CN102552938A - Egr-1拮抗剂在制备治疗Ⅱ型糖尿病的药物中的用途 - Google Patents
Egr-1拮抗剂在制备治疗Ⅱ型糖尿病的药物中的用途 Download PDFInfo
- Publication number
- CN102552938A CN102552938A CN2012100791028A CN201210079102A CN102552938A CN 102552938 A CN102552938 A CN 102552938A CN 2012100791028 A CN2012100791028 A CN 2012100791028A CN 201210079102 A CN201210079102 A CN 201210079102A CN 102552938 A CN102552938 A CN 102552938A
- Authority
- CN
- China
- Prior art keywords
- egr
- antagonist
- insulin
- cell
- purposes
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Pending
Links
- 101100444898 Mus musculus Egr1 gene Proteins 0.000 title claims abstract description 100
- 239000005557 antagonist Substances 0.000 title claims abstract description 19
- 239000003814 drug Substances 0.000 title claims abstract description 7
- 208000001072 type 2 diabetes mellitus Diseases 0.000 title claims abstract description 7
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 title claims abstract description 6
- NOESYZHRGYRDHS-UHFFFAOYSA-N insulin Chemical compound N1C(=O)C(NC(=O)C(CCC(N)=O)NC(=O)C(CCC(O)=O)NC(=O)C(C(C)C)NC(=O)C(NC(=O)CN)C(C)CC)CSSCC(C(NC(CO)C(=O)NC(CC(C)C)C(=O)NC(CC=2C=CC(O)=CC=2)C(=O)NC(CCC(N)=O)C(=O)NC(CC(C)C)C(=O)NC(CCC(O)=O)C(=O)NC(CC(N)=O)C(=O)NC(CC=2C=CC(O)=CC=2)C(=O)NC(CSSCC(NC(=O)C(C(C)C)NC(=O)C(CC(C)C)NC(=O)C(CC=2C=CC(O)=CC=2)NC(=O)C(CC(C)C)NC(=O)C(C)NC(=O)C(CCC(O)=O)NC(=O)C(C(C)C)NC(=O)C(CC(C)C)NC(=O)C(CC=2NC=NC=2)NC(=O)C(CO)NC(=O)CNC2=O)C(=O)NCC(=O)NC(CCC(O)=O)C(=O)NC(CCCNC(N)=N)C(=O)NCC(=O)NC(CC=3C=CC=CC=3)C(=O)NC(CC=3C=CC=CC=3)C(=O)NC(CC=3C=CC(O)=CC=3)C(=O)NC(C(C)O)C(=O)N3C(CCC3)C(=O)NC(CCCCN)C(=O)NC(C)C(O)=O)C(=O)NC(CC(N)=O)C(O)=O)=O)NC(=O)C(C(C)CC)NC(=O)C(CO)NC(=O)C(C(C)O)NC(=O)C1CSSCC2NC(=O)C(CC(C)C)NC(=O)C(NC(=O)C(CCC(N)=O)NC(=O)C(CC(N)=O)NC(=O)C(NC(=O)C(N)CC=1C=CC=CC=1)C(C)C)CC1=CN=CN1 NOESYZHRGYRDHS-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims abstract description 108
- 102000004877 Insulin Human genes 0.000 claims abstract description 54
- 108090001061 Insulin Proteins 0.000 claims abstract description 54
- 229940125396 insulin Drugs 0.000 claims abstract description 54
- 108020004459 Small interfering RNA Proteins 0.000 claims abstract description 9
- 241000701161 unidentified adenovirus Species 0.000 claims description 7
- 206010022489 Insulin Resistance Diseases 0.000 claims description 5
- HCHKCACWOHOZIP-UHFFFAOYSA-N Zinc Chemical compound [Zn] HCHKCACWOHOZIP-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 5
- 239000011701 zinc Substances 0.000 claims description 5
- 229910052725 zinc Inorganic materials 0.000 claims description 5
- 230000008685 targeting Effects 0.000 claims description 4
- 150000001413 amino acids Chemical class 0.000 claims description 3
- 230000002068 genetic effect Effects 0.000 claims description 3
- 238000013518 transcription Methods 0.000 claims description 3
- 230000035897 transcription Effects 0.000 claims description 3
- 238000013519 translation Methods 0.000 claims description 2
- 230000035945 sensitivity Effects 0.000 abstract description 2
- 210000004027 cell Anatomy 0.000 description 28
- 210000001789 adipocyte Anatomy 0.000 description 21
- 230000014509 gene expression Effects 0.000 description 18
- WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N Glucose Natural products OC[C@H]1OC(O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N 0.000 description 17
- 241000699670 Mus sp. Species 0.000 description 16
- 239000008103 glucose Substances 0.000 description 16
- 239000008280 blood Substances 0.000 description 15
- 210000004369 blood Anatomy 0.000 description 15
- 206010012601 diabetes mellitus Diseases 0.000 description 12
- 201000010099 disease Diseases 0.000 description 10
- 208000037265 diseases, disorders, signs and symptoms Diseases 0.000 description 10
- 238000002474 experimental method Methods 0.000 description 9
- 238000000034 method Methods 0.000 description 8
