CN102559841B - 一种奴卡氏菌培养基 - Google Patents
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Abstract
本发明公开了一种奴卡氏菌培养基。其特征在于，配制1000ml培养基的配方中含有：可溶性淀粉2~4g；牛肝粉10~20g；苯唑青霉素0.005~0.02g；多枯菌素3~5万单位；蒜硫胺素0.1~0.4g；肌醇0.01~0.2g；硫酸镁0.8~1.1g；琼脂15~20g；蒸馏水加至1000ml。本发明与现有技术相比较，具有检出可靠、奴卡氏菌分离率高的特点。
Description
技术领域
本发明涉及检验微生物培养领域，具体涉及一种适用于奴卡氏菌的培养基。
背景技术
奴卡氏菌属已有的种近30个，与医学有关的种也近10个，属于放线菌属，为需氧菌，存在于土壤，可引起人的奴卡菌病。带菌的灰尘、土壤或食物通过呼吸道、皮肤创口或消化道进入人体，然后局限于某一器官或组织，或经血循环散播至脑、肾或其他器官。由于该菌不很常见，而且生长较慢，使用传统方法需要几周方能较准确地做出鉴定，因而临床上又很容易误诊。常用一般抗生素进行治疗，结果延误时间，造成多处病灶转移，如转移至脑部极易造成死亡。故临床细菌检查的正确与快速鉴定极为重要。目前临床培养多使用血琼脂平板，在37℃需氧培养下多数于3~7d才能生长为肉眼可见的针尖大的菌落，做生化反应进行鉴定则需培养4~6周。而且如果是痰标本，则很有可能会被痰标本中的正常菌群所掩盖而产生误诊。
发明内容
本发明的技术任务是针对以上现有技术的不足，提供一种加速奴卡氏菌生长且分离率高的培养基。
本发明解决其技术问题的技术方案是：一种奴卡氏菌培养基，其特征在，配制1000ml培养基的配方中含有：
可溶性淀粉2~4g；
牛肝粉10~20g；
苯唑青霉素0.005~0.02g；
多枯菌素3~5万单位；
蒜硫胺素0.1~0.4g；
肌醇0.01~0.2g；
硫酸镁0.8~1.1g；
琼脂15~20g；
蒸馏水加至1000ml。
优化方案中，每1000ml培养基还含有胸腺嘧啶核苷0.05~0.5g。
优化方案中，每1000ml培养基还含有丙酮酸钙0.01~0.1g。
优化方案中，每1000ml培养基还含有柠檬酸锌0.01~0.1g。
优化方案中，上述的可溶性淀粉为薯蓣淀粉。
其中所述的可溶性淀粉、牛肝粉提供碳氮源和能量；苯唑青霉素、多枯菌素抑制杂菌生长，提高了奴卡氏菌的分离率；肌醇为营养增强剂，蒜硫胺素为激活剂，可以促进肌醇摄取；硫酸镁为缓冲剂，且可以破坏标本中残留的抗真菌菌素；琼脂是培养基的凝固剂；胸腺嘧啶核苷为营养增强剂，丙酮酸钙和柠檬酸锌除有营养增强作用外，还可以抑制革兰氏阳性菌生长。
本发明与现有技术相比较，具有检出可靠、奴卡氏菌分离率高的特点。
具体实施方式
以下结合实际情况，对本发明的具体实施方式作详细说明。
实施例1，配制1000ml培养基的配方中含有：玉米淀粉2g；牛肝粉20g；硫酸镁0.8g；琼脂15g；苯唑青霉素0.02g；多枯菌素5万单位；蒜硫胺素0.1g，肌醇0.2g；蒸馏水加至1000ml。
实施例2，配制1000ml培养基的配方中含有：豌豆淀粉4g；牛肝粉10g；硫酸镁1.1g；琼脂20g；苯唑青霉素0.005g；多枯菌素3万单位；蒜硫胺素0.4g，肌醇0.01g；蒸馏水加至1000ml。
