CN102608251B - 一种跌打榜药酒的检测方法 - Google Patents
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Abstract
本发明涉及跌打榜药酒的质量控制方法，该质量控制方法是：采用薄层色谱法，鉴别跌打榜药酒处方中是否含有大黄、虎杖、姜黄、功劳木、桅子等成分；本方法将跌打榜药酒标准进行了提高、完善，原标准中只有大黄的鉴别，在原标准基础上增加了虎杖、姜黄、功劳木、桅子的薄层鉴别方法，并对大黄的薄层色谱方法重新进行了设计，更改了展开剂，使质量标准更为完善，修订后的质量标准提高了药品的质量控制。
Description
技术领域
本发明涉及药酒的质量控制方法，具体涉及一种跌打榜药酒的质量控制方法，属于中药技术领域。
背景技术
跌打榜药酒由三七，无名异，土鳖虫，鸡骨香，泽兰，薄荷，木鳖子，荜澄茄，栀子等五十四味药物组成，制备方法：以上五十四味，除樟脑外，其余三七等五十三味粉碎成粗粉，照流浸膏剂与浸膏剂项下的渗漉法（附录ⅠＯ），用75％乙醇12.5kg作溶剂，浸渍48小时后，以每分钟1～3ml的速度缓缓渗漉，收集渗漉液,在漉液中加入樟脑，搅拌使溶解后，静置，滤过，即得。
跌打榜药酒为卫生部药品标准中药成方制剂第十四册，书页号：z14-172标准编号：WS3-B-2796-97。标准中只对大黄素进行了薄层色谱鉴别，对于一个由五十四味药材组成的的跌打榜药酒，仅以一味药材的定性鉴别作为其质量控制方法，局限性太大，专属性不强，不能全面反映产品质量的均一性和稳定性，难以控制跌打榜药酒的质量。为了提高中药的产品质量，就要完善产品质量标准。
发明内容
本发明的目的是提供跌打榜药酒的质量控制方法，本方法具有检测手段简单，检测结果准确的特点。
为了解决上述问题，本发明所采用的技术方案是：
跌打榜药酒的的质量控制方法，其中所述的药物配方由三七22g、无名异44g、土鳖虫22g、鸡骨香88g、泽兰44g、薄荷88g、木鳖子44g、荜澄茄44g、栀子44g、独角莲22g、三棱44g、草乌44g、洋金花44g、南刘寄奴44g、芥子44g、莪术44g、红花44g、姜黄44g、甘草44g、假蒟44g、山柰44g、徐长卿44g、重楼44g、油松节44g、大黄44g、朱砂根44g、虎杖44g、九里香44g、驳骨丹44g、大茶药44g、小罗伞44g、鹰不泊44g、两面针44g、肉桂44g、田基黄44g、乌药44g、韩信草44g、骨碎补44g、生天南星44g、火炭母44g、赤芍44g、苏木88g、桃仁44g、当归44g、鹅不食草44g、功劳木44g、膜叶槌果藤44g、樟脑132g、蛤爪草44g、生姜44g、黑老虎根44g、自然铜44g高良姜44g和麝香壳11g组成，制法是将除樟脑外地其他五十三味药物粉碎成粗粉，照流浸膏剂与浸膏剂项下的渗漉法，用75%乙醇12.5kf作溶剂，浸渍48小时后，以每分钟1~3ml的速度缓缓渗漉，收集渗漉液，在漉液中加入樟脑，搅拌使溶解后，静置，过滤，即得，该药物的质量控制方法包括如下步骤：
（1）采用薄层色谱分析法，鉴别跌打榜药酒中是否含有大黄，虎杖成分；
（2）采用薄层色谱分析法，鉴别跌打榜药酒中是否含有姜黄成分；
（3）采用薄层色谱分析法，鉴别跌打榜药酒中是否含有功劳木成分；
（4）采用薄层色谱分析法，鉴别跌打榜药酒中是否含有栀子成分；
所述的大黄，虎杖的薄层色谱鉴别方法如下：
（1）供试品溶液的制备：取供试治疗跌打损伤的药酒样品，蒸干，残渣加甲醇5ml使溶解，滤过，滤液作为供试品溶液；
（2）对照药材溶液的制备：取大黄、虎杖对照药材，分别加甲醇，超声处理，滤过，滤液作为对照药材溶液；
（3）对照品溶液的制备：取大黄素对照品加甲醇制成每1ml含1mg的溶液，作为对照品溶液；
（4）薄层制备：薄层色谱法试验，吸取供试品溶液5μl，对照药材溶液与对照品溶液各2μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以甲苯-乙酸乙酯-甲酸=9:1:0.5为展开剂，展开，取出，晾干，置氨蒸气中熏至斑点清晰。
