rat calvarial defects using extracellular matrix protein gels.(使用细胞外基质蛋白凝胶修复临界尺寸大鼠颅盖缺陷)J Neurosurg 83，710-715。
Sylvain D，Eduardo S，Antoni PT.Freeze casting ofhydroxyapatite scaffolds for bone tissue engineering.(用于骨组织工程的羟基磷灰石支架的冷冻浇铸)Biomaterials 2006；27：5480-5489。
Taba M Jr，Jin Q，Sugai JV，Giannobile WV.Current concepts inperiodontal bioengineering.(牙周生物工程中的当前观念)OrthodCraniofac Res 2005：8：292-302。
Tabata Y.Significance of release technology in tissueengineering.(在组织工程中释放技术的重要性)Drug Discov Today2005；10：1639-46。
Taguchi Y，Yamamoto M，Yamate T，Lin S C，Mocharla H，DeTogni P，Nakayama N，Boyce B F，Abe E和Manolagas S C 1998Interleukin-6-type cytokines stimulate mesenchymal progenitordifferentiation toward the osteoblastic lineag.(白细胞间介素-6-型细胞因子刺激间充质远祖朝向成骨细胞系谱分化)Proc.Assoc.Am.Physicians 110 559-74。
Tan KH，Chua CK，Leong KF.Scaffold development usingselective laser sintering of polyetheretherketone-hydfoxyapatitebiocomposite blends.(使用选择性激光烧结聚醚醚酮-羟基磷灰石生物复合物共混物的支架开发)Biomaterials 2003；24：3115-3123。
Tardif F，Ross G和Rouabhia M 2004 Gingival and dermalfibroblasts produce interleukin-1 beta converting enzyme andinterleukin-1 beta but not interleukin-18 even after stimulation withlipopolysaccharide.(牙龈和皮肤成纤维细胞产生白细胞间介素-1β转化酶和白细胞间介素-1β，但是不产生白细胞间介素-18，即使在使用脂肪多糖刺激后)J.Cell.Physiol.198 125-32。
Thesleff I，Aberg T.Molecular regulation of tooth development.(牙齿发育的分子调节)Bone 1999：25：123-125。
Thesleff I，Keranen S，Jernvall J.Enamel knots as signaling centerslinking tooth morphogenesis and odontoblast differentiation.(牙釉质结作为信号发生中心连接牙齿形态发生和成牙质细胞分化)Adv Dent Res2001：15：14-18。
Thesleff I，Sharpe P.Signalling networks regulating dentaldevelopment.(调节牙齿发育的信号网络)Mech Dev 1997；67：111-23。
Thesleff I，Vaahtokari A，Kettunen P，Aberg T.Epithelialmesenchymal signaling during tooth development.(在牙齿发育期间的上皮间充质信号发生)Connect Tissue Res 1995：32：9-15。
Thesleff I.Epithelial-mesenchymal signalling regulating toothmorphogenesis.(调节牙齿形态发生的上皮-间充质信号发生)J Cell Sci2003；116：1647-8。
Thesleff I.The genetic basis of tooth development and dentaldefects.(牙齿发育和牙齿缺陷的基因基础)Am J Med Genet A 2006；140：2530-5。
Thies R S，Bauduy M，Ashton B A，Kurtzberg L，Wozney J M和Rosen V 1992 Recombinant human bone morphogenetic protein-2 inducesosteoblastic differentiation in W-20-17 stromal cells.(重组体人骨形态发生蛋白-2诱导成骨细胞在W-20-17基质细胞中分化)Endocrinology130 1318-24。
