CN102242072A - 利用风味定向技术筛选中国白酒酿造中的β-大马酮产生菌株及其应用 - Google Patents
利用风味定向技术筛选中国白酒酿造中的β-大马酮产生菌株及其应用 Download PDFInfo
- Publication number
- CN102242072A CN102242072A CN2011101224203A CN201110122420A CN102242072A CN 102242072 A CN102242072 A CN 102242072A CN 2011101224203 A CN2011101224203 A CN 2011101224203A CN 201110122420 A CN201110122420 A CN 201110122420A CN 102242072 A CN102242072 A CN 102242072A
- Authority
- CN
- China
- Prior art keywords
- dorinone
- bjy
- pichia
- deposit number
- bacterial strain
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Granted
Links
Images
Landscapes
- Micro-Organisms Or Cultivation Processes Thereof (AREA)
- Distillation Of Fermentation Liquor, Processing Of Alcohols, Vinegar And Beer (AREA)
Abstract
利用风味定向技术筛选中国白酒酿造中的β-大马酮产生菌株及其应用，属于生物工程技术和酿酒生物技术领域。β-大马酮是我国清香型白酒重要的微量特征性风味物质。所述菌株为异常毕赤酵母CGMCC4740、东方伊萨酵母CGMCC4741、扣囊复膜孢酵母CGMCC4742、粉状毕赤酵母CGMCC4743、粟酒裂殖酵母CGMCC4744、丝孢酵母CGMCC4746、酿酒酵母CGMCC4747、少孢酵母CGMCC4748、嗜渗压有孢汉逊酵母CGMCC4749、发酵毕赤酵母CGMCC4750、膜醭毕赤酵母CGMCC4751、葡萄牙棒孢酵母CGMCC4752中任一一株。菌株是从中国多家名酒厂的大、小曲以及酒醅、酿造原料、酿造环境中分离得到。该菌株可用于传统食品酿造领域，及β-大马酮生物香料的制备中。
Description
技术领域
本发明涉及一种利用风味定向技术从中国白酒大曲、小曲、酒醅、原料、环境中筛选白酒中微生物代谢相关的香气物质产生菌的筛选方法，以及利用该法筛选中国白酒大曲、小曲、酒醅、原料、环境中的β-大马酮产生菌株，以及将菌株应用于传统酿造食品工业领域和生物香料制备领域。属于生物工程技术和酿酒生物技术领域。
背景技术
中国白酒是世界著名的六大蒸馏酒之一，深得消费者喜爱。中国白酒具有多种特殊的风格特征。白酒风味物质十分复杂，含量微少，种类繁多，对形成白酒的风格特征及其典型性具有很重要的作用。明确白酒重要风味物质的来源及其形成机制，并在酿造过程中对这类风味物质的合成进行有效的控制，对于白酒行业不同香型白酒工艺的改造以及白酒行业的现代化发展具有举足轻重的作用。
对于任何传统食品酿造过程，都需要在微生物的作用下才能使加工原料发生重要的生物化学及物理变化后生成食品，并且发酵食品独特的风味和风格也都是建立在微生物生命运动的基础上。白酒酿造微生物是白酒酿造的原动力，也是造就白酒独特风味和风格的原因所在。白酒的生产包括制曲和发酵两个过程。在制曲过程中依靠自然界各种微生物富集到用淀粉质原料制成的曲坯上，经过培养、贮藏，成为成品大曲。在发酵过程中，依靠大曲提供的微生物在密闭发酵容器中多微共酵，形成复杂的白酒风味成分。
因此建立白酒酿造中微生物代谢相关的重要香气物质产生菌的筛选方法，筛选风味物质产生功能微生物，不但能够明确白酒重要风味物质的来源及其形成机制，深入的认识中国白酒的科学理论价值；而且对于开发新的生物香料资源，以及生物香料行业的发展具有重要的意义。
β-大马酮（β-damascenone）又名β-突厥烯酮，属于C13萜烯类芳香化合物。阈值极低，水中为2ng/L，模拟葡萄酒中为50ng/L，具有极高的香气贡献度；具有水果香、蜂蜜香、苹果味等香气，广泛存在于葡萄酒、啤酒、蒸馏酒等酒类酿造产品中，是这些产品中的关键香气成分。目前发现在葡萄酒酿造过程中存在一些非酿酒酵母，如汉逊德巴利酵母、美极梅奇酵母、异常毕赤酵母、葡萄酒有孢汉逊酵母等能够以葡萄汁为培养基产生β-大马酮，但是β-大马酮浓度都极低。
β-大马酮是中国白酒中重要的风味物质，尤其是清香型白酒中重要的微量特征性风味物质，但是对于中国白酒中β-大马酮产生来源却一无所知，也未有β-大马酮产生菌株的任何相关报道。因此，科学的认识中国白酒中β-β-大马酮的产生机制，并有效改良中国白酒的酿造工艺，提高白酒品质，最关键的环节就是寻找以及利用产生β-大马酮的菌株。
