CN102351944B - 一种超声波辅助酶法提取苜蓿叶蛋白的方法 - Google Patents
一种超声波辅助酶法提取苜蓿叶蛋白的方法 Download PDFInfo
- Publication number
- CN102351944B CN102351944B CN 201110343615 CN201110343615A CN102351944B CN 102351944 B CN102351944 B CN 102351944B CN 201110343615 CN201110343615 CN 201110343615 CN 201110343615 A CN201110343615 A CN 201110343615A CN 102351944 B CN102351944 B CN 102351944B
- Authority
- CN
- China
- Prior art keywords
- ultrasonic
- leaf
- leaf protein
- enzyme
- juice
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Expired - Fee Related
Links
Images
Abstract
本发明公开了一种超声波辅助酶法提取苜蓿叶蛋白的方法，属于植物蛋白技术领域。该方法包括：以紫花苜蓿的苜蓿叶为原料，清洗后进行打浆，过滤后得到汁液和浆渣；对汁液进行超声波辅助酶法处理。在汁液中加入纤维素酶并同步超声提取得提取液。具体条件为加酶量为每
100
毫升所述汁液用
3~4
克纤维素酶，超声功率
100~250W,
频率为
20~40kHz
，温度
50~55
℃，超声持续作用，时间
30~40min
，得到提取液；在灭酶后溶液絮凝。然后在
4000~5000r/min
的离心作用下持续处理
15~20min
，得到叶蛋白粗提物和上清液；将叶蛋白粗提物提取后进行干燥至恒重，即得到苜蓿叶蛋白产品。本发明工艺过程简单，条件温和，能耗低，提取时间短，提取率高，操作控制容易，便于大规模工业化生产。
Description
技术领域
本发明涉及提取蛋白质的方法，尤其涉及一种超声波辅助酶法提取苜蓿叶蛋白的方法。具体涉及一种以紫花苜蓿叶为原料，提取苜蓿叶蛋白的技术，属于植物蛋白技术领域。
背景技术
叶蛋白是以新鲜的绿色植物茎叶为原料，经压榨取汁、分离汁液中蛋白质和浓缩干燥而制备的蛋白质浓缩物(leaf protein concentration，简称LPC)。苜蓿中含有丰富的叶蛋白，其营养丰富，具有防病、治病、防衰抗老、强身健体等多种生理功能；同时，苜蓿叶蛋白的氨基酸组成齐全且配比合理，与联合国粮农组织推荐的成人氨基酸模式基本相符，可作为儿童和成人的食用蛋白源和食品添加剂，被FAO认为是一种高质量的食品。
但目前苜蓿叶蛋白提取方法大多为加热絮凝法、酸法、碱法、有机溶剂法、酶法及发酵酸法等，加热絮凝法易使蛋白质高温发生变性，溶解度差，使其用途受到限制；酸法、碱法、有机溶剂法易使制得的叶蛋白产品存在大量的酸、碱和有机溶剂污染，给后续工作带来很多麻烦；酶法提取条件较温和，但提取率不高，提取速度较慢；发酵酸法提取是利用发酵产生的有机酸使蛋白质沉淀，条件温和，但缺点是提取时间长且操作繁琐。上述几种方法的局限，使得叶蛋白的提取成本高，品质不够稳定，需要进一步的精制。
超声波是一种弹性波，它能产生并传递强大的能量。超声波技术可大大提高提取率和提取速度，是由于超声波具有一系列的力学、热学、电磁学和化学的超声效应，如机械效应、空化效应、热效应和化学效应等。其中超声波的空化效应促使溶剂更大程度的渗入细胞中，在振动处于稀疏状态时，超声波在植物组织细胞里比电磁波穿透更深，停留时间也更长，提高物质传递速度；而且它的次级效应如机械振动、乳化、扩散、击碎和化学效应等可使细胞壁破裂，而加速植物中有效成分的扩散和释放。被浸提的有效成分在被破碎瞬间生物活性保持不变，同时提高破碎速度和提取率。超声波能够产生增溶作用而被广泛应用于有效成分的强化提取，具有成本低、设备简单、操作容易、提取率高等优点。酶法提取反应条件较温和，且能更多地保留蛋白质的营养价值。因此，利用超声波辅助酶法提取叶蛋白可以比较高效、节能和快速地从苜蓿叶中提取优质蛋白质。
