CN102268098B - 墨旱莲多糖铁络合物制备方法及其应用 - Google Patents
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Abstract
本发明涉及墨旱莲多糖铁络合物制备方法及应用，可有效解决墨旱莲多糖铁络合物的制备，并有效用于食品添加剂和提高机体免疫力以及制备治疗缺铁性贫血的药物中的问题，其解决的技术方案是，将干燥的墨旱莲粉加蒸馏水温浸、过滤，得墨旱莲多糖溶液；在墨旱莲多糖溶液中加入NaOH离子溶液调pH值，再加入柠檬酸三钠及FeCl3，边滴加边搅拌，同时由NaOH溶液调pH为8-10，当反应液中出现红色不溶物质时，立即停止滴加FeCl3溶液和NaOH溶液，离心除去沉淀，得墨旱莲多糖铁络合物溶液；然后进行透析、醇沉，得沉淀物，对沉淀物进行洗涤，得墨旱莲多糖铁络合物，本发明可做食品添加剂，也可以药用，是预防和治疗缺铁性贫血的药物，还可以提高机体的免疫力。
Description
技术领域
本发明涉及医药，特别是一种墨旱莲多糖铁络合物制备方法及应用。
背景技术
生物大分子与微量元素金属离子在一定条件下反应形成的生物大分子金属络合物显示出特异的生物活性，如氨基酸、核酸金属络合物。氨基酸金属络合物作饲料添加剂已有专利。如氨基酸与铜络合物(波兰格旦斯克大学Kaczmarek等人)，甘氨酸和三价铁离子形成的络合物(美国怀俄明州大学化学系Devore EC等人)。德国公开专利号为2209616的药用半胱氨酸和锌形成的络合物作为补锌剂，该方法是把氧化锌水溶液加入到半胱氨酸溶液中，用NaOH溶液调节pH而形成络合物。
又如美国专利号为3821192的说明书中公开了一种用葡萄糖、麦芽糖、低分子右旋糖苷与三氯化铁反应形成糖铁络合物，其制备方法用三价铁离子的水溶液与右旋糖苷溶液混合，并加入碱溶液直到三氯化铁完全沉淀，此时pH低于7，经搅拌加入碱使pH上升到11以上溶液呈均一状态为止，反应过程中温度保持在80℃，不要超过95℃。为了使糖铁络合物充分沉淀出来要加入醇类溶液，经离心分离、干燥、粉碎成所需颗粒。从上述专利文献描述的产物是用氨基酸、葡萄糖、麦芽糖经与金属离子加热反应，整个过程均需保持较高的反应温度，而且制备出的络合物作用单一，只用于治疗仔猪缺铁性贫血。
墨旱莲为菊科植物鳢肠的全草，因为搓揉它的茎叶时，可见黑色的汁液流出，所以又叫“墨旱莲”。茎园柱形，绿褐色或带紫红色，有纵棱。叶对生，近无柄，线状矩圆形至披针形，全缘或稍具齿，基部楔形，先端短尖或钝，两面密被白色粗毛，浸水后搓揉茎叶呈黑色。花序头状，具有滋补肝肾，凉血止血的功效，用于牙齿松动、须发早白、眩晕耳鸣、腰膝酸、阴虚血热、吐血、血衄、尿血、血痢、崩漏下血、外伤出血，但作为墨旱莲多糖铁络合物的制备及应用至今未见有公开报道。
发明内容
针对上述情况，为克服现有技术的缺陷，本发明的目的就是提供一种墨旱莲多糖铁络合物制备方法及应用，可有效解决墨旱莲多糖铁络合物的制备，并有效用于食品添加剂和提高机体免疫力以及制备治疗缺铁性贫血的药物中的问题。
本发明解决的技术方案是，将干燥的墨旱莲粉加蒸馏水温浸、过滤，得墨旱莲多糖溶液；在墨旱莲多糖溶液中加入NaOH离子溶液调pH值，再加入柠檬酸三钠及FeCl3，边滴加边搅拌，同时由NaOH溶液调pH为8-10，当反应液中出现红色不溶物质时，立即停止滴加FeCl3溶液和NaOH溶液，离心除去沉淀，得墨旱莲多糖铁络合物溶液；然后进行透析、醇沉，得沉淀物，对沉淀物进行洗涤，得墨旱莲多糖铁络合物，有效作为食品添加剂或制备药物用。
本发明的墨旱莲多糖铁络合物是利用中药材墨旱莲为原料，在不需加压的条件下，在水溶液中络合反应快速获得该产物。该产物作为食品添加剂或医药用，能够有效提高机体免疫和治疗缺铁性贫血有着实用价值。以天然中药材为原料，可以确保所生产的墨旱莲多糖铁络合物无毒无副作用，另外生产方法简单，易于大规模生产。本发明的墨旱莲多糖铁络合物可做食品添加剂，也可以药用，它是一种预防和治疗缺铁性贫血的药物，还可以有效提高机体的免疫力。
