CN102380357A

CN102380357A - 贴壁培养细胞层作为固定相的毛细管及其制备方法和用途

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Publication number: CN102380357A
Application number: CN2010102679979A
Authority: CN
Inventors: 凌笑梅; 帕孜来提·亚库甫; 王应; 綦辉; 张颖妹
Original assignee: Peking University
Current assignee: Peking University
Priority date: 2010-08-31
Filing date: 2010-08-31
Publication date: 2012-03-21
Anticipated expiration: 2030-08-31
Also published as: CN102380357B

Abstract

本发明提供了一种将细胞贴附培养于毛细管内壁作为固定相的毛细管、其制备方法以及通过毛细管电泳方法在药物筛选中的用途。针对某些生物活性大分子从细胞中分离纯化时会引起其天然构象的改变，本发明开发了将生物活性大分子超表达的细胞培养在毛细管色谱柱内，细胞贴壁生长后，经固定作为固定相用于研究生物活性大分子与活性配体或化合物相互作用以及药物筛选的毛细管电泳方法。

Description

贴壁培养细胞层作为固定相的毛细管及其制备方法和用途

技术领域

本发明涉及毛细管及其制备方法和应用，尤其涉及内壁贴附有作为固定相的活细胞的毛细管色谱柱、其制备方法以及所述毛细管色谱柱通过毛细管电泳在生物医药领域例如药物筛选方面的用途。

背景技术

大多数生物分子在发挥其生理功能时，都和其目标分子发生特异性相互作用，例如酶和底物、凝集素和多糖蛋白、受体和激素、抗原和抗体、调节蛋白和DNA等。这些特异性相互作用是产生生命现象的基础，是化学和生物化学体系中广泛存在的现象。无论是生物化学的循环级联反应与酶的高选择催化特性，遗传信息的传递、表达与调控，还是细胞增殖、分化与衰老，免疫中的信号、物质传递与调控，均离不开生物分子间的相互作用。对生物分子及其功能配体相互作用的表征已成为生物化学研究的重点之一，这有助于深入认识生物大分子间各种功能的结构基础及作用机制，并有助于新药的发现。目前开发的一些临床使用的新药就是建立在对药物-受体相互作用相当清楚的基础之上。因此，研究生物分子间相互作用的方法至关重要。

研究生物分子间相互作用的方法可分为两大类：一类是直接测定法，包括UV吸收、荧光强度、核磁共振(NMR)、傅立叶变换红外光谱(FTIR)、质谱(MS)、拉曼光谱、电位法、热分析法、表面等离子共振(SPR)等；另一类是分离分析法，包括滤膜分析法、超滤法、超速离心法、色谱法(液相色谱法和薄层色谱法)、电泳法(平板电泳法和毛细管电泳)。后者的优点是：能同时提供相互作用的两种分子以及复合物的信息，避免了共存物质的干扰。分离分析法所包括的滤膜分析法、超滤法、超速离心法、色谱法和平板电泳法常常用来研究配体-受体的相互作用，但它们存在一些问题，比如体积改变、Donnan效应、非特异性吸附、结合分子从膜上渗漏、分析时间长、样品消耗大以及由沉淀、后溶解和粘度引起的误差；而以毛细管电泳为基础的技术则是近年来用得较多的一种。

用于研究生物分子间相互作用，毛细管电泳(Capillary Electrophoresis，CE)具有以下优点：分离效率高，效率为10⁵-10⁶板/米；分析时间短，几十秒至十几分钟就可以完成分离；样品消耗量少，进样所需体积可小到1μL，消耗体积在1-50nL之间；可以同时研究多种分子对一种分子的结合行为；而且能够在生理条件或者接近生理条件的缓冲液中运行，可以得到较为真实的生物分子相互作用的信息；可通过选用不同的分离模式来适用不同的分离对象，运用灵活；经济，操作费用低；洁净，通常使用水溶液，对环境无害；自动化程度较高。其中，高效毛细管电泳(High Performance CapillaryElectrophoresis，HPCE)用于研究相互作用的形式有预平衡区带电泳、动力学平衡区带电泳和毛细管电色谱。近几年又陆续出现毛细管内细胞固定化的方法，使得无法分离的受体能够固定于毛细管内，用于配体筛选。