超声波辅助提取工艺已应用于植物性蛋白的制备中，如CN 102002111A的发明专利提供了采用超声波辅助稀碱液提取紫菜蛋白和多糖。但是到目前为止，还没有应用超声波辅助酶法提取苜蓿叶蛋白的成熟规范化技术。
发明内容
为了解决我国植物蛋白资源匮乏，苜蓿等大量优质牧草仅用作饲料而造成资源浪费的问题，本发明实施方式提供一种超声波辅助酶法提取苜蓿叶蛋白的方法，即采用超声辅助酶法提取苜蓿叶蛋白，优化提取工艺，达到以低耗能、无污染及低成本提取叶蛋白。
实现上述目的技术方案为：
本发明实施方式提供一种超声波辅助酶法提取苜蓿叶蛋白的方法，该方法包括：
(1)加工原料：采用新鲜的初花期紫花苜蓿，取其植株叶片为加工原料；苜蓿刈割后应尽快加工处理，若需要短时间保存，应装入保鲜袋封口，并置于5℃左右冷藏，以免由于叶子本身的呼吸作用和微生物的污染而使苜蓿叶蛋白产量和品质降低。
(2)清洗、粉碎：用自来水清洗2～3次，清洗过程中去除苜蓿叶原料中枯萎、变黄、腐烂和有病虫害的叶子。将清洗好的叶子切成1cm的小段；
(3)打浆：按重量比苜蓿叶∶水＝1∶2的比例加水，放入组织捣碎机中均匀打浆，打浆时间为3分钟。采用140目尼龙滤布过滤，得苜蓿汁液；
(4)超声波辅助酶解：提取叶蛋白的酶采用纤维素酶，将纤维素酶加入(3)得到的苜蓿汁液中，加酶量为每100毫升所述汁液用3～4克纤维素酶，用食品酸味剂调汁液pH为4.5～5.5，充分搅拌混匀后放入超声波提取器中超声处理，得到提取液；
(5)灭酶：将(4)得到的提取液在85℃下灭酶10min；
(6)絮凝、叶蛋白凝聚物分离：在灭酶后溶液中加入食品酸味剂调节其pH值为4.0，静置5小时。然后在4000～5000r/min的离心作用下持续处理15～20min，得到叶蛋白粗提物和上清液；
(7)干燥：将步骤(6)叶蛋白凝聚物干燥至恒重。即得到苜蓿叶蛋白产品。
步骤(1)所述初花期苜蓿包括刈割后第二茬或第三茬初花期新鲜苜蓿。
步骤(4)所述的纤维素酶的活力为8000U/g，纤维素酶活力单位定义为在37℃，pH值为5.5的条件下，每分钟从浓度为4mg/mL的羧甲基纤维素钠溶液中降解释放1umol还原糖所需的酶量为一个酶活力单位(U)。
步骤(4)所述的超声波提取条件为：超声功率100～250W，频率为20～40kHz，温度50～60℃，超声持续作用，时间30～40min。
步骤(6)所述的食品酸味剂为柠檬酸、苹果酸和酒石酸中的一种。
步骤(7)中的干燥方法为热风干燥、真空干燥和冷冻干燥中的一种。
本发明与现有技术相比，具有以下有益效果：
1、超声波辅助酶法与加热絮凝法相比，条件温和，蛋白质提取率高，尤其是所得到的苜蓿叶蛋白产品质量高，不会发生蛋白质变性，溶解度高，适于作为食品添加剂应用在食品工业中。
2、超声波辅助酶法与酸法、碱法及有机溶剂法相比，不会使蛋白产品因加入大量酸、碱及有机溶剂造成污染，得到的蛋白产品适于作为食品添加剂应用在食品工业中。
3、超声波辅助酶法与酶法相比，可快速、高效、节能地从苜蓿叶中提取蛋白质，所得的蛋白质提取率高、色泽较浅、稳定性好。
4、超声波辅助酶法与发酵酸法相比，工艺过程简单，周期短，提取速度快，提取率较高。
5、本发明原料来源广泛，且成本较低，采用超声波辅助酶法提取苜蓿叶蛋白，为缓解国内植物蛋白资源的短缺和现有资源的有效利用提供了一条新的途径。
附图说明
图1超声波辅助酶法提取苜蓿叶蛋白的工艺流程图
具体实施方式
实施例1
(1)加工原料：采用新鲜的初花期苜蓿，取其植株叶片为加工原料，所述初花期苜蓿包括刈割后第二茬或第三茬初花期新鲜苜蓿。苜蓿刈割后应尽快加工处理，若需要短时间保存，应装入保鲜袋封口，并置于5℃左右冷藏，以免由于叶子本身的呼吸作用和微生物的污染而使苜蓿叶蛋白产量和品质降低。
(2)清洗、粉碎：用自来水清洗3次，清洗过程中去除苜蓿叶原料中枯萎、变黄、腐烂和有病虫害的叶子。将清洗好的叶子切成1cm的小段；
(3)打浆、榨汁：按重量比苜蓿叶∶水＝1∶2的比例加水，放入组织捣碎机中均匀打浆，打浆时间为3分钟。采用140目尼龙滤布分离法过滤，得苜蓿汁液；
(4)超声波辅助酶解：提取叶蛋白的酶采用纤维素酶，将纤维素酶加入(3)得到的苜蓿汁液中，加酶量为每100毫升所述汁液用4克纤维素酶，用柠檬酸调汁液pH为5，充分搅拌混匀后放入超声波提取器中超声提取，超声波提取条件为：超声功率220W，频率为30kHz，温度50℃，超声持续作用，时间40min，得到提取液；