另外，β-大马酮作为一种珍贵的生物香料，主要被用于调制包括玫瑰香调在内的各种花香、木香、醛香、药草香和果香香调。因其价格较高，达2万元/kg左右，目前主要用于高级香水、高级化妆香精、食品香精和烟用香精中。尽管β-大马酮问世较晚，但因其具有独特的香气，为一名贵香料，颇受人们重视，目前已得到美国香料提取物制造协会的认可（FEMA NO.3420）。近年来，随着食品、高级化妆品及烟草工业的发展，其需求量有较大的增长。每年全球范围内的需求量为1～10吨。为了满足市场需求，许多国家都一直致力于其合成方法和工艺的研究，但是到目前为止，国际上主要还是集中于化学法合成β-大马酮，尚未见生物法规模化转化生产β-大马酮方面的研究报道。因此，规模化生物转化生产β-大马酮的最关键环节也是寻找以及利用高产β-大马酮的菌株。
本发明所提供的利用风味定向技术筛选中国白酒酿造过程中的微生物代谢相关的重要香气物质产生菌，对于科学地认识和理解中国白酒酿造过程及机制，对中国白酒的技术发展和进步具有重要的现实意义；同时，对于食品添加剂行业中新型生物香料的开发与生产也具有重要的实用价值。另外，本发明从中国白酒酿造大曲、小曲、酒醅、原料、环境中筛选所得的菌株是具有生物转化生产β-大马酮的功能。为首次从中国白酒酿造过程中获得的β-大马酮产生菌株，不但能够实现高效制备β-大马酮的功能，应用于β-大马酮生物香料的制备行业；而且能够解释中国清香型白酒中特征性风味物质β-大马酮产生的机制，将该菌株应用于中国白酒的酿造过程中，能够有效调控白酒中β-大马酮含量，实现中国白酒品质的提升。
发明内容
（1）要解决的技术问题
本发明要解决的一个技术问题是提供了一种利用风味定向技术从中国白酒大曲、小曲、酒醅、原料、环境中筛选白酒中微生物代谢相关的香气物质产生菌的筛选方法，以及将该方法应用于生物香料的制备工业中对中国白酒酿造中微生物代谢相关的香料物质的开发。
本发明所要解决的另一个技术问题是提供了一种β-大马酮产生菌株的筛选方法及其将菌株于传统白酒酿造行业和生物香料制备行业中的应用。
（2）本发明的技术方案
一种β-大马酮产生菌株，其分类命名为：
异常毕赤酵母（Pichia anomala）BJY-1，保藏编号CGMCC No.4740，
东方伊萨酵母（Issatchenkia orientalis）BJY-2，保藏编号CGMCC No.4741，
扣囊复膜孢酵母（Saccharomycopsis fibuligera）BJY-3，保藏编号CGMCC No.4742，
粉状毕赤酵母（Pichia farinosa）BJY-4，保藏编号CGMCC No. 4743，
粟酒裂殖酵母（Schizosaccharomyces pombe）BJY-5，保藏编号CGMCC No. 4744，
丝孢酵母（Trichosporon asahii）BJY-7，保藏编号CGMCC No. 4746，
酿酒酵母（Saccharomyces cerevisiae）BJY-8，保藏编号CGMCC No. 4747，
少孢酵母（Kazachstania exigua）BJY-9，保藏编号CGMCC No. 4748，
嗜渗压有孢汉逊酵母（Hanseniaspora osmophila）BJY-10，保藏编号CGMCC No. 4749，
发酵毕赤酵母（pichia fermentans）BJY-11，保藏编号CGMCC No. 4750，
膜醭毕赤酵母（Pichia membranifaciens）BJY-12，保藏编号CGMCC No. 4751，
葡萄牙棒孢酵母（Clavispora lusitaniae）BJY-13，保藏编号CGMCC No. 4752，上述菌株已保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心。
所述β-大马酮产生菌株的筛选方法：以风味为导向，利用风味定向技术分析中国白酒酿造过程中微生物代谢相关的香气物质的含量变化，明确微生物代谢相关香气物质的产生环节，以该环节的中国白酒大曲、小曲、酒醅、原料、环境作为分离原料，筛选白酒中微生物代谢相关香气物质的产生菌；
采用色谱法分析中国白酒酿造过程中微生物代谢相关的香气物质的含量变化，包括GC、GC/MS、HPLC、HPLC/MS、纸色谱的方法。
所述β-大马酮产生菌株的筛选方法，为尽可能全的筛选白酒中微生物代谢相关的香气物质产生菌，模拟白酒酿造过程的培养基配方，以白酒酿造所用的原料为培养基成分，选用高粱、大麦、小麦、豌豆及其各种不同比例的混合配方，制取原料液体培养基，制作方式为：20～200g原料样品经粉碎后，加mL/g计1～4倍体积的水，蒸煮1-5h，呈糊状，冷却后加入10～50U/g的糖化酶，于40～80℃保持2～10h，过滤、离心所得滤液，调节糖度为10~15oBx，调节pH为4～6。
所述β-大马酮产生菌株的筛选方法，将大曲、小曲、酒醅、原料与无菌水混合后，经过稀释涂布平板，对获得的菌株进行摇瓶发酵培养，培养条件为：28～40℃，150rpm，培养24～120h，发酵液经过顶空固相微萃取后，采用GC/MS测定β-大马酮含量，筛选获得产生β-大马酮的菌株。
