CN102326675A - 一种抗氧化饲料添加剂及其应用 - Google Patents

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苗晋锋
贾雪波
张金秋
郑六海
马子力
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Abstract

本发明公开了一种禽类饲料添加剂及其应用，属于配合饲料领域，该饲料添加剂，在日粮总重量的基础上按质量百分数计包括：0.05~0.2%的牛磺酸和0.001~0.003%的复合维生素。本发明的一种抗氧化饲料添加剂可广泛应用于饲料添加剂中，使畜禽在饲喂过程中的肝脏和肾脏受损程度降低，提高机体抵抗自由基并清除自由基的能力，从而保证细胞的活力和完整性，利于动物高产并维持健康。

Description

一种抗氧化饲料添加剂及其应用
技术领域
本发明涉及一种禽类饲料添加剂，具体地说涉及一种抗氧化饲料添加剂及其应用。
背景技术
随着生活水平的日益提高，人们对饮食的结构和食品的安全性也越来越重视。畜禽肉蛋产品是人类获得蛋白质的重要来源。但就目前的畜禽养殖业状况而言，为了提高产量和经济效益，在禽类养殖过程中，往往采用高密度的笼养饲喂方式，同时日粮中含有高水平的淀粉、蛋白质和脂肪，旨在提高禽类日增重和消化性能。但由于笼养家禽被限制在狭小的笼内，缺乏运动，且日粮的能量、蛋白比例不平衡，极易使禽类组织器官发生病理性变化，突出的临床症状表现为脂肪肝和肾肿大。这些症状不仅在产蛋后期的鸡群普遍发生，在产蛋高峰期的鸡也很常见。
动物的健康是其发挥最大生产性能、实现效益最大化的根本。肝脏，是动物体内最大的代谢器官，肾脏，是体内最大的排泄器官，如果肝脏肾脏受到损伤，就无法保证蛋鸡的高产。在生物机体代谢过程中常会发生氧自由基反应，该反应的产物会引起多不饱和脂肪酸(PUFA)的过氧化作用，从而产生脂质过氧化产物，如：醛基(丙二醛MDA)、酮基、羟基、羰基，以及新的氧自由基等，从而使细胞膜的流动性和通透性发生改变，最终导致细胞结构和功能的改变，引起细胞、组织、甚至脏器损伤，严重影响畜禽的生产性能。
发明内容
发明目的：本发明的目的是提供一种抗氧化饲料添加剂，用于提高家禽对自由基的抵抗能力和清除能力；本发明的另一个目的是提供一种抗氧化饲料在蛋鸡饲料上的应用。
技术方案：为实现上述目的，本发明的一种抗氧化饲料添加剂，在日粮总重量的基础上按质量百分数计包括：0.05～0.2％的牛磺酸和0.001～0.003％的复合维生素。
维生素是生命生长和代谢过程中所必需的微量有机物，是与代谢相关酶的辅酶、辅基的重要组成部分。所述复合维生素每20克包括维生素A1.78克、维生素D30.6克、维生素E7.62克、维生素K30.14克、维生素B10.14克、维生素B20.8克、维生素B60.26克、维生素B120.32克、烟酸3.04克、泛酸1.66克、叶酸0.32克、生物素3.32克。维生素对动物机体代谢起非常重要的作用。
在脂肪代谢方面，维生素B2作为黄素酶的组成部分，参与碳水化合物、氨基酸和脂肪酸的代谢。在畜牧生产中，维生素B2缺乏而导致饲料利用率降低是特别重要的问题。具体机理在于：黄素酶是在代谢中是一系列氧化还原反应的辅酶，黄素酶不足会造成内源蛋白质合成受阻，致使食入的一部分氨基酸由尿中排出，而造成畜禽生长缓慢或停滞，引起产蛋障碍。
作为本发明的优选方案，该饲料添加剂在日粮总重量的基础上按质量百分数计包括：0.1％的牛磺酸和0.002％的复合维生素。
牛磺酸是动物体内的一种含硫氨基酸，其化学名为2-氨基乙磺酸，化学式：H2N-CH2-CH2-S03H，常温常压下为无色四面针状结晶，微溶于水。在动物体内，牛磺酸可以由蛋氨酸、胱氨酸、半胱氨酸为原料合成，但牛磺酸在畜禽体内的合成量只占其生理需要的30％～40％，其他的必须从食物中获得，因此，牛磺酸是条件性必需氨基酸。
由于牛磺酸可以与胆汁酸相结合，促进脂肪乳化，增加脂肪酶的活性，并可协助中性脂肪、胆固醇、脂溶性维生素及其他脂溶性物质的消化吸收；同时，牛磺酸能够抗氧化，清除过量自由基，缓解脂肪的过氧化进程。