上述提取液中含有酶活力为8000U/g的纤维素酶，纤维素酶活力单位定义为在37℃，pH值为5.5的条件下，每分钟从浓度为4mg/mL的羧甲基纤维素钠溶液中降解释放1umol还原糖所需的酶量为一个酶活力单位(U)。
(5)灭酶：将(4)得到的提取液在85℃下灭酶10min；
(6)絮凝、叶蛋白凝聚物分离：在灭酶后溶液中加入柠檬酸调节其pH值为4.0，静置5小时。然后在4000r/min的离心作用下持续处理20min，得到叶蛋白粗提物和上清液；
(7)干燥：将步骤(6)叶蛋白凝聚物在50℃下的恒温烘箱中干燥至恒重。即得到苜蓿叶蛋白产品。
实施例2
(1)加工原料：同实施例1
(2)清洗、粉碎：同实施例1
(3)打浆、榨汁：同实施例1
(4)超声波辅助酶解：提取叶蛋白的酶采用纤维素酶，将纤维素酶加入(3)得到的苜蓿汁液中，加酶量为每100毫升所述汁液用3克纤维素酶，用苹果酸调汁液pH为4.5，充分搅拌混匀后放入超声波提取器中超声提取，超声波提取条件为：超声功率200W，频率为30kHz，温度55℃，超声持续作用，时间30min，得到提取液；
上述提取液中含有酶活力为8000U/g的纤维素酶，纤维素酶活力单位定义为在37℃，pH值为5.5的条件下，每分钟从浓度为4mg/mL的羧甲基纤维素钠溶液中降解释放1umol还原糖所需的酶量为一个酶活力单位(U)。
(5)灭酶：同实施例1
(6)絮凝、叶蛋白凝聚物分离：在灭酶后溶液中加入苹果酸调节其pH值为4.0，静置5小时。其它步骤同实施例1
(7)干燥：将步骤(6)叶蛋白凝聚物用真空干燥法干燥至恒重。即得到苜蓿叶蛋白产品。
实施例3
(1)加工原料：同实施例1
(2)清洗、粉碎：同实施例1
(3)打浆、榨汁：同实施例1
(4)超声波辅助酶解：提取叶蛋白的酶采用纤维素酶，将纤维素酶加入(3)得到的苜蓿汁液中，加酶量为每100毫升所述汁液用3.5克纤维素酶，用酒石酸调汁液pH为5，充分搅拌混匀后放入超声波提取器中超声提取，超声波提取条件为：超声功率250W，频率为30kHz，温度50℃，超声持续作用，时间40min，得到提取液；
上述提取液中含有酶活力为8000U/g的纤维素酶，纤维素酶活力单位定义为在37℃，pH值为5.5的条件下，每分钟从浓度为4mg/mL的羧甲基纤维素钠溶液中降解释放1umol还原糖所需的酶量为一个酶活力单位(U)。
(5)灭酶：同实施例1
(6)絮凝、叶蛋白凝聚物分离：在灭酶后溶液中加入酒石酸调节其pH值为4.0，静置5小时。然后在5000r/min的离心作用下持续处理15min，得到叶蛋白粗提物和上清液；
(7)干燥：将步骤(6)叶蛋白凝聚物用冷冻干燥法干燥至恒重。即得到苜蓿叶蛋白产品。
Claims (1)
1.一种超声波辅助酶法提取苜蓿叶蛋白的方法，其特征在于包括下列步骤：
（1）加工原料：采用新鲜的初花期紫花苜蓿，取其植株叶片为加工原料；
（2）清洗、粉碎：用自来水清洗2~3 次，清洗过程中去除苜蓿叶原料中枯萎、变黄、腐烂和有病虫害的叶子，将清洗好的叶子切成 1cm 的小段；
（3）打浆：按重量比苜蓿叶：水=1：2的比例加水，放入组织捣碎机中均匀打浆，打浆时间为 3 分钟，采用140 目尼龙滤布过滤，得苜蓿汁液；
（4）超声波辅助酶解：提取叶蛋白的酶采用纤维素酶，将纤维素酶加入（3）得到的苜蓿汁液中，加酶量为每100 毫升所述汁液用3~4 克纤维素酶，用食品酸味剂调汁液pH 为 4.5~5.5 ，充分搅拌混匀后放入超声波提取器中超声提取，超声波提取条件为：超声功率 100~250 W, 频率为 20~40 kHz，温度50~60℃，超声持续作用，时间30~40 min，得到提取液；
（5）灭酶：将（4）得到的提取液在85℃下灭酶10 min；
（6）絮凝、叶蛋白凝聚物分离：在灭酶后溶液中加入柠檬酸调节其pH值为4.0 ，静置5 小时，然后在4000~5000 r/min 的离心作用下持续处理15~20 min，得到叶蛋白粗提物和上清液；
（7）干燥：将步骤（6）叶蛋白凝聚物冷冻干燥至恒重，即得到苜蓿叶蛋白产品。
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CN 201110343615 CN102351944B (zh) | 2011-11-03 | 2011-11-03 | 一种超声波辅助酶法提取苜蓿叶蛋白的方法 |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CN 201110343615 CN102351944B (zh) | 2011-11-03 | 2011-11-03 | 一种超声波辅助酶法提取苜蓿叶蛋白的方法 |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| CN102351944A CN102351944A (zh) | 2012-02-15 |