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 description 8
- 230000004936 stimulating effect Effects 0.000 description 8
- 210000001519 tissue Anatomy 0.000 description 8
- 239000001963 growth medium Substances 0.000 description 6
- 230000001105 regulatory effect Effects 0.000 description 6
- 238000012360 testing method Methods 0.000 description 6
- 108091032973 (ribonucleotides)n+m Proteins 0.000 description 5
- 241000699666 Mus <mouse, genus> Species 0.000 description 5
- 210000000577 adipose tissue Anatomy 0.000 description 5
- 230000007774 longterm Effects 0.000 description 5
- 230000002103 transcriptional effect Effects 0.000 description 5
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 5
- OUYCCCASQSFEME-QMMMGPOBSA-N L-tyrosine Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CC1=CC=C(O)C=C1 OUYCCCASQSFEME-QMMMGPOBSA-N 0.000 description 4
- 230000033228 biological regulation Effects 0.000 description 4
- 230000006870 function Effects 0.000 description 4
- 230000001939 inductive effect Effects 0.000 description 4
- 230000004155 insulin signaling pathway Effects 0.000 description 4
- 230000008569 process Effects 0.000 description 4
- 238000010839 reverse transcription Methods 0.000 description 4
- 230000002441 reversible effect Effects 0.000 description 4
- 230000000638 stimulation Effects 0.000 description 4
- 239000006144 Dulbecco’s modified Eagle's medium Substances 0.000 description 3
- KFZMGEQAYNKOFK-UHFFFAOYSA-N Isopropanol Chemical compound CC(C)O KFZMGEQAYNKOFK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 108091030071 RNAI Proteins 0.000 description 3
- 108060008682 Tumor Necrosis Factor Proteins 0.000 description 3
- 102000000852 Tumor Necrosis Factor-alpha Human genes 0.000 description 3
- 238000004113 cell culture Methods 0.000 description 3
- 230000008021 deposition Effects 0.000 description 3
- 230000000694 effects Effects 0.000 description 3
- 230000009368 gene silencing by RNA Effects 0.000 description 3
- 230000004190 glucose uptake Effects 0.000 description 3
- 238000002347 injection Methods 0.000 description 3
- 239000007924 injection Substances 0.000 description 3
- 239000000463 material Substances 0.000 description 3
- 108020004999 messenger RNA Proteins 0.000 description 3
- 239000013612 plasmid Substances 0.000 description 3
- 230000000630 rising effect Effects 0.000 description 3
- 239000006228 supernatant Substances 0.000 description 3
- 108020004414 DNA Proteins 0.000 description 2
- 108700039691 Genetic Promoter Regions Proteins 0.000 description 2
- 241001465754 Metazoa Species 0.000 description 2
- 208000008589 Obesity Diseases 0.000 description 2
- 108091034117 Oligonucleotide Proteins 0.000 description 2
- 206010060862 Prostate cancer Diseases 0.000 description 2
- FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M Sodium chloride Chemical compound [Na+].[Cl-] FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 2
- 241000700605 Viruses Species 0.000 description 2
- 230000003321 amplification Effects 0.000 description 2
- 239000000074 antisense oligonucleotide Substances 0.000 description 2
- 238000012230 antisense oligonucleotides Methods 0.000 description 2
- 210000000227 basophil cell of anterior lobe of hypophysis Anatomy 0.000 description 2
- 239000002299 complementary DNA Substances 0.000 description 2
- 230000007850 degeneration Effects 0.000 description 2
- 238000013461 design Methods 0.000 description 2
- UREBDLICKHMUKA-CXSFZGCWSA-N dexamethasone Chemical compound C1CC2=CC(=O)C=C[C@]2(C)[C@]2(F)[C@@H]1[C@@H]1C[C@@H](C)[C@@](C(=O)CO)(O)[C@@]1(C)C[C@@H]2O UREBDLICKHMUKA-CXSFZGCWSA-N 0.000 description 2
- 229960003957 dexamethasone Drugs 0.000 description 2
- 239000003596 drug target Substances 0.000 description 2
- 238000004043 dyeing Methods 0.000 description 2
- 238000003119 immunoblot Methods 0.000 description 2