Toma C，Pittenger MF，Cahill KS，Byrne BJ，Kessler PD.Human mesenchymal stem cells differentiate to a cardiomyocytephenotype in the adult murine heart.(在成年鼠科心脏中人间充质干细胞分化为心肌细胞表型)Circulation 2002：105：93-98。
Tsuji K，Ito Y和Noda M 1998 Expression of thePEBP2alphaA/AML3/CBFAl gene is regulated by BMP4/7 heterodimerand its overexpression suppresses type I collagen and osteocalcin geneexpression in osteoblastic and nonosteoblastic mesenchymalcells.(PEBP2alphaA/AML3/CBFAl基因的表达受到BMP4/7杂二聚体的调节，并且其过度表达抑制I型胶原蛋白和在成骨细胞和非成骨细胞间充质细胞中的骨钙素基因表达)Bone 2287-92。
Tucker A，Sharpe P.The cutting-edge of mammalian development：how the embryo makes teeth.(哺乳动物发育的前沿：胚胎如何制造牙齿)Nat Rev Genet 2004；5：499-508。
Tummers M，Thesleff I(2003)Root or crown ：a developmentalchoice orchestrated by the differential regulation of the epithelial stem cellniche in the tooth of two rodent species.(根或冠：通过在两种啮齿动物物种的牙齿中差异性调节上皮干细胞小生境，精心安排发育选择)Development 130：1049-1057。
US Department of Health and Human Services.Oral health inAmerica：a report of the surgeon general.(美国的口腔健康：外科医生全面报告)Rockville，MD：US Department of Health and Human Services，NIDCR，NIH，2000。
Vacanti MP，Leonard JL，Dore B，Bonassar LJ，Cao Y，Stachelek SJ，Vacanti JP，O′Connell F，Yu CS，Farwell AP，VacantiCA.Tissue-engineered spinal cord.(组织-工程化的脊髓)Trahsplant Proc2001：33：592-598。
Varghese S和Canalis E 1997 Regulation of collagenase-3 by bonemorphogenetic protein-2 in bone cell cultures.(在骨细胞培养物中通过骨形态发生蛋白-2来调节胶原蛋白酶-3)Endocrinology 138 1035-40。
Van Diik LJ，Schakenraad JM，van der Voort HM，BusscherHJ.Cell seeding of periodontal ligament fibroblasts.A pilot study.(牙周韧带成纤维细胞的细胞接种.一个初步研究)J Clin Periodontal 1991：18：196-199。
Van der Heyden C，Allizard F，Sire JY，Huysseune A.Toothdevelopment in vitro in two teleost fish，the cichlid Hemichromisbimaculatus and the cyprinid Danio rerio.(在两种硬骨鱼：丽鱼科双斑伴丽鱼和鲤科斑马鱼中牙齿的体外发育).Cell Tissue Res 2005：321：375-389。
Van der Heyden C，Huysseune A.Dynamics of tooth formation andreplacement in the zebrafish(Danio rerio)(Teleostei，Cyprinidae).(在斑马鱼(Danio rerio)(真鱼骨总目，鲤科)中牙齿形成和代替的动力学)DevDyn 2005：219：486-496。
Van der Heyden C，Wautier K，Huysseune A.Tooth succession in thezebrafish(Danio rerio).(在斑马鱼(Danio rerio)中的牙齿演替)Arch OralBiol 2001：46：1051-1058。