所述β-大马酮产生菌株的应用，在传统和现代食品酿造工业、生物香料制备工业中的应用。
所述传统和现代食品酿造工业为中国白酒酿造工业。
所述生物香料制备工业为β-大马酮的生物转化香料制备工业。
风味定向技术的筛选方法
风味物质产生环节的测定：跟踪白酒酿造的过程，取中国大曲或小曲及每隔2~5天的发酵酒醅，各5～50g，加入2～5倍质量的超纯水，加入5g NaCl，室温浸泡6～24h，超声10～60min，10000r/min离心20min，取上清液5～8mL，HS-SPME-GC-MS测定。根据曲和酒醅中风味物质的浓度变化，分析风味物质产生的环节，选择该环节的样品作为分离原料。
风味物质产生菌株的筛选：模拟白酒酿造过程的培养基配方。以白酒酿造所用的原料为培养基成分，包括高粱、大麦、小麦、豌豆及其各种不同比例的混合配方，制取原料液体培养基，制作方式为：20～200g原料样品经粉碎后，加1～4倍体积的水，蒸煮1-5h，呈糊状，冷却后加入10～50U/g的糖化酶，于40～80℃保持2～10h，过滤、离心所得滤液，糖度为10~15oBx，调节pH为4～6。培养条件为：28～40℃，150rpm，培养24～120h。摇瓶培养发酵液采用HS-SPME-GC-MS检测。筛选获得产生风味物质的菌株。
β-大马酮产生菌株的筛选：采用风味定向技术的筛选方法，分析β-大马酮产生于大、小曲和培养初期的酒醅中，取大、小曲或培养0～5天的酒醅0.5～5g，溶于15～150mL无菌生理盐水摇床振荡30～150分钟，再稀释，涂布平板后单菌落移接斜面培养基，25～35℃恒温培养2～5天，单菌落移接斜面，挑取菌株进行摇瓶培养，采用HS-SPME-GC-MS方法测定发酵液中β-大马酮含量，筛选获得β-大马酮产生菌株。
β-大马酮浓度测定：采用HS-SPME-GC-MS方法，15 mL顶空瓶中加入5～10 mL澄清发酵液，进行顶空固相微萃取。顶空固相微萃取的条件为：三相(Car/DVB/PDMS)萃取头，60℃预热5～10 min，萃取吸附30～50 min，GC解吸5～10 min。
β-大马酮产生菌株在中国白酒酿造工业中的应用：将菌株制成液体或固体菌制剂，添加于白酒大曲或酒醅中，能够有效增加中国大曲或酒醅中该菌株的生物量，并有效提高酒醅中β-大马酮的含量，最终提高中国白酒中β-大马酮的含量。
β-大马酮产生菌株生物转化制备β-大马酮香料的应用：菌株采用大麦汁培养基，25～35℃，150rpm，培养24～120h后，β-大马酮含量达到46μg/L。
（3）本发明的有益效果
本发明提供了一种利用风味定向技术筛选中国白酒曲和酒醅中的微生物代谢相关的重要香气物质产生菌，对于科学地认识和理解中国白酒酿造过程及机制，对中国白酒的技术发展和进步具有重要的现实意义；同时，对于食品添加剂行业中新型生物香料的开发与生产也具有重要的实用价值。
另外，本发明从中国白酒酿造大、小曲、酒醅、原料、环境中筛选所得的菌株是具有生物转化生产β-大马酮的功能。为首次从中国白酒酿造过程中获得的β-大马酮产生菌株，不但能够实现高效制备β-大马酮的功能，应用于β-大马酮生物香料的制备行业；而且能够解释中国清香型白酒中特征性风味物质β-大马酮产生的机制，将该菌株应用于中国白酒的酿造过程中，能够有效调控白酒中β-大马酮含量，实现中国白酒品质的提升。
生物材料样品保藏：β-大马酮产生菌株，其分类命名为：
异常毕赤酵母（Pichia anomala）BJY-1，已保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，地址：北京市朝阳区北辰西路1号院3号中国科学院微生物研究所，保藏编号CGMCC No. 4740，保藏日期2011年4月6日。
东方伊萨酵母（Issatchenkia orientalis）BJY-2，已保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏编号CGMCC No. 4741，保藏日期2011年4月6日。
扣囊复膜孢酵母（Saccharomycopsis fibuligera）BJY-3，已保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏编号CGMCC No. 4742，保藏日期2011年4月6日。
粉状毕赤酵母（Pichia farinosa）BJY-4，已保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏编号CGMCC No. 4743，保藏日期2011年4月6日。
粟酒裂殖酵母（Schizosaccharomyces pombe）BJY-5，已保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏编号CGMCC No. 4744，保藏日期2011年4月6日。
