CN102470143A - 血中甘油三酯浓度上升抑制剂 - Google Patents
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Abstract
一种血中甘油三酯浓度上升抑制剂,其含有聚谷氨酸作为有效成份。
Description
技术领域
本发明涉及一种血中甘油三酯浓度上升抑制剂。
背景技术
甘油三酯是中性脂质的一种,血液中含有的中性脂质大部分是甘油三酯。已知血液中甘油三酯浓度高的状态如果持续,会引发高甘油三酯血症和高脂血症。高脂血症被认为是造成动脉硬化症的原因,并且是引发例如心脏病和脑血管疾病等疾病的最初诱因。
一般来说,因为血中甘油三酯浓度的变化受到食物的强烈影响,因此难以仅通过药物来完全进行控制。因此,相对于药物疗法,更关注作为食物所摄取的脂质的质量,例如,已经建议通过摄取以亚油酸、亚麻酸为主的高度不饱和脂肪酸,来降低血中甘油三酯的浓度。但是,另一方面,也指出由于过度摄入高度不饱和脂肪酸会造成生物体内产生过氧化脂肪酸,有诱发各种成人病的可能性。
基于以上情况,希望通过安全高且即使日常给药或摄取也不会产生副作用的方法,来抑制血中甘油三酯浓度的上升。近年来,作为安全且有效地抑制血中甘油三酯浓度上升的物质,已经报道了能抑制脂质吸收的黄原胶、海藻酸丙二醇酯(参照专利文献1)、壳聚糖(参照专利文献2)和加工淀粉(参照专利文献3)。
另一方面,聚谷氨酸因为其高保水力而被广泛用作保湿剂、吸收剂等,并作为生物可降解聚合物而受到关注。此外,已经报道了聚谷氨酸具有从小肠的钙吸收促进作用和血压上升抑制作用(参照专利文献4和5)。
现有技术文献
专利文献
专利文献1:日本特开平5-186356号公报
专利文献2:日本特开平3-290170号公报
专利文献3:日本特开2004-269458号公报
专利文献4:日本特开平5-95767号公报
专利文献5:日本特开2008-255063号公报
发明内容
本发明的课题在于提供一种作为医药或食品用途而有用的血中甘油三酯浓度上升抑制剂。具体地,本发明的课题在于提供一种血中甘油三酯浓度上升抑制剂,该血中甘油三酯浓度上升抑制剂可以抑制血中甘油三酯浓度上升,并且作为用于高甘油三酯血症、高脂血症和动脉硬化症的发病风险的降低、预防、改善、缓和、治疗的医药用途或者作为非医药用途的食品用途而有用。
本发明人基于以上提到的课题进行了专心研究。其结果发现,聚谷氨酸具有抑制血中甘油三酯浓度上升的效果。本发明是基于该发现而完成的。
根据本发明,能够提供以下手段:
(1)一种血中甘油三酯浓度上升抑制剂,其含有聚谷氨酸作为有效成分。
(2)一种用于在血中甘油三酯浓度上升的抑制中使用的聚谷氨酸。
(3)一种抑制血中甘油三酯浓度上升的方法,其包括将聚谷氨酸进行给药。
(4)一种聚谷氨酸在用于医药品的制造中的用途,其中,所述医药品具有血中甘油三酯浓度上升抑制效果。
发明的效果
根据本发明的血中甘油三酯浓度上升抑制剂,可以减少血中甘油三酯浓度的上升,特别是减少进食后的血中甘油三酯浓度的上升。而且,本发明的血中甘油三酯浓度上升抑制剂将血中脂质浓度调节至正常的范围内,并且对于高甘油三酯血症、高脂血症的发病风险的降低、预防、改善、缓和、治疗有用,进而对于动脉硬化症的发病风险的降低、预防、改善、缓和、治疗有用。
从下述记载可以更明确本发明的上述以及其它的特征和优点。
具体实施方式
以下详细说明本发明。