趋化因子受体是七次跨膜G蛋白偶联受体(GPCR)，当它与配体相结合时会引起一系列信号途径的激活，促使细胞形成伪足并参与细胞的游走与活化。CC趋化因子受体4(CC Chemokine Receptor 4，CCR4)的配体属于CC趋化因子亚家族，主要有CCL22/MDC(MacrophageDerived Chemokine)以及CCL 17/TARC(Thymus and Activation RelatedChemokine)。在外周血T细胞，自然杀伤细胞，单核巨噬细胞及嗜碱性粒细胞表面均有表达。鉴于CCR4在各种变态反应性炎症和T细胞淋巴瘤中的不良作用，人们寻找CCR4拮抗剂，如小分子拮抗剂，细胞因子修饰物以及抗体。

作为一种新型的拮抗剂，内酰胺类化合物(化合物A)

具有对CCR4的高选择性，高趋化抑制性和强结合能力，但是由于其在合成过程和体内毒性等方面的一系列相关问题，有必要寻求作用更好，合成更简单的化合物，这就需要寻找合适的药物筛选方法。

另外，值得注意的是CCR4与很多生物大分子一样，很难从细胞中分离纯化并保持分子构象。这也是通过药物筛选寻找CCR4拮抗剂的研究中所面临的技术问题之一。

发明内容

本发明通过开发在毛细管内培养活细胞以及进一步将活细胞贴附于毛细管的内壁并进行固定处理的方法，首次提供了一种新型的毛细管、制备这种具有经过固定处理的细胞层作为固定相而该细胞层表面的受体保持天然构象和生物活性的毛细管的方法，并且开发了将这种新型的毛细管通过毛细管电泳在生物技术领域比如药物筛选方面的用途。

本发明一方面提供了一种毛细管，该毛细管内壁的至少一部分上具有活细胞层。经过进一步的固定处理使该细胞层具有优良的贴壁性能，并且细胞层表面的受体保持天然构象和生物活性。

本发明另一方面提供了一种制备所述毛细管的方法，其中包括对注入毛细管内的细胞进行培养，使得所述细胞贴附于毛细管的内壁而得到贴附有活细胞层的毛细管。该方法还可进一步包括对贴附的活细胞层作进一步的固定处理使得所得到的细胞层具有优良的贴壁性能，并且细胞层表面的受体保持其天然构象和生物活性。

另外，本发明还涉及一种毛细管电泳系统，该系统包括：本发明所述的贴附有细胞层的毛细管；用于将样品导入所述毛细管的装置；对导入所述毛细管的所述样品进行电泳操作的装置；以及对所述样品进行检测的装置。

同时，本发明还提供了一种毛细管电泳的方法，其中毛细管内壁贴附有活细胞并经固定处理后作为固定相。该方法包括：提供本发明所述的毛细管；提供电泳装置；将样品导入所述毛细管；对所述样品进行电泳分析；以及对所述样品进行检测分析。该电泳方法适用于，例如用于研究分子间相互作用的毛细管电泳、阵列毛细管电泳、芯片毛细管电泳、阵列芯片毛细管电泳、毛细管液相色谱、表面等离子共振技术(SPR)及其他微流路方法。

进一步，本发明还提供了上述毛细管或者毛细管色谱柱在生物技术领域的用途。所述生物技术领域包括，例如筛选药物、生物活性大分子与活性配体相互作用或与化合物相互作用、药物成分分析、药物活性成分纯化及鉴定等方面。

本发明所建立的活细胞贴附毛细管内壁并固定后用于药物筛选的方法能够用于对化合物与受体的相互作用进行定性定量研究。比起其它毛细管内细胞固定化方法，本发明所提供方法的优点在于：(1)贴附于毛细管内壁的细胞可抵抗高压冲洗不脱落；(2)电泳过程中无细胞脱落，固定相性质稳定；(3)色谱峰形理想，可用NLC技术对受体配体相互作用进行定量分析。

本发明通过将细胞贴附于毛细管内壁而实现了对难以分离纯化的高分子受体蛋白的固定化，进一步实现了对高分子受体蛋白的亲和色谱研究。其次，此方法因具有毛细管电泳所具备的快速、高效、经济、灵敏、样品用量少且不用纯化等优点而区别于其它药物筛选方法。一些目前常用的药物筛选技术仅能提供IC₅₀值，而本发明的方法能提供结合常数等动力学参数。

