CN102218078B

CN102218078B - 一种含有蒙脱石的利福昔明混悬液及其制备方法

Info

Publication number: CN102218078B
Application number: CN201110097527A
Authority: CN
Inventors: 彭麟; 江善祥; 蔡冬; 万荣峰; 季辉; 周显龙; 张军忍; 施宗傲
Original assignee: Nanjing Weitai Fama Veterinary Research Institute Co Ltd
Current assignee: Jiangsu Jiyu Biomedical Technology Co ltd
Priority date: 2011-04-19
Filing date: 2011-04-19
Publication date: 2012-10-10
Anticipated expiration: 2031-04-19
Also published as: CN102218078A

Abstract

本发明公开了属于兽药制剂的一种含有蒙脱石的利福昔明混悬液，其组成成分及其质量百分比为：利福昔明5～15％、蒙脱石7.5～22.5％、助悬剂0.5～2％、表面活性剂0.2～1％、反絮凝剂0.2～1％和水为余量。本发明还公开了利福昔明混悬液的制备方法，即按照比例将助悬剂、表面活性剂、反絮凝剂加入到水中，混合均匀，并在65℃水浴1～3小时；再加入利福昔明、蒙脱石于搅拌器中搅拌；用水定容、均质、灭菌即可。本发明中利福昔明的粒径小，其有效成分的释出量和释出速度大大提高，提高了利福昔明的生物利用度；其次，本发明降低了患病畜禽因腹泻而导致的死亡率；此外，本发明稳定性好，适合长期保存。

Description

一种含有蒙脱石的利福昔明混悬液及其制备方法

技术领域

本发明属于兽药制剂领域，具体涉及一种含有蒙脱石的利福昔明混悬液及其制备方法。

背景技术

致病性肠道细菌所致腹泻是畜禽养殖产业中常见的一种病症。动物发病后，生长速度缓慢，饲料报酬降低，同时由于腹泻，动物体质下降、免疫功能减退、对疫病的抵抗力减弱，容易继发其它传染病，治疗不及时就会引起大批死亡，给养殖业造成了严重的经济损失。由于病因复杂化及细菌耐药性的不断增强，目前使用的抗生素对于细菌性腹泻的防治效果不显著。因此，寻求高效、低毒、安全的药物用于防治畜禽如猪、鸡的肠道细菌性疾病越来越成为关注的热点。

利福昔明(英文名称为：rifaximin)是利福霉素SV的半合成衍生物。利福昔明抗菌谱广、抗菌活性强，对革兰氏阳性需氧菌中的金葡菌、表皮葡萄球菌、肠球菌、艰难梭菌有高度抗菌活性，同时对革兰氏阴性的大肠杆菌、沙门氏菌、志贺氏菌、耶尔森菌等也有很好的抗菌活性。利福昔明作为广谱肠道抗生素，在医药领域主要用于治疗敏感菌所引起的急、慢性肠道感染、腹泻综合症、夏季腹泻、旅行者腹泻等。

蒙脱石(montmodUonite)又名微晶高岭石，是一种层状结构、片状结晶的硅酸盐粘土矿，因其最初发现于法国的蒙脱城而命名。蒙脱石在医药中应用广泛，可以做医药载体，起控释剂功效。蒙脱石为止泻药类非处方药药品，临床适用于成人及儿童急、慢性腹泻。蒙脱石在畜类(猪，兔)养殖中有很好应用，尤其是仔、乳猪的黄白痢，小兔的拉稀，起到预防功效。蒙脱石还能作为饲料脱霉剂。

利福昔明在人类临床上常用的供口服给药的药物剂型有片剂、干混悬剂、胶囊剂、包糖衣片、糖浆剂等，如专利申请《一种利福昔明干混悬剂及其生产方法》(CN101642439A)公开了由利福昔明、羧甲基纤维素钠、微晶纤维素、糊精、聚维酮K30和矫味剂组成的干混悬剂。但是现有的利福昔明药物剂型不适合于动物临床用药；此外，现有的利福昔明药物不能有效控制患病畜禽因为腹泻而导致的死亡。因此，需要适合动物应用的利福昔明药物剂型，并且能降低患病禽畜因腹泻而导致的死亡率。