本发明的血中甘油三酯浓度上升抑制剂,含有聚谷氨酸作为有效成分。在本发明中使用的聚谷氨酸的结构式用(-NH-CH(COOH)-CH2-CH2-CO-)n来表示。
如后述实施例所示,本发明的聚谷氨酸具有抑制血中甘油三酯浓度上升的效果。因此,该聚谷氨酸可以作为血中甘油三酯浓度上升抑制剂来使用,此外,可以用于制造甘油三酯浓度上升抑制剂。迄今为止,对于聚谷氨酸具有抑制血中甘油三酯浓度上升的作用是未知的。而且,聚谷氨酸对高酯血症和动脉硬化症有预防、改善的效果也是未知的。
本发明的血中甘油三酯浓度上升抑制剂适合抑制特别是进食后的血中甘油三酯浓度的上升。如上所述,因为血中甘油三酯浓度的变化受到食物的强烈影响,因此通过抑制特别是进食后的血中甘油三酯浓度的上升,从而能够期待将血中的中性脂质的浓度保持在优选范围内的效果。在本说明书中“进食后”具体是指摄取含有通常的糖质、脂质等的食品、饮料等之后。
如以下实施例所示,尽管聚谷氨酸的血中甘油三酯浓度上升抑制效果无论聚谷氨酸的分子量而能普遍得到认可,但是聚谷氨酸的分子量在某种程度上越高,则血中甘油三酯上升抑制效果越优异。
因此,为了更有效地抑制血中甘油三酯浓度上升,作为本发明中使用的聚谷氨酸的分子量,其重量平均分子量优选为大约9,000以上,更优选为28,000以上。
另一方面,当本发明的血中甘油三酯浓度上升抑制剂以经口用液体制剂的形式来使用时,从生产方面、饮用时的平滑感、粘稠感、吞咽的容易程度等出发,优选其粘度较低。从而,聚谷氨酸的重量平均分子量的上限优选为大约5,000,000,更优选为大约800,000。因此,从血中甘油三酯浓度上升抑制效果的方面出发,聚谷氨酸的重量平均分子量优选为9,000~5,000,000,更优选为28,000~5,000,000。从粘度的方面出发,聚谷氨酸的重量平均分子量优选为9,000~5,000,000,更优选为9,000~800,000。从血中甘油三酯浓度上升抑制效果以及粘度的两方面出发,聚谷氨酸的重量平均分子量优选为9,000~5,000,000,更优选为28,000~800,000。重量平均分子量可以通过,例如,使用凝胶渗透柱的高效液相色谱来进行测定。
本发明中使用的聚谷氨酸可以通过化学合成来制备,也可以通过微生物来生产,也可以使用市售品。此外,构成聚谷氨酸的谷氨酸的光学活性可以是D型或L型中的任意种,也可以是其混合物。天然的谷氨酸是在γ-位结合谷氨酸的聚合物,可以通过培养以野生型生产聚谷氨酸的微生物、或者经基因重组赋予聚谷氨酸生产能力的微生物等而得到。作为以野生型生产聚谷氨酸的微生物,可以举出,例如包含纳豆菌的部分芽孢杆菌(Bacillus)属细菌和其近缘种(枯草芽孢杆菌chungkookjang变种(Bacillus subtilis var.chungkookjang)、地衣芽孢杆菌(Bacillus licheniformis)、巨大芽孢杆菌(Bacillus megaterium)、炭疽芽孢杆菌(Bacillus anthracis)、耐盐嗜碱芽孢杆菌(Bacillus halodurans))、埃及钠白菌(Natrialba aegyptiaca)、水螅(Hydra)等(Ashiuchi,M.,et al.:Appl.Microbiol.Biotechnol.,59,pp.9-14(2002))。