有益效果：本发明的一种抗氧化饲料添加剂可广泛应用于饲料添加剂中，使畜禽在饲喂过程中的肝脏和肾脏受损程度降低，提高机体抵抗自由基并清除自由基的能力，从而保证细胞的活力和完整性，利于动物高产并维持健康。
附图说明
图1是试验例1对照组肝脏的组织染色图；
图2是试验例1试验组肝脏的组织染色图；
图3是试验例1试验组肾脏的组织染色图；
图4是试验例1对照组肾脏的组织染色图；
图5是试验例2中MDA含量测定的结果对比图；
图6是试验例3中SOD活性测定的结果对比图；
图7是试验例4中T-AOC活性测定的结果对比图。
具体实施方式
实施例1
一种抗氧化饲料添加剂，在日粮总重量的基础上按质量百分数计包括：0.1％的牛磺酸和0.002％的复合维生素。
其中，复合维生素每20克包括维生素A1.78克、维生素D30.6克、维生素E7.62克、维生素K30.14克、维生素B10.14克、维生素B20.8克、维生素B60.26克、维生素B120.32克、烟酸3.04克、泛酸1.66克、叶酸0.32克、生物素3.32克。将上述饲料添加剂加入日粮中，经充分搅拌混匀后即可饲喂。
实施例2
一种抗氧化饲料添加剂，在日粮总重量的基础上按质量百分数计包括：0.2％的牛磺酸和0.003％的复合维生素。
其中，复合维生素每20克包括维生素A1.78克、维生素D30.6克、维生素E7.62克、维生素K30.14克、维生素B10.14克、维生素B20.8克、维生素B60.26克、维生素B120.32克、烟酸3.04克、泛酸1.66克、叶酸0.32克、生物素3.32克。
将上述饲料添加剂加入日粮中，经充分搅拌混匀后即可饲喂。
实施例3
一种抗氧化饲料添加剂，在日粮总重量的基础上按质量百分数计包括：0.05％的牛磺酸和0.001％的复合维生素。
其中，复合维生素每20克包括维生素A1.78克、维生素D30.6克、维生素E7.62克、维生素K30.14克、维生素B10.14克、维生素B20.8克、维生素B60.26克、维生素B120.32克、烟酸3.04克、泛酸1.66克、叶酸0.32克、生物素3.32克。
将上述饲料添加剂加入日粮中，经充分搅拌混匀后即可饲喂。
试验例1组织观察对比试验
选择南京金水湾生态园生产的生长发育正常的2000羽60周龄绿壳蛋鸡作为试验动物。将其随机分成对照组(C，n＝10)和试验组(T，n＝10)。对照组饲喂正常日粮；试验组饲喂正常日粮的基础上，按照实施例1添加0.1％的牛磺酸和0.002％的复合维生素。自由饮水。整个试验期为14天。试验结束后处死所有蛋鸡，采集肝脏、肾脏组织，一部分采用中性甲醛液固定，用于组织观察；另一部分置于液氮后转存于-70℃冰箱用于后续试验。
对中性甲醛固定组织进行梯度酒精脱水、二甲苯透明、石蜡包埋、切片、H.E.染色等处理，进行组织学观察。
如图1、图2所示，通过组织病理学观察显示，与对照组相比，试验组蛋鸡肝组织可见浸银染色的网织纤维由终末肝小静脉放散，形成的网络更有规则些。在采集肝脏组织时明显可以观察到对照组的肝脏肿大、易碎、颜色发黄。而加入牛磺酸的试验组肝脏韧性好，色泽也正常。
如图3、图4所示，组织病理学观察显示，与对照组相比，试验组蛋鸡肾组织中肾小球和肾小管病变较对照组有明显变化，可以看出，试验组蛋鸡肾小球的硬化程度有所减轻，肾小管上皮细胞表现正常。
试验例2MDA含量测定
MDA即丙二醛，是脂质过氧化反应的主要产物，MDA的测定常常与SOD的测定相互配合，SOD活力的高低间接反应了机体清除氧自由基的能力，而MDA的高低又间接反应了机体细胞受自由基攻击的严重程度。
测定原理：过氧化脂质降解产物中的丙二醛可与硫代巴比妥酸缩合，形成红色产物，在532nm处有最大吸收峰。通过比色即可求出个样品中丙二醛的含量。本试验所用丙二醛测定试剂盒购自南京建成生物工程研究所。
本试验组织样本为试验例1置于液氮后并转存于-70℃冰箱的蛋鸡肝脏和肾脏。
分别取15％肝脏、肾脏组织匀浆液100ul加入混合试剂4mL，用旋涡混匀器充分混匀，95℃水浴40min，流水冷却。然后3500r/min离心10min。取上清液在532nm处，0.5cm光径，蒸馏水调零，测各样品的吸光度值。