丝孢酵母（Trichosporon asahii）BJY-7，已保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏编号CGMCC No. 4746，保藏日期2011年4月6日。
酿酒酵母（Saccharomyces cerevisiae）BJY-8，已保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏编号CGMCC No. 4747，保藏日期2011年4月6日。
少孢酵母（Kazachstania exigua）BJY-9，已保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏编号CGMCC No. 4748，保藏日期2011年4月6日。
嗜渗压有孢汉逊酵母（Hanseniaspora osmophila）BJY-10，已保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏编号CGMCC No. 4749，保藏日期2011年4月6日。
发酵毕赤酵母（pichia fermentans）BJY-11，已保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏编号CGMCC No. 4750，保藏日期2011年4月6日。
膜醭毕赤酵母（Pichia membranifaciens）BJY-12，已保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏编号CGMCC No. 4751，保藏日期2011年4月6日。
葡萄牙棒孢酵母（Clavispora lusitaniae）BJY-13，已保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏编号CGMCC No. 4752，保藏日期2011年4月6日。
附图说明
图1：菌株细胞形态电镜照片。
图2：葡萄牙棒孢酵母CGMCC No. 4752高粱糖化液体培养基发酵液质谱图。
具体实施方式
实施例1：
β-大马酮产生环节的确定：跟踪白酒酿造的过程，取中国大曲或小曲及每隔2~5天的发酵酒醅各20g，加入3倍质量的超纯水，室温浸泡6～24h，超声10～60min，10000r/min离心20min，取上清液5～8mL，加入5g NaCl，HS-SPME-GC-MS测定。根据酒醅中风味物质的浓度变化，结果见表1。从结果中看出，β-大马酮主要在发酵的0～5天产生，因此选择发酵2天的酒醅样品作为分离原料。
表1 清香型白酒发酵酒醅中β-大马酮浓度变化
| 发酵时间（天） | β-大马酮浓度（μg/L） |
| 0 | 8.5 |
| 2 | 12.2 |
| 5 | 16.2 |
| 10 | 15.3 |
| 15 | 15.5 |
| 20 | 17.4 |
| 25 | 16.7 |
| 出缸 | 16.2 |
实施例2：
β-大马酮产生菌株的筛选方法的确定：采用清香型白酒发酵2天的酒醅样品0.5g，溶于15mL无菌生理盐水摇床振荡30分钟，再稀释，涂布YPD平板培养2天后，挑选形态不同的菌株，划线分离单菌落后移接YPD斜面培养基保存。从斜面挑取菌株摇瓶培养。以高粱糖化液体培养基进行培养，培养基制作方式为：20g原料样品经粉碎后，加4倍体积的水，蒸煮2h，呈糊状，冷却后加入50单位/g的糖化酶，于40℃保持2h，过滤、离心所得滤液，糖度为15oBx，调节pH为5。培养条件为：30℃，150rpm，培养24h。摇瓶培养发酵液采用HS-SPME-GC-MS检测。筛选获得产生风味物质的菌株。
实施例3：
β-大马酮产生菌株及其分子生物学鉴定：对获得的12株不同的β-大马酮产生酵母进行分子生物学鉴定，利用酵母特异分类鉴定引物分别扩增12株菌的26srDNA片段，经凝胶电泳检测。随后进行测序比对，确定所筛得酵母的种属。将菌株保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，酵母种属及保藏编号见表2。
表2. 12株β-大马酮产生菌株
| 编号 | 中文名 | 英文名 | 保藏编号 |
| 1 | 异常毕赤酵母 | Pichia anomala | CGMCC No.4740 |
| 2 | 东方伊萨酵母 | Issatchenkia orientalis | CGMCC No.4741 |
| 3 | 扣囊复膜孢酵母 | Saccharomycopsis fibuligera | CGMCC No.4742 |
| 4 | 粉状毕赤酵母 | Pichia farinosa | CGMCC No.4743 |
| 5 | 粟酒裂殖酵母 | Schizosaccharomyces pombe | CGMCC No.4744 |
| 6 | 丝孢酵母 | Trichosporon asahii | CGMCC No.4746 |