作为使用基因重组技术的聚谷氨酸的生产例子,已知在用质粒导入基因的重组枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis,ISW1214菌株)中得到大约为9g/L/5天的生产率(Ashiuchi,M.,et al.:Biosci.Biotechnol.Biochem.,70,pp.1794-1797(2006))、在用质粒导入基因的重组大肠杆菌中得到大约为4g/L/1.5天的生产率(Jiang,H.,et al.:Biotechnol.Lett.,28,pp.1241-1246(2006))。此外,聚谷氨酸是作为食品添加剂、化妆品素材、增稠剂等而在商业上生产,因此也可以购入国内以及海外的聚谷氨酸制造商所供给的聚谷氨酸(例如,国内制造商:Nippon Poly-Glu Co.,Ltd.、Ichimaru Pharcos Co.,Ltd.、Meiji FoodMateria Co.,Ltd.等,海外制造商:BioLeaders Corporation等)。
此外,在本发明中,聚谷氨酸可以是其盐。在这种情况下,作为盐,可以举出例如钠盐、钾盐等的碱金属盐;镁盐、钙盐等的碱土金属盐;铵盐;乙醇胺盐;碱性氨基酸盐等,只要能作为医药或食品用途来使用,就没有特别限制。
在本发明中,上述聚谷氨酸可以直接用作血中甘油三酯浓度上升抑制剂。或者,可以在聚谷氨酸中加入例如氧化钛、碳酸钙、蒸馏水、乳糖、淀粉等适当的液体或固体的赋形剂或填充剂后再使用。在这种情况下,聚谷氨酸的配合量没有特别限制,但是优选聚谷氨酸在血中甘油三酯浓度上升抑制剂中的含量为0.01~100质量%,特别优选为0.1~80质量%。
在将本发明的血中甘油三酯浓度上升抑制剂应用于食品、医药品等的用途的情况下,聚谷氨酸可以以单体的形式通过消化道内给药、腹腔内给药、血管内给药、皮内给药、皮下给药等对人和动物进行给药,此外,也可以配合在各种食品、医药品、宠物食品等中进行摄取。作为食品,可以应用在一般食品中,此外,也可以应用到例如美容食品、患者用食品、特定保健用食品等的食品中,其中,这些食品将抑制血中甘油三酯浓度的上升;降低、预防、改善、缓和、治疗高甘油三酯血症、高脂血症和动脉硬化症的发病风险作为概念,并且根据需要具有该意思表示。在作为医药品使用的情况下,可以制成片剂、颗粒剂等的经口用固体制剂,或者内服液剂、糖浆剂等的经口用液体制剂。
此外,在制备经口用固体制剂的情况下,在聚谷氨酸中加入赋形剂,以及必要的话加入粘合剂、崩解剂、润滑剂、着色剂、矫味剂、矫嗅剂等之后,通过常用方法制造片剂、包衣片剂、颗粒剂、散剂、胶囊等。此外,在制备经口用液体制剂的情况下,在加入矫味剂、缓冲剂、稳定剂、矫味剂等之后,通过常用方法制造内服液剂、糖浆剂、酏剂等。
对于上述各剂中的聚谷氨酸的配合量没有特别限制,含量优选为0.01~100质量%,特别优选为0.1~80质量%。
上述各剂中的有效给药(摄取)量为,作为聚谷氨酸,优选每一天服用0.01g/kg体重~1.0g/kg体重。此外,本发明的血中甘油三酯浓度上升抑制剂更优选在进食前或进食中服用。
作为给药或摄取的对象者,只要是对此有需要者,就没有特别限定,优选为空腹时血中甘油三酯的值为100mg/dL以上的人。
实施例
以下,进一步基于实施例对本发明进行详细的说明,但是本发明不限定于此。
制造例1重量平均分子量为190,000的聚谷氨酸的制备
将重量平均分子量为800,000的市售聚谷氨酸(Meiji Food MateriaCo.,Ltd.制)作为初始材料,制作500mL 3(w/w)%水溶液,用盐酸调节至pH 2后,在70℃下保持恒温。恒温开始3小时后,用氢氧化钠水溶液中和至pH 7,随后用排阻限为300k的超滤膜(型号:PBMK,Millipore制)来进行浓缩。此时,浓缩前用试样3倍量的蒸馏水来适当进行加水清洗,并将10倍浓缩液进行冷冻干燥。将冷冻干燥后的试样用以下测定例所示的HPLC法来确定分子量。其结果,得到1.7g重量平均分子量为190,000的聚谷氨酸。