Vandervelde S，van Luyn MJ，Tio RA，Harmsen MC Signalingfactors in stem cell-mediated repair of infarcted myocardinm.(在梗塞的心肌的干细胞-介导的修复中的信号因子)J MoI Cell Cardiol.2005 Aug；39(2)：363-76。
Vavidovitch Z.Bone metabolism associated with tooth eruption andorthodontic tooth movement.(与牙齿萌出和牙齿矫正牙齿运动相关的骨代谢)J Periodontal 1979：50(4Spec No)：22-29。
Viljanen VV，Lindholm TC，Gao TJ，Lindholm TS(1997)Lowdosage of native allogeneic bone morphogenetic protein in repair of sheepcalvarial defects.(在绵羊颅盖缺陷的修复中，低剂量的本地异基因骨形态发生蛋白)Int J Oral Maxillofac Surg 26，389-393。
Wei Jie，Li Yubao.A study on nano-composite of hydroxyapatiteand polyamide.(对羟基磷灰石和聚酰胺的纳米复合物的研究)J MaterSci 2003；38：3303-3306。
Woodfield，T.B.，C.A.Van Blitterswijk等人(2005).“Polymerscaffolds fabricated with pore-size gradients as a model for studying thezonal organization within tissue-engineered cartilage constructs.(使用孔-尺寸梯度制造的聚合物支架作为在组织-工程化的软骨构造内研究带状组织的模型)”Tissue Eng 11(9-10)：1297-311。
Woodfield，T.B.，J.Malda等人(2004).“Design of porousscaffolds for cartilage tissue engineering using a three-dimensionalfiber-deposition technique.(使用三维纤维-沉积技术，用于软骨组织工程的多孔支架的设计)”Biomaterials 25(18)：4149-61。
Wozney JM，Rosen V，Byrne M，Celeste AJ，Moutsatsos I，Wang EA.Growth factors influencing bone development.(影响骨发育的生长因子)J Cell Sci Suppl.1990；13：149-156。
Wynn，R.F.，Hart，C.A.，Corradi-Perini，C，O′Neill，L.，Evans，C.A.，Wraith，E.，Fairbairn，L.J.和Bellantuoho，I.A smallproportion of mesenchymal stem cells strongly expresses functionalityactive CXCR4 receptor capable of promoting migration to bonemarrow.(小比例的间充质干细胞强烈表达能促进迁移至骨髓的功能活性CXCR4受体)Blood 104，2643，2004。
Xiao Y，Qian H，Young WG，Bartold PM.Tissue engineering forbone regeneration using differentiated alveolar bone cells in collagenscaffolds.(在胶原蛋白支架中使用分化的牙槽骨细胞的骨再生组织工程)Tissue Eng 2003：9：1167-1177。
Yamada S，Murakami S，Matoba R，Ozawa Y，Yokokoji T，NakahiraY，Ikezawa K，Takayama S，Matsubara K，Okada H.Expression profileof active genes in human periodontal ligament and isolation of PLAP-1，anovel SLRP family gene.(在人牙周韧带中活性基因的表达分布和PLAP-1，一种新型SLRP家族基因，的分离)Gene 2001：275：279-286。
Yamashiro T，Tummers M，Thesleff I.Expression of bonemorphogenetic proteins and Msx genes during root formation.(在根形成期间骨形态发生蛋白和Msx基因的表达)J Dent Res 2003；82：172-6。