实施例3，配制1000ml培养基的配方中含有：土豆淀粉2g；牛肝粉20g；硫酸镁0.8g；琼脂15g；苯唑青霉素0.02g；多枯菌素5万单位；蒜硫胺素0.1g，肌醇0.2g，胸腺嘧啶核苷0.05g；蒸馏水加至1000ml。
实施例4，配制1000ml培养基的配方中含有：薯蓣淀粉4g；牛肝粉10g；硫酸镁1.1g；琼脂20g；苯唑青霉素0.005g；多枯菌素3万单位；蒜硫胺素0.4g，肌醇0.01g，胸腺嘧啶核苷0.5g；蒸馏水加至1000ml。
实施例5，配制1000ml培养基的配方中含有：土豆淀粉3g；牛肝粉15g；硫酸镁1g；琼脂18g；苯唑青霉素0.01g；多枯菌素4万单位；蒜硫胺素0.2g，肌醇0.1g，胸腺嘧啶核苷0.1g；蒸馏水加至1000ml。
实施例6，配制1000ml培养基的配方中含有：土豆淀粉2g；牛肝粉20g；硫酸镁0.8g；琼脂15g；苯唑青霉素0.02g；多枯菌素5万单位；蒜硫胺素0.1g，肌醇0.01g，胸腺嘧啶核苷0.05g，丙酮酸钙0.1g，柠檬酸锌0.1g；蒸馏水加至1000ml。
实施例7，配制1000ml培养基的配方中含有：薯蓣淀粉4g；牛肝粉10g；硫酸镁1.1g；琼脂20g；苯唑青霉素0.005g；多枯菌素3万单位；蒜硫胺素0.4g，肌醇0.2g，胸腺嘧啶核苷0.5g，丙酮酸钙0.01g，柠檬酸锌0.01g；蒸馏水加至1000ml。
实施例8，配制1000ml培养基的配方中含有：薯蓣淀粉3g；牛肝粉15g；硫酸镁1g；琼脂18g；苯唑青霉素0.01g；多枯菌素4万单位；蒜硫胺素0.3g，肌醇0.1g，胸腺嘧啶核苷0.2g，丙酮酸钙0.05g，柠檬酸锌0.05g；蒸馏水加至1000ml。
实施例1~8培养基的制备方法可以为：取除多枯菌素、苯唑青霉素外的原料溶于蒸馏水中，混匀，蒸馏水定容至1000ml，121℃，15min灭菌后，降温到50~60℃，无菌操作下加入多枯菌素、苯唑青霉素溶解混匀，分装。
本发明所得奴卡氏菌培养基具有奴卡氏菌生长快，分离率高的特点，为临床资料充分证明：20株奴卡氏菌菌株（其中：星形奴卡氏菌8株、巴西氏奴卡氏菌8株及豚鼠奴卡氏菌4株）制成生理盐水菌悬液，以McFarland 0.5标准比浊管调整菌悬液浊度，用盐水连续10倍稀释，分别取0.lrnl接种于实施例8方案培养基、实施例5方案培养基、实施例2方案培养基、血琼脂平板上。36~37℃保温，48小时时各组检出阳性菌株（中央内凹，表面有皱褶，颗粒状橙黄色，菌落表面有白色菌丝生长）例数为：实施例8方案培养基15例、实施例5方案培养基12例、实施例2方案培养基8例、血琼脂平板6例。96小时时各组检出菌例数为：实施例8方案培养基20例、实施例5方案培养基20例、实施例2方案培养基18例、血琼脂平板14例。结果表明，本发明实施例奴卡氏菌分离率明显高目前常用于的血琼脂平板。
Claims (1)
1.一种奴卡氏菌培养基，其特征在于，配制1000ml培养基的配方中含有：
土豆淀粉3g；
牛肝粉15g；
硫酸镁1g；
琼脂18g；
苯唑青霉素0.01g；
多枯菌素4万单位；
蒜硫胺素0.2g；
肌醇0.1g；
胸腺嘧啶核苷0.1g；
蒸馏水加至1000ml。
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