本发明毛细管及其相关方法也适用于其他的领域并具有明显的技术优势，例如：阵列毛细管电泳高通量药物筛选法筛选组合化学库或者是传统中药中的前体药物。

附图说明

图1显示根据本发明的一种实施方式用于药物筛选时设计和合成化合物的结构。

图2显示根据本发明的一种实施方式通过共聚焦显微镜采集的CCR4-EGFP转染HEK293细胞的图像(A至G)。其中：A为培养皿贴壁生长表达CCR4-EGFP的HEK293细胞图像，CCR4-EGFP定位于细胞膜；B为培养皿贴壁生长表达CCR4-EGFP的HEK293细胞的核染色图像；C为A和B图像的重叠，D为在毛细管内壁CCR4-EGFP转染HEK293细胞层的图像；E、F和G为毛细管内细胞层图像的局部放大，其中E显示毛细管内壁上贴壁生长表达CCR4-EGFP的HEK293细胞，CCR4-EGFP定位于细胞膜，F显示毛细管内壁上贴壁生长表达CCR4-EGFP的HEK293细胞的核染色，G为E和F图像的重叠。

图3为根据本发明的具体实施方式的毛细管电泳图(A、B和C)，其中：谱图A为DMSO和内酰胺类化合物(化合物A)在未涂层毛细管色谱柱及CCR4超表达的HEK293细胞涂层毛细管色谱柱的毛细管电泳图，其中峰1和峰2分别为DMSO在未涂层毛细管色谱柱及CCR4超表达的HEK293细胞涂层毛细管色谱柱的毛细管电泳图；峰3和峰4分别为化合物A在未涂层毛细管色谱柱及CCR4超表达的HEK293细胞涂层毛细管色谱柱的毛细管电泳图；插图为化合物A在37.35min、41.86min、46.12min、51.53min的紫外光谱图，四条光谱曲线基本重合，表明化合物A(峰4)在细胞涂层管上具有较强亲和作用，此展宽峰自始至终为同一个化合物即化合物A。谱图B为不同浓度的化合物A(200，500，750，1000和2000μM)在涂细胞毛细管色谱柱上的毛细管电泳图。谱图C为化合物4，7，9和19在未涂层毛细管色谱柱及CCR4超表达的HEK293细胞涂层毛细管色谱柱的毛细管电泳图，其中A系列为化合物4，7，9和19在未涂层毛细管色谱柱的毛细管电泳图，B系列为化合物)4，7，9和19在CCR4超表达的HEK293细胞涂层毛细管色谱柱的毛细管电泳图。

具体实施方式

在下文中结合一些具体的实施方式对本发明作进一步的、示例性的描述，包括在毛细管内培养细胞并将其贴附于毛细管内表面进而制备以活细胞层作为固定相的毛细管的方法，以及这种新型的毛细管通过毛细管电泳在生物技术领域比如药物筛选方面的用途。

在本发明所包括的一种的实施方式中，将一种细胞，例如生物活性大分子超表达的细胞，培养在毛细管内并使得细胞贴壁生长，从而获得其内壁贴附有活细胞的毛细管。

在一个实施方式中，对毛细管进行前处理，在无菌条件下对所述毛细管进行涂层、冲洗及冲干的处理。在一个实施方式中，还进一步包括在毛细管内注入浓度为例如0.1-1.0mg/mL的多聚赖氨酸(PLL)溶液，然后孵化1.5-4.0小时。

在一个实施方式中，将经过适当培养的细胞注入毛细管中进行进一步的培养，例如，将经电转后的细胞被置于培养基中悬浮细胞至密度例如为1.0×10⁵-1.0×10⁸个/mL，随后注入经前处理的毛细管内，再将该毛细管浸入培养基(例如含有10％FBS的RPMI 1640培养基)，在37℃，5％CO₂孵箱内培养，其培养时间为例如10-48小时。

在一个实施方式中，当生物活性大分子超表达的细胞在毛细管内贴壁生长后，对其进行固定处理，使得所述细胞表面表达的受体保持天然构象和生物活性，牢固地贴附于所述毛细管的内表面。该固定处理步骤包括，对活细胞层采用例如4％的多聚甲醛进行处理，其处理时间可为例如10-40分钟。

本发明所提供的一种实施方式还包括采用合适的细胞贴附方法。针对CCR4从细胞膜分离纯化时其天然构象会发生改变的情况，在一个非限制性的实施方式中，选择了对细胞活性影响小、操作条件温和、效果持久的离子吸附法作为CCR4超表达细胞的促贴附手段，将细胞培养在毛细管内。