Yelick PC，Schilling TF.Molecular dissection of craniofacialdevelopment using zebrafish.(使用斑马鱼的颅面发育的分子解剖)CritRev Oral Biol Med 2002：13：308-322。
Yelick PC，Vacanti JP.Bioengineered teeth from tooth bud cells.(来自牙蕾细胞的生物工程化的牙齿)Dent Clin North Am 2006；50：191-203，viii。
Yeong W-Y，Chua C-K.Rapid prototyping in tissue engineering：Challenges and potential.(在组织工程中的快速原型制造：挑战和潜力)Trends Biotechnol 2004；22：643-652。
Young CS，Abukawa H，Asrican R等人Tissue-engineered hybridtooth and bone.(组织-工程化的混杂牙齿和骨)Tissue Eng 2005；11：1599-610。
Young CS，Abukawa H，Asrican R，Ravens M，Troulis MJ，KabanLB，Vacanti JP，Yelick PC(2005)Tissue-engineered hybrid tooth andbone.(组织-工程化的混杂牙齿和骨)Tissue Eng11：1599-1610。
Young CS，Kim S-W，Taylor R，Vacanti JP，Bartlett JD，Yelick PC.Developmental analysis and three-dimensional computermodeling of tooth crowns grown on biodegradable polymer scaffolds.(在可生物降解的聚合物支架上生长的牙冠的发展分析和三维计算机建模)Arch Oral Biol 2005：50：259-265。
Young CS，Terada S，Vacanti JP，Honda M，Bartlett JD，YelickPC.Tissue engineering of complex tooth structure on biodegradablepolymer scaffolds.(在可生物降解的聚合物支架上复杂的牙齿结构的组织工程)J Dent Res 2002：81：695-700。
Zhang W，Walboomers XF，Wolke JG，Bian Z，Fan MW，JansenJA.Differentiation ability of rat postnatal dental pulp cells in vitro.(大鼠后天牙髓细胞的体外分化能力)Tissue Eng 2005：11：357-368。
Zhao J，Guo LY，Yang XB，Weng J.Preparation of bioactive porousHA/PCL composite scaffolds.(生物活性多孔HA/PCL复合物支架的制备)Applied Surface Science 2008：第255卷：第5期：第2部分：2942-2946。
Zhao LR，Duan WM，Reyes M，Keene CD，Verfaillie CM，Low WC.Human bone marrow stem cells exhibit neural phenotypes andameliorate neurological deficits after grafting into the ischemic brain ofrats.(在移植进入大鼠的局部缺血大脑之后，人骨髓干细胞呈现神经表型并改善神经学缺陷)Exp Neural 2002：174：11-20。
Zhao M，Jin Q，Berry JE，Nociti FH Jr，Giannobile WV，SomermanMJ.Cementoblast delivery for periodontal tissue engineering.(用于牙周组织工程的造牙骨质细胞递送)J Periodontol 2004：75：154-161。
Zhu W，Rawlins B A，Boachie-Adjei O，Myers E R，ArimizuJ，Choi E，Lieberman J R，Crystal R G和Hidaka C 2004 Combinedbone morphogenetic protein-2 and-7 gene transfer enhances osteoblasticdifferentiation and spine fusion in a rodent model.(在啮齿动物模型中组合的骨形态发生蛋白-2和-7基因转移增强成骨细胞分化和脊柱融合术)J.Bone Miner.Res.192021-32。