| CN102351944B true CN102351944B (zh) | 2013-07-03 |
Family
ID=45575609
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| CN 201110343615 Expired - Fee Related CN102351944B (zh) | 2011-11-03 | 2011-11-03 | 一种超声波辅助酶法提取苜蓿叶蛋白的方法 |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| CN (1) | CN102351944B (zh) |
Families Citing this family (8)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN102675443A (zh) * | 2012-06-17 | 2012-09-19 | 徐毓艺 | 一种叶蛋白和白蛋白的提取 |
| CN103387599B (zh) * | 2013-08-08 | 2015-06-24 | 河北考力森生物科技有限公司 | 一种桑叶蛋白的提取工艺 |
| CN104195204A (zh) * | 2014-07-30 | 2014-12-10 | 内蒙古天奇生物科技有限公司 | 一种紫花苜蓿多肽的制备方法 |
| CN104323257B (zh) * | 2014-11-21 | 2016-04-20 | 北京东方兴企食品工业技术有限公司 | 一种具有辅助降血脂功能的营养食品及其制备方法 |
| CN104921243B (zh) * | 2015-07-01 | 2018-03-16 | 齐齐哈尔大学 | 一种苜蓿叶蛋白肽饮料的制备方法 |
| CN105018558B (zh) * | 2015-07-03 | 2019-04-26 | 浙江黛君生物医药科技有限公司 | 一种苜蓿多目标联产提取分离方法 |
| CN111772027A (zh) * | 2020-06-30 | 2020-10-16 | 武汉轻工大学 | 一种枸杞叶蛋白及其提取方法 |
| CN114989242B (zh) * | 2022-07-01 | 2023-07-25 | 承德医学院 | 一种提取桑叶蛋白的方法 |
Citations (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN101627813A (zh) * | 2009-08-11 | 2010-01-20 | 黄山旅游集团佳龙绿色食品有限公司 | 从豆渣中提取大豆膳食纤维和大豆蛋白的方法 |
-
2011
- 2011-11-03 CN CN 201110343615 patent/CN102351944B/zh not_active Expired - Fee Related
Patent Citations (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN101627813A (zh) * | 2009-08-11 | 2010-01-20 | 黄山旅游集团佳龙绿色食品有限公司 | 从豆渣中提取大豆膳食纤维和大豆蛋白的方法 |
Non-Patent Citations (6)
| Title |
|---|
| 杨云等.超声波辅助提取苜蓿黄酮工艺的研究.《草原与草坪》.2010,第30卷(第5期),66-69. |
| 杨春波.苜蓿叶蛋白的提取与应用研究.《中国优秀硕士学位论文全文数据库农业科技辑》.2009,(第3期),D050-6. |
| 植物功能成分提取技术研究进展;黄忠良等;《河南化工》;20091231;第26卷(第12期);17-20 * |