- 230000005764 inhibitory process Effects 0.000 description 2
- 206010025482 malaise Diseases 0.000 description 2
- 208000030159 metabolic disease Diseases 0.000 description 2
- 238000003199 nucleic acid amplification method Methods 0.000 description 2
- 235000020824 obesity Nutrition 0.000 description 2
- YBYRMVIVWMBXKQ-UHFFFAOYSA-N phenylmethanesulfonyl fluoride Chemical compound FS(=O)(=O)CC1=CC=CC=C1 YBYRMVIVWMBXKQ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 230000026731 phosphorylation Effects 0.000 description 2
- 238000006366 phosphorylation reaction Methods 0.000 description 2
- 238000003752 polymerase chain reaction Methods 0.000 description 2
- 102000004169 proteins and genes Human genes 0.000 description 2
- 238000003753 real-time PCR Methods 0.000 description 2
- UCSJYZPVAKXKNQ-HZYVHMACSA-N streptomycin Chemical compound CN[C@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](CO)O[C@H]1O[C@@H]1[C@](C=O)(O)[C@H](C)O[C@H]1O[C@@H]1[C@@H](NC(N)=N)[C@H](O)[C@@H](NC(N)=N)[C@H](O)[C@H]1O UCSJYZPVAKXKNQ-HZYVHMACSA-N 0.000 description 2
- OUYCCCASQSFEME-UHFFFAOYSA-N tyrosine Natural products OC(=O)C(N)CC1=CC=C(O)C=C1 OUYCCCASQSFEME-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 210000003462 vein Anatomy 0.000 description 2
- 102000040650 (ribonucleotides)n+m Human genes 0.000 description 1
- BMGMINKVTPDDRZ-UHFFFAOYSA-N 2-acetamido-n-[1-[[5-(diaminomethylideneamino)-1-oxopentan-2-yl]amino]-4-methyl-1-oxopentan-2-yl]-4-methylpentanamide;n-[1-[[5-(diaminomethylideneamino)-1-oxopentan-2-yl]amino]-4-methyl-1-oxopentan-2-yl]-4-methyl-2-(propanoylamino)pentanamide Chemical compound CC(C)CC(NC(C)=O)C(=O)NC(CC(C)C)C(=O)NC(C=O)CCCN=C(N)N.CCC(=O)NC(CC(C)C)C(=O)NC(CC(C)C)C(=O)NC(C=O)CCCN=C(N)N BMGMINKVTPDDRZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- APIXJSLKIYYUKG-UHFFFAOYSA-N 3 Isobutyl 1 methylxanthine Chemical compound O=C1N(C)C(=O)N(CC(C)C)C2=C1N=CN2 APIXJSLKIYYUKG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- QRXMUCSWCMTJGU-UHFFFAOYSA-N 5-bromo-4-chloro-3-indolyl phosphate Chemical compound C1=C(Br)C(Cl)=C2C(OP(O)(=O)O)=CNC2=C1 QRXMUCSWCMTJGU-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 108010039627 Aprotinin Proteins 0.000 description 1
- 201000001320 Atherosclerosis Diseases 0.000 description 1
- 238000009010 Bradford assay Methods 0.000 description 1
- 208000006545 Chronic Obstructive Pulmonary Disease Diseases 0.000 description 1
- LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N Ethanol Chemical compound CCO LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 241000206602 Eukaryota Species 0.000 description 1
- 206010061218 Inflammation Diseases 0.000 description 1
- 102100034343 Integrase Human genes 0.000 description 1
- GDBQQVLCIARPGH-UHFFFAOYSA-N Leupeptin Natural products CC(C)CC(NC(C)=O)C(=O)NC(CC(C)C)C(=O)NC(C=O)CCCN=C(N)N GDBQQVLCIARPGH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 108010011078 Leupeptins Proteins 0.000 description 1
- 241000222065 Lycoperdon Species 0.000 description 1
- 229910020700 Na3VO4 Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000002033 PVDF binder Substances 0.000 description 1
- 229930182555 Penicillin Natural products 0.000 description 1
- JGSARLDLIJGVTE-MBNYWOFBSA-N Penicillin G Chemical compound N([C@H]1[C@H]2SC([C@@H](N2C1=O)C(O)=O)(C)C)C(=O)CC1=CC=CC=C1 JGSARLDLIJGVTE-MBNYWOFBSA-N 0.000 description 1
- 241000768494 Polymorphum Species 0.000 description 1
- 208000000236 Prostatic Neoplasms Diseases 0.000 description 1
- 108010092799 RNA-directed DNA polymerase Proteins 0.000 description 1
- 238000011529 RT qPCR Methods 0.000 description 1
- 240000004808 Saccharomyces cerevisiae Species 0.000 description 1
- 108091081021 Sense strand Proteins 0.000 description 1
- 208000007536 Thrombosis Diseases 0.000 description 1
- 108091023040 Transcription factor Proteins 0.000 description 1
- 102000040945 Transcription factor Human genes 0.000 description 1
