CN102477406A - 一种防止紫色非硫细菌贴壁生长培养基 - Google Patents

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方井霞
杜凤梅
张柏松
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Abstract

本发明公开了一种经过改造可以有效防止紫色非硫细菌贴壁生长的培养基。采用的技术方案是在常规培养基中添加0.3％～0.5％的皂角粉。采用此培养基培养紫色非硫细菌可有效解决菌体贴壁生长问题，与常规培养基相比，用本发明的培养基培养菌体，生长周期更短，4天可进入稳定期；菌体最终培养浓度更高，菌液OD660达到2.8。

Description

一种防止紫色非硫细菌贴壁生长培养基
技术领域
本发明属于微生物学、微生态学领域。具体的说，涉及一种紫色非硫细菌的培养基。
背景技术
紫色非硫细菌属于红螺菌科(Rhodospirillaceae)是一类变化多样的紫色光合细菌(phototrophic purple bacteria，PNS)。能在厌氧光照、好氧黑暗条件下以不同的生理代谢方式生长繁殖，具有丰富的代谢多样性。由于它的细胞干物质中蛋白质含量高达到60％以上，其蛋白质氨基酸组成比较齐全，细胞中还含有多种维生素，尤其是B族维生素极为丰富，Vb2、叶酸、泛酸、生物素的含量也较高，同时还含有大量的类胡萝卜素、辅酶Q等生理活性物质。因此具有很高的营养价值，这正是它在水产养殖中作为饵料及作为饲料添加成分物质基础。同时，菌体在生长过程中可以有效利用水体中有机物有效降低水体COD值，实现水产饲料和水处理的双重作用，但其推广和应用的关键是培养的菌体应有较高的菌体浓度，可目前的常规培养基：主要配方为：氯化铵1.0g，乙酸钠3.5g，氯化镁0.1g，氯化钙0.1g，磷酸二氢钾0.6g，磷酸氢二钾0.4g，酵母膏0.1g，水1000mI，pH7.2.此培养基配方在培养过程中有诸多缺陷，最主要表现在菌体生长过程中往往出现明显的贴壁生长的现象，前期生长起来的菌体在光照生物反应器内壁生长阻止光的照射，从而影响菌体的进一步生长。
发明内容
为解决以上问题，本发明提供了一种防止紫色非硫细菌贴壁生长培养基，本发明的紫色非硫细菌培养基，可有效防止菌体贴壁生长，提高菌体最终培养浓度。
本发明采用的技术方案是：在前述常规培养基中，添加0.3％～0.5％的皂角粉，即每1000ml基本培养基，添加3～5g皂角粉。优选的培养基每1000ml加5g皂角粉。
调节本发明培养基pH为7.2，121℃灭菌25分钟，将紫色非硫细菌接种于培养基中，置于光照培养箱中，光照条件2000lux，温度32℃。
紫色非硫细菌贴壁现象随皂角粉的增加而减弱，当每1000ml加5g皂角粉时，基本不出现贴壁生长现象，培养4天OD660达2.8，因此选用5g/L皂角粉的添加比较适宜，但考虑添加成本可根据实际情况适当增加。
本发明的有益效果：
1、采用本发明培养基培养紫色非硫细菌，生长周期缩短、最大生长量提高。具体表现为采用本发明培养基培养的紫色非硫细菌最快4天就可以达到菌体生长的稳定期，较常用培养基提前2～3天；随着培养时间的增加，培养基中菌体OD660也逐渐增加，采用本发明培养基菌体的最终OD660可达到2.5以上，见附图中a；而常规培养基一般仅能达到1.9～2.0，见附图中b。
2、用本发明培养基培养的紫色非硫细菌用于水产养殖水体的净化，效果明显。按紫色非硫细菌的35kg/hm2用量一次性撒入鱼塘，试验池比对照池改善明显，COD下降26％，氨氮减少34.5％。
附图说明
本发明培养基(添加5g皂粉/L)与常规培养基，在培养紫色非硫细菌的过程中，光密度OD660的变化图。附图中a代表发明培养基、b代表常规培养基。
具体实施方式
实施例1：
(一)防止紫色非硫细菌贴壁生长培养基配制
基本培养基：氯化铵1.0g，乙酸钠3.5g，氯化镁0.1g，氯化钙0.1g，磷酸二氢钾0.6g，磷酸氢二钾0.4g，酵母膏0.1g，水1000mI，pH7.2.在上述培养基中，加皂角粉3g。
(二)紫色非硫细菌的培养
将上述培养基pH调节为7.2，121℃灭菌25分钟，将紫色非硫细菌按培养基体积3％接种于培养基中，置于光照培养箱中，光照条件2000lux，温度32℃。
培养结果：光照培养5天后，菌体生长进入稳定期，菌液OD660到达2.5
实施例2：
(一)防止紫色非硫细菌贴壁生长培养基配制
基本培养基：氯化铵1.0g，乙酸钠3.5g，氯化镁0.1g，氯化钙0.1g，磷酸二氢钾0.6g，磷酸氢二钾0.4g，酵母膏0.1g，水1000mI，pH7.2.在上述培养基中，加皂角粉5g。
(二)紫色非硫细菌的培养
将上述培养基pH调节为7.2，121℃灭菌25分钟，将紫色非硫细菌按培养基体积3％接种于培养基中，置于光照培养箱中，光照条件2000lux，温度32℃。
培养结果：光照培养4天后，菌体生长进入稳定期，菌液OD660到达2.8。

Claims (2)

1.一种防止紫色非硫细菌贴壁生长的培养基，其特征有常规培养基、皂角粉组成。在常规培养基中每1000ml加入3～5g皂角粉。常规培养基为：氯化铵1.0g，乙酸钠3.5g，氯化镁0.1g，氯化钙0.1g，磷酸二氢钾0.6g，磷酸氢二钾0.4g，酵母膏0.1g，水1000mI，pH7.2.
2.根据权利1的要求，培养的紫色非硫细菌菌液或干粉制剂。
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