| 苜蓿叶蛋白的提取与应用研究;杨春波;《中国优秀硕士学位论文全文数据库农业科技辑》;20090315(第3期);D050-6 * |
| 超声波辅助提取苜蓿黄酮工艺的研究;杨云等;《草原与草坪》;20101231;第30卷(第5期);66-69 * |
| 黄忠良等.植物功能成分提取技术研究进展.《河南化工》.2009,第26卷(第12期),17-20. |
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| CN102351944A (zh) | 2012-02-15 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| CN102351944B (zh) | 一种超声波辅助酶法提取苜蓿叶蛋白的方法 | |
| CN104187746B (zh) | 发酵法制备绿豆皮可溶性膳食纤维的工艺 | |
| CN108003251B (zh) | 一种菠萝皮渣多糖的提取方法 | |
| CN105410949B (zh) | 一种从笋下脚料中提取制备笋膳食纤维的方法 | |
| CN101147611A (zh) | 一种加工澄清型菠萝果汁的方法 | |
| CN101940306A (zh) | 菊芋全粉的生产方法 | |
| CN106912964A (zh) | 可溶性膳食纤维及其制备方法 | |
| CN102559808B (zh) | 玉米秸秆芯穰制备低聚木糖的方法 | |
| CN109576324A (zh) | 一种黄芪多糖及其生物提取法 | |
| CN107200781B (zh) | 一种从大鲵中提取胶原蛋白的方法 | |
| CN109535278A (zh) | 一种从百香果果皮提取果胶的方法 | |
| CN106832021A (zh) | 一种肉桂渣粗多糖的制备方法 | |
| CN104892780A (zh) | 一种大枣渣粗多糖的提取工艺 | |
| CN105779524A (zh) | 一种从豆粕中提取大豆低聚糖的制备方法 | |
| CN106892994A (zh) | 一种蓝莓渣粗多糖的制备方法 | |
| CN103224973B (zh) | 一种发酵虾头制备活性物质、甲壳素和有机酸钙的方法 | |
| CN102807629A (zh) | 利用连续逆流超声波设备提取米糠多糖的方法 | |
| CN102432667A (zh) | 紫菜蛋白质多糖产品及其逆流脉冲超声辅助同时提取方法 | |
| CN107897595A (zh) | 一种发酵石榴汁‑酶解桃汁复配的抗氧化性果汁的制备方法 | |
| CN102071180A (zh) | 一种菠萝蛋白酶制备新工艺 | |
| CN104262507A (zh) | 一种超声波协同cda酶制备龙虾壳壳聚糖的方法 | |
| CN103518943A (zh) | 一种利用多频超声波从菜籽饼提取蛋白的方法 | |
| CN111264878A (zh) | 高可溶性膳食纤维的低豆腥味大豆膳食纤维粉的制备方法 | |
| CN106889297A (zh) | 一种大豆肽粉的生产工艺 | |
| CN106892989A (zh) | 一种黑莓制备方法 |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| C06 | Publication | ||
| PB01 | Publication | ||
| C10 | Entry into substantive examination | ||
| SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
| C14 | Grant of patent or utility model | ||
| GR01 | Patent grant | ||
| CF01 | Termination of patent right due to non-payment of annual fee | ||
| CF01 | Termination of patent right due to non-payment of annual fee |
Granted publication date: 20130703 Termination date: 20161103 |