- 239000007983 Tris buffer Substances 0.000 description 1
- 208000036142 Viral infection Diseases 0.000 description 1
- 230000003213 activating effect Effects 0.000 description 1
- 230000004913 activation Effects 0.000 description 1
- 238000000137 annealing Methods 0.000 description 1
- 230000000692 anti-sense effect Effects 0.000 description 1
- 230000006907 apoptotic process Effects 0.000 description 1
- 229960004405 aprotinin Drugs 0.000 description 1
- 238000003556 assay Methods 0.000 description 1
- 230000008827 biological function Effects 0.000 description 1
- 150000001720 carbohydrates Chemical class 0.000 description 1
- 235000014633 carbohydrates Nutrition 0.000 description 1
- 230000024245 cell differentiation Effects 0.000 description 1
- 230000010261 cell growth Effects 0.000 description 1
- 230000006037 cell lysis Effects 0.000 description 1
- 230000005754 cellular signaling Effects 0.000 description 1
- 238000006243 chemical reaction Methods 0.000 description 1
- 230000003399 chemotactic effect Effects 0.000 description 1
- 208000029771 childhood onset asthma Diseases 0.000 description 1
- YTRQFSDWAXHJCC-UHFFFAOYSA-N chloroform;phenol Chemical compound ClC(Cl)Cl.OC1=CC=CC=C1 YTRQFSDWAXHJCC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000004087 circulation Effects 0.000 description 1
- 238000010276 construction Methods 0.000 description 1
- 238000007796 conventional method Methods 0.000 description 1
- 238000007405 data analysis Methods 0.000 description 1
- 229960000935 dehydrated alcohol Drugs 0.000 description 1
- 238000010586 diagram Methods 0.000 description 1
- FFYPMLJYZAEMQB-UHFFFAOYSA-N diethyl pyrocarbonate Chemical compound CCOC(=O)OC(=O)OCC FFYPMLJYZAEMQB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000012153 distilled water Substances 0.000 description 1
- 238000005516 engineering process Methods 0.000 description 1
- 230000007613 environmental effect Effects 0.000 description 1
- 239000012530 fluid Substances 0.000 description 1
- 238000001502 gel electrophoresis Methods 0.000 description 1
- 235000009200 high fat diet Nutrition 0.000 description 1
- 230000003308 immunostimulating effect Effects 0.000 description 1
- 230000006698 induction Effects 0.000 description 1
- 210000004969 inflammatory cell Anatomy 0.000 description 1
- 230000004054 inflammatory process Effects 0.000 description 1
- ZPNFWUPYTFPOJU-LPYSRVMUSA-N iniprol Chemical compound C([C@H]1C(=O)NCC(=O)NCC(=O)N[C@H]2CSSC[C@H]3C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H](C)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@H](C(N[C@H](C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H](CC=4C=CC(O)=CC=4)C(=O)N[C@@H](CC=4C=CC=CC=4)C(=O)N[C@@H](CC=4C=CC(O)=CC=4)C(=O)N[C@@H](CC(N)=O)C(=O)N[C@@H](C)C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H](C)C(=O)NCC(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CSSC[C@H](NC(=O)[C@H](CC(O)=O)NC(=O)[C@H](CCC(O)=O)NC(=O)[C@H](C)NC(=O)[C@H](CO)NC(=O)[C@H](CCCCN)NC(=O)[C@H](CC=4C=CC=CC=4)NC(=O)[C@H](CC(N)=O)NC(=O)[C@H](CC(N)=O)NC(=O)[C@H](CCCNC(N)=N)NC(=O)[C@H](CCCCN)NC(=O)[C@H](C)NC(=O)[C@H](CCCNC(N)=N)NC2=O)C(=O)N[C@@H](CCSC)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)N[C@@H](CSSC[C@H](NC(=O)[C@H](CC=2C=CC=CC=2)NC(=O)[C@H](CC(O)=O)NC(=O)[C@H]2N(CCC2)C(=O)[C@@H](N)CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(=O)N2[C@@H](CCC2)C(=O)N2[C@@H](CCC2)C(=O)N[C@@H](CC=2C=CC(O)=CC=2)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)NCC(=O)N2[C@@H](CCC2)C(=O)N3)C(=O)NCC(=O)NCC(=O)N[C@@H](C)C(O)=O)C(=O)N[C@@H](CCC(N)=O)C(=O)N[C@H](C(=O)N[C@@H](CC=2C=CC=CC=2)C(=O)N[C@H](C(=O)N1)C(C)C)[C@@H](C)O)[C@@H](C)CC)=O)[C@@H](C)CC)C1=CC=C(O)C=C1 ZPNFWUPYTFPOJU-LPYSRVMUSA-N 0.000 description 1