鉴于以上描述，可以看到实现了本发明的若干优点并且实现了其它优点。

Claims (51)

1.一种无细胞哺乳动物牙齿形支架，所述支架包含趋化性、成骨性、成牙质性、成釉质性或成牙骨质性化合物。
2.权利要求1的支架，所述支架具有人门牙、人犬牙、人双尖牙或人臼齿的形状。
3.权利要求1-2中任一项的支架，所述支架具有人臼齿的形状。
4.权利要求1-3中任一项的支架，其中所述化合物为血小板-衍生的生长因子(PDGF)、内皮细胞生长因子(ECGF)、转换生长因子-β1(TGF-β1)、表皮生长因子(EGF)、肝细胞生长因子(HGF)、基质细胞-衍生的因子-1(SDF1)、骨形态发生蛋白(BMP)、TGF-β、生长和分化因子(GDF)、胰岛素样生长因子-1(IGF1)、血管内皮生长因子(VEGF)、成纤维细胞生长因子(FGF)、牙质基质蛋白、牙质涎腺蛋白、骨涎腺蛋白、牙釉蛋白或整联蛋白。
5.权利要求3的支架，其中所述化合物为SDF1。
6.权利要求3的支架，其中所述化合物为BMP。
7.权利要求6的支架，其中所述BMP为BMP-7。
8.权利要求1-7中任一项的支架，所述支架包含趋化性生长因子和成骨性、成牙质性、成釉质性或成牙骨质性生长因子。
9.权利要求8的支架，其中所述趋化性生长因子为SDF1，并且所述成骨性、成牙质性、成釉质性或成牙骨质性生长因子为BMP-7。
10.权利要求9的支架，其中BMP-7在支架中为约10ng/g-1000μg/g支架，并且SDF1在支架中为约10ng/g-1000μg/g支架。
11.权利要求9的支架，其中BMP-7在支架中为约100μg/g支架，并且SDF1在支架中为约100μg/g支架。
12.权利要求1-11中任一项的支架，所述支架由包含骨传导材料的组合物制造。
13.权利要求12的支架，其中所述骨传导材料为羟基磷灰石。
14.权利要求12的支架，其中所述组合物为ε-聚己内酯和羟基磷灰石的混合物。
15.权利要求14的支架，其中所述混合物为约80％重量聚己内酯和约20％重量羟基磷灰石。
16.权利要求1-15中任一项的支架，所述支架包含直径在50-500μm之间的微通道。
17.权利要求1-16中任一项的支架，所述支架包含直径为约200μm的微通道。
18.权利要求16的支架，其中所述化合物嵌入微通道中的凝胶中。
19.权利要求18的支架，其中所述凝胶为胶原蛋白凝胶。
20.权利要求18的支架，所述支架进一步包含无孔牙冠。
21.权利要求17的支架，所述支架包含
直径为约200μm的微通道；
在微通道中以约100ng/ml凝胶的浓度嵌入胶原蛋白凝胶的BMP-7；
在微通道中以约100ng/ml凝胶的浓度嵌入胶原蛋白凝胶的SDF1；和
无孔牙冠。
22.权利要求1-21中任一项的支架，其中所述化合物在缓释制剂中。
23.一种在哺乳动物的嘴中代替牙齿的方法，其中牙齿缺失并且在嘴中在缺失牙齿的位置存在牙槽，所述方法包括在牙槽中植入具有丢失牙齿的形状的无细胞支架。
24.权利要求23的方法，所述方法进一步包括通过计算机辅助设计(CAD)制备缺失的牙齿的模型，以及使用bioplotter合成所述支架。
25.权利要求24的方法，其中缺失的牙齿为来自人嘴的第一臼齿，并且对与第一臼齿类似但是在嘴的另一侧的第二臼齿进行CT扫描，CAD利用第二臼齿的CT扫描数据来设计所述支架。
26.权利要求23-25中任一项的方法，其中所述支架包含趋化性、成骨性、成牙质性、成釉质性或成牙骨质性化合物。
27.权利要求23-26中任一项的方法，其中所述化合物为血小板-衍生的生长因子(PDGF)、内皮细胞生长因子(ECGF)、转换生长因子-β1(TGF-β1)、表皮生长因子(EGF)、肝细胞生长因子(HGF)、基质细胞-衍生的因子-1(SDF1)、骨形态发生蛋白(BMP)、TGF-β、生长和分化因子(GDF)、胰岛素样生长因子-1(IGF1)、血管内皮生长因子(VEGF)、成纤维细胞生长因子(FGF)、牙质基质蛋白、牙质涎腺蛋白、骨涎腺蛋白、牙釉蛋白或整联蛋白。
28.权利要求27的方法，其中所述化合物为SDF1。
29.权利要求27的方法，其中所述化合物为BMP。
30.权利要求29的方法，其中所述BMP为BMP-7。
31.权利要求23-30中任一项的方法，其中所述支架由包含骨传导材料的组合物制造。
32.权利要求31的方法，其中所述骨传导材料为羟基磷灰石。
33.权利要求31的方法，其中所述组合物为ε-聚己内酯和羟基磷灰石的混合物。
34.权利要求33的方法，其中所述混合物为约80％重量聚己内酯和约20％重量羟基磷灰石。
35.权利要求23-34中任一项的方法，其中所述支架包含直径在约50-约500μm之间的微通道。
36.权利要求23-35中任一项的方法，其中所述支架包含直径为约200μm的微通道。
37.权利要求23-36中任一项的方法，其中所述化合物在微通道中嵌入胶原蛋白凝胶中。
38.权利要求37的方法，其中所述化合物为浓度为约100ng/ml凝胶的SDF1，并且所述凝胶进一步包含浓度为约100hg/ml凝胶的BMP-7。
39.权利要求23-38中任一项的方法，其中所述支架包含无孔牙冠。