发明内容

本发明目的在于提供一种含有蒙脱石的利福昔明混悬液。

本发明另一目的在于提供上述利福昔明混悬液的制备方法。

为实现上述目的，本发明的技术方案为：

一种含有蒙脱石的利福昔明混悬液，其组成成分及其质量百分比为：利福昔明5～15％、蒙脱石7.5～22.5％、助悬剂0.5～2％、表面活性剂0.2～1％、反絮凝剂0.2～1％、水为余量。

上述利福昔明混悬液，其组成成分及其质量百分比为：利福昔明10％、蒙脱石15％、助悬剂1％、表面活性剂0.5％、反絮凝剂0.5％和水为余量。

所述的助悬剂是指羧甲基纤维素钠、甲基纤维素、乙基纤维素或聚乙烯吡咯烷酮等之一种或两种以上的组合；优选为羧甲基纤维素钠。

所述的表面活性剂是指吐温-80、聚乙二醇、丙三醇或月桂基硫酸钠等之一种或两种以上的组合；优选为吐温-80。

所述的反絮凝剂是指柠檬酸钠、酒石酸钠、枸橼酸钠或甘氨酸等之一种或两种以上的组合；优选柠檬酸钠。

上述含有蒙脱石的利福昔明混悬液的制备方法，包括如下步骤：

(1)按照比例将助悬剂、表面活性剂、反絮凝剂加入到水中，混合均匀，在65℃水浴1～3小时，得混合溶液；

(2)按照比例将利福昔明、蒙脱石和步骤(1)制备的混合溶液置于搅拌器中，在转速为800～1250rpm条件下搅拌10～20min；然后将所得液体转移至定量容器中，并用水定容；

(3)将步骤(2)所得溶液转移至搅拌器中，搅拌30min，充分混匀，然后在40℃以下、压力为30～40千帕条件下用均质机进行均质，将所得溶液边搅拌边倒入西林瓶中封口，100℃流通蒸汽灭菌30min即可。

上述制备方法中所述的助悬剂是指羧甲基纤维素钠、甲基纤维素、乙基纤维素或聚乙烯吡咯烷酮等之一种或两种以上的组合；优选羧甲基纤维素钠。

上述制备方法中所述的表面活性剂是指吐温-80、聚乙二醇、丙三醇或月桂基硫酸钠等之一种或两种以上的组合；优选吐温-80。

上述制备方法中所述的反絮凝剂是指柠檬酸钠、酒石酸钠、枸橼酸钠或甘氨酸等之一种或两种以上的组合；优选柠檬酸钠。

本发明利福昔明混悬液的使用方法：口服，猪12mg/kg.bw，1天1次，连用3天；鸡，60mg/kg.bw，1天1次，连用3天。

本发明的有益效果是：(1)本发明大大缩小了利福昔明的粒径，使有效成分的释出量和释出速度大大提高，提高了利福昔明的生物利用度；(2)本发明显著降低了患病畜禽因腹泻而导致的死亡率；(3)本发明混悬剂稳定性好，适合长期保存；(4)本发明制备方法简单；(5)本发明混悬剂使用方便。

具体实施方式

以下以具体实施例对本发明做进一步说明，但是不对本发明构成任何限制。

实施例1本发明含有蒙脱石的利福昔明混悬液的制备

按照如下方法进行：

(1)将羧甲基纤维素钠100g、吐温-80 50g、柠檬酸钠50g加入到水10L中混合，在65℃水浴2小时，制成混合溶液。

(2)将利福昔明1000g、蒙脱石1500g和步骤(1)的混合溶液置于搅拌器中，在1250rpm下搅拌10min；将所得溶液转移至定量容器中，并用水定容至10L。