- PBGKTOXHQIOBKM-FHFVDXKLSA-N insulin (human) Chemical compound C([C@@H](C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@H]1CSSC[C@H]2C(=O)N[C@H](C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)N[C@H](C(=O)N[C@H](C(N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CC=3C=CC(O)=CC=3)C(=O)N[C@@H](CCC(N)=O)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CC(N)=O)C(=O)N[C@@H](CC=3C=CC(O)=CC=3)C(=O)N[C@@H](CSSC[C@H](NC(=O)[C@H](C(C)C)NC(=O)[C@H](CC(C)C)NC(=O)[C@H](CC=3C=CC(O)=CC=3)NC(=O)[C@H](CC(C)C)NC(=O)[C@H](C)NC(=O)[C@H](CCC(O)=O)NC(=O)[C@H](C(C)C)NC(=O)[C@H](CC(C)C)NC(=O)[C@H](CC=3NC=NC=3)NC(=O)[C@H](CO)NC(=O)CNC1=O)C(=O)NCC(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)NCC(=O)N[C@@H](CC=1C=CC=CC=1)C(=O)N[C@@H](CC=1C=CC=CC=1)C(=O)N[C@@H](CC=1C=CC(O)=CC=1)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)N1[C@@H](CCC1)C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(O)=O)C(=O)N[C@@H](CC(N)=O)C(O)=O)=O)CSSC[C@@H](C(N2)=O)NC(=O)[C@H](CCC(N)=O)NC(=O)[C@H](CCC(O)=O)NC(=O)[C@H](C(C)C)NC(=O)[C@@H](NC(=O)CN)[C@@H](C)CC)[C@@H](C)CC)[C@@H](C)O)NC(=O)[C@H](CCC(N)=O)NC(=O)[C@H](CC(N)=O)NC(=O)[C@@H](NC(=O)[C@@H](N)CC=1C=CC=CC=1)C(C)C)C1=CN=CN1 PBGKTOXHQIOBKM-FHFVDXKLSA-N 0.000 description 1
- 230000003914 insulin secretion Effects 0.000 description 1
- 238000002372 labelling Methods 0.000 description 1
- 208000032839 leukemia Diseases 0.000 description 1
- 108010052968 leupeptin Proteins 0.000 description 1
- GDBQQVLCIARPGH-ULQDDVLXSA-N leupeptin Chemical compound CC(C)C[C@H](NC(C)=O)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@H](C=O)CCCN=C(N)N GDBQQVLCIARPGH-ULQDDVLXSA-N 0.000 description 1
- 239000007788 liquid Substances 0.000 description 1
- 210000004185 liver Anatomy 0.000 description 1
- 210000004072 lung Anatomy 0.000 description 1
- 239000012139 lysis buffer Substances 0.000 description 1
- 238000000386 microscopy Methods 0.000 description 1
- 230000000116 mitigating effect Effects 0.000 description 1
- 238000002156 mixing Methods 0.000 description 1
- 238000010369 molecular cloning Methods 0.000 description 1
- 230000009456 molecular mechanism Effects 0.000 description 1
- 210000003205 muscle Anatomy 0.000 description 1
- 229940098893 novolin r Drugs 0.000 description 1
- 230000001575 pathological effect Effects 0.000 description 1
- 229940049954 penicillin Drugs 0.000 description 1
- 230000004962 physiological condition Effects 0.000 description 1
- 229920002981 polyvinylidene fluoride Polymers 0.000 description 1
- 239000011535 reaction buffer Substances 0.000 description 1
- 238000011160 research Methods 0.000 description 1
- 108091092562 ribozyme Proteins 0.000 description 1
- 102000035025 signaling receptors Human genes 0.000 description 1
- 108091005475 signaling receptors Proteins 0.000 description 1
- 239000011780 sodium chloride Substances 0.000 description 1
- 238000002415 sodium dodecyl sulfate polyacrylamide gel electrophoresis Methods 0.000 description 1
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 1
- 229960005322 streptomycin Drugs 0.000 description 1
- 239000000758 substrate Substances 0.000 description 1
- 230000002194 synthesizing effect Effects 0.000 description 1
- 238000002054 transplantation Methods 0.000 description 1
- LENZDBCJOHFCAS-UHFFFAOYSA-N tris Chemical compound OCC(N)(CO)CO LENZDBCJOHFCAS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- IHIXIJGXTJIKRB-UHFFFAOYSA-N trisodium vanadate Chemical compound [Na+].[Na+].[Na+].[O-][V]([O-])([O-])=O IHIXIJGXTJIKRB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000009385 viral infection Effects 0.000 description 1
- 238000001262 western blot Methods 0.000 description 1
Images
Landscapes
- Medicines That Contain Protein Lipid Enzymes And Other Medicines (AREA)
- Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
Abstract
本发明提供了Egr-1作为治疗Ⅱ型糖尿病靶标的应用，尤其是提供了Egr-1拮抗剂在制备治疗Ⅱ型糖尿病的药物中的用途。本发明的Egr-1拮抗剂能增加胰岛素敏感性，防止胰岛素抵抗。本发明的Egr-1拮抗剂是能够抑制Egr-1基因转录和/或翻译的拮抗剂，其中优选为siRNA或显性无效Egr-1。
Description
技术领域
本发明涉及Egr-1作为治疗Ⅱ型糖尿病靶标的应用，尤其是涉及Egr-1拮抗剂在制备治疗Ⅱ型糖尿病的药物中的用途。