具体实施方式
以下结合具体情况，对本发明的具体实施方式作详细说明。
本发明在具体实施中是由以下步骤实现的：
①将干燥的墨旱莲粉加入蒸馏水或饮用水中，墨旱莲粉与蒸馏水或饮用水的重量比为1∶10-25(具体还可采用1∶12，1∶14，1∶16，1∶18，1∶20，1∶22，1∶24的重量比)，60-95℃(具体还可采用65℃，70℃，75℃，80℃，85℃，90℃)温浸1-3次，每次2-6h(根据温度的高低和墨旱莲粉数量的多少，具体还可采用3h，4h，5h，原则是温度越高，物料少，浸泡的时间越短，反之亦然)，过滤后得墨旱莲多糖溶液；
②将FeCl3加入水中，配制成浓度为2mol/L的FeCl3离子溶液；将NaOH加入水中，配制成浓度为2mol/L的NaOH离子溶液；
③在步骤①制备的墨旱莲多糖溶液中逐滴加入浓度为2mol/L的NaOH离子溶液至pH值为8-10，每100g干燥的墨旱莲制成的墨旱莲多糖溶液中加入柠檬酸三钠0.5-5g，搅拌溶解，60-80℃水浴下逐滴加入浓度为2mol/L的FeCl3溶液，边滴加边搅拌，同时滴加浓度为2mol/L的NaOH溶液保持pH为8-10，进行络合反应，当反应液中出现红色不溶物质时，立即停止滴加FeCl3溶液和NaOH溶液，离心除去沉淀，得墨旱莲多糖铁络合物溶液；
④对墨旱莲多糖铁络合物溶液装入透析袋进行透析，透析袋的截留分子量为8000-14000，透析液加入质量浓度为95％的乙醇至乙醇含量达到80％，静置10-18h过夜，弃去上清液，得沉淀物，先用无水乙醇将沉淀物洗至上清液无色，再用丙酮和乙醚各洗涤一次，得墨旱莲多糖铁络合物。
必要时，根据需要，将墨旱莲多糖铁络合物粉碎制成所需的颗粒。
本发明制备方法稳定可靠，并经多次(12次以上)实验得到了相同或相近似的结果，而且所制备的墨旱莲多糖铁络合物经试验取得了突出的有益技术效果，有关实验资料如下：
以低铁饲料辅以少量放血，快速建立缺铁性贫血的大鼠模型。实验组灌服墨旱莲多糖铁络合物，对照组灌服与墨旱莲多糖铁络合物溶液浓度相当的硫酸亚铁溶液。
1.墨旱莲多糖铁络合物提高缺铁性贫血大鼠免疫力的实验
健康SPF级雄性SD大鼠共50只，4周龄，体重100±20g血红蛋白(Hb)≥110g/L。大鼠用不锈钢笼子及器皿使其生活在无铁环境，并严防外来铁污染及彼此间的交叉污染。设空白对照组(10只)，将造模组大鼠按体重随机分为4组，分别为：①低剂量治疗组，每天每只大鼠给药量为20mg/Kg。②中剂量治疗组，每天每只大鼠给药量为40mg/Kg。③高剂量治疗组，每天每只大鼠给药量为60mg/Kg。④模型对照组，不予给药。
每6天眼眶静脉采血测血常规、SI、红细胞免疫相关指标。各组大鼠红细胞免疫功能的情况比较见表1，中、高剂量的墨旱莲多糖铁络合物能显著提升贫血大鼠体内RBC-C3bR(P＜0.05)，各剂量墨旱莲多糖铁络合物均能有效降低RBC-IcR(P＜0.01)，说明其能改善红细胞免疫功能。
表1墨旱莲多糖铁络合物对IDA大鼠红细胞免疫功能的影响
上述药理实验结果表明，本发明所制得的墨旱莲多糖铁络合物能使贫血大鼠红细胞C3bR受体逐渐恢复活性，使其RBC-IcR逐渐降低，较自然恢复的程度更为明显，且通过短期的治疗即有显著的效果。墨旱莲多糖铁络合物对IDA大鼠红细胞免疫力的提高具有显著效果。
2.墨旱莲多糖铁络合物用药后的铁代谢实验
按照墨旱莲多糖铁络合物提高免疫的药理实验的方法，取健康SPF级雄性SD大鼠共30只，4周龄，体重100±20g血红蛋白(Hb)≥110g/L。大鼠用不锈钢笼子及器皿使其生活在无铁环境，并严防外来铁污染及彼此间的交叉污染，造IDA大鼠模型。将IDA大鼠模型随机分成两组，分别为①墨旱莲多糖铁络合物组②硫酸亚铁组。每6天眼眶静脉采血测Hb值、血清铁、血清铁蛋白，结果见表2.