Figure BDA0000090326390000041
Figure BDA0000090326390000042
测试前做预试验摸得浓度15％的肝脏组织匀浆液最佳上样量为50ul，具体步骤按试剂盒说明书操作。在样品中加入相应试剂后用漩涡混匀器充分混匀，在37℃恒温水浴40min加入显色剂，混匀室温静置10min，在波长550nm处，0.5cm光径比色杯蒸馏水调零，比色测定各样品吸光度值。
采用SPSS 17.0统计软件处理试验数据，组间比较采用t检验，各组试验结果以平均数±标准差(x±SE)表示，结果如图5所示，可以看出，加入牛磺酸和维生素的饲料添加剂有利于肝脏和肾脏MDA生成量的减少，从而保护机体并提高其抗氧化能力。
试验例3SOD活性测定
SOD(超氧化物歧化酶)对机体的氧化与抗氧化平衡起着至关重要的作用，其可以清除超氧阴离子自由基，保护细胞免受伤害。本试验所用试剂和材料为：超氧化物歧化酶测定试剂盒(购自南京建成生物工程研究所)、生理盐水、冰醋酸(分析纯，乙酸浓度≥99.5％上海申博华工有限公司)、单蒸水等。
高速低温离心机(MIKRO-22型，日本日立公司)；可见分光光度计(Unic-2100)；恒温振荡器(SHA-C，国华企业)；WH-3微型旋涡混合仪(上海沪西分析仪器厂有限公司)等。SOD活性测定是与试验例2MDA含量测定配合完成的。
所有试剂的配制均在测试前一天进行，使其充分溶解。样品测试前需预试验以确定最佳取样量。抑制率应在在15-55％之间，取抑制率在48-50％左右的上样剂量为最佳取样量。
Figure BDA0000090326390000051
每毫升反应液中SOD抑制率达50％时对应的SOD量为一个SOD活力单位(U)。
Figure BDA0000090326390000052
Figure BDA0000090326390000053
采用SPSS 17.0统计软件处理试验数据，组间比较采用t检验，各组试验结果以平均数±标准差(x±SE)表示，结果如图6所示：加入牛磺酸和维生素的试验组，在肝脏和肾脏中超氧化物歧化酶(SOD)的活性具有显著上升(P＜0.05)，说明清除自由基的能力得到显著提升。
试验例4T-AOC活性测定
总抗氧化能力(T-AOC)是对机体抗氧化能力评价的一个总体指标。机体防御体系的抗氧化能力的强弱与健康程度存在着密切联系，该防御体系有酶促与非酶促两个体系，许多酶是以微量元素为活性中心，例如：超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-PX)、过氧化氢酶(CAT)、谷胱甘肽S-转移酶(GST)等，非酶促反应体系中主要为维生素、氨基酸和金属蛋白质。例如：VE、胡萝卜素、VC、半胱氨酸、蛋氨酸、色氨酸、组氨酸、葡萄糖、酮兰蛋白、转铁蛋白、乳铁蛋白等。对抗氧化而言，上述体系通过消除自由基和活性氧以免引发脂质过氧化；并分解过氧化物，阻断过氧化链；同时除去起催化作用的金属离子。
本试验此采用总抗氧化能力(T-AOC)测定试剂盒(南京建成生物工程研究所)、生理盐水、单蒸水等。仪器选用可见分光光度计(Unic-2100)；恒温振荡器(SHA-C，国华企业)；WH-3微型旋涡混合仪(上海沪西分析仪器厂有限公司)。
本试验组织样本为试验例1置于液氮后并转存于-70℃冰箱的蛋鸡肝脏和肾脏。
分别取15％的肝脏、肾脏组织匀浆液50ul，按说明书加入试剂。混匀，放置10min，蒸馏水调零0.5cm光径，520nm测各管吸光度。
Figure BDA0000090326390000054
采用SPSS 17.0统计软件处理试验数据，组间比较采用t检验，各组试验结果以平均数±标准差(x±SE)表示，结果如图7所示：加入牛磺酸和维生素的试验组，在肝脏和肾脏中总抗氧化能力(T-AOC)的活性具有显著上升(P＜0.05)。
以上所述仅是本发明的优选实施方式，应当指出：对于本技术领域的普通技术人员来说，在不脱离本发明原理的前提下，还可以做出若干改进和润饰，这些改进和润饰也应视为本发明的保护范围。