背景技术
II 型糖尿病是一种常见病，多发病，在我国以及全世界都具有很高的发病率，在我国，II型糖尿病已经成为发病率增长最快的疾病。最新资料表明，我国糖尿病患者已超过 6000 万，占全球糖尿病患者的五分之一。预计截止到2025年我国糖尿病患者总数将接近 1亿。
II 型糖尿病是一种多病因的代谢疾病，除内在的遗传因素外，还与人们生活环境、生活方式及行为有很大的关系，特别是过度肥胖引起的一些代谢紊乱易导致 II 型糖尿病。II 型糖尿病又称为非胰岛素依赖型糖尿病，是指肌肉和脂肪组织对胰岛素产生抗性，作为补偿，胰岛β细胞则分泌更多的胰岛素，但仍不能把血糖维持在正常范围内。另外，过量的胰岛素分泌使胰岛β细胞功能受到损伤，导致胰岛素分泌不足。胰岛素抵抗是指机体靶组织对胰岛素的反应性低于正常的一种病理生理状态，经常与肥胖，II 型糖尿病早期阶段等临床疾病相伴随，是这些疾病的一个重要的特征，也是导致这些疾病发生的重要因素。但是造成胰岛素抵抗以及由此导致的肥胖，II 型糖尿病等相关疾病的分子机制并不是很清楚。这就导致了其防治的困难。
Egr-1 基因普遍存在于从酵母到人的真核细胞基因组中,进化上高度保守。多种外界刺激都可促进Egr-1表达并使其活化 ,活化的Egr-1与靶基因启动子区上特异结合位点作用而调控不同靶基因的转录。目前已证实多种行使各类功能的基因的转录需要 Egr-1 参与，包括与细胞生长分化和细胞凋亡、炎性细胞趋化、免疫刺激等相关的多种基因。Egr-1的生物学功能主要是通过激活或抑制这些靶基因的表达实现的。
有研究表明，在前列腺癌组织中，转录因子Egr-1过表达，而且利用特定的反义寡核苷酸抑制Egr-1的表达，能够逆转前列腺癌细胞的转化。值得一提的是，已经有临床前研究利用针对Egr-1的反义寡核苷酸防止肺移植后形成炎症和血栓。另外，Egr-1在肺慢性阻塞性疾病（COPD）、动脉粥样硬化、儿童哮喘、白血病等疾病中都有重要的调节作用。
发明内容
本发明的提供一种新的Ⅱ型糖尿病相关疾病的药物靶点。
本发明涉及人类基因功能，特别是涉及与Ⅱ型糖尿病的Egr-1基因功能。检测Ⅱ型糖尿病病人脂肪组织以及相关动物体内实验证明了Egr-1基因的高表达，通过建立胰岛素抵抗脂肪细胞的细胞模型进行进一步的研究，表明Egr-1在胰岛素抵抗的情况下受到胰岛素信号通路的调节。胰岛素长期刺激实验表明，正常脂肪细胞应答胰岛素这一过程是依赖于Egr-1的转录活性的，Egr-1的表达受到胰岛素的调控。本发明还通过构建了控制Egr-1表达的相关腺病毒和Egr-1的干扰序列进行深入的探究，研究发现干扰Egr-1的表达可以缓解胰岛素抵抗，说明抑制Egr-1的表达能够增加胰岛素敏感性，防止胰岛素抵抗。因此Egr-1可以作为Ⅱ型糖尿病相关疾病理想的药物靶点。
因此，本发明在另一方面提供了Egr-1拮抗剂在制备治疗II型糖尿病的药物中的用途。
在一个实施方案中，所述Egr-1拮抗剂增加胰岛素敏感性，防止胰岛素抵抗。
在一个实施方案中，本发明的Egr-1拮抗剂是抑制Egr-1基因转录和/或翻译的拮抗剂，优选为针对Egr-1的siRNA。在一个实施方案中，所述siRNA靶向下列序列：5’-UCUCCCAGGACAAUUGAAAUUUGCU-3’(SEQ ID NO:1)，并且所述siRNA的序列优选为5’-AGCAAAUUUC AAUUGUCCUG GGAGA-3’ (SEQ ID NO:2)。
在另一个实施方案中，本发明的Egr-1拮抗剂是包含锌指结构域(Egr-1第331-427位氨基酸)的显性无效Egr-1，优选为表达所述显性无效Egr-1的DNEgr-1腺病毒。
附图说明
图1显示了14 例Ⅱ型糖尿病病人脂肪组织中 Egr-1 的表达水平。其中提取人组织标本 RNA，并用实时荧光定量 PCR 检测基因表达。
图2 A，含有大量脂滴的脂肪细胞，油红染色后脂肪细胞；B，胰岛素抵抗细胞 IRS的活性；C，胰岛素抵抗细胞的葡萄糖摄取能力。
图3 胰岛素抵抗细胞中 Egr-1 应答胰岛素刺激上调并调控细胞的葡糖摄取能力 A，胰岛素抵抗细胞中 Egr-1依然能应答胰岛素刺激而上调；B，在胰岛素抵抗细胞中过表达 DN-Egr-1 使细胞对葡糖的摄取得到显著恢复。
图4显示了胰岛素长期刺激下 Egr-1 的表达与 IRS 活性的关系。正常 3T3-L1 细胞以及脂肪细胞在不同时间点胰岛素的刺激下 Egr-1 以及IRS 活性的变化。
图5显示了长期胰岛素刺激下 Egr-1 调控细胞葡糖摄取能力。过表达 DnEgr-1 的正常 3T3-L1前脂细胞（A）和脂肪细胞（B）在长期胰岛素刺激下的葡萄糖摄取实验。
图6 显示了Egr-1 RNAi 有效的下调了小鼠体内的 Egr-1 mRNA 水平。灰色柱形图代表作为对照的糖尿病小鼠，黑色代表尾静脉注射 Egr-1 RNAi 的糖尿病小鼠。
图7 A 图，db/db 小鼠在喂食后血糖水平出现明显上升，在干扰 Egr-1 表达水平后，喂食后血糖水平的升高得到抑制。 B图， GTT 实验，糖尿病小鼠在 GTT 后血糖水平显著上升，干扰 Egr-1后，血糖的升高被显著抑制。
具体实施方式
下面结合附图和实施例对本发明作进一步详细的说明。以下实施例仅用于说明本发明而不用于限制本发明范围。
一般材料和方法
本发明以下实施例中使用了以下所列的材料和方法。实施例中未注明具体条件的实验方法，通常按照常规条件，例如Sambrook等人，分子克隆实验指南New York：Cold Spring Harbor Laboratory Press，1989）中所述的条件，或按照制造厂商所建议的条件。
1 材料
3T3-L1 细胞系购自上海细胞所，胰岛素（诺和灵R），地塞米松购自鼓楼医院，[3H]-D-Glucose 购自中国同位素总公司，IBMX 购自 Sigma 公司，抗-p-IRS(Tyr)抗体，抗-IRS 抗体，抗-Egr-1 抗体购自 Santa Cruz 公司，胎牛血清购自 PAA 公司。抗-p-ERK 抗体，抗-ERK 抗体购自（上海康城生物技术公司）反转录试剂盒 Traverse-Ace 以及荧光定量 PCR 试剂盒购自TOYOBO公司。TNF-α细胞因子购自Sigma 公司，油红染料购自南京生兴生物技术公司。抗-p-IRS(Ser308)，抗-p-IRS(Ser612) 均购自Cell signaling 公司，野生型及db/db 小鼠（Bks）购自南京大学模式动物研究所，罗氏血糖仪，葡萄糖购自Sigma公司 。Ⅱ型糖尿病病人组织标本由江苏省中医院提供。
2 细胞培养
前脂细胞（3T3-L1）培养于含 10%胎牛血清、100U/ml 青霉素、100mg/L 链霉素的 DMEM 培养基中，于37°C、5% CO2 浓度条件下的细胞培养箱中培养。
3脂肪细胞以及胰岛素抵抗细胞的诱导
前脂细胞（3T3-L1）接种并长满后培养基换为含有10%胎牛血清，150nmol/L胰岛素，250nmol/L 地塞米松以及 0.5mmol/L 3-异丁基-1-甲基黄嘌呤的刺激液 1，培养 2 天后，换为含有 10%胎牛血清和 150nmol/L 胰岛素的培养基，再培养2天后，细胞换回正常的含 10%胎牛血清的 DMEM 培养基，6天后即出现大量含有脂滴的脂肪细胞。3T3-L1前脂细胞在诱导为脂肪细胞后，用含有终浓度为5ng/ml的TNF-α细胞因子的 DMEM 培养基诱导 3天，每24小时换液，3天后即为胰岛素抵抗脂肪细胞。
4油红染色
将诱导好的脂肪细胞用 PBS 洗3遍，加入油红染料，吸干，10倍显微镜镜检。
5葡萄糖摄取实验
每个细胞样本加入[3H]-D-Glucose 使终浓度为 200uCi/mmol/L，同时加入终浓度为 10nm 的胰岛素，3 小时后，用冰预冷的 PBS 洗3遍，加入10M KOH 裂解细胞，用等体积无水乙醇沉淀葡萄糖过夜，10000g离心10分钟，用无菌水200ul重悬沉淀，用闪烁计数器检测。
6免疫印迹分析
细胞培养至可以进行蛋白抽提时，吸去培养基，用冰预冷的 PBS 洗两遍，加入 300 μl 裂解缓冲液(50.0 mmol/L Tris, 150.0 mmol/L NaCl, 0.1% SDS, 1.0% NP-40, 1.0 mmol/L Na3VO4, 2.0 mmol/L NaF, 100.0μg/ml PMSF, 1.0 μg/ml亮肽酶素(leupeptin), 以及1.0 μg/ml抑肽酶)，冰浴 30 min，期间每隔 5 分钟混匀一次，刮取细胞，12 000 g离心10分钟，收集上清。采用 Bradford法测定蛋白质浓度。取 50μg 的总蛋白进行SDS-PAGE 胶电泳分离，按常规方法转印至PVDF 膜上，一抗 4℃孵育过夜，抗-Egr-1(1:1000)，抗-p-IRS(Tyr)(1:500)，抗-IRS(1:500)，用 AP标记的二抗与 NBT和 BCIP显色或者采用 BM chemiluminescence Western Blotting Kit(购自 Roche公司)检测结果。
7 提取组织标本 RNA