表2墨旱莲多糖铁络合物的代谢情况
实验大鼠对墨旱莲多糖铁络合物的吸收显著优于硫酸亚铁组。墨旱莲多糖铁络合物是较好的补铁药物。
3.墨旱莲多糖铁络合物毒性实验
NIH系小鼠(体重20-30g)20只，雌雄混合，分二组，一组为对照组，一组为墨旱莲多糖铁络合物实验组，两组所用饲料相同，以4.5g/Kg的剂量给实验组小鼠灌服墨旱莲多糖铁络合物(自制)。灌胃15天，无一死亡。观察其外观行为无异常，将小鼠处死，观察内脏无异常，并将其心、肝、肾做成石蜡切片，在显微镜下进行镜检，结果未发现任何异常。仅算出口服最大耐受量为10.4g·Kg-1KD50Kg-1，属无毒物质。
4.作为食品添加剂的实验
经在饼干、馒头等食品中添加总原料重量的0.01-0.05％的墨旱莲多糖铁络合物，每天食用1-2次，经对食用者500人一年内统计，患感冒者仅31人，而未服用以本发明产品作为添加剂的食品的500人中，患感冒者163人，远远高于食用添加剂的患者，患感冒是身体免疫力低下的具体表现，表明本发明的墨旱莲多糖铁络合物可有效提高人体免疫力，防止疾病的发生。
总之，实验结果表明，本发明方法简单，稳定可靠，易操作，成本低，所制备的墨旱莲多糖铁络合物用途广，不但可有效用于制备治疗疾病用的药物中，而且还可在食品中作添加剂使用，提高人体免疫力。
Claims (4)
1.一种墨旱莲多糖铁络合物制备方法，其特征在于，由以下步骤实现：
① 将干燥的墨旱莲粉加入蒸馏水中，墨旱莲粉与蒸馏水的重量比为1:10-25，60-95℃温度下浸渍1-3次，每次2-6h，过滤后得墨旱莲多糖溶液；
② 将FeCl3加入水中，配制成浓度为2mol/L的FeCl3离子溶液；将NaOH加入水中，配制成浓度为2mol/L的NaOH离子溶液；
③ 在步骤①制备的墨旱莲多糖溶液中逐滴加入浓度为2mol/L的NaOH离子溶液至pH值为8-10，每100g干燥的墨旱莲制成的墨旱莲多糖溶液中加入柠檬酸三钠0.5-5g，搅拌溶解，60-80℃水浴下逐滴加入浓度为2mol/L的FeCl3溶液，边滴加边搅拌，同时滴加浓度为2mol/L的 NaOH溶液保持pH为8-10，进行络合反应，当反应液中出现红色不溶物质时，立即停止滴加FeCl3溶液和NaOH溶液 ，离心除去沉淀，得墨旱莲多糖铁络合物溶液；
④ 对墨旱莲多糖铁络合物溶液装入透析袋进行透析，透析袋的截留分子量为8000- 14000，透析液加入质量浓度为95%的乙醇至乙醇含量达到80%，静置10-18h过夜，弃去上清液，得沉淀物，先用无水乙醇将沉淀物洗至上清液无色，再用丙酮和乙醚各洗涤一次，得墨旱莲多糖铁络合物。
2.权利要求1所述制备方法制备的墨旱莲多糖铁络合物在制备防治缺铁性贫血药物中的应用。
3.权利要求1所述制备方法制备的墨旱莲多糖铁络合物在制备提高机体免疫力药物中的应用。
4.权利要求1所述制备方法制备的墨旱莲多糖铁络合物在制备食品添加剂中的应用。
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