CN102488699A - 芍药苷在制备防治肺纤维化药物中的应用 - Google Patents

Abstract

本发明涉及医药领域，具体涉及芍药苷在制备防治肺纤维化疾病药物中的应用，通过气管内滴注博莱霉素(bleomycin)复制小鼠肺纤维化模型，研究芍药苷对小鼠肺组织病理改变及相关指标的影响，证实其抗肺纤维化作用，为芍药苷用于制备防治肺纤维化的药物提供依据。

Description

芍药苷在制备防治肺纤维化药物中的应用

技术领域

本发明涉及医药领域，具体涉及芍药苷的医药用途。 

背景技术

肺纤维化是多种间质性肺疾病的最终病理改变，其特征是长期弥漫性肺泡炎，成纤维细胞过度增殖，继而出现细胞外基质沉积过多，并逐渐取代正常肺组织，最终造成肺功能障碍，病人可能因呼吸衰竭而死亡。研究认为病原微生物、粉尘、药物、化学制剂等多种因素均可诱导肺纤维化的发生，但其详细机制尚不清楚。肺纤维化可发生于任何年龄，全球发病率为7-10/10万，患者平均生存时间为3-4年，且随着年龄的增长，发病率逐渐增高而平均生存时间逐渐缩短。由此可见，肺纤维化严重危害人类的健康和生存，抗肺纤维化药物的研究与开发显得十分重要。 

目前抗肺纤维化的药物主要有：1)糖皮质激素，是目前临床治疗的主要选择，但这类药物副反应大，严重影响机体免疫功能，增加继发感染的可能性；2)干扰素γ(IFN-γ)，不良反应较多、易诱发耐受；3)细胞毒性药物(硫唑嘌呤、环磷酰胺等)，治疗药物选择性差、不良反应多；4)抗氧化剂(N-乙酰半胱氨酸等)，疗效不够理想；5)其他药物，秋水仙碱、吡啡呢酮等。鉴于此，有必要研制新型的高效、安全的治疗肺纤维化的药物。 

芍药苷(I)英文名：Paeoniflorin，结构式如下： 

是传统中药赤芍或白芍的主要有效成分，具有抗炎、改善微循环、抗血小板聚集、抗氧化及自由基损伤、免疫调节、抗神经毒性等作用[中国中药杂志2008，33(18)：2028-2032]。我们的前期研究发现，芍药苷腹腔注射给药对脂多糖引起的小鼠急性肺损伤具有明显的保护作用[Inflamm Res 2011，60(10)：981-990]。但迄今为止，未见有关芍药苷抗肺纤维化生物活性或临床应用方面的研究。 

发明内容

本发明公开了芍药苷的医药新用途，即其可用于制备预防和/或治疗肺纤维化疾病的药物的用途。 

下面是芍药苷抗肺纤维化疾病的部分药效学试验及结果： 

一、芍药苷对肺纤维化小鼠生存率的影响 

小鼠肺纤维化模型的建立及试验方案：小鼠随机分为6组，腹腔注射水合氯醛350mg/kg麻醉。选取其中1组为正常对照组，气管滴注生理盐水，其余5组气管滴注博莱霉素(5mg/kg)，滴注后立即将小鼠直立旋转2min使药液在肺内均匀分布，放回笼中正常饲养。 

芍药苷和研磨成粉末后的醋酸泼尼松片用0.5％CMC-Na混悬，自造模后第1天起，连续灌胃(0.2ml/10g)给药，每日一次，正常组及模型组给予等容量的0.5％CMC-Na，每日测量小鼠体重，记录小鼠死亡时间。 

在造模后第21天，腹腔注射水合氯醛350mg/kg麻醉小鼠，腹主动脉放血处死。取各组小鼠左肺下叶，置于4％甲醛固定，其余肺组织置于-70℃冷冻保存。 

试验结果：造模后第21天，模型组小鼠生存率为50.0％；泼尼松(6mg/kg)组生存率与模型组相近；芍药苷(50mg/kg)组小鼠生存率为87.5％；芍药苷(100mg/kg)组小鼠生存率为75.0％。表明芍药苷可明显提高肺纤维化小鼠的生存率。 

