CN102564832B - 尿液细胞分离芯片及试剂 - Google Patents

Abstract

本发明公布了一种适合分离和分析尿液细胞等有形成分的芯片和配套试剂。该芯片包括配套试剂为一种化学混合溶液含有蔗糖浓度为5％-50％，缓冲pH值为7.4；芯片部分包括芯片底板、芯片内部的储存尿液和尿液细胞等有形成分分离芯片结构和有形成分分离缓冲液芯片，外部链接尿液有形成分收集器。主权项目1.所述测定尿液细胞等有形成分芯片，其特征在于芯片配套分离试剂技巧储存芯片在尿液储存芯片的外部，芯片框架与芯片底盖和上盖之间紧密结合。2.根据权利要求(1)所述的尿液细胞等有形成分分离芯片，其特征在于所述的尿液储存芯片和分离液芯片均为圆形结构，芯片框架上均有四个缺口，在尿液储存芯片框架和有形成分分离液芯片框架外围均有紧密包裹的橡胶隔离层，同样含有四个缺口，转动隔离橡胶层使缺口重合，尿液细胞等有形成分能够通过缺口。

Description

尿液细胞分离芯片及试剂

技术领域

本发明涉及测定尿细胞及有形成分分离的一种芯片和相关配套试剂。更具体的体现在，本发明设计了一种尿液细胞、尿液管型以及尿液盐类结晶等有形成分分离芯片，并配有一种分离试剂，能够将尿液中细胞、管型等有机有形成分与盐类结晶等进行分离，应用于尿液分析仪器中尿液细胞、管型等有形成分的分类和数量测定的装置。

背景技术

尿液中红细胞、白细胞、上皮细胞、管型等与尿液盐类结晶均具有一定形态，均属于尿液中的有形成分。关于尿液中的红细胞、白细胞、大圆上皮细胞、鳞状上皮细胞、透明管型、细胞管型以及盐类结晶的分类和数量测定，对于泌尿系疾病的诊断和治疗效果观察具有重要临床价值。因此，尿液分析仪器公司一直致力于尿液有形成分的分析技术的研发。目前关于尿液中有形成分的分析仪器，主要依靠尿液有形成分高速摄像技术或尿液流式细胞分离技术两种测定装置，对于尿液中尿液细胞等有形成分进行分类和数量测定。基于摄影技术的尿液分析仪，对于鉴别尿液细胞等有形成分准确率较高，但是对于尿液中有形成分的数量测定准确率低。而基于流式细胞分离技术的尿液分析仪，对于尿液中有形成分的数量测定准确率高，但是对于尿液细胞等有形成分的鉴别能力低，容易造成尿液红细胞与盐类结晶等错误辨认，造成结果准确率低和重复性差。本发明技术弥补了上述两种分析方法的不足，能够准确鉴别尿液细胞等有形成分和对尿液细胞进行定量分析。

1983年，美国国际遥控影像系统有限公司(internationalremoteimagingsystemsCo，Ltd)研制了世界上第一台“YollowIRIS”高速摄影式的尿液分析仪。这种仪器是将尿液中细胞、管型等有形成分展示在计算机荧屏上，由掌握尿液有形成分形态学特点的专家进行鉴别和分类。1990年，美国国际遥控影像系统有限公司与日本东亚医疗电子有限公司联合生产了，影像流式细胞技术UA-100型尿液分析仪，用于尿液中细胞、管型等有形成分的分类和定量测定。虽然该仪器对原来的尿液分析仪进行了改革，但尿液细胞等有形成分的分类处理能力低，重复性差，尿液管型分辨不清。

发明内容

本发明解决的技术问题是克服了尿液流式细胞芯片技术对于尿液管型、尿液细胞辨别能力低、重复性差和高速摄影技术对于尿液细胞等有形成分定量测定能力低的缺点。提供了一种首先将尿液中细胞、尿液管型和尿液盐类结晶等有形成分进行分离和分类，然后分别对于尿液中有形成分进行定量分析的芯片技术。

本发明提出解决上述技术问题采用的技术方案是：本发明对于尿液中细胞、管型和盐类结晶等有形成分进行分离的芯片，首先将尿液存放于芯片的中心部位(图1)。芯片中心部位(1)结构为体积100-500ul的圆形槽状结构，其槽的壁(2)上有四个缺口(14、16、18和20)，在外壁上配有紧密包裹的带有四个缺口(13、15、17和19)的橡皮圈，转动橡皮圈使橡皮圈上的缺口与芯片中心部位缺口重合时，借助离心力能够从中心部位进入其外围的高比重分离缓冲液(4)。储存外围高比重分离缓冲液的芯片(4)同样为圆形槽状结构，包围于中心芯片(1)的外围，其外壁同样有四个缺口(21、23、25和27)，尿液中有形成分能够通过缺口进入四个有形成分收集器。该配套高比重分离缓冲液的化学成分为5％-50％蔗糖/磷酸缓冲液，pH7.4。将分离芯片存放于一个马达上，加给芯片50-2000rpm/min转速的旋转，尿液中细胞、管型和盐类结晶等有形成分，借助离心力从中心芯片向外层芯片进行分离，有形成分分别收集到(9、10、11和12)四个收集器内。然后根据加入尿液的量计算尿液中有形成分的数量和分类的种类。