在提供上述将细胞贴附于毛细管色谱柱内壁的方法的同时，本发明的实施方式还包括将所述毛细管色谱柱用于生物技术例如包括药物筛选的操作方法。在本发明的一种实施方式中，根据特定的操作条件，以化合物A为阳性对照以及二甲基亚砜(DMSO)为阴性对照进行了方法验证。结果表明，阳性化合物A与阴性对照DMSO与在CCR4超表达细胞贴附的毛细管色谱柱内的色谱行为完全不同，据此可以定性判断化合物与受体之间是否存在相互作用。

本发明所提供的一种实施方式还包括将所述毛细管用于毛细管电泳的毛细管电泳系统及其方法。所述毛细管电泳方法包括：提供本发明所述的毛细管，其内壁贴附有经过固定处理并作为固定相的细胞层；提供电泳装置；将样品导入所述毛细管；对所述样品进行电泳分析；以及对所述样品进行检测分析。

在本发明的一些实施方式中，将本发明的毛细管用于毛细管电泳分析并通过采用不同浓度的化合物A来验证峰型是否符合非线性色谱理论(Non-linear Chromatography，NLC)的特征峰型，以此定量计算具有相互作用化合物的动力学参数。

在本发明的另一些实施方式中，为了真实、可靠并且快速地反映受体和配体的相互作用，本发明建立将超表达CCR4受体活细胞贴附毛细管并固定作为固定相研究分子间相互作用的方法。还针对不同化合物进行了活性筛选。例如，在一个实施方式中，针对图1所示根据CCR4与其配体结合的结构特点通过计算机辅助设计新合成的23个化合物，进行了活性筛选。所述化合物根据母核的不同可分为两类：硫脲类和碳酰化2-氨基噻唑类(参见图1：母核I的化合物1-21和母核II的化合物22-23)。

另外，采用NLC技术对筛选出的活性化合物进行了结合常数、结合速率常数、解离速率常数以及容量因子的定量计算，同时对这些化合物进行了趋化抑制研究。结果表明，这些筛选出的活性化合物能够不同程度地抑制CCL22或CCL17介导HEK293细胞的趋化运动，表明本发明最新建立的活细胞贴附毛细管色谱柱内壁的HPCE可用于筛选化合物的生物活性。

实施例

下面结合具体实施例，进一步阐明本发明。应理解，这些实施例仅用于示例说明本发明而不用于限制本发明的范围。

实施例1、CCR4超表达细胞的培养

HEK293细胞培养在含有10％牛胎血清(FBS，Canada GIBCO)的RPMI1640培养基中，其中含有青霉素(100U/mL)和链霉素(100μg/mL)。将400μL HEK293细胞(4×10⁶)瞬时转染30μg CCR4-EGFP质粒；此过程通过电脉冲发生器(Electro Square Porator ECM830，BTX，San Diego，CA)进行，其操作条件包括电压123V，脉冲时间20sm。HEK293细胞电转染CCR4-EGFP后，细胞表面CCR4-EGFP蛋白的表达情况可见图2(A，B，C)。证明大多数细胞表面都表达了受体CCR4。

实施例2、贴附CCR4超表达活细胞的石英毛细管色谱柱的制备

石英毛细管色谱柱依次用甲醇、0.1M NaOH和去离子水冲洗和消毒。在无菌操作条件下冲干毛细管后，注入0.2mg/mL的多聚赖氨酸(PLL)并孵化1.5-4.0小时待用。经电转后的细胞回到培养基悬浮细胞至密度为1.5×10⁷个/mL，并注入经前处理的毛细管色谱柱内，毛细管色谱柱浸入含有10％FBS的RPMI 1640培养基中，在37℃，5％CO₂孵箱内培养12小时。为了保持细胞的结构，贴附细胞的毛细管色谱柱需要用4％的多聚甲醛固定10-40min，再用PBS冲洗后待用。这些CCR4超表达细胞贴壁生长于毛细管色谱柱的内壁效果见图3(D，E，F，G)。结果表明CCR4超表达细胞在毛细管色谱柱内贴壁生长良好，细胞固定涂层均匀。此方法制备的毛细管色谱柱在数月内未见细胞脱落，制备后4℃于PBS浸泡保存30天仍保持着药物筛选活性。