取 1mg 组织标本，悬浮于 1ml Trizol (Invitrogen)，用组织匀浆器匀浆3-5分钟，加 1/5体积酚氯仿抽提蛋白，12000rpm，离心10分钟，抽取上清，加等体积的异丙醇，-20 度，20分钟沉淀RNA，12000rpm，离心10分钟，弃上清，沉淀溶于 20ul DEPC(焦碳酸二乙脂)溶液，测定浓度。
8反转录 PCR
通过 Tranverse-Ace 反转录试剂盒 (TOYOBO)，采用 oligo-dT 进行逆转录。取800ng总RNA反转录合成单链cDNA， 流程如下： 800ng总RNA，加入1mol/L Oligo dT引物1ul，补DEPC水至10ul。65°C，反应5 min 后，迅速置于冰上，再加入反应缓冲液4ul，10mmol/L dNTP 2 ul，20 U/ul 的RNA酶拮抗剂 1l。在37°C反应5 min 后，加入 1ul 10 U/ul逆转录酶，42°C反应 1 h后在90°C处理10 min。
9 实时荧光定量 PCR
采用实时荧光定量 PCR 试剂盒（TOYOBO），具体体系如下：
20μl 体系，SYBR(2*):10μl，引物(上游)(10*):2μl，引物(下游)(10*):2μl，cDNA 模板：2μl，加双蒸水至 20μl。
egr-1实时定量 PCR 引物序列：
egr-1(鼠)正向: 5’-TCGGCTCCTTTCCTCACTCA-3’ (SEQ ID NO:3)
egr-1 (鼠)反向: 5’- CTCATAGGGTTGTTCGCTCGG-3’ (SEQ ID NO:4)
egr-1 (人) 正向: 5’- CAGCAGTCCCATTTACTCAG-3’ (SEQ ID NO:5)
egr-1 (人) 反向: 5’- GACTGGTAGCTGGTATTG-3’ (SEQ ID NO:6)
扩增条件：
95℃预变性5分钟，95℃变性15秒，60℃退火15秒，72℃延伸，收集荧光信号45秒，共40个循环，数据分析。
10糖耐量实验GTT
小鼠禁食12小时后，腹腔注射葡萄糖（1.8mg/g），分别在不同时间点尾部取血，用血糖仪检测小鼠血液中葡萄糖含量。
11摄食血糖实验
小鼠禁食12小时后，再喂食12小时，尾部取血，检测小鼠血液中葡萄糖含量。
12 DNEgr-1腺病毒的构建
采用本领域公知的方法构建表达显性无效Egr-1的腺病毒。具体而言，利用PCR构建包含锌指结构域（Egr-1上第331-427位氨基酸）的显性无效Egr-1（dominant negative Egr-1，DNEgr-1），特异性扩增引物为5’-CGCGGGATCCACACCCCCCCATGAACGCCCATATGCTTGC-3’ (SEQ ID NO:7)（有义链）, 和5’-CGCGGGATCCTCTAGATTAGTCTGCTTTCTTGTCCTTCTGTCT-3’ （反义链）(SEQ ID NO:8)。将DNEgr-1的序列从原始质粒克隆到pAdTrack-CMV质粒，AdEasy System将这些pAdTrack-CMV质粒再重组到腺病毒中，即得到DNEgr-1腺病毒。该病毒能够表达Egr-1的锌指结构域，与野生型 Egr-1 蛋白竞争结合 DNA 启动子区，从而抑制细胞内Egr-1的转录活性。
13干扰序列的设计合成
siRNA由Invitrogen公司设计以靶向下列序列：Egr-1，5-UCUCCCAGGACAAUUGAAAUUUGCU-3(SEQ ID NO:1)；乱序： 5-CCUACGCCACCAAUUUCGU-3(SEQ ID NO:9)。siEgr-1靶向序列位于Egr-1基因的第二个外显子。
实施例1
Ⅱ型糖尿病病人脂肪组织中Egr-1表达量明显高于正常人
Ⅱ型糖尿病病人组织标本由江苏省中医院提供。如图1显示，在14例Ⅱ型糖尿病病人脂肪组织中Egr-1的mRNA的表达水平要显著高于正常人的对照组，表明 Egr-1 表达水平的变化可能在调控Ⅱ型糖尿病中发挥了作用。我们在糖尿病小鼠、受胰岛素/葡萄糖刺激的糖尿病小鼠、高脂饮食3/6周的野生型小鼠上所做的动物实验也得到同样的结论。
实施例2
胰岛素抵抗脂肪细胞模型的成功建立
在正常脂肪细胞中，胰岛素信号受体底物IRS应答胰岛素会发生酪氨酸磷酸化，并激活下游胰岛素信号通路。在用TNF-α细胞因子诱导脂肪细胞3天后，我们采用免疫印迹的方法检测胰岛素信号通路中IRS的酪氨酸磷酸化水平的变化。图2-B、2-C所示结果表明诱导的胰岛素抵抗细胞模型成功建立。
实施例3
胰岛素抵抗细胞中Egr-1应答胰岛素的刺激上调并调控细胞的葡糖摄取能力
我们检测到胰岛素抵抗细胞中Egr-1 的表达量在胰岛素刺激3小时后明显增加，如图3-A所示，表明Egr-1在胰岛素抵抗的情况下仍然受到胰岛素信号通路的调节。
DNEgr-1病毒能够表达 Egr-1 的锌指结构域，与野生型 Egr-1 蛋白竞争结合 DNA 启动子区，从而抑制细胞内 Egr-1 的转录活性。我们将构建好的DNEgr-1病毒感染胰岛素抵抗细胞48小时。如图3-B所示，实验结果表明，Egr-1 在调控细胞胰岛素抵抗的过程中具有重要作用，抑制 Egr-1 的转录活性后能提高细胞对胰岛素的敏感性。
实施例4
长期胰岛素刺激下Egr-1调控细胞的葡糖摄取能力
图4结果显示在长期胰岛素刺激下，正常脂肪细胞开始出现胰岛素抵抗现象，而在这一过程中，Egr-1的表达受到到胰岛素的调控，同时Egr-1的表达伴随着IRS 的活性降低。图5结果说明，长期胰岛素刺激下，正常脂肪细胞应答胰岛素的能力出现显著下降，而这一过程是受到Egr-1调控的。
实施例5
Egr-1干扰序列的设计合成成功
通过尾静脉注射 Egr-1 RNAi，显著下调了db/db小鼠肝脏 Egr-1 的mRNA水平（如图6所示）。这表明Egr-1干扰序列成功干扰了Egr-1的表达。
实施例6
干扰Egr-1能够提高糖尿病小鼠的胰岛素敏感性，有助于缓解Ⅱ型糖尿病病情
如图7所示，喂食后 Egr-1 干扰 db/db 小鼠组的血糖水平较对照组组 db/db小鼠的血糖水平明显得到抑制，同样， GTT实验的数据也显示， Egr-1干扰组db/db小鼠对血糖水平的控制要显著好于对照组 db/db 小鼠。
这些结果说明，干扰Egr-1表达增强了脂肪细胞的胰岛素敏感性，对胰岛素抵抗具有缓解作用，因此，Egr-1可以作为临床治疗Ⅱ型糖尿病和胰岛素抵抗有效的潜在靶标。
Claims (8)
1. 以Egr-1为靶点的拮抗剂在制备治疗II型糖尿病的药物中的用途。
2. 权利要求1的用途，其中所述Egr-1拮抗剂增加胰岛素敏感性，防止胰岛素抵抗。
3. 权利要求1或2的用途，其中所述的Egr-1拮抗剂抑制Egr-1基因转录和/或翻译。
4. 权利要求3的用途，其中所述Egr-1拮抗剂包括针对Egr-1的siRNA。
5.权利要求4的用途，其中所述siRNA靶向下列序列：5’-UCUCCCAGGACAAUUGAAAUUUGCU-3’。
6. 权利要求5的用途，其中所述siRNA的序列为5’-AGCAAAUUUCAAUUGUCCUG GGAGA-3’。
7. 权利要求3的用途，其中所述Egr-1拮抗剂包括包含Egr-1第331-427位氨基酸的锌指结构域的显性无效Egr-1。
8. 权利要求7的用途，其中所述Egr-1拮抗剂是表达所述显性无效Egr-1的DNEgr-1腺病毒。
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CN2012100791028A CN102552938A (zh) | 2012-03-22 | 2012-03-22 | Egr-1拮抗剂在制备治疗Ⅱ型糖尿病的药物中的用途 |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CN2012100791028A CN102552938A (zh) | 2012-03-22 | 2012-03-22 | Egr-1拮抗剂在制备治疗Ⅱ型糖尿病的药物中的用途 |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| CN102552938A true CN102552938A (zh) | 2012-07-11 |
Family
ID=46400386
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| CN2012100791028A Pending CN102552938A (zh) | 2012-03-22 | 2012-03-22 | Egr-1拮抗剂在制备治疗Ⅱ型糖尿病的药物中的用途 |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| CN (1) | CN102552938A (zh) |
Cited By (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN104857529A (zh) * | 2015-05-20 | 2015-08-26 | 山西大学 | Egr-1基因在制备抗膀胱癌药物中的应用 |