| 7 | 酿酒酵母 | Saccharomyces cerevisiae | CGMCC No.4747 |
| 8 | 少孢酵母 | Kazachstania exigua | CGMCC No.4748 |
| 9 | 嗜渗压有孢汉逊酵母 | Hanseniaspora osmophila | CGMCC No.4749 |
| 10 | 发酵毕赤酵母 | pichia fermentans | CGMCC No.4750 |
| 11 | 膜醭毕赤酵母 | Pichia membranifaciens | CGMCC No.4751 |
| 12 | 葡萄牙棒孢酵母 | Clavispora lusitaniae | CGMCC No.4752 |
实施例4：
菌株发酵产β-大马酮浓度测定：产β-大马酮酵母进行摇瓶培养，发酵培养条件为：100g高粱经粉碎后，加3倍体积的水，蒸煮2～3h，呈糊状，冷却后加入30单位/g的糖化酶，于60℃保持2h，过滤、离心所得滤液，糖度为15oBx，调节pH为5，30℃，150rpm培养24h，β-大马酮浓度见表3。
表3
| 编号 | 中文名 | β-大马酮浓度（μg/L） |
| 1 | 异常毕赤酵母（Pichia anomala）CGMCC No.4740 | 13 |
| 2 | 东方伊萨酵母（Issatchenkia orientalis）CGMCC No.4741 | 29 |
| 3 | 扣囊复膜孢酵母（Saccharomycopsis fibuligera）CGMCC No.4742 | 12 |
| 4 | 粉状毕赤酵母（Pichia farinosa）CGMCC No.4743 | 28 |
| 5 | 粟酒裂殖酵母（Schizosaccharomyces pombe ）CGMCC No.4744 | 22 |
| 6 | 丝孢酵母（Trichosporon asahii）CGMCC No.4746 | 46 |
| 7 | 酿酒酵母（Saccharomyces cerevisiae）CGMCC No.4747 | 16 |
| 8 | 少孢酵母（Kazachstania exigua）CGMCC No.4748 | 21 |
| 9 | 嗜渗压有孢汉逊酵母（Hanseniaspora osmophila）CGMCC No.4749 | 35 |
| 10 | 发酵毕赤酵母（pichia fermentans）CGMCC No.4750 | 26 |
| 11 | 膜醭毕赤酵母（Pichia membranifaciens）CGMCC No.4751 | 19 |
| 12 | 葡萄牙棒孢酵母（Clavispora lusitaniae）CGMCC No.4752 | 24 |
Claims (7)
1.β-大马酮产生菌株，其分类命名为：
异常毕赤酵母（Pichia anomala）BJY-1，保藏编号CGMCC No.4740，
东方伊萨酵母（Issatchenkia orientalis）BJY-2，保藏编号CGMCC No.4741，
扣囊复膜孢酵母（Saccharomycopsis fibuligera）BJY-3，保藏编号CGMCC No.4742，
粉状毕赤酵母（Pichia farinosa）BJY-4，保藏编号CGMCC No. 4743，
粟酒裂殖酵母（Schizosaccharomyces pombe）BJY-5，保藏编号CGMCC No. 4744，
丝孢酵母（Trichosporon asahii）BJY-7，保藏编号CGMCC No. 4746，
酿酒酵母（Saccharomyces cerevisiae）BJY-8，保藏编号CGMCC No. 4747，
少孢酵母（Kazachstania exigua）BJY-9，保藏编号CGMCC No. 4748，
嗜渗压有孢汉逊酵母（Hanseniaspora osmophila）BJY-10，保藏编号CGMCC No. 4749，
发酵毕赤酵母（pichia fermentans）BJY-11，保藏编号CGMCC No. 4750，
膜醭毕赤酵母（Pichia membranifaciens）BJY-12，保藏编号CGMCC No. 4751，
葡萄牙棒孢酵母（Clavispora lusitaniae）BJY-13，保藏编号CGMCC No. 4752，上述菌株已保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心。
2.一种权利要求1所述β-大马酮产生菌株的筛选方法，其特征在于：以风味为导向，利用风味定向技术分析中国白酒酿造过程中微生物代谢相关的香气物质的含量变化，明确微生物代谢相关香气物质的产生环节，以该环节的中国白酒大曲、小曲、酒醅、原料、环境作为分离原料，筛选白酒中微生物代谢相关香气物质的产生菌；
采用色谱法分析中国白酒酿造过程中微生物代谢相关的香气物质的含量变化，包括GC、GC/MS、HPLC、HPLC/MS、纸色谱的方法。