制造例2重量平均分子量为70,000的聚谷氨酸的制备
将重量平均分子量为800,000的市售聚谷氨酸(Meiji Food MateriaCo.,Ltd.制)作为初始材料,制备500mL 3(w/w)%水溶液,用盐酸调节至pH2后,在70℃下保持恒温。恒温开始6小时后,用氢氧化钠水溶液中和至pH 7,随后用排阻限为100k的超滤膜(型号:PBHK,Millipore制)来进行浓缩。此时,浓缩前用试样3倍量的蒸馏水来适当进行加水清洗,并使10倍浓缩液进行冷冻干燥。将冷冻干燥后的试样用以下测定例所示的HPLC法来确定分子量。其结果,得到8.3g重量平均分子量为70,000的聚谷氨酸。
制造例3重量平均分子量为28,000的聚谷氨酸的制备
将重量平均分子量为800,000的市售聚谷氨酸(Meiji Food MateriaCo.,Ltd.制)作为初始材料,制备500mL 3(w/w)%水溶液,用盐酸调节至pH2后,在70℃下保持恒温。之后,在开始8小时后将温度变为90℃。从恒温开始11小时后,用氢氧化钠水溶液中和至pH 7,随后用排阻限为50k的超滤膜(型号:PBQK,Millipore制)来进行浓缩。此时,浓缩前用试样3倍量的蒸馏水来适当进行加水清洗,并使10倍浓缩液进行冷冻干燥。将冷冻干燥后的试样用以下测定例所示的HPLC法来确定分子量。其结果,得到6.3g重量平均分子量为28,000的聚谷氨酸。
聚谷氨酸的定量和分子量测定
聚谷氨酸的定量和分子量测定用HPLC分析来实施,其中,所述HPLC分析使用TSKGel G4000PWXL和TSKGel G6000PWXL的凝胶渗透色谱柱(商品名,Tosoh Corporation制)。分析条件为:在洗脱液中使用0.1M的硫酸钠,流速设为1.0mL/min,柱温设为50℃,UV检测波长设为210nm。此外,在浓度检测中,使用分子量为80万的聚谷氨酸(Meiji Food Materia Co.,Ltd.制)作出校准曲线。此外,在分子量检测中,使用了预先用普鲁兰多糖(pullulan)(商品名:ShodexSTANDRD P-82,昭和电工制)求得重量平均分子量的各种分子量不同的聚谷氨酸(和光纯药工业制(162-21411和162-21401)、SIGMA-ALDRICH制(P-4886和P-4761)、和Meiji Food Materia Co.,Ltd.制(分子量:88万))。
试验例1聚谷氨酸的血中甘油三酯浓度上升抑制作用
作为聚谷氨酸(PGA),使用重量平均分子量为9,000、350,000、800,000(Meiji Food Materia Co.,Ltd.制)以及重量平均分子量为28,000、70,000、190,000(在制造例1~3中制备)的6种试样。
此外,使用8周龄的雄性小鼠(C57BL/6J Jcl:来自Clea Japan,Inc.),每组8只来进行以下试验。
1.经口给药样品的制备
使用卵磷脂(由鸡蛋制得,和光纯药)和白蛋白(来自牛血清,Sigma制)来乳化葡萄糖(关东化学制)和三油精(三油酸甘油酯(Glyceryl trioleate):Sigma制),制备乳液。在该乳液中添加聚谷氨酸试样使得最终浓度为聚谷氨酸试样5(w/w)%、葡萄糖5(w/w)%、三油精5(w/w)%、乳化剂(卵磷脂0.2(w/w)%、白蛋白1.0(w/w)%,从而制备经口给药样品。此外,作为对照样品,制备添加了水来替代聚谷氨酸的样品。
