CN102318571A - 海紫杂交扇贝新品种的培育方法 - Google Patents
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Abstract
本发明涉及一种海紫杂交扇贝新品种的培育方法。首先利用海湾扇贝卵子和紫扇贝精子受精建立多个海紫杂交子一代家系，根据各杂交家系的表现型选择优良杂交家系，然后从优良杂交家系中选择雌雄同体的优良个体，促熟后分别自体受精建立多个自交家系；然后从上述自交家系中再选择优良家系，从优良家系中进一步选择雌雄同体的优良个体继续进行自交、选择；这样按同样的方法连续自交三代以上，即获得稳定遗传且生长快、个体大、温度耐受范围广的海紫杂交扇贝新品种。本发明同样也可采用群体培育的方法实现。鉴于本发明的海紫杂交新品种同时具有海湾扇贝和紫扇贝的优良特点，因此实现了在青岛和大连等北方海域养殖，产量比海湾扇贝提高30％以上。
Description
技术领域
本发明属于贝类水产养殖的育种技术，尤其是涉及一种海紫杂交扇贝新品种的培育方法。
背景技术
海湾扇贝(Argopecten irradians irradians)原产于美国大西洋沿岸，于1982年引入我国。海湾扇贝生长速度快，温度适应范围广，抗逆性强，非常适合我国北方海域的养殖，目前产量和养殖面积占我国扇贝养殖的50％以上。由于引进后长期近交，海湾扇贝在养殖过程中种质退化严重，表现为商品贝规格越来越小，育苗养殖过程中死亡率较高，例如2007年海湾扇贝亲贝死亡率高达约70％，因此扇贝养殖业迫切需要对海湾扇贝进行遗传改良，其中杂交育种是最有效的方法之一。
发明人自2007年首次从秘鲁引进了紫扇贝(Argopectenpurpuratus)。紫扇贝是原产于南太平洋的一种速生型中型扇贝，与海湾扇贝都属于Argopecten属，染色体数相同，且都是雌雄同体，但二者在个体大小、生长和温度适应性等方面性状互补，因此发明人又通过将海湾扇贝卵子和紫扇贝精子进行种间杂交，培育出海紫杂交扇贝子一代。海紫杂交扇贝子一代生长较快，个体较大(王春德等，2009.紫扇贝与海湾扇贝种间杂交的研究。海洋科学，33(10)：84-87；ChundeWang等，2011.Introduction of the Peruvian scallop and itshybridization with the bay scallop in China，Aquaculture，2011，310：380-387)。大部分个体不产生可育的卵子和精子，但少部分为可育的雌雄同体个体。
进一步研究表明，海紫杂交子一代虽然具有较大的杂种优势，但在生产推广上仍然存在以下缺点和障碍。1)由于杂交子一代遗传不稳定，后代生长性状出现分离，因而需要每年用紫扇贝和海湾扇贝制种，较为繁琐；2)由于引进的紫扇贝的温度适应范围较窄，难以在同一海域度夏和越冬，且在我国海域生长缓慢，因此获得用于培育杂交子一代的紫扇贝亲贝较为相当困难。3)由于海湾扇贝和紫扇贝都是雌雄同体的扇贝，同时排放精子和卵子，精或卵容易受到同种的卵或精的污染，不易进行种间杂交，而导致所获得的商品苗种中真正的杂交后代的比例大大降低，使产量的提高幅度大大受限。
显然，由于需要同时培育两种亲贝且不易实现两种雌雄同体扇贝间的杂交，因而推广存在着较大的困难。产业上迫切需要培育一种能够稳定遗传、易于培育且性状优良的新品种。
发明内容
本发明的目的是提供一种海紫杂交扇贝新品种的培育方法，以弥补现有技术的不足。
本发明基于以下构思：1)首先在亲贝促熟方面摒弃了传统的海湾扇贝从4℃开始培育，而且产卵前需要提高到19℃的常规方法，通过研究杂交子一代扇贝的温度适应特性，专门选择了从10℃开始培育杂交子一代亲贝，到产卵前逐渐提高到17℃；2)海紫杂交扇贝子一代中有少量个体为雌雄同体且自交可育；3)海紫杂交扇贝子一代的自交后代中约25％的个体外型与杂交子一代亲本相似，且其体重比同期的海湾扇贝提高77.5％；最后4)选择杂交后代中的雌雄同体个体进行连续自交，可迅速纯化种系，即获得稳定遗传的新品种。