实施例3、新筛选方法的验证

内酰胺类化合物A作为新型的CCR4拮抗剂，具有对CCR4的强亲和力以及良好的趋化抑制活性。因此，在本实验中将化合物A作为阳性化合物，DMSO为阴性化合物，分别研究了二者在未涂层毛细管色谱柱以及CCR4表达细胞涂层毛细管色谱柱中的色谱行为，实验结果如图3A所示。比较DMSO在两种色谱柱上的电泳图发现，峰高不变，峰形稍有展宽。化合物A在细胞包被毛细管色谱柱中电泳峰的峰高明显降低，峰展宽并拖尾，表明阳性化合物A与固定相发生了很强的亲和作用。峰4中不同时间点截取的紫外光谱图无明显区别，表明此展宽峰自始至终为同一个化合物即化合物A。

亲和色谱中的色谱峰形的变化是化合物与固定相之间的特异性和非特性相互作用的结果。通常，由于化合物与固定相的解离速率高于结合速率，使得色谱峰表现为展宽，拖尾的非高斯峰形。在色谱容量一定的情况下，化合物峰形偏离高斯峰的程度与化合物的浓度相关。而NLC理论正好解释了浓度与峰形变化的关系以及各种动力学参数的计算方法。本发明用CCR4超表达细胞贴壁的毛细管色谱柱对不同浓度(200μM，500μM，750μM，1000μM，2000μM)的化合物A以及500μM的待筛化合物进行电泳分析。所得的不对称峰型如图3中的谱图B所示，可用非线性色谱模型进行解释，并用软件拟合峰型，计算结合常数(K)、结合速率常数(k_a)、解离速率常数(k_a)以及容量因子(k′)(结果见表1)。

表1、不同浓度化合物A与CCR4相互作用的动力学参数

实施例4、毛细管色谱柱在化合物筛选中的应用

本发明所建立的药物筛选新方法被用于筛选如图1所示的23个根据CCR4与其配体结合的结构特点通过计算机辅助设计的新合成的化合物。在本实施例中，所用毛细管电泳仪为Beckman P/ACETM MDQ系统(BeckmanCoulter，Fullerton，CA，USA)，配有一个二极管阵列检测器以及32 KaratSoftware工作站(version 5.0，Beckman)，外层为聚酰亚胺涂层的熔融石英毛细管。分别用未涂层毛细管色谱柱以及CCR4表达细胞包被毛细管色谱柱对这些化合物进行电泳分析，观察到化合物1，2，3，5，7，9，10，11，13，14，15，16，18，20，22，23在两种毛细管色谱柱中的色谱峰形基本保持不变，和阴性化合物DMSO在细胞包被管中的峰形变化一致。图3中谱图C显示了其中的代表性化合物7和9在两种毛细管中的对比峰形，可见这些化合物与固定相无相互作用，属于阴性化合物。相反，化合物4，6，8，12，17，19和21在细胞包被毛细管色谱柱中的色谱峰形变化与阳性化合物A类似，表现为峰高降低、峰展宽，表明这些化合物与固定相具有特异性或非特异性的相互作用。图3中谱图C所示化合物4和19电泳图代表了此类化合物色谱峰形变化情况。为了比较不同化合物在同一浓度下的活性而选择了能够对所有化合物进行灵敏检测的浓度进行电泳分析，并通过NLC理论对这7个活性化合物的动力学参数进行计算，结果如表2所示。

表2、阳性化合物的动力学参数和hCCL17和hCCL22的趋化抑制率

与此同时还对定性筛选出的这7个化合物进行了趋化抑制实验。HEK293细胞用电穿孔法分别转染pcDB-CCR4，转染细胞继续培养36小时用于趋化实验。趋化因子人CCL17(TARC)，人CCL22(MDC)用含0.1％BSARPMI 1640培养基进行稀释，浓度分别为80ng/mL和10ng/mL。化合物用DMSO稀释成1mM，再用0.1％BSA RPMI 1640培养基进行稀释，浓度为10μM。将Boyden趋化小室的底层板放在水平台面上，将趋化因子人CCL17，人CCL22加入小孔中，27.5μL/孔。将10μm孔径的用鼠尾胶原包被的PVF-free聚碳膜平放在加完样品的底层板上。用0.1％BSA RPMI 1640将用于趋化实验的转染细胞的浓度调整至1×10⁶/mL，将细胞悬液加入上层板的孔中，55μL/孔。细胞在加样前，需与化合物在37℃共孵育30分钟，化合物的终浓度为1μM。将加完样的趋化小室放入37℃，5％CO₂孵箱中孵育5小时。趋化完毕后，在盛有PBS的平皿中浸湿聚碳膜的非迁移细胞面，再用清洗片刮去非迁移细胞面上的细胞，用三步法染色试剂盒固定、染色聚碳膜。水洗去游离染料后，显微镜高倍镜下随机取5个视野，进行细胞计数。计算实验组和底层板只加0.1％BSARPMI 1640培养基的对照组的趋化细胞数的比值，得出趋化指数。趋化指数大于2即被认为有趋化活性。相应的计算公式为：