3.根据权利要求2所述β-大马酮产生菌株的筛选方法，其特征在于：为尽可能全的筛选白酒中微生物代谢相关的香气物质产生菌，模拟白酒酿造过程的培养基配方，以白酒酿造所用的原料为培养基成分，选用高粱、大麦、小麦、豌豆及其各种不同比例的混合配方，制取原料液体培养基，制作方式为：20～200g原料样品经粉碎后，加mL/g计1～4倍体积的水，蒸煮1-5h，呈糊状，冷却后加入10～50U/g的糖化酶，于40～80℃保持2～10h，过滤、离心所得滤液，调节糖度为10~15oBx，调节pH为4～6。
4.根据权利要求2所述β-大马酮产生菌株的筛选方法，其特征在于：将大曲、小曲、酒醅、原料与无菌水混合后，经过稀释涂布平板，对获得的菌株进行摇瓶发酵培养，培养条件为：28～40℃，150rpm，培养24～120h，发酵液经过顶空固相微萃取后，采用GC/MS测定β-大马酮含量，筛选获得产生β-大马酮的菌株。
5.一种权利要求1所述β-大马酮产生菌株的应用，其特征在于：在传统和现代食品酿造工业、生物香料制备工业中的应用。
6.根据权利要求5所述β-大马酮产生菌株的应用，其特征在于所述传统和现代食品酿造工业为中国白酒酿造工业。
7.根据权利要求5所述β-大马酮产生菌株的应用，其特征在于所述生物香料制备工业为β-大马酮的生物转化香料制备工业。
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CN 201110122420 CN102242072B (zh) | 2011-05-12 | 2011-05-12 | 利用风味定向技术筛选中国白酒酿造中的β-大马酮产生菌株及其应用 |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CN 201110122420 CN102242072B (zh) | 2011-05-12 | 2011-05-12 | 利用风味定向技术筛选中国白酒酿造中的β-大马酮产生菌株及其应用 |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| CN102242072A true CN102242072A (zh) | 2011-11-16 |
| CN102242072B CN102242072B (zh) | 2013-02-27 |
Family
ID=44960320
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| CN 201110122420 Expired - Fee Related CN102242072B (zh) | 2011-05-12 | 2011-05-12 | 利用风味定向技术筛选中国白酒酿造中的β-大马酮产生菌株及其应用 |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| CN (1) | CN102242072B (zh) |
Cited By (8)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN102604845A (zh) * | 2012-03-23 | 2012-07-25 | 江南大学 | 一种中国白酒中耐酸、耐乙醇的产挥发酸的酵母及其应用 |
| CN106190556A (zh) * | 2016-07-22 | 2016-12-07 | 湖北中烟工业有限责任公司 | 一种烟用发酵型黑莓浸膏增香组分的制备方法 |
| CN107916198A (zh) * | 2017-12-15 | 2018-04-17 | 江南大学 | 一种有效抑制大曲中土味素形成的微生物菌剂 |
| CN111944708A (zh) * | 2020-08-27 | 2020-11-17 | 宜宾五粮液股份有限公司 | 高产乙酸异戊酯的酵母及其应用 |
| CN112048456A (zh) * | 2020-09-21 | 2020-12-08 | 四川中烟工业有限责任公司 | 一种筛选产醛或酮类风味物质微生物的高通量方法 |
| US20220071249A1 (en) * | 2018-12-28 | 2022-03-10 | Kirin Holdings Kabushiki Kaisha | Extracted and fermented composition of coffee cherry pulp and skin and method for producing same |
| CN114456962A (zh) * | 2022-03-17 | 2022-05-10 | 贵州大学 | 一种利用复合微生物发酵柚子米酒的制备方法 |
| CN114874926A (zh) * | 2022-03-22 | 2022-08-09 | 上海龙殷生物科技有限公司 | 类胡萝卜素氧化菌株及其应用和用于烟草加香的浸膏 |