二、芍药苷对肺纤维化小鼠肺组织病变的影响 

如图1所示，造模21天后，HE染色显示，正常对照组：肺组织结构完整清晰，肺泡腔透亮，腔内极少炎性细胞浸润，无成纤维细胞增生；模型组：肺泡结构破坏、萎缩或消失，肺泡间隔增宽，炎性细胞较早期减少；芍药苷(100mg/kg)组和泼尼松组(6mg/kg)组：肺组织结构较完整清晰，少量炎性细胞浸润及成纤维细胞增生，病变程度较模型组轻；同模型组相比，芍药苷(100mg/kg)及泼尼松(6mg/kg)组肺泡炎程度明显减轻。 

如图2所示，造模21天后，Masson染色显示，正常对照组：肺组织结构正常，肺泡间隔未见增厚；模型组：可见大量染成蓝色的胶原，肺泡壁增厚，大量肺泡腔变形、消失，纤维化严重；和模型组相比，芍药苷(100mg/kg)组和醋酸泼尼松组(6mg/kg)组：肺组织结构较完整清晰，肺泡间隔轻度增厚，胶原沉积减少，肺纤维化程度明显减轻。 

如表1所示，造模后第21天，模型组肺组织纤维化程度非常严重，肺泡炎明显，芍药苷(100mg/kg)和泼尼松(6mg/kg)能够显著减低肺纤维化程度，并抑制肺泡炎症。 

表1芍药苷对博来霉素模型小鼠肺泡炎和肺纤维化程度的影响(x±S.D.，n＝3)

^##p＜0.01(与正常组比较)；^*p＜0.05，^**p＜0.01(与模型组比较) 

三、对肺纤维化小鼠肺组织中羟脯氨酸含量的影响 

肺组织羟脯氨酸的量反映了肺组织胶原的含量，如图3所示，造模后第21天，和正常对照组相比，模型组肺组织羟脯氨酸含量显著升高，芍药苷(50，100mg/kg)和泼尼松(6mg/kg)可显著降低博莱霉素诱导的肺纤维化小鼠肺组织中羟脯氨酸含量，抑制率分别为20.6％，31.4％和31.2％，说明芍药苷可以剂量依赖性抑制胶原的合成。 

四、对肺纤维化小鼠肺组织平滑肌肌动蛋白(α-SMA)表达的影响 

造模后第21天，每组取适量肺组织，提取总蛋白，采用Western blot法对小鼠肺组织内α-SMA蛋白表达进行检测。如图4所示，和正常对照组相比，模型组α-SMA表达量显著升高，芍药苷(100mg/kg)和泼尼松(6mg/kg)可显著降低博莱霉素诱导的肺纤维化小鼠肺组织中α-SMA含量，提示其减少了肺组织中肌成纤维细胞的数目。 

五、对肺纤维化小鼠肺组织TGF-β1蛋白表达的影响 

造模后第21天，每组取适量肺组织，提取总蛋白，并采用Western blot法对小鼠肺组织内TGF-β1蛋白表达进行检测。如图5所示，和正常对照组相比，模型组TGF-β1表达量显著升高，芍药苷(100mg/kg)和泼尼松(6mg/kg)可显著降低博莱霉素诱导的肺纤维化小鼠肺组织中TGF-β1表达量。 

综上所述，芍药苷具有预防和/或治疗肺纤维化疾病的功效。 

附图说明

图1是对肺纤维化小鼠肺组织病变的影响 

图2是对肺纤维化小鼠肺组织中胶原沉积的影响 

图3是对肺纤维化小鼠肺组织中羟脯氨酸含量的影响(与正常组比较，##p＜0.01；与模型组 比较，^*p＜0.05，^**p＜0.01) 

图4是对肺纤维化小鼠肺组织α-SMA表达的影响(与正常组比较，##p＜0.01；与模型组比较， ^*p＜0.05，^**p＜0.01) 

图5是对肺纤维化小鼠肺组织TGF-β1蛋白表达的影响(与正常组比较，#p＜0.05；与模型组比较，^*p＜0.05，^**p＜0.01)。 

Claims (1)

1.芍药苷用于制备预防和/或治疗肺纤维化疾病的药物的用途。

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