所述的姜黄的薄层色谱鉴别方法如下：
（1）对照品溶液的制备：取姜黄素对照品加甲醇制成每1ml含0.2mg的溶液，作为对照品溶液；
（2）薄层制备：照薄层色谱法试验，吸取步骤（1）项下的供试品溶液5μl，对照品溶液2μl，分别点于同一以羧甲基纤维钠为黏合剂的硅胶G薄层板上，以甲苯-乙酸乙酯-甲酸=5:2:0.5为展开剂，展开，取出，晾干，在日光下检视，再在紫外光灯365nm下检视。
所述的功劳木的薄层色谱鉴别方法如下：
（1）供试品溶液的制备：取供试跌打榜药酒样品，蒸至近干，残渣加稀盐酸使溶解，滤过，滤液置分液漏斗中，用浓氨溶液调节pH值，用二氯甲烷提取2次，每次20ml，合并二氯甲烷溶液，蒸干，残渣加甲醇1ml使溶解，作为供试品溶液；
（2）对照药材溶液的制备：取功劳木对照药材，加甲醇，振摇，静置，取上清液作为对照药材溶液；
（3）薄层制备：照薄层色谱法试验，吸取供试品溶液、对照药材溶液各5μl。分别点于同一硅胶G薄层板上，以水饱和正丁醇-冰醋酸=7: 1为展开剂，展开， 取出，晾干，置紫外光灯365nm下检视。
所述的桅子的薄层色谱鉴别方法如下
（1）供试品溶液的制备：取供试跌打榜药酒样品，加活性炭，搅拌，水浴加热，滤过，滤液蒸干，残渣加乙醇使溶解，滤过，滤液置己处理好的中性氧化铝柱（10g ，1×25cm）上，以乙醇洗脱至无色，洗脱液蒸干，残渣加甲醇1ml使溶解，作为供试品溶液；
（2）对照药材溶液的制备：取栀子对照药材，加甲醇，超声处理，滤过，滤液作为对照药材溶液；
（3）对照品溶液的制备：取栀子苷对照品加甲醇制成每1ml含0.2mg的溶液，作为对照品溶液；
（4）薄层制备：照薄层色谱法试验，吸取供试品溶液5μl，对照药材溶液与对照品溶液各2μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以水饱和正丁醇-二氯甲烷-甲醇=4:2:1为展开剂，展开， 取出，晾干，喷以10%硫酸乙醇溶液，105℃加热至斑点清晰。
本发明相对于现有技术的有益效果是：
1、本发明把跌打榜药酒标准进行了提高、完善，原标准中只有大黄的鉴别，在原标准基础上增加了虎杖、姜黄、功劳木、桅子的薄层鉴别方法，并对大黄的薄层色谱方法重新进行了设计，更改了展开剂，修订后的质量标准，提高了药品的质量控制；
2、原标准中只有大黄的薄层鉴别，且展开剂成分复杂，重现性较差，不能很好的控制产品质量。本发明在原标准基础上对处方中的大黄、虎杖、姜黄、功劳木、桅子均进行了薄层签别试验，筛选出重现性好，专属性强，斑点显色清晰，结果易判断的大黄、虎杖、姜黄、功劳木、桅子方法纳入标准中，使本产品的鉴别更加准确。
附图说明
图1为本发明大黄，虎杖薄层色谱鉴别色谱图，从左至右依次是：1. 跌打榜药酒（06071201）、2. 跌打榜药酒（06071202）、3. 跌打榜药酒（06071203） 4.大黄对照药材、5.虎杖对照药材、6. 大黄素对照品、7. 缺大黄阴性对照、8. 缺虎杖阴性对照、9. 缺大黄、虎杖阴性对照（双阴性）；
图2为本发明姜黄薄层色谱鉴别色谱图，从左至右依次是：1. 跌打榜药酒（06071201）、2. 跌打榜药酒（06071202）、3. 跌打榜药酒（06071203）、4. 姜黄素对照品、5. 缺姜黄阴性对照；
图3为本发明功劳木薄层色谱鉴别色谱图，从左至右依次是：1. 跌打榜药酒（06071201）、2. 跌打榜药酒（06071202）、3. 跌打榜药酒（06071203）、4.功劳木对照药材、5. 缺功劳木阴性对照；
图4为本发明桅子薄层色谱鉴别色谱图，从左至右依次是：1. 跌打榜药酒（06071201）、2. 跌打榜药酒（06071202）、3. 跌打榜药酒（06071203）、4. 栀子对照药材、5. 栀子苷对照品、6. 缺栀子阴性对照。
具体实施方式
下面通过实施例对本发明做进一步详细说明，这些实施例仅用来说明本发明，并不限制本发明的范围。
跌打榜药酒的质量控制方法，其方法的步骤是：
（1）鉴别跌打榜药酒中含有大黄、虎杖：