40.一种制备牙齿支架的方法，所述方法包括合成哺乳动物牙齿形状的无细胞支架并加入至少一种趋化性、成骨性、成牙质性、成釉质性或成牙骨质性化合物。
41.权利要求40的方法，其中所述牙齿的形状像哺乳动物缺失的牙齿，并且所述方法进一步包括通过计算机辅助设计(CAD)制备缺失牙齿的模型，以及使用bioplotter合成所述支架。
42.权利要求41的方法，其中缺失的牙齿为来自人嘴的第一臼齿，并且对与第一臼齿类似但是在嘴的另一侧的第二臼齿进行CT扫描，CAD利用第二臼齿的CT扫描数据来设计所述支架。
43.权利要求40-42中任一项的方法，其中所述化合物为血小板-衍生的生长因子(PDGF)、内皮细胞生长因子(ECGF)、转换生长因子-β1(TGF-β1)、表皮生长因子(EGF)、肝细胞生长因子(HGF)、基质细胞-衍生的因子-1(SDF1)、骨形态发生蛋白(BMP)、TGF-β、生长和分化因子(GDF)、胰岛素样生长因子-1(IGF1)、血管内皮生长因子(VEGF)、成纤维细胞生长因子(FGF)、牙质基质蛋白、牙质涎腺蛋白、骨涎腺蛋白、牙釉蛋白或整联蛋白。
44.权利要求43的方法，其中所述化合物为SDF1。
45.权利要求43的方法，其中所述化合物为BMP。
46.权利要求45的支架，其中所述BMP为BMP-7。
47.权利要求40-46中任一项的方法，其中所述支架由包含骨传导材料的组合物制造。
48.权利要求47的方法，其中所述骨传导材料为羟基磷灰石。
49.权利要求47的方法，其中所述组合物为ε-聚己内酯和羟基磷灰石的混合物。
50.权利要求40-49中任一项的方法，其中所述支架包含直径在50-500μm之间的微通道。
51.权利要求40-50中任一项的方法，其中所述支架进一步包含无孔牙冠。
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Family

ID=

Cited By (11)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN103315916A (zh) * 2013-06-20 2013-09-25 北京大学 一种牙科修复材料及其制备方法
CN104548212A (zh) * 2014-12-31 2015-04-29 武汉人之源干细胞技术有限公司 一种促进牙髓及牙本质再生的组合物
CN105213038A (zh) * 2014-06-11 2016-01-06 三鼎生物科技股份有限公司 层积式列印装置
CN105228557A (zh) * 2013-03-21 2016-01-06 纽约市哥伦比亚大学理事会 用于牙组织再生的组合物和方法
CN105377181A (zh) * 2013-05-27 2016-03-02 维他牙科产品有限公司 用于制造牙科修复体的修复体预制件
CN105877858A (zh) * 2014-12-29 2016-08-24 章锐 免手术无毒无痛自助式美容义齿
CN107115561A (zh) * 2017-06-19 2017-09-01 中山大学附属口腔医院 一种3d打印支架材料及其制备方法和应用
CN110234364A (zh) * 2017-03-01 2019-09-13 帕利·纳齐尔 纳米多孔生物人工骨组织复合物的制备方法
CN112299856A (zh) * 2020-11-16 2021-02-02 中国工程物理研究院材料研究所 一种基于3D打印成型的AlON陶瓷粉体制备方法
WO2021035842A1 (zh) * 2019-08-26 2021-03-04 四川大学 一种生物活性支架及其制备方法
CN114225114A (zh) * 2021-12-22 2022-03-25 西南大学 一种高强柔韧耐磨仿生复合关节材料及其制备方法

Citations (7)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US20050070782A1 (en) * 2003-07-17 2005-03-31 Dmitri Brodkin Digital technologies for planning and carrying out dental restorative procedures
US20050079470A1 (en) * 2003-10-10 2005-04-14 Bruce Rutherford Methods for treating dental conditions using tissue scaffolds
CN1658914A (zh) * 2002-04-09 2005-08-24 艾斯特勒科技公司 具有改良生物相容性的医用假体装置
US20060024249A1 (en) * 2004-07-16 2006-02-02 Yelick Pamela C Methods and compositions for bioengineering a tooth