本发明可采用家系培育的技术方案：首先利用海湾扇贝卵子和紫扇贝精子受精建立多个海紫杂交子一代家系，根据各杂交家系的表现型选择优良杂交家系，然后从优良杂交家系中选择雌雄同体的优良个体，促熟后分别自体受精建立多个自交家系；第二年从上述自交家系中再选择优良家系，然后从优良家系中进一步选择雌雄同体的优良个体继续进行自交、选择；这样按同样的方法连续自交三代以上，即获得稳定遗传且生长快、个体大、温度耐受范围广的海紫杂交扇贝新品种。
同样，本发明也可采用群体培育的技术方案：首先利用海湾扇贝卵子和紫扇贝精子受精建立海紫杂交子一代群体，然后从杂交群体中选择雌雄同体的优良个体，促熟后单独产卵排精并自体受精，受精卵孵化后将幼虫合在一起构成自交群体；第二年从上述自交群体中再选择雌雄同体的优良个体继续进行自交、选择；这样按同样的方法连续自交三代以上，即获得稳定遗传且生长快、个体大、温度耐受范围广的海紫杂交扇贝新品种。
本发明具有以下有益效果：所获得海紫杂交新品种同时具有海湾扇贝和紫扇贝的特点，生长快、个体大、温度耐受范围广。本发明的海紫杂交扇贝新品种可以在青岛和大连等北方海域养殖，产量比海湾扇贝提高30％以上。
具体实施方式
本发明可采用家系培育方法，具体操作步骤如下：
1.海紫杂交一代家系的培育：选择壳高5厘米以上的紫扇贝和海湾扇贝各50个，在1月初纳入育苗室水体内，蓄养密度为100个/m3，选择从10℃开始培育亲贝。每天分6次投喂浓度为200-300万细胞/毫升的三角褐指藻和扁藻等单胞藻类，每次投喂15升/m3，每天换水三分之一，每6天倒一次池，用空气压缩机连续充气。在10℃培育10天性腺开始膨大后开始升温，每天提高0.5℃，待升到17℃时性腺接近成熟，逐渐增加饵料的投喂量直到扇贝达到性成熟。挑选性腺发育成熟的紫扇贝和海湾扇贝阴干刺激30分钟，并且将单个扇贝置于预先加入23℃海水的2升塑料烧杯中，分别收集海湾扇贝的卵子和紫扇贝的精子。收集的精液在显微镜下立即观察，若混有卵子则弃掉。收集的卵子放置20分钟以后在显微镜下观察，若已受精发育则弃掉。将获得的海湾扇贝卵子和紫扇贝的精子授精，将受精卵置于黑暗环境下孵化，然后按照常规方法进行幼虫培育、苗种中间培育和养成，即获得海紫杂交子一代家系。
2.海紫杂交子一代亲贝的选择和促熟：从上述培育的若干海紫杂交子一代家系中根据家系的平均表型选择优良家系，然后从优良家系中选择个体大且雌雄同体的扇贝在1月份纳入育苗室，按照上述步骤进行性腺促熟，成熟后即可进行自交纯化。
3.自交纯化：选取成熟的雌雄同体的海紫杂交子一代亲贝，阴干刺激30分钟，将单个扇贝置于预先加入23℃海水的2升塑料烧杯中使其产卵排精。搅拌使来自同一个扇贝的精卵混合均匀，再按照常规方法进行幼虫培育、苗种中间培育和养成，即获得多个海紫杂交子一代扇贝的自交家系；收获时测量每个家系的平均壳高、壳长、壳宽和总体重，根据各家系所有个体的表现选择优良家系。从选择的优良家系中选择多个个体大且雌雄同体的扇贝作为下一年自交选育的亲贝，用于品种培育。
4.品种培育：将以上选择的个体大且雌雄同体的扇贝作为亲贝按照以上方法连续自交三代以上，直到大部分个体表现均优良且一致，即获得遗传稳定的海紫杂交新品种。
本发明也可采用群体培育的方法，具体操作步骤如下：
1.海紫杂交一代群体的培育：选择壳高5厘米以上的紫扇贝和海湾扇贝各50个，在1月初纳入育苗室水体内，蓄养密度为100个/m3，选择从10℃开始培育亲贝。每天分6次投喂浓度为200-300万细胞/毫升的三角褐指藻和扁藻等单胞藻类，每次投喂15升/m3，每天换水三分之一，每6天倒一次池，用空气压缩机连续充气。在10℃培育10天性腺开始膨大后开始升温，每天提高0.5℃，待升到17℃时性腺接近成熟，逐渐增加饵料的投喂量直到扇贝达到性成熟。挑选性腺发育成熟的紫扇贝和海湾扇贝阴干刺激30分钟，并且将单个扇贝置于预先加入23℃海水的2升塑料烧杯中，分别收集海湾扇贝的卵子和紫扇贝的精子。收集的精液在显微镜下立即观察，若混有卵子则弃掉。收集的卵子放置20分钟以后在显微镜下观察，若已受精发育则弃掉。将获得的来自多个海湾扇贝的卵子和多个来自紫扇贝的精子授精，将受精卵置于黑暗环境下孵化，然后按照常规方法进行幼虫培育、苗种中间培育和养成，即获得海紫杂交群体。