取本品100ml，蒸干，残渣加甲醇5ml使溶解，滤过，滤液作为供试品溶液。另取大黄、虎杖对照药材各0.5g，分别加甲醇5ml，超声处理15分钟，滤过，滤液作为对照药材溶液。再取大黄素对照品加甲醇制成每1ml含1mg的溶液，作为对照品溶液。照薄层色谱法（中国药典2010年版一部附录Ⅵ B）试验，吸取供试品溶液5μl，对照药材溶液与对照品溶液各2μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以甲苯-乙酸乙酯-甲酸（9:1:0.5）为展开剂，展开，取出，晾干，置氨蒸气中熏至斑点清晰。供试品色谱中，在与对照药材、对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点。
取本品80ml，蒸干，残渣加水20ml使溶解，离心，取上清液，加盐酸5ml，置水浴上加热30分钟，立即冷却，用氯仿振摇提取3次，每次15ml，合并氯仿液，蒸干,残渣加氯仿0.5ml使溶解，作为供试品溶液。另取大黄素对照品，加甲醇制成每1ml含1mg的溶液，作为对照品溶液，照薄层色谱法（附录Ⅵ Ｂ）试验，吸取供试品溶液20μl、对照品溶液10μl，分别点于同一以羧甲基纤维素钠粘合剂的硅胶Ｈ薄层板上,以石油醚（30～60℃）-正己烷-醋酸乙酯-甲酸-水（2：6：3：0.2：1）的上层溶液为展开剂，展开，取出，晾干，置紫外光灯（365nm）下检视。供试品色谱中,在与对照品色谱相应的位置上，显相同的橙黄色荧光斑点；置氨气中熏后，日光下检视，斑点变为红色。
（2）鉴别跌打榜药酒中含有姜黄：
另取姜黄素对照品加甲醇制成每1ml含0.2mg的溶液，作为对照品溶液 。照薄层色谱法（中国药典2010年版一部附录Ⅵ B）试验，吸取鉴别（1）项下的供试品溶液5μl，对照品溶液2μl，分别点于同一以羧甲基纤维钠为黏合剂的硅胶G薄层板上，以甲苯-乙酸乙酯-甲酸（5:2:0.5）为展开剂，展开，取出，晾干，在日光下检视，再在紫外光灯（365nm）下检视，供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点。
（3）鉴别跌打榜药酒中含有功劳木：
取本品80ml，蒸至近干，残渣加稀盐酸30ml使溶解，滤过，滤液置分液漏斗中，用浓氨溶液调节pH9~10，用二氯甲烷提取2次，每次20ml，合并二氯甲烷溶液，蒸干，残渣加甲醇1ml使溶解，作为供试品溶液 。另取功劳木对照药材0.2g，加甲醇2ml，振摇，静置，取上清液作为对照药材溶液。照薄层色谱法（中国药典2010年版一部附录Ⅵ B）试验，吸取供试品溶液、对照药材溶液各5μl。分别点于同一硅胶G薄层板上，以正丁醇（水饱和）-冰醋酸（7: 1）为展开剂，展开， 取出，晾干，置紫外光灯（365nm）下检视。供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的荧光斑点。
（4）鉴别跌打榜药酒中含有栀子：
取本品60ml，加活性炭1g，搅拌，水浴加热5分钟，滤过，滤液蒸干，残渣加 乙醇5ml使溶解，滤过，滤液置己处理好的中性氧化铝柱（10g ，1×25cm）上，以乙醇洗脱至无色，洗脱液蒸干，残渣加甲醇1ml使溶解，作为供试品溶液。另取栀子对照药材0.5g，加甲醇5ml，超声处理10分钟，滤过，滤液作为对照药材溶液。再取栀子苷对照品加甲醇制成每1ml含0.2mg的溶液，作为对照品溶液。照薄层色谱法（中国药典2010年版一部附录Ⅵ B）试验，吸取供试品溶液5μl，对照药材溶液与对照品溶液各2μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以正丁醇（水饱和）-二氯甲烷-甲醇（4:2:1）为展开剂，展开， 取出，晾干，喷以10%硫酸乙醇溶液，105℃加热至斑点清晰。供试品色谱中，在与对照药材、对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的主斑点。
Claims (1)