趋化抑制实验结果(见表2)显示，这些筛选出的活性化合物能够不同程度地抑制CCL22或CCL17介导HEK293细胞的趋化运动。

与CCR4有相互作用的化合物中有六个化合物的Ar位由萘环取代，而Ar位未由萘环取代的化合物均未表现出对CCR4的亲和活性，表明萘环对化合物的活性具有一定的决定性作用。23个化合物中绝大多数的Bn位由苯环所取代，然而母核I中的叔胺被咪唑基或吡咯烷酮取代后的化合物(17，19)仍然表现出了较好的活性。活性化合物的A位被烷烃取代，但无结构特异性，表明A位取代基对化合物活性影响较小。

本领域的普通技术人员应该能够理解，本文所描述在毛细管内培养和贴附活细胞层的方法不仅适用于一般的毛细管，也适用于例如微流路芯片和微流路传感芯片的其他微流路。另外，本文所描述的毛细管电泳方法，同样适用于阵列毛细管电泳、芯片毛细管电泳、阵列芯片毛细管电泳、毛细管液相色谱、微流路芯片和微流路传感芯片、表面等离子共振技术(SPR)等其他微流路分析方法。再有，本文所描述的用途包括但不限于医药学领域有关分子间相互作用的研究和药物筛选的目的，还适用于其他生物技术领域的分离、检测和鉴定的目的。

以上，结合说明书附图针对一些本发明的一些具体实施方式进行了描述，只是用作示例和解释。应当理解，本发明的范围不受这些具体实施方式的限制。对本文所描述内容的修改或调整就本领域普通技术人员来说并不偏离本发明的精神和主旨，因而属于本发明的范围。

Claims

1.一种毛细管，其内壁上具有细胞层，其中所述细胞层表面的受体保持天然构象和生物活性。

2.根据权利要求1的毛细管，其中所述细胞层作为固定相牢固地贴附于所述毛细管的内壁。

3.根据权利要求2的毛细管，其中所述细胞层通过涂层贴附于所述毛细管的内壁。

4.根据权利要求1的毛细管，其中所述细胞为CCR4超表达细胞。

5.根据权利要求1的毛细管，其中所述毛细管为熔融石英毛细管。

6.一种制备权利要求1-5中任一项所述毛细管的方法，包括以下步骤：

对毛细管进行前处理；

对细胞进行培养，并将经过培养的所述细胞注入所述毛细管；

对所述细胞在所述毛细管内进行培养；

将所述细胞贴附于所述毛细管的内壁；以及

对贴附于所述毛细管的所述细胞进行固定处理使得所述细胞牢固地贴附于所述毛细管的内壁，并且使得所述细胞表面表达的受体保持天然构象和生物活性。

7.根据权利要求6的方法，其中所述前处理步骤包括在无菌条件下对所述毛细管进行涂层、冲洗及冲干的处理。

8.根据权利要求6的方法，其中所述固定处理步骤包括对所述细胞采用多聚甲醛进行处理。

9.一种毛细管电泳系统，包括：

权利要求1-5中任一项所述的毛细管；

用于将样品导入所述毛细管的装置；

对导入所述毛细管的所述样品进行电泳操作的装置；以及

对所述样品进行检测的装置。

10.一种毛细管电泳的方法，包括：

提供权利要求1-5中任一项所述的毛细管；

提供电泳装置；

将样品导入所述毛细管；

对所述样品进行电泳分析；以及

对所述样品进行检测分析。

11.一种权利要求1-5中任一项所述毛细管在生物技术领域的用途，其中包括使用所述毛细管进行电泳分析。

12.根据权利要求11的用途，其中所述生物技术包括药物筛选、生物活性大分子与活性配体相互作用或与化合物相互作用、药物成分分析、药物活性成分纯化及鉴定。

13.根据权利要求11的用途，其中所述电泳分析为毛细管电泳或阵列毛细管电泳。