2.海紫杂交子一代亲贝的选择和促熟：从上述培育的海紫杂交子一代群体中选择个体大且雌雄同体的扇贝在1月份纳入育苗室，按照上述步骤进行性腺促熟，成熟后即可进行自交纯化。
3.自交纯化：选取成熟的雌雄同体的海紫杂交子一代亲贝，阴干刺激30分钟，将单个扇贝置于预先加入23℃海水的2升塑料烧杯中使其产卵排精。搅拌使来自同一个扇贝的精卵混合均匀，受精卵孵化后将幼虫合在一起构成自交群体，按照常规方法进行幼虫培育、苗种中间培育和养成，即获得海紫杂交子一代扇贝的自交群体；收获时选择雌雄同体的优良个体作为下一年自交选育的亲贝，用于品种培育。
4.品种培育：将以上选择的个体大且雌雄同体的扇贝作为亲贝按照以上方法连续自交三代以上，直到大部分个体表现均优良且一致，即获得遗传稳定的海紫杂交扇贝新品种。
实施例1
从2009年培育的海紫杂交子一代家系中选择优良家系，从中选择个体较大且雌雄同体的个体，在2010年1月份纳入育苗室中，用以上方法对亲贝促熟，用自交家系的方法培育后代，到十一月上旬所获得的自交子二代中有约25％的个体(类F1子二代)壳色与其亲本相同，但个体比同期培育的海湾扇贝群体壳高大约21.5％，体重大77.5％；所获得的自交子二代中有约75％的个体(类海湾子二代)壳色与海湾扇贝相似，但个体比同期培育的海湾扇贝群体壳高大约9.3％，体重大26.7％。结果如表1所示。
表1海紫杂交子二代与同期海湾扇贝大小的比较(n＝30)
| 类F1子二代 | 类海湾子二代 | 海湾扇贝 | |
| 壳高 | 54.53±5.89 | 49.05±2.32 | 44.88±5.05 |
| 总重 | 31.06±9.38 | 22.17±3.16 | 17.50±5.84 |
本发明已经于2011年，从2010年培育的海紫杂交子二代中选择个体较大且雌雄同体的个体，用自交的方法培育后代家系，受精率和孵化率分别为86.5％和83.4％，并培育出大量的自交子三代。
实施例2
同样，也可以从海紫杂交子一代群体中选择个体较大且雌雄同体的个体，按上述操作步骤获得海紫自交群体，然后从海紫自交群体选择雌雄同体的个体连续进行自交三代以上，就可以获得稳定遗传的、个体大、温度耐受范围广的本发明的海紫杂交扇贝新品种。
Claims (4)
1.一种海紫杂交扇贝新品种的家系培育方法，其特征在于首先利用海湾扇贝卵子和紫扇贝精子受精建立多个海紫杂交子一代家系，根据各杂交家系的表现型选择优良杂交家系，然后从优良杂交家系中选择雌雄同体的优良个体，促熟后分别自体受精建立多个自交家系；第二年从上述自交家系中再选择优良家系，然后从优良家系中进一步选择雌雄同体的优良个体继续进行自交、选择；这样按同样的方法连续自交三代以上，即获得稳定遗传且生长快、个体大、温度耐受范围广的海紫杂交扇贝新品种。
2.一种海紫杂交扇贝新品种的家系培育方法，其特征在于采用家系培育方法的具体操作步骤如下：
1）海紫杂交一代家系的培育：选择壳高5厘米以上的紫扇贝和海湾扇贝各50个，在1月初纳入育苗室水体内，蓄养密度为100个/ m3，选择从10℃开始培育亲贝；每天分6次投喂浓度为200-300万细胞/毫升的三角褐指藻和扁藻等单胞藻类，每次投喂15升/ m3，每天换水三分之一，每6天倒一次池，用空气压缩机连续充气；在10℃培育10天性腺开始膨大后开始升温，每天提高0.5℃，待升到17℃时性腺接近成熟，逐渐增加饵料的投喂量直到扇贝达到性成熟；挑选性腺发育成熟的紫扇贝和海湾扇贝阴干刺激30分钟，并且将单个扇贝置于预先加入23℃海水的2升塑料烧杯中，分别收集海湾扇贝的卵子和紫扇贝的精子；收集的精液在显微镜下立即观察，若混有卵子则弃掉；收集的卵子放置20分钟以后在显微镜下观察，若已受精发育则弃掉；将获得的海湾扇贝卵子和紫扇贝的精子授精，将受精卵置于黑暗环境下孵化，然后按照常规方法进行幼虫培育、苗种中间培育和养成，即获得海紫杂交子一代家系；