(3)将步骤(2)定容后的溶液转移至搅拌器中，搅拌30min，使其充分混匀，然后在38℃、压力为40千帕条件下用均质机进行均质，将所得溶液边搅拌边倒入西林瓶中封口，100℃流通蒸汽灭菌30min，即得本发明利福昔明混悬液。

实施例2本发明含有蒙脱石的利福昔明混悬液的制备

按照如下方法进行

(1)、将乙基纤维素200g、聚乙二醇20g、枸橼酸钠20g加入到水10L中混合，65℃水浴2小时，制成混合溶液。

(2)、将利福昔明500g、蒙脱石750g和步骤(1)的混合溶液置于搅拌器中，在800rpm条件下搅拌；将搅拌所得的液体转移至定量容器中，并用水定容至10L。

(3)、将步骤(2)定容后的溶液转移至搅拌器中，搅拌30min，将其充分混匀，然后在40℃、压力为30千帕条件下用均质机进行均质，将所得溶液边搅拌边倒入西林瓶中封口，100℃流通蒸汽灭菌30min，即得本发明利福昔明混悬液。

实施例3本发明含有蒙脱石的利福昔明混悬液的制备

按照如下方法进行：

(1)将羧甲基纤维素钠200g、司盘-80 60g、丙三醇40g、柠檬酸钠100g加入到水10L中混合，在65℃水浴2小时，得混合溶液。

(2)将利福昔明1500g、蒙脱石2250g和步骤(1)的混合溶液置于搅拌器中，在1000rpm条件下搅拌；将搅拌所得的液体转移至定量容器中，并用水定容至10L。

(3)将步骤(2)定容后的溶液转移至搅拌器中，搅拌30分钟，将其充分混匀，然后在39℃、压力为35千帕条件下用均质机进行均质，将所得溶液边搅拌边倒入西林瓶中封口，100℃流通蒸汽灭菌30min，即得本发明利福昔明混悬液。

实施例4本发明利福昔明口服混悬液的沉降体积比试验

(一)材料与方法

1、材料：实施例1的利福昔明混悬液。

2、方法：检测方法为2005版《中国兽药典》混悬剂项下标准：注射用混悬剂照下述方法检查，沉降体积比应不低于0.90。

检测方法：用具塞量筒取供试品50ml，密塞，用力振摇1分钟，记下混悬物的开始高度H₀，静置3小时，记下混悬物的最终高度H。

计算公式：沉降体积比＝H/H₀

(二)试验结果

表1混悬剂的混悬情况及沉降体积比试验结果

项目	混悬情况	沉降体积比
			1分钟	分散良好	0.95
30分钟	分散良好	0.95
			1小时	分散良好	0.95
3小时	分散良好	0.94

从表1可见，本发明利福昔明混悬液的沉降体积比大于0.90，符合混悬剂的规定，适用于动物口服使用。

实施例5本发明混悬液与溶液剂的稳定性对比试验

(一)材料与方法

1、材料：

试验药品：实施例1、实施例2和实施例3的利福昔明混悬液；

对照药品：按照专利(CN101642439A，2010年2月10日公开)公开的方法制备利福昔明干混悬剂，含量为8％。

2、方法分别取试验药品和对照药品各25瓶，依据农业部《兽药稳定性试验技术规范(试行)》，进行了药物的加速试验六个月，分别于第0、1、2、3、6个月取样，进行利福昔明含量测定。

(二)试验结果：从表2中数据可以看出，在6个月的取样周期里，本发明实施例1、实施例2和实施例3制备的利福昔明混悬液的利福昔明含量下降量均低于对照组，说明本发明利福昔明混悬液稳定性好。

表2药物稳定性试验结果(n＝4)(单位：mg/mL)

药品	0个月	1个月	2个月	3个月	6个月
						实施例1	101±0.20	100±0.15	100±0.22	99±0.16	98±0.23
实施例2	50±0.14	49±0.08	49±0.16	49±0.12	48±0.20
						实施例3	151±0.06	150±0.16	150±0.11	149±0.21	149±0.18
对照药品	79±0.31	78±0.21	77±0.18	77±0.24	75±0.26