有形成分收集器为最层三角形或圆形收集器，分别是：9、10、11、12四个。根据尿液有形成分的大小、比重分离有形成分分别进入9、10、11和12等四个收集器，使尿液中细胞等有形成分进行初步分离。

芯片部分包括芯片框架和芯片底板。芯片框架为塑料材料制成框架结构，芯片底板为玻璃、有机塑料、石英玻片。在底板上附框架，框架(2、5、7)高度为2mm，芯片壁上合包裹于芯片壁上的橡皮圈的缺口，高度与芯片框架高度相同，去口长度为6-10mm。在框架和底片之间利用粘合剂将一层尼龙薄膜粘合在上述两框架之间或利用微刻融技术制备微芯片。

本法将尿液中细胞、管型和盐类结晶等有形成分初步划分成四个类型，每种类型根据尿液有形成分的形态学特点，再进行划分类型。根据收集的每种有形成分进行形态学成分的数量测定。

附图说明

本说明书包括四幅附图

图1为本发明所述尿液细胞分离芯片的平面图，其中芯片内部结构与上面相接处的一面朝向观察者，去掉了底盖和上盖部分，使这些内部结构暴露出来。

图2为本发明所述(图1)芯片中尿液储存芯片结构平面图，夹在底盖和上盖之间的内部结构图。

图3为包裹在尿液储存芯片周围的分离液芯片结构平面图，夹在底片和上盖之间。

图4为抱在分离液外层和尿液有形成分收集器的平面结构图。

具体实施方式

下面以具体实施例进一步解释发明，但不限制本发明范围。

参阅图1为本发明实施例提供的一种尿液有形成分的示意图。所述芯片为尿液细胞等有形成分分离和收集的芯片。

所述芯片(1)为分离芯片中心，其实是有框架组成的槽状结构，储存尿液。但框架上存在缺口，能够通过细胞等有形成分。

所述芯片(4)为芯片中心外的结构，隔离高比重分离缓冲液，在离心力作用下尿液细胞等有形成分能够通过外围的高比重分离缓冲液，进入有形成分分离槽。

所述芯片中心区(1)和高比重分离缓冲液区域(4)的微制备方法由现有技术可以实现。

实例

2005年8月3日授予李文生等的名称为《一种制备细胞芯片的方法及其装置》公告号：CN1661039。详细披露一种细胞芯片的制备方法及其实现该方法的装置。体现在通过阵列管与内芯之间形成的空腔结构，将细胞样本通过琼脂糖包埋于空腔内，细胞琼脂糖包埋块在外套与底层固定板之间形成的带微孔结构的扩大的空腔内进行脱水、透明、浸蜡等处理，而后利用阵列管装置在形成石蜡空心小孔的同时，轻推柱芯使细胞琼脂包埋块落入阵列小孔内，制成了细胞芯片石蜡包埋块，再经过切片、染色即可完成细胞芯片的制备。

2008年9月24日一授权于王站会的名称为《一种微流控细胞芯片》公告号为：CN101270333。详细披露了一种具有若干个细胞培养单元，每个细胞培养单元具有一个细胞培养区、一个细胞微流道和一个药物微流道。在细胞培养区具有一个入口和一个出口，细胞微流道与细胞培养区的入口相连通以输送细胞培养液至所述细胞培养区，药物微流道与所述细胞培养区的入口相连通以输送药物溶液至细胞培养区，使得细胞培养液输送方向和药物溶液输送方向相同，避免药物溶液带走细胞培养区内的细胞。

Claims (2)

1.一种尿液细胞分离芯片，其包括有尿液储存芯片和分离试剂芯片；尿液储存芯片外围设置有配套试剂，所述配套试剂为浓度5％-50％的蔗糖溶液，PH为7.4；所述尿液储存芯片和分离试剂芯片均具有芯片框架和芯片底板，所述的尿液储存芯片和分离试剂芯片的芯片框架为圆形结构，在芯片框架的外层均紧密包裹有橡胶隔离层，并且芯片框架和橡胶隔离层上均设有四个缺口；转动尿液储存芯片外层包裹的橡胶隔离层，使尿液储存芯片的芯片框架和橡胶隔离层上的缺口重合，从而让尿液中有形成分，从尿液储存芯片进入其外围的配套试剂中，并且有形成分在通过配套试剂外围的分离试剂芯片的芯片框架和橡胶隔离层上的缺口进入到收集器内。

2.根据权利要求1所述的尿液细胞分离芯片，其特征在于，尿液储存芯片和分离试剂芯片的芯片框架设置在芯片底盖和上盖之间。