2.经口给药试验
将禁食一晚的小鼠用乙醚麻醉,使用肝素处理过的血细胞比容毛细管(VITREX制),经眼窝静脉进行初期采血。之后,通过经口灌胃针将经口给药样品进行经口给药,在10分钟、30分钟、1小时、2小时之后在乙醚麻醉下经眼窝静脉采血。对于小鼠的经口给药量显示在下表1中。
表1小鼠经口给药量
将通过肝素处理的血细胞比容毛细管采集的血液在冰冻下保存直至血浆分离后,用11,000rpm离心5分钟,得到血浆。从得到的血浆中,用甘油三酯E-test Wako(和光纯药制,GPO·DAOS法)测定血中甘油三酯的浓度。
基于从样品经口给药后开始直至2小时后的血中甘油三酯浓度的各测定结果,将血中甘油三酯浓度的最大值(给药后30分钟或1小时)与初期值(初期采血时)的差(Δ值)定义为最大甘油三酯浓度上升,并显示在表2中。
基于得到的最大甘油三酯浓度上升的值,对于组间在统计学上的显著性差异进行研究,并显示在表2中。在各组间的显著性差异是通过方差分析来确认显著性(P<0.05)的情况下,通过多重比较检验(Bonferroni/Dunn法)来进行相对于对照组的聚谷氨酸(重量平均分子量:9,000以及28,000、70,000、190,000、350,000、800,000)给药组之间的测定。从得到的结果来判断显著性,将p<0.05作为显著性差异。
表2小鼠的最大甘油三酯浓度上升(最大值-初期值)
(方差分析,p<0.05)
*)S.E.:标准误
*)N.S.:不显著
从表2显示的结果可知,聚谷氨酸(重量平均分子量:9,000、28,000、70,000、190,000、350,000、以及800,000)给药组的最大甘油三酯浓度上升均比对照给药组低。此外,重量平均分子量为28,000、70,000、190,000、350,000、800,000的聚谷氨酸给药组,其最大甘油三酯浓度上升显著降低,并且,分子量大的聚谷氨酸对血中甘油三酯浓度上升抑制效果更优异。
此外,如上所述,已知由于血中甘油三酯浓度上升会引起高脂血症,进而引起动脉硬化症。因此,通过聚谷氨酸有效抑制血中甘油三酯浓度的上升,从而能够适合用于高脂血症和动脉硬化症的预防、改善。
工业的可利用性
本发明的血中甘油三酯浓度上升抑制剂具有高甘油三酯血症、高脂血症和动脉硬化症的发病风险的降低、预防、改善、缓和作用。因而,本发明可以在功能性食品、医药品、医疗的领域中加以应用。
尽管将本发明连同其实施方式进行说明,但是除非特别指定,该说明的任意细节并不意在限定本发明,在不违反附属的权利要求所示的本发明的精神和范围的情况下应该进行宽泛地解释。
本申请基于2009年7月16日在日本进行专利申请的特愿2009-168091来要求优先权,在此作为参考并将其内容作为本说明书记载的一部分而引入。
Claims (4)
1.一种血中甘油三酯浓度上升抑制剂,其含有聚谷氨酸作为有效成分。
2.一种用于在血中甘油三酯浓度上升的抑制中使用的聚谷氨酸。
3.一种抑制血中甘油三酯浓度上升的方法,其包括将聚谷氨酸进行给药。
4.一种聚谷氨酸在用于医药品的制造中的用途,其中,
所述医药品具有血中甘油三酯浓度上升抑制效果。
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