实施例6本发明利福昔明混悬液对猪大肠杆菌病的疗效试验

(一)材料和方法

1、试验材料

试验药物：实施例1的利福昔明混悬液，每天1次，连用3天；

对照药物：利福昔明干混悬剂(由扬州市三药制药有限公司生产，生产批号为20090903，其规格为0.2g/包)。

2、试验动物山东济宁市某养猪场，30头已经确诊为大肠杆菌感染的猪，发病日龄80天。

3、试验方法：将自然发病的30头猪，分成I、II、III三组，每组10头猪，按表3分别对试验组猪进行灌服给药。每次用药前测量直肠体温，观察并记录临床症状。观察期为15d，并对每头猪进行试验前后的称重及体况观察。

表3试验猪分组及给药方案表

(二)疗效评价指标

1.死亡率

在试验期间，猪只出现大肠杆菌病的典型症状，体温升高、食欲下降、下痢等症状并死亡，尸体剖检肠系膜等处出现化脓样物质，并有散在出血点，同时可从该处分离出大量溶血性较强的大肠杆菌。根据每组动物中的死亡数计算死亡率。死亡率(％)＝各组死亡数(只)/各组总数(只)×100％

2、治愈率

在试验期间，用药的猪只临床症状消失，肛门干燥，无红肿，粪便及精神恢复正常，接种菌分离阴性，均属治愈。根据每组动物中的治愈数计算治愈率。

治愈率(％)＝各组治愈数(只)/各组总数(只)×100％

3、有效率

治愈的猪和口服给药后体温降低或恢复正常，食欲增加，下痢减轻或消失等症状的猪，均判定为有效，据此计算有效率。

有效率(％)＝各组存活鸡数(只)/各组总数(只)×100％

4、平均增重

根据试验开始时及试验结束时每头猪的体重，计算每头猪的相对增重量，计算平均增重量。

5、数据分析和处理

用SPSS 16.0 for Windows对试验结果进行生物学统计。

(三)试验结果

30头发病猪分别用药后，逐日观察临床疗效，其结果见表4。

表4本发明混悬液对猪大肠杆菌病的疗效试验结果

1、治愈率与有效率：实施例1组无动物死亡，其有效率及治愈率显著高于药物对照组(P＜0.05)。

2、平均增重量：实施例1组15d的平均增重量高于药物对照组。

以上结果说明本发明利福昔明混悬液对于猪感染大肠杆菌引起的腹泻具有良好的治疗效果，其有效率及治愈率显著高于药物对照组，能有效缓解病猪增重缓慢，并显著降低了死亡率。

实施例7本发明利福昔明混悬液对鸡白痢的疗效试验

(一)试验材料

试验药品：实施例1制备的利福昔明混悬液，每天1次，连用3天；

对照药物：利福昔明干混悬剂，由扬州市三药制药有限公司生产，生产批号为20090903，其规格为0.2g/包。

菌种：鸡白痢沙门氏菌强毒株C79-21，购自中国兽药监察所。

(二)试验动物及分组

选择健康1日龄AA肉鸡(公母各半)216只。试验前饲养3d，自由采食和饮水，观察鸡的精神状况及饮食情况，发现有精神沉郁、食欲下降或粪便不正常的均淘汰。

(三)试验方法

1、菌液的制备

首先，将保存的菌种接种于麦康凯平板，培养24h后，用灭菌接种环挑选出单个典型菌落，接种于3mL MH肉汤中，在37℃环境下培养18h取出。然后，用肉汤培养物接种鸡，经复壮后，从死鸡肝脏中分离出沙门氏菌，并接种于麦康凯平板培养。最后，挑选典型菌落接种于营养肉汤培养基中，37℃下培养24h，作为攻毒菌液。

2、最小感染量(MID)的测定

16只鸡分成4组，每组4只，分别经胸肌注射6×10⁷、6×10⁸、6×10⁹、6×10¹⁰CFU/mL的试验菌液，观察鸡发病和死亡情况。确定试验时细菌的接种量为6×10⁹CFU/mL。