Citations (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN1311822A (zh) * | 1998-06-02 | 2001-09-05 | 葛兰素集团有限公司 | 基因治疗方法 |
| CN1816620A (zh) * | 2003-05-15 | 2006-08-09 | 因特罗根治疗公司 | 用于产生腺病毒载体的方法和组合物 |
-
2012
- 2012-03-22 CN CN2012100791028A patent/CN102552938A/zh active Pending
Patent Citations (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN1311822A (zh) * | 1998-06-02 | 2001-09-05 | 葛兰素集团有限公司 | 基因治疗方法 |
| CN1816620A (zh) * | 2003-05-15 | 2006-08-09 | 因特罗根治疗公司 | 用于产生腺病毒载体的方法和组合物 |
Non-Patent Citations (3)
| Title |
|---|
| NING SHEN, 等: "An Early Response Transcription Factor, Egr-1, Enhances Insulin Resistance in Type 2 Diabetes with Chronic Hyperinsulinism", 《THE JOURNAL OF BIOLOGICAL CHEMISTRY》 * |
| XIAO YU, 等: "Egr-1 decreases adipocyte insulin sensitivity by tilting PI3K/Akt and MAPK signal balance in mice", 《THE EMBO JOURNAL》 * |
| YACHIEL LEVKOVITZ，JAY M. BARABAN: "A Dominant Negative Inhibitor of the Egr Family of Transcription Regulatory Factors Suppresses Cerebellar Granule Cell Apoptosis by Blocking c-Jun Activation", 《THE JOURNAL OF NEUROSCIENCE》 * |
Cited By (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN104857529A (zh) * | 2015-05-20 | 2015-08-26 | 山西大学 | Egr-1基因在制备抗膀胱癌药物中的应用 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| Shi et al. | IL-6 and TNF-α induced obesity-related inflammatory response through transcriptional regulation of miR-146b | |
| Lee et al. | miR-130 suppresses adipogenesis by inhibiting peroxisome proliferator-activated receptor γ expression | |
| Meloni et al. | Local inhibition of microRNA-24 improves reparative angiogenesis and left ventricle remodeling and function in mice with myocardial infarction | |
| Liu et al. | ZFP217 regulates adipogenesis by controlling mitotic clonal expansion in a METTL3-m6A dependent manner | |
| Lin et al. | KSRP and MicroRNA 145 are negative regulators of lipolysis in white adipose tissue | |
| Nagel et al. | Activation of miR-17-92 by NK-like homeodomain proteins suppresses apoptosis via reduction of E2F1 in T-cell acute lymphoblastic leukemia | |
| CN102421917A (zh) | 对抗、预防和/或测定心力衰竭或心力衰竭的风险的工具和方法 | |
| CN109852688B (zh) | 一种2型糖尿病的诊断引物及试剂盒、以及非编码rna分子标志物的应用 | |
| JP5322066B2 (ja) | 関節リウマチ関連マイクロｒｎａ | |
| CN104548134A (zh) | miR-144及其抑制剂的应用 | |
| Zhang et al. | Adipose-derived mesenchymal stem cells ameliorate ulcerative colitis through miR-1236 negatively regulating the expression of retinoid-related orphan receptor gamma | |
| CN104774929A (zh) | miR-455-3p在食管鳞状细胞癌中的诊断、治疗和预后的应用 | |
| CN107693535A (zh) | 一种microRNA的应用 | |
| CN102552938A (zh) | Egr-1拮抗剂在制备治疗Ⅱ型糖尿病的药物中的用途 | |
| CN113143949A (zh) | 靶向SLC22A12基因的siRNA及其在高尿酸血症伴高血脂、高血糖治疗中的应用 | |
| CN102908621A (zh) | miRNAs作为调节胰岛素敏感性的靶标的新用途 | |
| CN101843632B (zh) | miR-145在制备治疗炎症药物中的应用 | |
| CN108144061B (zh) | microRNA-210抑制剂在制备治疗炎症性皮肤病药物上的应用 | |
| CN102526763A (zh) | Ggpps拮抗剂在制备治疗ii型糖尿病药物中的用途 | |
| Shi et al. | Interleukin-15 inhibits adipogenic differentiation of cattle bone marrow-derived mesenchymal stem cells via regulating the crosstalk between signal transducer and activator of transcription 5A and Akt signalling | |
| CN101027393A (zh) | 凋亡特异性elF－5AsiRNA和反义多核苷酸在抑制/阻抑炎症反应中的用途 | |
| CN103417987B (zh) | miR-148用于制备控制胰岛β细胞的增殖的药物 | |
| Park et al. | Downregulation of Wnt-mediated ROS generation is causally implicated in leprechaunism | |
| CN101565717B (zh) | 一种细胞特异性ndrg2基因表达下调的载体 | |
| Lei et al. | miR-302b promotes bovine preadipocyte differentiation and inhibits proliferation by targeting CDK 2 |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| C06 | Publication | ||
| PB01 | Publication | ||
| C10 | Entry into substantive examination | ||
| SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
| C02 | Deemed withdrawal of patent application after publication (patent law 2001) | ||
| WD01 | Invention patent application deemed withdrawn after publication |
Application publication date: 20120711 |