Citations (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN101586057A (zh) * | 2009-06-25 | 2009-11-25 | 红云红河烟草(集团)有限责任公司 | 一种卷烟搭口胶用香精及其制备和使用方法 |
-
2011
- 2011-05-12 CN CN 201110122420 patent/CN102242072B/zh not_active Expired - Fee Related
Patent Citations (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN101586057A (zh) * | 2009-06-25 | 2009-11-25 | 红云红河烟草(集团)有限责任公司 | 一种卷烟搭口胶用香精及其制备和使用方法 |
Non-Patent Citations (7)
| Title |
|---|
| 《Journal of Agricultural and Food Chemistry》 20020829 LAURENCE GIJS等 How Low pH Can Intensify �-Damascenone and Dimethyl Trisulfide Production through Beer Aging 5612-5616页 1-7 第50卷, * |
| 《中外葡萄与葡萄酒》 20070131 朱力 等 更完美的展现葡萄品种的个性--"品种酵母"的筛选和应用 58-61页 1-7 , 第1期 * |
| LAURENCE GIJS等: "How Low pH Can Intensify â-Damascenone and Dimethyl Trisulfide Production through Beer Aging", 《JOURNAL OF AGRICULTURAL AND FOOD CHEMISTRY》 * |
| LAURENCE GIJS等: "How Low pH Can Intensify â-Damascenone and Dimethyl Trisulfide Production through Beer Aging", 《JOURNAL OF AGRICULTURAL AND FOOD CHEMISTRY》, vol. 50, 29 August 2002 (2002-08-29), pages 5612 - 5616 * |
| NATOIYA D. R. LLOYD等: "Formation of Damascenone under both Commercial and Model Fermentation Conditions", 《JOURNAL OF AGRICULTURAL AND FOOD CHEMISTRY》 * |
| 徐岩 等: "风味分析定向中国白酒技术研究的进展", 《酿酒科技》 * |
| 朱力 等: "更完美的展现葡萄品种的个性——"品种酵母"的筛选和应用", 《中外葡萄与葡萄酒》 * |
Cited By (10)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN102604845A (zh) * | 2012-03-23 | 2012-07-25 | 江南大学 | 一种中国白酒中耐酸、耐乙醇的产挥发酸的酵母及其应用 |
| CN106190556A (zh) * | 2016-07-22 | 2016-12-07 | 湖北中烟工业有限责任公司 | 一种烟用发酵型黑莓浸膏增香组分的制备方法 |
| CN107916198A (zh) * | 2017-12-15 | 2018-04-17 | 江南大学 | 一种有效抑制大曲中土味素形成的微生物菌剂 |
| US20220071249A1 (en) * | 2018-12-28 | 2022-03-10 | Kirin Holdings Kabushiki Kaisha | Extracted and fermented composition of coffee cherry pulp and skin and method for producing same |
| CN111944708A (zh) * | 2020-08-27 | 2020-11-17 | 宜宾五粮液股份有限公司 | 高产乙酸异戊酯的酵母及其应用 |
| CN111944708B (zh) * | 2020-08-27 | 2022-04-01 | 宜宾五粮液股份有限公司 | 高产乙酸异戊酯的酵母及其应用 |
| CN112048456A (zh) * | 2020-09-21 | 2020-12-08 | 四川中烟工业有限责任公司 | 一种筛选产醛或酮类风味物质微生物的高通量方法 |