US20070202145A1 (en) * 2003-12-31 2007-08-30 Ragae Ghabrial Method for incorporation of bioactives into a porous hydrophobic polymer scaffold
WO2008013900A2 (en) * 2006-07-26 2008-01-31 The Regents Of The University Of California Osteogenic enhancer composition
CN101264341A (zh) * 2008-04-11 2008-09-17 东华大学 三维多孔组织工程支架材料、其制备及应用

Patent Citations (7)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN1658914A (zh) * 2002-04-09 2005-08-24 艾斯特勒科技公司 具有改良生物相容性的医用假体装置
US20050070782A1 (en) * 2003-07-17 2005-03-31 Dmitri Brodkin Digital technologies for planning and carrying out dental restorative procedures
US20050079470A1 (en) * 2003-10-10 2005-04-14 Bruce Rutherford Methods for treating dental conditions using tissue scaffolds
US20070202145A1 (en) * 2003-12-31 2007-08-30 Ragae Ghabrial Method for incorporation of bioactives into a porous hydrophobic polymer scaffold
US20060024249A1 (en) * 2004-07-16 2006-02-02 Yelick Pamela C Methods and compositions for bioengineering a tooth
WO2008013900A2 (en) * 2006-07-26 2008-01-31 The Regents Of The University Of California Osteogenic enhancer composition
CN101264341A (zh) * 2008-04-11 2008-09-17 东华大学 三维多孔组织工程支架材料、其制备及应用

Cited By (14)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN105228557A (zh) * 2013-03-21 2016-01-06 纽约市哥伦比亚大学理事会 用于牙组织再生的组合物和方法
CN105377181A (zh) * 2013-05-27 2016-03-02 维他牙科产品有限公司 用于制造牙科修复体的修复体预制件
CN103315916B (zh) * 2013-06-20 2014-12-17 北京大学 一种牙科修复材料及其制备方法
CN103315916A (zh) * 2013-06-20 2013-09-25 北京大学 一种牙科修复材料及其制备方法
CN105213038A (zh) * 2014-06-11 2016-01-06 三鼎生物科技股份有限公司 层积式列印装置
CN105877858A (zh) * 2014-12-29 2016-08-24 章锐 免手术无毒无痛自助式美容义齿
CN104548212A (zh) * 2014-12-31 2015-04-29 武汉人之源干细胞技术有限公司 一种促进牙髓及牙本质再生的组合物
CN110234364A (zh) * 2017-03-01 2019-09-13 帕利·纳齐尔 纳米多孔生物人工骨组织复合物的制备方法
CN107115561A (zh) * 2017-06-19 2017-09-01 中山大学附属口腔医院 一种3d打印支架材料及其制备方法和应用
CN107115561B (zh) * 2017-06-19 2019-11-26 中山大学附属口腔医院 一种3d打印支架材料及其制备方法和应用
WO2021035842A1 (zh) * 2019-08-26 2021-03-04 四川大学 一种生物活性支架及其制备方法
CN112299856A (zh) * 2020-11-16 2021-02-02 中国工程物理研究院材料研究所 一种基于3D打印成型的AlON陶瓷粉体制备方法
CN112299856B (zh) * 2020-11-16 2022-04-22 中国工程物理研究院材料研究所 一种基于3D打印成型的AlON陶瓷粉体制备方法
CN114225114A (zh) * 2021-12-22 2022-03-25 西南大学 一种高强柔韧耐磨仿生复合关节材料及其制备方法

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