1. 一种跌打榜药酒的检测方法，其特征在于：所述的药物配方由三七22g、无名异44g、土鳖虫22g、鸡骨香88g、泽兰44g、薄荷88g、鳖子44g、荜澄茄44g、栀子44g、独角莲22g、三棱44g、草乌44g、洋金花44g、南刘寄奴44g、芥子44g、莪术44g、红花44g、姜黄44g、甘草44g、假蒟44g、山柰44g、徐长卿44g、重楼44g、油松节44g、大黄44g、朱砂根44g、虎杖44g、九里香44g、驳骨丹44g、大茶药44g、小罗伞44g、鹰不泊44g、两面针44g、肉桂44g、田基黄44g、乌药44g、韩信草44g、骨碎补44g、生天南星44g、火炭母44g、赤芍44g、苏木88g、桃仁44g、当归44g、鹅不食草44g、功劳木44g、膜叶槌果藤44g、樟脑132g、蛤爪草44g、生姜44g、黑老虎根44g、自然铜44g高良姜44g和麝香壳11g组成；该药物的检测方法包括如下步骤：
（1）采用薄层色谱分析法，鉴别跌打榜药酒中是否含有大黄，虎杖成分；
（2）采用薄层色谱分析法，鉴别跌打榜药酒中是否含有姜黄成分；
（3）采用薄层色谱分析法，鉴别跌打榜药酒中是否含有功劳木成分；
（4）采用薄层色谱分析法，取本品60ml，加活性炭1g，搅拌，水浴加热5分钟，滤过，滤液蒸干，残渣加乙醇5ml使溶解，滤过，滤液置己处理好的中性氧化铝柱10g，1×25cm上，以乙醇洗脱至无色，洗脱液蒸干，残渣加甲醇lml使溶解，作为供试品溶液，另取栀子对照药材0.5g，加甲醇5ml，超声处理10分钟，滤过，滤液作为对照药材溶液，再取栀子苷对照品加甲醇制成每lml含0.2mg的溶液，作为对照品溶液，照薄层色谱法中国药典2010年版一部附录Ⅵ B试验,吸取供试品溶液5μl，对照药材溶液与对照品溶液各2μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以正丁醇水饱和-二氯甲烷一甲醇4∶2∶1为展开剂，展开，取出，晾干，喷以l0％硫酸乙醇溶液，l05℃加热至斑点清晰，供试品色谱中，在与对照药材、对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的主斑点；
所述的大黄，虎杖的薄层色谱鉴别方法如下：
（1）供试品溶液的制备：取供试治疗跌打损伤的药酒样品，蒸干，残渣加甲醇5ml使溶解，滤过，滤液作为供试品溶液；
（2）对照药材溶液的制备：取大黄、虎杖对照药材，分别加甲醇，超声处理，滤过，滤液作为对照药材溶液；
（3）对照品溶液的制备：取大黄素对照品加甲醇制成每1ml含1mg的溶液，作为对照品溶液；
（4）薄层制备：薄层色谱法试验，吸取供试品溶液5μl，对照药材溶液与对照品溶液各2μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以甲苯-乙酸乙酯-甲酸9∶1∶05为展开剂，展开，取出，晾干，置氨蒸气中熏至斑点清晰；
所述的姜黄的薄层色谱鉴别方法如下：
（1）对照品溶液的制备：取姜黄素对照品加甲醇制成每1ml含0.2mg的溶液，作为对照品溶液；
（2）薄层制备：照薄层色谱法试验，吸取步骤（1）项下的供试品溶液5μl，对照品溶液2μl，分别点于同一以羧甲基纤维钠为黏合剂的硅胶G薄层板上，以甲苯-乙酸乙酯-甲酸5∶2∶0.5为展开剂，展开，取出，晾干，在日光下检视，再在紫外光灯365nm下检视；
所述的功劳木的薄层色谱鉴别方法如下：
（1）供试品溶液的制备：取供试跌打榜药酒样品，蒸至近干，残渣加稀盐酸使溶解，滤过，滤液置分液漏斗中，用浓氨溶液调节pH值，用二氯甲烷提取2次，每次20ml，合并二氯甲烷溶液，蒸干，残渣加甲醇1ml使溶解，作为供试品溶液；
（2）对照药材溶液的制备：取功劳木对照药材，加甲醇，振摇，静置，取上清液作为对照药材溶液；
（3）薄层制备：照薄层色谱法试验，吸取供试品溶液、对照药材溶液各5μl；
分别点于同一硅胶G薄层板上，以水饱和正丁醇-冰醋酸7∶1为展开剂，展开， 取出，晾干，置紫外光灯365nm下检视。
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