| CN112048456B (zh) * | 2020-09-21 | 2022-03-15 | 四川中烟工业有限责任公司 | 一种筛选产醛或酮类风味物质微生物的高通量方法 |
| CN114456962A (zh) * | 2022-03-17 | 2022-05-10 | 贵州大学 | 一种利用复合微生物发酵柚子米酒的制备方法 |
| CN114874926A (zh) * | 2022-03-22 | 2022-08-09 | 上海龙殷生物科技有限公司 | 类胡萝卜素氧化菌株及其应用和用于烟草加香的浸膏 |
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| CN102242072B (zh) | 2013-02-27 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| CN102242072B (zh) | 利用风味定向技术筛选中国白酒酿造中的β-大马酮产生菌株及其应用 | |
| CN105861346B (zh) | 一株低产尿素、产风味的异常威克汉姆酵母菌株及其在食品生产中的应用 | |
| CN102226155B (zh) | 中国酱香型白酒生产中高产乙醇低产杂醇油的酵母的筛选与应用 | |
| CN105112305B (zh) | 一种富含Monacolin K的红曲米及其制备方法 | |
| CN105861345B (zh) | 一株低产尿素、产风味的库德里阿兹威毕赤酵母及其在食品发酵中的应用 | |
| CN105861348B (zh) | 一株低产尿素的酿酒酵母及其在食品生产中的应用 | |
| CN108251318A (zh) | 一种戴尔布有孢圆酵母及其在改善葡萄酒香气品质中的应用 | |
| CN109370927A (zh) | 假丝酵母菌fw922-1及其应用 | |
| CN103571763B (zh) | 一株能自身合成萜类物质的酿酒酵母及其应用 | |
| CN102102084A (zh) | 东方伊萨酵母菌、其组合物和应用 | |
| CN104673703A (zh) | 可同时促进酿酒酵母产酒精和风味物质的芽孢杆菌及其应用 | |
| CN102796716A (zh) | 一种制备单宁酶的方法 | |
| CN102628020B (zh) | 一种核桃红枣酒及其酿造方法 | |
| CN102876592B (zh) | 异常毕赤酵母 | |
| CN102766586B (zh) | 中国酱香型白酒生产中高产乙醇低产杂醇油的酵母cgmcc 4747的筛选与应用 | |
| CN102766584B (zh) | 中国酱香型白酒生产中高产乙醇低产杂醇油的酵母cgmcc 4746的筛选与应用 | |
| CN104404016A (zh) | 一种生产柚苷酶的方法 | |
| CN108094905A (zh) | 一种基于4-乙基愈创木酚发酵强化的酱香郫县豆瓣生产方法 | |
| CN102816706B (zh) | 中国酱香型白酒生产中高产乙醇低产杂醇油的酵母cgmcc 4745的筛选与应用 | |
| CN102766582B (zh) | 中国酱香型白酒生产中高产乙醇低产杂醇油的酵母cgmcc 4750的筛选与应用 | |
| CN102766583B (zh) | 中国酱香型白酒生产中高产乙醇低产杂醇油的酵母cgmcc 4748的筛选与应用 | |
| CN103589652B (zh) | 一种产辛酸和癸酸及其对应乙酯的酵母 | |
| CN106957861A (zh) | 一种固定化酵母菌制备烟用紫罗兰提取物的方法 | |
| CN102604845A (zh) | 一种中国白酒中耐酸、耐乙醇的产挥发酸的酵母及其应用 | |
| CN103215196B (zh) | 一株酿酒酵母及其在干白葡萄酒酿造中的应用 |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| C06 | Publication | ||
| PB01 | Publication | ||
| C10 | Entry into substantive examination | ||
| SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
| C14 | Grant of patent or utility model | ||
| GR01 | Patent grant | ||
| CF01 | Termination of patent right due to non-payment of annual fee |
Granted publication date: 20130227 Termination date: 20190512 |
|
| CF01 | Termination of patent right due to non-payment of annual fee |