3、试验方法

200只鸡，随机分成4组(见表5)，每组50只，除健康对照组外，各组鸡经胸肌注射试验菌液0.5mL。治疗组在接种菌液后，经口灌服给药，具体给药方案见表5。攻毒后，仔细观察和记录各组鸡的发病情况、临床症状及死亡情况。对死亡鸡进行剖检，取肝、心、脾进行细菌学分离培养鉴定，以确定鸡只死亡是否因为接种菌感染，临床观察时间为15d。在接种细菌前后和试验结束时，分别称量各组鸡的体重，并计算相对增重率。

表5试验鸡分组及给药方案

(四)疗效评价指标

1、死亡率：凡在试验期间出现排稀粪等发病症状，死亡后剖检又有典型病变特征，并分离出相应病原菌者认为感染死亡，依据死亡数算出死亡率。

计算公式：死亡率(％)＝各组死亡数(只)/各组总数(只)×100％

2、治愈率：凡在试验期间，服药后精神、食欲恢复正常，不再出现排稀粪等临床症状属治愈，依据治愈数算出治愈率。

计算公式：治愈率(％)＝各组治愈数(只)/各组总数(只)×100％

3、有效率：凡在试验期间，经用药后完全治愈的，以及有临床症状但未死者，认为给药对其有效，据此计算有效率。

计算公式：有效率(％)＝各组存活鸡数(只)/各组总数(只)×100％

4、相对增重率：给药前及试验结束时对各组鸡逐一称重，计算每只鸡的增重量。相对增重率是各用药治疗组与健康对照组的增重之比，其中健康对照组设为100％。

计算公式：相对增重率(％)＝各组平均增重/对照组平均增重(只)×100％。

(五)试验结果：利福昔明混悬液口服给药对鸡白痢的治疗效果见6。

表6本发明利福昔明混悬液对鸡白痢的对比试验结果

由表6可知，利福昔明能有效降低鸡感染沙门氏菌的死亡率。实施例1组、对照药物组对鸡白痢的有效率、治愈率均在70％以上，相对增重率在90％以上，且实施例1组显著高于对照药物组(P＜0.05)。说明本发明利福昔明混悬液能有效治疗鸡白痢，且与单纯的利福昔明用药相比，显著降低了死亡率。

Claims

1.一种含有蒙脱石的利福昔明混悬液，其特征在于其组成成分及其质量百分比为：利福昔明5～15％、蒙脱石7.5～22.5％、助悬剂0.5～2％、表面活性剂0.2～1％、反絮凝剂0.2～1％和水为余量；所述的含有蒙脱石的利福昔明混悬液，按照如下方法制备：

2.按照权利要求1所述的利福昔明混悬液，其特征在于其组成成分及其质量百分比为：利福昔明10％、蒙脱石15％、助悬剂1％、表面活性剂0.5％、反絮凝剂0.5％和水为余量。

3.按照权利要求1或2所述的利福昔明混悬液，其特征在于所述的助悬剂是指羧甲基纤维素钠、甲基纤维素、乙基纤维素或聚乙烯吡咯烷酮之一种或两种以上的组合。

4.按照权利要求3所述的利福昔明混悬液，其特征在于所述的表面活性剂是指吐温-80、聚乙二醇、丙三醇或月桂基硫酸钠之一种或两种以上的组合。

5.按照权利要求4所述的利福昔明混悬液，其特征在于所述的反絮凝剂是指柠檬酸钠、酒石酸钠或甘氨酸之一种或两种以上的组合。

6.按照权利要求3所述的利福昔明混悬液，其特征在于所述的助悬剂是羧甲基纤维素钠。

7.按照权利要求4所述的利福昔明混悬液，其特征在于所述的表面活性剂是吐温-80。

8.按照权利要求5所述的利福昔明混悬液，其特征在于所述的反絮凝剂是柠檬酸钠。

9.权利要求1所述的含有蒙脱石的利福昔明混悬液的制备方法，包括如下步骤：