Claims (3)

1.一种抗氧化饲料添加剂，其特征在于，所述饲料添加剂在日粮总重量的基础上按质量百分数计包括：0.05~0.2%的牛磺酸和0.001~0.003%的复合维生素。
2.根据权利要求1所述的一种抗氧化饲料添加剂，其特征在于：所述复合维生素每20克包括维生素A 1.78克、维生素D3 0.6克、维生素E 7.62克、维生素K3 0.14克、维生素B1 0.14克、维生素B2 0.8克、维生素B6 0.26克、维生素B12 0.32克、烟酸3.04克、泛酸1.66克、叶酸0.32克、生物素3.32克。
3.根据权利要求1所述的一种抗氧化饲料添加剂，其特征在于：该饲料添加剂在日粮总重量的基础上按质量百分数计包括：0.5~2%的牛磺酸和0.001~0.003%的复合维生素。
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Cited By (5)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN103931937A (zh) * 2014-04-14 2014-07-23 河北工程大学 一种改善蛋壳品质的添加剂
CN104186978A (zh) * 2014-08-11 2014-12-10 宾阳县王灵镇良骏养鹅场 一种对雏禽有促长保健作用的氨基酸维生素复合添加剂
WO2016112553A1 (zh) * 2015-01-17 2016-07-21 广州自远生物科技有限公司 一种预防和/或治疗由冠状病毒属和/或轮状病毒属病毒引发的疾病的药物组合物
CN106417965A (zh) * 2016-07-27 2017-02-22 广东天农食品有限公司 一种产妇用鸡的生产方法
CN108902539A (zh) * 2018-10-08 2018-11-30 云南海大生物科技有限公司 一种降低蛋鸭氧化应激的配合饲料及其制备方法和用途

Citations (8)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN101052312A (zh) * 2003-07-07 2007-10-10 希尔氏宠物营养品公司 用于改进宠物中的氧化状态的组合物
CN101119634A (zh) * 2004-12-22 2008-02-06 希尔氏宠物营养品公司 用于促进动物口腔健康的方法
CN101167525A (zh) * 2006-10-26 2008-04-30 天津市润拓生物技术有限公司 一种具有美毛和调节生殖功能作用的犬猫用保健品
CN101167526A (zh) * 2006-10-26 2008-04-30 天津市润拓生物技术有限公司 一种具有促生长作用的犬猫用保健品
CN101204200A (zh) * 2006-12-20 2008-06-25 河南农业大学 一种宠物猫饮料添加剂及该添加剂制备的猫饮料
CN101218960A (zh) * 2007-11-16 2008-07-16 中山大学 一种能提高草鱼肌肉蛋白含量的复合预混料
CN101410102A (zh) * 2006-04-04 2009-04-15 希尔氏宠物营养品公司 用于增加动物的抗氧化状态的组合物和方法
CN101984845A (zh) * 2010-09-21 2011-03-16 中山粤海饲料有限公司 一种低盐度养殖海水鱼饲料添加剂预混料

Patent Citations (8)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN101052312A (zh) * 2003-07-07 2007-10-10 希尔氏宠物营养品公司 用于改进宠物中的氧化状态的组合物
CN101119634A (zh) * 2004-12-22 2008-02-06 希尔氏宠物营养品公司 用于促进动物口腔健康的方法
CN101410102A (zh) * 2006-04-04 2009-04-15 希尔氏宠物营养品公司 用于增加动物的抗氧化状态的组合物和方法
CN101167525A (zh) * 2006-10-26 2008-04-30 天津市润拓生物技术有限公司 一种具有美毛和调节生殖功能作用的犬猫用保健品
CN101167526A (zh) * 2006-10-26 2008-04-30 天津市润拓生物技术有限公司 一种具有促生长作用的犬猫用保健品
CN101204200A (zh) * 2006-12-20 2008-06-25 河南农业大学 一种宠物猫饮料添加剂及该添加剂制备的猫饮料
CN101218960A (zh) * 2007-11-16 2008-07-16 中山大学 一种能提高草鱼肌肉蛋白含量的复合预混料
CN101984845A (zh) * 2010-09-21 2011-03-16 中山粤海饲料有限公司 一种低盐度养殖海水鱼饲料添加剂预混料

Cited By (6)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN103931937A (zh) * 2014-04-14 2014-07-23 河北工程大学 一种改善蛋壳品质的添加剂
CN104186978A (zh) * 2014-08-11 2014-12-10 宾阳县王灵镇良骏养鹅场 一种对雏禽有促长保健作用的氨基酸维生素复合添加剂
CN104186978B (zh) * 2014-08-11 2016-08-24 宾阳县王灵镇良骏养鹅场 一种对雏禽有促长保健作用的氨基酸维生素复合添加剂
WO2016112553A1 (zh) * 2015-01-17 2016-07-21 广州自远生物科技有限公司 一种预防和/或治疗由冠状病毒属和/或轮状病毒属病毒引发的疾病的药物组合物
CN106417965A (zh) * 2016-07-27 2017-02-22 广东天农食品有限公司 一种产妇用鸡的生产方法
CN108902539A (zh) * 2018-10-08 2018-11-30 云南海大生物科技有限公司 一种降低蛋鸭氧化应激的配合饲料及其制备方法和用途

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