2）海紫杂交子一代亲贝的选择和促熟：从上述培育的若干海紫杂交子一代家系中根据家系的平均表型选择优良家系，然后从优良家系中选择个体大且雌雄同体的扇贝在1月份纳入育苗室，按照上述步骤进行性腺促熟，成熟后即可进行自交纯化；
3）自交纯化：选取成熟的雌雄同体的海紫杂交子一代亲贝，阴干刺激30分钟，将单个扇贝置于预先加入23℃海水的2升塑料烧杯中使其产卵排精；搅拌使来自同一个扇贝的精卵混合均匀，再按照常规方法进行幼虫培育、苗种中间培育和养成，即获得多个海紫杂交子一代扇贝的自交家系；收获时测量每个家系的平均壳高、壳长、壳宽和总体重，根据各家系所有个体的表现选择优良家系；从选择的优良家系中选择多个个体大且雌雄同体的扇贝作为下一年自交选育的亲贝，用于品种培育；
4）品种培育：将以上选择的个体大且雌雄同体的扇贝作为亲贝按照以上方法连续自交三代以上，直到大部分个体表现均优良且一致，即获得遗传稳定的海紫杂交新品种。
3.一种海紫杂交扇贝新品种的群体培育方法，其特征在于首先利用海湾扇贝卵子和紫扇贝精子受精建立海紫杂交子一代群体，然后从杂交群体中选择雌雄同体的优良个体，促熟后单独产卵排精并自体受精，受精卵孵化后将幼虫合在一起构成自交群体；第二年从上述自交群体中再选择雌雄同体的优良个体继续进行自交、选择；这样按同样的方法连续自交三代以上，即获得稳定遗传且生长快、个体大、温度耐受范围广的海紫杂交扇贝新品种。
4.一种海紫杂交扇贝新品种的群体培育方法，其特征在于采用群体培育的方法的具体操作步骤如下：
1）海紫杂交一代群体的培育：选择壳高5厘米以上的紫扇贝和海湾扇贝各50个，在1月初纳入育苗室水体内，蓄养密度为100个/ m3，选择从10℃开始培育亲贝；每天分6次投喂浓度为200-300万细胞/毫升的三角褐指藻和扁藻等单胞藻类，每次投喂15升/ m3，每天换水三分之一，每6天倒一次池，用空气压缩机连续充气；在10℃培育10天性腺开始膨大后开始升温，每天提高0.5℃，待升到17℃时性腺接近成熟，逐渐增加饵料的投喂量直到扇贝达到性成熟；挑选性腺发育成熟的紫扇贝和海湾扇贝阴干刺激30分钟，并且将单个扇贝置于预先加入23℃海水的2升塑料烧杯中，分别收集海湾扇贝的卵子和紫扇贝的精子；收集的精液在显微镜下立即观察，若混有卵子则弃掉；收集的卵子放置20分钟以后在显微镜下观察，若已受精发育则弃掉；将获得的来自多个海湾扇贝的卵子和多个来自紫扇贝的精子授精，将受精卵置于黑暗环境下孵化，然后按照常规方法进行幼虫培育、苗种中间培育和养成，即获得海紫杂交群体；
2）海紫杂交子一代亲贝的选择和促熟：从上述培育的海紫杂交子一代群体中选择个体大且雌雄同体的扇贝在1月份纳入育苗室，按照上述步骤进行性腺促熟，成熟后即可进行自交纯化；
3）自交纯化：选取成熟的雌雄同体的海紫杂交子一代亲贝，阴干刺激30分钟，将单个扇贝置于预先加入23℃海水的2升塑料烧杯中使其产卵排精；搅拌使来自同一个扇贝的精卵混合均匀，受精卵孵化后将幼虫合在一起构成自交群体,按照常规方法进行幼虫培育、苗种中间培育和养成，即获得海紫杂交子一代扇贝的自交群体；收获时选择雌雄同体的优良个体作为下一年自交选育的亲贝，用于品种培育；
4）品种培育：将以上选择的个体大且雌雄同体的扇贝作为亲贝按照以上方法连续自交三代以上，直到大部分个体表现均优良且一致，即获得遗传稳定的海紫杂交新品种。
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